人类辅助生殖技术课件
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辅助生殖工作通用课件
症）
常见的问题—伦理
(七)伦理监督的原则
1、为确保以上原则的实施，实施人类辅助生殖技术的机构应建立生 殖医学伦理委员会，并接受其指导和监督
2、生殖医学伦理委员会应由医学伦理学、心理学、社会学、法学、 生殖医学、护理学专家和群众代表等组成
3、生殖医学伦理委员会应依据上述原则对人类辅助生殖技术的全过 程和有关研究进行监督，开展生殖医学伦理宣传教育，并对实施中遇到 的伦理问题进行审查、咨询、论证和建议
常见的问题
管理 伦理 女科临床 男科 实验室
常见的问题—伦理
伦 理？
伦理 ≠ 法律 伦理 ≈ 道德 伦理 > 道德
常见的问题—伦理
伦理七项基本原则 （一） 有利于患者的原则（D3天差胚培养到D5天，充分利用患者
的卵子）
（二）知情同意的原则（更改受精方式、D3/D5移植？） （三）保护后代的原则（IVF/ICSI) （四）社会公益的原则（不进行非医学指征的性别选择） （五）保密的原则（供卵？） （六）严防商业化的原则（禁止商业化买卖精子、卵子、严格适应
校验的注意事项
前次校验问 题的整改
整改报告 整改情况的落实
落实的真实性
校验的注意事项
• 前次校验问题的整改
• 建立质量与安全持续改进的体系
• 杜绝超范围实施技术和弄虚作假及违规行为
建立质量与 安全持续改 进的体系
校验的注意事项
校验所要求的时间范围的数据和资料
各项规章制度、SOP、伦理委员会会议 记录等
常见的问题—女科临床
常见问题 减胎的管理：减胎后期并发症的预防、规范化操作流程 人工授精促排卵方案使用比例偏多，部分单纯男科因素 的患者采用了促排卵治疗 Gn用量偏高、OHSS比例偏高 ICSI比例偏高、多胎妊娠率偏高、流产率偏高
常见的问题—伦理
(七)伦理监督的原则
1、为确保以上原则的实施，实施人类辅助生殖技术的机构应建立生 殖医学伦理委员会，并接受其指导和监督
2、生殖医学伦理委员会应由医学伦理学、心理学、社会学、法学、 生殖医学、护理学专家和群众代表等组成
3、生殖医学伦理委员会应依据上述原则对人类辅助生殖技术的全过 程和有关研究进行监督，开展生殖医学伦理宣传教育，并对实施中遇到 的伦理问题进行审查、咨询、论证和建议
常见的问题
管理 伦理 女科临床 男科 实验室
常见的问题—伦理
伦 理？
伦理 ≠ 法律 伦理 ≈ 道德 伦理 > 道德
常见的问题—伦理
伦理七项基本原则 （一） 有利于患者的原则（D3天差胚培养到D5天，充分利用患者
的卵子）
（二）知情同意的原则（更改受精方式、D3/D5移植？） （三）保护后代的原则（IVF/ICSI) （四）社会公益的原则（不进行非医学指征的性别选择） （五）保密的原则（供卵？） （六）严防商业化的原则（禁止商业化买卖精子、卵子、严格适应
校验的注意事项
前次校验问 题的整改
整改报告 整改情况的落实
落实的真实性
校验的注意事项
• 前次校验问题的整改
• 建立质量与安全持续改进的体系
• 杜绝超范围实施技术和弄虚作假及违规行为
建立质量与 安全持续改 进的体系
校验的注意事项
校验所要求的时间范围的数据和资料
各项规章制度、SOP、伦理委员会会议 记录等
常见的问题—女科临床
常见问题 减胎的管理：减胎后期并发症的预防、规范化操作流程 人工授精促排卵方案使用比例偏多，部分单纯男科因素 的患者采用了促排卵治疗 Gn用量偏高、OHSS比例偏高 ICSI比例偏高、多胎妊娠率偏高、流产率偏高
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利用现代分子生物学技术 与显微镜技术，在 受精卵分裂为8细胞时取出1-2个细胞，或在 囊胚形成时取3-10个滋养层细胞进行活检， 进行特定的遗传性状检测。 确定胚胎无遗传病后再进行移植，对优生有 重要意义。
