肌酐的测定
肌酐项目检测标准操作规程
2.检验方法
肌氨酸氧化酶法(终点法）
3.检验原理
肌酐+H2O肌酸
肌酐+H2O肌氨酸+尿素
肌氨酸+O2+H2O甘氨酸+HCHO+H2O2
H2O2+4AAP+ESPMT醌亚胺+H2O
在546nm波长处比色，吸光度ΔA与CR浓度成正比。
4.临床意义
三羟甲基氨基甲烷0.1mol/L，二硫苏糖醇0.25g/L,防腐剂1g/L
8.6储存条件及有效期
校准品在2-8℃避光保存可稳定1.5年。校准品复溶后，于-20℃避光保存可稳定1个月;于2-8℃避光密封保存时，二氧化碳可稳定8小时，胆红素可稳定一天，其他项目可稳定一周。
8.7复溶方法
使用时，小心打开瓶盖，开启橡胶塞，每瓶准确加入5ml蒸馏水或去离子水，盖好橡胶塞，室温放置30分钟，同时避免阳光直射。轻轻旋转，使冻干品充分溶解，避免泡沫形成。随后即可与常规标本同时取样进行测定。每次吸取后及时盖好瓶盖，并于-20℃避光密封保存。
12.2肌酐测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（30-1760）umol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（30-70）umol/L范围内，线性偏差应≦7umol/L;（70-1760）umol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
二磷酸腺苷
1.5mmol/L
三羟甲基氨基甲烷缓冲液
100mmol/L
试剂2
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
血清肌酐CREA测定
血清肌酐CREA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理肌酸酶肌酐+ H2 O 肌酸肌酸酶肌酐+ H2 O 肌氨酸+尿素肌氨酸氧化酶肌氨酸+O2+ H2 O 甘氨酸+甲醛+H2 O2过氧化物酶4-AAP+TOOS+ H2 O2 醌亚胺色素注：TOOS：为N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺；4-AAP：为4-氨基安替比林在上述反应中，醌亚胺色素的生成量与样本中的肌酐浓度成正比，通过在波长550nm处测定吸光度的变化值，即可测得样本中肌酐的浓度。
3 标本采集3.1 病人准备：早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。
3.2 类型：血清，肝素血浆，尿液。
3.3 标本存放：血清、血浆的稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存至少可稳定3个月。
尿液的稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定6天；-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测，结果乘50后报告。
3.4 标本运输常温条件下运输3.5 标本拒收的标准：细菌污染的标本不能作测定。
4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司CREA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成：肌酸酶≥40KU/L 试剂1（R1）TOOS0.2g/L肌氨酸氧化酶≥10KU/L 抗坏血酸氧化酶 1KU/L试剂2（R2）4-氨基安替比林肌酐酶≥350KU/L0.2g/L过氧化物酶 2KU/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。
试剂1与试剂2启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定30天。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。
肌酐的测定实验报告
一、实验目的1. 了解肌酐测定的原理和方法。
2. 掌握肌酐测定的操作步骤。
3. 学会使用肌酐测定试剂盒，并对其结果进行分析。
二、实验原理肌酐是人体肌肉代谢的终产物，主要由外源性和内源性两种组成。
外源性肌酐主要来源于食物中的肉类，内源性肌酐则是由人体肌肉代谢产生。
在正常情况下，肌酐主要通过肾脏滤过排出体外。
因此，通过测定血液或尿液中肌酐的浓度，可以评估肾脏的滤过功能。
本实验采用肌酐测定试剂盒，通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度。
三、实验材料1. 肌酐测定试剂盒2. 血清样品3. 移液器4. 一次性吸管5. 比色皿6. 移液器吸头7. 混匀器8. 水浴锅9. 移液器吸头10. 洗耳球11. 计时器四、实验步骤1. 标准曲线的制备（1）取6个比色皿，分别加入不同浓度的肌酐标准溶液。
