地中海贫血基因检测试剂盒标准操作规程
VARIANT IIβ-地贫试剂
结果分析
HbA2，的报告范围在1—13%之间，而HbF的报 告范围在1% 到40%之间。该结果同目前经济可 行的方法有很好的一致性。在为了与已确立的范 围保持一致性，低于报告范围的HbA2 和HbF值 应被报为小于1.0%，超出范围的HbA2 和HbF值 应被分别报为大于13%和大于40%。 糖尿病标本会有典型的P2峰升高。另外可能还有 “未知X”的峰出现在HbF 和P2之间。如果此峰面 积大于HbF则它可能会被误认为HbF ，尤其在 HbF窗口中出现另外附加峰时更应注意。
将引物，空白（DI水），校准液和对照液放在VARIANT II的样本仓。 1.5ml样本管应使用1.5ml载管。载管上应有标记样本类型的条形码， 其条码类型有：引物，空白（DI水），校准液和对照液。 按如下要求在样本盘中加入试剂和病人样本。 1 引物 2 空白（去离子水） 3 空白（去离子水） 4 Hb A2/F校准液 5 正常对照1 6 正常对照2 7 to N* 病人血标本 N + 1 正常对照1 N + 2 正常对照2 N+3 终止管
样本测试
选择CDM中的Run/Worklist屏幕来启动机器。 按开始键启动工作菜单。详细信息参看手 册第4.0章节。 每次分析校准物结束后，都将自动计算出 A2和F的反应因子，该因子将用于计算所有 后面样本的A2和F面积的百分比值
结果分析
结果分析
在对结果进行解释和说明时应遵循如下原则： HbA2 的滞留时间是3.65 ± 0.10，HbA2 或HbF 的反应因子需在0.7—1.3之间的范围内。 HbA2 的正常范围一般通常占全部血红蛋白的 1.75%到3.25%，而ß-海洋性贫血的范围则在 4.0% 到 9.0%之间。 通常HbF的正常范围一般占全部血红蛋白的不到 1%，杂合子和纯合子状态的ß-海洋性贫血的病人 其HbF可分别达到1-5%和80-100%。 每例分析的全面积波动在1,000,000 到3,000,000 µv.秒之间。若超出此范围产生的结果则不应2一同被洗脱。 样本 中HbA2 大于10%时应检测是否有其它类型血红 蛋白干扰的可能。 血红蛋白Barts 和 H在开始整合前被洗脱。 分析结果的的总面积在1,000,000到 3,000,000µvolt•秒之间，超出此范围可能报告不 出结果。 糖尿病标本会有典型的P2峰升高。另外可能还有 “未知X”的峰出现在HbF 和P2之间。如果此峰面 积大于HbF,则它可能会被误认为HbF ，尤其在 HbF窗口中出现另外附加峰时更应注意。
地中海贫血基因检测操作规程益生堂
α-地中海贫血基因检测操作规程（益生堂）一、目的：对筛查出来的地贫疑似病例和需要进行地贫产前诊断的夫妇提供进一步的确认。
二、适用范围：适用于益生堂PCR扩增、琼脂糖电泳技术等分析的操作。
三、原理：应用特异的PCR引物选择性地扩增不同类型的α-地中海贫血基因，通过琼脂糖凝胶电泳的带型分析，诊断α-地中海贫血基因缺失型。
四、操作规程（一）标本收集、标本保存、标本转运1、静脉采血：从肘静脉或手背静脉抽取静脉血1mL以上，将血液沿管壁缓慢注入加有EDTA或枸橼酸钠的试管内，轻轻混匀，即为抗凝全血。
羊水的采集：由临床医师经腹壁行羊膜穿刺取得。
采集羊水时速度不宜太快，标本抽取量也不宜太多，一般10-15mL即可。
2、标本一经采集，则应尽快送至实验室检测，抗凝全血室温放置不超过4小时，4℃保存不超过一周，-20℃保存不超过半年，应避免反复冻融。
