糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b,GPb)试剂盒说明书

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生物学专业英语词汇(字母G)

生物学专业英语词汇(字母G)

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生殖突gonidium 绿颗体gonimoblast 产孢丝gonium 生殖原细胞gonochorism 雌雄异体现象gonocyte 生殖母细胞gonoduct 生殖管gonome mutation 染色体组突变gonomery 两亲染色体分立gonophore 生殖体gonopore 生殖孔gonosome 生殖体gonotheca 生殖鞘gonozooid 生殖个员goral 羚gotlandian period 哥特兰纪graafian follicle 格拉夫氏泡grade 改良种动物grade animal 改良种动物graded response 等级应答gradient 梯度gradient analysis 梯度分析gradient elution 梯度洗脱gradient gel electrophoresis 梯度凝胶电泳gradient mixer 梯度混合器gradient plate method 倾斜平板法grafing 移植graft 接穗graft chimaera 嫁接杂种graft hybrid 嫁接杂种graft rejection 移植排斥graft transmission 嫁接传染grafting 嫁接grain 谷粒graining 谷粒形成graining phase 谷粒形成期grains 谷粒gram 克gram atom 克原子gram equivalent 克当量gram molecule 摩尔gram negative bacterium 革兰氏阴性细菌gram positive bacterium 革兰氏阳性细菌gram staining method 革兰氏染色法gramicidin 短杆菌肽gramineae 稻科植物类gramineous 禾本科的gramme 克grana 基粒granite 花岗岩granivores 食谷鸟类granivorous 食种子的granular endoplasmic reticulum 粗面内质网granular gland 颗粒腺granular layer 颗粒层granular structure 团粒状结构granulated feed 颗粒饲料granulated fertilizer 粒状肥料granulated gel 颗粒凝胶granulation 小粒形成granulation tissue 肉芽组织granule 颗粒granulocyte 有粒细胞granulocytopoiesis 颗粒白细胞形成granulopoiesis 颗粒白细胞形成granulose 细菌淀粉granulum 小颗粒grape sugar 葡萄糖grape vine 葡萄树graph 图解graptolites 笔石类grass 草grass blade 草茎grass fen 草沼地grass moor 草沼地grasses 稻科植物类grassland 草地grassplot 草坪gravidity 妊娠graviperception 重力觉gravitational water 重力水gravity 重力grazing animal 放牧动物grazing forest 放牧林great epiploon 大网膜great ice age 大冰期时代great omentum 大网膜greater circulation 大循环greater lip of pudendum 大阴唇greater omentum 大网膜green algae 绿藻类green belt 绿区green blindness 绿盲green feed 青饲料green fence 书green fodder 青饲料green gland 绿腺green gram 绿豆green manure 绿肥green mosses 绿苔类green plant 绿色植物green sulfur bacterium 绿色硫黄细菌greenhouse 温室gregarious parasitism 群居寄生gregariousness 群居本能gregaroid colony 聚生群体grey heron 苍鹭grey humic acid 灰色腐植酸grey matter 灰质grinding tooth 臼齿grip 列性感冒gristle 软骨gristly 软骨的grit cell 石细胞gritstone 沙岩groin 腹股沟grooming behavior 清整动作grosbeak 锡嘴雀gross energy 总能量gross production 总产量grotto 洞穴ground animal 地下动物ground cover 地被物ground flora 地被物ground layer 草本层ground substance of bone 骨基质ground substnace 基质ground tissue 基本组织ground water 地下水groundnut 落花声groundwater 地下水groundwater level 地下水位groundwater table 地下水位group 群group agglutination 群凝集group translocation 基团移位grove 林growers 雏growing 饲育growing birds 雏growing point 生长点growing point culture 生长点培养growing region 生长区growing season 生长期growth 成长growth attribute 生长属性growth chracteristic 生长属性growth cone 生长圆锥growth control 生长第growth curvature 生长弯曲growth curve 生长曲线growth factor 生长因素growth formula 生长公式growth hormone 生长激素growth in thickness 加厚生长growth inhibiting 生长抑制的growth inhibitor 生长抑制剂growth line 生长线growth movement 生长运动growth promoter 生长促进剂growth rate 生长速率growth regulating substance 生长第剂growth regulation 生长第growth regulator 生长第剂growth retardation 生长阻滞growth ring 生长轮growth stimulant 生长促进剂growth velocity 生长速率growth zone 生长区growthform 生长形态growthhabit 生长形态grub worm 毛虫guaiacol 愈刨木酚guanase 鸟尿素酶guanidine 胍guanine 鸟粪素guanine cell 含鸟粪素细胞guano 鸟粪guanophore 含鸟粪素细胞guanosine 鸟尿环核甙guanosine diphosphte mannose 鸟苷二磷酸甘露糖guanylic acid 鸟苷磷酸guard bee 监视蜂guard cell 保卫细胞guild 种群guinea fowl 珠鸡guinea pig 豚鼠gula 咽喉gull 海鸥gullet 食管gully 峡谷gulonic acid 古洛糖酸gulose 古洛糖gum 屎gum arabic 阿拉伯胶gum duct 屎道gum resin 胶尸gummiferous 产屎的gumming 梁gummosis 梁gustation 味觉gustatory cell 味细胞gustatory organ 味觉瀑gustatory pore 味孔gustatory sense 味觉gut 肠gut cavity 肠腔guttation 吐水gymnocarpic 裸果的gymnocarpous 裸果的gymnocyte 裸细胞gymnospermous plants 裸子植物类gymnosperms 裸子植物类gymnospore 裸孢子gynaeceum 雌蕊群gynaecium 雌芯gynandrism 雌雄同体gynandromorph 雌雄嵌体gynandromorphism 雌雄嵌性gynandrous 雌雄芯合体的gyneceum 雌芯gynic 雌的gynoecium 雌蕊群gynogenesis 雌核发育gynomerogony 雌核卵片发育gynophore 雌蕊柄gynospore 大孢子gynostegium 合蕊冠gynostemium 合蕊柱gyratory shaker 旋转搅拌机gyrus 脑回。

