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病毒学VirologyPPT课件

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(二)病毒纯化的方法
1,病毒纯化方法的依据
(1)病毒颗粒具有一定的大小和密度,在离 心 场中能以一定的沉降速率沉降
(2)病毒颗粒的主要化学组成为蛋白质
2.病毒纯化的方法 包括:超速离心,沉淀法,凝集技术,液态两
相分配系统,有机溶剂萃取,层析和电泳等
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三、病毒的测定(assay of vrvuses)
病毒感染细胞培养引起的细胞显微表现的改 变,如细胞聚集成团,肿大、园缩、脱落、 细胞融合形成多核细胞、细胞内出现包涵体 (inclusion body),乃至细胞裂解等
(3)植物病毒-坏死斑或称枯斑 (necrosis spot)
植物病毒感染敏感植物叶片所形成的局部 病损区域.
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(四)盲传(blind passage)
噬菌体(bacteriophage) 噬蓝绿藻体(cyanophage) 支原体噬菌体(mycohasmemaphage)
植物病毒 (Plant Viruses)
植物病毒(plant viruses) 噬藻体(phycophage)
真菌噬菌体或真菌病毒(mycophage)
动物病毒 (Animal Viruses)
(三)病毒存在的认定 1、系统症状
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2、局部反应
(1)噬菌体—噬菌斑(plaque) 噬菌体感染生长在营养琼脂平板上的细菌所形 成的,具有一定大小和形状的透明区域。
(2)动物病毒—蚀斑或称空斑(plaque) 动物病毒感染单层细胞培养所形成的局部病损 区域,系由病毒的致细胞病变作用所引起.
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致细胞病变作用(Cytopathic effect , CPE) :
原生动物病毒(protozoal viruses) 无脊椎动物病毒(inverteble viruses)

病毒学概述ppt

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相关因素 :病毒毒力弱、机体防御能力强
病毒仍可在体内增殖并向外界播散病毒 ,可成为重要的传 染源。隐性感染者虽不出现临床症状 ,但仍可获得免疫力而终 止感染。
病毒携带者:有部分隐性感染者一直不产生对此种病毒的 免疫力叫病毒携带者 ,无症状 ,但病毒可在体内增殖并向外界 排泄播散 ,也是重要的传染源。
2.稳定状态感染(非杀细胞感染)
多见于有包膜病毒 ,它们复制成熟的子代病毒以出芽方式从感 染的宿主细胞中释放出来 ,细胞不会溶解死亡 ,但可引起宿主 细胞膜组分的改变。
( 1 )细胞膜出现新抗原:
( 2 )细胞融合:形成多核巨细胞。感染与未感染的细胞融合 , 可以使病毒从感染的细胞直接进入相邻的正常细胞 ,有利于病 毒在细胞间的扩散。
持续性感染有下述三种类型 :
( 1 )慢性感染 ( 2) 潜伏感染 ( 3 )慢发感染或称迟发感染
⑴ 慢性感染
经显性或隐性感染后,病毒并未完全清除,可持续存 在于血液或组织中并不断排出体外,病程长达数月至数十 年。患者可表现临床症状。
如:乙型肝炎病毒( HBV)、巨细胞病毒(CMV)等 常形成慢性感染。
四、病毒的感染类型
病毒能否感染机体引起疾病 取决于病毒的致病性和宿主免疫力两个方面。
机体感染病毒后
1.按有无临床症状 ,可分为隐性感染和显性感染。 2.依病毒感染后在机体内滞留的时间长短 ,分为急性感染和 持续性感染。 3.持续性感染又分为慢性感染、潜伏感染、慢发病毒感染。
(一)隐性感染
病毒进入机体后不出现临床症状的感染 ,对组织和细胞的 损伤不明显。亚临床感染
二十面体对称型 icosahedral symmetry
30个梭
12个顶 五邻体
20个面 六邻体