3、标本装入试管密封，再装入塑料袋中，置冰壶或泡沬箱加冰袋密封运输，在运输过程中应避免剧烈震荡。
4、注意事项（1）抗凝时，不能用肝素抗凝。
（2）采集羊水穿刺羊膜要在妊娠16周羊水达到200mL以后才能进行。
（二）全血DNA提取操作规程1、所需试剂及仪器：试剂由益生堂生物技术（深圳）有限公司提供，包含核酸提取试剂、扩增管、模条、无水乙醇，1.5mL离心管.仪器有黑马和博日扩增仪、台式高速离心机、旋涡振荡器、真空旋转干燥仪、电泳仪、电泳槽、分子杂交仪、凝胶成像系统。
2、实验前准备工作2.1、准备好1.5mL无菌离心管及无菌吸头。
2.2、变性液在每次使用前应充分摇匀以保证提取质量。
3、操作步骤（1）在1.5mL离心管中加入250μL充分摇匀的变性液及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟。
也可选择以下操作步骤，以获得更高质量的DNA：在1.5mL离心管中加入1mL无菌水及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟以裂解红细胞。
13000rmp离心1分钟，弃上清，保留管底白细胞块。
α-地中海贫血检测试剂盒 标签打印 SOP
1.目的:建立α-地中海贫血（SEA型）检测试剂盒试剂标签准备过程操作规范，实现产品质量稳定。
2.范围:适用于α-地中海贫血（SEA型）检测试剂盒标签准备及打印过程。
3.职责:3.1操作人对过程操作规范性及记录的及时性和完整性负直接责任。
3.2工序负责人或生产管理人员负管理责任。
4.操作过程4.1作业场地：α-地中海贫血（SEA型）检测试剂盒标签打印生产在生产区外包间内进行4.24.3作业设备：4.4标签打印：4.4.1要求应按计划生产数量打印合格标签。
标签打印作业过程进行记录4.4.2标签打印要求4.4.3打印字体应清晰，应无缺字、漏字情况4.4.4打印字体排列整齐，应避免打印字体过度倾斜并遮盖标签印刷字体情况4.4.5合格标签示例：1) 试剂盒外标签：2) 彩盒侧面批号：3) 试剂标签打印内容： a) PCR 反应液标签b) 阴性对照标签:c) 地贫阳性对照标签：d)生产批号： 生产日期： 年月日有效日期至：年月日字体：华文新魏 字号：11号 字体：楷体GB2312 字号：小五 字体：宋体 字号：7号字体：宋体 字号：小六字体：宋体 字号：小五字体：宋体 字号：小六字体：宋体 字号：小六e ）细胞裂解液Ⅰ标签：f ）细胞裂解液Ⅱ标签：g）饱和NaCl 标签：4.5未使用标签、不合格标签、报废标签应粘贴在《标签打印记录》相关位置。
4.6 完成标签准备后，按照生产要求数量送交生产部PCR 项目组进行标签粘贴操作。
5. 相关文件:无 6. 相关记录：6.1 《标签打印记录》 FSD-PR-112字体：宋体 字号：小六字体：宋体 字号：小六字体：宋体 字号：小六。
β-地中海贫血基因检测标准操作规程(20110628)
某医院检验科作业指导书WORK INSTRUCTOR标题：β-地中海贫血基因检测标准操作规程β-地中海贫血基因检测标准操作规程1原理采用PCR 体外扩增和DNA 反向点杂交相结合的DNA 芯片技术：。
2器材2.1 试剂2.1.1 全血基因组提取试剂：深圳亚能全血DNA 快速提取试剂盒（25人份/盒）。
有效期：1年。
2.1.2 亚能β-地中海贫血基因诊断试剂盒（25人份/盒）。
主要组成： 储存条件：试剂盒Ⅰ保存在﹣18℃以下；试剂盒Ⅱ保存在2～8℃。
