血小板功能实验评价及分析前的质量控制
凝血试验的质量控制

凝血试验的质量控制一、引言凝血试验是临床常用的一种检测方法,用于评估患者的凝血功能。
为了确保凝血试验结果的准确性和可靠性,质量控制是不可或缺的步骤。
本文将详细介绍凝血试验的质量控制标准格式,包括质量控制的目的、方法、数据分析和结果解释等。
二、质量控制目的凝血试验的质量控制旨在评估实验室的凝血试验方法和仪器的准确性和可靠性,确保患者结果的准确性和可比性。
通过质量控制,可以及时发现和纠正实验室操作中的偏差,提高凝血试验结果的可靠性。
三、质量控制方法1. 内部质量控制:实验室应建立适当的内部质量控制程序。
内部质量控制样品应包括正常范围内的低、中、高三个水平。
每日应进行内部质量控制样品的测试,以评估实验室仪器和试剂的稳定性和准确性。
2. 外部质量控制:实验室应参加外部质量控制项目,如国家或地区的质量控制组织提供的质量控制方案。
外部质量控制样品应定期进行测试,并将结果提交给质量控制组织进行评估。
通过与其他实验室的结果比对,评估实验室的凝血试验结果的准确性和可比性。
四、数据分析1. 内部质量控制数据分析:每日进行内部质量控制测试后,应记录测试结果,并进行数据分析。
根据内部质量控制样品的目标范围,计算每个水平的平均值和标准差。
使用西格玛规则或其他统计方法,判断测试结果是否在可接受的范围内。
2. 外部质量控制数据分析:参加外部质量控制项目后,实验室将收到质量控制组织提供的评估报告。
实验室应仔细阅读评估报告,比较实验室的结果与其他实验室的结果,评估实验室的凝血试验结果是否符合质量控制要求。
五、结果解释1. 内部质量控制结果解释:如果内部质量控制结果在可接受范围内,说明实验室的凝血试验方法和仪器的准确性和可靠性良好。
如果内部质量控制结果超出可接受范围,应进行问题排查和纠正措施,以确保凝血试验结果的准确性。
2. 外部质量控制结果解释:如果外部质量控制结果与其他实验室的结果一致,说明实验室的凝血试验结果与其他实验室的结果具有可比性。
凝血试验的质量控制

凝血试验的质量控制凝血试验是一种常见的临床实验室检查方法,用于评估患者的凝血功能。
准确的凝血试验结果对于临床诊断和治疗决策至关重要。
为了确保凝血试验结果的准确性和可靠性,质量控制是必不可少的。
一、质量控制的目的和意义质量控制是通过使用已知浓度的控制品,监测实验室的凝血试验结果的准确性和可重复性。
质量控制的目的是评估实验室的仪器、试剂和操作流程是否符合质量标准,以保证凝血试验结果的可靠性和一致性。
通过定期进行质量控制,实验室可以及时发现和纠正潜在的问题,提高凝血试验的质量。
二、质量控制的方法和步骤1. 选择合适的质控品:根据实验室所使用的凝血试验方法和仪器,选择适合的质控品。
质控品应具有稳定的性质和已知的浓度,以确保准确性和可重复性。
2. 制定质控计划:根据实验室的需要,制定质控计划,包括质控品的频率和浓度。
通常建议每天至少进行两次质控,一次在早班和一次在晚班,以覆盖不同的操作人员和时间段。
3. 进行质控测试:根据质控计划,按照凝血试验的标准操作流程,进行质控测试。
确保每次测试都按照相同的条件进行,包括试剂的使用量、温度和时间等。
4. 记录和分析结果:将质控测试的结果记录在质控记录表中,并进行分析。
比较实验室的测试结果与质控品的目标范围,评估实验室的凝血试验结果的准确性和可靠性。
5. 纠正和改进:如果质控结果超出了目标范围,需要及时采取纠正措施。
可以检查仪器的校准状态、试剂的储存条件和操作流程等,找出问题的原因,并采取相应的改进措施。
三、质量控制的指标和评价1. 质控品的目标范围:根据凝血试验的参考范围和实验室的要求,确定质控品的目标范围。
通常使用均值和标准差来表示目标范围,例如,对于凝血酶原时间(PT),目标范围可以是均值加减2个标准差。
2. 质控结果的统计分析:通过对质控结果进行统计分析,可以评估实验室的凝血试验结果的准确性和可靠性。
常用的统计指标包括均值、标准差、变异系数等。
3. 质控图的使用:可以使用质控图来监测质控结果的变化趋势。
