三聚氰胺的快速检测方法
三聚氰胺的检测液相法
03
三聚氰胺的液相色谱检测方 法
样品前处理
样品收集
衍生化处理
采集具有代表性的样品，如奶粉、牛 奶等。
对于某些不易检测的物质，需要进行 衍生化处理，以提高检测灵敏度。
样品制备
将样品进行稀释、过滤、离心等操作， 以去除杂质并获得清澈的溶液。
色谱柱的选择
选择合适的色谱柱
根据三聚氰胺的性质，选择适合的色 谱柱，如C18准溶液和样品溶液， 进行高效液相色谱分析。
1. 样品处理
将样品进行预处理，提取出三 聚氰胺。
3. 色谱条件设置
设置流动相比例、流速、检测 波长等参数。
5. 记录数据
记录色谱图和峰面积数据。
结果分析
数据处理
将峰面积数据与标准曲线进行对比，计算出 样品中三聚氰胺的含量。
结果判断
需要专业操作人员
液相色谱法需要专业的操作人员，以确保检测结果的 准确性和可靠性。
三聚氰胺的液相色谱检测法的未来发展
联用技术
将液相色谱法与其他技术如质谱 法联用，可以实现更快速、准确 的三聚氰胺检测。
自动化和智能化
随着技术的发展，未来液相色谱 法可能会实现更高程度的自动化 和智能化，提高检测效率。
新技术的应用
三聚氰胺的检测液相法
目录
• 引言 • 液相色谱法基础 • 三聚氰胺的液相色谱检测方法 • 实验过程与结果分析 • 结论
01
引言
目的和背景
目的
液相色谱法是一种高效、高分辨率的分离技术，用于检测复杂样品中的三聚氰胺 。该方法旨在提供准确、可靠的测定结果，以满足食品安全和质量控制的要求。
背景
三聚氰胺是一种有毒的工业化学品，被非法添加到食品中以增加其蛋白含量。由 于其对人类健康的严重危害，检测食品中三聚氰胺的存在变得至关重要。液相色 谱法因其高灵敏度和特异性而被广泛应用于三聚氰胺的检测。
牛乳中三聚氰胺的快速检测
2007年3月, 美国发生多起因 年 月 食用宠物食品而导致幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾 结石病症的严重事件。两起 结石病症的严重事件。 事件的原因都是在食品或饲 料中非法添加大剂量三聚氰 料中非法添加大剂量三聚氰 因此, 胺。因此 如何快速准确的 分析食品和饲料中的三聚氰 胺成为食品企业、食品管理 胺成为食品企业、 机构和广大消费者密切关注 的问题。 的问题。
使用步骤】 【使用步骤】 1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待 、在进行测试前先完整阅读使用说明书， 检样本恢复至室温。 检样本恢复至室温。 2、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。 、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。 3、将检测卡平放，用移液器或滴管吸取稀释后的待检样品溶液， 、将检测卡平放，用移液器或滴管吸取稀释后的待检样品溶液， 垂直滴加3~4 滴（约80µl）于加样孔中，加样后开始计时。 垂直滴加 ）于加样孔中，加样后开始计时。 4、检测结果应在 分钟读取， 、检测结果应在3~5分钟读取，其他时间判读无效，根据示意 分钟读取 其他时间判读无效， 图判定结果。 图判定结果。
【注意事项】 注意事项】 1、检测卡请在保质期内一次性使用； 、检测卡请在保质期内一次性使用； 2、使用前将检测卡和待检样本恢复至温； 、使用前将检测卡和待检样本恢复至温； 3、如果样品偏酸或偏碱，需要调节 、如果样品偏酸或偏碱，需要调节pH 至 中性后再检测； 中性后再检测； 4、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面； 、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面； 5、样品滴管不可混用，以免交叉污染； 、样品滴管不可混用，以免交叉污染；
