人教生物高考二轮复习专题八第1讲基因工程和细胞工程(精品解析)
2024年高考生物复习重点、难点、热点专项解析—细胞工程与基因工程
2024年高考生物复习重点、难点、热点专项解析—细胞工程与基因工程高考感知课标要求——明考向近年考情——知规律12.1植物细胞工程包括组织培养和体细胞杂交等技术12.2动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞的应用等技术12.3对动物早期胚胎或配子进行显微操作和处理以获得目标个体12.4基因工程是一种重组DNA技术12.5蛋白质工程是基因工程的延伸12.6转基因产品的安全性引发社会的广泛关注12.7举例说出生殖性克隆人面临的伦理问题12.8世界范围内应全面禁止生物武器2023·湖南基因工程在农牧业、制药及环境等方面的应用2023·湖北DNA重组技术的基本工具、基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定2023·广东DNA的粗提取及鉴定的方法2023·新课标DNA重组技术的基本工具、基因表达载体的构建2023·北京动物细胞融合与单克隆抗体的制备2023·山东植物细胞工程的实际应用2023·广东植物体细胞杂交技术2023·广东动物的体外受精、胚胎的体外培养、胚胎移植技术2023·浙江动物的体外受精、胚胎的体外培养2023·浙江生物技术的安全性和伦理问题综合2023·海南将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定、基因工程的应用2023·山东PCR扩增的原理与过程、DNA重组技术的基本工具、基因表达载体的构建2023·湖北动物细胞融合与单克隆抗体的制备2023·浙江动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物体细胞核移植技术和克隆动物2023·全国遗传信息的翻译、基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定命题趋势1.细胞工程，胚胎工程的命题多以选择题呈现，基因工程的命题多以简答题呈现，属于年年必考的题目。
2.试题情境以下列几种居多：（1）以单克隆抗体为情境考查细胞工程。
新高考高中生物核心专题突破：基因工程和细胞工程
第1讲基因工程和细胞工程[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。
2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。
3.基因工程的应用(Ⅱ)。
4.蛋白质工程(Ⅰ)。
5.植物的组织培养(Ⅱ)。
6.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。
7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
8.实验：DNA的粗提取与鉴定。
11．基因工程(1)基因工程的3种基本工具①限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。
②DNA连接酶：a.E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；b.T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。
③载体：需具备的条件包括：a.能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；b.有一个至多个限制酶切割位点；c.具有特殊的标记基因，以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。
(2)获取目的基因的途径：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③化学方法直接人工合成。
(3)基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子及标记基因等。
(4)将目的基因导入受体细胞①植物：体细胞或受精卵——常用农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物)、花粉管通道法、基因枪法(单子叶植物)。
②动物：受精卵——显微注射技术。
③微生物：细菌(常用大肠杆菌)——感受态细胞法(钙离子处理法)。
(5)目的基因的检测与鉴定方法2①检测目的基因是否插入转基因生物的DNA上：DNA分子杂交技术。
②检测目的基因是否转录出mRNA：分子杂交技术。
③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术。
④个体生物学水平鉴定：根据表达性状判断。
易混辨析①限制酶≠DNA酶≠解旋酶限制酶的作用是识别双链DNA分子上某种特定的核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开；DNA酶的作用是将DNA水解为基本组成单位；解旋酶的作用是将DNA两条链间的氢键打开形成两条单链。
②DNA连接酶≠DNA聚合酶DNA连接酶能连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。
高考生物二轮复习 第一部分 专题八 现代生物科技专题 第一讲 基因工程与细胞工程 新人教版(202
优化探究2017届高考生物二轮复习第一部分专题八现代生物科技专题第一讲基因工程与细胞工程新人教版编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（优化探究2017届高考生物二轮复习第一部分专题八现代生物科技专题第一讲基因工程与细胞工程新人教版）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
同时也真诚的希望收到您的建议和反馈，这将是我们进步的源泉，前进的动力。
本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快业绩进步，以下为优化探究2017届高考生物二轮复习第一部分专题八现代生物科技专题第一讲基因工程与细胞工程新人教版的全部内容。
第一部分专题八现代生物科技专题第一讲基因工程与细胞工程1．根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。
(2)质粒运载体用Eco RⅠ切割后产生的片段如下：AATTC……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用Eco RⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是_______________________________。
(3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。
（4)反转录作用的模板是________，产物是________。
若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。
