尿液一般检验-尿液有形成分显微镜检验
尿液显微镜检验尿液有行成分检验
外形多变，不规则，结构模糊，浆内充满粗大颗粒，核
不清楚，细胞常成团，边界不清，已为死亡细胞。
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白细胞
放大倍数1000，Giemsa染色 放大倍数400，不染色
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嗜中性白细胞 (无染色)
嗜中性白细胞 (染色)
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白细胞
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单核细胞
中性粒细 胞
✓尿沉渣定量计数板法 ✓尿沉渣定量显微镜图像工作站法
尿沉渣染色法
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1. 直接涂片法
❖ 又称混匀一滴尿法，取一滴尿于载玻片上，直接用显 微镜观察尿液各种有形成分
❖ 方法学评价 简便、易行、快捷，适用于急诊病人。 阳性率低，重复性差，易漏诊。 适用于肉眼浑浊的尿液。
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尿液中的上皮细胞
放大倍数：400
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尿液中的上皮细胞
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尿液中的上皮细胞
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肾小 管上 皮
鳞 状 上 皮
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移行上皮 （小圆上皮）
移行上皮 （尾形上皮）
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A.小圆上皮细胞
B.白细 胞
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尾 形 上 皮 细 胞
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尾形上皮细胞
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临床意义
❖尿中出现呑噬细胞提示泌尿道急性炎症 ❖见于急性肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎等 ❖常伴有白细胞、脓细胞和细菌存在
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⒉ 管型
❖ 尿液管型(cast): 是一些有机物或无机物，如 蛋白、细胞或结晶等成分，在肾小管(远曲小管) 和集合管内凝固聚合而形成的圆柱状结构物。 ❖提示有肾实质性损害 。 ❖与临床症状结合，对急性或慢性肾炎、肾病综 合征有特异的诊断意义。
11 尿液显微镜检查
第六章 尿液一般检验
红细胞
双凹圆盘状，浅黄色，直径约8μm， 厚约3μm，中度折光性，侧面观呈沙漏状。高渗尿中 ，呈锯齿形，有时可见表面呈颗粒状。低渗尿中，为 无色的影细胞。 每升尿液中含血液在1ml以上时，能见到不同程度 的红色称为肉眼血尿； 每升尿液中含血液在1ml以下时，只能用隐血试验 或沉渣镜检发现，称隐血或镜下血尿。
3.固定染色法
