铁皮石斛工厂化生产技术研究
铁皮石斛组培快繁技术研究进展
铁皮石斛组培快繁技术研究进展作者：王朝雯来源：《现代农业科技》2020年第11期摘要; ; 铁皮石斛是濒危药材之一，本文通过查阅铁皮石斛相关文献，对其组织培养繁殖技术研究现状进行了综述，以期为铁皮石斛组培快繁技术研究提供参考。
关键词; ; 铁皮石斛;组织培养;快繁技术中图分类号; ; S567.239; ; ; ; 文献标识码; ; A文章编号; ;1007-5739（2020）11-0068-01; ; ;开放科学（资源服务）标识码（OSID）铁皮石斛为多年生草本植物，可有效提升人体免疫力，具有延缓衰老、增强血管扩张的效果。
由于铁皮石斛种子小且没有胚乳，只有在真菌环境下才有萌发的可能，因而栽培难度较大[1]。
组织培养是快速繁殖铁皮石斛的主要方式，目前国内外专家进行了大量研究，并取得了较为显著的成果。
1; ; 外植体的选取外植体除种子外，还有无菌幼苗茎段。
饶宝蓉等[2]通过分析发现，以种子作为外植体较茎段外植体其无菌系的建立效率较高，种子诱导感染率更低。
同时，种子外植体的长势更加整齐。
总体来说，选取种子作为外植体较为理想。
2; ; 初代培养基选择培养基选择是组培的关键，不同的物种、品种以及外植体材料所采用的培养基也应有所区别。
同时，处于不同培养阶段、基于不同目的而进行的培养，应从培养基上进行区分。
2.1; ; 基本培养基诱导培养基是常见的初代培养基，也可采用分化培養基作为初代培养基。
铁皮石斛有多种培养基，可根据外植体的不同而选择适合的培养基。
林江波等[3]采用SRR检验方法对各处理因子进行检验后发现，从原球茎诱导率方面分析，MS培养基与1/2MS培养基并没有明显差异，而二者与VW培养基的诱导率差异较为明显。
杨立昌等[4]对铁皮石斛的愈伤组织情况进行了分析，结果发现，与MS培养基相比，1/2MS培养基的出芽率更高，表明在激素浓度适合的情况下，培养基的盐含量较低对不定芽的分化更加适合。
2.2; ; 激素及添加物有利于铁皮石斛愈伤组织的培养基种类较多，NAA与IBA等激素的应用较为常见;此外，还有6-BA等激素。
铁皮石斛组培快繁技术
铁皮石斛组培快繁技术
李得萍;何远秦;许丁帆;易元慧;董洪雨;刘艳军
【期刊名称】《浙江农业科学》
【年(卷),期】2023(64)1
【摘要】以铁皮石斛茎段为外植体,探究最佳的外植体消毒方法和最适的诱导、增殖、生根培养基,进而优化铁皮石斛组培快繁体系。
结果表明,最佳外植体消毒方法为30%次氯酸钠消毒10 min,外植体污染率6%,死亡率0;最适诱导培养基为基础培养基(MS)+2 mg·L^(-1)细胞分裂素(BA)+0.5 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA),在此培养基中再生芽生长快速且健壮,诱导率为5.6;最适增殖培养基为MS+0.5 mg·L^(-1) NAA+1.0 mg·L^(-1) BA,在此培养基中丛生芽芽势健壮,生长快,增殖率为3.8;最适生根培养基为MS+0.5 mg·L^(-1) NAA,在此培养条件下组培苗的平均根数达7.3条,平均根长5.8 cm,根系正常且生长快速。
本研究优化了铁皮石斛组培快繁体系,可为组培快繁工厂化生产流程的进一步优化提供依据。
【总页数】4页(P128-131)
【作者】李得萍;何远秦;许丁帆;易元慧;董洪雨;刘艳军
【作者单位】天津农学院园艺园林学院
【正文语种】中文
【中图分类】S685.99
【相关文献】
1.铁皮石斛不同外植体组培快繁技术比较
2.铁皮石斛组培快繁技术及组培苗的生长效应分析
3.铁皮石斛组培快繁技术研究
4.铁皮石斛的组培快繁技术研究进展
5.铁皮石斛组培快繁技术研究进展
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开拓创新引领石斛产业健康发展——云南省德宏热带农业科学研究所
为继 续加快农 场经济快 速稳步 发展 ，今 年我场 坚
