快速高效偶联亲和层析介质试剂盒试用装说明书
试剂盒使用说明书

人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)水平。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)含量。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品:270IU/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
苏州蓝晓生物科技有限公司 Ni Seplife HP(IDA)说明书

Ni Seplife HP(IDA)说明书1.产品介绍Ni Seplife HP(IDA)层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型亲和层析介质,具有良好的化学稳定性和生物相容性,是将亚氨基二乙酸基键合在高流速高分辨率琼脂糖凝胶过滤层析介质上,再螯合金属离子Ni2+形成的一种亲和层析介质。
Ni Seplife HP(IDA)利用样品组分中的组氨酸与金属离子的亲和吸附进行分离纯化,可用于分离纯化能被金属离子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白及带His标签的重组蛋白。
2.性能介绍产品牌号Ni Seplife HP(IDA)外观球状凝胶,无臭无味基质Seplife6FF形状球形最高流速(cm/h)150耐压(MPa)0.3粒径(μm)25~45离子结合量(Ni2+umol/ml):~30pH稳定性3~13(长期);2~14(短期,在位清洗[CIP])化学稳定性在常用水相溶液中稳定:0.1M氢氧化钠;0.1M盐酸;8M尿素应用适用His标签的重组蛋白纯化3.使用方法3.1装柱装柱按照标准操作规程操作。
必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
3.2平衡用2~5个柱床体积的初始缓冲溶液进行平衡,直至电导率、pH值等参数不变。
3.3上样(1)样品一般溶解于pH6~8的初始缓冲液中,提高上样缓冲液的pH值可以增大载量。
(2)缓冲液中不能含有EDTA和柠檬酸盐,同时最好避免巯基乙醇、DTT等还原剂。
(3)常用缓冲液有10~100mmol/L磷酸钠缓冲液、20~200mmol/LTris-HCl缓冲液等。
(4)缓冲液中一般要加入0.15~0.5mol/L的NaCl以消除离子交换作用。
(5)初次使用镍螯合琼脂糖凝胶时,推荐使用50mmol/L PBS(50mmol/L NaH2PO4,0.5 mol/L NaCl,pH7.4)作为初始缓冲液。
3.4洗脱洗脱一般分为以下几种方法:(1)降低pH洗脱:大多数蛋白在pH6~4会被洗脱下来(也可以在pH3~4),缓冲液可以是醋酸钠、柠檬酸和磷酸盐缓冲体系。
Protein A亲和介质说明书

国家生化工程技术研究中心(北京)地址:北京市海淀区中关村北二条1号中国科学院过程工程研究所西区 电话/传真:010- 82544957 邮编:100190Protein A 亲和介质(Protein A QZT 4FF )产品说明书1. 产品简介Protein A 能特异性地与抗体的Fc 区结合,所以Protein A 亲和介质可用于抗体(单抗和多抗)的分离纯化,经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。
Protein A QZT 4FF 亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质,以重组Protein A 为配基,具有很高的物理化学稳定性,配基不易脱落,寿命长,使用方便,应用广泛。
2. 产品特性3. 使用方法Protein A QZT 4FF 广泛用于各种抗体的分离纯化。
层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡:用5~10CV 的平衡缓冲液(20 mM PB+0.15M NaCl ,pH 7.0,添加适当浓度的NaCl 抑制非特异性吸附)平衡层析柱,至流出液电导和pH 不变(与平衡液一致)。
进料:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。