(5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。
（6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是______________________________________.解析：此题考查基因工程应用的相关知识.(1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型.(2)为使运载体与目的基因相连，应使二者被切割后产生的末端相同,故用另一种限制酶切割产生的末端必须与Eco RⅠ切割产生的末端相同.(3）根据酶的来源不同，DNA连接酶分为大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA连接酶.(4)以RNA为模板，合成DNA 的过程称为逆转录，若要体外获得大量DNA分子，可以使用PCR技术。
高考生物二轮复习 第一讲 基因工程和细胞工程课件 新人教版
解析 基因工程中获得大量目的基因的技术为 PCR 技术。 为模板通过反转录获得的。 技术。cDNA 是以 mRNA 为模板通过反转录获得的。 本基因工程目的基因的表达产物为红细胞生成素， 本基因工程目的基因的表达产物为红细胞生成素， EPO。 来源极为有限，一般情况下， 即 EPO。由于天然 EPO 来源极为有限，一般情况下， 基因工程产生的是重组人红细胞生成素(rhEPO)。 基因工程产生的是重组人红细胞生成素(rhEPO)。 (rhEPO) 培养重组 CHO 细胞时，为了提供适宜的培养条件， 细胞时，为了提供适宜的培养条件， 需要不断更换培养液， 需要不断更换培养液，以防止有害代谢产物的积累 对细胞自身造成的危害。 对细胞自身造成的危害。单克隆抗体是通过培养杂 交瘤细胞获得的。 交瘤细胞获得的。
转 化 过 程
(4)目的基因的检测与鉴定 目的基因的检测与鉴定 DNA 分子杂交技术 即使用放射性同位 分子杂交技术(即使用放射性同位 ①导入检测： 导入检测： 作探针进行检测)。 素或荧光分子标记的 DNA 作探针进行检测 。 DNA 之间，看是否出现杂交带。 和 DNA 之间，看是否出现杂交带。
答案 (2)A
(1)Hind Ⅲ和 BamHⅠ 氨苄青霉素 Ⅰ (3)C (4)胚胎移植技术 胚胎移植技术 (5)全能 全能 (6)C
考点二
DNA 分子的提取与鉴定
1．DNA 与蛋白质理化性质的区别 ． (1)溶解度的区别 溶解度的区别 NaCl 酒精(体积分数为 酒精 体积分数为 95%的冷酒精 的冷酒精) 的冷酒精 不溶 NaCl 从 2 mol/L 逐 渐稀释的过程中溶 解度逐渐增大 某些蛋白质可溶
(3)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌 (3) 将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌 转化法， 转化法 ，将目的基因导入动物细胞常用的方法是显 微注射技术。 微注射技术。 (4)过程②是将早期胚胎移入受体母牛体内， (4) 过程②是将早期胚胎移入受体母牛体内，用到 过程 的技术是胚胎移植技术。 的技术是胚胎移植技术 。 (5)胚胎分割是利用机械方法将早期胚胎等分，经 (5) 胚胎分割是利用机械方法将早期胚胎等分， 胚胎分割是利用机械方法将早期胚胎等分 移植后获得同卵双胎或多胎的技术， 移植后获得同卵双胎或多胎的技术 ，可以看做动物 无性繁殖或克隆的方法，利用了细胞的全能性。 无性繁殖或克隆的方法 ，利用了细胞的全能性。 (6)检测目的基因是否翻译成蛋白质， (6) 检测目的基因是否翻译成蛋白质，需要用相应 检测目的基因是否翻译成蛋白质 的抗体进行抗原－抗体杂交， 的抗体进行抗原－抗体杂交，其他三项技术检测的 对象都是核酸。 对象都是核酸。
高考生物二轮、三轮复习课件 专题八第一讲
回归命题本源 1.植物组织培养过程原理—— 细胞的全能性 。 2.植物体细胞杂交需要用 酶解法 去除细胞壁(纤维素酶、果胶 酶)，动物组织分散成单个细胞需用 胰蛋白酶 处理。 3.植物组织培养的培养基中添加蔗糖的目的有两个：一是提供
营养 ，二是调节 渗透压 。
4.植物体细胞杂交的过程，实质上是不同植物体细胞的 原生质体 融合的过程，打破了 生殖 限的，并且动物细胞有 止分裂。 6.传代培养中遗传物质发生改变、有不死性的细胞具有 癌 细胞的特 性。 7.动物细胞培养中，细胞的增殖方式为 有丝 分裂，培养出来的多 数细胞基因型 相同 (相同、不同)。 隔离的限制。 5.动物细胞培养分为 原代 培养和
(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。
(4)过程②采用的生物技术是______________。 (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利 用了细胞的________性。 (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达， 可采用________(填字母 代号)技术。 A.核酸分子杂交 C.抗原－抗体杂交 B.基因序列分析 D.PCR
二、细胞工程
重温高考经典
2.下列有关细胞工程的叙述中，正确的是 ( ) ①培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 (2008· 江苏，20A) ②去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均 需酶处理 过程 远缘杂种 (2008· 全国Ⅰ，5B) (2009· 全国Ⅰ，4B) (2009· 全国Ⅰ，4A) ③不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交 ④利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育
④用限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒的核酸 (2010· 浙江，2A) ⑤将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产 生人干扰素的菌株 到细菌 DNA 上，属于基因工程 (2010· 大纲全国Ⅱ，5B) (2010· 大纲全国Ⅱ，5D) (2010· 江苏，18B) ⑧动物的生长激素基因转入植物后不能表达(2010· 江苏，18C) ⑨限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶 (2009· 浙江，3B) ⑥自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合 ⑦转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加
高考生物二轮专题：8.16《基因工程、细胞工程》ppt课件
命题点一 命题点二
命题直击
-9-
整合提升 题型突破 题组训练
思维拓展