配子输卵管内移植：在开腹或腹腔镜下将渠道 的卵母细胞与处理后的精液一起注入到输卵管 内。适用于输卵管正常的妇女。
辅助生殖技术
(assisted reproductive technique, ART)
1
Hale Waihona Puke 2辅助生殖技术在体外对配子和胚胎采用显微操作技术，帮助不孕夫 妇使其受孕的方法
人工受精（artificial insemination, AI) 夫精人工受精(artificial insemination with
子宫腔内人工受精（intra uterine
将精液洗涤处理后，去除精浆，取0.30.5ml精子悬浮液，在女方排卵期间通过导 管经宫颈管注入宫腔内受精。 人工授精可在自然周期和促排卵周期进行， 在促排卵周期中应控制卵泡数目，以免增加 多胎妊娠发生率。
insemination，IUI)
3
4
AIH适应症
6
体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer) 从不孕妇女体内取出卵细胞，在体外与精子受精 后培养之早期胚胎，然后移植回妇女的子宫，使 其继续着床发育、生长成为胎儿的过程 适应症：女方各种因素导致的配子运输障碍；排 卵障碍；子宫内膜异位症；男方少、弱精子症； 不明原因不育；免疫性不孕
7
8
卵细胞质内单精子注射（ICSI） 在显微操作系统帮助下，在体外直接将精子 注入卵母细胞质内使其受精。 适应症：严重的少、弱、畸精症；不可逆的 梗阻性无精子症；生精功能障碍（排除遗传 缺陷所致）；免疫性不育；体外受精失败； 精子顶体异常；需行植入前胚胎遗传学检查 病例
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• 通过人类辅助生殖技术的定义和分类我们可以看到，无论从人类辅助生 殖技术中的“辅助”还是英文中“assisted”的表述来看，这种技术都 是对人类自然生育方式的弥补或补救措施。人类辅助生殖技术只是解决 不孕不育症患者的生育问题，而不是治疗不孕不育症。 • 第三，人类辅助生殖技术可以解决不孕不育症患者的生育问题，但它不 能解决所有的不孕不育症患者的生育问题。在我国颁布的《卫生部关于 修订人类辅助生殖技术与人类精子库相关技术规范、基本标准和伦理原 则的通知》的附件1中指出无论是人工授精还是体外受精一胚胎移植及 其衍生技术都有其禁忌症，即不能够实施人类辅助生殖技术的条件。 • 例如，对于夫精人工授精的禁忌症：① 男女一方患有生殖泌尿系统急性 感染或性传ห้องสมุดไป่ตู้疾病；②一方患有严重的遗传躯体疾病或精神疾患；③一 方接触致畸量的射线、药品并处于作用期；④一方有吸毒等不良嗜好。 对于供精人工授精的禁忌症：①女方患有生殖泌尿系统急性感染或性传 播疾病；②女方患有严重的遗传躯体疾病或精神疾患；③女方接触致畸 量的射线、药品并处于作用期；④ 女方有吸毒等不良嗜好。对于体外受 精一胚胎移植及其衍生技术的禁忌症是：①男女任何一方患有严重的精 神疾患、泌尿生殖系统急性感染、性传播疾病；②患有《母婴保健法》 规定的不宜生育的、目前无法进行胚胎植入前遗传学诊断的遗传性疾病； ③ 任何一方具有吸毒等严重不良嗜好；④任何一方接触致畸量的射线、 毒物、药品并处于作用期；⑤女方子宫不具备妊娠功能或严重躯体疾病 不能承受妊娠。
四、辅助生殖技术带来的伦理问题
改变了传统的家庭模式
父母身份的多重性
道德的丧失
伦理 问题
精液、卵子和胚胎商品化 非在婚妇女进行人工授精 名人精子库达到“优生”
1、改变了传统的家庭模式
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四、体外受精（In Vitro Fertilization, IVF） 从女性体内取出卵子→在器皿内培养 →加入技术处理后的精子→形成受精卵 →在营养液中继续培养→形成早期胚胎 →移植到母体子宫着床→发育成胎儿 →分娩
