神经生物学实验

神经生物学实验
神经生物学实验

前言

神经生物学和分子生物学是21世纪生命科学研究中的两个最重要的领域。神经生物学的主要研究方向是研究神经系统的结构和功能。大脑的结构和功能是自然科学研究中最具有挑战性的课题。近代自然科学发展的趋势表明,21世纪的自然科学重心将在生命科学,而神经生物学是其中的最重要的领域,必将飞速发展。

讲授本课程主要是为了丰富本科生关于神经科学方面的新知识,使学生在了解神经生物学的前沿领域和新成就的同时,掌握该学科的一些基本技术和方法。对本课程的学习还与有助于医学专业的本科生加强对人类神经系统基本功能和相关机制的了解,对神经系统疾病的发病机制也有了更加直接的认识;而对医学基础专业的本科生来说,本课程的教学能够使之掌握分子生物学实验的一些基本方法,并对神经科学的研究有了一定的认识,有助于其建立正确的科研思维和良好的实验基础,对现阶段的本科生教育是适合的而且是急需开展的。

目录

实习一脑立体定位技术及微电极拉制技术(4学时)1.脑立体定位仪的原理及标准平面的确定

2.常用脑立体定位图谱及脑立体定位仪的使用3.微电极拉制器的原理和使用

4.各种玻璃微电极的拉制方法

实习二大鼠海马LTP的实验观察(4学时)1.LTP的基本概念

2.LTP形成的基本原理

3.海马结构的特点

4.LTP的实验观察

实习三大鼠局灶性脑缺血模型制作方法(4学时)实习四大鼠C6脑胶质瘤模型的制作方法(4学时)实习五大鼠Morris水迷宫实验方法(2学时)

实习六抑郁动物模型的制备与评价(2学时)

实习一脑立体定位技术及微电极拉制技术

1.脑立体定向(位)技术的原理及标准平面的确定

1.1实验目的

了解脑立体定向(位)技术的基本原理,掌握脑立体定位仪的使用方法,结合脑立体定位图谱进行中枢神经系统的立体定位,研究目的结构的形态和功能。

1.2实验用品

①脑立体定位仪

②微电极推进器

③脑立体定位图谱

④大白鼠

1.3脑立体定位的概念

脑立体定位是研究脑立体结构的主要方法,首先建立空间坐标系,以确定预研究结构的立体关系,进行定向定位,利用微电极技术对脑内靶位点进行各种科学研究及临床治疗。

1.4脑立体定位的基准平面与标准平面的确定

在中枢神经系统的电生理研究工作中,应用微电极记录中枢神经元的电活动是一种最基本的方法。如何将微电极准确地插入到所要研究的位置,就要用脑立体定位仪来实现。要想在空间确定一个位置(点),首先要建立一个坐标系,在该坐标系中必须确定一个基准平面及两个标准平面作为参考。基准平面和标准平面的选择应根据不同的情况来确定。

不同动物的大脑其形状和结构均有不同,但都有一个共同的生物特性,即左右对称性。我们用猫、兔、鼠三种动物为例。以动物的矢状缝所在的与水平面垂直的矢状面为基准平面,在此面的左边为L,在此面的右边为R。

猫脑:以外耳道插杆的中心连线与两眼眶下缘连线构成的平面为参考平面。在此平面上方10mm处与参考平面平行的平面作为水平标准平面(HO),在此平面上方为V+,在此平面下方为V-。与水平标准平面垂直并含有两耳杆中心连线的平面,作为额面标准平面(APO),在此平面之前为AP+,在此平面之后为AP-。

兔脑:兔的头部固定在脑定位仪上时,其前囟(Bregma,即冠状缝与矢状缝的交点)比λ(人字缝与矢状缝的交点)高1.5mm,在这种情况下,以通过前囟的水平面作参考平面,而以在该平面下12mm处的水平面作为水平标准平面(HO,零平面),在此平面上方为V+,在此平面下方为V-。经过前囟并与矢状缝垂直又与水平面垂直的面,作为额面标准平面(APO),在此平面之前为AP+,在此平面之后为AP-。

大鼠脑:大鼠脑固定在脑定位仪上时,其前囟比λ高1.0mm,在这种情

况下,通过前囟的水平面作水平标准平面(HO),经过前囟并与矢状缝垂直又与水平面垂直的面,作为额面标准平面(APO),在此平面之前为AP+,在此平面之后为AP-。

2.常用脑立体图谱的使用及脑立体定位的应用

参考George Paxino and Charles Watson大鼠脑立体定位图谱讲解。以及在实验室实际操作。

3.微电极拉制技术(方法)的原理及使用

3.1实验目的

学习微电极拉制器的使用方法。掌握玻璃微电极的制作过程,充灌方法,灌充液的配置,及玻璃微电极的电学特性。

3.2实验用品

①玻璃微电极拉制器

②玻璃毛坯管

③Kcl电解液

3.3玻璃微电极的介绍

玻璃微电极分为单管和多管两种。由于玻璃微电极绝缘性能良好,电学性质稳定,尖端直径大小易于控制,电极尖端与被记录组织接触紧密等优点,故已广泛应用于生物科学的许多领域,成为电生理技术研究的重要工具。3.3.1单管玻璃微电极

单管玻璃微电极是一根尖端开口很细的硬质玻璃管,内充电解质溶液作为电极。由于电解质溶液可以导电,利用单管玻璃微电极可以记录到中枢神经系统神经元的电活动。用于细胞内记录的微电极,其尖端直径应小于0.5mm,尖端的倾斜度应相当缓和,以免穿入细胞膜时造成大的伤害。这种微电极适合于从细胞内引导电活动和测量膜电位。用于细胞外记录的微电极,其尖端直径约在1~5mm。一般认为尖端内径1~4mm的玻璃微电极适宜于记录神经元胞体的电活动。微电极的长度应视需要而定,但插入脑组织内的部分不宜太粗,以免插入时造成显著的损伤。制作玻璃微电极应选用熔点高,化学稳定性高,电阻率高和膨胀系数低的硬质玻璃管。国外常用Pyrex 玻璃管,国内一般采用GG17和95玻璃管。

3.3.2多管玻璃微电极

多管玻璃微电极是在单管玻璃微电极的基础上发展起来的。多管玻璃微电极常用于记录注入药物及神经递质的神经元的电活动,观察药物及神经递质对该神经元的影响。每一个多管玻璃微电极一般最少需要有3个小管,一管用于记录单位放电,称之为记录管;另一管充灌药物或神经递质,藉电泳电流将其导入神经元内,该管称为药物管;第三管充灌生理盐水作为电泳对照或电流平衡,称之为对照管。如图1所示。

根据实验目的,多管玻璃微电极基本可分为两类:

①细胞外多管玻璃微电极,即细胞外记录,细胞外给药的多管玻璃微

电极。

多用于比较几种药物对同一神经元的效应。或用于研究几种物质(如神经递质)对受体的相互作用。这类电极的结构特点是各管的尖端处于同一横截

神经元

图1多管玻璃微电极工作示意图

②细胞外给药,细胞内记录的多管玻璃微电极。

用于测量细胞的静息膜电位,电兴奋性和电导的变化及判定受检药物的作用部位是在细胞外抑或在细胞内。并把记录的范围严格局限在被测细胞,而不受临近神经元放电的影响。这类电极的记录管通常要比药物管长40~60μm,常见的构形有同轴双电极及孪生电极。

4.单管玻璃微电极的制备方法

4.1毛坯管的清洁处理

拉制微电极前,必须对毛坯管做充分的清洁消毒处理。将毛坯管大约200只左右捆成一束,放入浓硫酸和等容量的浓硝酸(1:1)配置的清洁液中,或在热浓硫酸中浸泡1-2h,取出后用自来水冲洗20min,再放入蒸馏水中煮沸10min,更换蒸馏水后再煮沸10min,反复洗涤3次。最后将其放入烘干箱中烘干,储存于干燥﹑防尘的器皿中备用。

4.2单管玻璃微电极的拉制

国内外已有多种玻璃微电极自动拉制仪,我室所用的PE-2型微电极拉制仪系日本进口,性能稳定,操作简便。

拉制过程应在防风罩内进行。先按照所需电极尖端直径和杆长试拉几次,确定合适的加热温度和牵引电磁铁的拉力参数,然后用这些参数进行拉制。拉制步骤如下:

⑴打开主电源开关,看到指示灯亮。

⑵将玻璃毛坯管夹紧于下拉杆的固定夹内,调节三个机械微动开关到合适的位置。上提下拉杆,将毛坯管穿过加热器中心,固定于上固定夹内。

⑶按下开始按钮,拉制器工作。

⑷调节加热器旋钮,使电流表指针指向15~20A之间。调节磁力牵引器旋钮到合适的位置。

⑸被加热部分的玻璃管在重力(第一拉力)的作用下将被拉长。

⑹随着拉杆的向下运动,微动开关将启动磁力牵引器形成第二拉力,迅速将玻璃管拉下。毛坯管被拉制成玻璃微电极。

4.3多管玻璃微电极的制备方法

仅以三管微电极为例介绍拉制方法。

⑴取三根清洁处理后的玻璃毛坯管,管外径2.6-3.0mm,内径约2.0-

2.5mm。中心管一根,长55mm,侧管两根,长30mm。将侧管两端在酒精灯上加热,软化弯成30度角。冷却后用细铜丝捆牢成束。

⑵将中心管固定于拉制仪上固定夹内。调整加热器位于管长的中心处。

⑶打开主电源开关,按下开始钮,调节加热器电流使加热器缓慢加热,待玻璃管软化后,为使玻璃管能充分粘合,将玻璃管旋转180度,使之成为麻花状。关闭电源开关。

⑷玻璃管下端固定于下固定夹内,调节加热器到合适的位置,开电源开关,按下开始按钮,完成拉制工作。

4.4玻璃微电极的充灌

近年来发展起来的自动快速充灌型微电极是比较有效简易的方法,该方法是借助于毛细现象的原理而发明的,即在做玻璃毛坯管时,将数根(最好是1~3根)玻璃纤维插入细管内拉制而成。电极拉成后,这些玻璃纤维也被拉细,并一直延伸到电极尖端。所用的玻璃纤维应和毛坯管的材质不同,这样在冷却后由于膨胀系数不同而易于分开,毛细现象较明显。玻璃纤维的直径以50μm左右为宜。上述电极的充灌很简便,可用细塑料管将充灌液直接注入电极腔内,由于毛细作用而灌注至电极尖端。该方法也适用于多管微电极。4.5微电极充灌后的检查