定 “ 以发展 热带现代 高效农业 为主 、旅游 休 闲项 目为 辅 ”的发展方向 ，依托农场 资源优势 ，适 时发展农业 观 光 、休 闲养 生旅游度假项 目 ，构建 一条 “ 让投资者 发
财 ，促农场发展 ，带动职工增收 ，确保社会稳定 ”的开 发链 。力争今年总产值突破２ 亿元 ，增 长１ ％；在岗职 ５ 工平均收入超５ 万元 ，增长２ ％。努力开创农场 二次创 ０ 业 的新局面。固
（ 者 系中坤农场场长 ） 作
休闲农业是为 了解决传统农业经营困境与转型而发 展起来 的，能提供休 闲服务 、满足人们的休 闲需求 ，兼
之有农产 品生产经营和三产服务业 于一体的新兴产业 。
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中圉抽带程Байду номын сангаас业 ２ １ ４ 总 第４ 期 ０ ２ ７
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训 ，辐射 带动农户和企业扩大种植。 目前 ，云南省石斛种植 面积近３５ ，平均亩产约３ ０ 斤， ７亩 ＂ ０＆－ 石斛企 业年创利税上亿元 ，石 斛产业 已经成为云南德宏 、保 山、思茅、临沧、文山等地 州富农
强县 的特 色产业。现特将 云南省德 宏热带农业科 学研 究所在推 动石 斛产业发展 中取得 的部 分科
各 项 事业 均 取 得较 好 成 效 。 三 、加 快农 场 经 济 发 展 ，开创 新局 面
牧水产养殖潜力 ，加快畜牧水产业的 良种化 、规模化 、
标 准 化 和 产业 化 建 设 ，提 高 畜牧 水 产养 殖 产 品 的质 量 。
组建或引进畜牧养殖企业 ，实行股份制合作 ，专业化和 规模化经营 ，依托屯 昌黑猪品牌优势 ，大力发展屯昌黑 猪养殖 ，促进职工就业和增收 。力争今年饲养生猪５ 万 头 ，养牛３ ０ 头 ，养羊５ ０ 只以及家禽１万 只，年创产 ５０ ００ １ 值达３０ 万元 。 ８０
铁皮石斛组培苗工厂化生产技术关键问题探讨
理过程中 ， 各 阶段 的培 养基 选 择 、 培 养 室 温 光 管 理、 污染控制 、 出 瓶 苗 炼 苗 技 术 是 影 响铁 皮 石 斛 种 苗 生 产 收 益 的 几 个 关 键 因 素 。 笔 者 在 本 所 石 斛 种 苗 生产技 术 的基 础上 ， 对 铁 皮 石 斛 种 苗 工 厂 化 生 产 过 程 中 的关 键 问题 进 行 分 析 和 总结 ， 报 道 如下 。
能促进种子 萌发 ， 缩 短 萌 发 时 间［ ４ １ 。 在 种 胚 萌 发 产
生大量的原球茎后 ， 即可转入增殖培养阶段 。 在增 殖 培 养 过 程 中 ， 宜 采 用 添 加 有 马铃 薯 和 香
目前 ， 用 于 铁 皮 石 斛 组 织 培 养 的 外 植 体 主要 有 种子 、 原球 茎 、 幼 苗茎段等 ， 其 中 以 种 子 作 为 外 植 体 在 铁 皮 石 斛
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ａｓ ａ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｂ ｌ ｅ ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ， ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｉ ｓ ｇ ｒ ｅ ａ ｔ ｄ ｅ ｍａ ｎ ｄ ｏ ｆ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｈ ｉ ｕ ｍ ｏ ｆ ｆ ｉ ｃ ｉ ｎ ａ ｌ ｅ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｍａ ｒ ｋ ｅ ｔ ． Ｈｏ ｗｅ ｖ ｅ ｒ ， ｈ ｏ ｗ ｔ ｏ ｓ ｏ ｌ ｖ ｅ ｔ ｈ ｅ
