凯氏定氮法：土壤微生物量氮测定
凯氏定氮法测定氮含量
凯氏定氮法测定氮含量凯氏定氮法，这个名字听起来像是某种古老的魔法，实际上，它就是一门科学技术，专门用来测定食品和土壤中氮的含量。
氮，这个我们常常听到的元素，虽说听起来平平无奇，但它在植物生长、土壤健康和食品营养中可是个大角色。
没有氮，植物就像没有盐的菜，淡得不行，连鸟都不愿意啄上一口。
想象一下，吃个生菜沙拉，结果发现没什么味道，那可真是糟糕透了。
说到这里，凯氏定氮法的魅力就展现出来了。
通过这个方法，我们可以准确测出样品中氮的含量，进而推算出蛋白质的含量。
听起来复杂，其实就是一套巧妙的化学程序。
得准备好样品，像是土壤、饲料、食品什么的。
准备的时候，要小心翼翼，像在做一件艺术品。
然后，把这些样品放进一个特殊的容器里，加点浓硫酸，嘿，这可不是随便的调料。
浓硫酸能把有机物质分解，释放出氮。
这个过程可得小心，别让硫酸飞溅到自己身上，安全第一嘛。
看到那冒着烟的混合物，心里一定会想，哇，这是什么黑魔法呀！反应的时候可是要耐心等待的，有时候一分钟就像过了一个世纪。
就得加些催化剂，这一步就像给这锅汤加点调料，让它更快地煮熟。
催化剂的作用就是加速反应，让氮元素更容易释放出来。
然后，就可以将这个混合物转移到蒸馏器里。
大家可能会问，蒸馏器是什么？简单说，就是一个可以把气体变成液体的设备。
这个时候，氮会以氨的形式出现，跟水结合，形成氨水。
这一步，可不能掉以轻心，操作得不对，可能会错过好多好东西。
得用酸来滴定，检测氨的量。
滴定听上去很高深，其实就是通过逐滴加酸，观察反应的变化。
这个过程就像是在调试一个乐器，得慢慢来，找到那个完美的音调。
等到颜色发生变化的那一刻，心中不禁一阵雀跃，这说明实验快完成了。
计算一下反应中氮的含量，咱就可以得出结果了。
整个过程下来，虽然有点繁琐，但看着最终的结果，心里满是成就感，仿佛自己就是个科学家。
说到氮的意义，可不止于此。
农民们通过测定土壤的氮含量，能知道该施多少肥料，避免了“随便撒撒”的尴尬。
凯氮法测土壤中氮元素
凯氏定氮法测定土壤中氮含量1前言土壤是植物生长离不开的培养基，植物生长中所吸收的氮中有30%～60%是来自土壤，可见土壤中的氮含量对作物营养的重要作用。
本方案采取凯氏定氮法来测定土壤中氮含量，具有操作方便，重复性良好的优点。
2仪器与试剂2.1 仪器K1160全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪2.2 试剂硫酸滴定液c(H+)=0.02mol /L、2%硼酸溶液：质量分数、40%氢氧化钠溶液、溴甲酚绿-甲基红混合指示剂、催化剂片等。
3实验方法3.1样品制备取样品适量用研磨并过筛。
3.2 实验过程称取制备好的样品约1g（精确至0.1mg），用称量纸包好后一并投入消化管中，加一片催化剂片（或者3g硫酸钾、0.2g硫酸铜），加入10mL浓硫酸。
利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，设定消解温度参数如下表：式中：c-标准酸摩尔浓度（mol/L)W-样品质量（g）V0-空白样滴定标准酸消耗量（mL）V-样品滴定标准酸消耗量（mL），精确到小数点后四位4.2实验结论《NY/T 1121.24-2012土壤全氮的测定自动定氮仪法》要求平行测定结果允许绝对相差不得高于0.004%。
经测试，使用凯氏定氮仪测试土壤中氮含量绝对相差仅为0.0014%，平行性良好，符合标准要求。
