分光光度计
可见分光光度计使用方法
可见分光光度计使用方法分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测定溶液中物质的浓度，其原理是利用光的吸收和透射特性来测定溶液中物质的浓度。
下面介绍可见分光光度计的使用方法。
一、仪器准备1.开启分光光度计电源，确保仪器处于工作状态。
2.打开分光光度计条纹盖，并将溶液架放置在样品室上方。
3.打开分光光度计软件，并连接至计算机。
二、调整仪器1.调整参考光路径a.点击软件界面上的“参考”按钮，将光杆放置在溶液架上的空槽中。
b.调节光杆高度，使其与溶液架平齐。
c.点击软件界面上的“参考”按钮，将光杆移至参考槽中，然后点击“参考”。
2.调整样品光路径a.点击软件界面上的“样品”按钮，将光杆放置在溶液架上的空槽中。
b.在参考槽中加入去离子水，并将光杆放置在参考槽中。
c.点击软件界面上的“样品”按钮，将光杆移至样品槽中。
三、测量样品1.设置波长a.在软件界面上的波长选择栏中选择所需测量的波长。
b.点击软件界面上的“确定”按钮，确认波长设置。
2.校准基准值a.点击软件界面上的“样品”按钮，将光杆放入样品槽中。
b.在样品槽中加入去离子水，并将光杆放入样品槽中。
c.点击软件界面上的“校正”按钮，校正基准值。
3.测量样品a.将待测样品加入样品槽中，确保溶液填满槽。
b.将光杆放入样品槽中，避免气泡影响测量。
c.点击软件界面上的“测量”按钮，开始测量样品。
四、数据处理1.记录吸光度值a.在测量完成后，软件界面上会显示吸光度测量值。
b.记录并保存测量结果。
2.绘制标准曲线a.准备一系列已知浓度的标准溶液。
b.依次测量这些标准溶液，并记录吸光度值。
c.利用已知浓度和相应吸光度值绘制标准曲线。
3.计算未知浓度a.测量未知样品的吸光度值。
b.根据标准曲线，找到相应吸光度值对应的浓度。
c.计算得到未知样品的浓度。
五、结束测量1.关闭分光光度计软件。
2.将光杆从样品槽中取出，并将样品架取下。
3.关闭分光光度计电源。
以上就是可见分光光度计的使用方法，希望能对您有所帮助。
分光光度计
基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，称为吸光光度法。
根据物质对不同波长范围的光的吸收，吸光光度法包括比色分析，可见与紫外分光光度法以及红外吸收光谱分析等。
包括比色分析和分光光度法的吸光光度法（简称光度法），历史悠久，应用十分广泛。
它是现代分析化学中的“ 常规武器” 。
其主要特点为：1 、灵敏度高：与滴定分析和重量法相比，光度法具有很高的灵敏度，测定物质的浓度下限（最低浓度）一般可达10-5～10-6 mol?L-1，相当于含量低于0.01 ～0.001 ％的微量组分。
2 、准确度较高：分光光度法的相对误差一般为2 ～5 ％，但对微量组分的测定是允许的。
例如测定试样中含量为0.02 ％的杂质，即使相对误差为±5 ％，则测定的结果为0.019 ～0.021 ％，这样的结果应该认为是很准确的。
3 、操作简便、快速、应用广泛：比色分析和分光光度法无需复杂，昂贵的仪器设备，操作也比较简便，分析速度快。
例如钢铁中Mn 、P 、Si 三元素的快速比色分析，一般在 3 －4min 内可报出结果。
几乎所有无机离子和许多有机化合物都可直接或间接地用光度法测定。
本章主要讨论比色分析和可见光区的吸光光度法。
1 物质对光的选择性吸收1.1 光的基本性质比色分析和分光光度法的依据是物质对光的选择性吸收。
为此，必须对光的基本性质有所了解。
我们知道，光是一种电磁辐射，具有波动性和微粒性。
光在传播时表现了它的波动性，例如光的折射、衍射、偏振和干涉等现象。
描述波动性的主要物理量是波长（λ ）、频率（ν ）和速度（с ），它们的关系是：λν ＝с式中с 为光速，在真空中约等于3×108 m ·s-1；ν 为光的频率，以Hz 表示；λ 为光的波长，在紫外和可见光区，以纳米（1nm=10-9 m ）为单位。
