植物组织培养概念

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植物组织培养

植物组织培养

1.植物组织培养(离体培养):是指在无菌条件下,将植物体的任何一部分,培养在人工配制的培养基上,并给予合适的培养条件,使之发育形成完整植物体的过程。

2、植物组织培养的类型(1)根据培养基的类型分为:固体培养液体培养半液半固体培养(2)根据培养材料(外植体类型)分为:植株培养器官培养组织培养原生质体培养胚胎培养细胞培养(3)按培养过程分:初代培养继代培养生根培养3、植物组织培养的一般工作流程1.准备阶段:(1)查阅资料,制定培养方案;(2)清洗组培用器皿、工具;(3)配制所需试剂和培养基;(4)试剂、培养基及器皿、工具的灭菌。

2.外植体的选择与消毒;3.初代培养;4.继代培养;5.生根培养;6.炼苗移栽4、植物细胞的全能性概念:指植物体的每个活细胞都携带有该物种的全套遗传信息,在适宜条件下,离体细胞都具有发育为一个完整植株的潜在能力。

注意:(1)活细胞(2)离体细胞(3)细胞全能性表达的难易程度取决于细胞的分化程度5、细胞全能性的强弱表现:(1)植物细胞全能性根据细胞的性质不同由强到弱:营养生长中心>形成层>薄壁细胞>厚壁细胞(木质化细胞)>特化细胞(导管等)(2)植物细胞全能性根据所处的组织不同由强到弱:顶端分生组织>侧生分生组织>居间分生组织>薄壁组织>厚角组织>输导组织>厚壁组织6、植物组织培养中全能性表达的条件:1.无菌条件;2.离体条件;3.一定的营养物质;4.植物生长调节物质;5.适宜的外界条件。

7、胚性细胞的特点:未分化状态;细胞具有旺盛分裂能力;具有两极性8、脱分化:指在一定条件下,已分化成熟的细胞、组织或器官恢复到未分化的分生状态,并进行细胞分裂形成未分化的细胞团,如愈伤组织的形成过程。

9、愈伤组织形成的三个时期:(1)诱导期又称启动期(最难)。

(2)分裂期(3)分化期10、优良愈伤组织的特征:(1)具有旺盛的增殖能力;(2)容易散碎;(3)具有高度的胚性或再分化能力,便于植株再生;(4)经过长期的继代保存而不丧失胚性。

植物组织培养

植物组织培养

植物组织培养的含义:将植物的离体材料(器官、组织、细胞、原生质体等)无菌培养,使其生长、分化、繁殖,再生出完整植株或生产次生代谢物质的技术。

植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性:指一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息,在适宜条件下具有发育成完整植株的能力。

外植体:在植物组织培养中,在活体植物上提取下来的,接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。

外植体选择的原则:①、再生能力强;②、遗传稳定性好;③、来源丰富;④、灭菌容易。

植物组织培养的类型:根据培养材料(即外植体)的不同,可将植物组织培养划分为植株、胚胎、器官、组织、细胞和原生质体五个水平上的培养类型。

愈伤组织:原指植物在受伤后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组织培养中,则指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。

植物组织培养的特点:①、培养材料经济;②、培养条件可以人为控制;③、生长周期短,繁殖率高;④、管理方便,利于工厂化生产和自动化控制。

White(1943)撰写的《植物组织培养》是第一部有关植物组织培养的专著。

PH值最适5.6,高温、高压灭菌后PH值会降低,配制时一般为5.7~5.8,若PH值偏高,培养基会偏硬,会不利于植物材料吸取营养;PH值偏低,培养基凝固不好,不利于植物材料的固定。

MS培养基特点:①、无机盐成分很高,硝酸盐、NH+、K+含量高;②、元素平衡较好;③、缓冲性能也比较好;④、微量元素、有机成分丰富、齐全。

无机盐母液适度冷藏保存。

维生素等有机营养元素在—20℃保存,使用前用温水溶解。

MS培养基母液的成分:大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机物母液。

CuSO4、CuCl2取25mg溶于10mL,制成2.5mg/mL溶液,配制50mL微量元素母液,吸取该溶液0.05mL。

灭菌的条件:培养基的成分:1、水分2、无机盐①、大量元素:指植物生长发育所需浓度大于0.5mmol/L的营养元素。

植物组织培养概念

植物组织培养概念

植物组织培养概念
植物组织培养概念
组织培养(广义):又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