血小板功能分析试验中文解说

血小板功能分析試驗中文解說介紹血小板功能檢測因科技及樣本不易處理之故,而長期被忽略其在臨床上的重要性。
近年來有科學家利用Shear-Flow rate原理,於體外模擬血管受傷後血小板黏附和凝集過程,其只需一管含抗凝劑的血液就可以使血小板功能檢測在體外利用儀器真實的操作並取得分析結果。
如此可以使醫師對病患的血小板功能(Primary Hemosatsis Capacity)多一份瞭解,以幫助其在臨床上的治療。
關於PFA的適用的範圍如下:PFA的適應症:1.類血友病(vWD)及血小板功能障礙篩檢。
2.DDAVP在第一型類血友病患者之治療評估。
3.阿斯匹靈之治療評估。
4.術前之出血危險評估。
健保局於2008年5月1日通過08018C、08019C:出血時間(Bleeding Time)08069C :血小板凝集試驗(Platelet Aggregation test)PFA的適用範圍說明:阿斯匹靈<Aspirin>是心臟內科與神經內科的常用藥品,其主要功能在抑制Thrombaxne generation,使血小板的凝集功能降低使保護血管再次栓塞。
長久以來臨床的經驗發現約有25~45%的病患對阿斯匹靈有所謂的Non-responding的現象,但一直無理想的檢驗工具來協助。
同時經過國內及本科的研究發現在國人也有相同的情況,並以PFA作為評估工具與Mark J. Alberts, Alan D. Michelson, Armin J. Grau, Jacek Golan´ski, Kjell Andersen等人研究發現相同8 9 10 11,既Col/EPI對ASA-induced platelet dysfunction非常敏感,所以在臨床上PFA被建議可以用於阿斯匹靈的用藥評估。
Patrono對阿斯匹靈阻抗(無反應)的定義:Aspirin resistance:Definition, mechanisms and clinical read-outsC. Patrono, Journal of Thrombosis and Haemostasis 2003Inability of Aspirin to1.Protect individuals from thrombotic complication.2.Cause a prolongation of bleeding time.3.Inhibit thromboxane(TX) biosynthesis.4.Produce an anticipated effect on one or more in vitro tests of plateletfunction.優於血時間(Bleeding Time):根據Dr. Paul Harrison, Dr.Carcao1等人自1998年起的研究與觀察,確認除極為罕見的血管異常外,PFA在疾病的敏感性上明顯優於出血時間(BT),與血小板凝集試驗相關性達86%以上2。
血小板分析的误差与控制

疫 缺 陷 病 毒 ( V) 体 试 剂 盒 由 艾 康 生 物 技 术 ( 州 ) 限 公 HI 抗 杭 有 司提 供 , 型 肝 炎 病 毒 ( V) 体 由 英 科 新 创 ( 门 ) 技 有 丙 HC 抗 厦 科 限 公 司 提 供 , 为胶 体 金 法 , 格 按 照 试 剂 盒 说 明 书 操 作 。 阳 均 严
1 资 料 与 方 法 11 一 般 资 料 . 本 院 21 0 1年 1 7月 门诊 或 住 院 需 胃镜 检 查 ~
患纠纷 , 因此 胃镜 前 3 指 标 的 检测 可 以 了解 患 者 就 医 前 的状 项 况 , 过 原 始数 据 和 记 录 档 案 , 以 充 分 保 护 医 患 双 方 的权 益 , 通 可 对 减 少 和杜 绝 医 源 性 传 播 疾 病 而 引 起 的 医 疗 纠 纷 具 有 的 重 要
进 行检 测 。结 果 HB Ag阳性 率 7 0 , s . HCV 阳性 率 0 4 , V 阳 性 率 0 2 。 结 论 胃镜 前 3项 指 标 血 液 .4 HI .1
