综述分光光度法测食品中的硝酸盐
分光光度法测定市售肉罐头食品中亚硝酸盐含量
Ｋｅ ｙ ｗ ｏ ｒ ｄ ｓ ：ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｉ ｒ ｃ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ；ｃ ａ ｎ ｎ ｅ ｄ ｍｅ ａ ｔ ；ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｔ ｅ
有亚硝酸盐的食品后 ，会对人体有一定的致癌作用。 亚硝酸盐 的致癌机理是在 胃酸等环境下亚硝酸 亚硝 酸盐 在 肉罐 头 中的主要作 用有 护色作用 ， 盐与食物中的仲胺 、叔胺和酰胺等反应生成强致癌 将亚硝 酸盐 加入 肉罐 头 中使 肉色鲜 红 ；防腐作 用 ， 物Ｎ 一亚硝胺 。亚硝胺还 能够透过胎盘进入 胎儿体 尤其对梭状 芽孢杆菌 、产气夹膜梭菌 、金 黄色葡萄 内 ，对 胎儿有 致 畸作 用 。 球菌等起到抑制其生长繁殖的作用 ；赋香增味作用。 １ 材 料与 方 法 引 起亚 硝 酸盐 中毒 的 主要 原 因有食 用腌 制 品 （ 如泡菜 、酸菜 、 腌 肉及变质的蔬菜等）引起 的中毒 １ ． １ 肉罐头中亚硝酸盐的检测原理圜 现象 ；误食工业盐 （ 工业盐 中含有较多的亚硝酸盐） 罐头样 品经过沉淀后先分离其 中的蛋 白质 ，然 引起 的中毒 现象 。 后除去样品中脂肪 ；在弱酸环境下 ，罐头 中的亚硝 罐藏食品 中亚硝酸盐引起 中毒的机理 ：罐藏食 酸盐与对氨基 苯磺 酸起重氮化反应 ，生成重氮化合 品 中含有一定量 的亚硝酸盐 ，能使人体血 液 中的低 物 ；重氮化合 物与盐酸萘 乙二胺偶合 ，形成紫红色 铁血红蛋 白 （ 携 带氧气）氧化成高铁血红蛋 白，高 的络合物 ，紫色物质颜 色的深浅 与亚硝酸盐 的含量 铁 血 红 蛋 白的 性 质 比 较 稳 定 ，因 而 失 去 携 氧 能 力 ， 成正 比，可与标准 比较定量 。通过分光光度计 比色 引 起组 织缺 氧 的情况 。 测定 ， 计算出样品中亚硝酸盐的含量 。 罐头食 品中亚硝酸盐对健康 的影响ｆ １ ］ ： 通过动物 反 应式 见 图 １ 。 学实验表明，亚硝酸盐属于剧毒 ，当人体 （ 成年人） １ ． ２ 试 剂［ ３ １ 摄人 ０ ． ２ ～ ０ ． ５ ｇ 时能引起 中毒现象 ，摄入 ３ ｇ 可引起 除非另有规定 ，本方法 中所用试剂均为分析纯 ， 死亡 ；根据研究表 明 ，当人体长期小剂量 地摄人含 水为 Ｇ Ｂ ／ Ｔ ６ ６ ８ ２ 规定的三级水 。
食物中亚硝酸盐含量的测定
食物中亚硝酸盐含量的测定
亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，主要指亚硝酸钠，为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中，是自然界中最普遍的含氮化合物。
以下是一些测定食物中亚硝酸盐含量的方法：
1. 分光光度法：这是一种常用的分析方法，基于亚硝酸盐在特定波长下的吸光度来定量。
将食物样品与化学试剂反应，形成一种有色化合物，然后通过分光光度计测量其吸光度，并与标准曲线进行比较，从而确定亚硝酸盐的含量。
2. 离子色谱法：这是一种分离和分析离子的技术，可用于测定亚硝酸盐。
食物样品经过前处理后，通过离子色谱仪进行分离和检测，根据保留时间和峰面积来定量亚硝酸盐的含量。
3. 气相色谱法：该方法适用于分析挥发性化合物，如亚硝酸盐。
食物样品经过衍生化处理，将亚硝酸盐转化为易挥发的衍生物，然后通过气相色谱仪进行分离和检测。
