胶体金平台介绍
胶体金的性质、制备及其在医学中的应用

胶体金的性质、制备及其在医学中的应用胶体金溶液是指分散相粒子直径在l—150 nm之间的金溶胶,属于多相不均匀体系,颜色呈桔红色到紫红色.胶体金作为标记物用于免疫组织化学始于1971年,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合.1974年Romano等将胶体金标记在第二抗体(马抗人IgG)上,建立了间接免疫胶体金染色法。
1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用。
胶体金在免疫化学中的这种应用,又被称为免疫金.之后,许多学者进一步证实胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显改变.它可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、蛋白质、多肤、抗原、激素、核酸等生物大分子的精确定位,也可以用于日常的免疫诊断,进行免疫组织化学定位,因而在临床诊断及药物检测等方面的应用已受到广泛的重视.目前电镜水平的免疫金染色(IGS),光镜水平的免疫金银染色(IGSS),以及肉眼水平的斑点免疫金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力工具.1.免疫胶体金技术的基本原理氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。
由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。
胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC12-),外层离子层H+则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。
胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核,较小的胶体金颗粒基本是圆球形的,较大的胶体金颗粒(一般指大于30nm以上的)多呈椭圆形。
在电子显微镜下可观察胶体金的颗粒形态。
胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。
吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。
用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。
胶体金法各种方法法原理

胶体金法各种方法法原理胶体金(colloidal gold)是一种常见的纳米材料,广泛应用于生物医学、光电子学以及化学分析等领域。
胶体金法则是制备胶体金纳米颗粒的一种常用方法,它包括了各种不同的制备方法。
本文将详细介绍胶体金法的各种方法和原理。
一、胶体金法的概述胶体金法是指利用化学还原或还原剂将金离子还原成金原子并使其聚集形成胶体金颗粒的过程。
胶体金颗粒具有良好的可控性和活性,可以通过调节制备条件来控制其形状、尺寸和表面性质,便于在各个领域的应用中发挥优越性能。
二、化学还原法化学还原法是制备胶体金的一种常见方法。
其原理是通过将金离子与还原剂反应,使金离子还原为金原子,形成胶体金颗粒。
常用的还原剂有氨水、柠檬酸等。
这种方法制备的胶体金颗粒形状和尺寸较均匀,可以通过调节还原剂浓度、反应时间和温度等参数来控制颗粒的大小和形状。
三、光化学法光化学法是一种利用光照射来控制胶体金纳米颗粒形成的方法。
在该方法中,金离子在紫外光照射下被激发产生自由电子,然后与还原剂发生反应,形成胶体金颗粒。
这种方法具有反应速度快、颗粒形状可调控等优点。
光化学法的适应范围广,可以制备不同形状和尺寸的胶体金颗粒。
四、微乳液法微乳液法是一种利用乳化剂将金离子包裹在微乳液中,通过还原剂将金离子还原为金原子,最终生成胶体金颗粒的方法。
微乳液具有稳定性好、溶剂消耗少等特点,在胶体金制备中广泛应用。
该方法不受金离子浓度的限制,能够制备出较大尺寸的胶体金颗粒。
五、溶胶-凝胶法溶胶-凝胶法是一种将金离子逐渐转化为胶体金的方法。
首先,将金离子转化为胶态溶胶,然后通过加热或干燥使其凝胶,最终形成胶体金凝胶。
该方法可以制备出较大尺寸的胶体金颗粒,也可用于制备具有复杂结构的胶体金材料。
六、电化学法电化学法是一种利用电化学反应制备胶体金的方法。
在电化学细胞中,金阳极上的金离子被还原为金原子,并在阴极表面聚集形成胶体金颗粒。
该方法具有较高的纯度和良好的控制性能,可用于制备高质量的胶体金。
胶体金技术简介 ppt课件

心梗系列(肌钙蛋白、肌红蛋白、肌酸激酶)
毒品(吗啡,K粉,摇头丸,冰毒等)
畜牧兽医站, 商检系统, 传染病(禽流感、兽瘟疫等)
边检口岸,农牧类院系
和研究所
病毒(烟草花叶病毒、犬细小病毒等)
环保监测部门,研究机 有害物质超标 构
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注意事项
试剂原料耗材的批号控制,确保来源可靠有保障 设置关键控制点,确保流程无差错 仪器定期维护校准 研发时即考虑一定生产量的工艺问题,避免上量后不匹配 均一性,稳定性
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胶体金技术在中国的发展---回顾
1995年:国内基本空白,没有研发,1-2家生产单位仅是大包装分切 1997年:杭州艾康起步,依靠美国技术转让快速发展为国内第一品牌,
80年代:第一代产品,免疫渗滤法 (Flow Through)
90年代:第二代产品,免疫层析法 (Lateral Flow),女性妊娠 HCG
21世纪:快速诊断方法适应市场需要, 胶体金技术进入快速发展期,成为IVD 的热点(传染病、毒品、食品安全、畜 牧兽医等领域)
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两种技术的比较
免疫层析法
胶体金标记技术
容器清洁或硅化处理 胶体金颗粒制备 (负电)
颜色与颗粒的关系. 最佳标记颗粒大小40nm.