糖原代谢和糖异生

糖原代谢和糖异生
大约90%的葡萄糖残基是以葡 萄糖-1-磷酸形式进入糖酵解 途径。
另有10%葡萄糖残基要经己糖 激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸 进行糖酵解的。

15.3 糖原合成
糖原的生物合成不是糖原降解的逆过程,而是通过 另外一条途径。
糖原合成需要的能量是由尿嘧啶核苷三磷酸(UTP) 提供的。
糖原合成的底物是UDP-葡糖。
G o' = -16.3 kJ/mol
旁路III:葡糖-6-磷酸水解生成葡萄糖
葡糖-6-磷酸在葡糖-6-磷酸酶作用下水解为 葡萄糖 和无机磷酸。
G o'= -13.8 kJ/mol

葡糖-6-磷酸酶







糖 异 生 与 糖 酵 解 过 程 能 量 变 化
糖异生是个需能过程,由2分子丙酮酸合成1分子葡萄 糖需要4分子ATP和2分子GTP,同时还需要2分子NADH。 总反应方程式为:
3. 糖异生的调控
磷酸果糖激酶I(PFK-I)和果糖-1,6-二磷酸酶的调节
果糖-2,6-二磷酸可以激活PFK-1,加快糖酵解;而抑制 果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase-1),进而抑制糖异生。
当ATP和柠檬酸水平高时,PFK-I受抑制,降低糖酵解速 率;柠檬酸增加果糖-1,6-二磷酸酶活性,从而增加糖异 生速率。当AMP水平高时,PFK-I激活,加快糖酵解,果 糖-1,6-二磷酸酶受抑制,糖异生关闭。
但糖酵解途径中由丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶I和己 糖激酶催化的三个高放能反应是不可逆的。
1. 糖异生反应
旁路I:丙酮酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸
(1)丙酮酸羧化生成草酰乙酸 在丙酮酸羧化酶(生物素作为辅基)催化下,丙酮酸

糖原磷酸化酶

糖原磷酸化酶
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八、糖原合成与分解的生理意义
1.贮存能量。
2.调节血糖浓度。
3.利用乳酸:肝中可经糖异生途径利用糖 无氧酵解产生的乳酸来合成糖原。这就 是肝糖原合成的三碳途径或间接途径。
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糖代谢的调节过程
一、无氧酵解的调节 二、TCA 的调节 三、磷酸戊糖途径调节 四、糖异生的调节 五、糖原代谢的调节 六、神经和激素对糖的调节
作用生成自由葡萄糖后转运至肌肉组织加以
利用,这一循环过程就称为乳酸循环(Cori
循环)。
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五、糖原合成
1 定义: 由单糖合成糖原的过程称为糖原的合 成(glycogenesis)。
单糖: 葡萄糖(主要)、果糖、半乳糖等
部位: 肝脏、肌肉组织等细胞的胞浆中
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2.缩合:
线粒体 乙酰CoA
PEP
丙酮酸
② 草酰乙酸
苹果酸/ 天冬氨酸
丙酮酸 ①
草酰乙酸

