常见的三种生物切片法
常见生物玻片标本种类和制作过程
常见生物玻片标本种类和制作过程：材料种类制作 生物材料，载玻片（长方形），盖玻片（正方形 切片 切片是用从生物体上直接切取的薄片制成的，可用切片机切取或用徒手切片法切取 涂片 用涂抹的方法，将动植物较为疏松的组织或游离的细胞均匀地散布在载玻片上装片 用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成，或直接用个体微小的生物制成特别提醒：①制作三种玻片的共同要求是所观察材料必须是薄而透明的，最好是一层细胞，特别微小的生物可直接做成玻片标本。
②三种玻片按保存时间的长短可分为临时和永久两大类。
③染色剂对细胞具有毒害作用，因此，制作生物玻片时尽量不染色，在材料各结构对比度较弱的情况下尽量使用毒害作用较小的染色剂。
洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的制作：（1）擦：用洁净的纱布吧载玻片和盖玻片擦拭干净（2）滴：把载玻片放在试验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水制作临时装片（3）撕：用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取内表皮，把其浸入载玻片上的水滴中，用镊子展平（4）盖：用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓放下，盖在要观察的材料上，避免出现气泡。
（5）染：滴一滴碘液在盖玻片的一侧，用吸水纸从盖玻片的令一侧吸引，使染液浸润标本的全部。
特别提醒：①去除装片中气泡的方法：可用滴水引流法或镊子挤压法去除气泡。
②区分细胞和气泡：气泡在视野中是圆形或椭圆形，有黑而粗的边缘，用镊子或解剖针按压盖玻片。
气泡会变形、移动，而植物细胞不会变形，也不会移动。
切片，涂片，装片的辨析：用显微镜观察生物标本时要先做成玻片。
生物玻片根据制作方法可分为切片、涂片、装片三种，这三种玻片根据保存时间长短不同可分为两类，即永久性的和临时性的。
它们的相同之处是被观察的材料必须簿而透明，生物玻片无论从概念上还是从制作上都比较易混淆，需注意区分。
辽宁中学教学用实验切片种类
辽宁中学教学用实验切片种类辽宁中学教学用实验切片种类实验切片是生物学、医学等领域中常见的一种研究方法。
在教学中，实验切片也是非常重要的一种教学手段。
辽宁中学在教学过程中，采用了多种实验切片，以帮助学生更好地理解和掌握知识。
下面将介绍辽宁中学教学用实验切片的种类。
一、植物组织切片1.根尖组织切片根尖组织是植物根部最末端的一部分，主要包括根毛、根冠和分生组织等。
通过观察根尖组织切片，可以了解植物的生长方式、营养吸收和水分利用等方面的知识。
2.茎叶组织切片茎叶组织是植物体内负责光合作用和物质输送的部分。
通过观察茎叶组织切片，可以了解植物体内各个器官之间的联系和作用。
二、动物组织切片1.肌肉组织切片肌肉是动物体内最重要的组织之一，主要负责运动和保护内脏器官。
通过观察肌肉组织切片，可以了解肌肉的结构和功能。
2.神经组织切片神经组织是动物体内最为复杂的一种组织，主要负责信息传递和调节。
通过观察神经组织切片，可以了解神经元的结构和功能。
三、微生物切片1.细菌切片细菌是一种微小的单细胞生物，广泛存在于自然界中。
通过观察细菌切片，可以了解其形态、结构和生活习性等方面的知识。
2.病毒切片病毒是一种非常微小的生物体，只能在宿主细胞内进行复制。
通过观察病毒切片，可以了解其形态、结构和感染方式等方面的知识。
四、其他实验切片1.化石切片化石是古生物学中非常重要的一种证据。
通过观察化石切片，可以了解古生物学中各个时期的生物群落和地质环境等方面的知识。
2.晶体切片晶体是一种具有特殊结构的物质，广泛存在于自然界中。
通过观察晶体切片，可以了解其结构和性质等方面的知识。
总结：实验切片是一种非常重要的教学手段，在辽宁中学教学中得到了广泛应用。
通过观察不同类型的实验切片，可以帮助学生更好地理解和掌握知识，提高他们的科学素养和实验能力。
河北中学生物实验切片制作方法
河北中学生物实验切片制作方法
河北中学生物实验切片制作方法