组织培养(狭义):指用植物各部分组织,如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

植物组织培养术语
外植体〔explant〕:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。

分化〔differentiation〕:细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变,从而在个发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。

脱分化〔dedifferentiation〕:已分化好的细胞在人工诱导条件下,恢复分生能力,回复到分化组织状态的过程。

再分化〔redifferentiation〕:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程,重新形成各类组织和器官的过程。

愈伤组织〔callus〕:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在外植体切面上产生。

胚状体〔embroid〕:—对应于胚〔embryo〕,在离体培养过程中产生一种形似胚(具有明显的根端和芽端),功能与胚相同的结构。

继代培养:更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料(愈伤组织.芽等)。

植物组织培养

植物组织培养
Vc具有很强的还原能力, 常用于防止组织褐变。
(3)肌醇 又叫环己六醇,在糖类的相互转 化中起重要作用。 使用浓度:一般为lOOmg/L。 作用:适当使用肌醇,能促进愈 伤组织的生长以及胚状体和芽的形 成。对组织和细胞的繁殖、分化有 促进作用,对细胞壁的形成也有作 用。
(4)氨基酸 (almino acide) 作用:蛋白质的组成部分,也是一种有机氮化 合物。是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。 种类:最常用的是甘氨酸,其他的如精氨酸、 谷氨酸,谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等 半胱氨酸及多种氨基酸的混合物(水解酪蛋白、水 解乳蛋白)等。
(11)再分化 经脱分化的组织或细胞在一定 的培养条件下可又转变为各种 不同细胞类型的能力。 (12) 分化培养 经过脱分化阶段的外植体(形 成愈伤组织),转移到另一培 养基上分化出芽(或小球茎) 或胚时,则称为分化培养,所 用的培养基为分化培养基。
(13) 增殖培养 已分化芽、小球茎或无性幼胚再继续进行增殖,即
1. 培养条件可人为控制,周年生产
植物组织培养中的植物材料完全是在人为提供的 培养基及小气候环境下生长的,摆脱了大自然中 四季、昼夜气温频繁变化及灾害性气候等外界不 利因素的影响,且条件均一、对植物生长极为有 利。因此植物组织培养不受气候和季节的限制, 可周年进行生产。
2. 生长周期短,繁殖速度快
植物组织培养可根据不同植物、不同器官、不同 组织的不同要求而提供不同的培养条件,满足其 快速生长的要求,缩短培养周期。一般20~30d就 完成一个繁殖周期.每一繁殖周期可增殖几倍到几 十倍,甚至上百倍,植物材料以几何级数增加。
3. 管理方便,可实现工厂化生产
植物组织培养是在人为的提供一定温度、光照、 湿度、营养和植物生长调节剂等条件下进行的, 不受自然界中病、虫、杂草等有害生物危害,生 产微型化、精细化、高度集约化,重复性强,便 于标准化管理和自动化控制,真正实现了种苗的 工厂化生产。与田间栽培、盆栽等相比,省去了 中耕除草、浇水施肥、病虫防治等一系列繁杂劳 动,可大大节省人力、物力及田间种植所需要的 土地。

植物组织培养概论

植物组织培养概论

广义概念
人工培养植物体一 部分(即外植体 ) 生成完整植株。
愈伤组织:在离体培养过程中在人工培养基 上从外植体上长出来的,改变了它们原有的特性, 具有分生能力的能迅速增殖的无特定结构和功能 的细胞团。多在植物体切面上产生。
外植体:是指从植物体上分离下来的用于植 物组织培养的接种材料,它包括植物体的各种器 官、组织、细胞和原生质体等。
思考题:
1.什么是组织培养?组织培养的原理是什么?
2.组织培养分哪几种类型? 3.组织培养有哪些特点?
四、植物组织培养的理论基础
细胞全能性理论
植物每一个具有 完整细胞核的体细胞, 都含有植物体的全部 遗传信息,在适当条 件下,具有发育成完 整植株的潜在能力。
植物细胞全能性的表达
分裂 细胞 分化 再 分 化 器官 分裂
组织
脱分化
已分化组织细胞
分裂 植株
植物细胞全能性的实现
• 植物的生活史:
受 精 卵 早期胚 胎发育 合 分化 子 胚 组 织 形成 器 构成 植 物 体
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养:为狭义的植物组织培养,是对植物体的 各部分组织进行培养,如茎尖分生组织、形成层、• 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织 等等;或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培 养。二者均通过再分化诱导形成植株。
组织培养
愈伤组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
团按照一定密度在液体培养基中进行培养增殖的技术。
平板培养:是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄
层固体培养基中进行培养的技术。
看护培养:是指利用生长的愈伤组织所产生的物质
来培养单细胞或者异种愈伤组织等的方法。
微室培养:是指人工制造一个微室,将单细胞培养