微电极充灌后,需在显微镜下进行检查和测量其阻抗。镜下主要查看电极尖端有无损坏,是否充满灌注液,电极管内有无小气泡或异物阻塞现象。微电极的阻抗是帮助了解电极尖端内径的指标,一般来讲,内径越尖阻抗越高。微电极阻抗的高低和细胞电活动的记录效果有关,阻抗过高或过低,均不利于记录。

(蔡葵)

实习二大鼠海马LTP的实验观察

1.LTP的基本概念

LTP(long-term potentiation,长时程增强),对突触前神经元进行高频强直电刺激后导致突触后神经元产生突触传递效应增强的现象,该效应可持续一个小时以上,其具体表现为:

①峰电位幅值增大;

②潜伏期缩短;

③兴奋性突触后电位(EPSP)幅值增大;

④兴奋性突触后电位(EPSP)斜率增大;

2.LTP形成的基本原理

目前研究表明,LTP形成的基本原理尚不很明确,

它是由多种因素共同作用的结果。已发现的与LTP现

象有关的突触可塑性变化有:

⑴突触前修饰作用,包括神经递质的合成、贮存、

释放的增加及自身受体功能的改变;

⑵突触后修饰作用,包括神经递质受体的特征,受

体激活后第二信使、G蛋白、膜离子流、调控蛋白及

产生磷酸化和脱磷酸化等各种反应的酶变化;图2LTP电位示意图⑶突触前或突触后结构的可塑性,包括突触前树突棘体积增大,数目增多,突触界面扩大及突触后致密物质增大增厚等;

⑷非神经元修饰:如胶质细胞及胶质-神经元相互作用的变化;

⑸上述某些变化或所有变化的综合表现。

3.海马的结构特点

海马(Hippocampus),齿状回(Dentate Gyrus),下托(Subiculum)在结构和功能上可视为一个整体,合称海马结构。海马和齿状回皮层的神经元紧密排列构成带状:在海马由锥体细胞密集排列,而在齿状回由颗粒细胞构成。海马皮层从海马沟至脑室回依次为分子层、锥体层和多形层;齿状回皮层依次分为分子层、颗粒细胞层和多形层。

海马沿其长轴分为CA1、CA2、CA3和CA4区。CA4区接邻齿状回,CA1区接邻副下托。海马结构的传入纤维主要来自内嗅区,其发出至海马的纤维分布于海马及齿状回全长。海马结构的传出纤维主要经穹窿出海马,参与Papez环路形成。

图3大鼠海马结构示意图

4.LTP的实验观察

⑴选用Wrstar大鼠,雌雄不限,体重250~350克。

⑵用20%乌拉坦(urethane,6.5ml/kg,IP)进行麻醉,必要时行气管插管术。

⑶将麻醉的动物固定在立体定位仪之上。参照Paxions和Waston所著大鼠脑立体定位图谱,进行大鼠海马CA1区和CA3区定位。CA1区坐标为前囟后3.8mm,旁开2.0mm,皮质下2.8mm;CA3区坐标为前囟后3.8mm,旁开

4.0mm,皮质下3.8mm。

⑷用牙科钻在大鼠颅骨按CA3区坐标钻一直径1mm左右的孔,将双极刺激电极(除距尖端0.1mm外全部绝缘,极间距0.2~0.4mm)插入CA3区,用牙科水泥固定,以施加单个脉冲刺激或高频刺激。

⑸在大鼠颅骨按CA1区坐标钻一直径1mm左右的孔。取尖端直径1~2mm,阻抗5~20MΩ,内充3M Kcl的玻璃微电极作为记录电极插入孔内。

⑹连接好刺激电极和记录电极,准备记录。

⑺打开各仪器电源,首先以每分钟一次的频率对CA3区施加单脉冲电刺激(强度7.5v,波宽0.1ms),并在CA1区记录其群体峰电位(PS),共持续

3omin。测量每次反应的幅值,并将测量值的平均值定为基准值(100%)。然后对CA3区施加短串高频条件刺激(频率100Hz,间距10ms,持续5s),之后,再给予单脉冲电刺激来检测条件刺激所诱发的PS的幅值及持续时间的变化。如PS幅值高于基准值的10%,并持续30min以上,则定义为LTP;若低于基准值的10%,并持续30min以上,则定义为LTD(突触传递的长时程压抑);若处于二者之间,则视作无变化。(张桦)

实习三大鼠局灶性脑缺血模型制作方法

实验目的:

1.学习大鼠脑缺血模型制作。

2.观察大鼠局灶性脑缺血时的神经行为学表现。

3.了解脑缺血的病理生理基础。

实验内容:

脑血管疾病是危害人类健康最严重的疾病之一,亦是临床及基础医学工作者的研究重点。由于临床研究的局限性,动物实验就成为研究脑血管疾病的重要途径。但是,动物实验要求有一个接近于人类脑缺血性疾病的动物模型,而疾病的动物模型往往与人类的自发疾病差别较大,因此,缺血性脑中风模型的研究仍然是非常重要的课题。采用一种线栓法,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,并从动物神经病学评分、鼠脑整体观、鼠脑切面染色、鼠脑组织光镜下观察等进行评价,表明该模型达到脑缺血的效果。在此基础上可进行缺血性脑血管病的多种实验性研究。

一、动物手术

选用SD成年雄性大鼠,体重250-300克。手术前动物自由饮水进食,一切程序均按外科手术操作。

(1)10%水和氯醛麻醉,350mg/kg,腹腔内注射。动物仰卧固定于手术台。(2)颈正中切口长2.0cm,逐层分离,仔细分离左侧颈总动脉(CCA)、

颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。用4-0丝线结扎颈总动脉和

颈外动脉,在颈总动脉近分叉处打一松节。

图4大鼠的脑动脉解剖结构示意图

(3)栓线的制备:直径0.26mm尼龙线其末端靠近火焰烧圆,长3cm,备用。

(4)在松节下方剪一小切口,将栓线由切口插入并推入颈内动脉颅内段,直至有轻微阻力感时停止。以颈总动脉分叉为起始标记,插入深度为

1.8±0.5cm,扎紧颈总动脉,缝合皮肤。

(5)大鼠约1.5小时后清醒,观察神经学症状。

(6)缺血2小时后,大鼠再次用1/3剂量10%水和氯醛麻醉,剪开切口,将线退出以实现血液再灌注,缝合皮肤。

(7)在再灌注24小时后观察大鼠神经行为学症状,断头取脑进行病理观察。

二、行为学观察

动物麻醉清醒后,从是否出现霍纳氏征来进行症状观察。按Bederson检查法进行体征分级。0级:无神经病学体症;1级:对侧肢体屈曲;2级:在1级基础上,还有瘫痪侧肌张力下降;3级:在2级基础上,出现活动时向瘫痪

侧打转现象。

图5脑缺血大鼠体征

三、病理观察

(1)新鲜标本进行整体观。大鼠断头取脑,从新鲜鼠脑可见左侧表面明显的颜色相对白亮的区域为缺血区,左脑轻微肿胀。

(2)2%TTC水溶液染色确定梗死效果。TTC水溶液是一种无色溶液,它是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体,是脂溶性光敏感的

复合物,还原后为红色。血供正常组织染色呈红色,缺血组织颜色无变

化。为了评价MCAO模型缺血效果,选取MCAO2小时再灌注24

小时大鼠断头取脑,全脑切片,片厚2mm,置入2%TTC水溶液中,37℃

孵育30分钟,观察缺血效果。图中缺血区为白色,正常血供区为红色。

可见由颅侧向尾侧,缺血范围包括无粒型岛皮质(腹侧区、背侧区和后

区)、外侧中央皮质、第Ⅰ、Ⅱ感觉运动皮质、海马、下丘脑等部位。

图6鼠脑TTC染色切面观

(3)HE染色及光镜观察。常规组织切片进行HE染色,光镜下观察组织结构变化。

思考题

1.大鼠颈部动脉和Willis环由哪几部分构成?

2.脑中动脉供血区的功能有那些?