蛋白质最适用量测定:盐析法
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NC膜与溶液喷点-NC膜
NC膜的性能
NC膜的选择 爬速对灵敏度的影响 底衬的作用 不同膜厂家的产品差异(Pall/Whatman/Millipore/Sartorius)
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NC膜与溶液喷点---溶液喷点
C\T线溶液前处理: 1.过滤,0.2um孔径滤膜 2.离心1万转10分钟 喷点过程 头尾去除,喷点中的报废标志 C\T线喷点工艺(BJQ3000喷头)与接
中德生物:成为老百姓可信赖的食品安全专家——访无锡中德伯尔生物技术有限公司总裁李林

中德生物:成为老百姓可信赖的食品安全专家——访无锡中德伯尔生物技术有限公司总裁李林高光普【期刊名称】《食品安全导刊》【年(卷),期】2017(000)013【总页数】2页(P54-55)【作者】高光普【作者单位】【正文语种】中文中德生物以专业化、国际化为目标,在为用户提供食品安全监控与检测方案的基础上,逐步将产品扩展到更广阔的领域,为国家的食品安全做出更多贡献。
2017年4月6~8日,在北京国家会议中心举行的中国国际科学仪器及实验室装备展览会(CISILE)吸引了众多展商前来参展,而无锡中德伯尔生物技术有限公司(以下简称“中德生物”)就是其中之一。
会上,中德生物的展位以其独特的产品吸引了众多观众的关注,本刊记者就中德生物在此次展会带来的产品采访了中德生物的总裁李林先生。
对于此次展会,李林表示,CISILE作为仪器行业具有深度影响力的会展,对仪器市场来说,是非常重要的沟通平台之一。
因此,在很久之前中德生物就决定参与本次展会,也在会前进行了精心的准备。
本次展会所取得的效果并没有让中德生物失望,中德生物以本次展会为平台,与其他友商取得了良好的交流和沟通,也让更多的业内人士深入了解了中德生物的产品。
在采访中,李林首先向记者简单介绍了中德生物,他说:“中德生物创建于2002年,是国家级重点高新技术产业,是集食品安全检测试剂、仪器、软件于一体的产业化集团。
中德生物拥有5000m2国内顶级的研发实验室,3000m2标准化的生产车间,并通过了ISO 9001质量管理体系认证。
”关于中德生物目前的技术水平,李林表示,凭借先进的技术和强大的研发能力,中德生物在成立之初就逐步建立和完善了胶体金检测技术平台、ELISA检测技术平台、微生物检测、生化检测与信息化建设平台以及纳微米材料技术五大平台,先后研制生产了200余种食品安全快速检测产品,涵盖农药残留、兽药残留、禽类产品中的抗生素残留、水产品以及保健食品和化妆品中违禁物添加、真菌毒素和微生物检测等多个领域。
胶体金资料

胶体金(colloidal gold),又称金溶胶(gold solution),是指分散相粒子直径在l—150nm之间的金溶胶,属于多相不均匀体系,颜色呈桔红色到紫红色。
胶体金可以作为标记物用于免疫组织化学,近10多年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术。
胶体金免疫分析在药物检测、生物医学等许多领域的研究已经得到发展,并越来越受到相关研究领域的重胶体金(colloidal gold)也称金溶胶(gold solution),是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液。
胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC12-),外层离子层H+则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。
胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核,较小的胶体金颗粒基本是圆球形的,较大的胶体金颗粒(一般指大于30nm以上的)多呈椭圆形。
在电子显微镜下可观察胶体金的颗粒形胶体金因而具有胶体的多种特性,特别是对电解质的敏感性。
