兽药残留分析
水产品兽药残留检测技术课件
水产品兽药残留检测样品前处理技术 2、提取方法
l 超临界流体密度与液体相似，但是溶质在其中的扩 散系数比液体中大得多。
l 极性低的碳氢化合物，醚，酯，环氧化合物，可以 在低压力下提取（7-10MPa）进行萃取，羟基，羧 基难萃取，一个羧基和两个羟基的化合物和三个酚 羟基的苯环衍生物可以被萃取；40 MPa以下，糖和 氨基酸都不能被萃取；分级极性差异和挥发性差异。
2.建立测定方法 建立测定方法和线性范围，为后续的各种工作提供分析手段，最 后根据干扰和使用情况逐步确立测定条件和建立标准曲线。如兽 残及代谢物属中等极性或较高极性化合物，不能直接进行GC分析， HPLC常用的检测器有紫外（UVD），荧光（FLD，共轭双烯）,电 化学（EehlD）。MS为非常规检测器。
8. MRM优化模式优化Tube Lens Offset和Collision Pressure
9.记录并保存子离子全扫描质谱图。保存Tune Method文 件。
建立液质定量分析方法
1、确立质谱条件（化合物优化）
建立液质定量分析方法
1、确立质谱条件（化合确立LC条件
5. 选择MS Only优化模式和Syringe Pump Infusion入口类 型选项
6.优化Tube Lens Offset、Spray Voltage、Sheath Gas Pressure、Aux Gas Pressure获得待测化合物稳定的准 分子离子峰。
7.选择MS+MS/MS优化模式设置Parent Mass、Charge State和Num Product对子离子进行优化。
水产品兽药残留检测样品前处理技术
3、净化方法
固相萃取（SPE）
水产品兽药残留检测样品前处理技术
品检中的兽药残留检验方法
品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。
合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病，提高畜禽养殖效益。
然而，如果兽药残留超过安全标准，可能对消费者健康造成潜在风险。
因此，兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。
兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。
本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法，并讨论其原理和应用。
高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。
该方法基于高效液相色谱（HPLC）和质谱联用仪（MS），通过对样品进行分离和定性分析，可以快速、准确地检测多种兽药残留物。
HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点，适用于不同类型的兽药残留物检测。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。
该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合，形成特异性抗原-抗体复合物，并通过酶作用产生颜色反应，从而定量检测兽药残留物的含量。
ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点，适用于大规模的兽药残留检测。
气相色谱-质谱联用法（GC-MS）也是常用的兽药残留检验方法之一。
该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析，可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。
GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点，适用于多种兽药残留物的分析。
快速液相色谱法（UPLC）也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。
与传统的液相色谱相比，UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。
因此，UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。
综上所述，兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。
通过合理选择和应用适当的检验方法，可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。
这有助于确保畜产品的质量安全，保护消费者的健康。
未来，随着科技的进步，兽药残留检验方法还会不断发展和完善，以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。