瑞-吉染色、H-E染色、巴氏染色、苏丹Ⅲ染色等方法
第五章 尿液一般检验
（四）尿液颗粒计数参考方法
• Fuchs-Rosenthal（菲斯-罗森塔）血细胞计数板
每侧计数池划线格面积16mm2，计
数室深度为0.2mm，总容量为3.2 mm3；分为16个中方格，每个中方
格面积为1mm2，容积为0.2mm3。
可根据情况采用离心非离心尿液进行检测，是尿液有形成分检查的“金标准”
缺点
成本高，耗时； 计数板为聚乙烯材料，焚毁时易污染环境
1h细胞排泄率试验
采用改良牛鲍氏计数板定量检查，无需特殊器材，经济 对有形成分影响小，不需严格限制饮食，适用于门诊及住院患者 的连续检查。 反映单位时间内尿液中所排出的细胞、管型数量。 在规定时间内留取尿液，属真正意义上的定量计数，更准确地反 映泌尿系统状况 自动进样，重复性好，准确定量、视野清晰、操作简单、速度快 捷,节省成本,有助于尿液分析特别是尿沉渣检查的规范化,标准化 采用不离心的新鲜尿液进行测定，对有形成分影响小。 适合含有少量细胞、特别是管型的尿液有形成分检测；也常用于 脑脊液及其他体液的细胞计数。 精密度、准确度显著提高。 符合体外诊断产品（in vitro diagnostic products，IVD）98/79 指令要求，拥有欧盟CE标志。 2003年，被ISLH作为尿中红细胞、白细胞、透明管型和鳞状上 皮 细胞的参考计数方法 操作简单、快捷、减少因离心造成的有形物损失 阳性率和精确度与定量尿液有形成分分析板法相关性较好
最新 尿液一般检验 05 有形成分显微镜检查(下)
5．显微镜检查方法 如使用尿沉渣涂片，先在
低倍视野（10×10）下观察尿液有形成分的分布情况。
6．鉴别有形成分形态 如尿液红细胞与真菌、草
酸钙结晶等的鉴别。
（三）检测后质量保证 1．综合分析检查结果（表5-44） 2．核对申请单（报告单） 3．检查结果及时反馈
4．资料分析
图5-30 胆固醇结晶
五、尿液其他有形成分及临床意义
1．细菌 尿液细菌有革兰阴性杆菌和革兰阳性 球菌，以大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌 等多见。
2．真菌 ①白假丝酵母菌。②酵母菌（图5-31）。
3．寄生虫及虫卵 尿液中的寄生虫及虫卵多因
标本被污染所致。
4．精子 5．纤维状物 6．其他
图5-31 尿液酵母菌形态（S-M染色）
（二）检测中质量保证
1．标准化操作 严格按照操作规程进行检
查，CLSI、JCCLS和CCCLS对尿液有形成分
显微镜检查有严格要求（表5-41）。
2．离心机 采用有盖、水平式离心机，离 心机转速显示应准确、直观，定期校正，离心 机内温度应保持在15℃～25℃。
3．离心 尿液标本应为10ml，如不足10ml，则报 告时应注明。RCF 400g，离心5min，应避免离心力过 大对有形成分，特别是管型的破坏。 4．制备涂片或充入标准化沉渣定量计数板
图5-23 草酸钙结晶
图5-24 尿酸结晶
（二）碱性尿液中的结晶 碱性尿液内的结晶，一般是磷酸盐类结晶，包括
非晶形磷酸盐、磷酸铵镁、磷酸钙、碳酸钙、尿酸铵
及尿酸钙等。
图5-25 三联磷酸盐结晶
（三）其他结晶
图5-26 胆红素结晶
图5-27 胱氨酸结晶
图5-28 亮氨酸结晶
尿液有形成分检测原理
尿液有形成分检测原理尿液有形成分检测是医学检验中非常重要的一项内容，它可以帮助医生诊断泌尿系统疾病、评估疾病严重程度、监测治疗效果等。
尿液有形成分检测主要通过以下几种方法进行：显微镜检查、化学检测、免疫检测和自动化分析。
显微镜检查显微镜检查是尿液有形成分检测的基本方法之一。
它通过将尿液样本置于显微镜下观察，可以发现尿液中的各种有形成分，如红细胞、白细胞、上皮细胞、管型等。
