金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析

盒购自法国梅里埃公司， 操作方法按说明书进行， 结果观察有无凝集颗粒出现， 如出现凝集颗粒即判 定为 ＭＲＳＡ 株。
２．３ 肠毒素检测： 用反向间接血凝试验（ ＲＰＨＡ） ， 具 体 操 作 参 照 文 献［２］进 行 。
表 １ ２６０ 株 ＳＡ 不同方法 ＭＲＳＡ 检测情况
ＦＯＸ方 法（％）
ＰＢＰ２ａ 方法（％）
１３４ 株 ， ＭＳＳＡ １２６ 株 ； 用 检 测 ＰＢＰ２ａ 的 方 法 ， 检 测 １９．４％、１６．４％、１３．４％； ＭＳＳＡ １２６ 株， 产肠毒 素 率 为
出 ＭＲＳＡ １２４ 株， ＭＳＳＡ １３６ 株。经卡方检验， Ｐ ＞ ３０．２％（ ３８／１２６） ， 以 ＳＥＢ 为主， 占 ９．５％。ＭＲＳＡ 与
江西医学检验 ２００６ 年 ８ 月 第 ２４ 卷 第 ４ 期
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２．１ 毒检能迅速检出中毒患者所中毒物种类， 为临床提供 诊疗依据。不醒人事的中毒病人， 被送到医院后， 当医生问及 病史时， 亲朋好友众说不一， 临床医生则往往举棋不定， 通常 只好按常规洗胃洗肠， 对症治疗， 其效果常常不能令人满意。 有时还会适得其反， 例如： 有机磷和氨基甲酸酯中毒时均有 胆碱能毒蕈碱样和烟碱样症状［１３］。有机磷中毒， 一般说不能应 用高锰酸钾洗胃洗肠， 因为高锰酸钾能使有机磷氧化成毒性 更强的氧化型有机磷。敌百虫变成敌敌畏， 对硫磷变成对氧 磷等。２００２ 年 ８ 月一位面色苍白、抽搐不止的儿童被送到我 院抢救， 其父叙述病史说： 母亲精神不好， 可能吃了抗感冒 药。致使临床医生无法对其抢救治疗， 经我毒检中心检测， 血 样中有大量有机磷成分， 胆碱脂酶活力 ３０％。急诊医生迅速 采取针对治疗， 使患儿转危为安， 毒物检测可以及时的检测 出送检物品所含毒物成分， 对病人的确诊以及医生的及时救 治， 提高治愈率起着至关重要的作用。
方法 １： 参照 ＮＣＣＬＳ ２００５ 年推荐的用 Ｋ－ Ｂ 法 检测头孢西丁（ ＦＯＸ） 的抑菌环直径， 当 ＦＯＸ 的抑菌 环直径≤１９ｍｍ 时即判定为 ＭＲＳＡ 株。
方法 ２： 乳胶结合试验的方法检测 ＰＢＰ２ａ， 试剂
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Ｊｉａｎｇｘｉ Ｊ． Ｍｅｄ Ｌａｂ Ｓｃｉ．Ａｕｇｕｓｔ ２００６， Ｖｏｌ ２４， Ｎｏ４
ＭＳＳＡ（１２６ 株）
检出数（３８ 株）ຫໍສະໝຸດ 检 出 率（％）Ａ
２８
１０．８
２２
１６．４
Ｂ
３８
１４．６
２６
１９．４
Ｃ
２６
１０．０
１８
１３．４
Ｄ
１６
６．２
１０
７．４６
Ｅ
８
３．１
８
５．９７
ＡＢ
１０
３．８
８
５．９７
ＡＣ
８
３．１
８
５．９７
ＡＤ
１２
４．６
１０
７．４６
ＢＣ
８
３．１
６
４．４７
ＡＢＣ
６
２．３
６
４．４７
ＡＣＤ
［关键词］ 金黄色葡萄球菌； 肠毒素
Ｄｅｔｅｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒ ｅｕｓ ｅｎｔｅｒ ｏｔｏｘｉｎ ＬＩ Ｈｏｎｇｙｕ， ＬＯＮＧ Ｊｕｎ， ＸＵ Ｘｉａ． Ｔｈｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｓｕｎ Ｙａｔ－ Ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０１２０， Ｃｈｉｎａ