组织培养技术

组织培养技术

第五章组织培养技术第一节植物组织培养所谓植物组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织. 器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

狭义上是指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也包括在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植株。

一、概述(一)概念1. 植物组织培养:是指通过无菌操作,把植物的外植体接种于人工配置的培养基上,在人工控制的条件下进行培养,使其成为完整植株的方法。

2. 外植体:是指用于植物组织培养的接种材料,它包括植物体的各个器官、组织、细胞和原生质体等。

3. 愈伤组织(Callus ):原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。

(二)组织培养类型1. 根据接种的外植体不同分:胚胎培养;器官培养;3组织培养;细胞培养;原生质体培养;2. 根据培养基态相不同分:固体培养;液体培养;3. 根据培养过程不同分:初代培养;继代培养;(三)植物组织培养历史植物组织培养是20 世纪初开始,以植物生理学为基础发展起来的。

有以下过程:思想准备阶段;理论奠基阶段;技术建立阶段;形态发生阶段;应用研究阶段;1902 年德国植物学家Haberlandt 提出了细胞全能性概念。

1939 年White 报道了烟草组培成功。

并提出植物细胞全能性学说。

同年,Gautheret 与Nobecourt 培养胡萝卜成功。

三人被誉为植物组培奠基人。

罗士韦是我国植物组织和细胞培养研究的开拓者和奠基人之一(四)植物组织培养的应用1•植物的快速繁殖:⑴园艺、花卉植物的大规模快速繁殖;⑵抢救濒危珍稀植物⑶进行某些植物的种质资源保存2•培育无病毒的植物,如脱病毒草莓等;3•制造人工种子。

4 突变体的筛选培育5 药用植物的工厂化生产6 花药培养和花粉单倍体育种7 基因工程的应用等二、实验室设计和设备(一)实验室设计一般具有:1. 准备室器皿洗涤,培养基配制、分装、高压灭菌,植物材料的预处理,重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析等各种操作都要在此室中进行2. 缓冲室进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的卫生服、拖鞋,戴上口罩。

植物组织培养(1)

• 组培的环境温度、光照强度和时间都是人为 设定的,其参数可调。
0.1.3 植物组织培养的研究类型和任务
• 组织培养:分生组织、形成层组织、薄壁组织、韧皮部组 织等。
• 器官培养:根、茎、叶、花、果实、种子。 • 胚胎培养:幼胚、成熟胚、胚乳、胚珠、子房等。 • 细胞培养:单细胞或较小细胞团,如性细胞、叶肉细胞、
1. Thimann和Wickson
• 1958年,他们发现腋芽(当顶芽存在时为休眠状态) 的生长,可以通过外源细胞分裂素的应用而启动。这 样,将茎段培养在含有细胞分裂素的培养基上,就可 以在一个具有完整顶芽的生长中的茎上诱导侧芽的形 成。这将消除顶端优势,得到大量不定芽。
Thimann
2. Morel-脱毒、快繁商业化
• 1922 年 , 植 物 离 体 组 织 培 养 取 得 了 一 些 进 展 。 德 国 人 Kotte和美国人Robbins两人同时分别独立地将分生组织作 为外植体。Kotte研究切下的根尖,如豌豆、玉米根尖, 将它们放在含有Knop溶液盐成分、葡萄糖、含氮化合物 如天冬酰氨酸、丙氨酸以及肉汁的各种营养液中。Kotte 观察到根尖生长持续了2周,但他没有进行继代培养。另 一方面Robbins通过继代,将玉米根尖离体培养了更长的 时间,但随着时间延长,生长量减少,最后消失。
• 1952年, Morel和Martin提出了植物脱毒(virus free)技 术,通过分离已被病毒感染的大丽花个体的根尖,并将其 离体培养,重新获得了无病毒的大丽花。
• 1960年,Morel利用兰花茎尖培养,实现了脱毒和快速繁殖 (rapid clone propagation)的两个目的。这一技术导致欧 洲、美洲和东南亚许多国家“兰花工业”的兴起。
0.2 植物组织培养的形成和发展