固体样品可用平衡液溶解配制;低浓National Engineering Research Center forBiotechnology (Beijing)Add :No.1 Bei er tiao, Zhongguancun, Haidian District, Beijing, ChinaTel/Fax : 010- 82544957 Post code :100190度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。
为了避免堵塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm )处理。
进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
淋洗:上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱:用洗脱缓冲液(20 mM 柠檬酸,pH 3.0-4.0;或0.1M 甘氨酸,pH 3.0;或20 mM 乙酸钠,pH 3.0-4.0;具体洗脱条件与抗体的结合强度和稳定性密切相关,效果不好时应进行洗脱缓冲液(种类和pH 或添加剂)的优化)洗脱,收集流出液。
快速高效偶联亲和层析介质试剂盒说明书

快速高效偶联亲和层析介质试剂盒说明书【产品名称】通用名称:CDI预活化琼脂糖凝胶4B试剂盒。
商品名称:快速高效偶联试剂盒。
【包装规格】20mL活化柱+500mL缓冲液/盒,附送亲和层析用空柱一支。
【预期用途】快速高效偶联试剂盒适用于亲和层析填料的快速制备以及固相吸附、固定化酶等用途。
【主要组成成份】●预活化琼脂糖凝胶4B●缓冲液【原理】本试剂盒系用优质琼脂糖凝胶 4B活化后存放于保护液中和适合的偶联缓冲液制成,用活性咪唑碳酸酯基团偶联需要的配体。
使用时,保护液被洗去后就可使欲偶联的配体的氨基和活性咪唑碳酸酯反应,脱去咪唑基,使得配体的氨基通过共价键牢固的链接在基质上,即可方便得到高偶联效率的亲和层析填料。
【存储条件和有效期】存储条件:原包装应储存于4-8 C。
密封保存在阴凉干燥处切忌冷冻。
有效期:一年。
【适用仪器】本产品无需特殊仪器辅助使用,只需要在操作时使用抽滤装置帮助抽去洗涤液,以免洗涤时间过长造成偶联效果不理想。
附送的亲和层析空柱可安装适合的接口用于自动纯化仪。
【配体要求】配体溶液的质量至关重要。
配体需溶解于偶联缓冲液中并使得浓度大于15mg/mL,并且浓度越大,偶联效果越好,如已经溶解在其他缓冲液中,可用偶联缓冲液透析平衡。
【偶联方法】方法一:1、预先准备好溶解在偶联缓冲液中的配体(可用直接溶解或透析方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
2、将活化琼脂糖摇匀,倒入抽滤漏斗,加5倍体积的去离子水,抽气至快干时拔掉抽气管,注意不可抽干,此步速度宜快。
3、用配体溶液悬浮抽滤漏斗里的琼脂糖固体,摇床缓慢振荡(不可使用磁力搅拌器),室温3小时或4摄氏度过夜,然后洗净即可。
洗出来的配体可回收使用。
此方法适用于比较昂贵的配体。
方法二:1、用干燥枪头吸去保护剂。
制备配体在溶液B中的溶液(可用直接溶解或透析方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
nhs活化偶联介质(nhsactivatedqzt4ff)产品说明书

活化偶联介质()产品说明书. 产品简介活化偶联介质可用于各种含有氨基的亲和配基(蛋白质、多肽、糖等)的偶联,广泛十分广泛。
活化偶联介质以自制的琼脂糖凝胶为基质,经过一系列的活化、偶联步骤,最终形成活化酯,在温和的条件下就可以偶联各种带氨基的配基。
活化偶联介质具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广的特点。
. 产品特性表*:除基质外,也可以提供、和基质的活化介质。
. 应用活化偶联介质广泛用于各种含有氨基的亲和配基(蛋白质、多肽、糖等)的偶联。
具体的操作步骤如下(以活化胶偶联为例):清洗液:, ,度预冷;偶联缓冲液:, , 。
()准确称取溶于,缓冲液,溶解完全后备用。
()将约活化胶用度预冷的洗次后抽干,再用, 清洗次,抽干后将活化胶(约)加入到的反应器(磨口三角瓶或离心管)中(注意:清洗后应立即使用)。