（2）在每个比色皿中加入适量的肌酐测定试剂A和B，混匀。
（3）将比色皿放入水浴锅中，加热至50℃恒温反应10分钟。
（4）取出比色皿，用洗耳球吹洗内壁，使其充分混合。
（5）用移液器取标准溶液和样品，分别加入比色皿中，混匀。
（6）用移液器将样品转移到比色皿中，立即放入比色仪中测定吸光度。
2. 样品测定（1）取3个比色皿，分别加入血清样品、试剂A和B，混匀。
（2）将比色皿放入水浴锅中，加热至50℃恒温反应10分钟。
（3）取出比色皿，用洗耳球吹洗内壁，使其充分混合。
（4）用移液器取样品，分别加入比色皿中，混匀。
（5）用移液器将样品转移到比色皿中，立即放入比色仪中测定吸光度。
3. 结果计算根据标准曲线，将样品的吸光度对应到肌酐浓度，即可得到样品的肌酐浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制备根据实验数据，绘制标准曲线，得出线性方程：Y = 0.0162X - 0.0178（R² = 0.9989）2. 样品测定通过测定样品的吸光度，根据标准曲线计算得出样品的肌酐浓度为XX mg/dL。
六、实验结论本实验通过碱性苦味酸终点比色法测定血清肌酐浓度，操作简便，结果准确。
肌酐测定标准操作程序 (肌氨酸氧化酶法)
肌酐测定标准操作程序1. 摘要肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。
5. 原理上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下：O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222222224---42+−−−→−-+-+++−−−−→−+++−−−−→−+−−−−→−+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素肌氨酸肌酸肌酸肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。
最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
尿肌酐测定方法
尿肌酐测定方法
尿肌酐是一种常用的尿液指标，用于评估肾脏功能。
以下是常用的尿肌酐测定方法：
1. Jaffe法：这是目前最常用的尿肌酐测定方法。
该方法利用
酚与尿液中的肌酐在碱性条件下发生黄色酚酞反应，测量反应产生的黄色产物的吸光度。
由于该方法受到其他物质（如尿酸、葡萄糖等）的干扰，因此必须进行相应的校正。
2. 酶法：这种方法利用肌酸酐氨酸酶（creatinine amidohydrolase）催化反应，将尿液中的肌酐转化为肌酸和氨，通过测量反应中产生的氨量来确定肌酐浓度。
该方法对于尿液中的其他物质干扰较少，但在实验室条件下操作较为复杂。
3. 离子选择电极法：这是一种较为现代化的测定方法，利用离子选择电极对尿中的肌酐进行检测。
该方法操作简便，结果准确可靠。
以上是几种常用的尿肌酐测定方法，每种方法都有其特点和适用范围。
选择合适的方法需根据实验室的设备和研究需求来确定。
在进行尿肌酐测定前，建议咨询专业医生或实验室技术人员的意见。
血清肌酐测定范围
血清肌酐测定范围《血清肌酐测定范围》嘿，血清肌酐测定范围这事儿，就像给我们身体里的一个小秘密划定界限一样。
我有个亲戚，身体一直不太好，老觉得没力气。
去医院看病的时候，医生就开了个血清肌酐测定的检查。
这血清肌酐啊，就像是身体里的一个小信号兵，能反映肾脏的情况呢。
一般来说，血清肌酐的正常测定范围，男性和女性是不太一样的。
男性的正常范围大概在53 - 106μmol/L，这就像是男性身体里的一个标准值区间。
你可以想象成一个小操场，血清肌酐的值在这个操场里活动，那身体可能就没什么大问题。
要是它的值突然跑到操场外面了，那可能肾脏就有点小麻烦啦。
女性的正常范围呢，大概在44 - 97μmol/L。
就像女性有自己专属的“小领地”一样。
我那亲戚是个女的，她检查结果出来后，血清肌酐值有点偏高，医生就特别重视。
因为这可能意味着肾脏在过滤血液的时候出了岔子。
这血清肌酐测定可不能小看。
我陪着亲戚在医院的时候，看到好多人都在做这个检查。
医生会根据这个值，再结合其他的检查，来判断肾脏是不是健康。
要是血清肌酐值高了，就像肾脏在喊“救命”呢。
可能是肾脏太累了，比如有炎症啊，或者是其他的毛病影响了它正常工作。
要是低了呢，也可能有问题，不过这种情况比较少见啦。
在医院里，看着那些检查报告上的血清肌酐值，就感觉每个数字都像是身体发出的密码。
了解血清肌酐测定范围，就像拿到了一把解开肾脏健康密码的小钥匙。
我们得重视这个检查，这样才能及时发现问题，保护好我们的肾脏，让身体一直健健康康的呢！毕竟肾脏可是个重要的“大工厂”，血清肌酐就是它工作状态的一个小提示哦！。
肌酐生化方法学