从“基因表达”层面理解启动子和终止子 启动子是RNA聚合酶结合位点,启动转录;终止子是终止转录的位点。插入的目 的基因只是结构基因部分,其表达需要调控序列,因而用作载体的质粒的插入部位 前面需要有启动子,后面需要有终止子。
命题点一 命题点二
专题八 现代生物科技专题
第16讲 基因工程、细胞工程
命题点一 命题点二
命题直击
-3-
整合提升 题型突破 题组训练
命题点一基因工程及转基因技术的安全性
1.基因工程的主干知识图解
命题直击
-4-
命题点一 命题点二
整合提升 题型突破 题组训练
2.基因工程的基本工具
作用
作用 部位
作用 特点 (条 件)
限制酶
(1)图中的①是指
。
(2)过程Ⅱ中应用的酶是
。此性引物。
(3)在上述生产流程中,
(填序号)是基因工程生产CP衣壳蛋白的核心步
骤。为检测样液中是否含有有效成分,在Ⅶ可使用
进行检测。
关闭
(1)RNA (2)TaqDNA聚合酶 CP蛋白基因(控制CP蛋白合成的RNA片段) (3)Ⅲ CP蛋白的抗体
种(1方)相法互在接动触物新接品触种抑选制育中单的层显(或著一优层点)是胰蛋白酶 。(2)容易获得纯合子并缩短
(育3)种为时使间外源(基3)因细在胞后核代中去长核期的保卵持,核可移将植转(基或因克小隆鼠) 体(4细)冷胞冻的(或超转低入温、液细氮胞)
中酶构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体,该技术称为 。
b.可通过反转录法获取,即 mRNA
单链 DNA
高考生物二轮复习基因工程和细胞工程复习资料
第1讲基因工程和细胞工程基础自查明晰考位[纵引横连建网络]提醒：特设长句作答题，训练文字表达能力[边角扫描全面清]提醒：判断正误并找到课本原话1．基因工程的相关判断(1)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测(×)(2)转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测(×)(3)一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列(√)(4)用限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒的核酸(×)(5)每个重组质粒至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点(√)(6)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上，属于基因工程(×)(7)转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加(×)(8)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子中脱氧核糖和磷酸交替连接(×)(9)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其是否完全表达(×)(10)动物的生长激素基因转入植物后不能表达(×)2．细胞工程的相关判断(1)产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测(√)(2)21三体综合征的诊断必须通过分子检测(×)(3)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养(√)(4)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理(√)(5)乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养(×)(6)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞(×)(7)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性(×)(8)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体(×)(9)单克隆抗体技术可用于治疗老年痴呆症(√)(10)细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行(×)考点梳理整合突破整合考点20 基因工程和细胞工程[考点突破固考基]1．理清基因工程3种操作工具的作用与特点限制酶DNA连接酶载体作用切割目的基因和载体拼接DNA片段形成重组DNA分子携带目的基因进入受体细胞作用部位两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键作用特点(条件) (1)识别特定的核苷酸序列；(2)在特定位点上切割DNA分子(1)E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；(2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端(1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；(2)有一个至多个限制酶切割位点；(3)具有特殊的标记基因2.掌握基因工程的操作步骤(1)目的基因的获取途径：方法具体操作直接分离从自然界已有的物种中分离，如从基因文库中获取人工合成化学合成已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板反转录法以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成PCR技术扩增目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在热稳定性DNA聚合酶作用下延伸(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建：①表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因＋复制原点。
高考生物二轮复习 第1部分 专题8 第1讲 基因工程和细胞工程课件
(1)若 a、b 分别表示两种植物的体细胞，则采用化学法形成 c 时，一般是 用聚乙二醇作为诱导剂。由 d 形成杂种植株 e 的过程所依据的原理是 植物细
胞
的全能性，技术手段为植物组织培养技术，此技术包括两个关键环节：脱分化 和再分化。从本质上讲，杂种植株 e 具有的性状是基因选择性表达达的结果。
若研究人员已知 β胡萝卜素基因序列，可采用________方法获得 β胡萝卜 素基因。②过程中可用________技术检测水稻体细胞 DNA 上是否插入了 β胡萝 卜素基因。
(2)乙方案中，在体细胞杂交前需要用________酶除去细胞壁获得原生质体， 诱 导 其 融 合 的 化 学 试 剂 常 用 ________ 。 通 过 ⑤ 获 得 “ 黄 金 大 米 ” 幼 苗 需 要 ________两个过程，依据的原理是________________。在培养过程中，除了在 培养基中添加营养物质外，还需要添加_________________________________。