实习四大鼠C6脑胶质瘤模型的制作方法

实验目的

本实验使用大鼠尾状核立体定向注射方法建立脑胶质瘤模型,详尽介绍了建立该模型的具体过程,为进一步研究及治疗C6脑胶质瘤提供了实验基础。

实验内容

脑胶质瘤是神经系统较常见的肿瘤,无论是手术还是放疗和化疗疗效都不太理想。为了更好地研究其生物学特征及探寻有效的治疗措施,有必要建立相应的动物模型。大鼠C6脑胶质瘤模型是研究中应用最为广泛的模型之一。原因在于:C6细胞为已建系的大鼠脑胶质瘤细胞;同源原位接种成活率高,所建模型稳定性和可靠性好;大鼠价格低廉,便于大量制备模型等。经研究证实,大鼠尾状核立体定向注射是较理想的模型制备方法,具有广泛的研究和应用价值。

1.实验材料

1.1.11细胞株和实验动物

①C6胶质瘤细胞系;

②成年Wistar大鼠,雌雄不限,以雄性为佳,平均体质量200~240g,常规

喂养。

1.2药品与试剂

胎牛血清;RPMI-1640培养粉;0.25%胰蛋白酶(自配);

青霉素100U/mL;链霉素100U/mL;

10%水合氯醛(自配),以3ml/kg剂量腹腔注射麻醉大鼠;

1%琼脂糖溶液(30℃以下凝固);

牙科水泥粉;牙托水;

1.3仪器设备和器械

CO2培养箱;超净工作台;低速离心机;

大鼠脑立体定向仪一台;

简易手术切开包一个;25μl微量注射器一个;血球计数板;

牙科钻一台;

2.实验步骤

2.1细胞培养及悬液制备

①将C6细胞分装于数只75cm2(底面积)的培养瓶中,加入适量含有体积

分数为10%胎牛血清、青霉素100U/mL、链霉素100U/mL的RPMI-1640培养液,置入温度37℃、5%CO2的培养箱中培养。

②在细胞处于指数生长期时,以0.25%胰蛋白酶适量消化3~5min后,弃去

消化液。加入2ml不含胎牛血清的RPMI-1640培养液终止消化。

③吹打冲洗1~2次形成细胞悬液。将悬液分别装入1ml PE管中,以

2500r/min低速离心5min后弃去上清,备用。

④在离心的同时,取一滴细胞悬液滴在血球计数板上,计数并计算应稀释

的倍数。调整细胞浓度为每10μl含1×106个C6细胞,用于接种(保存在37℃水域或碎冰中)。

2.2颅内接种

①用10%水合氯醛以3ml·kg-1剂量腹腔注射麻醉大鼠,麻醉后的大鼠

头部固定在鼠脑立体定向仪上,两耳针深入外耳道对称固定,剪去头顶部毛发,碘酒、酒精消毒后铺洞巾。

②内眦连线与头部正中矢状面交点向后纵向切开头皮约1cm,分离暴露颅

骨。根据大鼠头部立体定向解剖图谱确定对应于右脑尾状核的钻孔位置:冠状缝与矢状中线交点处前1mm,矢状缝右3mm.,以牙科钻在颅骨上钻一小孔。

③25μl微量注射器抽取C6细胞悬液10μl(1×106个C6细胞),接种前

加入1%琼脂糖溶液(必须保存在37℃水域中以防凝固)。

④固定微量注射器于立体定位仪上,针尖深入硬膜下4.5mm,后上提

0.5mm。注射速度为1μl·min-1,共注射10min。注射完毕后留针3~5min

,使细胞充分沉积,缓慢拔针。

⑤骨孔用牙托粉迅速封闭。生理盐水冲洗手术野,缝合切口后消毒皮肤。

2.3术后观察

①对荷瘤鼠大体观察发现,大鼠接种后3d开始,大鼠运动量逐渐减少,攻击

性下降。继而饮水进食减少,皮毛不整洁,毛色失去光泽,精神萎靡,对侧或双侧放置反射损害,偏瘫进行性加重。后期,大鼠面部不整洁,眶周出血,对刺激反应减弱甚至呈木僵状,偶有癫痫发作。濒死前表现为极度恶液质,呼吸衰竭。

②新鲜标本观察发现,接种后14d内大鼠脑内无肉眼可见肿瘤,14d后脑内

肿瘤体积呈指数增大。肿瘤呈圆形或椭圆形浸润生长,无包膜,较周围正常组织颜色深,境界清楚。切开后为实性,可见新生血管,肿瘤内出血和坏死。周边脑组织肿胀,中线结构向对侧移位。

③HE染色观察发现,呈典型的胶质瘤样改变,可见较多的血管腔,与正常

脑组织界线清楚,但仍呈浸润性生长。分级为胶质瘤Ⅲ~Ⅳ级,可见栅栏状坏死,周边围绕着胶质瘤细胞,此为胶质瘤的特征。

实习五大鼠Morris水迷宫实验方法

实验目的

(1)掌握Morris水迷宫的实验原理;

(2)掌握Morris水迷宫的实验方法;

实验内容通过Morris水迷宫实验测定大鼠的学习与记忆功能。

实验器材

(1)圆形水槽

(2)柱形平台

(3)秒表

实验动物Wistar大鼠,体重200-250g,雌雄不限。

实验步骤

(1)首先准备直径130cm、高50cm的圆形水槽,后注入30cm深的水,水温保持在20+5℃,将水槽均匀划分为四个象限,并人为在槽壁上标出Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ象限,在第一象限中心部分放入柱形平台,平台高29cm,(即没入水下1cm)。最后在水中均匀洒入细小泡沫,达到扰乱其目视平台的目的,国外有文献报道,可在水中倒入牛奶,所起效果相同。(2)实验包括①定点航行实验:将大鼠依次从Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ象限的中间部分放入水中,放入时尽量保持其头部面向槽壁,记录2分钟内寻找平台的时间(即逃避潜伏期)。对未找到平台的大鼠,实验者将其引导上平台,停留1分钟,按最高时限2分钟记录其潜伏期。上、下午各训练一次。②空间探索实验:在前一实验历经4天半后(9次),撤除平台,将大鼠从任一象限放入水中,观察游泳路径,记录大鼠2分钟内跨原平台位置与其余3个象限相应位置的次数。

实验结果

(1)经过训练后大鼠的逃避潜伏期逐渐缩短,对于平台的记忆形成。(2)在撤除平台后大鼠在通过第一象限中心位置的次数要多于其他3个象限相应位置的次数,进一步证实其对平台的记忆。

图7Morris水迷宫示意图

实习六抑郁动物模型的制备与评价

实验目的

了解常见的抑郁动物模型;掌握慢性不可预见性应激抑郁模型的制备方法;了解评价抑郁动物模型的方法。

抑郁动物模型介绍

建立理想的抑郁症动物模型,可以为抑郁症的病因、发病机制以及治疗研究提供便利的条件。良好的抑郁症动物模型应该具有以下特征:①行为表现的模拟性(模型可以表现出抑郁症的特征症状);②具有合理的理论基础(造模手段与临床抑郁症的病因之间有关联);③动物模型体内的病理生理学改变与人类抑郁症患者有相似性;④抗抑郁剂治疗有效。此外,模型所致的行为学改变必须持续足够长的时间,以允许抗抑郁剂的长期应用。

抑郁症的动物模型目前主要包括:应激模型、孤养或分养模型、药理学模型、脑损伤模型、操作行为模型、遗传选择性模型等。慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁模型,由Willner等创建于二十世纪八十年代,采用轻度、不可预见的应激因子模拟人类生活事件和环境应激刺激等心理社会因素,其理论依据与人类抑郁症中慢性、低水平的应激原促进疾病发生,加速疾病发展的机理比较接近,近年来在国内外相关研究中被广泛应用。

实验方法

1.慢性不可预见性应激抑郁模型的制备

①采用青年雄性Wistar大鼠,体重180~220克。

②将大鼠置于自然昼夜节律光照条件下,室温18~20℃,控制干扰声音和

光线,每笼4-6只,提供充分的饮水和标准鼠饲料,自由进食、饮水。

大鼠饲养1周以适应环境,每日逐只抚摸抓拿大鼠,使其适应实验人员的操作。

③第1~21天,每天接受各种不同的应激刺激:电击足底(电流1mA,每

次10s,间隔1min刺激1次,共20次);强迫游泳(水温20℃,5min);

摇晃(频率1次/s,10min);夹尾(大卵圆钳,大鼠尾近体侧1/3处,1min);

热应激(大鼠装入狭口瓶置于45℃水浴箱,5min);禁水(24h);禁食(48h)。每天随机给予1种刺激,每种刺激累计使用2~3次。

2.抑郁动物模型的评价

①Open-field法(开场实验)测定大鼠的行为。在制作模型的前后分别进行

测定以评价大鼠的行为学改变。

将单个大鼠置于高40cm、直径80cm的圆柱形开场实验箱中央,开场箱

由不透明的材料制成,箱底划分为面积相等的25格。记录大鼠5分钟内的行为表现,包括中央格停留时间、水平穿越格数、竖立次数、修饰次数和粪便粒数。行为评定采用盲法,在安静房间内,由三名观察观察者进行,取各指标三人的平均值。

