ABO血型反定型全自动微板检测法误读原因分析。word
血型鉴定正反定
▼抗体太弱或消失 如新生儿、老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年龄
和诊断
▼非正常高浓度的抗－A、抗－B可引起前带现象，导致假 阴性,将血清稀释或用EDTA（2.5％）处理可消除 ▼A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗－A1, 抗－A1
只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
应用抗－A、抗－B试剂未能出现预期的凝集反应
原因
二、红细胞标问题
患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏（包
被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体 试剂的特异性免疫反应所致
红细胞表面包被IgG类抗体
原因
三、血清标本的问题
免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老
年人ABO抗体减弱
c.将血清用0.01mol/L DTT处理和再定型
三、意外的血清学反应所致的 ABO正反定不符及其处理
▼同种抗体/意外抗体 室温下抗-P、抗-M、抗E等，可能出现意外反应，干
扰ABO血型鉴定
抗体特异性抗体鉴定，选择抗原阴性的红细胞做反定
谢 谢
使用了受到细菌污染的试剂 试验器皿不干净 实验结果记录、解释错误
原因
二、红细胞标本问题
患者近期接受了大量ABO血型相容但不同
型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型
人接受O型红细胞
原因
二、红细胞标本问题
◆某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些
白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，
6.室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应
7. 做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰
分析和处理
ABO正反定不符的分类
ABO血型鉴定错误原因分析与质量控制方法
ABO血型鉴定错误原因分析与质量控制方法目的总结探讨血型鉴定的影响因素。
方法对226例健康体检人群玻片法和试管法同时进行ABO血型鉴定。
结果两种方法检测结果不是完全相符，除AB 型两种方法检测结果基本一致外，其他血型（A型、B型、O型）的人數存在一定差异。
结论在血型鉴定中，如果出现正反定型结果不相符时，应找到对血型鉴定造成影响的因素，针对因素，采取措施。
标签：血型鉴定；影响因素；质量控制红细胞的两大血型抗原抗体系统是ABO血型系统和RH血型系统，这两大系统在临床输血和遗传学研究上的意义非常重要[1]。
血型鉴定正确与否是保证安全输血的前提。
生理盐水凝集法是临床最常用ABO血型鉴定方法，有玻片法和试管法两种方法。
本文主要对ABO血型鉴定中最常见出现错误原因进行分析及质量控制方法。
1 资料与方法1.1一般资料选择2014年1月～6月我院226例健康体检人群为研究对象，年龄20～28岁，平均年龄（24.3±3.7）岁。
所有研究对象均无严重的传染性疾病和血液疾病。
1.2标本采集抽取EDTA抗凝血后在2h内完成血型鉴定操作。
1.3血型试剂采用上海血液生物医药有限责任公司生产提供的ABO血型反定型用红细胞试剂盒；抗A、抗B血型鉴定单克隆抗体购置于长春博徳生物技术有限公司[2]。
1.4鉴定方法严格按照相关步骤方法进行操作。
1.5统计学方法采用SPSS11.5统计软件包进行相关数据处理，以均数±标准差（x±s）表示计量资料。
采用频数和率表示计数资料，采用χ2检验。
2 结果见表1。
由表1可以看出，两种方法对226名健康体检患者的血型检测结果基本上是一致的。