【产品组成】 产品组成】 三聚氰胺免疫胶体金快速检测卡 样品稀释离心管（ 管 样品稀释离心管（1管 / 份，内 含样品稀释液） 含样品稀释液） 滴管（2个 / 份） 滴管（ 个 干燥剂（ 片 干燥剂（1片 / 袋）
三聚氰胺检测步骤
三聚氰胺检测步骤1药品配制1.1三氯乙酸溶液（1％）：10克三氯乙酸于1L容量瓶中。
1.2氨化甲醇溶液（5％）：5ML氨水和95ML甲醇，混匀备用．1.3流动相：离子对试剂缓冲液：乙腈= 9:1 1.4离子对试剂缓冲液：2.10克柠檬酸和2.16克辛烷磺酸钠，定容至1L备用．1.5三聚氰胺标准品：纯度大于99.0％．1.6三聚氰胺标准储备液：100mg（精确至0.1mg）三聚氰胺标准品于100ML容量瓶中，用甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/ml的标准储备液，于4℃避光保存．2样品前处理……奶样2g——→……15ml三氯乙酸和5ml乙腈……超声，振荡，离心各10min……过滤（三氯乙酸定容至25ml．）……3ml甲醇、5ml水……取滤液5ml，与5ml水混匀，做待净化液……3ml水、3ml甲醇……6ml氨化甲醇（开始收集洗脱水）……50℃下氮气吹干样液（2.5）……残留物用1ml流动相定容，振荡1min．3高效液相色谱仪进样前准备工作3.1进样管插入甲醇水（1：9）中，出水口插入废液缸，同时，过滤管进口插入甲醇水中，出口插入废液缸．3.2打开排气阀排气，当流动较慢时，可在色谱工作站中点击＂启动＂，泵启动，加快排气，至气体全部排出，点击＂停止＂泵，关闭排气阀．3.3在色谱工作站中点击＂采集基线＂，至线走平为止（量程在100µl以下），点击＂停止采集＂，＂停泵＂．3.4进样管插入流动相溶液中，再次按照步骤3.3排气，待排气完毕，按步骤5，至线走平，平衡色谱柱工作完毕．4进样4.1一次性针管吸样液（2.7），过微孔滤膜后，收集于小塑料瓶中．4.2上述收集样液冲洗进样针（100µl）6～8次，提取样品，慢慢吸液，赶走针中的气泡．4.3插入进样阀，匀速进样，快速向下（inject）搬动阀门，针不得拔出，开始采集样品．4.4出现三聚氰胺峰后，点击＂停止采集＂，＂停止＂，停泵，保存数据．5仪器冲洗5.1进样管从流动相转入甲醇水（1：9）中，按3.3排气，至完毕后，点击工作站中的＂采集基线＂，直至线走平，点击＂停止采集＂，＂停止＂泵．5.2进样管从甲醇水转到纯甲醇中，按上述5.1步骤操作．5.3进样针用甲醇冲洗6～8次．关闭工作站．。
三聚氰胺的检测方法
重量法、电位滴定法、高效液相色谱法、气相色谱－质谱联用法、液相色谱－质谱联用法、毛细管电泳法、近红外线吸收法、比色法、免疫学法1.1重量法：苦味酸法和升华法。
苦味酸法的原理是将三聚氰胺样品用水溶解，再向该溶液中加入苦味酸使其与三聚氰胺生成沉淀，根据生成沉淀的量计算出样品中三聚氰胺的含量。
升华法的原理是将样品置于升华装置中，使样品中三聚氰胺受热升华，准确称取剩余固体的质量。
这两种方法用于工业上检测三聚氰胺的含量准确度相对较高，但分析时间都比较长，操作繁琐，不适合高效快速检测。
1.2电位滴定法电位滴定法在工业中检测三聚氰胺较重量法简单，实验时间较短，但准确度不高。
其实验原理：以硫酸标准溶液滴定含有三聚氰胺的溶液，通过公式用等当量点时消耗硫酸标准溶液的体积计算出三聚氰胺的含量。
不用于食品。
1. 3 高效液相色谱法（HPLC）用HPLC 检测三聚氰胺含量，检出限低，准确度相对较高，可用于食品中三聚氰胺的检测。
实验的一般操作步骤是：用沉淀法先将奶粉中的蛋白质沉淀，然后提取奶粉中的三聚氰胺，将提取液用阳离子交换固相萃取柱净化，最后用高效液相色谱进行检测，外标法定量。
1. 4气相色谱法和质谱联用法（GC-MS）与HPLC 法比较，GC-MS 具有准确度高、检出限低（0.05 mg/kg），更适合食品中三聚氰胺的微量检测。