罗伯特• 爱德华
1978年7月25日，世界上第一 例试管婴儿 —路易斯∙布朗诞 生。2004年7月25日将欢度她 的24岁生日
第九章 现代人工生殖技术
Modern Technology of Artificial Reproduction
第一节
人工生殖技术概述
一、人工生殖技术的概念
人工生殖技术，又称人类辅助生殖技术，是指 利用现代医学的最新成果用人工的手段代替自 然生殖过程的一部分或者全部的技术。
关键词： 人工手段
代替
自然生殖
（三）AID的法律问题 1．夫妻关系的问题
案例
1998年12月29日，美国纽约市理查德夫妇（双方均为白人）经过人 工授精生下了一对双胞胎，但令人意外的是这对双胞胎中一个是白人 一个是黑人。白人夫妇怎么会生出来一个黑人小孩呢？原来医院在给 理查德夫妇作人工授精的同时还为一对名叫罗杰斯的黑人夫妇做过手 术，但是术后罗杰斯夫人并没有怀孕。经过DNA测试，医生告诉唐娜 （理查德夫人）可能把罗杰斯夫妇的受精卵植入了她的子宫。听到这 个消息的唐娜尽管觉得意外，但还是决定把孩子生下来。尽管一对孪 生兄弟黑白分明，但理查德夫妇还是格外高兴，没有对两个孩子区别 对待，而是把他们都看成是自己的亲生骨肉。但当罗杰斯夫妇得知自 己的孩子要别人生养时，决定要回自己的儿子。1999年3月16日，他 们将理查德夫妇和三位医生告上了法庭。起初，理查德夫妇拒绝应诉， 经过法庭反复辩论，案情发生了戏剧性变化，理查德夫妇在一份书面 声明中说：“假如通过DNA鉴定，罗杰斯夫妇的确是孩子生物学上的 父母，我们决定交出孩子。因为我们爱他，一切从孩子的最佳利益出 发。但是我们有权探视孩子，让孩子长大后知道他还有个孪生兄弟。” 罗杰斯夫妇听到这个消息兴奋不已，同意理查德夫妇有权利和责任去 探视孩子，并可以优先享有孩子的福利待遇。
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前景
• 理论上讲，凡能诊断的遗传病，应该都能通过PGD防止其传递， 但限于目前的技术条件，PGD的适应证还有一定的局限。但随着 分子生物技术的发展和更多遗传病基因被确定，一些准确、安全 的遗传诊断技术会不断出现，PGD技术会日趋完善。
五、赠卵IVF-ET
• 适应证 （1）卵巢功能衰竭或无卵巢 （2）女方有遗传性疾病或染色体异常
授精
• 术前对女方的排卵监测、选在排卵前48h至排卵后12h之间进行。 • 授精部位目前常用的是将精子注入宫颈 • 严格无菌措施下注入宫腔。
二、体外受精-胚胎移植（IVF-ET）
• 从母体取出的卵子置于培养皿内，加入经优选诱导获能处理的精 子，使精卵在体外受精，并发育成前期胚胎后移植回母体子宫内， 经妊娠后分娩婴儿。由于胚胎最初2天在试管内发育，所以又叫 试管婴儿技术。
两个重要环节
• 须将受者和供者的月经周期调整同步 • 维持妊娠。
六、代孕
• 用于子宫切除术后或子宫破裂及子宫严重粘连患者。代孕技术原 理与供卵IVF-ET相同、但供卵者为患者，受者为代孕者。因观念 意识原因、国内目前对此技术尚未认同。
伦理原则
• 有利于患者 • 知情同意 • 保护后代 • 社会公益 • 保密 • 严防商业化 • 伦理监督
精子优化获能
• 受精前精子都须进行优选诱导获能处理，其作用是去除含有抑制 与影响受精成分的精浆，激活诱导精子获能 。 • 自然受精中，精子是在穿过宫颈粘液及在输卵管内停留等候卵子 的过程中获能
临床处理
采用离心洗涤和使用成分相似于输卵管液的授精培养液培养相 结合的方法完成 • 上游法： 正常者，方法简单，回收率低 • 梯度离心法: 少、弱精症，可回收不同活力的精子
• 流产 • 宫外孕 • 多胎妊娠 • 卵巢过度刺激综合症（OHSS）。