食品中兽药残留分析
（3）本方法测定四环素类药物的加标回收率分别为：OTC： 82%-93%，TC:80%-90%,CTC:80%-95%; (4）出峰顺序为土霉素（OTC)、四环素（TC)、金霉素（CTC)
曲线。
(4）试样测定
取经0.45μm滤膜过滤的待测液10μL进样，记录峰高，从工 作曲线上查含量。
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(四)结果计算
式中： X－试样中抗生素含量，单位为mg/kg A－试样溶液测得抗生素质量，单位为μg m－试样质量，单位为g
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（五）方法说明
（1）流动相中加NaH2PO4及调节pH值目的：改善四环素类药物 在C18柱上的分离度和峰形；
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（二）常见兽药残留的检测
1.磺胺类兽药残留的检测 2.四环素类兽药残留的检测 3.硝基呋喃类兽药残留的检测 4.盐酸克伦特罗残留的检测 5.激素类兽药的检测
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磺胺类药物
➢ 磺胺类药物的基本结构为对氨苯磺酰胺，简称磺胺的衍 生物,具有芳氨基和磺酰胺基，多为两性化合物。
➢ 常用的有：磺胺嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺甲氧嘧啶、磺 胺二甲基嘧啶等。
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（三）兽药残留的危害
毒性作用
急性中毒、慢性中毒、“三致”（致癌、致畸、致突变）
耐药性
动物体内耐药性菌株通过食品传递给人，给治疗带来困难。
过敏反应 激素作用
潜在致癌、儿童性早熟等
污染环境影响生态
兽药排入环境后，仍然有活性，对土壤微生物、水生生物 等造成影响。
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（四）兽药残留限量标准和检验
兽药最高残留限量(MRLVD)：
兽药残留分析技术ppt课件
（1）影响药物残留消除和休药期的因素
药物的剂型与剂量 给药途径 合并用药和重复用药 动物年龄、性别、品种、个体差异 胃肠道环境及机能状态
（2）休药期估算方法
估算休药期的程序
确定靶组织 确定被测残留物 研究组织残留消除规律 数据统计处理
➢四环素
骨骼和牙齿发育
➢苯并咪唑类
致畸、致癌、致突变
➢二恶英 肺、肝肿瘤
3.耐药性
动物在经常反复接触某一种抗菌药物后，其体 内的敏感菌株将受到选择性的抑制，细菌产生耐药 性，使耐药菌株大量繁殖。
人体经常食用含药物残留的动物性食品，动物 体内的耐药菌株可传播给人体，当人体发生疾病时， 就给临床上感染性疾病的治疗带来一定的困难，延 误正常的治疗。
3.标示残留物（marker residue)
指总残留物中，在动物体内消除缓慢、 残留量高、残留期长、性质稳定、有灵敏方 法检测的组分。
4.靶组织(target tissue）
指残留量高、残留物最后消除的组织。
二、兽药残留的原因
➢不正确用药
➢不遵守休药期 ➢以未经批准的药物作饲料添加剂 ➢宰前用药物掩饰临床症状，以逃避检查 ➢药物标签指示用法不当 ➢加工贮存过程中污染 ➢接触环境中污染的药物
指用于测定并确证筛选方法和常规方法检测为阳性结果 的样品中是否存在药物残留及残留量。
❖ 确证方法的要求 特异性高、定量分析能力强 精密度、准确度达
到规定 检测限和定量限适合检测目的
❖ 常用方法 GC-MS、LC-MS、GC-IR、LC-IR
4.参比方法 （REFERENCE METHOD）
指以被某国家或国际机构验证和接受的法定性确证 方法，可用于验证有关方法的精确度和精密度。
兽药残留检测方法
兽药残留检测方法
兽药残留检测方法主要包括以下几种：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：通过对样品进行提取和分离，利用高效液相色谱仪进行检测。
该方法可以同时检测多种兽药残留，并且具有高灵敏度和高准确性。
2. 气相色谱法（GC）：对样品进行蒸馏提取后，利用气相色谱仪进行分离和检测。
该方法适用于挥发性兽药残留的检测，具有高分辨率和快速分析的优点。
3. 液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）：将高效液相色谱与串联质谱联用，可对多种兽药残留进行高灵敏度、高选择性的定性和定量分析。
4. 酶联免疫吸附法（ELISA）：利用免疫学技术，通过抗体与兽药残留结合来检测样品中的兽药残留。
该方法具有操作简单、快速、经济的特点，但灵敏度和选择性较低。