【解析】项，胚胎移植应选用发育良好的桑椹胚或囊胚。C 项，胚胎分割技术 的操作对象一般是发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，分割后可进行胚胎移 植，②过程后已经完成胚胎分割、胚胎移植，借助胚胎移植技术可产生遗传物 质完全相同的后代。图示过程③的操作对象是转基因山羊个体，可通过克隆技 术达到扩大转基因山羊群体的目的。D 项，翻译不能在细胞核内进行。
基因工程和蛋白质工程的比较
比较项目
基因工程
蛋白质工程
原理
基因重组
中心法则的逆转
预期蛋白质功能―→设计预期的
获取目的基因―→构建表达载 区
过程 体―→导入受体细胞―→目的 别
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第1讲基因工程和细胞工程[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。
2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。
3.基因工程的应用(Ⅱ)。
4.蛋白质工程(Ⅰ)。
5.植物的组织培养(Ⅱ)。
6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。
7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
考点一基因工程1．2．基因工程的操作程序(1)目的基因的获取①从基因文库中获取。
②利用PCR技术扩增：其实质是在体外对目的基因进行大量复制。
③用化学方法人工合成a．对于核苷酸序列已知的直接人工合成。
b．可通过反转录法获取，即mRNA逆转录酶,单链DNADNA聚合酶,双链DNA。
(2)基因表达载体的构建①基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因＋复制原点。
②基因表达载体的构建方法[错混诊断]1．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测(2014·天津，4A)(×)2．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测(2014·天津，4C)(×)3．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列(2007·全国Ⅱ，4A)(√)4．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸(2010·浙江，2A)(×)5．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011·浙江，6B)(√)6．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上，属于基因工程(2010·大纲全国Ⅱ，5D)(×)7．转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加(2010·江苏，18B)(×)8．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接(2013·安徽，6C)(×)9．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达(2011·四川，5D)(×)10．动物的生长激素基因转入植物后不能表达(2010·江苏，18C)(×)题组对基因工程的操作工具与操作步骤综合考查1．(2014·重庆，4)下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述，正确的是()A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异答案 D解析A项，②为重组Ti质粒，其构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
B项，含重组Ti 质粒的农杆菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的目的基因整合到受体细胞(④)的染色体上，而并非整个重组Ti质粒整合到④的染色体上。
C项，目的基因导入受体细胞后不一定能进行表达，所以抗虫基因导入植物细胞后，培育成的植株也不一定具有抗虫性状。
D项，转基因抗虫植株是否培育成功，可以从个体水平上进行检测，即观察植株是否具有抗虫性状，如果具有抗虫性状则说明发生了可遗传变异(基因重组)。
2．(2014·海南，31)下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。
请据图回答：(1)获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在____________的催化下，合成互补的单链DNA，然后在______________作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的__________序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的______________序列，再通过化学方法合成所需基因。
(2)利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有________、________、4种脱氧核苷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。
(3)由A和载体B拼接形成的C通常称为__________________________。
(4)在基因工程中，常用Ca2＋处理D，其目的是________________________________________________________________________。
答案(1)逆转录酶DNA聚合酶氨基酸脱氧核苷酸(2)引物模板(A基因)(3)基因表达载体(4)使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子解析(1)利用反转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，然后在DNA聚合酶的作用下，合成双链DNA分子；根据蛋白质工程合成目的基因的过程是：根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测相应的mRNA 序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序，通过化学方法合成。
(2)PCR 过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件。
(3)目的基因和载体结合，形成基因表达载体。
(4)在利用大肠杆菌做受体细胞时，需要先用Ca2＋处理，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA 分子。