筛 查 不 仅 对 患者 与 医务 人 员 自身 有 益 , 别在 减 少 医疗 纠 纷 , 少或 防 止 医 院 感 染 方 面 有 重要 意 义 。 特 减 【 键 词 】 胃镜 ; 乙型 肝 炎病 毒 表 面抗 原 ; 丙型 肝 炎病 毒 ; 人 类 免 疫 缺 陷病 毒 ; 医院ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ感 染 关
DOI 1 . 9 9 j is . 6 2 9 5 . 0 2 0 . 4 文 献 标 志码 l 文 章 编 号 : 6 29 5 ( 0 2 0 7 9 0 : 0 3 6 /.sn 1 7 —4 5 2 1 . 6 0 1 B 17 4 5 2 1 )60 l-1
影响分析前质量控制主要因素

影响分析前质量控制主要因素为保证临床检验质量,必须做到全过程质量控制,即对实验检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。
这包括:分析前、分析中和分析后三个阶段的质量控制,其中分析前质量控制是全面质量控制的前提。
国内外均有报道,检验结果误差中 70%左右来自分析前,而且分析前误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。
因此,必须做好分析前质量控制。
1.患者和标本采集者准备标本采集的类型依所分析的物质而定。
标本采集前患者的状态和医护人员的医疗活动对检测结果有一定的影响。
许多非疾病因素,如是否空腹、精神状况、体力活动、使用药物、输注液体、溶血、脂血、胆红素血等都可能影响检验结果,导致分析结果与被测物真实浓度不符。
1.1.血样采集时间:个体的血液成分在 1 天内的不规则的变化必须与个体的生理节律相鉴别。
后者是 24h 内有规律的反复出现的特定现象。
时区改变时,常常出现生物节律的改变,如穿越经线,机体需要 6-8h 去适应新的时区。
并不是所有的人都出现昼夜节律和生物节律的改变(如在早晨常有几分钟的皮质醇的改变)或血液成分在较长时间内发生变动。
个体间的变化、生理节律和长期的变动只在纵向检测时有意义。
在横向检测中,因为有参考值范围,所以这些改变没什么意义。
在每日的不同时间,铁浓度都有明显的变化,在下午的变化最大。
而皮质醇、肾上腺素和去甲肾上腺素在早晨的变化最大,肾素、醛固酮、生长激素和甲状旁腺素在晚上的变化最大。
皮质醇(Corisol)在晨8 点左右皮质醇值达到峰值,随后逐渐降低,午夜最低,因此上下午所测定之值可能会有明显差异,最好于上下午各采血一次。
醛固酮检测要在起床活动前取卧位血,起床后活动 2 小时取立位血。
促甲状腺刺激激素(TSH)在每日不同时辰,其浓度也会出现若干变化。
1.2.姿势:从仰卧位到直立位的过程中,大约 8%的体内水由血管进入间质组织中,而血液中细胞、蛋白、蛋白结合物等成分不能通过血管壁转移,使其血浆含量升高 5%-10%。
血小板功能检测分析前影响因素分析

血小板功能检测分析前影响因素分析血小板功能检测目前金标准方法为LTA(光学透射比浊法)法,其检测原理为将诱发血小板凝集的物质(ADP、胶原蛋白、肾上腺素、花生四烯酸等)添加到富血小板血浆(PRP:Platelet Rich Plasma)中。
以乏血小板血浆(PPP:Platelet Por Plasma)的浊度为基准设为100%,将PRP的透光度上升量表示为波形,求出最大凝集率。
检测前由于血浆中存在血小板,通过透射光时透过率低,但形成凝集后透光度就会上升,通过监测前后透光率的变化来判断血小板聚集能力。
在实验过程中偶尔听到操作老师反馈血小板聚集检测结果为负数或结果稳定性不好,其中很大原因与标本前处理关系比较大,以下逐一分析血小板聚集分析前的影响因素。
ONE采血前准备GOOD TO NEW建议患者空腹静息状态抽血,前餐避免高脂食物摄入,采血前2h 内禁饮咖啡或含咖啡因饮料,采血前30min内禁止吸烟;同时,建议患者采血前2h内避免剧烈运动。