其中O型人数占比率最多，B型、A型人数次之，AB血型人数占比率最少。
除AB型血型两种方法的检测结果一致外，其他血型（A型血型，B型血型，AB型血型）的人数存在一定的差异。
3 讨论3.1红细胞方面的原因①血型检测时，因患者红细胞悬液过浓或过淡，使反应不明显，误判为阴性反应。
血型正反定型不符原因及对策
血型正反定型不符原因及对策正确鉴定 ABO 血型是输血前最重要的一项检测，血型鉴定错误会导致严重的溶血性输血反应甚至是死亡。
目前血型鉴定最常用的方法是卡式微柱凝胶法，此法具有诸多优点，但由于血型抗原抗体反应的复杂性及各种因素的影响，往往会出现正反定型不符，不能鉴定血型的情况。
常见的原因有如下几点：1. 血浆中抗体减弱或缺失：白血病、肿瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗体减弱，老年人抗体水平生理性下降，婴幼儿尚未产生抗体或抗体效价低，均影响反定型的鉴定。
可通过加大患者血浆用量（2 倍或 4 倍）的方法进行鉴定。
2. 红细胞抗原减弱：最常见的是白血病、恶性肿瘤等[1]，抗原减弱或消失，干扰正定型，凝集减弱或消失，可加大患者红细胞浓度[2]或进行吸收放散实验以确定抗原。
3. 不规则抗体：这一类抗体存在于患者血清中，可在反定型中与标准红细胞上的相应抗原发生凝集（而与 A 或 B 抗原无关），导致正反不一致。
抗体筛选试验阳性，应用谱细胞可鉴定出不规则抗体种类。
4. 自身免疫性溶血性贫血：患者红细胞表面存在致敏自身抗体，DAT（直接抗人球蛋白试验）阳性，有时正定型会发生非特异性凝集。
同时血清中存在的自身抗体也能干扰反定型。
可用37℃ 生理盐水洗涤患者红细胞，一般可排除干扰。
5. 冷凝集素：高效价冷凝集素在体外4℃ 或室温条件下可与自身红细胞发生非特异性凝集反应，可出现正反定型全凝集的现象。
用37℃ 生理盐水洗涤红细胞，去除红细胞表面附着的冷凝集素，可获得可靠地正定型结果。
37℃ 温浴患者标本，可消除血浆中游离的冷凝集素对反定型的影响[3]。
6. 亚型：由遗传因素导致，即红细胞 A 或 B 抗原弱化，正定型抗A 或抗B 有时不能检测出抗原而不出现凝集，造成定型困难。
进一步鉴定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB，反定型增加 O 细胞、A1 细胞、A2 细胞，还应进行吸收放散试验、唾液中血型物质检测等[4]。
7. 血浆成分异常：多发性骨髓瘤患者易使红细胞发生缗钱状凝集，在血清中加入 1~3 滴生理盐水凝集可消失（真凝集不受影响）。
血型报告错误的原因有哪些
血型报告错误的原因有哪些？正确的ABO血型鉴定，采血管是临床安全输血的关键。
而错误血型的血液一旦输入，则直接危及患者的生命。
笔者对多年工作中所观察的造成ABO血型定型错误的原因分析总结如下。
1. 血型测定的错误血型检测时因患者红细胞悬液浓度过低或离心时间太短(未做反定型检测)，又只用肉眼观察结果，使之在血型抗原较弱的情况下，微弱、细小的凝集未看到，而造成定型报告错误。
2. 检验者工作粗心的错误 (1)在血型检测时，由于试管上未编号，离心后拿错试管，使之张冠李戴而造成血型结果错误；(2)工作精力不集中，填写血型结果时因笔误而造成血型错误；(3)把ABO标准血清的习惯性存放颠倒，故将“抗-A血清”误认B型血清，而“抗-B血清”误认为A型血清，使之判定结果错误而造成血型报告错误。
(4)检测板的清洗不彻底，导致结果错误。
(5)工作中图省事，未做复检试验，而仅仅只看申请单的填报结果。
3. 临床医生的错误临床医生在填写输血申请时，没有做血型检测，单凭印象或听信患者的自诉血型而造成血型错误。
4. 临床护士的错误临床护士在抽取血标本时，未校对患者的姓名、床号，仅凭印象，抽了其他人的血液而造成血型报告错误或交叉配血不合。
还出现多人抽血未及时贴标签，导致血标本混错现象。
另一可能就是送多标本，粗心大意，将标本送错。
总之，标本与患者不符。
5. 血站发血的错误由于血站发送的血液袋上的血型与血袋内的血液不符而造成献血者的血型错误。
笔者曾在为一名O型患者做交叉配血时，发现主侧管中有轻度凝集，为受血者重复进行血型鉴定无误后，再对献血者的血型进行检测，结果该献血者的血型不是O型而是B型。
