如何分析血细胞三分类直方图
血常规直方图解析
1. PL：低鉴别线（LD）处相对度数超过设定值。提 示存在电子噪声、冷凝蛋白、破碎红细胞、白血病 性白细胞碎片等的干扰。
2. PU：高鉴别线（UD）处相对度数超过设定值。提 示存在电子噪声、冷凝蛋白、破碎红细胞、小红细胞、
大血小板、血小板聚集等的干扰。 DW：设峰值高度为100％时，20％度数处的粒度分 布宽度异常。提示有破碎红细胞、血小板大小不均、
外抗凝剂的种类和浓度也会影响细胞直方图，通常应选用 EDTA-K２，1.5-2.0mg抗凝剂抗凝1.0ml全血。
（c）样本放置时间：一般认为样本应在采集后20分钟至二 个小时内检测。若放置时间过短，可能存在血小板没有完全 解离、抗凝剂未完全溶解等情况。若放置时间过长，则易引 起细胞的变形，尤其是一些免疫功能亢进的病人，其淋巴细
大小分布情况图形，称之为细胞体积直方图。
血细胞分析仪在进行细胞分析时，将每个细胞的脉冲根 据其体积大小分配并存储在相应的体积通道中，每个通道 收集的数据被统计出相对数，表示在Y轴上，体积数据以
飞升(fl)为单位，表示在X轴上。可将白细胞体积从30～ 450fl分为256个通道，每个通道1.64fl，依据体积大小分 别将其放在不同的通道中，得到白细胞体积分布直方图。 初步确认：第一群是小细胞区，主要是淋巴细胞，体积在 35～90fl之间；第二群是中间细胞群，主要是单核细胞， 体积在90～160fl，；第三群为大细胞区，主要是中性粒
为大红细胞和网织红细胞。
（二）分类规则：在红细胞直方图上，依据细胞的大小，按以下的规则分类： • （1）位于红细胞低鉴别位线（RL）和红细胞高鉴别位线(RU)之间的细胞为
红细胞。 • （2）红细胞低鉴别位线（RL）为血小板及红细胞的分界线。如果存在小红
细胞、大红细胞、血小板簇，可以根据红细胞直方图的改变检测出来。 • （3）超过高鉴别位线（RU）为存在红细胞聚集。
血细胞直方图
正常红细胞直方图（2-1）
% 两侧对称、正态分布曲线
100
200
300
400
红细胞左移、右移直方图（2-3）
紫红色虚线为正常红细胞直方图
%
蓝色曲线为红细胞左移直方图 黑色曲线为红细胞右移直方图
100
200
300
400
红细胞直方图与参数关系
35 90
160
300
450
中间细胞增高白细胞直方图（1-6/7）
% 淋巴细胞群
单核细胞群
中性粒细胞群 虚线为正常白细胞曲线
35 90
160
300
450
急性白血病直方图
白血病细胞在某一区域出高大细胞峰，同时仪器报警。 白细胞总数明显增高，必须指出，不同类型的白血病可 出现相似的直方图，同一标本在不同的仪器分析，其直方图也 有所差异。 患者出现白血病共性特征时须骨髓细胞学明确诊断。 （图1-8和1-9）
正常白细胞三分类直方图（1-1）
小细胞群 %
大细胞群
中间细胞群
35 90
160
300
450
白细胞直方图与临床应用
白细胞直方图的变化，可评价血液中 白细胞群体的变化，但这种变化的细胞图 并无特异性，某一类白细胞的增多或减低 均可使直方图产生相似的变化。
因此，异常白细胞直方图（如图：14~1-16）只能提示白细胞分群之间比例 变化或可能出现异常白细胞，故必要时可 用显微镜复查血涂片（外周血细胞学分 析）。
红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC） =每升血液中血红蛋白含量÷每升血液中血细胞比容
红细胞体积分布宽度（RDW）
RDW是一个较新的红细胞参数，由血液分析仪根据红细 胞体积的直方图导出，反映所测标本中红细胞体积大小的异质程 度，常用变异系数（CV）表示。
血细胞直方图
血细胞直方图血细胞直方图是一种描述人体血液中各类细胞数量的图形表达方式，通过图表的形式展示了不同细胞类型的百分比和绝对计数。
它是血液分析的一项重要工具，可以帮助医生快速了解患者的血液情况，从而用于诊断和治疗方案的制定。
一、背景介绍血液是人体重要的生命物质之一，由红细胞、白细胞和血小板组成。
每种细胞的数量和比例与人体健康状况息息相关。
血液检验是临床医学中最常用的检查方法之一，而血细胞直方图则是其中的重要一环。
二、血细胞直方图的类型血细胞直方图通常分为三类，分别是红细胞计数直方图、白细胞计数直方图和血小板计数直方图。
不同的直方图反映了人体各类细胞的分布情况和数量变化。
1. 红细胞计数直方图红细胞计数直方图主要反映了人体血液中红细胞的数量和分布情况。
通过该直方图，可以准确了解血红细胞的平均体积、平均血红蛋白含量和平均血红蛋白浓度等指标，进而判断红细胞的正常与否。
2. 白细胞计数直方图白细胞计数直方图则描述了血细胞中白细胞的数量和分布情况。
不同类型的白细胞对应着不同的免疫功能，通过该直方图可以判断白细胞的类型和数量，从而了解免疫系统的功能状态。