由于不同的抗血小板药物在体内达到稳定剂量的时间不同,进行血小板功能检测的采血时机应有所区别。
氯吡格雷和阿司匹林建议在稳定给药至少2d后采血,替格瑞洛建议在给药后至少24h采血,西洛他唑建议在稳定给药至少3d后采血。
药物或膳食成分影响:•1)应在采血前完成由护士或患者所在科室记录受试者服用的所有药物,在解释血小板聚集结果时,临床检验实验室应考虑这些药物对血小板功能的影响;•2)可能影响血小板聚集率的药物:如阿托品、氢化可的松、阿司匹林、双嘧达莫、肝素、双香豆素、普萘洛尔、呋塞米、β内酰胺类抗生素等药物,以及丹参、红花、三七、银杏叶、水蛭类等中药制剂;•3)可能影响血小板聚集率的膳食成分:包括水溶性番茄浓缩物、可可黄烷醇、维生素E、鱼油等。
文献查阅发现年龄和经期、妊娠等生理因素均会对血小板功能产生影响,在分析结果时需综合考虑。
TWO采血管及采血针GOOD TO NEW采血针19-21号,含有3.2%枸橼酸钠抗凝剂的塑料试管,按1:9的比例采血。
血站机采血小板的全面质量管理分析
血站机采血小板的全面质量管理分析摘要:随着输血医学的发展,我国临床输血出现了对血液数量、品种和质量不断提升的需求,对成分输血比例的要求也不断增加。
机采血小板作为重要的血液成分之一,其采集质量关乎受血者的生命安全。
它较之传统手工分离的浓缩血小板而言具有纯度高、疗效好、副作用小和节省血液资源等优点,对临床疾病治疗有重要意义。
本文以血站血小板采集流程内容为着眼点,对机采血小板采集的全面质量管理进行探究。
关键词:血站;机采血小板;全面质量管理;分析我国血液需求量近年来普遍增加,被用于各类疾病治疗。
在这一背景下,血站加强了血液采集整体要求,血小板采集水平有了进一步提升。
大部分血站已开展机采血小板业务,利用其血小板浓度高,质量好,满足各类患者疾病需求。
为了更加科学合理地进行血小板采集工作,需要积极开展全面质量管理,通过全方位,科学化,实用化的管理方式,进一步提升机采血小板采集水平,达到持久有效提升我市血站为临床服务的能力。
1.机采血小板基础管理1.1 科学管理机采血站在机采血小板采集过程中,需以计算机控制为主导,用人为设置相关参数进行控制,利用计算机掌握机采血小板献血者基本信息,并且制定相关安全措施,防止采血人员以及献血者出现感染或者血液受到污染,同时单独设置配置有消毒设施的机采血小板房间。
1.2保持机采室符合采血环境要求机采血小板采集过程中,需要保持机采房间内的整体环境卫生。
保证室内温度、湿度符合要求,并且定期对采血室进行消毒,控制空气中菌落的数量及浓度。
在机采室内,设置有空调、电视等设施,在一定程度上保持献血人员心情愉悦,身体放松,进一步改善献血者的恐惧心理,增加采集成功率。
1.3建立健全机采制度在机采血小板采集过程中需要对采血人员进行培训,让其全面掌握机采血小板的操作规程,对采集过程中使用的血细胞分离机及时维护,保证它的使用功能正常[1]。
采集过程中要使用国家食品药品监督管理局注册并批准的相关辅助性材料,加强机采血小板工作人员与各个部门的协调沟通,实施岗位责任制,相关负责人需全面做好机采血小板前的各项准备工作,保存前来献血人员的信息,比如姓名、电话、性别、血型、血源编号以及联系方式。
机采血小板的质量控制
血小板是重要的血液成分,在凝血等生理活动中发挥了重要作用。
机采血小板是获得血小板的重要方式,很多人对其过程了解较少。
什么是血小板?血液是由很多种成分构成的混合物质,血小板是其中重要的组成部分之一,主要作用为凝血和止血。
血小板的寿命较短,一般可以存活7~11天,身体每天都有大量的血小板被淘汰,并会对血小板中的有效成分进行收集,再次制造新的物质。
同时,新生的血小板也会源源不断进入血液,以保持一定的血小板浓度,避免出现凝血功能障碍。
血小板突然减少或增多可引起很多疾病,因此在临床检查中,医生会对患者的血小板水平进行监测,如果出现过少时需要补充血小板,防止患者因大出血而死亡。
什么是机采血小板?机采血小板就是利用细胞分离机,在密闭环境内将血液中血小板分离出来的过程。