病毒学所有 ppt课件

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三、病毒的复制
• 病毒侵入 • 遗传物质的释放 • 病毒的复制与病毒蛋白的合成 • 病毒的装配 • 出芽
• 1、病毒的神经氨基 酸酶破坏唾液中的 神经氨酸,使粘蛋 白水解,糖蛋白受 体暴露,血凝素与 糖蛋白受体结合, 完成专一性吸附。 • 2、病毒通过受体介 导的胞吞作用进入 胞浆形成内体;
• 3、内体酸化,使 病毒外壳与内体 融合,病毒将核 酸释放到细胞质 中。 • 4、病毒通过其核 酸上的核定位信 号蛋白导向而迅 速进入核内。
不适于接种流感疫苗的人群
对鸡蛋或疫苗中成份过敏者不宜接种; 发热、急性感染者要推迟接种; 晚期癌症病人、心肺功能衰竭者、有过敏史者 不用; 自身免疫系统疾病 患有脱髓鞘病、孕妇 凡健康状况不适者、禁忌症 不易掌握者,均不予接种。
流感禁忌

• •
经常吃煎炸食物:会令喉头充血,增加黏膜表 面伤口及感染机会。
流感不是普通感冒!
每年季节性流感流行
流感大流行: 超大规模的流行 每几十年发生一次 (11–36年)
• 美国在第一次世界大战中战死人数为 50385 人,而非战斗死亡人数为 55868人,其中绝 大多数是患流感死亡。 • 1918~1919年西班牙流感使欧洲2.5亿人患 病,2000万人死亡,(第一次世界大战的 死亡人数只是850万人),是历史上最严重 的流感疫症;1957~1959年德国死于流感 的人约5.5万;1968~1969年德国死于流 感的人约4万。
流感病毒的表面结构
• 神经氨酸酶(NA)
四个亚单位组成的四 聚体,并不平均分布在病 毒表面,而是聚合成群, 具有酶活性.
• • 蘑菇状 NA的作用是促使被感染的细胞释放出新产生的病毒 颗粒,是流感病毒继续扩散和繁殖必不可少的。NA 也是一个重要的流感病毒抗原,不同毒株和亚型的 流感病毒也会有各自不同的 NA 糖蛋白突起但是, NA的变异程度较小.

病毒学总论 ppt课件

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笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
病毒引起疾病的特点
传染性强
传播迅速
流行广泛
病死率高
后遗症严重, 持续感染
临床诊断困难 病毒早期诊断对于控制病毒的传播、疾病 的诊缺断乏和有防效治药都物有防着治及其重要的意义.
肿瘤和自身免疫病PPT的课件 形成关系
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一、病毒的大小、形态 病毒体积微小, 测量单位:纳米(nm)
常用抗生素对病毒无作用, 可用来抑 制病毒培养中细菌生长;
对氧化剂、卤素及其化合物敏感.
醛类破坏蛋白质、核酸
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病毒感染
病毒的传播方式 ❖ 水平传播 ❖ 垂直传播 病毒的侵入途径 呼吸道、消化道、眼及泌尿生殖道
粘膜,血液,胎盘 病毒的播散方式 ❖ 局部播散 ❖ 血循环播散 ❖ 沿神经干移行
难, 病死率高, 后遗症严重; ③ 与肿瘤相关; ④ 分子生物学研究的重要工具.
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精品资料
• 你怎么称呼老师? • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你
是否会认为老师的教学方法需要改进?
• 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我
• 抗原性 • 红细胞吸附 • 血凝 • 细胞融合
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物理因素:
① 温度:病毒耐冷不耐热, 56℃ 30min 可灭活大多病毒(肝炎病毒较耐热);
② pH: pH 5-9稳定; ③ 射线:γ射线、X射线、紫外线都能
灭活病毒.
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化学因素:
有包膜病毒对脂溶剂敏感(乙醚、氯仿、 胆盐)可鉴别病毒有无包膜;