经过21天的综合应激刺激,大鼠的活动和探究行为减少,对环境警觉增加。表现为:中央格停留时间延长、水平穿越格数减少、竖立次数减少、修饰次数减少、粪便粒数增加。

②糖水消耗实验评价大鼠兴趣和快感的缺乏。

以糖水消耗量、糖水偏爱百分比作为测量抑郁动物模型快感缺乏的客观指标。经过21天的不可预见性综合应激,大鼠的糖水消耗量明显下降,表明对犒赏的反应性下降。

③体重评价。

抑郁模型大鼠出现体重增长缓慢,甚至下降,与临床抑郁症患者的体重变化相似。

认知神经科学知识点总结

1、认知科学——是研究智能实体与其环境相互作用园里的科学。 2、智能实体——是人类、动物和智能机的泛称。 3、研究人类智能的科学有心理学、心里语言学;研究动物智能的有动物心理学 和比较心理学;研究机器智能的科学有计算机科学,特别是人工智能学以及人工神经网络的研究。 4、神经科学是一大类学科的总称,这些学科均以“分析神经系统的结构和功能, 揭示各种神经活动的基本规律,在各个水平上阐明其机制,以及预防、诊治神经和精神疾病患”为自己的基本研究内容,包括神经生理学、神经解剖学、神经胚胎学。。P2。。。等。这些学科彼此渗透,互相支持,新技术、新概念层出不穷,日新月异,构成当代生物医学发展的前沿学科之一。 5、《人治神经科学》一书的主要思想就是阐明组成脑的分子和细胞如何以其可 塑性参与脑结构与功能系统的形成,进而通过结构与功能系统映射的进化,逐渐出现了人类的意识和多层次的精神活动。 6、人治神经科学的基本理论: (1)物理符号论、信息加工学说和特征检测理论 (2)联结理论、并行分布处理和群编码理论 (3)模块论或动功能系统论 (4)基于环境的生态现实理论:认知科学家们一直把认知过程堪称是发生在每个人头脑或智能系统内部的信息加工过程。而环境作用的观点则 认为认知决定于环境,发生在个体与环境交互作用之中,而不是简单 发生在每个人的头脑之中。 (5)机能定位论:试图为每一种高级功能在脑内找到一个中枢,或一种特意的细胞。到20世纪80年代前后,曾以半讽刺的方式,否定了祖母 细胞是识别熟悉面孔的特意细胞。 7、认知神经科学方法包括两大类互补的研究方法:一类是无创性脑功能(认知) 成像技术;另一类是清醒动物认知生理心理学研究方法。前一类方法中又分为脑代谢功能成像和生理功能成像两种;后一类方法中包括单细胞记录、多细胞记录、多维(阵列)电极记录法和其他生理心理学方法(手术法、冷却法、药物法等)。

神经生物学重点复习

第一篇神经活动的基本过程 第一章神经元和突触 一、名词解释: 1、神经元:神经细胞即神经元,是构成神经系统的结构和功能的基本单位。 2、突触:神经元之间进行信息传递的特异性功能接触部位称之为突触。 3、神经胶质细胞:是广泛分布于中枢神经系统内的、除了神经元以外的所有细胞。 具有支持、滋养神经元的作用,也有吸收和调节某些活性物质的功能。 二、问答题: 1. 神经元的主要结构是什么?可分为哪些类型? 神经元的主要结构包括胞体(营养和代谢中心)、树突(接受、传导兴奋)、轴突(产生、传导兴奋)。分类: 1)、根据神经元突起的数目分类:单极神经元、双极神经元、多极神经元、假单极神经元。 2)、根据树突分类:①按树突的分布情况分类:双花束细胞、a细胞、锥体细胞、星形细胞。②按树突是否有棘突:有棘神经元、无棘神经元。③按树突的构型:同类树突、异类树突、特异树突神经元。 3)、根据轴突的长度分类:高尔基I型神经元、高尔基II型神经元。 4)、根据功能联系分类:初级感觉神经元、运动神经元、中间神经元。 5)、根据神经元的作用分类:兴奋性神经元、抑制性神经元。 6)、根据神经递质分类:胆碱能神经元、单胺能神经元、氨基酸能神经元、肽能神经元。 2. 简述突触的分类。 突触:神经元之间进行信息传递的特异性功能接触部位称之为突触。分类: 1)、根据突触连接的成分分类:轴—体、轴—树、轴—轴三种最为主要。 2)、根据突触连接的方式分类:依傍性突触、包围性突触。 3)、根据突触连接的界面分类:I型突触(非对称性突触)、II型突触(对称性突触)。 4)、根据突触囊泡形态分类:S型突触、F型突触。 5)、根据突触的功能特异性分类:兴奋性突触、抑制性突触。 6)、根据突触的信息传递机制分类:化学突触、电突触。 3. 试述化学突触的结构特征。 化学突触:通过神经递质在细胞之间传递信息的突触。由突触前成分、突触后成

《神经生物学》教学大纲

《神经生物学》教学大纲 传统教学方式的教学大纲 以疼痛专题为中心的教学方式 Neurobiology 学时:54 考核方式:笔试及口试 教学方式:课堂讲授、讨论 课程类型:A 主讲教师: 韩济生、万有、于常海、王韵,崔彩莲、吴鎏祯、崔德华、王克威、罗非、邢国刚、薛冰、刘风雨、张嵘和张瑛等 授课对象:三年级学生等 开设目的: 本课程教学包括两部分,一部分为传统教学方式,即以教师讲解为主,系统介绍神经生物学的基础知识及有关研究的新进展,包括基础研究和临床应用的研究动向。另一部分则结合本学科科研优势,开展以疼痛专题为中心的教学(problem based learning, PBL)。通过传统的教学方式,使学生掌握神经生物学的基础知识,了解有关领域的新成果、新动态。而以疼痛专题为中心的教学则充分调动同学的主观能动性,训练学生查阅相关文献,分析问题,解决问题及培养科学思维及科学演讲的能力。 教学要求: 要求学生了解课堂讲授内容,要求每位同学根据自己的兴趣查阅相关文献,制作powerpoint幻灯片进行分组汇报和讨论,教师及同学对报告内容进行评判打分。课程最后评分包括两部分:即理论考试(笔试)占60%,口头报告占40%。 预修知识:医学基础、临床医学基础、生物学。 传统教学方式的教学大纲(共24学时) 一、绪论:2课时

1.神经科学的发展史 2.神经科学的基本内容:分子神经科学,细胞神经科学,发生神经科学,系统和行为神经科学,认知神经科学,计算神经科学,临床神经科学,等。 3.神经科学基本的研究方法:形态学方法,生理学方法,电生理方法,生物化学方法,分子生物学方法,脑成像方法,等。 4.本课程学时安排的思路、教材及参考书等。 二、细胞与分子神经生物学:5课时 1.神经元及神经胶质细胞(2课时) (1)神经元的超微结构特点、与功能关系。 (2)突触的超微结构特点、分类及化学性突触的传递过程。 (3)中枢神经系统神经胶质细胞的分类,形态特点及功能。 (4)神经元及神经胶质细胞的相关基础知识在实验研究中的应用。 2.离子通道:(2课时) (1)离子通道的提出与证实。 (2)离子通过通道的方式和离子通道的特点; (3)离子通道的现代研究方法; (4)离子通道的分类与功能; (5)离子通道活动的调制。 (6)离子通道与疾病、毒物和药物。 3.神经元的电活动:(1课时) (1)膜静息电位:静息电位的形成原理;膜内、外离子浓度维持平衡的原理。 (2)动作电位及其形成原理; (3)局部电位:终板电位、突触后电位(兴奋性或抑制性)和感受器电位;局部电位与配基门控离子通道和机械门控离子通道;局部电位的特点与功能。 4.跨膜信息传递(自学) (1)递质:神经递质与调质的概念、递质的共;兴奋性氨基酸递质的种类、来源,兴奋性氨基酸受体的种类、结构及生理作用、部分毒性作用;抑制性氨基酸递质的种类、来源,抑制性氨基酸受体的种类、结构及生理作用;神经肽的概念,神经肽的产生与降解,神经肽的受体与配体,神经肽的作用

神经生物学复习大全

2009年神经生物学复习资料 一名词解释 静息电位:活细胞处于安静状态时存在于细胞膜两侧的电位差,称为静息电位, 在多数细胞中呈现稳定的内负外正的极化状态,通常是采用细胞内记录获得。 阈电位和阈强度:能使Na+通道大量开放从而产生动作电位的临界膜电位。(或 能使膜出现Na+内流与去极化形成负反馈的膜电位值)称为阈电位。在一定的刺 激持续作用下,引起组织兴奋所必需的最小刺激强度,称为阈强度。 动作电位“全或无”现象:指动作电位的产生,不会因为刺激因素的不同或强度 的差异而使动作电位的形状发生改变,即动作电位只要发生,它的波形就不发生 变化。 后电位:在锋电位下降支最后恢复到静息电位水平前,膜两侧电位还要经历一些 微小而较缓慢的波动,称为后电位。 突触:一个神经元和另一个神经元之间的机能连接点,神经元之间传递信息的特 殊结构。突触的结构一般可由突触前膜、突触间隙、突触后膜组成。根据突触连接的界面分类:分为Ⅰ型突触或非对称突触;Ⅱ型突触或对称突触。根据突触的功能特性分类:分为兴奋性突触和抑制性突触。根据突触的信息传递机制分类:分为化学突触和电突触。 突触整合:不同突触的冲动传入在神经元内相互作用的过程。它不是突触电位的 简单代数和,其本质是突触处激活的电导和离子流的对抗作用,从而控制膜电位 的去极化和超极化的相对数量。(当神经元具有两个或者两个以上的信号同时输入的时候,这些信号在神经元上就会发生叠加,这种现象称为突触整合。两次兴奋造成的神经元去极化作用将大于单个兴奋性;如果兴奋性突触后电位和抑制性突触后电位同时发生,则两种作用可能会互相抵消。) 电压依赖性离子通道 离子通道是神经系统中信号转导的基本元件。能产生神经元的电信号,调节神经递质的分泌,也能将细胞外的电解质、化学刺激及细胞内产生的化学信号转变成电反应。有两个基本特性:对离子的特异性和对调节的易感性。有一类通道对电压变化敏感,受电压变化的调节而关闭。 化学依赖性通道:能特异性结合外来化学刺激的信号分子,引起通道蛋白质的变构作用而使通道开放,然后靠相应离子的易化扩散完成跨膜信号传递的膜通道蛋白。 化学门控通道:能特异性结合外来化学刺激的信号分子,引起通道蛋白质的变构作用而使通道开放,然后靠相应离子的易化扩散完成跨膜信号传递的膜通道蛋白。 时间性总和:局部兴奋的叠加可以发生在连续解接受多个阈下刺激的膜的某一点,即当前面刺激引起的局部兴奋尚未消失时,与后面刺激引起的局部刺激发生叠加。 G蛋白:能与GTP 结合的蛋白称为G 蛋白,它能接到神经递质、光、味、激素和其他细胞外信使的作用。一般说来。G蛋白是一个三聚体结构,由alpha、beta、garma亚基组成,具有多种类型。 反常整流:也称为内向整流器,钾通道的一种,因去极化而关闭,只有在膜处于超极化并且大于静息电位时才开放,此时开放的钾电流为内向的,驱使膜电位趋向钾离子平衡电位。 快瞬性钾通道:也称早期钾电流,可被很小的去极化作用迅速激活和失活,特别是在一次动作电位之后。被超极化作用“去失活”而接通。 生长锥:神经元轴突和树突生长的末端被称为生长锥,它是一种高度能动的细胞结构特化形式,它的三个结构域是中央区、片状伪足和丝状伪足。其功能活动受细胞胞体(细胞内游离Ca2+ 浓度)和外部环境(神经递质、细胞外基质、细胞粘连分子)的调节。 先驱神经纤维:在神经束中轴突生长期间,发育期间形成较早,最早到达靶组织的轴突,是其他轴突发育为神经束的引路向导。