显微镜检查的原理是利用光学显微镜对尿液中的有形成分进行直接观察，通过不同的视野和倍数，可以发现不同大小和形状的有形成分。
化学检测化学检测是尿液有形成分检测的另一种方法。
它主要是通过化学反应来检测尿液中的有形成分。
尿液中的某些化学物质可以与特定的试剂发生反应，产生颜色变化或者沉淀等，从而间接检测出尿液中的有形成分。
化学检测的原理是利用化学反应的特异性，将尿液中有形成分的存在转化为可见的信号，以便于医生的诊断。
免疫检测免疫检测是利用免疫学原理来检测尿液中的有形成分。
免疫学是研究机体免疫系统组成、结构和功能的科学，它通过识别和中和外来物质，保护机体免受病原体的侵害。
在尿液有形成分检测中，免疫检测的原理是通过将尿液中的有形成分作为抗原，利用特异性抗体来检测其存在。
如果抗原和抗体发生特异性结合，则说明尿液中含有该抗体对应的抗原，即有形成分。
免疫检测具有高特异性和灵敏性，适用于临床常规检查。
自动化分析随着科技的不断发展，自动化分析仪器在尿液有形成分检测中得到了广泛应用。
自动化分析仪器利用物理、化学和免疫学等原理，能够快速、准确地检测尿液中的多种有形成分。
这类仪器具有高效率、低误差、可重复性好等优点，可以大大提高尿液有形成分检测的效率和准确性。
在自动化分析中，尿液样本经过处理后，被加入到仪器中进行检测。
仪器通过读取和分析样本中的有形成分，将其转化为可分析的数据，以便医生进行诊断。
结论尿液有形成分检测是医学检验中的重要内容，它为医生提供了关于泌尿系统疾病的重要信息。
尿液有形成分显微镜检查
二、尿液细胞检查
尿液移行上皮细胞 表层移行上皮细胞 中层移行上皮细胞 底层移行上皮细胞
表层移行上皮细胞
中层移行上皮细胞
二、尿液细胞检查
尿液鳞状上皮细胞
鳞状上皮细胞来自输尿管下部、膀胱、尿道和阴道的表 层。
尿液中镜下红细胞>3/HPF，且肉眼不能看到尿液显血色， 称为镜下血尿(microscopic hematuria)。
1L尿液中含血量在1ml以上，肉眼能观察到尿呈红色， 称为肉眼血尿（macroscopic hematuria)。
尿液中的红细胞
尿液中的红细胞
二、尿液细胞检查
尿液红细胞检查
正常红细胞为双凹圆盘状； 高渗尿中红细胞皱缩，体积变小，呈锯齿形、棘形等； 低渗尿中红细胞胀大，呈环形红细胞或者影红细胞。
Fuchs-Rosenthal血细胞计数板
尿液有形成分检查方法学比较
一、尿液有形成分检查概述
尿他
检查
检查
二、尿液细胞检查
红细胞 吞噬细胞
白细胞 上皮细胞
二、尿液细胞检查
尿液红细胞检查
正常人尿中排出红细胞甚少，如每个视野见到1-2 个红细胞时应考虑为异常。
尿液中的吞噬细胞
二、尿液细胞检查
尿液上皮细胞检查
肾小管上皮细胞 renal tubular epithelium
移行上皮细胞 transitional epithelium
鳞状上皮细胞 squamous epithelial cell
二、尿液细胞检查
尿液肾小管上皮细胞
来自肾小管，较中性粒细胞大1.5倍左右，细胞 核圆形较大，核膜很厚。常为多边形，胞质中 有小空泡、颗粒或脂肪小滴。
一、尿液有形成分检查概述
尿液有形成分检测的方法学评价
尿液有形成分检测的方法学评价1.显微镜检查:目前，尿沉渣检查虽可用尿沉渣分析仪进行定性或定量检查。
但迄今为止，仍无任何一种仪器可以完全代替显微镜检查，尿沉渣显微镜检查仍然是一种方法简便、价廉、结果最可靠的检查方法，尿沉渣显微镜检查同时也是最重要参考方法。
(1)直接镜检法:简便但阳性率低，重复性差，易漏诊。
仅适用于急诊有明显混浊血尿、脓尿的检查。
(2)离心法:敏感阳性率高，但操作较整理繁琐费时。
国内外对临床尿沉渣检查方法，已制定了标准化操作程序。
(3)定量尿沉渣计数板法:使尿沉渣检查更符合标准化的要求。
(4)染色法:有助于识别细胞、管型等。