病毒学基础Ippt课件

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3.朊粒的抵抗力
土壤中可存活20年 标准高压蒸汽灭菌不能破坏 灭活方法是室温下5%次氯酸钠或1mol/L
氢氧化钠处理1hr,再134℃高压蒸汽2hr以上
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4.朊粒的致病性
引起人和动物Prion病。潜伏期长,表 现为致死性中枢神经系统的慢性退化性疾患
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动物Prion病
人类Prion病
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4、生物合成
生物合成阶段也称为隐蔽期 包括
➢ 基因的复制:子代核酸的合成 ➢ 基因的表达:子代病毒蛋白的转录与翻译 阻止病毒生物合成的药物:核苷类药、非核 苷类似药、蛋白酶抑制剂等
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病毒核酸类型不同,生物合成规律也不同
双链DNA病毒 单链DNA病毒 单正RNA病毒 单负RNA病毒 双链RNA病毒 逆转录病毒
C、脊髓灰质炎病毒
D、乙脑病毒
E、蛋白分子
F、流感病毒
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G、烟草花叶病毒
二、病毒形态多样
多呈球形或近似球形 少数为杆状、丝状、砖状、或子弹状
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三、病毒的结构
1.核心 ( core )
核酸 →基因组genome 为病毒生命活动提供遗传信息 病毒复制的模板
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2.衣壳(capsid)
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大小悬殊 有内含子,ORF间有重叠 较大的遗传不稳定性
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功能
➢ 病毒复制的模板 ➢ 决定病毒的生物学活性 ➢ 部分核酸具有感染性
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2、病毒蛋白质
结构蛋白
➢ 分布于衣壳、包膜和基质中 ➢ 对核酸具有保护作用,稳定病毒形态 ➢ 决定病毒对细胞的亲嗜性 ➢ 具有良好的抗原性,可用于分类及诊断

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研究病毒的第三个目的是利用病毒为人类造福。
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教材及参考书目
1、教材
《普通病毒学》,谢天恩、胡志红主编,北京,科学出版社,2002年
2、参考书目
《动物病毒学》,殷震主编,北京,科学出版社,1997年
《分子病毒学》,黄文林主编,北京,人民卫生出版社,2002年
《分子病毒学》,侯云德主编,学苑出版社,1990年
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(二)天花的记载
16世纪下半叶,我国率先发 明人痘接种法预防天花
明代隆庆年间,人痘预防天 花对外推行
种痘法的发明,可以说是我 国对世界医学的一大贡献
“其苗传种愈久,则药力之提拔愈清,人工之选炼愈熟,火毒
汰尽,精气独存,所以万全而无害也。若时苗能连种七次,精
加选炼,即为熟苗。”
---《种痘心法》
病毒学的任务等。通过本章的学习,使学生对病毒 学有基本了解。
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教学内容
第二章 病毒的分类与命名
本章主要介绍病毒的分类意义;病毒分类的发展简史;病
毒的命名规则;病毒的分类原则;病毒的分类方法等。通 过本章的学习,使学生了解病毒分类过程和分类 方法。
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教学内容
第三章 病毒的形态与结构
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病毒(virus):是一类个体微小,无完整细胞
结构,含单一核酸型(DNA或RNA),必须在活 细胞内寄生或复制的非细胞型微生物。
病毒学(virology):即研究病毒的本质、病
毒与宿主相互作用和规律的生物学科。 病毒学的分支:普通病毒学、医学病毒学、兽医
病毒学、植物病毒学、昆虫病毒学、细菌病毒学、 肿瘤病毒学、环境病毒学、分子病毒学等。

医学微生物学课件病毒学

医学微生物学课件病毒学

丙型肝炎病毒感染
病毒特性
丙型肝炎病毒属于黄病毒科,为单股正链RNA病 毒。
传染性
丙型肝炎病毒主要通过血液传播,如输血、注射 、共用注射器等。
危害性
丙型肝炎病毒感染可导致慢性肝炎、肝硬化、肝 癌等,且病程较长,容易慢性化。
人乳头瘤病毒感染
病毒特性
01
人乳头瘤病毒属于乳头瘤病毒科,为无包膜的圆形或卵圆形
针对新发病毒的防控措施与展望
加强国际合作
各国政府应加强国际合作,共 同应对新发病毒感染的挑战。
提高公众意识
加强公众对新发病毒感染的认 识,提高防范意识和自我保护
能力。
展望未来
对新发病毒感染的防控,需要 加强病毒监测和预警,深入研 究病毒的生物学特性和致病性
,提高防控能力和水平。
06
病毒感染研究的前沿技术与方法
疫苗研究
针对不同病毒,研究制备高效、安全、廉价的疫苗,提高疫苗接种覆盖率和接种 质量。
04
常见病毒感染及其危害
流行性感冒病毒感染
病毒特性
流行性感冒病毒属于正黏病毒科 ,呈球形或丝状,具有血凝素和 神经氨酸酶。
传染性
流感病毒具有较强的传染性,主 要通过飞沫传播,人群普遍易感 。
危害性
流感病毒感染可引起高热、头痛 、咳嗽、喉咙痛、肌肉疼痛、乏 力等症状,严重时可导致肺炎、 心肌炎等并发症,甚至死亡。
病毒颗粒进入细胞后,衣壳释放病 毒核酸并进入细胞质。
病毒基因表达
病毒核酸在细胞内表达病毒蛋白质 和复制病毒核酸。
病毒装配和释放
病毒蛋白质和核酸在细胞内装配成 完整的病毒颗粒,并通过细胞膜或 胞吐作用释放。
宿主的抗病毒防御机制
先天性免疫应答