波长在400 ～760 nm 范围内的电磁辐射，人眼可以看见，称为可见光；波长在10 ～400 nm 是紫外光区。
分光光度计
分光光度计一．分光光度计基本结构简介能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。
分光光度计因使用的波长范围不同而分为紫外光区、可见光区、红外光区以及万用（全波段）分光光度计等。
无论哪一类分光光度计都由下列五部分组成，即光源、单色器、狭缝、样品池，检测器系统。
（1）光源要求能提供所需波长范围的连续光谱，稳定而有足够的强度。
常用的有白炽灯（钨比灯、卤钨灯等），气体放电灯（氢灯、氘灯及氙灯等），金属弧灯（各种汞灯）等多种。
钨灯和卤钨灯发射320－2000nm连续光谱，最适宜工作范围为360－1000nm，稳定性好，用作可见光分光光度计的光源。
氢灯和氘灯能发射150－400nm的紫外结，可用作紫外光区分光光度计的光源。
红外线光源则由纳恩斯特（Nernst）棒产生，此棒由ＺrＯ2:Ｙ2Ｏ3=17:3（Ｚr为锆，Ｙ为钇）或Ｙ2Ｏ3，ＧeＯ2（Ｇe为铈）及ＴhＯ2（Ｔh为钍）之混合物制成。
汞灯发射的不是连续光谱，能量绝大部分集中在253.6nm波长外，一般作波长校正用。
钨灯在出现灯管发黑时应及更换，如换用的灯型号不同，还需要调节灯座的位置的焦距。
氢粘及氘灯的灯管或窗口是石英的，且有固定的发射方向，安装时必须仔细校正接触灯管时应戴手套以防留下污迹。
（2）分光系统（单色器）单色器是指能从混合光波中分解出来所需单一波长光的装置，由棱镜或光栅构成。
用玻璃制成的棱镜色散力强，但只能在可见光区工作，石棱镜工作波长范围为185￣4000nm，在紫外区有较好的分辩力而且也适用于可见光区和近红外区。
棱镜的特点是波长越短，色散程度越好，越向长波一侧越差。
所以用棱镜的分光光度计，其波长刻度在紫外区可达到0.2nm，而在长波段只能达到5nm。
有的分光光系统是衍射光栅，即在石英或玻璃的表面上刻划许多平行线，刻线处不透光，于是通过光的干涉和衍射现象，较长的光波偏折的角度大，较短的光波偏折的角度小，因而形成光谱。
分光光度计
2.2.3 物质吸光度（A）与透射比（T）的关系 物质吸光度（ ）与透射比（ ）
为经过空白校正后入射光的强度； 为透过光的强度。 设 I0 为经过空白校正后入射光的强度；I 为透过光的强度。 根据实验得知 I = I0 ·10－εc l
式中， 表示吸收物质的摩尔浓度； 表示吸收物质的光径， 式中，c 表示吸收物质的摩尔浓度；l 表示吸收物质的光径， 表示； 表示吸收物质的摩尔消光系数 表示吸收物质的摩尔消光系数， 用 cm表示； ε表示吸收物质的摩尔消光系数， 它表示物质对光的 表示 吸收特性，不同物质的ε数值不同。 所以 数值不同。 吸收特性，不同物质的 数值不同 令 T（透射比） = I / I 0 （透射比） T = 10－εcl I / I0 = 10－εc l
检测器--检测器 光电倍增管
光电倍增管 它比普通的光 电管优越， 电管优越，它可将第一次发射出 的电子数目放大到数百万倍 。 当电子打在兼性阳极上时， 当电子打在兼性阳极上时，能引 起更多的电子自表面射出。 起更多的电子自表面射出。这些 射出的电子又被第二个兼性阳极 所吸引，同样再产生更多的电子。 所吸引，同样再产生更多的电子。
2.5 显色反应及其影响因素 显 色 反 应
显色 色 色反
显色反应
色
及
显色反应
其 影
显色
响 因 素
影响显色 反应因素
反应 反应 显色反应 影响 pH
2.5.1 显色反应一般要求
（1）选择性好：显色剂最好只与一种被测组分起显色反应； ）选择性好：显色剂最好只与一种被测组分起显色反应； （2）灵敏度高：灵敏度高有笪微量组分的测定； ）灵敏度高：灵敏度高有笪微量组分的测定； （3）有色化合物性质稳定：确保前后测定准确。 ）有色化合物性质稳定：确保前后测定准确。 （4）显色剂与有色物颜色反差大：两者最大吸收波长之差应 ）显色剂与有色物颜色反差大： 大于60nm； 大于 ； （5）显色反应要易于控制：结果的确保实验再现性。 ）显色反应要易于控制：结果的确保实验再现性。