1)Sternheirner-Malbin(SM)染色法:为常用的染色方法，能辨别管型尤其是透明管型及各种形态的红细胞、上皮细胞，并能区别存活及死亡的中性粒细胞和检出闪光细胞。
2)巴氏染色法:观察有形成分的微细结构，对泌尿道肿瘤细胞和肾移植排异反应具有诊断意义。
3)其他特殊染色: ?尿沉渣结合细胞化学染色、荧光抗体染色和酶免疫化学染色法:可清晰地辨别各种细胞、管型的形态结构。
?细胞过氧化物酶染色:根据粒细胞含过氧化物酶的特点，可鉴别不典型的红细胞与白细胞，并可区别中性粒细胞管型及肾上皮细胞管型。
?酸性磷酸酶染色:可区分透明管型与颗粒管型。
?阿利新蓝、中性红等混合染色:可辨别白细胞种类和细胞存活情况;区分正常红细胞、小红细胞、影红细胞及上皮细胞、管型种类。
(5)偏振光显微镜检查:可识别脂肪管型中的脂肪成分，如胆固醇酯，在管型的黑色背景中嵌有大小不等的明亮球体，中心为黑色的十字架形状，又称马尔他十字;鉴别和确认尿沉渣中各种结晶。
2.仪器法: 灵敏度较、重复性好，速度快，效率高;但目前尿沉渣分析仪特异性仍有待提高。
尿液有形成分显微镜检查几点探讨
尿液有形成分显微镜检查几点探讨中华医学会检验分会血液体液学组近期对"尿液沉淀检查标准化问题"采取自上而下遵守意见，再自下而上的反复修改取得一致的意见。
深信这对尿液有形成分检查的标准化、规范化与国际接轨有助。
如能在检验实践中贯彻推行，必将会进一步提高在尿液分析中这一重要组成实验的质量。
现就正确采集尿标本，染色及选用不同显微镜，加强对尿液有形成分深入研究；尿有形成分的参考范围，及尿液沉渣的床边分析等问题就近期查阅到的文献作以下探讨。
一、采集合适尿标本这是保证尿液有形成分质量不可缺少的第一步。
我们近期用UF-100对门诊56例病人（男14，女42）在观察前后二段排尿的实验结果后发现：男性前、后尿中红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌等五项指标两者无明显统计上差异，而女性病人则前段尿中红细胞、白细胞、上皮细胞及细菌均明显高于后段尿(1) （P<0.01），考虑在女性为白带污染所致。
查欧洲尿分析组（ECLM）文件中有详细的如何留取各不同年龄组如何采集尿液标本图式(2)。
伊藤机一在"尿实验纸检查法"JCCLS提案指针中详细介绍了男性、女性中段尿留取顺序，着重强调了应用消毒脱脂棉纱布留尿前垫在尿道口擦拭后再留取中段尿的手法(3)。
二、用染色法提高对尿有形成分的鉴别一般尿沉渣检查用不染色标本，但为防止漏检透明管型等有形成分，及鉴别白细胞、闪光细胞、上皮细胞、病理管型、结晶、细菌、霉菌等以进一步确认时可以鉴别染色体；我们已在全国临床检验操作规程中列出Sternheimer-Malbin染色法(4)。
但发现临床实验室很少开展此项染色法，不知何故？ECLM除介绍了上述S-M法外，认为Sterheimer法，AlcianbluepyroninB 染色优于S-M法；文中也强调可采用染色结果清晰的甲苯胺蓝(O-Toulidine)(2)。
而NCCLS Gp16A尿分析文件中提出按不同成分采用不同的染色法；如染脂肪或卵圆脂肪体用油红-O或苏丹III，染细菌用Gram染色或巴氏染色，染嗜酸性粒细胞用Hansel染色，瑞氏、吉氏、瑞-吉氏，巴氏染色等，而染含铁血黄素用普鲁氏蓝染色(5)。
尿液有形成分显微镜检查
尿液有形成分显微镜检查一、不离心镜检法方法：直接混匀新鲜尿液1滴涂片显微镜检查。
结果：管型，以低倍镜视野全片至少20个视野所见的平均值报告；细胞，以高倍镜至少10个视野所见的最低——最高数的范围报告；尿结晶等，以每高倍视野所见数换算为半定量的“-、+-、1+、2+、3+”等级报告。
二、离心镜检法方法：取新鲜混匀尿液10ml,在400g离心力（约1000转/min）条件下离心5分钟后，倾倒或吸弃上清尿液，留取底部约0.2ml尿液，混匀显微镜检查。