并且具有操作简单,安全性高，节省人力等优点。
参考文献[1]NY/T 1121.24-2012土壤全氮的测定自动定氮仪法[S].注意事项实验中涉及到的试剂，均为优级纯或分析纯；实验用水为无氨蒸馏水。
此方法为测定全氮过程中，由于硝态氮含量过低可忽略不计，所以采用不含硝态氮测定方法。
土壤样品消解完成后底部仍会有部分沉淀，一般颜色为白色或浅灰色。
微量凯氏定氮法
微量凯氏定氮法
微量凯氏定氮法是一种常用的测定土壤中氮含量的方法，其原理是将土壤样品中的氮转化为氨，然后通过滴定法测定氨的含量，进而计算出土壤中的氮含量。
这种方法操作简便、结果准确，被广泛应用于农业和环境科学领域。
微量凯氏定氮法的步骤如下：
首先，准备样品。
从不同位置采集土壤样品，将其充分混合，然后随机取样。
样品的数量应根据实际需要而定，一般来说，取10-50克的土壤样品即可。
其次，将取样的土壤样品加入容器中，加入一定量的钠氢氧化溶液，用玻璃棒搅拌均匀。
这一步的目的是将土壤中氮的有机形态转化为氨。
然后，加入氯化钾固体作为氮的吸收剂，用熔盐块进行加热。
在加热的过程中，土壤中的氨会被氯化钾吸收并转化为氯化铵。
加热时间一般为20-30分钟。
接着，将反应的溶液冷却后，用蒸馏水洗涤过滤。
将洗涤液收集到滴定瓶中，并加入酚酞指示剂。
这时，溶液会呈现淡红色。
最后，用硫酸溶液滴定酚酞溶液直至颜色变为无色。
硫酸溶液的浓度和滴定的体积会根据土壤样品的氮含量而定。
通过计算滴定所需的硫酸溶液体积，就可以得到土壤样品中氮的含量。
微量凯氏定氮法的优点是操作简单、结果准确。
与其他氮测定法相比，微量凯氏定氮法更适用于测定土壤中微量氮的含量。
在实际应用中，可以根据土壤的特性和研究需要选择合适的氮测定方法。
总之，微量凯氏定氮法是一种重要的土壤氮测定方法，其准确性和方便性使其成为农业和环境科学研究中不可或缺的工具。
通过合理运用该方法，可以更好地了解土壤中氮的含量，为土壤养分管理和环境保护提供科学依据。
土壤凯氏定氮法
土壤凯氏定氮法
土壤凯氏定氮法是一种用于测定土壤中可溶性氮含量的方法。
该方法利用硫酸钠与苏打灰反应生成氨气的特性，通过收集氨气并用酸进行中和，计算出样品中的氮含量。
具体操作步骤如下：
1. 准备样品：将需要测定的土壤样品取若干克，经过干燥处理后，将土壤样品孔隙内的空气排净，保证样品中只有土壤。
2. 加入试剂：将样品放入一个特制的凯氏消化管中，加入一定量的酸，然后加入硫酸钠试剂和氢氧化钠试剂，反应生成氨气。
3. 收集氨气：利用凯氏影射瓶收集生成的氨气，通过长管与影射瓶相连，将氨气从凯氏消化管中传输到影射瓶中。
4. 中和氨气：在影射瓶中加入一定量的酸，将氨气中和至酸碱中性，使氨气转化为水。
5. 测定氮含量：测定影射瓶中酸的剩余量，计算出氨气转化为氮酸的质量，并通过计算得出土壤中可溶性氮的含量。
土壤凯氏定氮法主要适用于测定土壤中的无机氮含量，包括铵态氮和硝态氮。
该方法操作简单、准确性高，广泛应用于土壤肥力评价和农业生产中。
土壤全氮 凯氏定氮法
土壤全氮凯氏定氮法
凯氏定氮法是一种测定土壤全氮含量的方法。
凯氏定氮法的原理是将土壤中的有机氮转化为氨氮，然后使用氨氮与相应试剂反应生成深蓝色络合物，通过测定络合物的光强度来计算土壤中的全氮含量。
具体操作步骤如下：
1. 取一定量的土壤样品并将其空气干燥，然后将其通过筛网过滤，以去除颗粒物。
2. 将经过筛网的土壤样品和含有碱性添加剂的试剂（例如三氟化硼-乙醇）混合，加热至100摄氏度，以将土壤中的有机氮
转化成氨氮。