4. 酶联免疫吸附法：这是一种基于抗体-抗原相互作用的分析方法。
使用特异性的亚硝酸盐抗体与食物样品中的亚硝酸盐结合，然后通过酶标抗体或显色底物进行检测。
无论选择哪种方法，都需要根据具体的实验条件和要求进行适当的样品前处理，以去除干扰物质并提取出亚硝酸盐。
同时，应该使用标准物质进行校准和质量控制，确保测量结果的准确性和可靠性。
这些方法通常需要专业的实验室设备和技术，因此如果你需要测定食物中亚硝酸盐的含量，建议咨询专业实验室或相关机构。
分光光度法测定煮熟蔬菜中亚硝酸盐含量变化
仪器 ： ７ ２ １ 型 紫外一 可 见分光 光度计 。
２实验过 程
２ ． １亚硝 酸钠 系列标 准 溶液 配制 吸取０ ． ０ ０ ｍＬ 、 ０ ． ２ ０ ｍＬ 、 ０ ． ４ ０ ｍＬ 、 ０ ． ６ ０ ｍＬ、 ０ ． ８ Ｏ ｍＬ 、
１． ０ ０ ｍＬ、 １． ５ Ｑ ｍＬ、 ２． ０ ０ ｍＬ、 ２． ５ Ｏ ｍＬ、 ３． ０ ０ ｍＬ、 ３． ５ ０ ｍＬ、
４ ． ０ ｍＬ ５ ｕ ｇ ／ ｍＬ 亚硝 酸钠标准使 用液（ 相当于０ ． ０ ｕ ｇ 、
１ ． ０ ｕ ｇ、 ２． ０ ｕ ｇ 、 ３ ． ０ ｕ ｇ、 ４． ０ ｕ ｇ、 ５． ０ ｕ ｇ、 ７． ５ ｕ ｇ、 ｌ ０ ． ０ ｕ ｇ、
１ ２ ． ５ ｕ ｇ 、 １ ５ ． ０ ｕ ｇ 、 １ ７ ． ５ ｕ ｇ 、 ２ ０ ． ０ ｕ ｇ ） ， 分别置于５ ０ ｍＬ比色 管 中。 分别加入２ ｍＬ ４ ｇ ／ Ｌ 对氨基苯磺酸 溶液 ， 混匀 ， 静 置３ ａｉ ｒ ｎ ～５ ｍｉ ｎ 后， 各加入 ｌ ｍＬ ２ ｇ ／ Ｌ 盐酸萘 乙二 胺溶 液， 加水至刻度 ， 混匀 ， 静置 １ ５ ａｉ ｒ ｎ。
吸光度 为纵 坐 标 ， 标准 溶液 浓度 为横 坐标 ， 绘制 标准 曲线 。 （ 如 图１ ） ２ ． ４蔬 菜 中亚硝 酸 盐含 量 的测 定 将菠菜、 茄子 用 去 离子 水洗 净 ， 用 去离 子 水 煮 沸 １ ５ ａｉ ｒ ｎ， 用研 钵制 成匀浆 ， 分成 两份 ， 一份 处于 常温条 件下 ， 一份 处于 冰箱 冷藏 中。 分别 放置 Ｏ ｈ、 ４ ｈ、 １ Ｏ ｈ、 ２ ４ ｈ 、 ２ ８ ｈ 后测定其吸光度 。 称４ ｇ （ 精确至０ ． ０ ０ ０ １ ｇ ） 制成 匀 浆 的试样 ， 置于 ５ ０ ｍＬ的烧 杯 中 ， 加１ ０ ｍＬ饱和硼 砂溶 液， 搅拌均 匀 ， 以７ ０ 。 Ｃ左右 的水约５ ０ ｍＬ， 将试样洗 人 １ ０ ０ ｍＬ 容量瓶 ， 于７ ０ 。 Ｃ中加 热３ ０ ａｉ ｒ ｎ， 取出至冷水 浴 中 冷却 ， 并放 置至 室温 。 在震 荡上述提 取液时 ， 加人５ ｍＬ 亚铁 氰化钾溶 液 ， 摇匀 ， 再加入 ５ ｍＬ乙酸锌溶 液 ， 沉 淀蛋 白质 ， 再 加入 １ ｇ 活性 炭 ， 除去 抗坏 血酸 。 加水 定容 至 刻度 ， 摇匀 ， 放 置 ３ ０ ａｉ ｒ ｎ， 除去上层 脂肪 ， 上层 清液 用滤纸 过滤 ， 并 弃去 ３ ０ ｍＬ 初滤液 ， 滤液备 用 。 吸取 ４ ０ ｍＬ 上述滤 液于５ ０ ｍＬ 带塞 比色管 中 ， 试样 管 中分 别 加入 ２ ｍＬ对 氨基 苯 磺 酸溶 液 ， 混匀 ， 放 置３— ５ ａｍ， ｒ 加入 ｌ ｍＬ 盐酸萘 乙二胺溶液 ， 加水至刻度 ， 混匀 ， 静置 １ ５ ｍｉ ｎ ｔ ， 用２ ｃ ｍ比色 皿 ， 以零管 调节零 点 ， 于波 长 ５ ３ ８ ￣ ｔ ， 】 处 测吸光度 。 若 吸光度 过大 ， 用稀释 方法 ， 直 至
食品中亚硝酸盐的测定