5. 生物传感技术：利用生物传感器对兽药残留进行检测，如基于表面等离子体共振（SPR）技术、电化学传感器等。
这些方法具有高灵敏度、高选择性和实时监测的特点。
总之，不同的兽药残留检测方法有着各自的特点和适用范围，可根据需求选择合适的方法进行检测。
兽药残留的原因分析及对策
兽药残留的原因分析及对策我国畜牧业经过20多年持续增长，畜产品得到了极大发展，但随着食品安全工作的深入开展和人们健康意识的增强，兽药残留已逐渐成为人们普遍关注的一个社会热点问题。
近年来兽药残留引起食物中毒和影响畜禽产品出口的报道越来越多。
药物残留不仅可以直接对畜体产生急慢性毒性作用，引起细菌耐药性的增加，还可以通过环境和食物链的作用对人体健康造成危害，兽药残留还影响我国养殖业的发展和走向国际市场。
因此必须采取有效措施，减少和控制兽药残留的发生。
1兽药残留的原因分析兽药的应用保证了畜牧业的增产、增效，但是，同时也带来了兽药残留。
尤其是某些人大范围、过量、不正确地使用，有害物质残留超标现象严重，给动物产品安全造成极大隐患。
造成兽药残留主要原因如下。
1.1促进生长，提高效益由于兽药具有预防和治疗许多病原微生物感染引起的疾病，有的还能促进动物生长，因此一些生产企业为了追求高额暴利，违反国家规定，在饲料产品中超剂量或滥加兽药和其他违禁药品，如在饲料中添加“瘦肉精”、喹乙醇等禁用兽药，并大量向饲养场或专业户出售；另一方面，一些养殖场或专业户，法制观念淡漠，仅从短期经济利益考虑，为非法兽药生产企业和添加违禁物质的非法添加剂产品提供了“地下市场”。
1.2预防疾病，减少损失为了预防阶段性寄生虫病（如球虫病，蛔虫病）和白痢等，在饲料中大量使用各种抗菌（虫）药物，其中有专用药，如氨丙啉、氯羟吡啶、球痢灵，盐霉素等，也有抗生素，如四环素类、呋喃唑酮等，大多具有药物残留。
有的养殖场或专业户，常常盲目大范围用药或大剂量用药，或者在不知情的情况下成为非法产品的使用者。
1.3为增加动物性食品的色泽和色相一些企业违法使用阿散酸、洛克沙胂等胂制剂，使色素沉积而增加鸡蛋黄、蛋皮的颜色。
违规使用“苏丹红”增强蛋黄色泽也不乏其例。
特别是近几年一些不法商人为了延长水产品的保质期，保持好的卖相，在运输销售期间违规使用甲醛这种毒性防腐剂，造成水产品的药残污染。
简述：兽药残留分析检测及应用案例
兽药残留分析检测及应用案例--青岛科标生物实验室概述兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品(如鸡蛋、奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物，包括与兽药有关的杂质的残留。
兽药大致可归纳为四类：①一般疾病防治药；②传染病防治药；③体内、体外寄生虫病防治药；④（包括促生长药）。
范围畜禽机体或产品(如鸡蛋、奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物等；兽药中，常用的为安乃近、阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋、土霉素、金霉素、杆菌肽、盐霉素、莫能霉素、粘菌素等20多种。
类别项目β-激动剂类盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、特步他林硝基呋喃类呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因四环素类四环素、金霉素、土霉素、强力霉素、差向金霉素、去甲基金霉素、差向四环素、二甲胺四环素、差向土霉素、甲稀土霉素喹诺酮类西诺沙星、环丙沙星、达氟沙星、二氟沙星、伊诺沙星、恩诺沙星、氟甲喹、洛美沙星、麻保沙星、萘啶酮酸、诺氟沙星、氧氟沙星、奥比沙星、恶喹酸、培氟沙星、吡哌酸、沙拉沙星、弗洛沙星、司帕沙星磺胺类磺胺苯酰、磺胺醋酰、磺胺喹恶啉、磺胺氯哒嗪、磺胺嘧啶、磺胺地索辛、磺胺多辛、磺胺胍、磺胺甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲恶唑、磺胺甲氧嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲唑、磺胺硝苯、磺胺苯吡唑、磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺索嘧啶、磺胺二甲异恶唑、磺胺氯吡嗪、甲氧苄啶大环内酯类林可霉素、红霉素、替米考星、泰乐菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉它霉素、交沙霉素青霉素类阿莫西林、氨苄青霉素、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、邻氯西林、萘夫西林、双氯西林、甲氧西林、阿洛西林氨基糖苷类链霉素，潮霉素B，双氢链霉素，壮观霉素，丁胺卡那霉素，卡那霉素，安普霉素，新霉素，妥布霉素，庆大霉素硝基咪唑类4-硝基咪唑、异丙硝唑、2-甲硝咪唑、洛硝哒唑、甲硝唑、氯甲硝咪唑、地美硝唑、苯硝咪唑、羟基甲硝唑、羟甲基甲硝咪唑其他氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素、孔雀石绿、无色孔雀石绿、结晶紫、无色结晶紫、氨苯砜、喹乙醇、金刚烷胺、地塞米松、利巴韦林、甲基睾丸酮、己烯雌酚、双烯雌酚、玉米赤霉酮、玉米赤霉醇、氯羟吡啶、尼卡巴嗪。