结果：管型，以低倍镜视野全片至少20个视野所见的平均值报告；细胞，以高倍镜至少10个视野所见的最低——最高数的范围报告；尿结晶等，以每高倍视野所见数换算为半定量的“-、+-、1+、2+、3+”等级报告。
三、离心染色镜检法方法：Stenheimer-Malbin染色法：结晶紫和沙黄；Stenheimer染色法：阿利新蓝和派若宁B；或0.5%甲苯胺蓝染色。
需要制备特定涂片，如浓缩涂片、印片或细胞离心涂片等。
结果：不同染色结果报告各不一致。
四、计数板定量镜检法（1小时尿沉渣计数）方法：患者先排尿弃去，准确采集3h内的全部尿液N ml。
取混匀尿液10ml，1500r/min离心5分钟，吸去上层尿液9ml,留下1ml，充分混匀后，取混匀尿沉渣充入牛鲍血细胞计数板内。
计数10个大方格的细胞、计数20个大方格的管型，然后换算成1h尿液中细胞和管型的数量。
计算：1小时细胞数=10个大方格的细胞总数*1000/10*N/31小时管型数=20个大方格的细胞总数/2*1000/10*N/3式中：1000为ul换算为ml；10为尿液浓缩倍数；N为3h内的全部尿液量ml。
参考：红细胞男性<3万/小时；红细胞女性<4万/小时.白细胞男性<7万/小时；白细胞女性<14万/小时.管型<3400个/小时。
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一、概 述
• 尿液有形成分是指通过尿液排出体外并能在显微 镜下检查到的成分。包括细胞、管型、结晶及某 些病原体等。也被称为“肾的体外活检”。
• 可利用显微镜或尿液有形成分分析仪进行识别与 计数。
• 标准化尿液显微镜检查法是尿液有形成分检查的 “金标准”。
二、主要检验方法
（一）尿液有形成分非染色非定量镜检法
1．未离心未染色尿直接涂片镜检法
混匀新鲜尿液直接涂片，低倍镜观察管型（至少20个视野）； 高倍镜观察细胞（至少10个视野）及其他成分（如细菌、原虫、 真菌病毒包含体和肿瘤细胞等）并对管型种类进行鉴定。
报告细胞：最低数～最高数/HP；管型：最低数～最高数/LP； 结晶‘细菌、真菌、寄生虫，按高倍镜视野中分布范围估计报告， 用“+”表示。
1小时细胞数＝10大格细胞总数 1000 3小时尿总量ml数
10
3
1小时管型数＝20大方格管型总数 1000 3小时尿总量ml数
2
10
3
式中：1000为ml换算成μl 数；10为尿液浓缩倍数。 改良牛鲍氏计数板定量检查法还可用于Addis计数。
• 4. 尿液有形成分定量计数仪法
由自动进样系统、流动计数池、显微镜和计算机控制系统组成。 流动计数池大小与标准载玻片相同，有4个大格，总容积1μl，每 个大方格又分为25个小方格，每个小方格容积为0.01μl。 ①标本离心浓缩50倍。 ②进样。 ③观察流动计数池中央视野中的有形成分；计数1个小方格内细胞数，结 果 乘以100，或计数10个小方格内的细胞总数乘以10，换算出1μl尿液中 的细胞数。计数1个大方格内管型数，结果×4，即得出1μl尿液中的管型 数。 ④若有形成分含量较多，也可采用未离心标本直接计数。 ⑤结果报告方式同尿液有形成分定量计数板法。 ⑥注明标本是否离心。
第五章 尿液一般检验
第五章
尿液一般检验
第五章 尿液一般检验
主要内容
第一节 尿液理学检查 第二节 尿液化学检验 第三节 尿液有形成分显微镜检验
第五章 尿液一般检验
第三节 尿液有形成分显微镜检验
第五章 尿液一般检验
本节内容
一、概述 二、主要检验方法 三、尿液主要有形成分的形态和临床应用 四、尿液显微镜检验的质量保证
（2）操作：①标本离心、沉淀、浓缩50倍混匀； ②0.2ml沉渣+染液20μl； ③3min后制片镜检；