神经生物学专业.

神经生物学专业 一、研究方向 (一)疼痛与镇痛的神经生物学机制 (二)药物依赖与成瘾的神经生物学机制 (三)帕金森病的发病机制及治疗的分子生物学研究 (四)胶质细胞的激活及其与疾病关系的细胞分子生物学研究 二、课程设置 (一)学位课程 1.公共必修课:同培养方案总则 2.专业必修课 10学分 (1)专业及专业基础课 高级神经生物学 3.0学分 分子生物学工作基础 2.0学分 核酸的生物化学 2.0学分 组织化学 4.0学分从中选修 高级医学细胞生物学 2.0学分 7学分 分子免疫学 3.0学分 神经精神药理学 1.5学分 (2)本专业的经典理论著作或文献阅读 3学分 结合本专业经典理论著作或前沿研究成果论文报告,写出 读书报告或文献综述三篇,每篇1学分,由导师评定。 (二)非学位课程 13学分 1.相关学科理论与实验技术课 9学分 神经生物学实验 2.0学分 中枢神经解剖学 4.5学分 中枢神经系统发育可塑性 1.5学分 组织学实验技术 1.5学分 细胞培养技术 1.0学分 细胞分析与定量 1.5学分 高级生化实验 3.0学分 分子生物学实验 3.0学分 分子免疫学实验 1.0学分 生物医学中的电镜方法 2.0学分 2.方法课 1学分 信息技术在医学中的应用 2.0学分 医学文献检索 2.0学分 医学科研设计 2.0学分 3.进展课 1学分 神经科学进展 1.5学分 分子生物学进展 0.5学分 细胞生物学进展 2.0学分 免疫学进展 1.0学分4.自选课 2学分

人类疾病的分子基础 2.0学分 组织培养技术 1.0学分 实验核医学 2.0学分 基础免疫学 3.0学分 内分泌药理学 2.0学分 三、学术活动10学分 具体要求见总则。 四、资格考试 资格考试的具体要求按照《北京大学医学部攻读医学科学(理学)博士学位研究生资格考试办法》执行,其中专业综合考试中的相关学科应从本专业的主要相关学科里确定。 五、主要相关学科 生物化学与分子生物学、生理学、人体解剖学、人体组织胚胎学、药理学、生物物理学、免疫学、细胞生物学、遗传学、神经病学。

认知神经科学期末复习题及参考答案

《认知神经科学》期末复习 一、概论 1.什么是认知神经科学? [ppt]认知神经科学是阐明认知活动的心理过程和脑机制的科学。其研究模式是将行为、认知过程、脑机制三者有机地结合起来 [书]认知神经科学是在传统的心理学、生物学、信息科学、计算机科学、生物医学工程,以及物理学、数学、哲学等学科交叉的层面上发展起来的一门新兴学科,在分子(基因)、细胞、网络(神经回路)、脑区、全脑、行为等各个水平上对人类的所有初级和高级的精神活动的心理过程和神经机制—包括感知觉、运动、注意、记忆、语言、思维、情绪、意识等—开展研究。简而言之,它是研究脑如何创造精神的。 二. 方法: 2. 结构磁共振成像的空间contrast与功能共振成像的时间contrast 的概念 结构像的空间contrast:结构像一般认为是比较固定的,在短时间内不会变化,所以空间contrast是被试间某个脑区volume大小的contrast; 功能像的时间contrast:功能像在时间维度上是变化的,使用block design/event related design时,可以在被试内做时间上的experimental condition vs. baseline的contrast,当然在这之后也可以做被试间的两个时间上的experimental condition vs. baseline的contrast的contrast。 3. fMRI研究中的多重比较校正的概念。为什么需要做多重比较?常用的矫正方法有哪些(列举3个左右)?(答案1:在我们进行voxel-by-voxel比较时,由于比较次数很多,那么犯I型错误的数量也随之增加,如果还以只进行一次比较的α值为犯I型错误的概率的话,就会出现假阳性的结果,所以理论上比较次数大于1次的分析都应该进行多重比较校正。 另外,在fMRI数据分析中,我们相信脑的活动应该在灰质的一定范围内,而不是仅在一个voxel内,所以通过多重比较校正我们可以把这些单个的假阳性voxel排除。fMRI数据分析中常用的多重比较校正有FDR(false discovery rate),FWE(family-wise error)和AFNI提供的校正方法。) 4. 在磁共振成像中的血液动力学响应函数指的是什么? 血液动力学响应函数受区域性脑血流(rCBF)、血体积(rCBV)等的变化影响,是随着刺激出现从平稳状态先降低,再升高,再降低,最后恢复到平稳状态的一条函数曲线。 5. 什么是成像设备的空间分辨率与时间分辨率? 这两个分辨率都应该指设备进行功能成像的描述。 空间分辨率(Spatial Resolution)是指成像设备在什么空间水平上反映大脑活动的信号,也就是能在什么样的空间水平上分辨出不同的信号的变化,可以反映为突触级,神经元级,voxel级,脑回级等空间分辨率。 时间分辨率(Temporal Resolution)是指成像设备在脑活动后多长时间内能记录下活动信号,可以反映为毫秒(ms)级,秒(m)级,分钟(min)级,小时(h)级等时间分辨率; 空间分辨率:单细胞记录 > 颅内ERPs > 颅外ERPs、fMRI、PET。 时间分辨率:MEG、颅外ERPs > fMRI、TMS、PET。 6. BOLD-fMRI, NIRS, EEG/ERP这三种成像各自的特点是什么?哪两个之间可以同时记录,好处在哪里?

神经生物学考试重点整理版3

谷氨酸受体与突触可塑性—长时程增强(p307) 长时程增强L TP:给突触前纤维一个短暂的高频刺激后,突触传递效率和强度增加几倍且能持续数小时至几天保持这种增强的现象。 早期L TP: ?Ca/CaM依赖的蛋白激酶II(CaMKII) ?蛋白激酶C(PKC) 产生逆行信使(NO),促进突触前神经元递质的释放 CaMKII能触发在突触后膜上插入AMPA受体或增加谷氨酸受体通道的传导性?晚期L TP:3小时以上 ?蛋白激酶A(PKA)和胞外信号调节激酶(ERK)通路 ?需要有基因的转录和蛋白质的合成 ?(在谷氨酸突触传递过程中,AMPA受体和NMDA受体都会被激活 ?AMPA受体介导的快速反应 ?NMDA受体介导的较慢但持续时间长的反应 ?AMPA受体激活引起的去极化是移除阻滞在NMDA受体上的Mg2+所必需的?NMDA受体激活后,大量的胞外Ca2+进入细胞; ?由NMDA受体介导的神经递质传递较慢并且持续时间长) 胆碱能受体的分型、分布和作用机理

?烟碱型乙酰胆碱受体(上两个是外周神经系统,后两个是中枢的) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体

?儿茶酚胺的种类,合成途径(Tyrosine是酪氨酸)酪氨酸羟化酶(TH)多巴脱羧酶(DDC) 多巴胺-β-羟化酶(DBH)苯乙胺-N-甲基转移酶(PNMT)(a-左旋多巴,b-多巴胺,c-去甲,d-肾上腺素) ?