食品中亚硝酸盐的测定分光光度法1、提取：称取5g（精确至0.01g）制成匀浆的试样置于50ml烧杯中，加12.5饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300ml将试样洗入500 ml容量瓶中，于沸水浴加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。
2、提取液净化：在振荡上述提取液时加入5ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5ml乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。
加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30ml，滤液备用。
3、测定：吸取上述40.0ml上述滤液于50ml带塞比色管中，另取0.00 ml，0.20 ml，O.40 ml，0.60 ml，0.80 ml，1.00 ml，1.50 ml，2.00 ml，2.50 ml亚硝酸钠标准使用液分别置于50 ml带塞比色管中。
于标准管与试样管中分别加入 2 ml对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5min后各加入 1 ml盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，摇匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。
同时做试剂空白。
4、计算：式中：X：—试样中亚硝酸钠的含量(mg/Kg)A：—测定用样液中亚硝酸钠的质量（μg）m：—试样质量（g）V2：—测定用样液体积（ml）V1：—试样处理液总体积（ml）结果保留两位有效数字。
此方法的最低检出限为1mg/kgx =A×1000m× V2/ V1×1000食品中亚硫酸盐盐酸副玫瑰苯胺法1试剂1.1 四氯汞钠吸收液：称取13.6g氯化高汞及6.0g氯化钠，溶于水中并稀释至1000mL，放置过夜，过滤后备用。
1.2 氨基磺酸铵溶液(12g/L)。
1.3 甲醛溶液(2g/L)：吸取0.55mL无聚合沉淀的甲醛(36%)，加水稀释至100mL，混匀。
1.4 淀粉指示液：称取1g可溶性淀粉，用少许水调成糊状，缓缓倾入100mL沸水中，随加随搅拌，煮沸，放冷备用，此溶液临用时现配。
蔬菜中硝酸盐含量的测定
NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处，NP3-、NO2-具有等吸收特征。 测定结果为 NO3-和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中 NO2-，从而从总 和中扣除。由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2找出等吸收波长，再进行测定。
关键词：蔬菜; 硝酸盐; 紫外分光光度法 前言：蔬菜( 尤其叶菜类) 是一种容易累积硝酸盐的作物，硝酸 盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。由于当前我国蔬 菜在种植过程中化肥过量施用,而且有些蔬菜生产者采用工业废水和 生活污水浇地,造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高,已证明,硝酸盐在人 体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐,它可与人体血红蛋白 作用, 使之失去载氧功能,造成高铁血红蛋白症, 长期摄入硝酸盐会 造成智力迟钝等危害[ 1]。