采集前,对捐献者的手臂局部进行消毒,然后穿刺,通过一次性的管道将血液引到分离机内。
分离机会分离出一种血液成分及血小板,其他血液会通过管道再次回输到人体内。
机采血小板获得的血小板,可为临床治疗提供重要的成分血,对于只需要补充血小板的患者,仅输注血小板即可,可减少血制品的消耗,节约临床用血。
为什么要捐献血小板?目前,还没有可靠的血小板代替物质,因此需要无偿献血时采集血小板,以满足临床需求。
健康人血液中的血小板非常充足,一次血小板捐献完成后,约72小时,人体就可以将血小板恢复到采集前水平。
由此可知,捐献血小板不会影响血小板水平和人体健康,但是每次捐献时间需要间隔半月以上。
每次采集血小板的量以治疗单位计算,一个成年人一次可以捐献1~2个单位的血小板,一个单位血小板的采集时间约为35分钟,捐献者完成血小板采集后多无明显不适感,可以正常工作和生活。
如何进行机采血小板质量控制?当前,机采血小板已经形成了规范的采集流程管理体系,但仍存在一些潜在因素影响血小板采集质量。
因此,工作人员要对机采血小板进行严格的质量控制,以保证捐献者的安全和血小板采集的质量。
采集前严格筛查与登记机采血小板之前,既要保证捐献者无健康问题,又要保证其身体健康不受影响。
血小板计数质量控制
血小板计数质量控制血小板计数是临床常规检查项目之一,对于评估患者出血和凝血功能状况具有重要意义。
然而,由于血小板数量少、大小不规则等特点,其计数过程容易受到干扰,因此需要严格的质量控制措施来确保测试结果的准确性和可靠性。
本文将介绍血小板计数的质量控制方法,以期提高检验结果的准确性和临床应用价值。
一、实验室环境质量控制实验室环境的干净整洁对于血小板计数结果的准确性至关重要。
首先,实验室应具备良好的通风设施,保持空气流通,避免尘埃等污染物质进入实验室;其次,实验室操作台面和仪器仪表应保持清洁,定期消毒,以防交叉感染的发生;最后,实验室工作人员应做好个人防护,佩戴手套、口罩等防护用具,保证实验过程的洁净。
二、仪器设备质量控制血小板计数通常采用自动化血液分析仪进行,因此对仪器设备进行定期维护和校准是保证测试结果准确的关键。
操作人员应按照仪器说明书的要求,定期进行内部标定和外部质量控制检测,确保仪器的准确性和稳定性。
同时,定期对仪器进行检查和清洁,及时更换耗材和试剂,有效延长仪器的使用寿命。
三、标本采集与保存质量控制血小板计数的标本采集和保存也是影响结果准确性的关键环节。
在采集血液标本时,应注意选择适当的采血管和采血针,避免溶血和血栓的形成;同时,采血过程中要注意采血技术,避免空气污染和细菌感染。
采集血液标本后,应立即送至实验室进行处理,避免标本失真或凝块的产生。
对于需要保存的血样,应采用合适的保存方法和条件,确保样本质量完好,避免冰冻过程中的细胞破坏。
四、内部质量控制与外部比对内部质量控制是实验室对自身测试结果的监控和评价,通过每日运行质控品,跟踪仪器的运行性能和测试结果的稳定性。
同时,实验室还应定期参加外部质量评价和比对,与其他实验室共同参与同一标本的检测,以验证自身测试结果的准确性和可靠性。
在出现异常结果时,实验室需要及时处理,找出问题并采取纠正措施,确保后续检测结果的准确性。
在血小板计数质量控制方面,实验室人员需要高度重视,严格按照相关规范和标准操作,确保测试结果的准确性和可靠性。
血细胞分析仪计数血小板的影响因素及其质量控制
世界最新医学信息文摘 2017年 第17卷 第39期111投稿邮箱:zuixinyixue@·医学检验·血细胞分析仪计数血小板的影响因素及其质量控制田前进 (大同市新荣复康医院 检验科,山西 大同 037000)0 引言血小板的形成是由于骨髓巨核细胞的细胞质脱落而导致的,其属于所有血细胞中体积最小的细胞,没有细胞核,并且还能够维护人体的健康。
此外,血小板还具有极好的聚集、黏附功能,对于止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成等生理和病理的过程中起到一定的作用。
同时其还能够有效参与机体的自行止血、凝血的过程。