3. 将转化后的氨氮与试剂中的染料（一般为砒百灵或硫氰酸铁）反应，生成深蓝色络合物。
4. 通过测定深蓝色络合物的吸光度或光强度，利用标准曲线来确定土壤中全氮的含量。
凯氏定氮法是一种常用的测定土壤全氮含量的方法，其优点是测量结果准确可靠，操作简单快捷。
然而，凯氏定氮法只能测定土壤中的全氮含量，无法区分有机氮和无机氮的含量。
因此，当需要了解土壤中各形态氮的含量时，需要采用其他方法进行测定。
氮量的测定凯氏法
氮量的测定凯氏法1范围本方法规定了地球化学勘查试样中氮含量的测定方法。
本方法适用于水系沉积物及土壤试料中氮量的测定。
本方法检出限（3S）：0.002%氮。
本方法测定范围：0.006%~0.4%氮。
注：本方法测得的氮不包括硝态氮、亚硝态氮。
因硝酸根离子在煮解过程中不会完全还原为铵离子，且易挥发损失。
但一般土壤样品中硝态氮含量不超过全氮量的1%，故可以忽略不计（引自GB7848-87）。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本方法的本部分的引用而成为本部分的条款。
下列不注日期的引用文件，其最新版本适用于本方法。
GB/T 20001.4 标准编写规则第4部分：化学分析方法。
GB/T 7848-87 森林土壤全氮的测定。
GB/T 14505 岩石和矿石化学分析方法总则及一般规定。
GB 6379 测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准方法的重复性和再现性。
GB/T 14496-93 地球化学勘查术语。
3 方法提要试料在硫酸钾、硫酸铜和硒的共存下，用硫酸煮解氧化，使试料中的氮转化为硫酸铵，再用氢氧化钠碱化后，加热蒸馏逸出氨，经硼酸溶液吸收，用盐酸标准溶液滴定并计算试料中氮的含量。
4 试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水。
4.1 氢氧化钠4.2 硼酸4.3 硼砂4.4 硒粉ω(Se)=99%4.5 硫酸（ρ 1.84 g/mL）4.6 盐酸（ρ 1.19 g/mL）4.7 硝酸（ρ 1.40 g/mL）4.8 乙醇ω(CH3CH2OH)=95%4.9 氢氧化钠溶液ρ（NaOH）=400 g/L4.10 盐酸溶液[c（HCl）=1 mol/L]量取84 mL盐酸（4.6），用水稀释至1000 mL。
4.11 王水（1+1）75 mL盐酸（4.6）和25 mL硝酸（4.7）混合后，加入100mL 水混匀。
用时配制。
4.12 混合加速剂将硫酸钾（K2SO4）和硫酸铜（CuSO4·5H2O）按10∶1比例，在玻璃研钵中研磨混匀，装入宽口玻璃瓶中。
凯氏定氮法
凯氏定氮法凯氏定氮法是一种广泛用于土壤、水、肥料和动物组织中测定氮含量的方法。
该方法是由德国化学家凯斯于1883年首次提出的。
凯氏定氮法的原理是利用氮在含钾氢氧化物中的氧化反应。
将样品中的氮以铵离子（NH4 +）的形式存在，加入烧化的硫酸钾，硫酸钾中产生的氢氧根离子（OH-）将氨气与水反应生成氢氧化铵，并将硫酸钾还原成硫酸亚铁（Fe2+）。
然后向还原的溶液中滴加过量的高浓度二氧化钠，使溶液中的氢氧化铵被完全氧化成氮气（N2），同时钠离子（Na+）与氢氧根离子（OH-）中和生成水。
通过测定生成的氮气体积或气压，计算出原样中氮的含量。
凯氏定氮法的步骤如下：1. 取100g样品，加入含有15mL浓盐酸的锥形瓶中，用热板加热溶解。
2. 过滤后将滤液倒入蒸发皿中，置于水浴上加热，使溶液蒸干。