()将溶液加入到活化胶中,反应温度恒定在℃(或室温℃),摇床中振荡混合(离心管水平放置),转速,反应过夜(或)。
()反应停止后,静置,取上清离心(,,室温),收集上清液用于未偶联的浓度分析(可采用、、法,在有强吸收,不能采用测定蛋白浓度),计算偶联的的配基密度;将其余料液转移到砂芯漏斗中用去离子水清洗、抽干。
()封闭未反应的:将抽干的亲和胶加入到磨口三角瓶中,加入乙醇胺,溶液(或,)。
反应温度恒定在℃(或室温℃),搅拌速度,反应过夜(或)。
反应停止后将料液转移到砂芯漏斗中抽干,用去离子水清洗。
()清洗将制得的琼脂糖凝胶依次用倍的去离子水、含的乙酸乙酸钠缓冲液()、去离子水、含的硼酸四硼酸钠缓冲液()和去离子水充分洗涤(重复交替清洗次),抽干,去除未反应的配基。
()保存制得的亲和介质保存于℃、乙醇溶液中。
备注:其他配基的偶联方法与类似,但反应条件(、温度、时间、配基加入量)需要根据配基的特性和应用的需求进行适当调整。
注意事项:偶联缓冲液可用碳酸盐和磷酸盐等缓冲液,但绝对不能使用含有氨基的等缓冲液。
UniMab

UniMab® 50 HC亲和层析介质产品使用说明书文件编号:NM-W-DF-0302版本号:A1UniMab®50HC层析介质使用说明产品简介在全球医药市场上,抗体药物已连续多年占据销售榜单前几位,其市场竞争也日趋白热化。
降低抗体生产成本是增强市场竞争力的关键因素。
而解决抗体的生产瓶颈关键主要在于改进第一步Protein A 亲和捕获。
为了满足抗体生产企业对亲和层析介质机械强度高、反压低、化学稳定性好和耐碱性强,以及在高流速下仍然保持较高动态吸附载量的需求我们开发了UniMab® 50 HC Protein A 亲和层析介质。
UniMab® 50 HC是纳微科技利用自主专利技术生产的高性能、耐碱型重组Protein A 亲和层析介质,该填料以单分散多孔型聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球为基质,利用专有的表面修饰技术并环氧偶联键合Protein A 制得,适用于单克隆抗体及含有Fc (功能层析)片段的重组蛋白类生物大分子的分离纯化。
UniMab® 50 HC机械强度高、反压低、化学稳定性好、耐碱性强,即使在高流速下仍然能保持较高动态吸附载量,能满足从实验室制备到中试及工业化生产的各种需求。
图1. UniMab® 50 HC亲和层析介质电镜图全新一代的UniMab® 50 HC Protein A 亲和层析介质作为抗体纯化层析介质,在高流速下能保持较高动态吸附载量,是大规模单克隆抗体及含Fc片段重组蛋白亲和纯化的理想选择,有助于降低企业生产成本,相较市场同类产品有如下独特优势:耐受 0.1 到 0.5 M (mol/L) NaOH清洗,寿命长、生产成本低;(b) 单分散均一粒径高强度亲水基质,允许更大操作压力和线性流速;(c) 采用耐碱rProtein A 与独特固定键合技术,更低配基脱落、更强耐碱性;(d) 高流速下具有50 mg/mL(human IgG)高载量,显著优于同类产品,更高的全程载量和更低的非特异性吸附,可以提高生产效率;(e) 最高流速(~800 cm/h)和耐受压力(~0.8 MPa),显著高于同类产品;(f) 不同抗体洗脱条件均一,是抗体纯化工艺平台的理想选择;(g) 洗脱条件更加温和;(h) 装柱容易,批次重现性好。
QuicKey-人转铁蛋白(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)QuicKey-人转铁蛋白(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书QuicKey Human TF (Transferrin) ELISA Kit产品货号:E-TSEL-H000196T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
QuicKey系列与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。
Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。
用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、尿液中TF浓度。