苹果酸/ 天冬氨酸
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PEP
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糖酵解和葡萄糖异 生的关系
葡萄糖 G-6-P
F-6-P F-1.6-P
3-P-甘油醛
A A G-6-P磷酸酯酶
B F-1.6-P磷酸酯酶
C1 丙酮酸羧化酶
B
C2 PEP羧激酶
磷酸二羟丙酮
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三羧酸循环的调节酶及其调节
酶 的 名 称 变构激活剂 变构抑制剂
柠檬酸合酶
ATP
异柠檬酸脱氢酶 ADP、AMP
NADH
α-酮戊二酸脱氢酶系
ATP、NADH、 琥珀酰CoA

基础生物化学-糖类分解代谢报告

基础生物化学-糖类分解代谢报告

5.3.2 淀粉(糖原)的酶促降解 淀粉(糖原)有水解和磷酸解两种酶促降解途 径。 5.3.2.1 淀粉酶促水解 淀粉酶、-淀粉酶、脱支酶和麦芽糖酶参与 了植物体内的淀粉水解。
①- 淀粉酶耐热 (70℃,15min) 不耐酸 (pH3.3) , 在淀粉分子内部随机水解-1,4糖苷键,将直 链淀粉水解的产物为葡萄糖、麦芽糖;将支 链淀粉作用产物为葡萄糖、麦芽糖和糊精。
5.3.3 细胞壁多糖的酶促降解 纤维素是由1000~10000个-D-葡萄糖通过-1, 4糖苷键连接的直链分子,是植物细胞壁的主 要组分。纤维素可在酸或纤维素酶作用下水 解为-葡萄糖。
单糖的分解代谢 在生物体内首先要将多 糖水解为单糖才能为 生命活动提供能源或 碳源,葡萄糖是大多 数有机体生命活动的 主要能源,细胞通过 分解葡萄糖将其中所 含的化学能转化成细 胞能够利用的形式 (ATP)。
5.3 双糖和多糖的酶促降解 5.3.1 蔗糖、麦芽糖、乳糖的酶促降解 5.3.1.1 蔗糖的水解 蔗糖是植物光合作用产物的主要运输形式。 ①在蔗糖合成酶作用下水解
②在蔗糖酶(转化酶)作用下水解
5.3.1.2 麦芽糖的水解 麦芽糖酶可催化麦芽糖水解为葡萄糖。
5.3.1.3 乳糖的水解 乳糖在-半乳糖苷酶催化下水解为 D-葡萄糖和 D-半乳糖。
②- 淀粉酶耐酸不耐热,从多糖的非还原端的 -1,4糖苷键,将直链淀粉水解成麦芽糖;将 支链淀粉(或糖原)水解为麦芽糖和极限糊 精。
③脱支酶(R酶)可专一水解 -1,6糖苷键。支 链淀粉经淀粉酶水解产生的极限糊精,由脱 支酶水解去除 -1,6键连接的葡萄糖,再在淀粉酶和-淀粉酶作用下彻底水解。 ④麦芽糖酶水解麦芽糖和糊精中的-1,4糖苷键, 生成葡萄糖。
糖原磷酸解时,在酶 a 的作用下,从糖原非还 原端逐个磷酸解下葡萄糖基,生成 G-1-P , 切至离分支点 4 个葡萄糖残基处停止,然后 由 -1,4-1,4- 寡聚糖基转移酶 (oligosaccharyl transferase)切下分支点上的麦芽三糖,同时 将它转移到另一链上,以-1,4糖苷键连接, 被加长了的支链仍由糖原磷酸化酶 a 磷酸解, 而连接有 1 个葡萄糖残基的 -1,6 糖苷键由脱 支酶水解形成葡萄糖。