有效期：6个月。
2.1.3 自备试剂：2.1.3.1 20×SSC （pH 7.0）NaCl 175.3g组成成分 数量 规格 试剂盒ⅠPCR 反应液 25管 23μL 试剂盒Ⅱ膜条 25张 POD 母液1管 75μL TMB 1瓶 10mL 矿物油 1管 1mL 30％ H 2O 21管75μL柠檬酸钠88.2g加蒸馏水750mL溶解，用pH计调pH至7.0，最后定容至1000mL，并高压灭菌保存。
2.1.3.210% SDS（pH 7.0）SDS 20g加蒸馏水180mL溶解，用pH计调pH至7.0，最后定容至200mL。
2.1.3.31M柠檬酸钠（pH 5.0）柠檬酸钠294g加蒸馏水700mL溶解，用浓HCl调pH至5.0，最后定容至1000mL。
2.1.3.4A液（2×SSC，0.1%SDS，pH 7.4）20×SSC 100mL10% SDS 10mL加蒸馏水定容至1000mL2.1.3.5B液（0.5×SSC，0.1%SDS，pH 7.4）20×SSC 25mL10% SDS 10mL加蒸馏水定容至1000mL2.1.3.6C液（0.1M柠檬酸钠，pH 5.4）1M柠檬酸钠100mL加蒸馏水定容至1000mL2.1.3.7显色液（新鲜配制使用，按顺序加入以下溶液）C液19 mLTMB 1 mL30% H2O22μL2.2仪器某公司某型移液器某公司某型离心机某公司某型生物安全柜某公司某型PCR仪某公司某型水浴锅某公司某型分子杂交仪某公司某型水平摇床某公司某型扫描仪3操作规程3.1DNA提取3.1.1在1.5mL离心管中加入800μL裂红液及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置2～3min，8000rpm离心2分钟，弃去上清，小心保留管底沉淀。
-地中海贫血基因诊断项目开展指南
α-地中海贫血基因诊断项目开展指南一α-地中海贫血基因诊断流程示意图二实验室建设1最佳α-地中海贫血基因诊断实验室设计平面图1）实验室应具有试剂准备区、标本制备区、PCR扩增区及产物分析区（如上图）2）临床样本的收取及储存应该在这4个区域以外的地方完成。
3）进入各个工作区必须遵循严格的单一方向顺序。
4）进入各工作区必须严格按照要求更换各区域特定颜色的工作服，并同时佩戴一次性手套。
出工作区之前必须脱去区域特定工作服及手套。
5）每一个工作区都应有独立的一套仪器设备及耗材（包括移液器、离心机、试管架、一次性手套、移液吸头、离心管及冰箱等），且不同区域的仪器设备及耗材不能混用。
2实验室环境1）工作区域必须始终保持清洁整齐2）所有实验台面及地面均应保持清洁.3）所有实验废料及垃圾使用专用垃圾袋装好后，封口处理。
4）每次工作前后对工作台面进行消毒液擦洗、消毒酒精擦洗工作，并在完成工作后开启紫外灯进行灭菌。
3 实验室制度及人员配备1）实验室必须有完整详细的操作规章制度并严格遵守。
2）操作人员需要一定的专业技术知识和经验。
3）操作人员需要有强烈的责任感，且工作认真细心。
4）操作人员需要严格遵守α-地贫基因诊断的操作规程。
三实验所需试剂、设备及其功能简介α-地中海贫血基因诊断实验主要由以下三个实验组成：全血或羊水 DNA的抽提，基因扩增（PCR），电泳分析。
1 实验所需试剂2 实验所需仪器（推荐使用）及功能简介β-地中海贫血基因诊断项目开展指南一β－地中海贫血基因诊断实验工作流程二实验室建设1最佳β-地中海贫血基因诊断实验室设计平面图1）实验室应具有试剂准备区、标本制备区、PCR扩增区及产物分析区（如上图）2）临床样本的收取及储存应该在这4个区域以外的地方完成。