南 种植 面 积 已达 到 １ ３ ３ ８ ｈ ｍ ， 遍及全省２ ４个 县 市
。
１ 培 养 基 选 择
目前 ， 用 于 石 斛 组 织 培 养 的培 养 基 类 型 主要 有 Ｎ ６、 Ｂ ５、 Ｍ Ｓ （ １ ／ ２ ＭＳ、 ３ ／ ４ ＭＳ ） 等， 其 中 ＭＳ 培 养 基 在 工
铁皮石斛组培快繁技术实例分享 · 附配方
铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo），属微子目，兰科多年生附生草本植物，是名贵的中药材。
本文在前人研究的基础上，以铁皮石斛的未成熟种子为外植体材料，研究了铁皮石斛的再生体系，其研究结果可为铁皮石斛的工厂化育苗提供技术支撑。
1 材料与方法1.1 外植体材料及培养条件1.1.1 外植体选择实验材料为八成熟的铁皮石斛蒴果。
1.1.2 材料预处理及消毒将铁皮石斛的蒴果先用自来水冲洗干净，再置于洗洁精溶液中摇洗3次，每次摇洗5分钟；取出蒴果用自来水洗净，沥干水后。
在超净工作台上先用75%浓度的酒精消毒3分钟，倒去酒精；再用0.15%的升汞消毒15分钟；倒去升汞消毒液，用无菌水冲洗4-5次，沥干备用。
接种时，将经过表面消毒的蒴果放在无菌的不锈钢盘上，切除头尾约0.5厘米部分并弃去，然后将蒴果中段沿纵轴切开，取出种子，均匀地接种到培养基表面。
1.1.3 培养条件培养室温度为(25±2)℃，以日光灯为光源，光照强度为2000-2500lx，照光10小时/天。
2 结果与分析2.1 初代培养：种子的萌发与无菌材料的建立将铁皮石斛的未成熟种子接种在初代培养基（配方见文末，下同）上，培养约15天后，用肉眼可观察到在培养基表面有浅绿色的小团粒(直径0.5-1.5毫米)。
这些浅绿色颗粒系原球茎体，或为少数原球茎体已萌发出子叶和第1片真叶而形成的无菌实生小苗。
再经过20-25天的培养，大部分原球茎体已萌发，形成了具1-2片真叶的幼苗，同时也产生了一些新增殖的原球茎体。
这些幼苗和原球茎体相互堆挤在一起，占满了初代培养基整个表层及表层上约1.5厘米厚的空间。
此时，铁皮石斛无菌材料的建立即告完成，应该及时将无菌实生小苗或原球茎体转接到新配制的增殖培养基或者生根壮苗培养基上进行培养。
2.2 继代增殖培养建立了铁皮石斛的无菌材料后，将原球茎转接到增殖培养基，培养90天，增殖系数非常高。
铁皮石斛产业现状及可持续发展的探讨
参考内容
铁皮石斛是一种珍贵的中药材，具有极高的药用价值和保健功能。近年来，随 着人们对铁皮石斛的认识和需求不断加深，铁皮石斛的相关研究也得到了广泛。 本次演示将综述铁皮石斛的研究进展，探讨当前的研究现状、存在的问题及未 来研究方向。
关键词：铁皮石斛、中药材、植物学特征、药材品质评价、研究现状、未来研 究方向
一、铁皮石斛产业现状
1、种植现状
铁皮石斛生长环境要求严格，适宜生长的地区有限。目前，我国铁皮石斛主要 种植区域为浙江、安徽、云南、四川等地。由于种植技术不够成熟，铁皮石斛 种植面积虽然不断扩大，但产量仍然较低，市场供应不足。
2、市场现状
随着铁皮石斛价值的挖掘，市场需求逐年增加。目前，市场上的铁皮石斛产品 种类繁多，包括新鲜铁皮石斛、干品铁皮石斛、铁皮石斛粉、铁皮石斛饮料等。 然而，由于缺乏统一的质量标准和管理，市场上铁皮石斛产品质量参差不齐， 价格混乱。
3、促进市场需求
为了扩大铁皮石斛的市场需求，需要加强宣传和推广工作。通过举办铁皮石斛 文化节、科普讲座、知识竞赛等活动，提高公众对铁皮石斛的认识和了解。此 外，应注重开发铁皮石斛的衍生产品，满足不同消费者的需求，拓展市场份额。
4、加强行业监管
政府应加强对铁皮石斛产业的监管力度，规范市场秩序，打击假冒伪劣产品。 制定相应的行业标准和规范，推动产业规范化发展。此外，应建立健全的铁皮 石斛质量检测体系，确保产品的安全和质量。
二、铁皮石斛产业的可持续发展
1、提高科技水平
为了实现铁皮石斛产业的可持续发展，必须不断提高科技水平。加强对铁皮石 斛生长规律、种植技术、病虫害防治等方面的研究，以提高种植效率和产品质 量。同时，应注重引进和培养高层次的人才，为产业发展提供智力支持。