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病毒学
引言
甲流
我国0.065%,全球平均1.24%
SARS
11% 世界卫生组织统计非典的流行全球感染8422人,死亡919人,病死率近
SARS
无特效药 隔离病人 焚烧尸体
艾滋病AIDS
自1981年在美国发现以来迅速蔓延,死亡率接近100%
艾滋病AIDS
艾滋病AIDS
2008年斯威士兰42.2%的孕妇都是艾滋病病毒携带者 近40%的高艾滋病感染率
另一个质粒R6-3(Neor)组合成嵌合质粒,转化
E.coli后在含四环素和新霉素培养基上选出有
Tetr和Neor的新转化子。
Paul Berg(1926-)
载体的一些必要元件如复制原点、启动子、转录增强子、 翻译增强子等等大多来自病毒 多种病毒载体的广泛应用。
CMV 立刻早期基因IE的启 动子含有增强子、 TATAbox、和转录起始位 点
1955-1957年,美国的F. Raenkel Conrat和Singer与德国的 Gierer和Schramm分别独立地证明纯化TMV-RNA有侵染性 并决定TMV的遗传特性,证明DNA和RNA都是携带遗传信息 的遗传物质。
近代病毒学(1960年至今)
病毒学与分子生物学 病毒学与基因工程
(二)限制性内切酶的发现
20世纪70年代另一个病毒学研 究中最有深远影响的发现。
在对噬菌体与其寄主相互关系 的研究中发现的。
(三)基因工程的诞生
➢ 1972年 P. Berg在斯坦福大学第一次体外构建
重组DNA分子,即将λ噬菌体基因和E.Coli半乳
糖基因插入SV40的环DNA中。
➢ 1973年 H.Boyer和S. Cohen用E.coli质粒 pSCIOI(Tetr)上仅有一个EcoRⅠ切点的特点与
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禽流感AIV
禽流感AIV
禽流感AIV
1918年西班牙流感死亡2200万
禽流感AIV
1000万
猪高热病
学习目的
了解当前流行的病毒,以及致病机理。
给大家指出一条发家致富的明路。
对已经发现的病毒,大多数我们还都束手 无策,希望通过对这门课的学习使大家对 病毒产生兴趣,从而在以后的深造中投身 到病毒学的研究中。
(二)限制性内切酶的发现
20世纪70年代另一个病毒学研 究中最有深远影响的发现。
在对噬菌体与其寄主相互关系 的研究中发现的。
(三)基因工程的诞生
1972年 P. Berg在斯坦福大学第一次体外构
建重组DNA分子,即将λ噬菌体基因和E.Coli半
乳糖基因插入SV40的环状DNA中。
1973年 H.Boyer和S. Cohen用E.coli质粒 pSCIOI(Tetr)上仅有一个EcoRⅠ切点的特点与
名为“噬菌体”
1935年,美国生化学家Wendell Meredith Stanley获得TMV的晶体,并于1946年因此获得诺贝 尔奖。
免疫兔子制备出TMV抗血清--说明病毒的蛋白质本性。 1937年,英国的Bawden和Pirie证明TMV的结晶含5%RNA和
0.5%的磷,其它都是蛋白质,提示TMV是个核蛋白。 1938年,W.J.Elford测定了各种病毒颗粒大小。 1939年,Kausche和Ruska用电镜照片,直观证实TMV是杆
RNA聚合酶Ⅲ与启动子识别并进行转录 --腺病毒VA基因的研究
基因在DNA基因组上的位置是不连续的,有内含子存在, 转录体需要剪裁,拼接成mRNA ---T4噬菌体和腺病毒的研究
mRNA3’-端的聚腺苷酸化-----痘病毒 首次发现聚腺苷酸化信号-----SV40 mRNA5’-端的帽子结构和碱基的甲基化作用-----呼肠病毒 翻译后的前体经蛋白酶加工裂解成为功能蛋白质,经高尔