河北中学生物实验切片是利用生物体内部组织，在鑽切或其它方式下取出一块，利用显微镜配合染色技术，可以观察细胞及组织结构的可视化技术。
由于可以大量研究物种之间的结构差异，因此，这种技术被广泛应用于科学研究中。
以下主要介绍河北中学生物实验切片制作方法：
一、样品处理
确定样品的主要成分，选择合适的溶剂，用氨基酸清洗，根据样品的特性，可以直接均质或采用其他方法。
二、样品定形
确定最佳切片厚度，力学特性定形，或者使用电钻刀实现样品定形。
三、染色处理
确定染色和清洗技术，合适的染色液（或染色试剂）浸渍样品后，按洗涤顺序进行清洗，在确定的光激发下染色，具体操作可参考实验室中提供的操作守则。
四、观察分析
使用高倍显微镜观察切片表面的组织和结构，或电镜在细胞隔壁结构上有更好的观察结果，并进行细胞和组织结构分析，以便研究切片表面细胞和细胞结构的微观结构特征。
以上就是河北中学生物实验切片制作方法的简单介绍，执行切片技术的前提是要有良好的实验设备，以及系统的实验步骤，这些步骤需要一定的科学性和规范性，实验操作者也应有一定的理论基础，否则制备的切片将影响最终结论的准确性。
中学生物教学实验切片种类
中学生物教学实验切片种类
中学生物教学是一门十分重要的学科，为了更好地掌握该学科的知识，实验切片是必
不可少的一部分。
切片是一种用来查看器官细胞结构的实验手段，可以清楚地显示细胞结构、组织结构和细胞内结构等。
目前，市面上常见的中学生物教学实验切片种类有多种，其中，植物切片包括植物叶片、茎细胞切片、植物细胞壁切片等；动物切片则包括被褐虫、蝌蚪、青蛙、马尾松仔鱼、青蛙肝脏等；海洋生物切片则有海绵、海葵、海豹、海星等。
此外，为了更好地掌握中学生物的知识，还可以使用模拟切片，例如植物细胞模拟切片、动物细胞模拟切片等，这些模拟切片可以更好地模拟细胞结构，有助于学生更好地理
解细胞结构。
总之，中学生物教学实验切片种类繁多，包括植物切片、动物切片、海洋生物切片等，此外，还可以使用模拟切片，有助于学生更好地理解细胞结构。
实验植物细胞切片的制作
9）封片：将载玻片自二甲苯中取出，立 即滴一滴用二甲苯溶解的加拿大树胶于 材料之上，加盖盖玻片。置玻片标本于 烘箱中烘干即可。
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1、显微镜、尖嘴镊子、刀片、载玻片 、盖玻片、吸水纸、解剖针、纱布、 碘液。
2、蚕豆（芹菜）茎和叶
3、洋葱或玉米根尖纵切永久制片
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三、内容与方法
（一）临时切片制作
１、徒手切片法（重点） ２、整体装片 适合于植物体形小而扁
平的材料。如菌丝、孢子束、藓类。
３、涂抹法 用于极小的植物体或组织。
选取待观察的植物材料，初步 切取大约3cm长的小块，再依切片 的具体要求，将组织块修整为 0.5cm的材料块。
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2、切片
1）以左手夹住材料，用右手平稳地握住刀 片。
2）使刀片与材料的断面保持平行，刀口自 左上方斜向右下方，动作要均匀有力。
3）材料与刀片须常以水湿润。 4）切下的薄片，立即用毛笔蘸水后粘取，
4）番红复染色：400 ml 1%番红酒精（水 液）再染色2h。回收染液， 并用自来水 洗去多余的染液。
5）继续脱水：用30%、50%和70%酒精 400 ml各处理30s～1 min，并回收各液 。
6）固绿复染：用0.1%固绿的95%酒精 24/11/26
7）再继续脱水：用95%酒精和两次纯酒 精彻底脱水，每次10 s～1 min，回收各 液。
2）切片：调整切片机的切片厚度为8～14 μm,
切取石蜡块薄片。 2024/11/26
4、粘贴展平
选取洁净的载玻片，于中央用火柴棒粘取明
植物组织切片
浸蜡
• 使石蜡慢慢溶于透明剂中，然后完全取代 透明剂进人植物组织中。一般将透明好的 材料换入新的二甲苯中，然后加入等体积 的碎蜡，置于40℃左右的温箱中。随着碎 蜡的溶解，不断加入碎蜡使石蜡饱和为止。 时间大约l~2天。
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包埋