若标本中有形成分含量较多，也可采用未离心标本直接染色。
（3）染色后的有形成分形态为
第五章 尿液一般检验
第五章 尿液一般检验
结晶紫-沙黄（S-M）染色法
2．Sternheimer（S）染色法
阿利新蓝将细胞核和管型基质染成蓝色，哌若宁能将胞质 及核糖核酸染成红色。易于对比，更易辨认病理成分。
3.固定染色法
瑞-吉染色、H-E染色、巴氏染色、苏丹Ⅲ染色等方法
第五章 尿液一般检验
（四）尿液颗粒计数参考方法
• Fuchs-Rosenthal（菲斯-罗森塔）血细胞计数板
每侧计数池划线格面积16mm2，计 数室深度为0.2mm，总容量为3.2 mm3；分为16个中方格，每个中方 格面积为1mm2，容积为0.2mm3。 每个中方格又划分为16个小方格， 边长为0.25mm，面积为0.0625 mm2。
第六章 尿液一般检验
2. 离心尿液直接涂片镜检法
①取混匀尿10ml于刻度离心管中； ②离心1500r/min×5 min； ③保留沉淀物0.2ml； ④混匀，取约20μl于载玻片，加18mm×18mm盖玻片覆盖； ⑤观察方法及结果报告同未离心尿未染色直接涂片镜检法。
报告时须注明“离心取沉渣”。
第六章 尿液一般检验
（三）尿液有形成分染色检查法
1.结晶紫-沙黄（Sternheimer-Malbin，S-M）染色法
（1）S-M染色液 Ⅰ液：结晶紫3.0g，草酸铵0.8g，95%乙醇20.0ml，溶解后加蒸 馏水80.0ml， 冷藏保存。 Ⅱ液：沙黄0（safranin 0）0.25g，95%乙醇10.0ml，溶解后加 蒸馏水至100.0ml，冷藏保存。 应用液： Ⅰ、Ⅱ液按3:97比例混合过滤，贮棕色瓶，室温保存
（1）Sternheimer染色液： 溶液Ⅰ：2％阿利新蓝8GS水溶，棕色瓶贮存，冷藏。
（2）操作：①在0.2ml沉渣中加入1～2ｄ染色液； ②混合5～10min后镜检。 或2d沉渣+1ｄ染液混合后镜检。
第六章 尿液一般检验
（3）染色后的有形成分形态为： 1）红细胞：粉红、红色或不着色。 2）多形核白细胞：核呈蓝色，胞质呈红色。可分辨浓染细
2．标准化沉渣定量计数板法
FAST-READ10尿液标准 化沉渣定量计数板具有 耐高温、高压，清晰度 极高的性能。每个计数 室体积为1μ l，充满尿 液后所计得有形成分数 量为细胞或管型数/μ l。
检测：
①标本离心浓缩50倍，充入计数室； ②计数方法与报告方式同牛鲍计数板法；
③若标本中有形成分含量较多，也可采用未离心标本直接计数。
• 3. 一小时细胞（管型）排泄率测定
• 采用改良牛鲍氏计数池，计数3小时尿中细胞、管型排出的数量，再换算 出1小时排出的数量。
• ①受检者排空膀胱后，收集3小时尿液。②测定尿量。③取10ml混匀尿液 1500r/min离心10min，弃去上清液，留1ml沉淀液。④混匀沉淀液充入计 数池，高倍镜计数10个大方格中的各种细胞数，低倍镜计数20个大方格的 管型数。⑤计算1小时细胞（管型）排泄率。
胞、淡染细胞和闪光细胞。 3）管型：基质染蓝色。①透明管型---少许红色颗粒。②颗
粒管型---有粗大的紫红色颗粒。③细胞管型---细胞核淡或 深蓝色，细胞质红色。④蜡样管型---红色或紫色。⑤脂肪 管型---无色或黄色 4）其他：鳞状上皮细胞---淡粉红或紫红色，移行上皮细胞 肾小管上皮细胞---紫红色。
（二）尿液有形成分定量检查法
1. 改良牛鲍氏计数板定量检测法：
混匀的非离心尿直接充入计数池，低倍镜计数10个大方格 的管型数，高倍镜计数10个大方格的红、白细胞数，得出尿 液有形成分数量／μl。
倒置显微镜检查法：将未离心的混匀尿液定量放入酶标板 小孔中，静置规定时间后有形成分自然下沉至孔底，在倒置 显微镜下用高倍镜计数10个视野或规定区域中的细胞和管型 数。报告尿液有形成分数量／μl 。