四. 病毒与宿主相互关系的探索时期
病毒核酸可以整合到宿主细胞基因组中 DNA是噬菌体的遗传物质 某些病毒感染引起细胞融合 某些病毒引起细胞生长习性和形态特征
的转化
(三) 噬菌体的发现
1915年,Fredrick Twort首次发表了关于噬菌体的文章。 1917年,Felix d’Herelle将“能溶解琼脂平板上的细菌”命
另一个质粒R6-3(Neor)组合成嵌合质粒,转化
E.coli后在含四环素和新霉素培养基上选出有
Tetr和Neor的新转化子。
Paul必要元件如复制原点、启动子、转录增强子、 翻译增强子等等大多来自病毒 多种病毒载体的广泛应用。
CMV 立刻早期基因IE的启动 子含有增强子、TATAbox、 和转录起始位点
基体的糖基化以及被蛋白激酶磷酸化的研究------病毒
(一) 反转录酶的发现
20世纪70年代 反转录酶的发现----RNA肿瘤病毒
意义: 1. 揭示了病毒正链RNA基因组复制和基因表达的一种新类型。 2. 对20世纪60年代所形成的中心法则理论的重要修饰和补充。 3. 反转录酶广泛应用于cDNA克隆的技术。
病毒学
引言
甲流
我国0.065%,全球平均1.24%
SARS
11% 世界卫生组织统计非典的流行全球感染8422人,死亡919人,病死率近
SARS
无特效药 隔离病人 焚烧尸体
艾滋病AIDS
自1981年在美国发现以来迅速蔓延,死亡率接近100%
艾滋病AIDS
艾滋病AIDS
2008年斯威士兰42.2%的孕妇都是艾滋病病毒携带者 近40%的高艾滋病感染率
状颗粒。
至此,TMV是核蛋白而不是纯蛋白质,病 毒是颗粒状而不是毒液的争论到此结束。
1952年,美国冷泉港卡内基遗传学实验室的Alfed Hershey和Martha Chase用35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋白 质和核酸试图追踪噬菌体吸附进入大肠杆菌细胞的机制,结 果证明只有DNA进入就足以提供复制出100多个子代病毒所需 的遗传信息。
以病毒为材料,如SV40研究DNA与寄主组蛋白的作用,给
E.coli基因组结构和哺乳动物染色体结构的了解以重要的
启示。
独特类型的病毒基因组,如ssDNA,(+)RNA 、 (-)RNA 先后在体外翻译体系中被转录,充分显示了生物遗传信息 储存方式的多样性。
转录增强子元件、转录因子与启动子结合 ---SV40的研究
他称这种“有感染性的、活的流质” 为“病毒 ”
他被誉为“病毒学之父”
Martinus Beijerinick (1851-1931)
第一个病毒引起的动物病例
Freidrich Loeffler (1852-1915)
同年,Freidrich Loeffler证明牛口蹄疫病是可滤性病毒引起的。
细菌的病毒--噬菌体
1935年,美国生化学家Wendell Meredith Stanley获得TMV的晶体, 并于1946年因此获得诺贝尔奖。
1937年,英国的Bawden和Pirie证明TMV的结 晶含磷和RNA,提示TMV是个核蛋白。
1939年,Kausche和Ruska用电镜照片,直观 证实TMV是杆状颗粒。
SV40的poly A
病毒是什么
“我自己也是乙肝的带菌者”
2006年刘德华担任中国肝炎防治基金会乙肝防治宣传大使
病毒与其它微生物的区别
微生物 结构 种类
细菌 原核细胞型 支原体 原核细胞型 立克次体 原核细胞型 衣原体 原核细胞型 螺旋体 原核细胞型 真菌 真核细胞型 病毒 非细胞型
在无活细 胞的培养 基中生长
+ + -(+) + -
二等分裂 繁殖
核酸类型
+
DNA,RNA