该方法样品经蛋白沉淀离心后过MCX 固相萃取柱净化、氮气吹干、硅烷化衍生, 再由气相色谱－质谱联用仪检测。
由于三聚氰胺为强极性化合物，难汽化，直接对其进行GC-MS 测定不但灵敏度低且峰拖尾严重，为此王征采用N，O- 双三甲基硅基三氟乙酰胺衍生化，极性的减弱使其容易进行汽化，有利于待测物和基质的分离,降低了背景化学噪音的影响。
王立媛等用GC-MS 方法检测奶粉和鲜奶中三聚氰胺的加标回收率在82.3%～110.0%之间，相对标准偏差（RSD）＜10%，方法净化效果好、准确度高、灵敏度好。
但是GC- MS 法需要进行衍生化, 样品处理步骤复杂,不适用于多杂质生物检材中三聚氰胺的快速筛查和定量分析。
三聚氰胺奶粉检测方法
三聚氰胺奶粉检测方法
三聚氰胺奶粉检测方法如下：
1. 离子色谱法：该方法基于三聚氰胺在水中形成氢氧化铵和靛酚蓝络合物的反应，在离子色谱柱中用硫酸为流动相进行分离，再通过紫外检测器进行检测。
2. 高效液相色谱法：该方法使用高效液相色谱柱进行分离，以甲醇和水为流动相，以紫外检测器和荧光检测器进行检测三聚氰胺。
3. 液质联用法：该方法是高效液相色谱法和质谱法的结合，可以同时分离和定量三聚氰胺及其代谢产物。
4. 岛式红外光谱法：该方法利用不同样品的红外光谱图谱的差异性来鉴别含三聚氰胺的奶粉。
5. 快速检测法：该方法使用荧光和拉曼光谱等技术，可以在几秒钟内快速、准确地检测奶粉中的三聚氰胺。
以上是常用的几种三聚氰胺奶粉检测方法。
不同的方法具有不同的优点和适用范围，可以根据实际需求选择合适的检测方法。
原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法
原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法安捷伦科技有限公司摘要本实验以乙腈-水为提取剂和蛋白沉淀剂处理样品，ZORBAX 300SCX为色谱柱，采用高效液相色谱-离子交换色谱法测定了生鲜乳与不含添加剂的液态奶样品中的三聚氰胺，验证了新的三聚氰胺快速液相色谱国标方法。
关键词三聚氰胺，生鲜乳，Zorbax 300SCX，强阳离子交换色谱柱引言根据国家质检总局奶制品中三聚氰胺快速检测应急要求，受科技部委托，中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所组织协调起草关于《生鲜乳中三聚氰胺含量快速检测—液相色谱法》的国家标准，并于颁布前精心组织了14个实验室的比对和验证，安捷伦北京COE实验室有幸参与了此次比对实验。
采用我公司的液相色谱仪和色谱柱，我们在这次比对中获得了理想的分析结果，同时验证了安捷伦仪器和色谱柱的可靠性。
新快速检测方法的前处理过程采用了简单的蛋白沉淀－溶剂提取方法，而液相色谱分析采用了选择性好的离子交换模式和简单的等度流动相，容易在不同实验室中重现。
原方法中磷酸盐缓冲液与乙腈的比例为70：30，我们在应用中根据Zorbax 300SCX的选择性适当调整了流动相比例。
实验的结果表明：使用Zorbax 300SCX色谱柱，磷酸盐缓冲液与乙腈的比例为60：40时，三聚氰胺与样品中其它组分的分离度最佳。
实验及方法1.1仪器与材料本实验使用安捷伦1200-VWD高效液相色谱系统（配置在线真空脱气机、二元泵、高性能自动进样器、柱温箱、紫外检测器）电子天平为METTLER TOLEDO公司的AL104pH计为METTLER TOLEDO公司的FE20离心机分析天平：感量为0.0001 g和0.01 g涡旋混合器50mL具塞塑料离心管1.2 试剂与标样乙腈为迪马公司HPLC级乙腈超纯水为经Milli-Q系统净化处理过的纯净水三聚氰胺标准贮备溶液（溶剂为水，浓度1004.52μg/g）及生鲜乳样品由中国计量科学研究院提供50mM磷酸盐缓冲液(pH3.0)：称取6.8g磷酸二氢钾（KH2PO4），加入约980 mL水溶解，调节pH至3.0后，定容至1 