２．５ 数据统计 卡方检验。
６６．２％， 主要为 ＳＥＡ 型 １０．８％（２８／２６０）、ＳＥＢ 型 １４．６％
结果
（３８／２６０）、ＳＥＣ 型 １０．０％（ ２６／２６０） ， 同时产二种或二种
１ ＭＲＳＡ 检测结果
以上的肠毒素的占 ２１．５％（ ５６／２６０） ； 其中 ＭＲＳＡ１３４
２６０ 株 ＳＡ， 用检测 ＦＯＸ 的 方法， 检测出 ＭＲＳＡ 株 ， 全 部 产 肠 毒 素 ， 以 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ 为 主 ， 分 别 为
６
２．３
６
４．４７
ＡＢＤ
６
２．３
６
４．４７
未检出肠毒素
８８
３３．８
０
０．００
６
４．８
１２
９．５
８
６．３
６
４．８
－
－
２
１．６
－
－
２
１．６
２
１．６
－
－
－
－
－
－
８８
６９．８
合计
２６０
１００．０
１３４
１００．０
１２６
１００．０
讨论 本 文 采 用 乳 胶 结 合 试 验 的 方 法 检 测 ＰＢＰ２ａ 判 定 ＭＲＳＡ， 其原理为 ＰＢＰ２ａ 单克隆抗体致敏的 乳胶 颗粒与 ＭＲＳＡ 的膜蛋白提取作用， 产生肉眼可见的 凝集颗粒； 从表 １ 可见， 与 ＮＣＣＬＳ 推荐的检测头孢 西 丁 方 法 来 判 定 Ｍ Ｒ Ｓ Ａ 相 比 ， 结 果 无 差 异（Ｐ ＞ ０．０５）， 说明在方法学上无差异， 两者的一致性较好。 近年来革兰阳性菌引起的院内感染明显上升， 主要表现为革兰阳性菌脓毒血症的发生率显著提 高， 至上世纪 ９０ 年代已占脓毒血症发生率的 ４０％， 其中金黄色葡萄球菌肠毒素致脓毒血症的能力居 首位［２］， 金黄色葡萄球菌， 特别是 ＭＲＳＡ 能产生许多 外毒素， 包括肠毒素（ ＳＥ） 和中毒性休克综合症毒素 － １， 这两类毒素在 ｐｇ／ｍｌ 水平即可引起体内产生强 大生物学效应， ＳＥ 是 ＳＡ 产生的重要外毒素之一， 除 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ、ＳＥＤ、ＳＥＥ 外 ， 近 几 年 又 发 现 了 ＳＥＧ、ＳＥＨ、ＳＥＩ、ＳＥＪ、ＳＥＫ、ＳＥＬ、ＳＥＭ、ＳＥＮ、ＳＥＯ 等 新
型 的 肠 毒 素 ［３］， 其 中 ＳＥＡ 型 毒 力 最 强 ， 最 常 见 ， ０．１ｐｇ／ｍｌ 即可引起中毒。
从表 ２ 结果可见： 从临床各标本中分离出的 ２６０ 株 ＳＡ 中 产肠毒素的 有 １７２ 株 ， 占 ６６．２％， 主 要 为 ＳＥＡ 型 、ＳＥＢ 型 、ＳＥＣ 型 １０．８％（２８／２６０）、 １４．６％ （３８／２６０）、１０．０％（ ２６／２６０） ， 同时产二种或二种以上的 肠毒素的 占 ２１．５％（ ５６／２６０） ， 与文献 ［４～６］ 报 道 相 符 。 另 ＭＲＳＡ 产肠毒素率为 １００．０％（ １３４／１３４） ， 以 ＳＥＡ、 ＳＥＢ、ＳＥＣ 为主， 分别为 １９．４％、１６．４％、１３．４％； ＭＳＳＡ 产 肠 毒 素 率 为 ３０．２％ （ ３８／１２６） ， 以 ＳＥＢ 为 主 ， 占 ９．５％， 与相关的报道［３，５］接近， ＭＲＳＡ 与 ＭＳＳＡ 的产肠 毒素率存在显著的差异 （ Ｐ＜ ０．０１） ， 提示 ＭＲＳＡ 较 ＭＳＳＡ 有 更 强 的 毒 力 和 致 病 性 ， ＭＲＳＡ 对 临 床 病 人 特别是免疫力低下的患者构成的潜在的威胁更大。 ＳＡ 产毒株的存在给临床治疗和预防院内感染方面 带来了许 多 困 难 ， 因 此 ， 在 检 测 ＭＲＳＡ 耐 药 性 趋 势 的同时检测其肠毒素的产生情况， 把 （下转第 ３５３ 页）