其它相关生物液体请咨询技术支持。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度:0.13ng/mL。
●检测范围:0.14-100ng/mL。
●特异性:可检测样本中的人TF,且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性:板内,板间变异系数均<10%。
背景介绍转铁蛋白(Transferrin, Tf)是一种在血浆中发现的对细胞健康至关重要的铁结合蛋白,它为机体细胞提供天然铁,能作为细胞培养基的补充物。
转铁蛋白从肠道、网状内皮系统和肝实质细胞中携带铁,为体内所有的增殖细胞提供铁。
转铁蛋白与其他四种蛋白质共享同源氨基酸序列,包括乳转铁蛋白、卵转铁蛋白、黑色素瘤抗原p97和hublym1。
抗原p97和转铁蛋白受体基因共同定位在人类3号染色体上。
转铁蛋白的分子量约为80kda,含有两个特异的高亲和力铁(III)结合位点。
转铁蛋白与铁(III)亲和力非常高(缔合常数在pH值7.4时为1020M−1),但将pH值从中性以下降低,其亲和力会逐渐减弱。
当不与铁结合时,转铁蛋白被称为Apo转铁蛋白。
亲和层析柱使用说明

亲和层析柱使用说明货号名称规格说明DS0101亲和层析柱1ml 含1个空管柱,上下盖和2个筛板(亲水性,孔径50um)DS0103亲和层析柱3ml DS0106亲和层析柱6ml DS0110亲和层析柱10ml DS0130亲和层析柱30ml DS0150亲和层析柱50ml一、产品说明亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。
它是利用生物分子间存在很多特异性的相互作用(如抗原和抗体、酶和底物或抑制剂、激素和受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
本公司提供的亲和层析柱工具可应用于如下方面:①纯化重组蛋白;②纯化抗原和抗体;③纯化多肽;④纯化DNA;⑤糖蛋白的纯化;⑥纯化磷酸化蛋白和肽;⑦DNA 结合蛋白的纯化;⑧去除内毒素,等。
亲和层析柱空柱管的材质为医疗级的聚丙烯,这种工程材料通过大量的应用证明具有清洁无毒,不与生物分子结合和低溶解度的优点。
亲和层析柱空柱所用的筛板是选用纯净的UHWM-PE (超高分子量聚乙烯)为原料,经独特的工艺加工而成,具有亲水性。
筛板在装填时安置在填料基质的上下端,以阻挡昂贵的基质渗出。
亲水性筛板采用了领先的亲水性UHWM-PE 生产技术,该筛板能保证使用重力法时的流速为1-2ml/分钟或1-2滴/秒。
同时,该筛板和其它同类产品相比,不会由于亲水性基团的引入而对蛋白质产生吸附。
另外,该亲水性筛板在使用过程中不易形成气泡,气泡会使流速降低,液体通过基质不均匀。
二、产品应用1,抗体纯化纯化抗体一般用Protein A作为纯化的配体,也可以用Protein G或Protein L或异源性抗体作为配体。
2,小分子物质提取(以提取黄曲霉毒素M1为例)试样通过免疫亲和柱时,黄曲霉毒素M1被提取。
亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当样品通过亲和柱时,抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合,形成抗体一抗原复合体。
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快速高效偶联亲和层析介质试剂盒说明书
【产品名称】
通用名称:CDI预活化琼脂糖凝胶4B试剂盒。
商品名称:快速高效偶联试剂盒。
【包装规格】
20mL活化柱+500mL缓冲液/盒,附送亲和层析用空柱一支。
【预期用途】
快速高效偶联试剂盒适用于亲和层析填料的快速制备以及固相吸附、固定化酶等用途。
【主要组成成份】
●预活化琼脂糖凝胶4B
●缓冲液
【原理】
本试剂盒系用优质琼脂糖凝胶4B活化后存放于保护液中和适合的偶联缓冲液制成,用活性咪唑碳酸酯基团偶联需要的配体。
使用时,保护液被洗去后就可使欲偶联的配体的氨基和活性咪唑碳酸酯反应,脱去咪唑基,使得配体的氨基通过共价键牢固的链接在基质上,即可方便得到高偶联效率的亲和层析填料。
【存储条件和有效期】
存储条件:原包装应储存于4-8 C。