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五、常用的人工授精技术
1、宫颈内人工授精
将精液原液注入宫颈外口或宫颈管内。是一种简便、 方便和安全的人工授精方法。该方式多用于供精人工授精 和性交障碍的不孕夫妇， 2、宫腔内人工授精 最常用 将洗涤后的精子注射到子宫腔内。可克服精子运输到 受精部位的影响因素如阴道酸度、宫颈粘液的理化性状及 ASAB等对精子穿透的阻碍。 宫腔内人工授精与控制性诱导排卵可明显提高临床妊 娠率。
（二）供精人工授精
( AID)
1 、适应症 （1）不可逆的无精症、严重的少精、弱精症和畸精症。 （2）输精管复通术失败 （3）射精障碍 （4）男方和（或）家族有不宜生育的严重遗传性疾病 （5）母婴血型不合不能得到存活的新生儿
2、禁忌症
（1）女方患有生殖泌尿系统急性感染或性传播疾病。
（2）女方患有严重的遗传、躯体疾病或精神心理疾患。 （3）女方接触致畸量的射线、毒物、药物并处于作用期。 （4）女方有吸毒等严重不良嗜好 .
取卵 最常用的取卵方式是在的局部麻醉下，经阴道B超引 导，将取卵针穿过阴道穹窿，直达卵巢吸取卵子，并立即在显 微镜下将卵子移到含胚胎培养液的培养皿中，臵37 °C的培养 箱中培养。 取精： 精子取出的时间与取卵的日子为同一天。取精前洗净 双手，用自慰法留取精液。所给的小杯是无菌的，留取时不要 触摸杯缘及杯内。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度 离心法处理。
根据授精部位不同可分为：
阴道内人工授精
宫颈内人工授精★
宫腔内人工授精★ ★ 输卵管内人工授精
二、人工授精的原理和条件
原理：通过人工的方法帮助精子穿越宫颈粘液的屏障，增加
女性生殖管道内精子的数量、活力，克服影响精子到达受精 部位的因素，增加受孕的机会。
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第一节 辅助生殖技术概述
辅助生殖技术广义的包括各种帮助不孕
患者妊娠的技术，而狭义的只包括对卵 子进行操作的技术。
一、体外受精与胚胎移植 二、从体外受精与胚胎移植派生的技术 三、显微受精
四、辅助生殖技术新进展
体外受精与胚胎移植
体外受精与胚胎移植（IVF—ET）是不依
赖于外科输卵管手术的实验室技术，是 现代人类新的助孕措施中最基本的技术， 涉及生殖内分泌、胚胎、遗传等多个基 础学科。经IVF—ET出生的婴儿即所谓试 管婴儿。1978年世界第一例试管婴儿在 英国诞生。
一体外受精与胚胎移植二从体外受精与胚胎移植派生的技术三显微受精四辅助生殖技术新进展体外受精与胚胎移植ivfet是不依赖于外科输卵管手术的实验室技术是现代人类新的助孕措施中最基本的技术涉及生殖内分泌胚胎遗传等多个基础学科
辅助生殖技术与妊娠
近20年来，辅助生殖技术（ART）发展迅速，
使不孕症的治疗不断革新。但经ART治疗获得 的妊娠结果不同于自然妊娠，故也给围产医学 带来新的内容，如经ART妊娠者的流产率、异 位妊娠率较高，多胎妊娠明显增加，孕妇易发 生妊娠期并发症，围产期胎、婴儿发病率及死 亡率升高。
•
• •
2.取卵
3.精液处理 4.体外受精与培养 5.胚胎移植 6.移植后处理
IVF—ET新技术
1、冻融胚胎移植 冻融胚胎移植可用于： (1)、对有可能发生严重卵巢过度刺激综 合征的患者，在IVF治疗周期不移植， 将胚胎冷冻保存，在以后的自然周期移 植；(2)、治疗周期子宫内膜生长发育不 良；(3)、本次胚胎移植时移植管插入宫 腔非常困难；(4)、胚胎活检后需等待诊 断结果，或需排除供配子者人类免疫缺 陷病毒（HIV）感染。
三、显微受精
辅助生殖技术人工授精培训课件
辅助生殖技术人工授精
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AIH的适应症(二）
女方