3. 血小板计数直方图血小板计数直方图是用来衡量血液中血小板数量和分布情况的指标。
血小板在人体中起着血液凝固和止血功能，通过该直方图的分析可以了解到血小板的平均体积、大小分布和数量，从而评估血液止血功能的强弱。
三、血细胞直方图的应用血细胞直方图的应用在医学领域非常广泛，主要用于以下方面：1. 诊断疾病血细胞直方图是常用的疾病诊断工具之一，可以通过分析各类细胞的数量和分布情况，识别出不同的疾病类型。
例如，红细胞计数直方图异常常见于贫血、缺铁性贫血等疾病，白细胞计数直方图异常则可能表明感染、免疫系统疾病等。
2. 治疗监测血细胞直方图也可用于治疗效果的评估和监测。
通过定期检测血细胞直方图的变化，可以判断治疗措施的有效性，并及时调整治疗方案。
3. 健康管理血细胞直方图可以作为健康管理的参考指标之一。
血细胞分析
八 一
血涂片镜检：异淋7%
解放军总医院 临床检验科
八 一
血涂片镜检：中晚粒4%
解放军总医院 临床检验科
Blast
RBC ghost
DC
4. RET-散点图
Forward Scatter(Volume)
RBC-O
LFR
MFR
HFR
WBC
IRF
RET
PLT
Fluorescence(RNA)
八 一
解放军总医院 临床检验科
八 一
解放军总医院 临床检验科
八 一
血涂片镜检：淋巴69%
解放军总医院 临床检验科
随红细胞在一个系统中进行检测。 正常血小板直方图呈左偏态分布：2～30fl 分布，主要在2～15fl。
%
10
20
30(fl)
八 一
八 一
二、血细胞散点图
XE-2100 检测原理
参数 WBC, BASO 通道 WBC/Baso - ch 原理
NEUT, LYMPH, MONO, EO Diff - ch
FCM+半导体激光
NRBC NRBC - ch RET - ch RBC/PLT - ch HGB - ch 鞘流原理 SLS-Hb RF-DC
RET, IRF, PLT-O(RNA)
RBC, HCT, PLT HGB HPC
IMI - ch
流式细胞
激光波长: 633nm
鞘流
半导体激光
CELLPACK
血细胞分析
山东省立医院检验科
王盛华
主要内容
直方图
散点图
• 你会审核血常规报告吗？
• 你知道血常规复检标准是什么吗？
怎么看白细胞直方图？
怎么看白细胞直方图？白细胞直方图看过了红细胞和血小板直方图，不要忘了还有白细胞。
白细胞正常三分类体积分布直方图血液经溶血剂处理后,白细胞失水皱缩,各群细胞间体积差异增大。
血细胞检验仪器中计算机根据其体积大小把白细胞分成3个群。
在白细胞体积分布直方图上(图1),表现为3个区或峰,即淋巴细胞峰、中间细胞峰和颗粒细胞峰,叫白细胞三分类法。
但不同型号的血液检验仪,以及不同目、科、种动物之间,其白细胞体积分布直方图图形不完全相同。
白细胞体积分布直方图的三分类细胞检验,反映的是三类白细胞各占的百分数和其绝对值。
直方图的纵轴(n)表示细胞数的多少,横轴[volume (fL)]表示细胞体积大小。
展开剩余83%图1 白细胞正常三分类体积分布直方图01淋巴细胞峰(Lymph)淋巴细胞峰(Lymph)是直方图上的左峰,反映的细胞体积为35～90fL,主要是淋巴细胞,还有有核红细胞和成堆的血小板等。
参考值:其绝对值和百分比,分别为犬1.2×10^9 ～5.0×10^9/L 和12.0%～30.0%;猫1.8×10^9～7.0×10^9/L和20%～50%。
02中间细胞峰(Midcells)中间细胞峰(Midcells) 在直方图淋巴细胞峰和颗粒细胞峰之间,反映的细胞体积为70～110fL。
主要是单核细胞,还有大淋巴细胞,可能还有异型淋巴细胞和原细胞(Blasts)。
参考值:其绝对值和百分比,分别为犬0.3×10^9 ～1.0×10^9/L 和5.0%～20.0%;猫0.2×10^9～2.3×10^9/L和0～16%。
03颗粒细胞峰(Gran)颗粒细胞峰(Gran) 是直方图上的右峰,反映的细胞体积为80～200fL,主要是中性粒细胞。
另外,还有晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞、原细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等。
参考值:其绝对值和百分比分别为犬3.5×10^9 ～12.0×10^9/L 和60.0%～80.0%;猫2.8×10^9～13.0×10^9/L和35.0%～78.0%。
血细胞直方图解析
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5
细胞的原始大小
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6