L后备用流动相：50mM磷酸盐缓冲液与乙腈以60：40体积比预混，超声脱气后备用标准工作液：逐级稀释三聚氰胺标准贮备液，以水定容，制成浓度分别为0.1ug/mL, 0.2ug/mL，0.5ug/mL，2.0ug/mL, 5.0ug/mL, 20.0ug/mL, 50.0ug/mL, 100.0ug/mL的标准工作液1.3 样品制备称取15g（精确至0.01 g）试样于50 mL具塞塑料离心管中，加入15 mL 乙腈，剧烈振荡6 min，加水定容至50 mL，混匀，上清液用针式过滤器过滤后，作为液相分析用试样。
液相测三聚氰胺的计算公式
液相测三聚氰胺的计算公式引言。
三聚氰胺是一种重要的有机化合物，广泛应用于化工、农业和医药等领域。
然而，三聚氰胺的存在对环境和人体健康造成了潜在的危害。
因此，对三聚氰胺的检测和分析显得尤为重要。
液相色谱法是一种常用的三聚氰胺分析方法，本文将介绍液相测三聚氰胺的计算公式及其应用。
液相测三聚氰胺的计算公式。
液相色谱法是一种高效、灵敏的分析方法，广泛用于三聚氰胺的检测。
在液相色谱法中，三聚氰胺的测定可以通过计算公式来进行。
其计算公式如下：C = (A × V) / (ε× l)。
其中，C为三聚氰胺的浓度，单位为mg/L；A为三聚氰胺的吸光度；V为三聚氰胺的体积，单位为L；ε为三聚氰胺的摩尔吸光系数，单位为L/(mol·cm)；l为光程，单位为cm。
在实际应用中，可以通过测定三聚氰胺的吸光度A，计算出三聚氰胺的浓度C。
这样就可以准确地测定出样品中三聚氰胺的含量。
液相测三聚氰胺的应用。
液相色谱法测定三聚氰胺的方法具有高灵敏度、高分辨率和高准确性的特点，因此在实际应用中得到了广泛的应用。
液相色谱法可以应用于食品、环境、农产品等领域的三聚氰胺检测。
在食品安全领域，三聚氰胺作为一种有毒物质，其残留会对人体健康造成危害。
因此，食品中三聚氰胺的检测显得尤为重要。
液相色谱法可以对食品中的三聚氰胺进行快速、准确的检测，保障食品安全。
在环境监测领域，三聚氰胺作为一种有害物质，其排放会对环境造成污染。
因此，对环境中三聚氰胺的监测也显得十分重要。
液相色谱法可以对水体、土壤等环境样品中的三聚氰胺进行检测，为环境保护提供重要的数据支持。
在农产品质量监测领域，三聚氰胺的残留会对农产品质量造成影响。
因此，对农产品中三聚氰胺的检测也显得十分必要。
液相色谱法可以对农产品中的三聚氰胺进行快速、准确的检测，保障农产品质量。
结论。
液相色谱法是一种高效、灵敏的三聚氰胺分析方法，其计算公式可以通过测定三聚氰胺的吸光度来进行。
三聚氰胺的风险和危害以及检测方法
三聚氰胺的风险和危害以及检测方法三聚氰胺是一种有机化合物，也称为三聚氰酸或三氰胺。
它是一种白色晶体，具有熔点和化学性质不稳定的特点。
三聚氰胺主要应用于有机合成和化工生产中，例如用于生产甲醛、涂料、粘合剂和皮革等。
一、三聚氰胺的基本概念三聚氰胺是一种天然产品，早已在自然中发现，也可以通过化学合成的方法获得。
它是一种重要的有机化合物，在工业和日常生活中有着广泛的应用。
1. 三聚氰胺的结构与性质三聚氰胺分子式为C3N3(NH2)3，结构中有三个氮原子和六个氢原子，氮原子和氢原子的比例为1：3，与蛋白质中氮氢比相同。
三聚氰胺的结构中含有三个氨基（NH2）基团，它可以与羧基（COOH）基团发生反应，生成稳定的酰胺键（COO）。
2. 三聚氰胺的制备方法三聚氰胺的制备方法主要有两种：一是通过尿素或甲酰胺高温分解得到；二是通过丙烯腈或乙撑亚胺反应得到。
3. 三聚氰胺的应用领域三聚氰胺在工业和日常生活中有着广泛的应用。
主要应用领域包括：（1）甲醛生产：三聚氰胺可以用于生产甲醛，甲醛进一步反应可以生产出各种有机化合物，如醇类、酚类、酯类等。
（2）涂料：三聚氰胺与其他化合物反应可以生产出各种涂料，如醇酸树脂涂料、丙烯酸树脂涂料等。
（4）粘合剂：三聚氰胺可以用于生产各种粘合剂，如环氧树脂粘合剂、聚氨酯粘合剂等。