因此,蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚 硝酸盐对人体潜在危害的一个指标[ 2]。 蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多，如镉柱还原分光光度法、 离 子色谱法。其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国 家标准方法, 但由于干扰因素多，操作步骤过于繁琐，很难满足批量 常规分析之需要，而其它几种方法则需要精密仪器， 测定条件较为 严格，不适宜作常规监测分析[3]。本实验采用操作简单、准确度高 的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。
0.2664
0.8943
0.5871
1.9639
小瓜
0.3476
0.4843 1.1653
1.6211 354.91
0.5182
1.7342
0.2270
0.7631
土豆
0.1497
0.1495 0.5052
0.6546 68.43
实验七 蔬菜中硝酸盐含量的测定(紫外分光光度法)
实验七蔬菜中硝酸盐含量的测定（紫外分光光度法）1、实验目的掌握蔬菜中硝酸盐的测定原理，熟悉取样方法、样品的处理、测定和仪器的使用方法，了解各种试剂的配制方法。
2、实验原理用pH9.6～9.7的氨缓冲液提取样品中硝酸根离子，同时加活性炭去除色素类，加沉淀剂去除蛋白质及其他干扰物质，利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区219nm处具有等吸收波长的特性，测定提取液的吸光度，其测得结果为硝酸盐和亚硝酸盐吸光度的总体，鉴于新鲜蔬菜、水果中亚硝酸盐含量甚微，可忽略不计。
测定结果为硝酸盐的吸光度，可从标准曲线上查得相应的质量浓度，计算样品中硝酸盐的含量。
3、仪器与试剂3.1 仪器（1）紫外分光光度计（2）分析天平：感量0.01g，0.0001g。
（3）研钵（4）可调式往返震荡机（5）pH计3.2 试剂（1）盐酸。
（2）氢氧化铵。
（3）氨缓冲溶液（pH9.6～9.7）：量取20ml盐酸，加到500nl水中，混合后加入50ml氢氧化铵，用水定容至1000ml。
用精密pH计调pH到9.6～9.7。
（4）活性炭（粉末）。
（5）正辛醇。
（6）亚铁氰化钾溶液{ω[K4Fe(CN)6.3H2O]=15%}：称取150g亚铁氰化钾溶于水，定容至1000ml。
（7）硫酸锌溶液[ω(ZnSO4)=30%]：称取300g硫酸锌溶于水，定容至1000ml。
（8）硝酸盐标准溶液：称取0.2039g经110±5℃烘干至恒重的硝酸钾（优级纯），用水溶解，定容至250ml。
此溶液硝酸根质量浓度为500mg/L，于冰箱内保存。
4、实验步骤4.1 取样选取一定数量的生菜，先用自来水冲洗，再用蒸馏水清洗干净，用吸水纸吸干表面水分，剪碎后充分混匀，称取5.0g于研钵中充分捣碎。
4.2 提取将匀成浆后的样品少量多次共20ml水洗净研钵，将样品全部转移到50ml容量瓶中，加1滴正辛醇消除泡沫，再加入3ml氨缓冲溶液，0.5g粉末状活性炭。
放置于可调式往返振荡机上（200次/min）振荡30min，加入亚铁氰化钾溶液和硫酸锌溶液各1ml，充分混合，加水定容至100ml，充分摇匀，放置5min，用定量滤纸过滤。
紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量的不确定度评定