2、优化种植模式
农研铁皮石斛种植与种苗组培与抗癌作用
农研铁皮石斛种植与种苗组培与抗癌作用铁皮石斛是我国传统名贵中药之一,被收载入《中国药典》2005年版,具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功能,具有很高的药用价值和经济价值。
铁皮石斛的种子非常细小,自然条件下很难萌发生长。
由于近年来的过度采挖、自然生境的破坏,其野生资源日益匮竭。
农研石斛通过现代生物技术的手段实现铁皮石斛的工厂化快繁,从而取代和保护铁皮石斛的野生资源。
以茎节为材料建立无菌系,筛选适于铁皮石斛增殖和生根的培养条件。
结果表明,利用次氯酸钠消毒8min,后,外植体的成活率可达到85%,无菌率达到90%。
MS培养基最适于铁皮石斛的生长,60天达到较大的增殖倍数。
以NAA0.4 mg·L~(-1)、6-BA5mg·L~(-1)为继代培养基时铁皮石斛植株健壮,增殖倍数高达到 3.2倍。
NAA0.3 mg·L~(-1)、6-BA2 mg·L~(-1)时,最适于铁皮石斛生根,生根率达到96.67%。
天然添加物对铁皮石斛生长的影响。
实验表明,香蕉汁能促进植株生长,根粗壮,整齐,叶色浓绿,茎粗节短;能显著促进铁皮石斛的芽增殖,可达到4.98倍。
还能够促进生物碱和多糖的积累,分别达到2.8mg·g~(-1)和19.2%。
当添加20%的土豆汁时,铁皮石斛的增重倍数达到3.51倍。
这种作用可能与天然添加物中的植物激素和可溶性糖有关,土豆中含有较丰富的生长素和细胞分裂素,分别达到 1.07μg·g~(-1)和0.89μg·g~(-1),而香蕉中脱落酸的含量最高为4.61μg·g~(-1),土豆和香蕉中均含有丰富的可溶性糖。
农研石斛研究了菌根菌对铁皮石斛生长的影响。
从春石斛和蝴蝶兰中分离出11株菌根菌,经液体发酵后,分别提取菌丝提取物,发酵液和发酵液菌丝混合物,结果表明菌株ph5最有利于铁皮石斛增重和干物质的积累,发酵液菌丝混合提取液对铁皮石斛的促进作用最强。
铁皮石斛提纯实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握铁皮石斛的有效成分提取方法。
2. 探究不同提取工艺对铁皮石斛提取效果的影响。
3. 对提取过程进行优化，提高提取效率。
二、实验原理铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）是一种珍贵的中药材，具有滋阴清热、生津止渴、润肺止咳等功效。
其主要活性成分包括石斛多糖、石斛碱等。
本实验采用超声波辅助提取法，利用超声波的高频振动作用，提高提取效率。
三、实验材料与仪器材料：1. 铁皮石斛药材（干燥）2. 乙醇3. 甲醇4. 水浴锅5. 超声波提取仪6. 离心机7. 精密天平8. 容量瓶9. pH计仪器：1. 1000ml容量瓶2. 50ml容量瓶3. 烧杯4. 玻璃棒5. 滤纸6. 铁皮石斛粉碎机四、实验方法1. 样品制备：将干燥的铁皮石斛药材粉碎，过筛，取适量粉末作为实验样品。
2. 超声波辅助提取：将样品置于50ml容量瓶中，加入适量乙醇或甲醇，超声提取30分钟，离心分离，取上清液。
3. pH调节：将提取液用pH计测定，根据需要调节pH值。
4. 浓缩：将提取液在40℃下减压浓缩至一定体积。
5. 纯化：采用大孔树脂进行纯化，收集纯化液。
6. 测定：对纯化液进行含量测定，如石斛多糖、石斛碱等。
五、实验结果与分析1. 提取率：采用超声波辅助提取法，提取率可达80%以上，明显高于传统提取方法。
2. pH值：通过调节pH值，可以提高提取效果，最佳pH值为5.0。
3. 纯化效果：采用大孔树脂纯化，纯化率可达90%以上，纯度较高。
4. 含量测定：通过测定石斛多糖、石斛碱等含量，验证提取效果。
六、实验结论1. 超声波辅助提取法是一种高效、简便的铁皮石斛提取方法，具有较好的应用前景。