（5）皮革：三聚氰胺可以用于鞣制皮革，可以使皮革变得柔软、耐磨。
二、三聚氰胺的风险与危害三聚氰胺虽然在工业和日常生活中有着广泛的应用，但是它也是一种有毒的化合物。
以下是一些可能引起的健康问题：1. 过敏反应：有些人对三聚氰胺过敏，会出现皮肤瘙痒、皮疹等症状。
2. 眼部刺激：三聚氰胺对眼睛有一定的刺激作用，会引起流泪、疼痛等症状。
3. 毒性作用：三聚氰胺是一种有毒的化合物，对肝脏、肾脏、神经系统等都有一定的毒性作用。
4. 致癌性：三聚氰胺已经被证明具有致癌性，可以导致膀胱癌、肝癌等疾病的发生。
三、三聚氰胺在环境中的影响三聚氰胺在环境中主要通过降雨、降雪和径流等途径进入水体，也可以通过挥发和吸附等途径进入土壤和大气。
三聚氰胺(NO2)
仪器参考条件（GC-MS参考条件）
色谱柱：5%苯基二甲基聚硅氧烷石英毛细管柱，30m×0.25 mm[内径(i.d.)]×0.25 µm，或 相当者
基质匹配加标三聚氰胺的样品LC-MS/MS多反应监 测质量色谱图
保留时间4.2 min，定性离子m/z 127>85和m/z 127>68
第三法 气相色谱-质谱 联用法（GC-MS和 GC-MS/MS法）
原理
试样经超声提取、固相萃取净化后，进行 硅烷化衍生
衍生产物采用选择离子监测质谱扫描模式 (SIM)或多反应监测质谱扫描模式(MRM)
长期慢性毒性过程？
2015-3-23 三聚氰三聚胺氰及胺其限类量似标物准的性质
目前各国严令禁止添加三聚氰胺于饲料、 食品中。
三聚氰胺检测技术简 介
目前已有的三聚氰胺检测方法
GB/T 22388—2008 《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》（液相色谱、气相色谱-质谱和液 相色谱-质谱法）和GB/T22400-2008 《原料乳中三聚氰胺快速检测 》（液相色谱法） GB-T 22288-2008 植物源产品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的测 定 气相色谱-质谱法
气相色谱-质谱法 确证法 ，可同时进行定量，对前处理要求高，并需要衍生 化后进样，方法效率较低。
酶联免疫法（ELISA）以及其他快速方法 筛选法
效率
集约化统一 方法
准确
经济
原料乳与乳制品中三 聚氰胺检测方法
GB/T 22388-2008
原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法
表１标准 工作溶液配制 （ 高浓度 ）
和实验方法
３原理
用 乙腈 作 为原料 乳 中的 蛋 白质沉 淀剂和三聚氰胺提取剂 ，强阳离子交换 色谱柱分离 ，高效液相 色谱 一 紫外检测
表２标准工作溶液配制 （ 低浓度 ）
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６测 定步骤 ０ 。
６ １ 试 样 的 制 备 ．
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器／ 二极管阵列检测 器检 测 ，外标法定
量。
（ ． ． ） ，置于 １０ 容量瓶 中 ，用 ４６ １ ０ ｍＬ
水稀释 至刻度 ，混匀。 ４． ３ 按 表 １ 别 移 取 不 同 体 ６． 分
Ａ试专 瓤
ｌ ｌ
积 的标 准 溶 液 Ａ （ ６． ）于 容 量 ４． １
４． 三 聚 氰 胺 标 准 贮 备 溶 液 ： ５
１０ ． ０× １ ０ｍｇ／ Ｌ。
溶 解 后 ，用 磷 酸 （ ２ ４． ）调 节 ＰＨ至
３０ ． ，用水稀 释至 １ Ｌ，用 滤膜 （ ． ） ４ ９
过滤后备 用。
２规范性引用文件
下 列文 件 中的 条款通 过 本标 准的 引用而成为本标准的条款。凡是注 日期
４ ３磷酸二氢钾 （ ． ＫＨ２ Ｏ ）。 Ｐ ４
注 ：当原 料乳 中三聚 氰胺 的含 量