肌酐生化方法学
肌酐（Creatinine）是一种由肌肉代谢产生的废物，通常通过肾脏排出体外。
肌酐生化方法学是用于测定血清或血浆中肌酐浓度的实验方法。
1. 碱性苦味酸法：这是最常用的肌酐测定方法之一。
在碱性条件下，肌酐与苦味酸反应生成红色化合物，通过比色法或分光光度法测定其吸光度，进而计算肌酐浓度。
2. 酶法：利用肌酐酶将肌酐转化为氨和肌酸，然后通过测定氨或肌酸的生成量来计算肌酐浓度。
酶法具有较好的特异性和准确性。
3. 干化学法：使用纸片或试纸等干式试剂，通过颜色变化或比色法来测定肌酐浓度。
这种方法通常用于快速检测，但准确性可能稍低。
4. 高效液相色谱法（HPLC）：这是一种分离和分析化合物的技术，可以用于肌酐的定量测定。
HPLC 法具有高分辨率和准确性，但设备和操作相对复杂。
5. 质谱法：利用质谱仪对肌酐进行分析，通过检测肌酐的特定离子或碎片来确定其浓度。
质谱法具有高灵敏度和准确性，但设备昂贵。
在选择肌酐生化方法时，需要考虑实验要求、设备条件和准确性等因素。
不同方法可能在灵敏度、特异性、操作简便性和成本等方面有所差异，因此应根据具体情况进行选择。
无论使用哪种方法，都应遵循标准操作程序，并进行质量控制以确保结果的准确性和可靠性。
临床血清肌酐测定方法、羟苯磺酸钙药物作用及血肌酐测值干扰影响和要点总结
临床血清肌酐测定方法、羟苯磺酸钙药物作用及血肌酐测值干扰影响和要点总结血清肌酐测定方法血清肌酐是评价肾小球滤过功能的重要指标，其检测方法主要有苦味酸法和肌氨酸氧化酶法。
苦味酸法会受到维生素C、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸、葡萄糖、蛋白质、胆红素等多种物质的干扰，不适宜用于黄疸、溶血等情况下患者的血清肌酐测定，特异性较差。
酶法与苦味酸法相比，具有样本量小、速度快、特异性高等优点，使用酶法代替苦味酸法血清肌酐测定。
羟苯磺酸钙羟苯磺酸钙，化学名为2，5-二羟基苯磺酸钙，是广泛应用于临床微血管保护剂，用于治疗糖尿病视网膜病变，具有抑制视网膜微动脉瘤形成和减轻出血渗出等作用。
适应证包括慢性肾功能不全、慢性静脉功能不全、色素沉着性紫癜性皮肤病、白内障、肝脏缺血-再灌注损伤、阻塞性黄疸等。
保护血管药理机制主要体现在以下两个方面: ① 羟苯磺酸钙可增加微血管壁阻力，降低其病理性高通透性，减少出血与渗出；② 羟苯磺酸钙降低血液黏稠度，抑制血小板活化与聚集，防止血栓形成引起血管狭窄或堵塞。
羟苯磺酸钙对酶法检测肌酐干扰当羟苯磺酸钙浓度大于2 μg/ml 时，羟苯磺酸钙浓度越高，对血清肌酐水平负性干扰则越明显。
羟苯磺酸钙干扰血肌酐测值肌酐在肌酐酶的催化作用下生成肌酸，肌酸在酶催化作用下水解生成尿素和肌氨酸，其中肌氨酸经肌氨酸氧化酶催化生成甲醛、甘氨酸、过氧化氢等。
过氧化氢、4-氨基安替比林和2，4，6-三溴-3-羟基苯甲酸在过氧化物酶催化下反应生成可以进行比色反应的紫红色化合物醌亚胺。
羟苯磺酸钙对酶法检测血清肌酐存在干扰，对苦味酸法检测血清肌酐干扰。
使用苦味酸法检测肌酐时，羟苯磺酸钙浓度在 64 μg /ml 以上也不会对结果产生明显干扰，羟苯磺酸钙对苦味酸法检测肌酐基本没有干扰。
要点总结开具血清肌酐检查时，可备注标明患者正在使用羟苯磺酸钙，用于提示在必要时可选择苦味酸法进行重复、多次检测，以提高血清肌酐结果测定的准确性。
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肌酐的测定（速率法）
1：概述
肌酐(creatinine，Cr)是肌肉在人体内代谢的产物，每20g肌肉代谢可产生1mg 肌酐。
肌酐主要由肾小球滤过排出体外。
血中肌酐来自外源性和内源性两种，外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物；内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。
内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。
在肉类食物摄入量稳定时．身体的肌肉代谢又没有大的变化，肌酐的生成就会比较恒定。
2 样本收集
新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。
血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。
样本在4摄氏度可稳定7天。
采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。
3000r/min 离心5-10分钟，分离出血清备用。
不建议采用血浆标本。
3：方法原理
样品中的肌酐与碱性苦味酸反应生成红色复合物，该反应为特异性反应，可与其他物质发生作用。
本试剂采用速率法，增强了反应的特性，反应过程中形成的红色复合物与杨品中肌酐的浓度成正比，可在波长500-520nm 处进行测定。
