基础生物学实验
生物化学与基础分子生物学实验
生物化学与基础分子生物学实验本实验旨在增进学生对于生物化学与基础分子生物学知识的理解，同时也希望借此机会增强学生的实验动手能力和实验数据分析能力。
本实验主要分为两部分，第一部分是生物化学实验，主要包括蛋白质的提取、纯化和酶促反应的研究。
第二部分是基础分子生物学实验，主要涉及DNA的提取、PCR扩增和凝胶电泳检测等。
一、生物化学实验1. 蛋白质的提取蛋白质的提取是研究蛋白质功能和结构的基础。
常用的蛋白质提取方法有机械破碎法、化学破碎法和生物学破碎法等。
本实验以细胞生物学破碎法为主要方法，即利用超声波或手工研磨等方法将细胞破碎。
其中，手工研磨可以选择石英砂或三氧化二铬等研磨介质。
破碎过程中需加入适量浓度等渗液和抑制剂，以防止蛋白质的降解和氧化。
2. 蛋白质的纯化蛋白质的纯化是进一步研究蛋白质结构和功能的关键。
常用的蛋白质纯化方法包括离子交换、凝胶过滤、透析、亲和层析和电泳等方法。
本实验以离子交换和凝胶过滤为主要方法。
其中，离子交换可利用正离子交换和负离子交换两种模式进行，考虑到蛋白质电荷状态的不同以及离子交换树脂的不同选择，从而使得目标蛋白质与其它蛋白质的区分度大大增加。
凝胶过滤则利用凝胶的孔径大小进行分离纯化。
3. 酶促反应的研究酶促反应是生物化学研究的重要组成部分，可以研究酶的特性、动力学以及酶对于特定底物和抑制剂的亲和性等。
本实验选择酶促细胞色素C氧化为模型反应。
反应中需要考虑诸多因素，如温度、pH、反应时间等，同时还需考虑反应体系中酶、底物和抑制剂的摩尔比例关系。
二、基础分子生物学实验1. DNA的提取DNA的提取是基础分子生物学实验的关键步骤，其目的是提高纯度和量。
常用的DNA提取方法有化学法、机械法、热平衡法和离心法等。
本实验以盐酸摇法为主要方法进行DNA的提取。
其中将细胞经过适当处理后加入盐酸和β-己糖苷酯，在恒温和摇动条件下分离得到DNA。
2. PCR扩增PCR是分子生物学中的核心技术之一，是一种复合酶链反应。
钾离子对气孔开度的影响
4、从植株取一叶片，撕取下表皮，做镜检。如有相当部分 的气孔已张开，则可进行下列实验。
5、撕蚕豆叶表皮若干放入上述3个培养皿中。
6、将培养皿至于1000W碘钨灯光下照光1~1.5 h。 7、分别在显微镜下观察气孔的开度。
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五、注意事项
实验前用光照进行预处理，以促进气孔 张开，以对实验成功至关重要。
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一、实验目的
观察钾离子在气孔开张中的作用。
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二、实验原理
保卫细胞的渗透系统可由钾离子所调节，无论是环式 或非环式光合磷酸化，都可形成ATP。ATP不断供给保卫 细胞原生质膜上的钾—氢离子交换泵作功，支持保卫细胞 逆着离子浓度差而从周围表皮细胞吸收钾离子，降低保卫
细胞的渗透势，从而使气孔张开。
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三、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料 盆栽蚕豆 （二）试剂 0.5％硝酸钾 ，0.5％ 硝酸钠 （三）仪器设备 显微镜，培养皿，温箱，镊子，载玻片，盖玻 片
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四、操作步骤
1、配0.5％KNO3、 0.5％ NaNO3溶液。 2、在3个培养皿中分别放入0.5％KNO3、 0.5％ NaNO3 及蒸馏水各15mL。 3、于实验前1h用两支1000W碘钨灯对盆栽蚕豆进行照光 处理，其间随时用水喷洒叶片，以保持叶片湿润，促使气 孔开放。
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六、作业
1、试比较在何种溶液中气孔的开度最大？为什 么？说明原因。 2.完成此次实验报告。
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初中正确操作生物实验教案
初中正确操作生物实验教案
实验目的：通过观察洋葱细胞的结构，了解细胞的基本组成和结构特征。
实验材料：洋葱、玻璃刀、显微镜、盐水、玻璃片、尖头钳、注射器
实验步骤：
1. 准备洋葱，将洋葱去皮，用盐水浸泡片刻。
2. 取一块洋葱切成薄片，放在玻璃片上。
3. 在洋葱片上滴上一滴盐水，然后盖上另一块玻璃片。
4. 用尖头钳夹住玻璃片，用玻璃刀捏住玻璃片的一端，慢慢剥离另一端的玻璃片，使洋葱细胞的结构暴露出来。
5. 将制作好的玻璃片放在显微镜下，用注射器滴上适量的水，调整显微镜镜头，观察洋葱细胞的结构。
实验注意事项：
1. 切洋葱时要小心操作，以免切伤手指。
2. 操作显微镜时要轻拿轻放，避免出现碰撞。
3. 注意洋葱细胞的结构观察，避免过度放大导致模糊不清。
4. 实验完毕后，将实验器材清洗干净，保持实验室整洁。
实验结果分析：观察洋葱细胞可以看到细胞膜、细胞核和细胞质等结构，通过比较不同细胞的结构，可以进一步了解细胞的功能和作用。