3. 将蒸干的样品装入蒸发皿，加入一定量的硫酸钾和硝酸，加热至燃烧，使硫酸钾氧化氨气和有机氮化合物，同时硝酸氧化硫酸钾。
4. 然后加入一定量的水，将溶液转移到滴定瓶中，用含NaOH的滴定液滴定溶液中的酸，使溶液呈中性。
5. 加入过量的NaOH，使氢氧化铵完全转化为氨气。
6. 用滴定管向滴定瓶中加入用水稀释过的二氧化钠，使溶液中氧化铵转化为氮气并与钠离子中和。
7. 通过测定生成的氮气体积或气压，计算出原样中氮的含量。
凯氏定氮法的优点是测定结果稳定可靠，精度高，操作简便快捷，适用于各种类型的样品。
但是，该方法存在着一些局限性，例如可能会受到含有硫酸盐或硝酸盐的干扰。
此外，由于该方法不能分离不同形式的氮，因此不能区分有机氮和无机氮。
总之，凯氏定氮法是一种简便快速、精度高的测定氮含量的方法，已广泛应用于农业、环境和生物学等领域。
微量凯氏定氮法实验报告
微量凯氏定氮法实验报告微量凯氏定氮法实验报告引言：微量凯氏定氮法是一种常用的测定土壤或水体中氮含量的方法。
该方法通过将样品中的氮转化为氨，并使用凯氏试剂与氨反应生成深蓝色络合物，通过分光光度计测定络合物的吸光度，从而确定样品中的氮含量。
本实验旨在通过微量凯氏定氮法测定土壤样品中的氮含量，探究土壤中氮的含量对植物生长的影响。
实验方法：1. 实验前准备：将凯氏试剂与氨试剂按照一定比例混合制备凯氏试剂工作液，根据实验需求调整其浓度。
2. 样品处理：将采集的土壤样品经过筛网过滤，去除杂质，并将筛选后的土壤样品称取一定质量。
3. 氮转化：将称取的土壤样品与适量的硫酸铵混合，加入蒸馏水溶解，然后加入足量的钠氢氧化溶液，使样品中的氮转化为氨。
4. 反应：将转化后的样品与凯氏试剂工作液混合，静置反应一段时间，使其生成深蓝色络合物。
5. 测定：使用分光光度计测定反应后的样品的吸光度，根据标准曲线确定样品中氮的含量。
实验结果：通过实验测定，我们得到了不同土壤样品的氮含量。
结果显示，不同土壤样品中氮的含量存在一定的差异。
其中，A样品的氮含量最高，为X mg/kg；B样品的氮含量为Y mg/kg；C样品的氮含量为Z mg/kg。
讨论：1. 影响土壤中氮含量的因素：土壤中的氮含量受到多种因素的影响，包括土壤类型、植被类型、气候条件等。
在本实验中，我们观察到不同土壤样品中氮含量存在差异，这可能是由于土壤类型和植被类型的不同导致的。
2. 氮对植物生长的影响：氮是植物生长所需的重要营养元素之一，它参与了植物体内的蛋白质合成、叶绿素合成等关键过程。
因此，土壤中的氮含量对植物的生长和发育具有重要影响。
本实验结果显示，A样品中氮含量最高，可能说明该土壤适合植物生长。
3. 实验方法的优缺点：微量凯氏定氮法是一种常用的测定土壤中氮含量的方法，它具有操作简便、准确度高的优点。
然而，该方法也存在一些限制，如需要较长的反应时间、对样品的处理要求较高等。
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土壤微生物量氮的测定方法
1.试剂配制：
(1)混合催化剂：按照硫酸钾：五水硫酸铜：硒粉=100：10：1，称取硫酸钾100g、
五水硫酸铜10g、硒粉1g。
均匀混合后研细,贮于瓶中。
(2)密度为1.84浓硫酸。
(3)40%氢氧化钠：称400g氢氧化钠于烧杯中，加蒸馏水600ml，搅拌使之全部溶
解定容至1L。
(4)2%硼酸溶液：称20g硼酸溶于1000ml水中，再加入20ml混合指示剂。
（按体
积比100:2加入混合指示剂）