（ Ｌ 液 ）００ ３√ ： ．０ ７ 移 管＝ ．０ ／ ３ Ｏ０ １ ，计算 得 出 ｌ
Ｕ ｅ （ ２ Ｌ ０． Ｉ ｏ ） ｍ ００８５ Ｕｒ （ ｍ ） Ｏ． ｅ ｏ Ｌ ｌ ４ ００４２ Ｕ ｅ （ ｍ ） ｒｌ ０ Ｌ ６ ００ ２ ｒ ㈣ ｍ ）＝０．０２１Ｕ （ｏ Ｌ ０ ０ ７ ．０ ８Ｕｅ ｌ Ｌ ０ Ｉ１ ｍ ）＝ ．０１ ；
的测定 紫外分光光度法》 对蔬菜样品进行清洗、 粉 碎与制备 ，并配制所需试剂。
１ ． 提 取 与 测 定 ．２ ３
笔者根据 Ｊ ５ — １９ 《 Ｊ １ ９ ９９（ Ｆ０ 测定不确定度评定与标 示 中的有 关规 定 ，以硝 酸盐 为例 。建立 紫外 分光
光 度 法 测定 硝 酸 盐 含 量 的 不确 定度 计 算 模 型 ，对
到 ５ ｍＬ容量 瓶 中，定容 ，得 到浓度为 ０ ．、４０ ０ 、２ ０ ．、
６ 、８ 、ａ． ｇ ｆ ． ． ０ ￣ ｉ ０ ０ ０ ｍ 酸钾工作液。查移液管、容量瓶 的检定证书 ，得 出以下 兀 ． 个不确定度 ：
将 上述 不确 定度 分量 合成 得 ：
ｕ ＝ （ｏ Ｃ ０ １７ ＋ ． ２３ ＋ ． ６ ００ ２ ￣ ， ＵＣ ／ｏ ． ０ ０ ０２ ０ ０１ ＝ ．１ ５ ￣ ） ＝４ ０ ０ ０
量轻 且基 质保 水保 肥能 力强 ，适 宜 长途运 输 ，成苗 率高 ，定植 后不 伤根 ，无缓 苗期 ，抗逆 性强 ，是近 几年 来 出现 的一项 先进 技术 ，具有 显著 的节 本增 效
室进行 了一系列设施改造 ， 并在改造温室 中进行常 规育苗试验 。 试验结果表 明， 改造后的温室增温、 保
体积 ； 为 吸取滤 液体 积；’为 待测 液定 容体 积； ／ ３ ｍ 为样 品质 量 。
分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析
分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析目的：探讨肉制品中亚硝酸盐的测试方法。
方法：采用分光光度法，对肉制品中亚硝酸盐进行测试。
结果：检出限其检测限为 3.68x10-3g/ml。
结论：测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一，分光光度法是其测定的行之有效的方法。
标签：分光光度法；亚硝酸盐；肉制品；分析亚硝酸盐(N023作为食品防腐剂和发色剂，能改善食品的色泽和口感，有发色、防腐双重功效，是国家列入允许使用的食品添加剂之一。
但亚硝酸盐能与胺类化合物作用生成致癌性很强的N-亚硝基化合物，长期摄入可导致消化道癌症，影响人体健康。
还可使血红蛋白变性，使其失去携氧功能。
尽管亚硝酸盐对人体不利，但目前无更好的物质所替代，所以仍在使用。
作为防范亚硝酸盐危害，向消费者提供安全食品的最后屏障，测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一。
目前关于亚硝酸盐测量较好的方法有导数紫外光度法，离子色谱紫外光度法，气体分子吸收光度法等。
利用重氮化反应测定NO，由于测定时多使用如Ot-萘胺和N-(1一萘基)乙二胺等毒性很大的试剂，且线性范围窄(0-0.2 mg／L)，所用试剂较复杂，不宜用于肉制品的测定；氧化还原光度法也因干扰因素较多不常被使用。
为此，尝试探索一种既不会对测定人员身体造成伤害，又保证较高灵敏度且适用于此样品的简易快速测定的方法，十分必要。
本法采用分光光度法来测定肉制品中亚硝酸盐含量，收到良好效果，现将结果报道如下：1材料与方法1.1材料试验仪器为WFZ800-D分光光度计，分析天平、组织捣碎机。