• 浸蜡后，在60℃的温箱中，换两次已溶解 的纯蜡，每次约2h。然后将材料和石蜡一 起倒人小纸盒中，用加热的镊子迅速把材 料按需要的切面和一定的间隔排列整齐， 再将小纸盒平放于冷水中，使其很快凝固。
植物组织永久制片
• 一、徒手切片法 • 二、滑走切片法 • 三、离析法 • 四、压片法 • 五、石蜡切片法 • 六、冰冻切片法
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石蜡切片法
石蜡切片法是用石蜡作为包埋剂的一 种显微制片方法，是显微技术中最重要最 常用的方法之一。它的优点是能够切出薄 而均匀的连续切片，便于进行器官的三维 重构。此法多用手摇切片机切片。对于较 硬的材料，也可以使用滑走切片机。 石蜡切片法的操作程序包括：取材、固定、 脱水、透明、浸蜡、包埋、修块、切片、 粘片、染色和封片。
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修快和切片
• 按需要的切面将蜡块切成梯形，切面在梯 形的上部，注意上部矩形的对边平行。
• 用手摇切片机将蜡块切成连续的蜡带。切 片时，把切片刀夹在刀架上，再把木块夹 在固定装置上，调整固着位置，使材料的 切与面刀口平行。然后调整厚度，转动切 片机切片。
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粘片
• 粘片是将切好的蜡片粘在载玻片上。在洁 净的载玻片上，加少许粘贴剂并涂匀。代表性的目标材料，洗 净。用锋利的双面刀片截取材料，动作要 迅速。材料的大小不超过0.5~lcm3。
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固定
• 将选取的材料放人固定液中，固定液的体积大约 是材料的20倍。固定是用化学试剂迅速杀死细胞 的过程。目的是尽可能使细胞中的各个组分保持 生活状态的结构，并固定在它们原来的位置上。 常用的固定剂有：FAA 、卡诺和纳瓦兴固定液。 【FAA是Formalin-Aceto-Alcohol（福尔马林-乙酸 -乙醇）混合液的缩写，配法：50%或70%酒精90 毫升, 冰醋酸 5毫升, 福尔马林, 5毫升。柔软材料 用50%酒精，坚硬材料用70%酒精配制。】
生物制片技术
盐酸酒精分化 15秒
0.5%伊红染色 1 二甲苯I 5分钟 分钟 二甲苯II 5分钟 自来水洗（镜检） 95%酒精I 5分钟 自来水洗 15分 钟
14.封片 自二甲苯中取出切片，放在格板内，滴少量 的树胶于组织片中央。 取一盖玻片，轻轻以盖玻片的一边接近载玻 片，然后迅速放下盖玻片，树胶即迅速扩张 到四周，校正好盖玻片方向。将封好的切片 放置在恒温箱中干燥。 最后，将干燥好的切片上的浮色擦净，并在 玻片的左端粘上标签，注明组织切片的名称、 染色方法、固定方法、年月日。
2.固定 用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜 材料，迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、 终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变 化，尽可能保持其活体时的结构。 固定能使组织硬化，有利于切片的进行，而且也有 媒浸作用，有利于组织着色。
3.冲洗 固定后的组织材料需除去留在组织内的固定液 及其结晶沉淀，否则会影响以后的染色效果。 多数用流水冲洗；使用含有苦味酸的固定液固 定的则需用酒精多次浸洗；如果组织经酒精或 酒精混合液固定，则不必洗涤，可直接进行脱 水。
（二）非切片法
1.非切片法分类 整体封片法 涂片法
展片法（铺片法）
磨片法 离散法（渍撕散法）
2.非切片法的制片步骤 固定
冲洗（必要时）
整体染色 分化与退染 脱水 透明 封藏
第二讲 取材和固定
一 取材
1.动物选择 组织材料的选择非常重要，一般必须根据 教学或科研的目的和要求确定。 组织切片以人的材料最好但局限性大，不 过一些特殊的结构动物的比人的更具有代 表性。
3.胆囊：