但是,由于血小板的自身容易遭到破坏,从而导致其在进行血细胞分析仪的诊断时,容易受到各种因素的干扰,如(服药、试剂质量、采血质量等),最终致使血红细胞仪分析诊断失败,因此,为使检测的准确性得到保障,在进行检测时一定要注意好质量的控制[2]。
我院选取了62例普通患者进行观察,以血细胞分析仪计数血小板的影响进行分析研究,详细报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料。
将2015年9月至2016年9月在我院接受治疗的普通患者62例作为本文的观察对象,有女性30例,男性32例,患者年龄最大为72岁,最小为40岁,平均年龄(53.15±3.18)岁。
1.2 方法。
1.2.1 检测方法:所有患者在入院后全部进行静脉采血2ml,放置于抗凝管中,而后送去检测。
首先,将叶酸铵与血液按照比例1:20进行稀释,然后,对于血液标本中的血小板计数采用SYSMEX 2000i 细胞分析仪进行检测,检测完成后,对血小板计数进行观察并记录。
血小板计数正常参考值为100-300×109/L。
1.2.2 影响因素:采用医院自制的调查问卷,其中包括患者的病情情况以及对于检测有可能产生影响的因素等。
该调查由主治医师执行,在患者住院期间进行,当场发放当场收回,从而使信息的及时性、有效性得以确保。
1.3 统计学处理。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
13 Zhou D,Kusnecov AW,Shurin MR,et al. Exposure to physicaland psychological stressors elevates plasma interleukin 6:relationship to the activation of hypothalamic-pituitary-adrenal axis [J]. Endocrinology,1993,133(6):2523-2530.14 Tan KS,Nackley AG,Satterfield K,et al. Beta2 adrenergicreceptor activation stimulates pro-inflammatory cytokine production in macrophages via PKA- and NF-kappaB-independent mechanisms [J]. Cell Signal,2007,19(2):251-260.15 Raynor DA,Pogue-Geile MF,Kamarck TW,et al. Covariation ofpsychosocial characteristics associated with cardiovascular disease: genetic and environmental influences[J]. Psychosom Med,2002,64(2):191-203.16 Rebollo I,Boomsma DI. Genetic analysis of anger:geneticdominance or competitive sibling interaction[J]. Behav Genet,2006,36(2):216-228.17 Cloninger CR. A unified biosocial theory of personality and its role inthe development of anxiety states[J]. Psychiatr Dev,1986,4(3):167-226.18 Service HM,Hintsanen M,Hintsa T,et al. Does neuregulin-1 playa role in Type A behavior?The cardiovascular risk in young Finnsstudy[J]. Behav Brain Funct,2008,4:40.19 Surtees