将该献血者的血液送市中心血站复检证实该献血者为B亚型。
6. 疾病导致血型结果的错误某些疾病可使受检者血液中有含量较高的冷凝集素，而产生自凝现象或由于疾病使患者红细胞上的抗原减弱而造成血型的检测错误。
造成血型错误原因的分类结果表明，有大部分是由于检验者在血型鉴定检测时造成的差错，其中一半以上是检验者的粗心大意、精力分散、责任心不强所致。
ABO血型正反定型不符的原因调查与分析
（ 山西省中医院 ， 山西 太原 ０ ３ ０ ０ １ ２ ）
文章编 号 ： １ ６ ７ １— ８ ６ ３ １ （ ２ ０ １ ６ ） １ ２— ０ ９ ２ ２— ０ ２
摘要
目的： 回顾 分析山西省 中医院 Ａ Ｂ Ｏ血型测定结果 ， 总结造 成 Ａ Ｂ Ｏ血 型正反定 型不符 的原 因， 并提 出解决
ｄ ｉ ｓ ｃ ｒ ｅ ｐ ａ ｎ ｃ ｙ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｆ ｏ ｒ ｗ ａ ｒ ｄ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｖ ｅ ｒ ｓ ｅ ＡＢＯ ｔ ｙ ｐ ｉ ｎ ｇ ， ａ ｎ ｄ ｐ ｕ ｔ ｏｒ ｆ ｗａ ｒ ｄ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ： Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｔ ｕ ｂ ｅ ｓ ｇ ｅ ｌ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗ ｉ ｌ ｌ ｂ ｅ ａ ｐ － ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ ｔ ｏ ｔ ｅ ｓ ｔ ｔ ｈ ｅ ｆ ｏ ｗａ ｒ ｒ ｄ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｖ ｅ ｒ ｓ ｅ ｔ ｙ ｐ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ａ ＢＯ ｂ ｌ ｏ ｏ ｄ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｆ ｏ ｒ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ａｌ ｌ ７ ８ ５ ０ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｅ ｘ ａ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ
ｏ ｆ ｓ ｅ ｌ ｆ —ａ ｇ ｇ ｌ ｕ ｔ ｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ， ４ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｗｅ ａ ｋ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ， １ ｃ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ ｃ ｏ ｎ ｇ ｅ ｎ ｉ ｔ ａ ｌ ｌ ｙ ｎ ｏ ｎ ＡＢＯ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ， ａ ｎ ｄ ２ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ｉ ｒ ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ —
流动采血车74例ABO血型鉴定错误的原因分析
具 体 结 果 见 表 １ ２ 由表 １２可 见 ， 型 录 入 错 误 人 次 占总 错 、。 、 血
误血型人次的 ６．６ 。 ２ １
表 １ ＡＢ 血 型初 检 鉴 定 错 误 统 计 ０