可见光分光光度计原理
可见光分光光度计原理
可见光分光光度计是利用物质对光的吸收特性来测量物质的
组成、结构及性质的仪器，其特点是：具有光谱范围广、灵敏度高、快速、不损坏样品等优点，目前在医药、卫生、化工、食品
等领域得到广泛的应用。
可见光分光光度计是根据物质对光的吸收特性而设计出来的，当某种物质在特定波长下被吸收时，会导致在这个波长范围内，
其吸收量与吸光度成正比。
而吸光度与吸光度又与物质本身有关，在一定条件下可以得到定量关系。
因此，利用吸光度就可以测定
物质的含量。
吸光度是指吸光率与入射光线波长（或透过光线的光线波长）的比值，用吸光度表示。
例如，对一束可见光进行测量时，可以
通过测定其光通量大小来确定是一束还是几束光。
若某一物质对
某一波长的光有很大吸收时，其吸光率与入射光线波长成反比；
若某一物质对某一波长的光吸收很小时，其吸光率与入射光线波
长成正比。
可见光分光光度计可以测定物质含量、溶液浓度等指标。
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分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法
分光光度计是一种实验室常用的仪器，用于测量溶液或气体的吸光度或透光度。
下面是分光光度计的使用方法。
1. 准备工作：
(1) 确保分光光度计已接通电源并预热至稳定状态。
(2) 校准光度计，使用已知浓度的标准溶液进行校准，确保
仪器准确度。
2. 准备样品：
(1) 准备待测样品，通常以溶液的形式存在。
如果需要测量
气体，需要将气体溶解或将光通过气体进行测量。
(2) 如果样品浓度较高，可以将其稀释至合适的浓度范围内，以避免出现过高的吸光度。
3. 调整仪器：
(1) 打开光程腔盖，确保光程腔内没有灰尘或杂质。
(2) 将光程腔盖关闭，并调整光程腔宽度，通常为1厘米。
(3) 根据实验需要选择合适的波长，并将仪器调整至该波长。
4. 设置基线：
(1) 选择空白试剂，如去离子水或溶剂，将其放入光程腔中。
(2) 将仪器调零，即设置光度计读数为零。
5. 测量样品：
(1) 将样品放入光程腔中，确保光通过样品。
(2) 记录光度计读数。
(3) 如果需要测量多个波长，则重复以上步骤。
6. 清洗仪器：
(1) 测量结束后，将样品取出并清洗光程腔。
(2) 关闭仪器并关闭电源。
以上就是分光光度计的使用方法。
使用时注意根据实际情况进行操作，并严格遵守操作规程，以确保实验结果的准确性。
分光光度计的原理
分光光度计的原理分光光度计是一种用于测量物质溶液中吸光度的仪器，它利用光的特性来分析物质的浓度和化学性质。
分光光度计的原理基于比尔-朗伯定律和光的吸收、透射特性，通过测量样品对特定波长光的吸收来确定其浓度。
在分光光度计中，光源发出的光经过滤光器选择特定波长后照射到样品上，样品吸收一部分光，其余的光经过样品后被检测器接收并转换成电信号，最终通过电子器件进行数据处理和显示。
分光光度计的原理可以简单地解释为，当一束光通过样品时，样品中的化合物会吸收特定波长的光，而不同化合物对光的吸收程度也不同。
这种吸收特性可以用比尔-朗伯定律来描述，即吸光度与溶液中物质的浓度和光程成正比。
因此，通过测量样品对光的吸收程度，我们可以推断出样品中物质的浓度。
分光光度计的原理还涉及光源、滤光器、样品室和检测器等部件。
光源通常采用白炽灯或者氙灯，它们能够发出连续光谱的光。
滤光器用于选择特定波长的光，以保证只有特定波长的光能够照射到样品上。
样品室是样品放置的地方，通常采用石英或玻璃制成，以保证光能够透过样品。
检测器能够将光信号转换成电信号，并通过数据处理系统进行分析和显示。
在使用分光光度计时，首先需要进行基准校准，以确保仪器的准确性。
然后将样品放置在样品室中，调节滤光器选择所需的波长，启动光源，让光照射到样品上。
检测器将接收透过样品的光，并将其转换成电信号。
最后，通过数据处理系统计算出样品的吸光度，并根据比尔-朗伯定律推断出样品中物质的浓度。