江西医学检验 ２００６ 年 ８ 月 第 ２４ 卷 第 ４ 期
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金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析 ＊
李红玉 １ 龙 军 １ 徐 霞 ２ 中图分类号 Ｒ４４６．５，Ｑ９３５，Ｒ３７８．１＋１
文献标识码 Ａ 文章编号 １００８－ ００２３（２００６）０４－ ０２９１－ ０３
·论 著·
［摘要］ 目的 了解引起临床感染的金黄色葡萄球菌（ ＳＡ） 携带肠毒素（ＳＥ）的情况。 方 法 对 从 临 床 标本中分离出的 ２６０ 株 ＳＡ， 用反向间接血凝试验检测其肠毒素， 耐 甲 氧 西 林 金 黄 色 葡 萄 球 菌 （ ＭＲＳＡ） 检 测按 ２００５ 年美国临床实验室标准化委员会（ ＮＣＣＬＳ） 推荐的检测头孢西丁方法进行。 结果 ２６０ 株 ＳＡ 中 有 １７２ 株 携 带 肠 毒 素 ， 占 ６６．２％， 主 要 为 ＳＥＡ 型 １０．８％（２８／２６０）、ＳＥＢ 型 １４．６％（３８／２６０）、ＳＥＣ 型 １０．０％ （ ２６／２６０） ， 同时携带二种或二种以上肠毒素的占 ２３．８％（ ６２／２６０） ； 其中 ＭＲＳＡ １３４ 株， 全部携带肠毒素 ， 且 以 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ 为 主 ， 分 别 为 １９．４％、１６．４％、１３．４％； 甲 氧 西 林 敏 感 金 黄 色 葡 萄 球 菌 （ ＭＳＳＡ） １２６ 株 ， 携 带肠毒素率为 ３０．０％（ ３８／１２６） ， 以 ＳＥＢ 为主， 占 ９．５％。 结论 临床上 ＳＡ 分 离 株 大 部 分 都 携 带 肠 毒 素 ， 且 以 ＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ 为主， ＭＲＳＡ 的带毒率高于 ＭＳＳＡ。
［Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ］ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ； Ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ
金黄色葡萄球菌至今仍是国内外医院获得性 感 染的常 见 病 原 菌 之 一 ， 除 引 起 皮 肤 、组 织 及 器 官 的化脓性炎症外， 其产生的毒素因超抗原特性以及 在 中 毒 性 休 克 综 合 征 、多 器 官 功 能 障 碍 综 合 征 的 发 病中的特殊意义而倍受关注。因此， 对临床分离的 金黄色葡萄球菌进行肠毒素的检测有重要的临床 意义。
材料与方法 １ 材料
＊基金项目： 广州市医药卫生科技项目（ ２００５－ ＹＢ－ １３５） 作 者 单 位 ： ５１０１２０ １、广 州 ， 中 山 大 学 附 属 二 院 检 验 科 ； ２、广 州医学院检验系 作者简介： 李红玉， 女， １９６７ 年出生， 副主任技师， 主要从事临 床微生物检验及耐药性研究。