针 对 上 述 造 成 流 动采 血 车 血 型 鉴 定 错误 原 因作 者 建 议 ： 加
血 清 效 价 容 易 降 低 ， 成 血 型 判 定错 误 。 照
上无偿献血者 ， 龄 １～５ 年 ８ ５岁 ， 照 ＧＢ ８６ —０ １ 血 者 健 按 １ ４ ７２ ０ 献
康 检 查 要 求 ， 集 ４ ６ 采 ０４ ２例 无 偿 献 血 者末 梢血 标 本 。
１２ 试剂 ． 街 头 检 测 用 血 标 本 未 加 抗 凝 剂 ， 用 卫 生 部 长 春 使
３ １ 人 为 因素 ．
人 为 因 素 是造 成 血 型 初 检 定 型 错 误 的 主要 原
重 要 的工 作 环 节 。如今 流 动 采 血 车 街 头 采 血 已经 成 为 各 地 血 站保 证 血 源 、 障血 液 供 应 的 主 要 方 式 。由 于 采 血 车受 条 件 限 保 制 ， Ｂ 血 型鉴 定 一 般 是 用 纸 板 法 做 正 定 型 试 验 ， 能 同 时进 Ａ Ｏ 不
素 原 因 易 照 成 假 阳性 ， 致 误判 。 导
生 物 制 品研 究 所 生 产 单 克 抗 一 Ａ抗 一 Ｂ血 型 定 型 试 剂 ， 卫 生 部 经 生物 制 品检 定 所 批 检 定 合 格 ， 价 大 于 或 等 于 １ ８ 亲 和 力 小 效 ２、
于 １ 。 ０ Ｓ
１ ３ 方法 按 照 说 明书 ， 用纸 板 法 （ 片 法 ） 在 流 动 采 血 现 ． 使 玻 ， 场 依 照 常 规 进 行 ＡＢ 血 型 （ 定 型 ） ０ 正 的初 步 鉴 定 。 ２ 初 检 血 型错 误 统 计 血型初次鉴定错误 总计 ７ ４份 ， 采 血 总 人 次 的 ０ １ 。 占 ．８
ABO血型正反定型不一致的原因分析-雷静
输血科：雷静
概述
血型（blood group） 是指血液中各种成分 的遗传多态性标志。 血型包括红细胞血型、 白细胞血型、血小板 血型、血清蛋白血型 等，如果前面未加限 定词，“血型”一词 就指红细胞表面的抗 原差异，即红细胞血 型。
血型鉴定包括正定型和反定 型，所谓正定型是指用标准 血清鉴定红细胞上的抗原称 正定型，所谓反定型是指用 标准红细胞鉴定血清中的抗 体，正反定型要一致血型才 能确定。
血型鉴定及鉴定结果的可靠性对保证临床 输血安全具有至关重要的作用。在输血工 作中经常会遇到ABO正反定型不一致的情况 （排除实验技术原因：如样本混淆、静脉 输液处采样、采样不规范、试剂质量问题 或漏加试剂、实验操作不规范、结果观察 不仔细或误判等），下面就分别简述其原 因。
一、红细胞抗原减弱或丢失；
三、混合凝集（mf）
1、近期内输异型血 2、造血干细胞移植 3、双精子受精或同卵受精（嵌合体）
四、血清定型减弱或无反应
1、年龄（＜4-6个月，老年） 2、ABO亚型 3、低丙种球蛋白血症 4、造血干细胞移植 5、先天性ABO抗体缺失 6、大量输晶体盐或胶体扩容剂
和AIHA。 （2）热盐水洗涤红细胞，可以排除干扰。
小结
血型鉴定在输血工作中看似简单，但却是 最基本、最重要的环节，为避免输血中作 中发生错误，一定要做血型正反定型，如 有发生正反定型不一致时，应查明原因， 确定出正确的血型，把好血型鉴定这一关， 确保临床输血安全。
定
（1）正定型抗-A 4+，抗-B ±，抗-AB 3+；
（2）反定型Ac-，Bc-，Oc-。 2、复查：用高效价抗-B（效价为256）复检，抗-B2+； （1）唾液中含A、B物质； （2）红细胞可吸收放散抗-B； （3）3个月后复查B抗原恢复正常。 3、结论：AB型，白血病导致血型抗原减弱。 4、讨论 （1）白血病患者血型抗原“变异”是变少（弱）不变多（强）。 （2）吸收/放散试验及唾液中血型物质检测有助于鉴定弱抗原。 （3）高效价血清有助于正确判定血型。 （4）一般反定型不受干扰，因此不干扰主侧配血。 （5）疾病缓解后，血型抗原恢复。
ABO血型鉴定结果误判的原因分析