畜产品中常用兽药残留危害及检测方法
畜产品中常用兽药残留危害及检测方法兽药残留对人体健康的危害有多个方面。
首先，兽药残留可能导致抗药性菌株的产生。
长期暴露于兽药残留的情况下，细菌、寄生虫等会逐渐形成抗药性，从而降低了抗生素的疗效。
其次，兽药残留可能导致人体免疫力下降。
人类消费含有兽药残留的畜产品后，兽药残留会进入人体，影响人体的免疫系统，使身体对其他疾病产生抵抗力下降。
此外，一些兽药残留还可能对人体的内分泌系统产生影响，导致激素失衡。
目前，针对兽药残留的检测方法主要包括生化方法、免疫学方法和分析化学方法。
生化方法是通过测定畜产品中特定兽药的生物活性来进行检测。
常用的方法包括抗生素菌落呈阴性检测法、抗生素抑菌法等。
这些方法通过将畜产品与感受器混合，观察感受器是否发生生理变化，从而判断兽药残留是否超标。
免疫学方法是通过检测畜产品中与兽药相关的抗体或免疫反应来进行检测。
常用的方法有ELISA(酶联免疫吸附测定法)、免疫层析法等。
这些方法通过检测样本中抗体和兽药之间的免疫反应，来判断兽药残留是否超标。
分析化学方法是通过分析畜产品中兽药的化学成分来进行检测。
常用的方法有气相色谱法、液相色谱法等。
这些方法通过将畜产品中的兽药提取出来，然后使用化学试剂进行分析，从而判断兽药残留是否超标。
综上所述，畜产品中常用兽药残留对人体健康构成潜在风险。
为了保证畜产品的质量安全，必须使用科学合理的方法进行兽药残留的检测。
目前生化方法、免疫学方法和分析化学方法是常用的检测方法。
这些方法在实际应用中，可以互相结合，提高检测的准确性和可靠性。
未来的研究还可以进一步改进和发展更加高效和灵敏的兽药残留检测方法，确保畜产品的质量安全。
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农兽药残留检测
• 1.对人体产生直接毒性作用 1）急、慢性毒性
•
2）激素样作用
•
3）过敏反应
2.对人类胃肠道微生物平衡产生破坏
• 3.增强人类病原菌的耐药性
• 4.环境危害
•
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三、常见兽药的种类
1.抗生素类药物
2.磺胺类药物 3.硝基呋喃类药物 4.抗寄生虫类药物
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• 四环素类抗生素在动物养殖中应用广泛， 主要作为饲料添加剂用于预防和治疗疾病。 近些年来，在牛、猪、绵羊、山羊、家禽 及水产养殖中常用的四环素类抗生素主要 是土霉素、金霉素、四环素和强力霉素等。
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• （一）四环素类抗生素的代谢
市场上有售的常用的品种：
1. 四环素类 2. 大环内酯类 3. β-内酰胺类 4. 氨基糖甙类 5. 氯霉素类
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第一节 四环素类
• 一、四环素类化合物的结构和性质
• 四环素类抗生素（TCs）具有共同的基本母 核（氢化并四苯环），仅取代基有所不同。
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• 在我国，鱼药、蜂药、蚕药也列入兽药管 理。
• 2.兽药残留
• 对食品动物用药后，动物产品的任何食用 部分中的原型药物或/和其代谢产物，包括 与兽药有关的杂质的残留。
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• （二）兽药残留来源
• 现代养殖业日益趋向于规模化、集约化， 不可避免地带来了大量的疫病问题，为了 提高饲料报酬和满足人们对动物性食品的 需要，需要大量使用饲料药物添加剂，这 已成为保障我国畜牧业发展不可少的一环。
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• 常见的四环素类药物包括：四环素（TC ）、 土霉素（ OTC ）、金霉素（ CTC ）、强 力霉素（DC ）、二甲胺四环素（MINO ）、 甲烯土霉素（MTC ）、去甲基金霉素 （DMCTC ）和毗甲四环素（PRMTC ）等
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• 金霉素、土霉素和去甲基金霉素是 3 种由 微生物自然产生的四环素类药物，已经被 成功地从真菌中分离出来；