电解质能破坏胶体金颗粒的外周永水化层,从而打破胶体的稳定状态,使分散的单一金颗粒凝聚成大颗粒,而从液体中沉淀下来。
某些蛋白质等大分子物质有保护胶胶体金、加强其稳定性的作用。
呈色性微小颗粒胶体呈红色,但不同大小的胶体呈色有一定的差别。
最小的胶体金(2~5nm)是橙色的,中等大小的胶体金(10~20nm)是酒红色的,较大颗粒的胶体金(30~80nm)则是紫红色的。
根据这一特点,用肉眼观察胶体金的颜色可粗略估计金颗粒的大小。
光吸收性胶体金在可见光范围内有一单一光吸收峰,这个光吸收峰的波长(λmax)在510~550nm范围内,随胶体金颗粒大小而变化,大颗粒胶体金的λmax偏向长波长,反之,小颗胶体金的制备并不难,但要制好高质量的胶体金却也并非易事。
因此对每次制好的胶体金应加以检定,主要检查指标有颗粒大小,粒径的均一程度及有无凝集颗粒等。
在日光下仔细观察比较胶体金的颜色,可以粗略估计制得的金颗粒的大小。
胶体金技术的应用及展望PPT课件

This paper mainly introduces the design of an intelligent temperature control system which realizes the function of temperature measurement and control by using single bus digital temperature sensor DS18B20 and single chip microcomputer. The core components of the system are AT89C51 m sensor.
肌梗死). The determination assays for human myoglobin(肌红蛋白),
cardiac troponin complex(肌钙蛋白复合物) and the MB isoform of the
enzyme creatine kinase are presented. Cyclic voltammetry measurements
机理
根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗 粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和 生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学 、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
This paper mainly introduces the design of an intelligent temperature control system which realizes the function of temperature measurement and control by using single bus digital temperature sensor DS18B20 and single chip microcomputer. The core components of the system are AT89C51 m sensor.
胶体金是一种什么实验方法

胶体金是一种什么实验方法胶体金是指由纳米级金粒子组成的胶体溶液。
胶体是一种介于溶液和固体之间的物质状态,由一种或多种物质在另一种物质中形成的微粒子分散体系。
金是一种非常重要的贵金属,具有良好的热导性、电导性和化学稳定性,因此广泛应用于光学、电子学、生物医学等领域。
胶体金的实验方法主要包括物理还原法、化学还原法、光化学法等多种方法。
其中,物理还原法是最常用的制备胶体金的方法之一。
该方法的原理是通过外加还原剂来还原金离子,使其形成金原子,然后金原子自行聚集形成纳米粒子。
这种方法一般利用某些常见的还原剂如氢气、亚硫酸钠等将金盐还原成金纳米颗粒。
例如,可以将金盐(如氯金酸)加入溶剂中,然后逐滴加入还原剂,在适当的温度和pH条件下,金离子得到还原成金纳米颗粒,形成胶体金溶液。
化学还原法是另一种制备胶体金的方法。