(5)混合指示剂：称取溴甲酚绿0.5g和甲基红0.1克,溶解在100ml95%的乙醇中,
用稀氢氧化钠或盐酸调节使之呈淡紫色，此溶液pH应为4.5。
(6)0.01mol的盐酸标准溶液：取比重1.19的浓盐酸0.84ml，用蒸馏水稀释至
1000ml，用基准物质标定之。
(7)0.5M K2SO4溶液：称取K2SO4 87.165g溶解于蒸馏水中，搅拌溶解，（可加
热）定容至1L。
(8)去乙醇氯仿的配制：在通风柜中，量取100毫升氯仿至500毫升的分液漏斗
中，加入200毫升的蒸馏水，加塞，上下振荡10下，打开塞子放气，而后加塞再振荡10下，反复3次，将分液漏斗置于铁架台上，静止溶液分层，打开分液漏斗下端的阀，将下层溶液（氯仿）放入200毫升的烧杯中，将剩余的溶液倒入水槽，用自来水冲洗。
再将烧杯中的氯仿倒入分液漏斗中，反复3次。
将精制后的氯仿倒入棕色瓶中，加入无水分析纯的CaCl2 10g，置于暗处保存。
2.试验步骤：。
（1）制样：称取新鲜土壤（30.0g）于放置烧杯中，加约等于田间持水量60%水在25℃下培养7~15d。
取15.0g土于烧杯，置于真空干燥器中，同时内放一装有用100ml精制氯仿的小烧杯，密封真空干燥器，密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿沸腾5分钟，静置5分钟，再抽滤5分钟，同样操作三次。
干燥器放入25℃培养箱中24小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。
按照土：0.5M K2SO4=1:4(烘干土算，一般就是湿土：0.5M K2SO4=1：2)，加入0.5M K2SO4溶液（空白直接称取15.0g土，加同样比例0.5M K2SO4溶液）震荡30分钟，过滤。
（2）测定：滤液要是不及时测定，需立即在-15℃以下保存，此滤液可用于微生物碳氮的测定。
微生物碳测定只吸取2ml，采用重铬酸钾-硫酸亚铁滴定法测定。
微生物氮吸取滤液10ml于消化管中，加入2g催化剂，在再加5ml浓硫酸，管口放一弯颈小漏斗，将消化管置于通风橱内远红外消煮炉的加热孔中。
打开消煮炉上的所有加热开关进行消化，加热至微沸，关闭高档开关，继续加热。
消煮至
溶液呈清彻淡蓝色，然后继续消煮0.5—1.0h，最后溶液呈蓝绿色，土呈灰白色，全部消煮时间约85一90 min。
消煮完毕冷却，同时做两个试剂空白试验。
（3）计算：
A．氮含量计算
)*N*0.014*100*ts/W
土壤含氮量（%）=(V-V
V-滴定试样时消耗的盐酸标准溶液体积，ml。
V
-滴定空白时消耗的盐酸标准溶液体积，ml。
N-盐酸标准溶液的当量浓度。
（此处为0.01）
W-土壤样品重（用水分系数换算成烘干土重）g。
0.014-氮的毫克当量
ts为分取倍数，滤液为30ml，试验测定用了10ml，因此处ts为3
B．微生物氮计算
B(N) =EN／KEN
式中B(N)——微生物量氮（BN）质量分数，mg.kg-1；
EN——熏蒸土样浸提的全N 与未熏蒸土样之间的差值，mg.kg-1；（取上述A 熏蒸和未熏蒸全氮的差值）
KEN—代表被氯仿熏蒸杀死的土壤微生物生物量碳在培养期间矿化为矿质态氮的比例，常取0.57（Jenkinson.1988）
注：所有的滤液测定参考的方法为：陈立新《土壤实验实习教程》，步骤和熏蒸前期处理参考：吴金水《土壤微生物生物量测定方法及其应用》，所有的药品全是分析纯，若土壤比较贫瘠可在消煮的时候加多点浸提液。