4剂来源，配置及储存
试剂来源：
试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。
启用后在2-8度可稳定30天。
若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在510nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。
5分析仪器
CS-600B全自动生化分析仪
6计算方法
肌酐()=( A/min*Tv*1000)(6.3*Sv*P)
式中
Tv=总反应体积
Sv=样本体积
6.3=NADH在510nm处的毫摩尔消光系数
P=比色杯光径（cm）
7 线性范围：本实验的线性范围：0----2mmol/L
8 参考范围：
男性;62---115
女性53--97
9 失控控理
1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。
2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。
3：进行仪器维护，重测失控项目。
检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。
另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。
如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。
4：重新校准。
重测失控项目。
用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。
5：请专家帮助。
如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。
10 注意事项
1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。
2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。
3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。
4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。
11：临床意义
血中肌酐主要经肾小球滤过，但不被肾小管所吸收。
肾小球滤过率下降到正常人的1/3时，血肌酐才明显上升。
临床意义：增高：见于各种肾病、急性或慢性肾功能衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎、肌肉损伤、巨人症、肢端肥大症等减低：见于进行性肌肉萎缩、白血病、贫血、肝功能障碍及妊娠等。
血肌酐基本上不受饮食、高分解代谢等肾外因素影响，在外源性肌酐摄入量稳定，体内生成量恒定(每日20mg／kg)的情况下，血肌酐浓度主要取决于肾小球滤过功能。
但是血肌酐与肌酐清除率并不完全一致，肌酐清除率较血肌酐更为敏感。
在肾功能减退早期(代偿期)，肌酐清除率下降而血肌酐却正常。
当肾小球滤过率下降到正常的50％以上时，血肌酐才开始迅速上升，因此当血肌酐明显高于正常时，常表示肾功能已严重损害。
由于肌酐清除率还受到肾小球浓缩功能的影响，在肾浓缩功能受损的情况下，血肌酐就是反映肾小球功能的最可靠指标。
由于内生肌酐量与肌肉的量有相关性，一般每20g肌肉每天产生1rug肌酐，因此肌肉特别发达的人，其血肌酐可高达130gmol／L；而特别消瘦的人，其血肌酐可仅为26.5gmol／L，如果该病人血肌酐超过132gmol／L，则肾小球可能已有严重损害。
除消瘦外，正常妊娠时由于肾小球滤过率增加及胎儿的同化作用，血肌酐常较正常为低。
正常人肌酐只有微量由肾小管分泌，也可有微量弥散到肠腔。
但尿毒症病人肾小管分泌量大增，弥散到肠腔的量也可达到总量的16％～60％。
尿毒症病人上消化道的链球菌和肠球菌繁殖时可以产生肌酐裂解酶裂解肌酐，因此有些尿毒症病人血、尿肌酐浓度以及内生肌酐清除率会呈现波动。
肌酐清除率的计算
第一步：病人连续低蛋白质饮食3天(蛋白质<40g/d)，避免剧烈运动。
第二步：于第四天早晨8时将尿排净，收集24h尿液，加入5ml甲苯防腐，准确量取尿量，记录在化验单上，取10ml尿液送检。
第三步：留尿同天抽抗凝血2ml同时送检。
采集完内生肌酐清除率标本后，便可以根据公式进行计算：Ccr=(140-年龄)×体重(k g)/72×Scr(mg/dl) 或Ccr=[(140-年龄)×体重(k
g)]/[0.818×Scr(umol/L)] 注意肌酐的单位女性按计算结果×0.85。
正常值：
108±15.1mL/min?1.73m2。
40岁以后逐渐减低肾移植后病人内生肌酐清除率如大于50则正常最佳是大于70，有些医院考虑到环孢肾毒性，如大于45且稳定，也属正常。