5.激素类药物
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分析方法主要有微生物分析法、放射化学法、
免疫法（包括放射免疫法、酶联免疫法、 荧光免疫法、化学发光免疫法）、气相色 谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法（包 括柱前和柱后衍生荧光法）、液相色谱-质 谱法和气相色谱-质谱法。
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• 四环素类药物的给药可通过几种方式：
• 口服（添加到饲料或饮用水中）、注射及 通过乳腺注入。
• 无论采用何种给药方式，四环素类抗生素 都能在体内广泛分布，而在肾脏和肝脏组 织中含量尤高。
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• 由于四环素类药物普遍为低亲脂性，因此 在脂肪中检测不到四环素类药物残留。
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三、四环素类兽药残留样品前处理
• （一）样品提取
• 由于四环素类抗生素的强极性性质，在生 物样品中易与蛋白质形成共轭物而提取困 难。稀无机酸可将四环素类化合物与蛋白 质分离，但四环素类化合物一旦进入水相， 由于其在有机相的分配系数较低，再将其 提取入易挥发的有机相进行浓缩和净化就 变得困难了。
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• 多数四环素类化合物对光敏感，而且在强 酸或碱性条件下不稳定，在弱酸性 （ pH=3 ）条件下形成差向异构体，在强 酸性（ pH < 2 ）条件下形成脱水产物。
• 兽药用于防病或治病是有疗程规定的，有 病的动物也不可能无休止地吃药，特别是 药物饲料添加剂，都规定了休药期 。
• 如抗菌促生长的喹乙醇预混剂，体药期是 35天 。
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Байду номын сангаас
• 3、超剂量、超范围（对象）用药 4.不遵守有关标签的规定
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• 目前，造成我国兽药残留的原因，大致有 如下； 1.非法使用违禁药物
• 滥用己烯雌酚给鸡催肥 ；
• 盐酸克仑特罗（又叫瘦肉精 ）；
• 在饲料中添加避孕药、雌性激素养黄鳝、 甲鱼 ；
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• 2.不遵守休药期规定
• 相反，由于四环素类抗生素对钙具有亲和 性，能在家禽、猪、牛以及鱼类的骨骼组 织中蓄积。
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（二）四环素类抗生素的毒性与最大残留限 量
四环素类抗生素口服吸收良好，分布广泛， 易在骨骼和牙齿中沉积；可在肝脏中富集， 造成肝损害。
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第九章 兽药残留分析 —抗生素类兽药
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一、兽药定义及兽药残留来源
• （一）兽药定义
• 1.兽药
• 是指用于预防、治疗、诊断动物疾病或者 有目的地调节动物生理机能的物质（含药 物饲料添加剂），主要包括：血清制品、 疫苗、诊断制品、中药材、中成药，化学 药品、抗生素、生化药品、放射性药品、 外用杀虫剂、消毒剂等。
• 其他四环素类药物如强力霉素、甲烯土霉 素、二甲胺四环素、毗甲四环素及四环素 则是通过半合成法制备的
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• 二、四环素类抗生素的毒性及其代谢
• 四环素类药物为广谱抗生素，是相互关系 密切的抑菌性抗生素，抗菌谱和毒性相似， 对多种α-溶血性链球菌、非溶血性链球菌、 革兰阴性杆菌、立克次体、螺旋体、支原 体属和衣原体属均有效。
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四、抗生素类兽药
• 抗生素是由细菌、真菌或其他微生物在生 活过程中所产生的物质，具有抑制或杀灭 细菌、真菌、螺旋体、支原体、依原体等 致病微生物的作用。
• 抗生素是能抵抗致病微生物的药物，是抗 菌消炎药中最大的一类。
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抗生素类药物广泛地应用于各种感染性疾病， 其品种繁多。