✓ 宫颈粘液分泌异常： ✓ 生殖道畸形：双阴道、双子宫、阴道纵隔 ✓ 心理因素导致性交不能 ✓ 免疫性不育 • 男方抗精子抗体阳性：男方血清或精液中存在着自身免疫性抗精子抗体 • 女方抗精子抗体阳性：女方宫颈粘液中存在抗精子抗体（对女方血液中
存在抗精子抗体者效果不大，其治疗价值尚有争议）
辅助生殖技术人工授精
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AI的授精方法
ICI
IUI
辅助生殖技术人工授精
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IUI时精液标本的制备
• 洗精的目的：去除精浆、细菌和可能存在的炎症细胞、
AsAb，提高精子活力
• 洗精的方法：
1）上游法 2）Percoll 梯度离心法：分为单层和双层两种
辅助生殖技术人工授精
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IUI－SO(intrauterine insemination in superovulated cycle) 的优点
辅助生殖技术人工授精
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授精时机的选择
授精的最佳时间:女方围排卵期,指排卵前、排卵期和排卵后， 大约3-4天。
围排卵期的确定：月经周期 BBT记录曲线 宫颈黏液观察、宫颈口扩张度 B超监测卵泡及子宫内膜发育情况 尿LH、血E2改变
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月经周期
• 正常月经周期平均为28天；
月经稀发： 月经周期过短：
性聋哑、神经纤维瘤、精神分裂症、急慢性活动性肝炎
➢ 接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期
➢ 女方有酗酒、吸烟等不良嗜好
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各因素导致的配子运输障碍
辅助生殖技术人工授精
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AID病人的术前准备与处理
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主要方法
• • • • • • 人工授精 （ AI） 体外受精-胚胎移植（IVF-ET） 卵泡浆内单精子显微注射（ICSI） 胚胎植入前遗传学诊断（PGD） 赠卵IVF-ET 代孕
一、人工受精分类和适应症
• 夫精人工授精（AIH） （1）性交障碍 （2）精子在女性生殖道内运行障碍 （3）少、弱精症 • 供精（非配偶）人工授精（AID） （1）无精症 （2）男方有遗传疾病 （3）夫妻间特殊性血型或免疫不相容
IVF-ET的建立
• 1959年与科学家Pincus合作研究中，果然成功地 实现了兔子的体外受精和胚胎移植，为人类IVFET的建立奠定了基础。 • 1970年，英国胚胎学家Edwards与妇产科医生 Steptoe合作，开始了人类的体外受精与胚胎移植 研究。 • 1977年，他们取出因输卵管阻塞不育的患者 Lesley的卵子与丈夫的精子行体外授精后，将发 育的胚胎移植回Lesley的子宫内。 • 1978年7月25日，Lesley终于分娩了世界上第一 例试管婴儿Louise Brown。至此人类IVF-ET技术 正式建立。
前景
• 理论上讲，凡能诊断的遗传病，应该都能 通过PGD防止其传递，但限于目前的技术 条件，PGD的适应证还有一定的局限。但 随着分子生物技术的发展和更多遗传病基 因被确定，一些准确、安全的遗传诊断技 术会不断出现，PGD技术会日趋完善。
五、赠卵IVF-ET