１ ． １ 标 本来源 ： 收集本 院 ２ ０ １ ２年 １ １月 至 ２ ０ １ ３年 ４月 之间所 有 住院有感 染的患者标本 ４ ０６例 ， 年龄 ０～８ ６岁 ， 其 中男 性 ２ ４ ６ 例， 女性 １ ６ ０例 。 １ ． ２ 仪器 与试剂 ： ＭＩ Ｎ Ｄ Ｒ Ａ Ｙ Ｂ Ｓ一８ ０ ０ Ｍ 全 自动 生化分析 仪及 ＭＩ Ｎ Ｄ Ｒ Ａ Ｙ 的 配套 试 剂 和 质 控 品 ， Ｂ Ｅ Ｃ Ｋ ＭＡ Ｎ Ｃ Ｏ Ｕ Ｌ Ｔ Ｅ Ｒ Ａ Ｃ Ｔ一 ５ ｄ ｉ ｆ血细胞计数仪及配套试剂 和 Ｍ Ａ Ｋ Ｅ Ｒ质控 品。 １ ． ３ 检测 方法 ： 收集 ４ ０ ６例 感染病 例 白细胞 的数 值和 中性 粒 细胞的比率 以及 Ｃ Ｒ Ｐ结果 ， 按说明与 Ｓ Ｏ Ｐ文件进行操作。 １ ． ４ 结果 判定 ： 按照第三版 《 全 国临床检 验操作规 程》 将 白细 胞 ＞１ ０×１ ０ ／ Ｌ ， 判 为升高 ， ＜１ ０×１ ０ ／ Ｌ ， 判为降低 ； 中性粒细胞 比率 ＞ ７ ０ ％， 判 为升 高； 中性粒 细胞 比率 ＜ ７ ０ ％， 判 为降低 ； Ｃ一 反 应 蛋 白根 据 说 明 书 在 Ｃ Ｒ Ｐ＞ ８ ｍ ｇ ／ Ｌ判 定 升 高 ； Ｃ Ｒ Ｐ ＜８ ｍｇ ／ Ｌ 判 为 降低 。
Ｃ反应蛋 白（ Ｃ—ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ Ｃ Ｒ Ｐ ） 是机体非特异性感染 时 产生 的急性时 相蛋 白， 是反应 机体 内感染 的敏感指 标之 一。 Ｃ Ｒ Ｐ是最早认识 的一种正 时相 反应 蛋白 ， 是急性炎症和组织损 伤 的灵敏指标 ， 当细菌 感染 引发炎症 和存在 组织损 伤时 ， 其 浓 度 会显著 升高， 而病毒 感染时 则不升 高 ， 因此常用来 鉴别 细菌 和病毒感染 。 ， 是评价疾病活动性和疗效监控的 良好指标 。
ABO血型正反定型不一致
4
处理方法
检验者要严格按照操作规程进行操作： ♦在实验前应将血型卡离心，以使微柱内壁上端 沾有的凝胶离心下来，以免撕膜时各微柱内容 物交叉污染。 ♦撕开卡上部的锡纸膜时，注意避免各微柱间特 异性单克隆抗体的交叉污染。 ♦在使用加样枪或移液器时，应将红细胞悬液或 血清悬空加入各微柱上端，避免一切交叉污染。 ♦工作中养成良好的习惯，查看试剂批号、患者 标本采集日期等。
10
谢谢！
11
祝各位身体健康、工作顺利、家 庭幸福。
2021/3/26Βιβλιοθήκη 125患者原因
1、红细胞抗原变化 （1）红细胞抗原下降：年龄小于6个月或老年
人、白血病、异型血输注（临床提示有输血 史）、造血干细胞移植、血型物质升高（冷凝 集素等）、急性大失血、ABO亚型等。
（2）红细胞抗原额外反应：自身凝集素（临 床提示有自身免疫性疾病）、红细胞粘附大量 蛋白（红细胞未洗涤）、造血干细胞移植、获 得性B抗原、异型血输注等。
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2、血清抗体变化 （1）血清抗体下降：年龄小于6个月或老年、
双胞胎嵌合体（家族史）、低丙种球蛋白血症、 造血干细胞移植、先天性ABO抗体缺失、大 量输液等。
（2）血清抗体额外反应：自身抗体、同种抗 体、对试剂反应的物质、血清蛋白异常（肝病 等）、输异性血浆、造血干细胞移植、输含血 型抗体的免疫球蛋白、ABO亚型。
7
3、混合凝集 近期怀孕或输血、双胞胎嵌合体、骨髓干
细胞移植、白血病等。
8
处理方法
对于这些标本，红细胞要用37 ℃的温盐水洗涤3遍， 再进行鉴定。 另外，有些老人及肿瘤患者，由于血型抗原减弱， 导致正反定型不符。 处理方法：可适当增加血细胞的浓度。对于抗体较 弱的标本，可适当增加血清的比例。
血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因及措施
血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因及措施目的对血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因和处理措施进行探讨。
方法抽取2014年1月～2016年12月间，拟输血患者中ABO血型正反定型不符者18例作为研究对象，对其进一步展开吸收放散试验、抗体筛查、唾液血型物质测定、亚型检测，经ABO疑难血型3步分析法对不符的原因进行分析及鉴定。