3）进入各个工作区必须遵循严格的单一方向顺序。
4）进入各工作区必须严格按照要求更换各区域特定颜色的工作服，并同时佩戴一次性手套,出工作区之前必须脱去区域特定工作服及手套。
地贫绒毛检测技术实验室操作流程
地贫绒毛检测技术实验室操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!地贫绒毛检测技术实验室操作流程一、准备工作阶段在进行地贫绒毛检测之前，需要做好充分的准备。
QO011 α-地中海贫血(--SEA型)检测试剂盒成品检验SOP
1.目的建立α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒成品检验作业指导书，对α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒检验进行规范。
2.范围α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒的检验。
3.职责QC负责本规程实施，部门负责人监督执行。
4.仪器4.1ABI 7500荧光定量PCR仪4.2微量移液器及相匹配的带滤心吸头4.3生物平安柜5.材料与试剂5.1灭菌过的1.0 ml PCR反应管或1.5ml的离心管6.规程6.1外观检查以正常或矫正目力观看试剂盒外观，内包装完整，无内容物溢出；标签外观完整，无脱落，标签标识内容清楚，品名、批号和有效期清楚；试剂盒内组成成分正确，无重复、缺少组分的状况；说明书清楚完整。
6.2装量各组分实际装量精确：细胞裂解液I不少于28ml，细胞裂解液II、饱和NaCl 不少于8ml，PCR反应液不少于1ml，阴性对比不少于40μl，阳性对比不少于40μl，Taq 酶液不少于30μl。
6.3性能指标依照《α-地中海贫血（--SEA型）检测试剂盒（实时荧光PCR法）说明书》进行PCR 扩增。
PCR6.3.1 阳性对比设1管，检测结果为阳性，CT≤25，扩增曲线有明显指数增长期。
6.3.2 阴性对比设1管，检测结果为阴性，CT＞36或无CT值，线性为直线或稍微斜线，无指数增长期。
6.3.3阳性参考品符合率取阳性参考品溶液，浓度为浓度为100，000 copies/ml ，做三个重复，分别编号，摇匀，取5μl 加入PCR 反应液中，盖上盖子，低速离心甩液10秒，然后依照表三进行PCR 扩增。
6.3.4 阴性参考品符合率取阴性参考品溶液（NC1、NC2、NC3、NC4），浓度为100，0000 copies/ml ，分别编号，摇匀，取5μl 加入PCR 反应液中，盖上盖子，低速离心甩液10秒，然后依照下表PCR 反应条件扩增。
6.3.5 最低检出限取最低检出限参考品，浓度为1000copies/ml ，做三个重复，分别编号，摇匀，各取5μl 加入PCR 反应液中，盖上盖子，低速离心甩液10秒，然后依照表三进行PCR 扩增。
PO010 α-地中海贫血检测试剂盒 组装 SOP
1. 目的:建立α-地中海贫血检测试剂盒组装作业操作规范，实现产品质量稳定。
2. 范围:适用于α-地中海贫血检测试剂盒成品的组装。
3. 职责:3.1 操作人对过程操作规范性及记录的准时性和完整性负直接责任。
3.2 复核人对相关作业过程规范性及记录的准时性和完整性负间接责任。
3.3 工序负责人或生产管理人员负管理责任。
试剂盒组装过程规范5.1 组装场地：PCR 试剂盒组装生产在生产区外包装间内进行。