2. pH值对提取效果有显著影响，最佳pH值为5.0。
3. 大孔树脂纯化技术可有效提高铁皮石斛提取物的纯度。
七、实验讨论1. 本实验采用超声波辅助提取法，提取效率较高，但提取过程中需要注意温度、时间等因素的控制。
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铁皮石斛工厂化生产技术研究
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是一种兰科石斛属多年生附生草本植物,主要生长于高海拔的山地较阴湿的岩石上,自古以来就由于被认为具有增强人体免疫力和抗衰老的功能,而被认为是一味珍贵的中草药。
本论文的试验从铁皮石斛原球茎入手,进行PLB离体条件培养优化,从PLB增殖的优化到多糖含量的测量,然后用改进后的最佳增殖培养基进行铁皮石斛工厂化育苗生根壮苗的培养、优化,探究了不同LED光源对组培苗生长的影响,再到大田移栽中最适宜的栽培基质。
最后,本文尝试建立铁皮石斛原球茎多糖工厂化生产模式,并对该模式进行了效益分析。
1、铁皮石斛原球茎离体培养条件的优化通过铁皮石斛原球茎进行PLB的离体培养优化。
(1)铁皮石斛原球茎添加2.0 mg/L的6-BA时,增殖的效果也显著。
最佳的原球茎增殖的配方为1/2MS+1.0mg/L 6-BA+100g/L土豆泥。
改良MS中KNO3, KH2PO4比例分别为0.5和1倍时,原球茎的增长系数最高。
(2)添加茉莉酸甲脂对铁皮石斛原球茎增殖的效果不明显。
(3)有机添加物组合增殖系数较高的有：1/2MS (KNO3, KH2PO4:0.5和
1)+50g/L土豆、1/2MS (KNO3, KH2PO4:0.5和1)+50g/L椰子+100/L土豆、1/2MS (KNO3, KH2PO4:0.5和1)+50g/L番茄汁+100/L土豆1/2MS1/2MS (KNO3,
KH2PO4:0.5和1)+50g/L香蕉泥+100/L椰子。
综合工厂化的经济效益来看,在增殖效果相当的情况下,只添加50g/L的土豆是最经济实惠且增殖系数又较高的。
2、在添加不同激素和有机添加物时原球茎多糖含量的比较在添加不同配比的激素和有机添加物条件下,测量并比较原球茎的多糖含量发现,不同激素加添
加物组合对原球茎的多糖含量有一定影响：(1)在MS基本培养基中有添加物的处理中,多糖含量比没有添加物的含量高,这是由于有机添加物中有丰富的内含成分,如糖类、可溶性蛋白物、纤维成分、脂肪、碳水化合物和生长调节剂等；(2)通过试验比较看出,添加有机天然物有助于原球茎积累多糖含量,但不同有机物组合对多糖积累总量的影响不大。
3、铁皮石斛工厂化育苗生产技术研究本文对铁皮石斛的工厂化生产化技术进行了深入研究。
试验发现：(1)从外植体的不同消毒组合来看,消毒效果最佳的组合为：升汞消毒时间20分钟,无菌水冲洗4次.(2)在不同铁皮石斛组培苗的生根培养基中,最佳的生根培养基为：1/2 MS (KNO3,KH2PO4:0.5和1)+AC 0.5 g/L+6-BA1.5 mL+2,4-D 1.5 mg/L+白糖30 g/L。
(3) LED暖白光源处理下铁皮石斛组培苗的生长状态最好。
LED蓝光、LED白光和暖白以及对照的日光灯都有助于铁皮石斛组培苗的生长,有助于叶脉的显色,增强叶的厚度。
(4)适合铁皮石斛移栽的基质为松树皮：椰糠：蛭石=3：2：2,且干水苔不适合作为铁皮石斛组培苗移栽的基质。
4、铁皮石斛工厂化多糖生产模式的建立与工厂化生产的经济效益分析铁皮石斛多糖工厂化的生产流程为：首先进行铁皮石斛原球茎的采购,然后进行铁皮石斛原球茎的增殖,接着从铁皮石斛原球茎中直接提取多糖,最后将铁皮石斛多糖制成产品进行市场销售。
本文按原球茎每年生产多糖年产量100 kg的标准,铁皮石斛工厂化建设投入的总成本为545.94万元,通过计算得出的年运行需要投入的成本为79.45万元,年产100 kg多糖的收入总额为186.5万元,则每年可获利润为107.05万元,工厂化生产多糖运营约5年时可以收回成本并开始盈利。