这种方法的原理是将金离子与某些还原剂(如多肽、某些有机物)反应,使金离子还原成金原子并形成纳米颗粒。
这种方法一般需要控制反应条件如温度、pH值等,以得到所需的粒子尺寸和分散度。
光化学法是利用光化学反应原理制备胶体金的方法。
这种方法一般采用可见光、紫外光等光源来激发金离子,产生电子和空穴,然后通过还原剂将金离子还原成金原子,并形成纳米颗粒。
这种方法具有选择性、快速和可控性的优点。
制备胶体金的实验方法一般需要精确控制反应条件,如温度、pH值、反应时间等,以控制金纳米颗粒的粒径和分散度。
同时,还需要选择合适的还原剂、溶剂和金盐等试剂,以确保高效、可重复的制备过程。
胶体金的应用非常广泛,主要包括生物医学领域、光学传感、催化剂等。
在生物医学领域中,胶体金被用作生物标记物或药物载体,通过对其表面进行功能修饰,可以实现对生物分子的检测、分离和治疗。
在光学传感领域,胶体金具有强烈的表面等离子共振吸收和散射性质,可用于制备表面增强拉曼散射(SERS)基底,实现对低浓度分子的检测,并被应用于环境监测、食品安全等方面。
在催化剂领域,胶体金纳米颗粒具有良好的催化性能,可用于催化剂的制备和催化反应的促进。
胶体金的相关知识

免疫层析试纸包被技术简介试纸生产过程中一般有三种溶液的包被处理,即质控溶液,检测溶液,和结合物溶液(胶体金)。
质控和检测溶液就是C/T线上包被的溶液。
在免疫层析试纸硝酸纤维素膜表面进行 C/T线的包被,是试纸生产制作的关键环节之一。
免疫诊断试剂中使用的硝酸纤维素膜有两类,一种是免疫渗滤产品用的,按孔径选择一般采用0.45um-1.2um的膜,与分子生物学中用的印迹转移膜一样。
Whatman Schleicher & Schuell的膜属于纯采用100%的纯硝酸纤维素,蛋白结合能力较高。
另一类即免疫层析用膜,一般按侧向流动速度来划分,常用的范围一般在120-180秒/4cm。
目前市场上的硝酸纤维素膜材以带塑料底衬为主,也有部分的膜不带底衬。
不带底衬的膜需注意膜面的正反面,其光滑度有适当差别。
鉴于流动封闭技术的普及,C/T线的包被目前流行先将膜粘贴在塑料支持底板上,然后直接将塑料板放入仪器上进行划线操作,干燥后进行其他部分的贴板组装,这种划膜工艺可简称为划板。
但部分产品的工艺要求先直接在膜上划好C/T线,然后用特定配方的溶液将膜进行浸泡封闭处理,干燥后再贴膜及其他部分材料,这种划膜工艺可简称为划膜。
在结合物溶液(胶体金)的包被上,较多的用户倾向于用气动喷头进行定量操作。
在科研及研发项目中,往往喷一条线或几条线就够用了,因此在单维往复平台上一次喷一条线也可接受。
鉴于胶体金膜切条宽度一般在3--7mm,不方便一条条依次地在移动平台上固定和取放。
因此在批量生产过程中,一般建议采用成片的胶体金垫,用三维平台往复来回地间隔喷线,一次即可喷出二三十条。
此后将喷好的金干燥再裁切成条,这样的操作会效率高,适合规模生产。
在某些免疫层析试纸产品生产工艺中,层析膜材或样品垫膜材需要用特定溶液进行整平面包被,要求效果均匀,如层析膜和样品垫的特定封闭处理。
而一般的浸泡或铺金工艺满足不了要求。
这时可用气动喷头叠加喷线成面。
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农牧业
畜牧兽医站, 商检系统,边 检口岸,农牧类院系和研究 所 环保监测部门,研究机构
食品安全检测中心,各监管 部门
传染病(禽流感,兽瘟疫等) 病毒(烟草花叶病毒、犬细小病毒等) 有害物质超标
农兽药残留(磺胺类、瘦肉精等),大肠杆菌,黄曲霉素
环境
食品安全
免疫层析法的临床应用
临床应用范围 检测感染性疾病抗原
3、喷膜机 喷膜机是将包被液包被到 膜上面的机器。 影响产品质量和实验效果 的参数有: ①喷膜速度 ②喷膜参数 ③灌注量 ④线条间隔和位置
金子垫的介绍
1、标记材料 将胶体金和标记材料 结合起来的过程叫标记。 标记材料的作用是和 胶体金标记物结合,捕获 目标蛋白,结合膜上T线 材料,从而显示出检测结 果。
检测抗体 检测蛋白质
检测激素 毒品类,