试验药剂为亚硝酸钠标准溶液(0.5g／L)、依文思蓝但vansBlue，Fluka试剂，进口分装)溶液0.1 mol／L、磷酸1.0mol／L、氯化钠溶液l mol／L、蒸馏水(二蒸液)。
试验药品均为分析纯。
1.2方法1.2.1样品制备①亚硝酸钠标准溶液(0.5g/L)：准确称取亚硝酸钠粉末0500 0 g于烧杯中，加少量水溶解后，转入1000 ml容量瓶中，用水稀释至刻度定容，瓶身用黑纸包裹。
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分光光度法检测食品中的硝酸盐
1.分光光度法：
分光光度法主要有三种：可见分光光度法、紫外分光光度法、红外光谱法。
分光光度法设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观，在硝酸盐和亚硝酸盐的测定中一直占据有十分重要的地位。
但在复杂介质中测定时易受样品本身颜色影响，所以样品前处理十分重要。
1.1 可见光分光光度法.
1.1.1镉柱法还原法.
这是我国食品安全国家标准（GB 500933-2010）[1]中检测硝酸盐的方法，样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,使用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，于波长538nm出测定吸光度，测得亚硝酸盐总量，由此总量减去不加锌粒测得的亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。
刘烨等【4】研究发现当镉柱高度为5cm，氨缓冲液PH9.15~9.78，水洗脱液是镉柱容积的2~3倍时，活化速度加快，还原效率及回收率都较高。
针对该检测方法的样品预处理过程复杂、耗时长等问题，项锦欣[2]等改用天然高分子絮凝剂W-3 取代原有蛋白质沉淀剂——亚铁氰化钾和乙酸锌，不但节省试剂，且显著缩短处理时间。
陈秋生[3]等人实验比较后发现用超声提取蔬菜中的硝酸盐，具有简单、高效、回收率高的优点。
由于本法所用试剂为毒性很大的强致癌试剂，对环境和分析人员可能会造成危害，因此, 选择新的重氮化试剂和偶联试剂以降低试剂的毒性是许多环境工作者研究的课题。
1.1.2锌粒还原法.
用锌粒做还原剂，在银离子催化下将食品中的硝酸盐还原成亚硝酸盐,再按国标格里斯试剂法进行检测。
之所以用锌粒不用锌粉，是因为用锌粉的还原液较浑浊，周峰[4]用20 目~ 30 目的金属锌粒代替锌粉, 还原液不产生混浊且易过滤，同时实验结果几近一致。
肖义夫[5]实验室应用锌粒还原法对各类食品样品(包括乳及乳制品,肉及肉制品等) 中的硝酸盐进行了测定,平均回收率为94.0 % , RSD 低于5 %。
认为该法重现性好, 准确度高,利于环保,其突出优点还有省时,从取样到出结果不超过2 h。
1.1.3直接显色法.
硝酸盐也可以不经还原，直接与显色剂反应。
王亮等[6]利用酚二磺酸与硝酸根离子在无水的条件下生成黄色的硝基酚二磺酸，在403nm的波长下测定吸光度，获得了较满意的结果。
冯颖等[7]依据硝酸盐与二苯胺在浓硫酸介质中反应生成蓝色物质的原理，根据显色深浅与标准色卡进行比较，从而确定样品中硝酸盐的含量。
梁金平等[8]采用百里酚作显色剂测肉类食品中硝酸盐，此法最低检出限为1.25μg/25ml，在1.25-0.25μg/ml内线性关系良好（r=0.9999，P<0.001）,直线回归方程为y=0.048469X+0.000002，该方法的回收率良好。
显色法灵敏度高、准确度高，操作较为简便。
1.1.4流动注射-分光光度法.