白细胞直方图
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7
二.白细胞分类原理
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8
（一）辨别线的设置
LD：在30至60fL之间自动寻找最适位置。 UD：固定在300fL 。 T1： 自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波
谷，第一波谷值设为辨别线1。 T2：自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波
胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞增高，
红细胞溶血不全，标本放置时间过
精长选2等02情1版况课件。
22
T1高，T2高
警号F3表示T2鉴别线位置上相对度数超过预定值。常见于 存在原始细胞、幼稚粒细胞，单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性 细胞增高，红细胞溶血不全，标本放置时间过长等情况。
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23
T2高
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11
2.监视白细胞粒度分布,提供异常分布信息 白细胞粒度分布正常时，白细胞直方图显示
三峰性分布，在LD与UD之间有两个谷值 （T1）和（T2）。
当谷值辨别线不能设定，或在设定的辨别线 位置的度数比规定值高时，将标有白细胞粒 度分布异常警号。
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白细胞粒度分布异常警号
3
1.电阻抗原理
根据血细胞是非导电的性质，悬浮在电 解质溶液中的血细胞颗粒，在通过检测 小孔时可引起电阻的变化为基础，对血 细胞进行计数和体积测量。
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4
2.直方图定义
以血细胞体积大小为横座标，不同体积的 细胞出现的相对频率为纵座标，来描绘细 胞群体分布情况的曲线图形称作血细胞直 方图。
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解析血细胞分析仪直方图
解析血细胞分析仪直方图有些自动血细胞分析仪的报告单附带有细胞直方图，那么这些图有什么用，能提供什么临床的信息呢？在国内，大多数医师都不甚了了，一般都不看的，也看不懂。
在以前人工做的时代，在报告RBC、WBC、PLT、Hb等参数的时代，还附带了诸如：RBC 大小、分布等等形态学的报告，但进入自动化时代这些形态学的报告就不再出现在报告中了，因此许多医生很不习惯，总是要求做手工，但实际上在目前几乎所有的报告中都能出关于血细胞的一些形态特征，而细胞直方图就是其中的一种报告方式。
怎样解读细胞直方图呢？首先，我们要知道什么是直方图。
直方图是统计学上常用的来表示样本各组在成分布的一种直观的图表。
如图1所示：X轴表示体积单位，Y轴表示个数（即统计学的频数），柱条表示在某个体积段内的物体个数。
当我们将体积段无限细分下去方块图就会变成曲线图，如同我们的报告单上的一样。
图2＿S1表示的是常见血细胞分析仪的红细胞直方图：曲线的每个点对应的坐标（X，Y）表示X体积的红细胞有Y个，而曲线与X轴围成的范围表示的是红细胞的总数（对于数学模型而言，就是曲线的定积分）。
图中显示了两个峰，A峰体积小，峰值也小是PLT（血小板）峰，B峰体积较在，峰值高，显示RBC（红细胞）峰。
而A、B峰的面积显示了RBC和PLT的总量，峰值的X坐标显示了RBC和PLT体积大小，峰宽显示了RBC和PLT体积的极差（极差可不是特别差^O^,而是统计学中常用来表示离散程度的指标，即一组观察值中，最大值和最小值之差）。
峰的面积越大表示总量越多，峰越宽表示体积大小差异越大，即大小分布不均。
曲线向左移（如S2），即表示，RBC和PLT的体积较小，曲线向右移，即表示，RBC和PLT的体积较大。
因此通过红细胞分布直方图，再结合Hb、MCH、MCVH等指标就能知道，是不是贫血，是大细胞正色素性贫血（缺铁？），还是小细胞低色素性贫血（缺叶酸？）、以及大小分布状况（地海贫？）等临床诊治信息。
血细胞直方图
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（四）质量控制
1.充分了解仪器的原理,操作规程.掌握仪器的 维护.