P,Wainwright N,Khaw KT,et al. Inflammatorydispositions:a population-based study of the association between hostility and peripheral leukocyte counts[J]. PAID,2003,35(6):1271-1284.20 Novoselova EG,Khrenov MO,Cherenkov DA,et al. The role ofTLR4 receptor in the stress response of lymphocytes[J]. Biofizika,2008,53(3):457-461.血小板功能实验评价及分析前的质量控制Evaluation and pre-analysis quality control on platelet function tests李祖兰1,杨亮程2,陈兴明3,夏吉成3,白小军3,许永杰3,周维军4,李 平5,丛玉隆1 综述1解放军总医院 南楼检验科,北京 100853;2总装备部黄寺门诊部,北京 100120;3解放军306医院 检验科,北京 100101;4总装后勤部苇子坑门诊部,北京 100101;5中生北控生物科技股份有限公司,北京 102200摘要:血小板功能实验包括出血时间、血小板功能分析仪-100、血小板聚集、腺嘌呤核苷酸类测定和流式细胞术等。
除了更好定位新实验如血小板功能分析仪、血栓弹力图的作用,更注重老方法如血小板聚集的标准化和优化。
本文就目前采用的血小板功能实验优点、缺点以及它们可用的临床条件进行综述,以期为建立血小板功能检验全面质量管理体系提供参考。
关键词:血小板;血小板聚集;质量控制中图分类号:R 446 文献标识码:A 文章编号:1005-1139(2011)02-0196-04血小板功能试验是临床检验中常用的项目之一,对心脑血管病的诊断和治疗有重要价值。
但由于实验方法学、检测仪器与试剂、质量控制措施、操作人员素质等多方面的影响,临床工作中获得准确、有意义的血小板功能试验结果比较困难。
对血小板功能实验进行评价及分析前质量控制方面的探讨,对改善血小板功能试验和血小板功能检验全面质量管理都很有意义。
在静脉穿刺、抗凝、标本运输和实验室处理过程中减小对血小板的影响是很重要的。
受检者禁食、烟、酒12h,1周内不服阿司匹林类药物,3d不服影响血小板功能的药物;注意年龄和经期、妊娠等生理因素的影响;压脉带压力适度,采血针头至少21号,静脉穿刺且血流顺畅,弃去前2ml血,用塑料试管或硅化玻璃试管或注射器,抽血后立即与抗凝剂轻轻混合,红细胞压积在25%-55%时,3.8%枸橼酸钠与血液比例为1∶9,压积超过这范围时,应调整抗凝剂与血液之间的比例;标本置于室温,最好在采血后2h内进行测试,最长不宜超过3h;掌握好离心的条件,所得的PRP量以占1/4-1/3为佳;检查试管标本是否过满或不足,避免对标本进行不必要的操作[1-3]。
不推荐用真空系统采集血样,因为真空通过加大剪切力和增强对低剂量ADP 反应性而易于致血小板活化,血样必须加盖以防血液的pH 值发生变化,影响测试。
以下对目前采用的各血小板功能实验优点、缺点以及它们可用的临床条件分别进行综述。
1 出血时间出血时间在1901年由MILIAN第一次阐述,第二次是在1910年由DUKE表述。
但随着使用越来越广泛,其重复性、敏感性和特异性差也越来越明显。
例如,约有50%血管性血友病(vWD)患者出血时间正常[4]。
单从技术角度看,出血时间受邻近温度较低的皮肤、剧烈运动、压脉带压力的差异(IVY技术)、过度焦虑、切口的方向和过度擦拭切口的影响[5]。
1998年,《外科档案》一篇有分量的文章主张反对用出血时间作为常规筛选项目[5]。
出血时间不再被认收稿日期:2010-06-21 修回日期:2010-07-21基金项目:军队“十一五”项目(42412172)The 11th Five Years Programs of Chinese PLA(42412172)作者简介:李祖兰,女,硕士,主管技师。