+
DNA,RNA
+
DNA,RNA
+
DNA,RNA
+
DNA,RNA
出芽、产生孢子 DNA,RNA
-
DNA 或 RNA
核糖体 敏感性 抗生素 干扰素
++-
++-
++-
++-
++-
+
-
-
-
-
+
病毒致病过程
第一章 病毒学的发展史
一. 经验时期
北宋(960年到1127年) 年间,吸入病人痂接 种人痘来预防天花。
利用噬菌体突变体的重组,以及基因缺失和置换突变的杂交, 鉴定和定位λ噬菌体的基因,获得基因组的物理图谱。
噬菌体溶原性和裂解性生活史的发现和相 互转换机制的研究,如阻抑蛋白cI的负调 控和转录因子N蛋白和Q蛋白的正调控、以 及多基因间表达调控的相互协调、相互制 约的复杂关系的研究,奠定了分子生物学操 纵子学说的基础。
同年,Wyatt和Cohen在T偶噬菌体和动物病毒中发现有寄 主DNA所没有的新碱基羟甲基胞嘧啶,最终证明是病毒DNA 编码羟甲基酶被合成的原因,可见病毒的遗传信息在寄主 细胞内被表达成蛋白质。
1956年 根据病毒负染的电镜照片第一次提出病毒颗粒的 外壳蛋白是由组分相同的蛋白质亚基做对称的二十面体或 螺旋式的排列而成。
T4噬菌体是另一个利用突变体获得基因组物理图谱的实 例。对其基因结构和功能的研究,尤其是对rⅡA和rⅡB两 个顺反子的遗传分析导致移码突变,首次支持遗传密码是 三联体密码的学说。
利用T4噬菌体溶菌酶基 因所进行的移码突变结果 直接证实了这一学说。
利用噬菌体为材料研究基因组DNA的复制机制及所需各种酶 活性,促进了对原核生物遗传物质复制地了解。
目前斯威士兰的人均寿命仅为37.5岁
AIDS
全国累计报告艾滋病病毒感染者和病人分布图(截至2007年10月底) 70万,0.05%
AIDS
潜 伏 期 七 年
禽流感AIV
禽流感AIV
1997年香港一3岁男童死于禽 流感,这是全球首宗人类感染 H5N1的个案
2003年11月到2006年7月,全 球230多人感染,130多人死亡, 病死率51.69%
1955-1957年,美国的F. Raenkel Conrat和Singer与德国的 Gierer和Schramm分别独立地证明纯化TMV-RNA有侵染性并决定 TMV的遗传特性,证明DNA和RNA都是携带遗传信息的遗传物质。
近代病毒学(1960年至今)
病毒学与分子生物学 病毒学与基因工程
1892年,俄国科学家Dimitri Iwanowski用无釉陶瓷 滤膜过滤TMV的病原体,滤过液可以将疾病传染到另外 的植物上。他认为是细菌产生的毒素引起的。
Dmitri Iwanowski (1864-1920)
Chamberland过滤器
1898年,Martinus Beijerink发现稀释后的滤液可以在植物的 活组织中复制并保持其力量 而且它不能像细菌一样在无细胞 状态下培养,他称之为“传染性活汁液”
1796年英国医生Edward Jenner发明了“种牛痘”的方法预防天花。
1884年巴斯德从科学实践中知道有侵染性的物质经 过反复传代和干燥,会减少其毒性。用减低
毒性的侵染物接种狗,该狗即使再感染狂犬
病毒也不会得狂犬病。
二. 发现时期
1886年,法国人Adolf Mayer将感染TMV的烟草 叶汁注入健康的烟草叶脉中,诱发了花叶病。
1915年,Fredrick Twort首次发现了噬菌体。 1917年,Felix d’Herelle将“能溶解琼脂平板上
的细菌的物质”命名为“噬菌体”
三. 病毒本质的研究时期
早期的生化实验工作中得出的主要结论是,蛋白变性、 强酸强碱、高温都对病毒有害,而温和的蛋白沉淀剂、
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