结果本次18例ABO血型正反定型不符者中，有2例为人为因素造成，另外16例的原因包括有生理因素、自身抗体因素、血浆蛋白异常、不规则抗体以及血液疾病等因素，其中不规则抗体因素所占比例最高（P＜0.05）。
结论造成ABO血型正反定型不符的原因较多，在临床血型鉴定中应引起重视，积极采取有针对性的确诊试验，展开鉴定分析，ABO血型鉴定时选择正确辅助手段，进而提高血型鉴定准确性，以保证输血的安全性、有效性。
[Abstract] Objective To explore reasons and measures of ABO typing discrepancy in blood grouping. Methods 18 patient with ABO typing discrepancy who were planning to receive blood transfusion from January 2014 to December 2016 were selected as research objects and they were further given absorption-elution test，antibody screening，saliva blood-group substance and subtype blood grouping.Reasons for discrepancy were analyzed and detected by 3-step analytical method of suspicious ABO blood group. Results In 18 patient with ABO typing discrepancy，2 cases were caused by human factors and 16 cases were caused by physiological factors，autoantibodies factors，plasma protein abnormality，irregular antibodies，hematologic diseases and other factors.Of which，proportion of irregular antibodies factors is the highest（P＜0.05）. Conclusion There were many reasons for ABO typing discrepancy which should be paid attention in clinical blood grouping and take targeted confirmatory tests and carry out identification and analysis.Proper supplementary means of ABO blood grouping can further improve accuracy of blood grouping to guarantee safety and effectiveness of blood transfusion.[Key words] Blood grouping；ABO typing discrepancy；Safety of blood transfusion；Suspicious blood group；Influencing factors在實际临床工作中，ABO血型属于输血、器官移植过程中所应用到的一种非常重要的血型系统，确定受血者与供血者之间的ABO血型正确，是有效保证临床输血安全的一个非常重要的前提，也是基本原则。
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现代医药卫生2008年24.卷第6期879 ABO血型反定型全自动微板检测法误读原因分析
易志梅
(南通市红十字中心血站，江苏南通22_7)
文章编号：1009-5519(2008)06-0878-02 中图分类号：R446 文献标识码：B