应先将胆囊与肝脏分离，用无齿镊子夹起胆囊，从一 侧将胆囊剪开，倒掉胆汁，用生理盐水充分洗干净。 取材时不要取贴附于肝脏的一面，可在游离面胆囊的 体部做一纵切面，以被膜面附贴于滤纸上再行固定。 另法：亦可直接在胆囊游离面的体部取材，取下胆囊 立即附贴于滤纸再置于生理盐水中充分洗去胆汁，然 后投入固定液固定，注意不要让镊子损伤胆囊粘膜。 4.胰腺 一般取胰腺的尾部做横切面，因胰尾含胰岛较多，便 于做胰岛细胞的特色染色研究，取材时应注意将胰腺 周围的脂肪组织去掉，以免影响胰组织的固定，胰腺 有各种消化酶，动物死后易于自溶，取材操作要快， 保持新鲜，组织切取要小，以免发生组织自溶变性。
重要 动物组织切片制作技术
脂无作用，渗透力较弱，很少单独使用，固定后
收缩明显，用含苦味酸的固定液固定组织一般不
宜超过24小时。
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（5）重铬酸钾：其穿透速度快，对组织收缩小并
稍有膨胀，重铬酸钾常备水溶液为3-5%。其混合 固定液，如Zenker液、Helly液及Regaud液等被 广泛用于组织学，凡经重铬酸钾、铬酸、铬酸盐 固定的组织，必须以流水冲洗后方能转入脱水剂。
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（四）、固定液
1、固定液种类：一类是单纯固定液，即只有一种
试剂；另一类是混合固定液，由两种或两种以上试
剂组成。 作为较好的固定液，应有下列特性，首先，有 强渗透力，能迅速的渗入组织内部；其次，不使组 织过渡收缩或膨胀，并能使组织内欲观察的成分得 以凝固为不溶性物质；最后，能使组织达到一定的 硬度并获得较佳的折光率和对某些染料具有较强的
一般厚度约 5mm 的实质性器官，总的浸蜡时间约 2-
3h，均在恒温箱内进行。较理想的的浸蜡温度是石
蜡刚溶化的温度，或在蜡杯底部尚残留一小部分未 熔完蜡时的温度，浸蜡完成后，即做成包有组织的 蜡块。包埋蜡块的器材有专用的包埋框，也有自己 制作的包埋盒，只要是具有一定形状的容器，我们
都可以把它用作包埋盒。包埋的具体过程详述。
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4、使组织块在脱水、包埋、切片、染色等过程 中不易损坏。 5、使不同组织成分对染料有不同的亲和力，经 染色处理后易于辨认。 6、防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有形态 结构。
7、使组织块硬化，便于制作薄片。
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（三）、注意事项及影响固定的因素
1、组织块不易过大，一般以厚度5mm，长宽不超过
15×15mm。 2、固定液的量一般以组织块大小的20倍为宜。 3、必须选择渗透力强，又不使组织过渡收缩或膨 胀的试剂作为固定液。 4、有的固定剂是由氧化剂与还原剂混合而成，如 甲醛（还原剂）与重铬酸钾（氧化剂）混合成的 Helly液等。
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常见的三种生物切片法
常见的生物切片发有三种，徒手切片法、石蜡切片法、火棉胶切片法：
1、徒手切片法
徒手切片法简单省时，容易掌握，虽有一定局限性，但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法。
徒手切片分选材、持物、切片、取片、选片和装片等步骤。
2、石蜡切片法
石蜡切片法所使用的支持剂是石蜡，优点是切下的片子薄而匀，还能作连续切片，但制作手续较复杂，具体可分为固定、冲洗、脱水、染色、浸蜡、切片、透明和封藏八步进行操作。
3、火棉胶切片法
火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。
这种方法的优点是包埋过程不经高温，可以避免组织收缩及变脆，适用精细材料(如脑)的切片，也因火棉胶有韧性，切片不致有折卷或破裂，适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片。