研究方向为血小板功能试验分析前质量控制。
Email: lzlan5@通信作者:丛玉隆。
Email: yulongc@为是合理的术前筛选试验,而很大程度由PFA-100代替了。
2 血小板功能分析仪-100由于出血时间的局限性,其他一些体内外实验发展起来,其中PFA-100可能应用最广泛。
在1985年,Kratzer和Born设计了Thrombostat 4000,该仪器在高剪切力情况下刺激血小板黏附和聚集。
枸橼酸全血通过一软片上的小孔吸入,软片上附有浸有胶原、肾上腺素混合物或胶原、ADP 混合物的薄膜,血液与这些诱导剂接触导致血小板黏附、聚集和活化,最终导致小孔闭塞和血流停止。
此过程所需时间被称为封闭时间[6]。
封闭时间受一些因素影响,包括血小板计数、血细胞比容、血小板受体1b和Ⅱb/Ⅲa、vWF和昼夜变化[7-8]。
血小板计数在100×109/L以下和封闭时间之间有线性关系[9]。
有正常血小板功能,血小板计数降低至50×109/L以下,封闭时间才会延长。
当血细胞比容低至25%时封闭时间通常也会延长,低于10%检测不出来。
抗体封闭糖蛋白Ⅰb或Ⅱb/Ⅲa也会相应延长封闭时间。
妊娠会缩短封闭时间,特别是第六个月和第九个月,在分娩开始就回到基线值[10]。
仪器每天进行质控检测,确保血标本采集质量、抗凝和检测卡片批间差异,每个实验室应该用正常人血标本建立自己正常参考范围。
其他先进血小板功能试验包括锥形板血小板分析仪(CPA)和全自动商业形式仪器IMPACT。
3 血小板聚集血小板集合度测定是Born和O'Brien在1962年独立发展起来的,已被公认为评价血小板功能的金标准。
血小板黏附,聚集和分泌用该技术评价[11]。
光比浊发血小板聚集测定就是将一系列能引起血小板聚集诱导剂加入富血小板血浆,再用分光光度计来测定。
目前比浊法血小板聚集用得最多,但易受以下因素的影响:1)实验前先开机预温到37℃,然后用蒸馏水校准测试仪器是否在正常测试状态;2)标本采集及抗凝影响:同前。
枸橼酸钠抗凝标本AA诱导血小板聚集率与肝素抗凝相当,ADP 诱导聚集比肝素抗凝低(P<0.05),EDTA抗凝标本血小板几乎不聚[12];3)标本因素:溶血、脂血和黄疸,轻度使血小板聚集率降低,重度导致实验失败;4)标本离心的速度和时间影响:标本离心的速度和时间关系着富血小板血浆(PRP)中的数量和质量,目前各文献报道转速在500-1 000r/min,时间在5-10min;贫血小板血浆(PPP)制备:3 000-4 000r/min,时间在10min左右;5)PRP保存的条件及时间:PRP置于室温(20℃-25℃),试管加盖,必须在采血后3h、分离PRP后2h内完成检测[1];环境温度过高(34℃以上)标本易老化致血小板聚集率降低,温度过低(冰箱4℃),血小板冷凝集致聚集率假性升高[13];6)血小板密度:PRP中的血小板密度对血小板聚集有影响,聚集的强度和速度随血小板数增加而增高,250×109/L作为测试浓度比较合适,<150×109/L聚集明显下降[14];7)诱导剂制备:外源血小板诱导剂包括ADP、肾上腺素、胶原、花生四烯酸、凝血酶、酸性黏多糖、凝血酶和瑞斯托霉素。
常用诱导剂包括ADP、AA、胶原。
诱导剂配置后带盖小离心管按日需量分装冻于-50℃或温度更低冰箱,忌反复冻融;ADP、肾上腺素和酸性黏多糖对血小板有相互促进聚集的协同作用,用这3种诱导剂组成复合诱导剂可明显提高血小板聚集率[15];8)钙离子的影响:在钙浓度<33.66mmol/L,血小板聚集率随钙离子浓度的增高而增高,≥39.00mmol/L时,10分钟血小板聚集率明显降低[16];9)pH值的影响:一般文献报道PRP的正常范围6.8-8.5,当血浆标本偏酸时,肾上腺素诱导聚集受抑制;10)药物干扰:许多药物如阿司匹林、潘生丁、肝素、双香豆素、维生素E、心得安、速尿、黄连素等以及丹参、红花类活血化淤中药,还有食物西红柿汁等,有不同程度地抑制血小板的聚集、释放作用,使血小板集聚率下降。