我站自起用STAR全自动样本处理系统及SUNRISE恒温酶标仪判读微板法测定ABO血型以来，降低了工作强度，避免了人为因素导致的错判。
ABO血型检测的操作实现了自动化、标准化,并可将原始血型资料实现文件化管理，提高了临床输血的安全性。
笔者对12 420例献血员的标本进行ABO血型反定型全自动微板检测法，结果发现有6例反定型酶标仪误读，现总结如下。
1资料与方法
1.1标本：2007年5月~2007年7月献血标本12 420例。
A型和
B 型2%〜4%标准红细胞（每日不同人份A、B新鲜血齐3份用生理盐水洗涤配制）。
仪器;STAR (澳斯邦公司），96孔进口U型板(澳斯邦公司），H e d o l p h TITRAMAX1000，恒温震荡仪，平板离心机(上海离心机厂），酶标仪（SUNRISE)。
1.2反定型方法：用自动加样器STAR扫描各样管条码，并将样品血浆60 加入到U型微孔板中，每人两孔各30 |xl,每孔分别加入配制的A型和B型2%〜4%标准红细胞3 0 |x 1,振荡孵育温度31^,900 r/min,再罝平板离心机上2 000 r/min,离心15s;振荡悬浮温度37t,l 350r/min，振荡20s后，改为600 r/min，振荡1 分钟，酶标仪判读。
1.3酶标仪判读软件编程：原酶标仪判读有基本的判读程序，在此基础上扫描波长为350 nm,以水平线为非凝集参考线，挑选19个典型凝集曲线为参考曲线。
酶标仪判读时，在每一孔读取40个点的数据，由这40个点组成一条曲线。
将此曲线与挑选的19个经典曲线和水平线进行拟合，并设定统计误差。
在误差范围内读取的线与水平线相拟合的为非凝集（-);与19条经典曲线之一相拟合则为凝集(+)。
设定Cuto£f=0.5, S/C0=1。
2结果
12 420例献血员标本中，发现酶标仪误读有6例，各血型比例及误读比例见表1。
3讨论
12 420例献血员标本AB0血型反定型全自动微板检测，有6例酶标仪误读，合格率为99.95%。
酶标仪判读设定C u toff=0.5，S/C0=1，其中A误读为0型为1例（A型标准红细胞+样本血浆0D 值为0.924;B型标准红细胞+样本血浆01)值为1.451),经试管法水浴37度5分钟，鉴定为A型，原因为冷凝集。
1例B型误读为AB 型（A型标准红细胞+样本血浆0D值为0.206;B型标准红细胞+ 样本血浆0D值为0.105)，经肉眼鉴定为脂肪血。
另1例B型误定为0型（A型标准红细胞+样本血浆0D值为2.370;B型标准红细胞+样本血浆0D值为0,684)，经观察为纤维蛋白，原因是漏加EDTA 抗凝剂。
0型误定为B型1例（A型标准红细胞+样本血浆0D值为1,709;B型标准红细胞+样本血浆0D值为0.425),是B型标准红细胞与样本中的B抗体凝集不充分,B抗体效价弱。
0型误读为AB 型1例（A型标准红细胞+样本血浆0D值为0.208;B型标准红细胞+样本血浆0D值为0,154),原因是标本溶血。
AB型误定为B型1例(A型标准红细胞+样本血浆0D值为0.622;B型标准红细胞+样本血浆0D值为0.206),原因孔底有杂质。
要使微板法有较高的准确率有儿点注意事项：（1)要保证震荡仪的温度在37 $。
（2)要保证标本为抗凝血，标本不能溶血，也不能是脂肪血，红细胞和血浆的比例应在1:2的最适比例范围内。
若发现凝集不充分,有细小颗粒，应适当延长振荡反应时间，待凝集充分后再读板。
（3)标准红细胞试剂配制要严格按操作规程进行，要使用新鲜配制的标准红细胞，标准红细胞的浓度要准确。
(4)实验过程要按已建立的实验条件进行操作。
总之，在实际工作中我们必须最大限度地消除影响因素(试剂、标本、红细胞的新鲜程度、加样程序的控制、板的清洁、标本试剂不被污染和失效％。
正反定型最好由不同人操作，工作责任心强，经验丰富，适当长期固定人员，当反定型与正定型不相符时，用试管法做正反定型确认。
以确保临床输血安全。
参考文献：
[1|中华人民共和国卫生部医政司.第二版.全国临床检验操作规程f M f.
2006.122.
|2]李慧，樊忠杰.微板法血型检测几个影响因素的探讨|J j.中国输血杂志,2001,14⑶：165.
收稿日期：2007-11-13。