植物组织培养(全)

(3)胚培养
胚培养是器官培养的一种。选用的外植体是成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养。其具体方法是将取出放在液体或固体培养基上培养,由于胚包含在胚珠和子房里,因而进行胚胎培养时,常常是将胚珠和子房放在培养基上培养。
胚培养用途:1.拯救胚2.研究胚的发育营养研究3.一些特殊的领域的研究。
(4)细胞和原生质体培养
二是要给予它们适当的刺激,即给予它们一定的营养物质,并使它们受到一定的激素的作用。
全能性体现的两个过程
一个已分化的细胞要表现它的全能性,必须经历两个过程,即首先要经历脱分化过程,然后再经历再分化过程。
再分化的过程有两种方式:
一是器官发生方式 二是胚胎发生方式
2.激素(植物生长调节剂)调控
后来证明,激素可调控器官发生的概念对于多数物种都可适用,只是由于在不同组织中这些激素的内生水平不同,因而对于某一具体的形态发生过程来说,它们所要求的外源激素的水平也会有所不同。
⑤1958年,Wickson和Thimann指出,应用外源细胞分裂素可促成在顶芽存在的情况下处于休眠状态的腋芽的生长。
当把茎尖接种在含有细胞分裂素的培养基上以后,将可使侧芽解除休眠状态,而且,能够从顶端优势下解脱出来的不只是那些既存于原来茎尖上的腋芽,此外,还有由原来的茎尖在培养中长成的侧枝上的腋芽,结果就会形成一个郁郁葱葱的结构,里面包含了数目很多的小枝条,其中每个小枝条又可取出来重复上述过程,于是在相当短的时间内,就可以得到成千上万的小枝条。当把这些小枝条转够到另外一种培养基上诱导生根以后,即可移植于土壤中。
奠基阶段(从20世纪30年代中至20世纪50年代末)
30年代中期,植物组织培养领域两个重要的发现,其一是认识了B族维生素对植物生长的重要意义;二是发现了生长素--一种天然的生长调节物质。

植物组织培养技术


初代培养( culture) 初代培养(primary culture):指在组织 培养过程中,最初建立的外植体无菌培 养阶段。由于首批外植体来源复杂,携 带较多细菌,要对培养条件进行适应, 因此,初代培养一般比较困难。 继代培养( subculture) 继代培养 ( subculture ) : 在组织培养过 程中,当外植体被接种一段时间后,将 已经形成愈伤组织或已经分化根、茎、 叶、花等的培养物重新切割,转接到其 它培养基上以进一步扩大培养的过程称 为继代培养。
另一为药物和生物制品的工业生产,探索 天然药物生产工业化的途径是当前药物生产 的一个新方向,有可能用组织培养法来代替 全植物提取有效成分。组织培养应用在药学 方面的工作虽然历史不长,但发展很迅速, 它具有如下一些优点: 1.利用组织培养代替原植物的栽培以获得 所需的有效成分,达到产量高,成本低的目 的,还可节约土地。 2.除了应用于产生次生物质外,还可应用 于生物转化。例如烟草组织培养中蒂巴因去 甲基后可能生成吗啡。
目前中国已成功地将麦角菌、灵芝、猴 头菇等真菌进行工业化生产,高等植物组织 培养在工业化中的应用也正在研究。 总之,植物组织培养这一新技术在中草药 方面应用的前途是无限广阔的,它不仅有利 于探讨和阐明药用植物生理、遗传和成分生 物合成等一系列理论问题,而且一旦工业化 生产问题得到解决,将可以为防病治病做出 很大的贡献。
2 培养基的种类 MS培养基、B5培养基、White培养基、N6培养基等等。 3 培养基的配制 (1)混和培养基中的各成分 (2)融化琼脂 (3)调整pH为5.8 (4)分装 (5)灭菌 (6)放置备用
二组织培养操作的一般流程
1 2 3 4 5 6 器皿的洗涤 培养基的配制和灭菌 接种室及用具消毒 材料灭菌:70%酒精、氯化汞 接种 无菌培养