考点二细胞工程1．2．容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞(1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体出现细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。
(2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。
(3)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。
3．从结果来分析原理(1)植物体细胞杂交：植物体细胞杂交包含两个过程，一是植物细胞融合，二是杂种细胞的植物组织培养。
其最终结果是形成杂种植株，产生了一个生物体，因此其原理是：细胞膜的流动性和细胞的全能性。
(2)动物细胞融合：动物细胞融合形成杂交细胞，杂交细胞进行细胞培养，获得大量的克隆细胞，但没有形成生物体，因此动物细胞融合的原理是细胞增殖和细胞膜的流动性，不包含细胞全能性。
4．对细胞核移植技术的分析(1)细胞核移植技术形成重组细胞并发育成一个新个体，体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。
(2)克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。
(3)核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同的原因：①克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其线粒体中的DNA来自于去核卵细胞。
②性状受基因与环境共同影响。
③在个体发育过程中有可能发生基因突变，产生供核动物没有的性状。
[错混诊断]1．产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测(2014·天津，4B)(√) 2．21三体综合征的诊断必须通过分子检测(2014·天津，4D)(×)3．培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养(2012·广东，2A)(√)4．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理(2008·全国Ⅰ，5B)(√) 5．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞(2010·浙江，4A)(×)6．动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性(2012·江苏，22C)(×)7．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体(2011·江苏，14B)(×)8．单克隆抗体技术可以用于治疗老年痴呆症(2010·江苏，17C)(√)题组一从植物细胞工程进行命题1．植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：(1)培育胚状体利用了__________________这一项生物技术，胚状体再继续培养，则可培育出完整的植株，这体现了________________。
培养基中除了含有一定的营养外，还必须含有________________等植物激素，还需要对培养基进行严格的________________。
(2)如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的，若为了获得三七的细胞产物，则只需要培养到________________；若为了获得三七的人工种子，则需要培养到________________。
如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的，通过基因工程要获取抗虫棉，目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是________________法。
(3)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，必须要经过________________。
①无丝分裂②有丝分裂③减数分裂④原代培养⑤传代培养⑥植物体细胞杂交⑦细胞融合⑧脱分化⑨再分化答案(1)植物组织培养植物细胞的全能性细胞分裂素、生长素灭菌(2)愈伤组织胚状体农杆菌转化(3)②⑧⑨解析(1)离体植物细胞通过脱分化形成愈伤组织，通过再分化形成具有根和芽的胚状体，再通过细胞分裂、分化发育成一个完整的植株。
该技术称为植物组织培养，其原理为植物细胞的全能性。
培养基的成分为水、无机盐、维生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生长素和细胞分裂素等)等；培养基要求进行严格的灭菌。
(2)三七的细胞产物为细胞的代谢产物，将三七叶肉细胞培养到愈伤组织即可；获得人工种子需培养至胚状体；棉花为双子叶植物，导入抗虫基因常用农杆菌转化法。
(3)离体叶肉细胞培养到胚状体的过程中必须经过脱分化和有丝分裂形成愈伤组织，再分化和有丝分裂形成具有根和芽的胚状体。
2．下图是细胞融合示意图，请据图回答下列问题：(1)过程①②应使用________________________处理细胞，以去除植物细胞壁。
(2)如果将已去除细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞呈现什么形状？_______________。
(3)过程③的诱导方法有__________和__________两大类。
(4)过程④是细胞壁的再生过程，与此过程密切相关的细胞器是____________。
(5)⑤过程中进行的细胞分裂方式是________，该过程先诱导细胞分裂形成________，再由它分化形成杂种植物幼苗。
(6)融合的细胞需要在培养基上进行培养。
人工合成的培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加物、无机物质外，______________是植物细胞培养成杂种植物幼苗不能缺少的调节物质。
答案(1)纤维素酶、果胶酶(2)球形(3)物理法化学法(4)高尔基体(5)有丝分裂愈伤组织(6)植物激素(或生长调节物质)解析(1)过程①②应使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体。
(2)去除细胞壁的原生质体是球形的，在等渗溶液中，细胞形态不变。
(3)用物理法和化学法可诱导过程③完成原生质体融合。
(4)高尔基体与植物细胞壁的形成有关。
(5)杂种植株形成杂种幼苗的过程中进行的是有丝分裂，该过程先经过脱分化形成愈伤组织，再由它分化形成杂种植物幼苗。
(6)植物组织培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加物、无机物质外，还需要加入植物激素(或生长调节物质)，诱导愈伤组织完成再分化过程，形成杂种植物幼苗。