26糖原的分解与合成

26糖原的分解与合成

糖尿病(Diabetes mellitus)
Insulin缺乏或其受体异常,不能对抗 由肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质 激素等引起的血糖升高作用,产生高血 糖和糖尿。病人的代谢发生障碍,机体 供能不足,表现出典型的多饮、多食、 多尿及体重减少的“三多一少”症状。 严重时还伴随酮血症及酸中毒。
三、糖原的分解
糖原分解需要三种酶参与,即糖原磷酸化酶 (glycogen phosphorylase),糖原脱支酶(glycogen debranching enzyme)和磷酸葡萄糖变位酶 (phosphoglucomutase)。分步反应:
(1)从糖链的非还原端开始
磷酸化酶
糖原(Gn)+ H3PO4
分步反应:
(1) G
G-1-P
HO CH2
H
H
OH OH
H
ATP ADP P O CH2
O H
H
H
H OH
Mg+
OH OH
OH 葡萄糖激酶
H
HO CH2
O H
H OH
HH
OH OH
OH 磷酸葡萄 H
O H
H OP
OH
G
G-6-P 糖转位酶 G-1-P
(2)尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)的合成
UDPG焦磷 酸化酶
+
G
② G-1-P
磷酸葡萄糖 转位酶
G-6-P
葡萄糖-6-磷酸
酶(肝、肾)
③ G-6-P
G + H3PO4
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在于肌肉 中,所以只有肝和肾可补充血糖,而肌糖原不能分解为葡 萄糖,不能补充血糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。

生物化学及分子生物学(人卫第九版)-05-05节糖代谢

生物化学及分子生物学(人卫第九版)-05-05节糖代谢

熟悉 糖原合成与分解关键酶的调节;糖异生与糖酵解的底物循环 调节;乳酸循环的概念和生理意义;血糖调节激素及其作用 机制
了解
糖原累积症的发病机制;糖醛酸途径、多元醇途径的概念和 生理意义;血糖的来源和去路;糖代谢异常所致疾病
第五节
糖原的合成与分解
Glycogenesis and Glycogenolysis
激素调节的整合作用
糖、脂肪、氨基酸代谢相协调 肝、肌、脂肪组织等各组织代谢相协调
(一)胰岛素是降低血糖的主要激素
特点: 血糖升高时分泌增多 机制: 促进糖原、脂肪、蛋白质合成
促进肌、脂肪组织等通过GLUT4摄取葡萄糖
激活磷酸二酯酶而降低cAMP水平,使糖原合酶活化、磷酸化酶抑制 激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶,使丙酮酸脱氢酶活化
一、血糖水平保持恒定
是血糖来源和去路相对平衡的结果
食物糖
糖原合成
CO2 + H2O 肝(肌)糖原 其他糖
肝糖原
分解
血糖
磷酸戊糖途径等
非糖物质
脂肪、氨基酸
二、血糖稳态主要受激素调节
调节血糖的主要激素
降低血糖:胰岛素 (insulin)等
升高血糖:胰高血糖素 (glucagon)、糖皮质激素、肾上腺素等
葡糖-1-磷酸
UDPG
ATP
UTP
CH 2 OH
H
HO
H OH H
O H
H O P
+
P
P
P
尿苷
葡糖-1- 磷酸 UDPG焦磷酸化酶 PPi
H
HO
OH
UTP
CH 2 OH H OH H O H H O P P
尿苷
2Pi+能量

糖原的分解合成代谢

糖原的分解合成代谢

腺苷环化酶
腺苷环化酶(有活性)
(无活性) ATP
cAMP
PKA
(无活性)
PKA
(有活性)
磷酸化酶b激酶 磷酸化酶b激酶-P
Pi
磷蛋白磷酸酶-1

糖原合酶
糖原合酶-P
磷酸化酶b 磷酸化酶a-P
Pi
糖原的分解合成代谢
磷蛋白磷酸酶-1
Pi

PKA(有活性)
磷蛋白磷酸酶-1

磷蛋白磷酸酶抑制剂-P
磷蛋白磷酸酶抑制剂
葡萄糖-6-磷酸酶(肝,
肾)
葡萄糖-6-磷酸
葡萄糖
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在
于肌中。所以只有肝和肾可补充血糖;而肌糖原不
能分解成葡萄糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。
糖原的分解合成代谢
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肌糖原分解
➢ 肌糖原分解前三步反应与肝糖原分解过程相同, 不过生成6-磷酸葡萄糖之后,因为肌肉组织中 不存在葡萄糖-6-磷酸酶,所以生成6-磷酸葡萄 糖不能转变成葡萄糖释放入血,提供血糖,而 只能进入酵解路径深入代谢。
合成部位: 组织定位:主要在肝脏、肌肉 细胞定位:胞浆
糖原的分解合成代谢
第4页
糖原合成路径:
1.葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸
ATP
ADP
葡萄糖 己糖激酶;
葡萄糖-6-磷酸
葡萄糖激酶(肝)
糖原的分解合成代谢
第5页
2.葡萄糖-6-磷酸转变成葡萄糖-1-磷酸
磷酸葡萄糖变位酶
葡萄糖-6-磷酸
葡萄糖-1-磷酸
➢ 当糖原合成路径活跃时,分解路径则被抑制, 才能有效地合成糖原;反之亦然。
糖原的分解合成代谢