总之，分光光度计的原理是基于物质对特定波长光的吸收特性，通过测量样品对光的吸收程度来确定样品中物质的浓度。
它是一种非常重要的分析仪器，被广泛应用于化学、生物、环境等领域的实验和研究中。
通过对分光光度计原理的深入理解，可以更好地掌握其使用方法和数据分析技巧，从而提高实验和研究的准确性和可靠性。
分光光度计的实验报告
分光光度计的实验报告一、实验目的1、了解分光光度计的基本结构和工作原理。
2、掌握分光光度计的使用方法，学会测量物质的吸光度。
3、通过实验，学会绘制标准曲线，并利用标准曲线进行未知溶液浓度的测定。
二、实验原理分光光度计是根据物质对光的选择性吸收原理来进行物质浓度测定的仪器。
当一束平行单色光通过均匀的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度和液层厚度成正比。
其关系式为：A ＝εbc，其中 A 为吸光度，ε 为摩尔吸光系数，b 为液层厚度（通常为比色皿的光程），c 为溶液的浓度。
三、实验仪器与试剂1、仪器：分光光度计、比色皿、容量瓶、移液管等。
2、试剂：标准溶液（已知浓度）、待测溶液、蒸馏水。
四、实验步骤1、仪器预热打开分光光度计电源，预热 20 30 分钟，使仪器稳定。
2、波长选择根据待测物质的吸收特性，选择合适的波长。
3、调零将空白溶液（通常为蒸馏水）放入比色皿中，置于光路中，调节仪器的零点，使吸光度为零。
4、绘制标准曲线分别吸取不同体积的标准溶液于容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，配制成一系列不同浓度的标准溶液。
以蒸馏水为参比，在选定的波长下，依次测量各标准溶液的吸光度。
以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
5、测定待测溶液的吸光度吸取适量的待测溶液于比色皿中，按照上述步骤测量其吸光度。
6、数据处理根据待测溶液的吸光度，在标准曲线上查出对应的浓度，或者通过回归方程计算出待测溶液的浓度。
五、实验数据及处理1、标准溶液浓度与吸光度数据记录｜标准溶液浓度（mol/L）｜吸光度（A）｜｜｜｜｜ 000 ｜ 0000 ｜｜ 010 ｜ 0125 ｜｜ 020 ｜ 0250 ｜｜ 030 ｜ 0375 ｜｜ 040 ｜ 0500 ｜2、标准曲线绘制以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
通过线性回归，得到标准曲线方程为：A ＝ 125c ＋ 0001，R²＝ 0999。
3、待测溶液吸光度测量测量三次，取平均值。
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操作简便
测色分光度仪的使用注意事项
※进行校正（使用时要校正，还要定期校正） 波长标尺的校正：使用钕谱滤片对波长进行校正 光度标尺的校正：使用标准溶液或标准白板进行校正
（4-8小时校正一次） ※仪器的测量精度：要从色度和光度两方面来衡量 ※至少测量四次取平均值 ※按要求经常校正仪器
分光光度计在印刷中应用
②分光光度计光路简图
分光光度计跟眼睛不同，眼睛是 同时在感受的全部波长上评价接 受的光能，而反射曲线的测量必 须逐波长地进行。这就必须把光 源的光在各个波长上进行分解， 这既可以在照射样本之前分解成 单色光，也可以在从样本上反射 之后进行分解。几乎所有的新型 仪器都按后一种方式工作，只有 这样才能对具有荧光性质的样本 进行正确的测量。
分光光度定义
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一 定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定 量分析。 针对各个单色光进行度量
测色分光光度仪并不是直接测量颜色样品的三刺激值， 而是测量物体的光谱反射率或透射率再通过计算进而 得到三刺激值X、Y、Z及色差等颜色数据.