?5-HT的降解代谢途径 失活 5-HT释放后,主要通过膜转运体重摄取 酶解 重摄取: 5-HT膜转运体属Na+/CI-依赖型转运体 5-HT被膜转运体摄入胞浆再经囊泡 单胺类转运体进入囊泡内储存 酶解: 5-HT →MAO →5-HIAA 主要酶解失活途经 5-HT →MAO →5-MIAA 病理情况HIOMT (5-甲氧基吲哚乙酸) 5-HT →AANMT →N-甲基5-羟色胺 芳香烃胺氮位甲基移位酶(AANMT) 5-HT →HIOMT →N-乙酰基-5-甲基5-HT(松果体) 5-HT氮位乙酰转移酶(褪黑素melatonin)

神经生物学

神经生物学教学大纲(供基础医学、临床医学等专业使用) 四川大学华西基础医学与法医学院 组织胚胎学与神经生物学教研室 2006年5月

神经生物学教学大纲 一、课程基本信息 课程名称:神经生物学(Neurobiology) 课程号:50125530 课程类别:临床医学基础课,基础医学专业课 学时:48 学分: 3 二、教材:《医学神经生物学纲要》关新民主编科学出版社2003年 三、主要参考资料:《医用神经生物学基础》蔡文琴主编西南师范大学出版社2001年 四、成绩评定:期终考试,100分 五、教学目的:神经生物学是一门研究神经系统的结构和功能的科学。大脑的结构和功能是 自然科学研究中最具有挑战性的课题。近代自然科学发展的趋势表明,21世纪的自然科学重心将在生命科学,而神经生物学和分子生物学将是21世纪生命科学研究中的两个最重要的领域,必将飞速发展。分子生物学的奠基人之一,诺贝尔奖获得者沃森宣称:“20世纪是基因的世纪,21世纪是脑的世纪。” 在医学这个大的学科内,神经生物学是一门在各个水平,研究人体神经系统的结构、功能、发生、发育、衰老、遗传等规律,以及疾病状态下神经系统的变化过程和机制的科学。它涉及神经解剖学、神经生理学、发育神经生物学、分子神经生物学、神经药理学、神经内科学、神经外科学、精神病学等等。 神经生物学的内容非常丰富,研究进展很快,作为医学生不仅要全面掌握,还要及时了解新的研究进展。 本门课程是在学习了神经解剖学、神经组织学、发育神经生物学、神经生理学的基本内容之后,继续给学生介绍关于神经生物学更深入、更感兴趣、更新以及更接近临床实际的知识。 授课将不拘泥于教材,有的老师会结合自己的研究领域;有的以课题进展或综述的方式;有的介绍某一领域研究的历史和现状,特别是研究过程中偶然性和必然性的发现; 有的通过介绍实验方法或实验技术的方式;除了重大进展的意义,还会介绍研究中的挑战、困难和艰辛。会介绍不同的观点或学说,少讲定论性的知识。

神经生物学复习题

希望在全面复习的基础上,然后带着下列的问题重点复习 一、名词解释 神经元、神经调质、离子通道、突触、化学突触、电突触、皮层诱发电位、信号转导、受体、神经递质、神经胚、神经诱导、神经锥、感受器、视网膜、迷路、味蕾、习惯化、敏感化、学习、联合型学习、非联合性学习、记忆、陈述性记忆、非陈述记忆、程序性记忆、边缘系统、突触可塑性、量子释放、动作电位、阈电位、突触传递、语言优势半球、RIA、LTP、CT、PET、MRI、兴奋性突触后电位、儿茶酚胺、神经递质转运体、神经胚、半规管、传导性失语、离子通道、神经生物学、神经科学、免疫组织化学法、细胞外记录、EEG、突触小泡、纹外视皮层、半侧空间忽视、 二、根据现有神经生物学理论,判断下列观点是否正确?说明其理由。 1、神经系统在发育过程中,从神经胚到形成成熟的神经系统,其神经细胞的数 量是不断增多的。 2、在神经科学的发展过程中,西班牙的哈吉尔(Cajal)、英国的谢灵顿 (Sherrinton)和俄国的巴甫洛夫做出了杰出的贡献,并因此获得诺贝尔生理学或医学奖,其中哈吉尔主要是因创立了条件反射理论,谢灵顿主要是因创立神经元的理论,而巴甫洛夫主要是因创立反射(突触)学说。 3、神经元是神经组织实施其功能的主要细胞,但其数量在神经组织并不是最多 的。 4、海马的LTP与哺乳动物的学习记忆形成的机制有关。 5、神经系统的功能学研究方法和形态学研究方法是本质上不同的两种方法,因 此迄今尚没有办法把功能学和形态学研究结合起来。 6、一个神经元一般只存在一种神经递质或调质。 7、大脑功能取决于脑的重量。 8、神经肌肉接头处是一个化学突触。

9、Bernstein 的膜假说和Hodgkin等的离子学说均能很好地解释神经细胞静息 电位和动作电位的产生。 10、EPSP有“全和无”现象 11、抑制性突触后电位的产生与氯通道激活有关,而兴奋性突触后电位的产 生与钠通道激活有关。 12、视锥决定了眼的最佳视锐度(空间分辨率),视杆决定视敏度。 13、神经管的细胞不是神经干细胞,神经元及神经胶质细胞不能由神经管的 细胞转化。 14、哺乳动物特殊感觉的形成需要经过丘脑的投射,而一般感觉的形成则一 般不经过丘脑的投射。 15、语言的优势在大脑左半球,所以语言的形成与右半球无关。 16、在神经科学的发展过程中,一些实验材料的应用对一些神经生物学理论 的创立有重要的作用,其中海兔对乙酰胆碱作用的了解,鱼类的电器官对学习记忆机制的阐述,枪乌贼对细胞生物电离子学说的建立有重要的意义。 17、神经元是神经组织实施其功能的主要细胞,其树突和轴突分别有接受和 传出神经信息的作用。 18、REM睡眠与觉醒时脑电图相似,而这两个时期脑和躯体状态有明显的不 同。 19、采用脑透析术可引导脑的诱发电位。 20、ATP是神经系统中的一种神经递质或调质。 21、钾通道既有电压依赖性离子通道,也有化学门控性离子通道。 22、视觉的形成需要经过丘脑的投射,而听觉的形成则一般不经过丘脑的投 射。 23、裂脑实验证明大脑两个半球的功能既有对称性,也有不对称性。 24、典型的突触结构主要由突触前膜、突触间隙和突触后膜组成。 25、大脑皮层中央后回是运动代表区,中央前回是躯体感觉代表区。

神经生物学yu诺贝尔奖

与神经科学有关的诺贝尔奖项 在诺贝尔奖设立一百多年以来,神经科学已在神经元、神经活动、信号转导、感觉和知觉、脑的高级功能和神经发育等研究水平上取得了巨大成果,并获得了十多项诺贝尔奖。

其中1932年的诺贝尔生理学及医学奖颁给了英国的 C.S.Sherrington 和 E. D. Adrian ,奖励他们发现神经细胞活动的机制。他们通过研究膝跳反射,认为反射是神经系统的基本活动形式,并具有抑制和兴奋两个相互协同作用的过程;还发现肌肉的神经束是由运动和感觉两种神经纤维组成,提出了神经系统整合作用和“突触”的概念;且在神经纤维传导过程中记录到了电活动,即神经冲动。 其实,一个观点理论从提出到完善再到被大众接受都不是一蹴而就的,就如“突触”理论:1897年Sherrington在“突触”这一结构尚且观察的到的大背景下,根据已知的“中枢传导功能与神经干的传导功能是的区别,神经干双向传导,中枢却不行”这一理论,大胆提出“脊髓内的感觉神经传入与运动神经元之间存在着“突触(synapse)”,它起活门的作用,仅允许兴奋按一个方向传播”这一合理猜测。经过许多人的工作,到二十世纪初已经明确突触是有结构的。然后,1910年Sherrington在此基础上又进一步提出由于突触存在,神经脉冲不是随机地在神经细胞间传入传出,而是通过突触单向传导。随后关于中枢神经系统(脑和脊髓)的观点也被提出,它活动的特点是,在接受了诸多传入之后,要把它们整合起来,成为一个有意义的输出,这就是中枢整合作用,抑制在此起关键作用。在1950年代开始把电子显微镜应用于神经解剖研究的时候,这些终于得到了实验证实,并明确了经典的突触结构:由突触前部、突触间隙和突触后部三部分组成;突触前部和突触后部相对应的细胞膜较其余部位略增厚,分别称为突触前膜和突触后膜, 两膜之间的狭窄间隙称为突触间隙。在突触前膜部位的胞浆内含有许多突触小泡以及一些微丝和微管、线粒体和滑面内质网等。 但是,基础观点被提出后,研究绝不是止步于此,此后还有关于神经递质、电位变化、抑制性突触等的深入研究都在继续。随后观点不断完善精简:大脑神经元细胞之间相互连接形成突触结构(Synapse)从而使得神经信号在神经系统中能够快速准确的传递。突触前膜兴奋,其神经递质分子例如乙酰胆碱,谷氨酸,多巴胺,和γ-氨基丁酸被被释放后,进一步结合突触后质膜上的神经递质受体,从而激活下游的信号通路,使神经冲动在神经元之间传递。这种神经信号传导的方式保证了神经元之间的相互通讯,并且直接决定了我们的认知和行为,包括学习记忆。 之后有研究表明很多神经系统疾病也与突触功能紊乱有关,例如自闭症患者在某些时期突触的数量远多于正常人,而阿尔茨海默综合征的患者则是某些时期突触的数量远远低于正常水平。近年又有研究表明神经元作为肿瘤微环境的重要组成部分,可通过分泌突触蛋白,以神经元活动性依赖的方式促进胶质瘤恶性生长,即大脑内肿瘤细胞能与神经元形成兴奋性突触从而促进肿瘤生长;这一机制却无法以传统肿瘤信号通路充分解释。但这一研究开启了一个全新的方向,提示了靶向谷氨酸受体、突触形成和突触后信号通路途径可能成为降低脑肿瘤增生的重要治疗手段。 从提出“突触”的概念到观察到突触的结构,再到研究其工作原理与关系,之后又针对各类病症展开研究......一直到现在,关于突触的各类研究都还在继续。一个机制被发现、一个理论被提出后,还有许许多多由此发散的未知事情可以去探索。所以科研一步步发展,正是由于科研人观察仔细,能够剥茧抽丝、洞察先机,从而能够敏锐地发现各事件直接的联系,然后发掘真相,一步步研究得出结果。