密封保存在阴凉干燥处切忌冷冻。
有效期:一年。
【适用仪器】
本产品无需特殊仪器辅助使用,只需要在操作时使用抽滤装置帮助抽去洗涤液,以免洗涤时间过长造成偶联效果不理想。
附送的亲和层析空柱可安装适合的接口用于自动纯化仪。
【配体要求】
配体溶液的质量至关重要。
配体需溶解于偶联缓冲液中并使得浓度大于15mg/mL,并且浓度越大,偶联效果越好,如已经溶解在其他缓冲液中,可用偶联缓冲液透析平衡。
【偶联方法】
方法一:
1、预先准备好溶解在偶联缓冲液中的配体(可用直接溶解或透析
方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
2、将活化琼脂糖摇匀,倒入抽滤漏斗,加5倍体积的去离子水,抽气至快干时拔掉抽气管,注意不可抽干,此步速度宜快。
3、用配体溶液悬浮抽滤漏斗里的琼脂糖固体,摇床缓慢振荡(不可使用磁力搅拌器),室温3小时或4摄氏度过夜,然后洗净即可。
洗出来的配体可回收使用。
此方法适用于比较昂贵的配体。
方法二:
1、用干燥枪头吸去保护剂。
制备配体在溶液B中的溶液(可用直接溶解或透析方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
2、用5倍以上体积配体溶液悬浮抽滤漏斗里的琼脂糖固体,4度摇床缓慢振荡(不可使用磁力搅拌器),过夜后用适当缓冲液洗净即可。
洗出来的配体可回收使用。
此方法适用于比较廉价的配体。
注意:
如果配体不耐高pH条件,可以用1M盐酸调节缓冲液至适合pH。
【装柱】
塑料层析柱
1、将层析柱固定,封闭层析柱下端出口,向柱内充入去离子水,排开层析柱内空气,先将垫片完全浸没于水面下方,在保持水平的状态下,小心推向底部,避免垫片下方滞留气泡。
2、先将介质混匀,打开层析柱下端出口,排出柱中去离子水;在液面低至距垫片1~1.5cm高度时封闭下端出口,用导流棒沿内壁倒入介质或移液枪吸取介质,将介质加入到层析柱中;静置,待介质自
然沉降。
3、从上端管口将另一垫片缓慢推至介质沉降平面,使介质表面保持水平状态,注意避免垫片与介质接触面滞留气泡。
4、若使用一段时间后,如果层析柱流速减慢,可按2)、3)所述步骤重新装柱。
5、注意整个操作过程无气泡。
玻璃层析柱
1、将层析柱洗净后固定;向柱中加入去离子水,排开柱子中的空气,纯水排尽以前,关闭柱子出口,在柱内保留一定高度的去离子水。
2、先将介质混匀,用导流棒沿内壁倒入介质或移液枪吸取介质,将介质加入到层析柱中;静置,待介质自然沉降。
3、从上端管口将转杆出液端缓慢推至介质沉降平面,使介质表面保持水平状态,注意避免转换杆与介质接触面间滞留气泡。
4、在使用一段时间后,如果流速减慢,可先卸下上转换杆,将介质倒出,再取出下转换接头中滤网,清洗或更换后重新装柱。
5、注意整个操作过程无气泡。
【产品性能指标】
本试剂盒具有快速、简便、高效等优点,是一种迅速偶联配体的方法,偶联效率最高可达到50mg/mL(IgG),活化基密度并且没有引入电荷,减少了非特异性吸附,共价化合牢固,不会脱落,特别适用于不耐盐的亲和系统。
独特的免封闭设计,使得合成更高效,回收配体更容易。
图:偶联配体后纯化效果
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1:发酵液2:流窜液3:洗脱液
【注意事项】
1. 抽滤的时候不能抽干,以免影响效果。
2. 活化琼脂糖倒出来后请尽量一次性使用,不要受潮。
3. 操作越快偶联效率越高。
【参考文献】
1.Mallia A K,Hernanson GT,Krohn R I,et al. Preparation and use of a boronic acid affinity support for separation and quantitation of glysocylated hemoglobins.Anal Lett,1981,14(B8):649-661 2.Kuhn N.Activation of molecular oxygen by hemin complexes. Prikl Biokhim Mikrobiol,1982,18(4):489-98
【生产企业】
企业名称:柳州市智萃生物试剂研制中心
企业地址:柳州市雅儒路东四巷182号2楼
邮政编码:545001
销售热线:136********
技术支持:151********。