分光光度计的特点
测量物体的光谱反射或光谱透射特性，并不直接测量颜色的 三刺激值。选用CIE标准照明体和标准观察者，通过积分计算 求得颜色的三刺激值。
1 利用标准样品获得各单 色光的入射光能量 2 测量待测样品对各单 色光的反射光能量 3 计算样品的光谱反射 率并计k
100
S y
Z k S()z
式中: S 为照明体的光谱功率分布,为被测物体的光谱反射率, x y z 为标准观察者光谱三刺激值
满足条件：
分光光度计
金蒋 玉柳 婷敏
1、分光光度计
2、分光光度计的原理 3、分光光度计的用法
目
4、分光光度计在印刷中的应用
录
分光光度计
色度测量方法主要有两种: 第一种是利用光电色度仪测 色的方法；第二种是利用分光光度计测量色彩的方法。 分光光度计作为印品在线检测的主要工具，是整个印品 在线检测系统的核心部件，它所完成的主要工作简单的 说是将可见光按要求分成单色光，然后照射到印品上， 反射得到光信号，光信号再由光电传感器转化为电信号 进行处理计算，从而得到XYZ,LAB等色度值。
光源：测量所用的照明必须包含可见光谱的全部波长。
光的色散：在散光的传统元件是用棱镜，但在现代仪器中则常用
弯曲光栅。后者得到的不同波长的间隔可以是相等的，这可以使光 圈结构不必是可变的。色散光的第三种可以选择的元件是彩色干涉 滤色片。
传感器：在分光光度计中，传感器是用光电池、光电二极管或光电 倍增管装配成的。
图2-8
分光光度计的基本部件
光源:发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的 光强度,稳定。 单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 在分光光度计中多用 作为色散元件 积分球：测色仪重重难关光的满散射。球内光强稳定 而均匀，受光时积分球内壁呈漫反射状态。 光电检测器：影响测色仪的检测质量，将进入检测器 的光能转变成电信号后检出 数据处理及输出装置：分光光度计输出的基本数据是 光谱反射率或光谱透射率，其他的色度学数据都是通 过数据处理装置计算后得到的。
【1】何晓辉。油墨叠印率检测方法的比较[J].北 京印刷学院学报，2005，13（2）:3~5 【2】罗庆尧。分光光度分析[M]。科学出版社， 1997. 【3】吴石编译.分光光度计在丝网印刷中的应用. 网印工业,2003,6:43-45 【4】汤顺青.测色分光光度计.计量技 术,1998,NO6:30-32
仪器标定：100%线定标和0%线定标
精度：短时间可重复性、长时间可重复性及稳定性、绝对精度等
测量几何条件：积分球、光泽吸收阱 大多数分光光度计有一个称作积分球的元件。球的内壁涂以白 色，壁上开有小孔，以便让照明标本所必需的光线出入。光源放 在球内或至少放在球旁边，以便用扩散的光照明球壁。所以，小 球上有一或两个小孔，以便放置被测样本或标准白板。对着样本 的孔因测量仪不同而有不同的尺寸，在大多数仪器中这个孔的孔 径是可以连续改变的，以便适应被测样本的大小。带积分球的分 光光度计，样本通常是在慢射照明的状态下，测量从样本某个方 向反射的光。一般是测量8°方向反射的光（图2－8）
分光光度计工作流程图
分光光度计的用法
现代测色用分光光度计的测色操作过程，自始 至终是自动进行。 仪器校准 波长间隔调整 测色条件改变 反射率换算 各种测色计算 读数和输出。
而且大多数测色系统均配有荧光屏输出输入终 端或荧光屏和打印装置结合终端。计算机能将 绝对反射值予以存储，并用来标定仪器，从而 保证仪器在标准状态下工作。
※测反射样品为主，兼顾透射样品 ※常规测色局限为可见光范围 ※对仪器波长精度和分辨率要求较低，对光度准确度要求较 高 ※测量光路必须满足测量颜色对样品的照明观察条件的规定 ※数据处理复杂，常由软件计算颜色参数
测量物体的光谱反射率ρ(λ)或透射率τ(λ)
分光光度计的原理
①测量原理：将整个视觉可见光谱380-700nm范围内， 每隔10nm或20nm取离散点测量，将所得曲线进行积分。
早期使用分光光度计的是油漆和油墨厂。在 1980年代末，色度测量和分光光度计开始应用 在印刷厂。在印刷界，大部分使用的分光光度 计是爱色丽公司的产品。如经济型色差仪CA22， 它简单方便，易携带，主要做色差的评估;台式 分光仪CFS57经济型台式分光仪，可以满足一 般的颜色测量和管理需求。
参考文献