植物组织培养的概念及培养的技术条件

植物组织培养的概念及培养的技术条件
植物组织培养是指在无菌条件下,通过分离和培养植物细胞、组织或器官,使其在培养基中进行生长和分化的一种技术手段。

植物组织培养的主要技术条件包括:
1. 无菌条件:采用无菌操作器具和培养基、培养室等设备,确保细胞、组织或器官不受外部微生物的污染。

2. 培养基:植物组织培养需要使用合适的培养基,培养基中含有必需的营养物质、激素和维生素等,以满足细胞、组织或器官的生长和分化需求。

3. 光照条件:光照条件对于植物的生长和分化非常重要,通常需要提供适当的光照强度和光照周期。

4. 温度条件:植物组织培养需要在适宜的温度下进行,一般为20-25摄氏度。

5. 湿度条件:保持适宜的湿度可以促进组织的生长和分化,通常需要在培养基上覆盖一层无毒无菌的凝胶,例如琼脂或洋菜粉。

6.pH值:培养基的pH值对于组织的生长和分化也有一定影响,通常在5.5-6.5之间。

总之,植物组织培养的技术条件主要包括无菌条件、合适的培
养基、适宜的光照、温度和湿度等。

这些条件的合理控制可以促进植物细胞、组织或器官的生长和分化,实现组织培养的成功。

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植物组织培养概念
1.植物组织培养概念:是指在无菌和人工
控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生
质体进行培养,使其再生细胞或完整植
株的技术,又称为植物离体培养。

2.外植体(explant):用于离体培养的那部
分植物器官、组织或细胞。

3.愈伤组织(callus);是指外植体因受伤
或在离体培养时其细胞进行活跃的分裂
增值而形成的一种无特定结构和功能的
组织。

4.植物组织培养的特点是采用微生物学的
实验手段来操作植物离体的器官、组织
和细胞。

这一特点具体表现在以下几个
方面:(1)组培技术是无菌操作技术;
(2)组培材料处于完全的异养状态;(3)
组培材料可以是离体状态的器官、组织、细胞或原生质体;(4)组培培养物可以
形成克隆(clone,无性繁殖系),也可以进
行茎芽增殖或生根;(5)组培容器内的气
体和环境气体可以通过封口材料进行交
换,相对湿度通常是几乎100%,因此,
组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质
层,且气孔保卫细胞功能缺乏,气孔始终
都是张开的;(6)组培的环境温度,光
照强度和时间都是人为设定的,其参数
可调。

5.德国植物学家Haberlandt被公认为是植
物组织培养之父,他与1902年发表的植
物组织培养的第一篇论文:提出了植物
细胞具有全能性,构思了细胞培养的概
念。

6.培养基是植物组织培养的核心,它提供
植物生长所需的营养物质,是决定植物
组织培养成败的关键因素之一。

外植体
之所以能沿着不同的组培途径生长、分
化,其主要原因就在于培养基中的物质
成分对细胞的生长发育起着定向操控作
用。

7.在离体培养条件下,不同种植物的组织
对营养有不同的要求,甚至同一种植物
不同部位的组织对营养的要求也不相
同。

因此,在建立一项新的培养系统时,首先必须找到一种合适的培养基,培养
才有可能成功。

8.培养的构成:(1)水分;(2)无机盐类:
a大量元素b微量元素;(3)有机营养成
分:a糖类物质:蔗糖葡萄糖果糖麦
芽糖b维生素类c氨基酸类;(4)植物生
长调节剂:a生长素:IAA NAA 2,4-D IBA
抑制芽b细胞分裂素:6-BA ZT KT促
进芽分化;(5)天然有机添加物:椰子
汁香蕉泥番茄汁胶木提取液等;(6)pH值:常用5.8 过高培养基变硬,过低
培养基不凝固;(7)凝固剂:常用琼脂(粉) 7-10g\L;(8)其他添加物:活性炭。

9.配培养基的琼脂一般称取0.7%,蔗糖
3%。

10.培养基母液的配制:(1)大量元素合并
配制;(2)微量元素合并配制;(3)钙
盐(氯化钙;(4)鉄盐(螯合铁);(5)有机成分分别配制;(6)生长调节剂分
别配制。