5.2 生产前确认当前生产作业所需物料齐备，标签批号与所生产产品批号全都 5.3 试剂盒组装过程规范：5.3.1，7、8、5.3.2 包装盒外观批号检查放置包装内衬放置PCR 反应液 放置阴性对比放置阳性对比放置说明书放置Taq 酶液放置细胞裂解液Ⅰ放置细胞裂解液Ⅱ放置饱和NaCl 放置PCR管贴盒签贴合格签试剂盒内容物检查5.3.3全部生产人员，依据试剂盒组装挨次确定负责内容，并依据流水线进行操作.5.4流程各步操作要求：5.4.1包装内衬放置前应对包装内衬清洁度及完整性进行核查。
残缺、表面有污物、局部褪色的包装内衬不得放入试剂盒内。
5.4.2放置说明书之前应再次检查说明书标题、内容、编号与所组装试剂盒是否全都。
5.4.3试剂盒内容物检查时应认真检查是否有漏装状况，同时检查试剂盒内各种试剂摆放位置是否正确。
5.4.4粘贴试剂盒盒签时应明确盒签标示品名、规格与所组装试剂盒是否全都。
5.4.5试剂盒组装操作完成后填写《请验单》，由品保部进行成品抽验。
5.4.6品保部取样后，剩余成品置于仓库成品待检区。
并在冷冻条件下保存。
5.4.7如成品质检合格，则转入成品区并办理正式入库手续。
5.5作业完成后，应准时对作业区进行清场。
5.6作业过程如消灭特别状况，应准时说明。
6.相关文件：无7.相关记录：7.1 《α-地中海贫血检测试剂盒组装记录》FSD-PR-113。
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1.目的：本试剂盒用于定性检测α地中海贫血和β地中海贫血，可用于检测从人血液或血斑样本中获得的人基因组DNA中与地中海贫血相关的25个突变位点，包括19个β地中海贫血和6个α地中海贫血的突变位点。
检测结果可以辅助临床诊断，也可用于流行病学调查、婚检及产前检测等领域。
2.责任人：3.适用范围：本标准化操作规程适用于晶芯®地中海贫血基因检测试剂盒（微阵列芯片法）整体解决方案操作使用的全过程。
4.PCR扩增：4.1 设备与耗材4.1.1 4℃/-20℃冰箱；4.1.2 超净工作台2台（分别用于PCR体系配制和模板加样）；4.1.3 微型高速离心机（Eppendorf，5424）；4.1.4漩涡混合器；4.1.5 PCR扩增仪（博奥生物集团有限公司，晶芯®E-Cycler TM96 PCR仪）；4.1.6单道移液器（1000µl，200µl，20µl），8道移液器（10µl），灭菌枪头（1000µl，200µl，20µl）；4.1.7 离心管架，96孔板，1.5ml离心管，PCR扩增管或八连排管（200µl）；4.1.8 记号笔，手套（无粉乳胶，PE）；4.1.9 75%酒精棉，废液缸和消毒液；4.2 试剂晶芯®地中海贫血基因检测试剂盒（微阵列芯片法）B部分中的扩增试剂A，B，C，D，E以及PCR扩增酶试剂，阳性对照品（博奥生物集团有限公司）。
4.3 样本人基因组DNA（提取方法详见干血斑基因组提取标准操作规程）。
4.4 实验前准备4.4.1 打开超净台紫外灯照射20min，开风机15min后打开日光灯进行操作；4.4.2 准备实验用品，包括PCR扩增试剂，离心管架，96孔板，移液器等；4.4.3 从-20℃冰箱取出PCR扩增试剂及基因组DNA，室温融化，涡旋混匀后瞬时离心；4.4.4 核对样本名称及数量，排好顺序，将样本的加样顺序记录下来。