2.在日常工作中作好仪器的校正,尽量用静脉抗 凝血,
3.原则上使用原仪器的配套试剂,测试时应注意 试剂温度对结果的影响.
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（二）红细胞直方图
正常红细胞直方图 红细胞直方图有两个细胞群体，从60fl开始到120fl之间有 一个几乎两侧对称，较为狭窄的正态分布曲线，即红细胞主群；主群右侧， 约分布在120～200fl区域有一个小细胞群，又称“足趾部”，此群含有大红 细胞、二聚体或三聚体细胞等。
血细胞直方图
杨献明 2010.10.20
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白细胞、红细胞、血小板直方图
血细胞分析仪在进行细胞分析时，将每个细胞 的脉冲数据根据其体积大小分类并储存在相应的 体积通道中，每个通道收集的数据被统计出相对 数量表示在“Y”轴上，体积数据以fl为单位表示在 “X”轴上，即得到细胞直方图。
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中性粒细胞增高。 （2）左侧小细胞波峰相对增高，而右侧大细胞波峰明显变低。提示淋
巴细胞增高。 （3）在90～160fl区域出现一个明显的细胞峰。提示中间细胞增多，
可有单核细胞嗜酸性粒细胞及各种幼稚细胞增多等。 临床应用时需注意白细胞直方图的图形变化并无特异性，由于细胞体
积之间有交叉，同一群中可以包括多种细胞，其中任何一种细胞增多， 均可使直方图产生相似的变。必须时需要进一步作血图片显微镜检查化。
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Байду номын сангаас
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如何分析血细胞三分类直方图
南宁市第二人民医院检验科马升俊
血细胞分析仪在测定白细胞、红细胞和血小板的多数数据的同时，把它们的体积大小、出现的相对频率以坐标式的曲线图表示出来，形成了血细胞直方图。
血细胞直方图不仅能提供细胞相对频率信息和他们的分布状态，还可以与临床上其它检查数据结合进行分析。
三分类仪器的血细胞直方图通常有白细胞直方图、红细胞直方图和血小板直方图三种。
一．白细胞直方图
血液分析仪对有关白细胞数据的测定，通常是在加入溶血剂后，溶血剂在溶解红细胞的同时也使白细胞膜穿孔，使白细胞失水皱缩，再根据皱缩后的白细胞膜及白细胞核在体积上大小的不同，其在通过计数孔时所表现出的阻抗大小不同来区分。
三分类仪器可把白细胞分为大、中、小白细胞，大白细胞代表中性粒细胞，小白细胞代表淋巴细胞，中白细胞则包括嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞等。
一般情况下，正常人白细胞
在直方图上分布位置如下：淋巴细胞在30―100fl，嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞在100―150fl，而中性粒细胞分布在150―300fl之间。
直方图坐标横轴（X轴）表示白细胞的体积大小，以飞升（fl）为单位，纵轴（Y轴）表示在一定范围的白细胞数量，即不同体积白细胞的相对频率（百分率）。
因此，正常的三分类白细胞直方图是一条有三个波峰的曲线。
通常白细胞直方图是我们判断是否要进行显微镜复检的主要指标之一。
比如在一些白血病人的白细胞直方图中，由于出现了早期幼稚细胞，往往会看到该种类白细胞的峰值会向左或向右推移，而且加阔了该种类白细胞的分布宽度。
因此，把它与其它的血液参数、各种检查结果和临床表现结合分析可对白血病的诊断有所提示。