将流动注射技术与分光光度法结合，使操作更加简便快捷，极大的提高了工作效率，尤其适合大批量的样品分析。
Andradea[9]等人在2003年利用此方法同时测定了蔬菜中的亚硝酸盐和硝酸盐。
其原理为：首先将NO3-还原成NO2-，NO2-在硫酸介质中还原成NO。
NO在酸性条件下与铁（Ⅱ）、硫氰酸盐生成FeSCNNO+复合物，在460nm处的吸光度值与NO3-和NO2-的浓度成正比。
该方法可以测定的硝酸盐浓度范围为1.00一10.00 mg／L,检测限为13mg/kg，精确性和准确性与AOAC方法相当。
当样品量为5 g时，每小时可分析30～40个样品。
国内对流动注射法的研究也越来越多，河海大学的孙西燕[10]等人设计了亚硝酸盐流动注射自动在线监测仪,并研究了仪器的最佳测量条件。
用此流动注射全自动在线检测仪测定天然水
中的NO2-含量, 测定结果与国标法手动测量结果基本一致，线性范围为10～1200μg/L,目前已成功用于环境水体中亚硝酸根的监测。
1.2 紫外光谱法
紫外法是我国农业行业中测定蔬菜水果中的硝酸盐含量的标准方法[11]，其原理是用pH9.6～9.7的氨缓冲液提取样品中硝酸根离子，同时加活性炭去除色素类，加沉淀剂去除蛋白质及其他干扰物质,利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区219nm处具有等吸收波长的特性，测定提取液的吸光度，其测得结果为硝酸盐和亚硝酸盐吸光度的总和，鉴于新鲜蔬菜、水果中亚硝酸盐含量甚微，可忽略不计。
测定结果为硝酸盐的吸光度，可从工作曲线上查得相应的质量浓度，计算样品中硝酸盐的含量。
本方法检出限为1.2mg/kg,线性范围为2.00mg/kg～12.00mg/kg。
罗雪华[12]等改进了上述标准法，采用双波长紫外分光光度法，同时测定硝酸根离子在220nm 和275nm的吸光度，以两者之差作为NO3-的吸光度，排除了叶绿素等有机物质的干扰。
在样品液的制备时，冷家峰[13]等在弱碱性氯化铵缓冲溶液中用振荡法提取硝酸盐, 魏珂萍[14]对这两种提取方法比较后发现，震荡法和沸水浴法的精密度和准确度均符合试验要求。
紫外分光法分析成本较低、操作简单、精密度好、灵敏度高，但由于有机物在220nm也有吸收，对紫外法有一定干扰。
1.3 红外光谱法
王多加等利用Nicolet 670N FT-IR 傅里叶变换近红外光谱仪，带有I n G a A s监测器，用漫反射方法采集吸收光谱，波数范围 10000～4000cm-1。
以生菜[15]、小白菜[16]为实验样品，处理后采用漫反射的方法采集吸收光谱。
图谱的扫描条件为: 扫描次数32 次, 分辨率8 cm- 1。
原始光谱图用二阶导数预处理, 用最小偏二乘法进行统计分析。
多组实验表明近红外法的相关系数在0.98以上，相对误差多在4%以内, 个别样品超过6%。
虽然近红外光谱法较常规化学分析法( 3%以内) 的误差稍大，灵敏度较低，而且由于设备昂贵，目前应用范围较小。
但考虑到样品不需任何处理,不消耗任何材料和试剂, 操作快速简便，仅需1min 就能检测1 个样品, 其准确度也能够满足现场检测的实际需要, 仍有很好的应用前景。
参考文献：
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