• 适应证 （1）卵巢功能衰竭或无卵巢 （2）女方有遗传性疾病或染色体异常
操作过程
• 选择一个形态正常，缓慢运动的精子先予 以制动 • 注射针挤压精子尾部，稍微擦破细胞质膜 ，诱导精子从擦破点释放精子细胞质体因 子激活卵细胞 • 按尾先头后的顺序吸精子放入注射针，再 通过显微操作，将精子注入卵胞浆内，即 完成受精
适应证
• • • • • • 严重少、弱畸精症 输精管阻塞 先天性双侧输精管缺如 输精管结扎后子女伤亡 吻合输精管失败或无法吻合者 精道不通的患者可进行附睾穿刺，如吸出 物中无精子，则从睾丸取活组织分离精子 ，或取精细胞激活后使用
适应证
• 输卵管堵塞 • 子宫内膜异位伴盆腔内粘连或输卵管异常 ，使精子在盆腔内被巨嗜细胞吞噬。 • 男性轻度少精、弱精症。 • 免疫性不育、抗精子抗体阳性。 • 原因不明的不育。
临床处理
• • • • • • 控制性超排卵与卵泡监测 取卵 体外授精 胚胎移植 胚胎冻融 胚胎移植后监测
胚胎移植合并症
四、胚胎植入前遗传学诊断（PGD ）
• 胚胎植入前遗传学诊 断(Preimplantation genetic diagnosis )也 称第三代试管婴儿， 指在IVF-ET的胚胎移 植前，取胚胎的遗传 物质进行分析，诊断 是否有异常，筛选健 康胚胎移植，防止遗 传病传递的方法 .
检测方法
• 聚合酶链反应（PCR） 检测男女性别和单基因遗传病 • 荧光原位杂交（FISH） 检测性别和染色体病
人类辅助生殖技术
周 强
人类辅助生殖技术
• 人类辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technology，ART）的简称，指采用医疗 辅助手段使不育夫妇妊娠的技术，包括人 工授精（Artificial Insemination，AI）和体 外受精-胚胎移植（In Vitro Fertilization and Embryo Transfer，IVF-ET）及其衍生技术 。
授精
• 术前对女方的排卵监测、选在排卵前48h至 排卵后12h之间进行。 • 授精部位目前常用的是将精子注入宫颈 • 严格无菌措施下注入宫腔。
二、体外受精-胚胎移植（IVF-ET ）
• 从母体取出的卵子置于培养皿内，加入经 优选诱导获能处理的精子，使精卵在体外 受精，并发育成前期胚胎后移植回母体子 宫内，经妊娠后分娩婴儿。由于胚胎最初2 天在试管内发育，所以又叫试管婴儿技术 。
精子优化获能
• 受精前精子都须进行优选诱导获能处理， 其作用是去除含有抑制与影响受精成分的 精浆，激活诱导精子获能 。 • 自然受精中，精子是在穿过宫颈粘液及在 输卵管内停留等候卵子的过程中获能
临床处理
采用离心洗涤和使用成分相似于输卵管液 的授精培养液培养相结合的方法完成 • 上游法： 正常者，方法简单，回收率低 • 梯度离心法: 少、弱精症，可回收不同活力的精子
两个重要节
• 须将受者和供者的月经周期调整同步
• 维持妊娠。
六、代孕
• 用于子宫切除术后或子宫破裂及子宫严重 粘连患者。代孕技术原理与供卵IVF-ET相 同、但供卵者为患者，受者为代孕者。因 观念意识原因、国内目前对此技术尚未认 同。
伦理原则
• • • • • • • 有利于患者 知情同意 保护后代 社会公益 保密 严防商业化 伦理监督
• • • • 流产 宫外孕 多胎妊娠 卵巢过度刺激综合症（OHSS）。
妊娠率
• 目前为25%～35%。随着对影响妊娠成功 因素的深入研究和相应技术环节的改进， 预期IVF-ET妊娠率还会提高。
三、卵泡浆内单精子显微注射（ICSI ）
• 这一技术是在针对男性精子数量不足，功 能异常导致受精障碍所采取的体外受精的 微滴法、透明带部分切除法及透明带下授 精等方法基础上发展起来的。 • 1992年Palerme等报道了用该技术授精的首 例试管婴儿诞生。 • 第二代试管婴儿
谢谢！