大脑的奥秘——神经科学导论(期末考试答案)

一、 单选题(题数:50,共 50.0 分)
1
下列说法错误的是()。 (1.0 分)
1.0 分
?
A、
没有声音刺激时耳蜗会自发发生声波震动
?
B、
如果检测不到自发耳声发射,有可能外毛细胞功能出现问题
?
C、
在不打开大脑直接观察的情况下,不同的细胞类型,不同的通路位置的异常是无法检测到的
?
D、
传出神经纤维的活动会刺激外毛细胞,接着会改变外毛细胞机械特性会产生自发的声音发射
正确答案: C 我的答案:C
2
自主神经系统对心血管活动的调控中错误的是()。 (1.0 分)
1.0 分
?
A、
心脏受到交感神经和副交感神经双重调控,前者是兴奋作用,后者具有抑制作用
?
B、

当血压升高时,动脉管壁受到牵拉,交感神经会兴奋,血管会收缩
?
C、
动脉血压降低时,压力感受器传入冲动减少,迷走神经紧张性减弱,交感神经紧张性会加强,血管会收缩
?
D、
血压升高时,压力感受器传入冲动增加,迷走神经紧张性活动加强,心交感神经紧张性活动减弱,血管会 舒张
正确答案: B 我的答案:B
3
在小鼠关键期内进行过一次单眼剥夺实验,然后又使其恢复;同一只小鼠在关键期之外,再 进行一次单眼剥夺实验,它的可塑性变化为()。(1.0 分)
1.0 分
?
A、
由于在关键期之外,所以不存在可塑性
?
B、
可塑性增强
?
C、
由于在关键期内做过单眼剥夺实验存在记忆,当再一次进行时此类实验是可能达到相同效果
?
D、
可塑性减弱
正确答案: C 我的答案:C
4
关于情景记忆,不正确的说法是()。

15神经生物学研究的常用方法

1.神经生物学研究的常用方法 神经科学的发展与的研究方法的进步密切相关。总体上,神经生物学的研究 方法有六大类:形态学方法、生理学方法、电生理学方法、生物化学方法、分子 生物学方法及脑成像技术。 7.1形态学方法 神经生物学研究中常用的形态学方法有束路追踪、免疫组化和原位杂交,其 他还有受体定位、神经系统功能活动形态定位等方法。 7.1.1束路追踪法 追踪神经元之间的联系是神经解剖学研究中的重大目标,它对研究神经元的功能、神经系统的发育和成熟都具有重要意义。这种方法学的建立始于19世纪末的逆行和顺性溃变(顺行溃变指胞体或轴突损伤后的轴突终末的溃变,逆行溃变指去除靶区之后神经元胞体的溃变)研究。20世纪40年代主要手段是镀银染色法,根据变性纤维的形态变化来判断变性纤维。20世纪50年代发展了Nanta法,能遏制正常纤维的染色而仅镀染出变性纤维。但该法不易显示细纤维,1971年Kristenson等将辣根过氧化物酶(HRP)注入幼鼠的腓肠肌及舌肌结果在脊髓和延脑的相应部分运动神经元胞体内发现HRP的积累。不久LaVail正式使用HRP作为轴突逆行追踪,以后遂广泛应用于中枢神经系统的研究。HRP可被神经末梢、胞体和树突吸收,轴突损伤部分也可摄入。在胞体内,HRP的活性可持续4~5天,在溶酶体内对联苯胺呈阳性反应而显现出来。被标记的神经元可以清晰的显示胞体、树突及轴突。 除了HRP标记法,还有荧光物质标记法、毒素标记法、注射染料等方法。 7.1.2免疫组织化学 免疫组织化学术是应用抗原与抗体结合的免疫学原理,检测细胞内多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。这种方法特异性强,敏感度高,进展迅速,应用广泛,成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。近年随着纯化抗原和制备单克隆抗体的广泛开展以及标记技术不断提高,免疫组织化学的进展更是日新月异,不仅用于许多基本理论的研究,并取得重大突破,而且也用于疾病的早期快速诊断等临床实际。 组织的多肽和蛋白质种类繁多,具有抗原性。分离纯化人或动物组织某种蛋白质,作为抗原注入另一种动物体内,后者即产生相应的特异性抗体(免疫球蛋白)。从被免疫动物的血清中提取出该抗体,再以荧光素、酶、铁蛋白或胶体金标记,用这种标记抗体处理组织切片或细胞,标记抗体即与细胞的相应蛋白质(抗原)发生特异性结合。常用的荧光素是异硫氰酸荧光素(FITC)和四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC),在荧光显微镜下可观察荧光抗体抗原复合物。常用的酶是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP,从辣根菜中提取的),它的底物是3,3'-二氨基、联苯胺(DAB)和H2O2,HRP使DAB氧化形成棕黄色产物,可在光镜和电镜下观察。铁蛋白和胶体金标记抗体与抗原的结合,也可在光镜和电镜下观察。 标记抗体被检抗原的结合方式有两种。一是直接法,即如上述用标记抗体与样品中的抗原直接结合。这种方法操作简便,但敏感度不及间接法。间接法是将分离的抗体(第一抗体简称一抗)再作为抗原免疫另一种动物,制备该抗体(抗原)的抗体(第二抗体简称二抗),再以标记物标记二抗。先后以一抗和标记二抗处理样品,最终形成抗原一抗-标记二抗复合物。间接法中的一个抗原分子可通过一抗与多个标记二抗相结合,因此它的敏感度较高,而且目前国内外均有多种标记二抗商品供应,使用方便。间接法中较常用的是一种称之为过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物法(peroxidase-antiperoxidase complex

神经生物学实验指导

生物工程专业神经生物学实验指导 实验内容一:大鼠脑立体定位及帕金森病(PD)模型制作 目的要求:掌握大鼠脑立体定位仪的设计原理、基本结构、用途和正确使用;PD 模型制作要点和注意事项。 实验分组:4人/组 实验课时:5学时 实验用动物、器械和药品: 健康成年SD大鼠,体重200-250g,雌雄不拘;脑立体定位仪、水平仪、电吹风;麻醉药(0.4%戊巴比妥钠:戊巴比妥钠0.4 g,生理盐水100 ml);碘酒、酒精、生理盐水、蒸馏水;5或10ul微量注射器;手术器械,如手术刀、镊、止血钳等;大鼠脑立体定位图谱;6-羟基多巴胺(6-OHDA)溶液(按3ug/ul 配制,加Vc,即6-OHDA溶液1ml:将6-OHDA3mg,VitC0.2mg,溶于灭菌生理盐水,在1.5ml离心管中定容至1ml,分装后-20℃保存)。实验操作及注意点: 1.根据老师的讲解和指导,认识脑立体定位仪主要部件,即主框、电极移动架及动物头部固定装置(即固定上颌的结构和耳杆与耳杆固定柱)及用途。 2.脑立体定位仪的调试:摆稳定位仪,用水平仪测水平。检验电极移动架上各个轴向滑尺是否保持互相垂直,微量注射器针尖是否光滑垂直。检查定 位仪各衔接部位的螺丝有无松动。检查头部固定装置两侧是否对称。检查 耳杆使两耳杆尖端相对,以此判定耳杆固定的准确程度。然后,使两耳杆尖 端相对间隔1~2 mm ,前后移动固定有注射器的注射装置纵轴,使注射器的 针体向后移时,恰好通过两耳杆尖端之间的1~2 mm 间隙; 向前移时,恰 好与切牙固定架的正中刻线在一条直线上。 3.大鼠称重并麻醉(腹腔注射戊巴比妥钠,40mg/kg),动物麻醉不可过深或过浅,注意呼吸情况。抓取大鼠时要轻柔,防止抓咬伤。 4.鼠颅的固定:将麻醉大鼠置于脑立体定位仪上,鼠颅依靠两耳杆及切牙钩三点固定。在向外耳道内插入耳杆时,鼠眼球向外凸出。一旦进入鼓膜环 沟内,穿破鼓膜,则会发出轻微的“嘭”声,同时出现眨眼反射,眼球不再凸出,