当然，这只是提供了一个参考数据，任何血细胞分析仪所提供的白细胞直方图对血液病诊断都只能作过筛作用，还是不能代替传统的显微镜检查的。
二．红细胞直方图
红细胞直方图是反映红细胞大小或任何相当于红
细胞大小范围内的粒子的分布图。
该图坐标的横轴表示仪器所设立的红细胞通道排列范围，可看作是细胞体积的大小，纵轴表示在一定范围的红细胞数量，即体积大小不同的红细胞相对频率。
由于红细胞直方图是一正态分布图，故图的峰（也就是中值）是表示一定数量红细胞体积的平均值，与红细胞平均体积（MCV）基本一致。
正常人的峰值一般在80―100fl范围。
如果峰值左移，小于80fl，可提示为小红细胞，反之，峰值右移，超出100fl则提示为大红细胞。
其实在血细胞三个直方图中，红细胞直方图提供的信息是最有用的，它可以初步判断贫血的种类，还可以对贫血病人的治疗进展进行观测。
比如，缺铁性贫血的病人，是属于小细胞低色素性贫血，其红细胞平均体积（MCV）值小于正常，而红细胞分布宽度（RDW）则增大，在红细胞直方图上可见到其峰左移，而且曲线的底部明显加宽。
而在治疗过程中，如果出现红细胞直方图上有两个峰值，呈右移现象，红细胞体积也增大，则说明治疗有了好转。
而在治疗好后，红细胞直方图的峰值则应该回到正常范围，是一条正常的
曲线图。
三．血小板直方图
血小板直方图是反映血小板体积大小分布的一个曲线图。
血液中血小板体积大小呈偏态分布，所以直方图是一个主峰向右逐渐下降的拟合曲线。
坐标的横轴表示血小板体积的大小，以飞升（fl）为单位，纵轴表示在一定范围内的血小板数量，也就是体积不同的血小板相对频率（百分率）。
一般血液分析仪能把2―30fl的血小板或相当于这个范围大小的粒子检测出来。
正常人血小板直方图的主峰常在6―11.5fl之间。
如果主峰超出此范围，向右移表示血小板体积偏大，向左移则表示血上板体积偏小。
四．干扰的判断及镜检的重要性
细胞直方图既是给临床提供诊断参考数据，也是为操作人员提供对仪器工作状态和实验结果是否可信的监控。
我们一般都必须在仔细分析直方图后，确定是否要显微镜检查再发报告。
这一点在白细胞分类中尤为重要。
1．在白细胞直方图中，如果在直方图上35fl前出
现异常峰，则可能是一些血小板集团、有核红细胞、杂质颗粒等干扰分类的结果，这时侯可能导致白细胞总数和淋巴细胞出现部分假性增高。
而且三分类的血细胞计数仪只是根据皱缩后的白细胞在体积上的大小不同进行简单的分类，对一些嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、幼稚细胞等并不能区分出来，对一些异常改变的细胞更没法辩别。
因此，到目前为止仪器白细胞分类结果只作为过筛作用，对直方图有异常的结果仍要进行镜检复查，以减少漏诊或误诊的机率。
2．在红细胞直方图中，如果在直方图上30fl前有异常，则可能是一些大血小板、血小板集团、杂质颗粒等干扰造成的，这可能会使红细胞计数结果呈假性增高。
而且红细胞形态多种多样，红细胞形态的不同对贫血类型的区分尤其重要，这些都必须要通过涂片镜检才能区分。
3．在血细胞分析仪中，血小板计数结果最容易受到干扰。
很多原因都可引起血小板计数结果假性增高，比如：小红细胞性贫血患者的部分红细胞小于30fl时会干
扰血上板计数，导致血小板计数值偏高；溶血性贫血患者由于红细胞受到破坏，血中存在一定数量的红细胞碎片，这也是导致血小板计数结果偏高的原因之一；而一些杂质微粒也常引起血小板假性增高。
因此，如果血小板数明显增高，而血小板直方图中其曲线拉得较宽，即血小板分布宽度较大，则应该复查血小板。
而如果在抽血后血液未能及时与抗凝剂充分混匀，则易引起血小板聚集；而标本若放置时间太长则易产生巨大血小板，这些都可造成血小板数结果假性偏低。
因此，镜下复核血小板是否正确对保证血小板计数的质量很有必要。