4.5 操作过程4.5.1 用75%酒精棉擦拭双手，超净台面，移液器，96孔板及离心管架；4.5.2 按照加样顺序准备PCR反应管，并在管盖和管身同时做好相应标记；4.5.3根据样本数目准备5倍数量的200µl PCR扩增管，在试剂准备区内，将融化后混匀的PCR 扩增试剂A、B、C 、D、E按17µl/管，分别分装到5个PCR 扩增管中。
再分别向这5个PCR扩增管中加入3µl的PCR扩增酶试剂。
4.5.4 在模板加样区内，用75%酒精棉擦拭移液器、台面及双手，晾干后，向相对应的A、B、C、D、E系列试剂中各加入5µl同一样本核酸溶液，混匀，按照地中海贫血基因检测PCR扩增程序进行PCR扩增；4.5.5扩增：将PCR扩增管或八连排管置于PCR扩增仪中，按表2中的热循环程序进行PCR扩增反应；（扩增程序设定方法详见晶芯®E-Cycler TM96 PCR仪标准操作规程）5.芯片杂交：5.1 设备与耗材5.1.1 4℃/-20℃冰箱；5.1.2 芯片杂交仪（博奥生物集团有限公司，晶芯®BioMixer™ II）；5.1.3芯片洗干仪（博奥生物集团有限公司，晶芯®SlideWasher TM）；5.1.4杂交盒若干套（博奥生物集团有限公司，HybSet基因微阵列芯片杂交盒）；5.1.5单道移液器（1000µl，200µl，20µl），灭菌枪头（1000µl，200µl，20µl）；8道移液器（10µl，200µl）；5.1.6 离心管架，96孔板，1.5ml离心管、八连排管（200µl）；5.1.7 磁力架和磁力板；5.1.8 记号笔，75%酒精棉，废液缸；5.1.9 手套（无粉乳胶，PE）；5.1.10 15ml离心管。
5.2 试剂5.2.1 晶芯®地中海贫血基因检测试剂盒（微阵列芯片法）A部分中的磁珠、结合液、芯片；B部分中的杂交液缓冲液和PCR扩增试剂A、B、C、D、E，以及阳性对照品（博奥生物集团有限公司）；5.2.2 NaOH溶液（10 M），纯化水；5.2.3 20×SSC、10% SDS（博奥生物集团有限公司）。
5.3 实验前准备5.3.1提前打开杂交仪运行程序50℃预热（杂交程序设定方法详见晶芯®BioMixer II芯片杂交仪标准操作规程）；5.3.2杂交液：从试剂盒B部分中取出杂交缓冲液（白色盖），50℃温浴使其完全融化；5.3.3 变性液：根据需要量，用纯化水将NaOH 溶液（10 M）稀释100 倍，涡旋混匀得到变性液（0.1 M）（需每次新鲜配制）；5.3.4芯片：第一次使用时提前从4℃取出，平衡至室温再使用，开封后室温保存。
5.4 操作过程5.4.1 清洁与准备①用75%酒精棉擦拭实验台面双手，移液器，96 孔板及离心管架；②按照样本数量准备相应的离心管，并在管身做好相应标记；提示：以8份备检样本为例，需准备2个1.5ml离心管（分别配制磁珠及变性液）和5个200µl八连排管（用于放置产物，磁珠，变性液和杂交液）5.4.2 磁珠的准备以一份样本为例，涡旋振荡混匀磁珠与结合液，取离心管置于离心管架上，加入50µl结合缓冲液，再加入磁珠20µl，静置磁力架上吸附15 s，去除溶液。
将离心管撤离磁力架，再加入50µl 结合缓冲液，涡旋混匀。
5.4.3 磁珠纯化①检测一人份需用2个离心管，分别在2个离心管上进行标注，1号管和2号管；在1 号管中加入A体系PCR产物10µl和B体系PCR产物10µl，混匀；在2号管中加入C体系PCR产物10µl、D体系PCR产物10µl和E体系PCR产物10µl，混匀。
②向1号管中加入5.4.2中制备好的磁珠悬液20µl，向2号管中加入5.4.2中制备好的磁珠悬液30µl，混匀后静置10 min，期间在静置5min后需用移液器进行一次吹吸，以防止磁珠沉积。