神经生物学复习题2016

一、名词解释 神经元:神经系统结构和功能的基本单位,由胞体,轴突,树突组成。 神经调质:由神经元产生,作用于特定的受体,但不在神经元之间起直接传递信息的作用,能调节信息传递的效率、增强或削弱递质的效应的化学物质。 离子通道:是各种无机离子跨膜被动运输的通路。在神经系统中是信号转导的基本元件之一。 突触:一个神经元和另一个神经元之间的机能连接点。 化学突触:通过化学物质在细胞之间传递神经信息的突触。 电突触:直接通过动作电流的作用到达下一级神经元或靶细胞的突触。 皮层诱发电位:在感觉传入的冲动的刺激下,大脑皮层某一区域产生较为局限的电位变化。 信号转导:生物学信息(兴奋或抑制)在细胞间或细胞内转换和传递,并产生生物学效应的过程。 局部电位:能引起膜电位偏离静息电位而尚未达到阈电位的变化。 受体:能与配体结合并能传递信息、引起效应的细胞成分。它是存在于细胞膜上或细胞质内的蛋白质大分子。 G-蛋白偶联受体:在与激动剂结合后,只有经过G蛋白转导才能将信号传递至效应器,结构上由单一多肽链构成,形成7次跨膜结构的受体蛋白。 神经递质:是指由突触前神经元合成并在末梢处释放,经突触间隙扩散,特异性作用于突触后神经元或效应器细胞上的受体,引起信息从突触前传递到突触后的一些化学物质。 神经递质转运体:膜上将递质重新摄取到突触前神经末梢或周围胶质细胞中储存起来的功能蛋白。 神经胚:原肠胚的外胚层经过发育,经神经板、神经褶、神经沟,最后形成神经管,这就是神经胚的形成,经历上述变化的胚胎。 神经诱导:在原肠胚中,原肠背部中央的脊索与其上方覆盖的预定神经外胚层之间细胞的相互作用,使外胚层发育为神经组织的过程。 神经生长锥:神经元轴突和树突生长的末端。 先驱神经纤维:指在发育期间形成较早,最早到达靶组织的轴突,它们是其他轴突发育为神经束的引路向导。 感受器:把各种形式的刺激能量(机械能、热能、光能和化学能)转换为电信号,并以神经冲动的形式经传入神经纤维到达中枢神经系统的结构。 视网膜:视觉系统的第一级功能结构,可将光能转换为神经电信号。 光致超极化:光照引起感受器细胞超极化效应的过程。 视觉感受野:视觉系统中,任何一级神经元都在其视网膜有一个代表区,在该区内的化学变化能调制该神经元的反应,则称这个特定的视网膜区为该神经元的视觉感受野。视皮层功能柱:具有相似视功能的细胞在厚度约2mm的视皮层内部以垂直于皮层表面的方式呈柱状分布。 on-中心细胞:细胞的感受野对中心闪光呈去极化反应。 迷路:前庭器官和耳蜗共同组成极复杂的内耳结构。 行波:声波引起膜振动从耳蜗基部开始,逐渐向蜗顶传播。 本体感觉:指人和高等动物对身体运动的感觉。

神经生物学研究概论

神经生物学研究概论 生A0921 江名 23 摘要:神经生物学是生物学中研究神经系统的解剖,生理,神经生物学。病理方面内容的一个分支。神经生物学,21世纪的明星学科。从上个世纪90年代以来,世界科研强国加快了对神经生物学研究的投入。美国于1990年推出了“脑的十年计划”,接着欧洲于1991年开始实施“EC脑十年计划”,然后日本于1996年也正式推出了名为"脑科学时代计划"的跨世纪大型研究计划,计划在未来20年内投入相当的研究经费。这些研究工作虽然至今为止并没有在神经生物学领域取得重大进展,没有解开智力形成之迷,没有解开毒品上瘾之迷,没有解开老年痴呆治疗之迷,但却在潜移默化中推动了神经科学的发展,为本世纪神经生物学的腾飞打好了基础。 关键词:神经生物学研究进展展望 1.神经生物学的概念 神经科学是专门研究神经系统的结构、功能、发育、遗传学、生物化学、生理学、药理学及病理学的一门科学。大脑的结构和功能是自然科学研究中最具有挑战性的课题。近代自然科学发展的趋势表明,21世纪的自然科学重心将在生命科学,而神经生物学和分子生物学将是21世纪生命科学研究中的两个最重要的领域,必将飞速发展。在医学这个大的学科内,神经生物学是一门在各个水平,研究人体神经系统的结构、功能、发生、发育、衰老、遗传等规律,以及疾病状态下神经系统的变化过程和机制的科学。它涉及神经解剖学、神经生理学发育神经生物学、分子神经生物学、神经药理学、神经内科学、神经外科学、精神病学等等。神经生物学的内容非常丰富,研究进展很快,作为医学生不仅要全面掌握,还要及时了解新的研究进展[1]。 2.神经生物学的主要内容 神经生物学包罗了基础神经科学的诸多学科,并非若干传统学科简单和机械地组合,在传统神经科学的基础之上成长和发展起来的一门新兴的综合性的边缘学科。神经生物学的重点研究对象便是脑,脑是高等生物最复杂的器官,同时神经元几乎是最难培养的细胞。神经生物学的材料与生物学的其它学科一样,是动物,从低等的果蝇到高等的小鼠、人。神经生物学的研究方法同样离不开核酸的分析与蛋白质的分析,分子生物学的PCR、免疫组化、western blot也是神经生物学的主要研究方法。但是由于脑的特殊性,所以神经生物学研究还需要使用一些其他的方法、电生理法便是其中的一种,电生理是用电刺激的方法来研究神经回路、神经元在特殊生理条件下的反应。膜片钳是用于测量离子通道活动的精密检测方法[1]。神经细胞、神经网络的遗传与发育研究,自1993年ZieglgansbergerW和Tolle TR提出系统生物学方法研究神经疼痛(pain)的疾病机理以来,细胞信号传导网络与基因表达调控的系统生物学已经成为神经生物

2019级北大认知神经科学复习重点

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 2019级北大认知神经科学复习重点 2019 级北大认知神经科学复习重点一、名词解释 1. 神经元: 神经细胞是神经系统最基本的结构与功能单位,所以又将其称为神经元。 神经系统的一切机能都是通过神经元实现的。 神经元虽然在形态、大小、化学成分和功能类型上各异,但是在结构上大致相同,都是由细胞体、轴突、和树突组成的。 2. 突触是神经元之间发生联系的细微结构,由突触前膜(轴突末梢)、突触后膜(下一个神经元的树突或胞体)和突触间隙(前,后膜之间的缝隙)三个部分组成,突触间隙因突触的种类不同宽窄不一。 3. 中枢神经系统和外周神经系统 a 中枢神经系统由脑和脊髓组成。 b 外周神经系统由 12 对脑神经和 31 对脊神经组成,它们分别传递头部、面部和躯干的感觉与运动信息。 在脑、脊神经中都有支配内脏运动的纤维,分布于内脏、心血管和腺体中,称为自主神经或植物神经系统,它们维持机体的生命过程。 4. 脑的结构: 大脑: 1 / 11

大脑皮层、髓质、基底神经节间脑: 丘脑、上丘脑、下丘脑、底丘脑脑干: 中脑、桥脑、延脑小脑: 灰质、白质、深部核 5. 全或无规则是指每个神经元都有一个刺激阈值;对阈值以下的刺激不发生反应,对阈值以上的刺激,不论其强弱均给出同样高度的神经脉冲发放。 6. 神经递质与调质神经递质是一些小分子或中分子的化学物质,由突触前末梢释放。 越过突触间隙,作用于突触后膜。 神经调质作用于释放的神经细胞体或稍远的神经末梢,调节自身的生成和释放速度。 根据神经递质的化学结构,可将其分为如下几类: 胆碱类,单胺类,氨基酸类,肽类 7. 受体: 是蛋白大分子, 8. 脑的电现象第 1 页共 6 页脑的电现象可分为自发电活动和诱发电活动两大类,两类脑电活动变化都在大脑直流电位的背景上发生。 自发电活动记录就是脑电图(EEG) 9. 平均诱发电位: 20 世纪 60 年代以来,在计算机叠加和平均技术的基础上,对大脑诱发电位变化进行了大量研究.这种大脑平均诱发电位是一组复合波,刺激以后 10 毫秒之内出现的一组波称为早成分,代表接受刺激的感觉器官发出的神经冲动, 10~50 毫秒的一组称为中成分, 50 毫秒以后的一组波称为晚成分。

神经生物学实验指导书

神经生物学实验指导书 实验一 脑内重要神经核团和神经生物学研究方法简介 Methods for neuroscience research and nuclei in brain 1.实验目的 理解神经核团的概念,理解重要的神经核团;掌握脑立体定位图谱的使用方法;了解神经生物学研究的常用方法。 2.实验器材、试剂及实验材料 手术刀、毛剪、注射器, 1%戊巴比妥钠(Pentobarbital Sodium)、依文氏蓝(Evans Blue), 大鼠。 3.实验步骤 3.1脑的大致结构和重要神经核团 脑膜至外由内分别有:硬脑膜、蛛网膜、软脑膜,其下是大脑皮层,边缘系统等结构。重要的核团(神经内分泌相关的丘脑下部核团)有:PVN(室周核)、PeN (室旁核)、SON(视上核)、ME(正中隆起)、Hippocampus(海马)等。下表给出几个重要核团的大致范围,值得注意的是:核团在不同截面上的位置和形状是不同的,因此具体位置应查阅图谱。 神经核团距离前囟(mm)中心线两侧(mm)距脑背侧(mm) PVN(室周核)-1.0~-4.2 0.0~0.8 5.0~5.5 PeN(室旁核)0.0~-3.2 0.0~0.5 6.5~9.5 SON(视上核)0.0~-1.8 1.0~2.3 8.5~8.8 ME(正中隆起)-2.4~-3.4 0.0~0.5 9.5~10.0 Hippocampus(海马)-1.8~-6.2 0.5~6.3 3.2~8.0 3.2实验内容 a)戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠(40mg/kg); b)在颅骨前囟后3-5mm处打孔; c)用微量注射器吸入3μl依文氏蓝,注入大鼠背侧三脑室。 d)大鼠断头,除去颅骨,观察脑的结构。 George Paxinos and Charles Watson,The Rat Brain in Stereofaxic coordinates,Academic press,1986 4.江湾Ⅰ型脑定位仪的使用 6.1脑立体定位仪的原理 a)脑立体定位仪分为两大类:直线式和赤道式。

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