11.培养基的配制:琼脂——蔗糖——按顺
序取母液到烧杯中——容量瓶定容——
调pH值——分装、封口——灭菌20min
12.高压灭菌锅一般灭菌20 min.
13.外植体的成苗途径:
芽、根
(1)愈伤组织途径:外植体——愈伤组织——
芽——根——试管苗
根——芽
(2)胚胎发育途径:外植体——胚状体——试管苗
(3)直接成苗途径(如茎尖培养):外植体——根、芽——试管苗
14.经过初代培养外植体可能会出现褐变、
玻璃化、污染等现象
(1)污染:植物培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌导致培养失败的现
象。

原因:空气中病原菌污染(细
菌、真菌);外植体、培养基、培养
器皿带菌;操作人员未遵守操作规
程。

污染的预防措施:《1》防止材
料带菌<2>防止用具带菌《3》接种
室处于无菌状态《4》培养物处理后
应及时淘汰并作高压灭菌处理《5》
操作人员应按操作程序进行
(2)褐变;指外植体在培养过程中体内的多分氧化被激活后,使
细胞内的酚
类物质氧化成棕褐色醌类的物质,
褐化物不断向外扩散培养基变成褐
色,严重影响外植体脱分化最后变
色死亡。

预防措施:(1)选择适宜
的外植体及最佳培养基(适当降低
培养基无机盐浓度,降低pH值,降
低细胞分裂素水平等,可显著减轻
培养物褐变)(2)连续转移(3)加
抗氧化剂,如硫代硫酸钠、抗坏血
酸(4)加活性炭(5)加多酚类物
质,如精氨、亚精胺。

(3)玻璃化:指植物培养过程中的特有的一种生理失调或生理病变,试管
苗呈现半透明状外观形态异常的现
象。

预防措施:(1)适当控制培养
基无机盐浓度(氯浓度尤其铵态氮
浓度不能过高)(2)适当控制培养
基中蔗糖和琼脂浓度(3)适当降低
细胞分裂素和赤霉素浓度(4)增加
自然光照,控制光照时间(5)控制
好温度(6)改善培养皿的气体交换
状况(7)在培养基中添加其他物质15.植物细胞全能性:即植物体细胞具有全
部的遗传信息,在适当的条件下,具有
不断分裂和繁殖、发育成完整植株的能
力。

16.植物生长调节剂有明显调节作用。

如生
长素与分裂素比值高,促进生根;低,
促进长芽。

17.离体培养中再生植株的主要途径:器官
发生型和胚胎发生型。

(1)器官发生再生植株的方式:A先形成芽,芽的基部后产生后根;B先
形成根,根上再出芽;C愈伤组织的
不同部位形成芽和根,然后形成维
管束组织把两者结合起来。

(2)植物体细胞胚胎发生途径:A直接途径指从外植体某些部位的胚性细
胞直接诱导分化出体细胞胚胎,如
子叶、花序、珠心等外植体;B间接
途径外植体先脱分化形成愈伤组
织,再由愈伤组织的某些细胞重新
“决定”为胚性细胞,进而分化出体
细胞胚胎。

多数体细胞胚胎通过该
途径的。

18.形态发生和植株再生:
体胚途径————————————植株
外植体——
愈伤组织——具根茎的两级器官——植株
器官化途径先茎后根——植株
单极器官
先根后茎——植株
19.茎尖培养脱毒的基本原理:(1)病毒在
植物体内分布不均匀,病毒的数量随植
株年龄和部位不同而异,茎尖顶端区域
病毒感染低。

(2)茎尖大小与脱毒效果,取茎尖越小越好,但太小不易成活,过
大又不能保证完全除去病毒。

20.植物快繁的器官再生主要分为五种类
型:(1)短枝发生型(2)丛生芽发生型:是大多数植物快繁的主要方式(3)不定
芽发生型(4)胚状体发生型(5)原球
茎发生型
21.制备单细胞:愈伤组织或悬浮培养物
(常)用纤维素酶或果胶酶从组织分离22.原生质体:去掉细胞壁的由之末包裹、
具有生活力的裸露细胞。

23.原生质体融合:也叫做体细胞杂交,使
分离出来的不同亲本的原生质体,在人
工控制条件下,相互融合成一体,形成
杂种细胞,并进一步发育成杂种植株的
技术。

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