然后，将产物-磁珠混合物置于磁力板上，吸附15 s，吸弃溶液，撤离磁力架。
③NaOH变性：再向1、2 管中分别加入新配制的0.1 M NaOH 60 µl，将聚集在离心管壁上的磁珠吹吸打散，充分混匀，静置10 min，期间在静置5 min后需用移液器进行一次吹吸，以防止磁珠沉积。
然后，将离心管置于磁力板上，吸附15 s，吸弃溶液，撤离磁力板。
★变性期间，分装杂交液于一干净的八连排管中，每一人份需要杂交液120µl,分装时每份大于120µl备用。
5.4.4 杂交反应混合物准备①向变性结束后的离心管中加入温浴后并充分混匀的杂交缓冲液40µl，对着管壁四周轻轻吹打，以去除干净管壁上残留的NaOH溶液，置磁力板上吸附15 s，吸弃溶液，撤离磁力板；②向上述管中加入杂交缓冲液20µl，将聚集在离心管壁上的磁珠吹吸打散，充分混匀，准备杂交。
5.4.5 芯片杂交①按照杂交盒托架（两侧凹槽各加50 µl纯化水）、芯片、盖片的顺序装配好杂交反应盒；②吸取14µl杂交混合物经加样孔加入芯片点阵中，注意不要加入气泡至反应池中，盖好盒盖并使用金属封条密封杂交盒，完成后将杂交盒平稳放入杂交仪托盘，并注意将三只或六只杂交盒全部放入，以使托盘平衡；★加样时注意顺序，一份样本需要同时进行两个点阵的检测，1号管检测点阵为1或3，2号管检测点阵为2或4。
③运行地中海贫血基因检测杂交程序见表3，杂交条件为50℃杂交1 h，转速为5 rpm；★杂交仪需提前打开预热20 min以上，待温度稳定后使用。
5.4.6芯片清洗①取出洗液原液（20×SSC，10%SDS），根据需要及实际情况，按如下比例配制洗涤液Ⅰ和Ⅱ；洗涤液I：依次将纯化水，20×SSC，10%SDS按照975：15：10的比例混合；洗涤液II：依次将纯化水，20×SSC按照997：3的比例混合；②预热SlideWasher TM芯片洗干仪，选择“加热”和“甩干”选项，按表4设置好程序后，点击“运行”。
待仪器屏幕显示“请放入芯片进行洗涤”的对话框时即可放入完成杂交的芯片，放入后点击“确定”开始运行地中海贫血基因检测洗涤程序进行洗涤，待洗涤完成后仪器屏幕显示“请将芯片放入甩干仓”时，点击“确定”即可将芯片对称的放入甩干仓，盖上仓门后自动进行甩干，等待甩干后点击“确定”打开仓门，取出芯片。
（洗干程序设定方法详见晶芯®SlideWasher TM芯片洗干仪标准操作规程）表4 地中海贫血基因检测洗涤程序★杂交结束提前10 min配置洗液，并预热洗干仪。
6.扫描判读：使用晶芯®LuxScan TM 10K/B微阵列芯片扫描仪和晶芯®地中海贫血基因检测芯片判别系统进行信号的读取及结果判断。
操作简介如下（详见晶芯®LuxScan TM 10K/B微阵列芯片扫描仪标准操作规程及软件用户手册）：6.1 开启扫描仪，运行地中海贫血基因检测基因芯片判别系统，预热激光10 min；6.2设置“保存路径”，输入芯片编号，样本编号等信息；6.3将完成洗涤、甩干的芯片插入扫描仪插槽内，即可进行芯片扫描和结果判读；6.4 完成判读的芯片需室温避光保存，并请详细记录判读结果和芯片信息；6.5 关闭激光，退出软件，关闭扫描仪。
7.说明：本试剂盒使用前请仔细阅览晶芯®地中海贫血基因检测试剂盒（DNA微阵列芯片法）使用说明书和各仪器设备使用手册，并严格参照说明书执行相应操作。
8.相关文件：见附件。
9.记录模板：见附件。
10.历史修改记录：变更类型：A-增加M-修改D-删除。