检测的物质 HBsAg、HbeAg、疟原虫抗原、大 肠埃希菌抗原等 TB-Ab、Hp-Ab、HBsAb、HIV-Ab、 抗登革热抗体等 AFP、癌胚抗原、肌红蛋白、肌钙 蛋白、尿微量白蛋白、粪便血红 蛋白等 hCG,LH 、FSH(促卵泡生成素) TSH(促甲状腺激素) 检测药物 如吗啡、可卡因、鸦片、大麻、 安非他命及摇头丸等
Technology 技术
项目开发技术路线图
抗体的制备 胶体金的制备
胶体金标记 技术的研究
抗体膜的制备 装配
固相膜筛选
胶体金标记物的制备 胶体金标记物吸附在玻纤上
固相技术 的选择优化
试纸板的生产 切 割
组装、包装
膜的介绍
1、硝酸纤维素膜 在检测线和对照线条带区域 固定抗体 2、包被材料 将抗原或抗体通过喷膜机喷 到硝酸纤维膜上的过程叫包被过 程。
2、涂布材料 ①涂金子的材料一般是玻纤 和无纺布 ②涂布的方法一般有两种: 一是用喷膜机把金子喷在 玻纤上;二是手工涂布。
其他原材料的介绍
1、箭头胶 箭头胶是常用的一种原材料, 它的作用是将辅料垫、金子垫和 膜紧密的贴在一起,同时也起到 操作标示的作用。
2、吸水纸 ①吸水纸是产生装配在试纸条的上端, 它的作用有:产生吸力,引导层析过 程的进行;可用作手柄。 ②吸水纸的标准:吸水性能强;厚薄适 中;吸水后不会过度膨胀;易贴彩胶, 吸水后彩胶也不易脱落;
吸水棒吸水后会改变颜色
技术创新
结果判读
怀孕
与常规诊断方法相比
优点 快速:全部检测过程仅需 3-10分钟。 简便:不需其它任何仪器设备,操作也极其简单,无需专 业人员,携带方便,可随时随地进行。 廉价:单个测试条成本极低 可单份检测:对标本既能成批检测,又可单份检测,可立 刻拿到结果,不必等待。 稳定性好:金标试剂稳定,可长期保存。 检测标本种类多:既可用于查血,又可用于检尿或唾液, 因而适合各种检查 缺点 定量问题 灵敏度问题
试纸条组成结构
胶体金垫 样品垫 控制线(C线) 吸水滤纸
层析方向 PVC底板 测试线 (T线)
NC膜(硝酸纤维素膜)
胶体金层析法一般原理介绍
(双抗体夹心)
(以HCG检测为例)
视频
早早孕产品形式
图片
形式
试纸条
卡型
笔型
电子验孕笔
价格
最经济
3-5元
5-10元
>$5.0
(国外价格)
使用方法
1.试纸:将试纸条标: “MAX”一端浸入尿液,尿液液面请勿超 过标志线,待尿液爬至观察区后取出试纸条平放。3-5分钟观察 结果,10分钟后无பைடு நூலகம்。 2.用吸管吸取尿液,加入4滴到检测卡的加样孔中,3-5分钟观 察结果,10分钟后无效。 3.将尿液滴加到试纸上或直接淋在检测笔的吸尿棒上,尿液爬 上后平放,10分钟观察。
3、PVC板 PVC板是用来承载膜、金 子、辅料等成分的底板,它是 试纸条的骨架。 PVC板的标准:板上的粘 性要适中;板的长度要合乎规 格;板的硬度也要达到一定的 标准。
评价一个试剂的标准
评价一个试剂好坏的标准有: 1、灵敏度 2、特异性 3、背景 4、吸样和上样 5、和对照试剂比较 6、市场反馈 7、检验机构的评价
评价指标
灵敏度:试剂具有检测出最低量被检物的能力。 灵敏度是诊断试剂的首要质量指标。 特异性:试剂正确检定不存在的被检物质的能力(即 无假阳性)。 精密度:重复测定值之间的符合程度,批内CV(变异 系数)值应小于15%。 稳定性:试剂在规定条件下能储存的时间。
发展方向
形式创新
显示窗口的设计、显示结果显示设计
技术应用
类别 人类医学 应用领域 各级医院 ,血站 ,CDC, 防疫 站,诊断中心;家庭自检; 商检系统;边检口岸;公 安系统. 检测的物质 传染病(乙肝五项,HCV,HIV, SARS等) 标志物(AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等) 女性妊娠(hCG(早孕),LH,FSH) 毒品(吗啡,K粉,摇头丸,冰毒等) 其他(疟疾)
胶体金诊断平台介绍
胶体金原理及其产品介绍
什么是胶体金?
胶体金免疫技术的特点是以纳 米级别的胶体金作为标记物。 胶体金(colloidal gold)是氯金酸 (chloroauric acid)的水溶胶,具有 高电子密度,并能与多种生物大分 子结合,已成为继荧光素、放射性 同位素和酶之后,在免疫标记技术 中较常用的一种非放射性示踪剂。