糖代谢

糖代谢

第四章糖类分解代谢新陈代谢(metabolism)是生物的基本特征之一。

新陈代谢又称 物质代谢,是指生物与周围环境进行物质交换和能量交换的过 程。

合成代谢(也叫同化作用 assimilation) 新陈代谢 分解代谢(也叫异化作用 dissimilation) 生物新陈代谢的特点是: ① 代谢反应是在温和条件下,由酶催化来实现。

② 各种代谢反应互相协调、有条不紊。

③ 能随着内外环境的变化进行自我调节。

④ 无论是分解代谢还是合成代谢,其生物化学反应都是分步进行 的,伴随着的能量吸收和释放也是逐步进行的。

⑤ 由于反应是分步进行的,上一反应的产物就成为下一反应的底 物,因此代谢反应中的任一反应物、中间物或产物,都通称为 代谢物(metabolite)。

z z z糖类物质是一类多羟基醛或多羟基酮化合物或聚合物。

糖类物质可以根据其水解情况分为:单糖、寡糖和多糖。

糖类是自然界分布最广的物质之一,在生物体内,糖类物质 主要以均一多糖、杂多糖、糖蛋白和蛋白聚糖形式存在。

动物和大多数微生物所需的能量,主要是由糖的分解代谢提 供的,一克葡萄糖彻底氧化分解可释放16.74kJ的能量。

另一 方面,糖分解的中间产物,又为生物体合成其它类型的生物 分子,如氨基酸、核苷酸和脂肪酸等,提供碳源或碳链骨 架。

糖的分解代谢是指大分子的多糖和寡糖酶促降解生成单糖, 单糖进一步氧化分解成CO2和H2O,并释放能量的生物化学变 化过程。

糖的分解代谢是生物体广泛存在的最基本代谢。

zzz1第一节 双糖和多糖的酶促降解一、双糖的酶促降解 生物体内广泛存在的双糖主要有蔗糖、麦芽糖和乳 糖。

1、蔗糖的水解 蔗糖是由葡萄糖和果糖通过α,β-1,2-糖苷键脱水缩合而 成。

其化学学名是α-D-葡萄糖-(1→2)- β-D-果糖苷。

CH2OHOOH OH OH OCH2OH OOH CH2OHOH1)蔗糖合成酶(sucrose synthetase) 催化蔗糖与UDP反应生成果糖和尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG), 反应可逆。

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货号:MS3602 规格:100管/48样糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b,GPb)试剂盒说明书
微量法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。

GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。

GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。

测定原理:
GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。

添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。

自备实验用品及仪器:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:
提取液:100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体16 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;
试剂三:粉剂×1支,-20℃保存;
试剂四:粉剂×1支, -20℃保存;
试剂五:粉剂×1支, -20℃保存;
样本的前处理:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零;
2、工作液的配制:临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃
保存,禁止反复冻融。

3、试剂三的配制:临用前在试剂三瓶中加入1mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后
-20℃保存,禁止反复冻融。

4、试剂四的配制:临用前在试剂四瓶中加入1mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后
-20℃保存,禁止反复冻融。

5、试剂五的配制:临用前在试剂五管中加入500μL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融。

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6、将工作液、试剂三、试剂四和试剂五置于37℃预热5分钟;
7、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、10μL试剂三、10μL试剂四、10μL蒸
馏水和160μL工作液,立即混匀,记录340nm处5min后的A1和10min后的吸光值A2,计算ΔAGPa=A2-A1。

8、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、10μL试剂三、10μL试剂四、10μL试
剂五和160μL工作液,立即混匀,记录340nm处5min后的A3和10min后的吸光值A4,计算ΔAGP=A4-A3。

注意:由于每个样本需要同时测一个GP(GPa和GPb)活性和一个GPa活性,因此本试剂盒100管测48个样本。

GPb活性计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GPb(nmol/min/mg prot)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=643×(ΔAGP-ΔAGPa)÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位定义:每g组织每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GPb(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=643×(ΔAGP-ΔAGPa)÷W
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。

b.用96孔板测定的计算公式如下:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GPb(nmol/min/mg prot)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1286×(ΔAGP-ΔAGPa)÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位定义:每g组织每分钟产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

GPb(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔAGP-ΔAGPa)×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=1286×(ΔAGP-ΔAGPa)÷W
V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。

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