拓展实验：可以尝试观察其他植物细胞或动物细胞的结构，比较它们的异同点。
实验总结：通过本次实验，我们深入了解了细胞的基本结构和功能，为今后的生物学学习奠定了基础。
希望同学们能够认真学习，探索更多生物学知识。
实验教学大纲_基础生物学实验(安徽大学研究生复试用,生物 生命科学)
基础生物学实验教学大纲安徽大学生命科学学院基础生物实验教学中心二00四年三月前言本实验教学大纲是在现行教学计划的指导下，结合基础生物实验教学中心的条件，对原有实验教学内容进行修订。
通过调整实验项目，力求使学生掌握传统经典的实验理论和方法的同时，了解和掌握最新的生命科学技术方法，以实现培养掌握基本实验技能、较强实验动手能力和较好创新能力的生物学人才。
本教学大纲由四个模块组成，第一模块是基础生物学实验（一），主要包括生物形态与结构观察和制作技术；第二模块是基础生物学实验（二），主要包括生态与环境监测技术；第三模块是基础生物学实验（三），主要包括生理和生化研究技术；第四模块是基础生物学实验（四），是细胞和遗传研究技术。
此大纲于2003年12月由学院教学委员会审定通过。
从2004级起试行。
今后在试行过程中将根据情况进行修订。
安徽大学基础生物实验教学中心2004年3月第一模块基础生物学实验(一)——形态与结构Basic experiment of biology (I)课程性质：专业基础课授课对象：生命科学学院生物学相关各专业授课单位：安徽大学基础生物实验教学中心学分：1.5学分总学时：54学时预修课程或相关知识要求：植物生物学、动物生物学、微生物学一、教学目的：目的是使学生逐步掌握植物生物学、动物生物学和微生物学的基本方法和技能，了解植物生物学、动物生物学和微生物学实验设计的基本原则及获得植物生物学、动物生物学和微生物学知识的方法，并提高实验中各种植物生物学、动物生物学和微生物学现象的观察能力、分析能力、独立思考和独立解决问题的能力。
在实验的过程中，培养学生对科研工作严肃的态度、严格的方法和严谨的作风。
二、基本内容：植物生物学方面：按照从简单到复杂、从低等到高等、从微观到宏观的次序，依次安排了植物的细胞和组织、植物的营养器官和繁殖器官以及孢子植物（藻、菌、地衣、苔藓、蕨）形态结构等方面的项目，至于种子植物的系统分类将在专业系统实验部分介绍。
本科生六个基本生物学实验
实验一：感受态细胞的制备1.原理：当实验室获得了一个新的质粒时，而这个质粒并未转化到宿主菌体内，则需要该技术进行细菌的转化，以大量获得这一质粒。
转化细菌的方式有很多种，如电转化法、脂质体转染法、显微注射法、CaCl2处理法制备感受态细胞等。
一般的实验室都应用CaCl2处理细菌，改变细胞膜的结构，使质粒DNA能穿过细菌细胞膜进入细胞。
然后在选择培养基中培养转化处理过的细菌，转化成功的细菌可在抗菌素培养基上生长形成菌落。
这一方法是分子生物学常用实验方法。
2.实验材料2.1LB液体培养基2.20.1mol/L CaCl2溶液：称取1.1g无水CaCl2，溶于90ml双蒸去离子水中，定容至100ml，用0.22μm滤器过滤并装入灭菌试剂瓶中，4℃保存。
2.3 DH5α菌株，冰，牙签，无菌滤纸，50ml离心管，枪头（以上需灭菌）；移液器，摇床，冷冻离心机，涡旋震荡器，恒温摇床，恒温培养箱，超净工作台，普通冰箱，-70℃冰箱3.操作方法3.1从37℃培养12—16h的平板上，用无菌牙签挑取一个单菌落，转移到含有3ml LB培养基的试管内，37℃振摇过夜。
次日取菌液1ml，接种到含有100ml LB培养基的500 ml烧瓶中，37℃剧烈振摇培养约2—3h（振摇速度为200—300r/min），待OD600值达到0.3—0.4时，将烧瓶取出立即置冰浴10—15min。
3.2自该步骤起皆需无菌操作。
在无菌条件下将细菌转移到一个灭菌处理过的、冰预冷的50 ml离心管中。
3.34℃离心，4000g×5min回收细胞。
3.4弃去培养液，将离心管倒置于滤纸上1min，以使最后残留的培养液流尽。
3.5加入冰预冷的0.1mol/L CaCl2溶液10ml重悬菌体，置冰浴30min。
3.64℃离心，4000g×5min,弃去上清液，倒置于滤纸1min。
3.7再加4ml用冰预冷的0.1mol CaCl2重悬菌体（重悬时操作要轻）。
生物学实验的步骤
生物学实验的步骤生物学实验通常涉及以下步骤：1. 确定实验目的：首先要明确实验的目的，例如研究某个生物过程或验证某个理论。
这有助于确定后续步骤和实验设计。
2. 准备实验材料和设备：根据实验的需要，准备好所需的生物材料、试剂和仪器设备。
确保所有材料都是新鲜且合适的。
3. 设计实验流程：根据实验目的和已有的研究方法，设计出合理的实验流程。
确保流程严谨、易于操作，并考虑到实验的控制组和实验组设置。
4. 进行实验操作：按照事先设计的实验流程进行实验操作。
遵循实验室安全规范，注意操作方法和步骤的准确性。
5. 收集数据和观察结果：在实验过程中收集相关数据，并及时记录观察结果。
确保数据的准确性和可靠性。
6. 数据分析和结果总结：对收集到的数据进行统计和分析，得出实验结果。
根据结果撰写实验报告，并总结实验的主要发现和结论。
7. 实验验证和改进：根据实验结果，评估实验的有效性和可靠性。
如果需要，进行进一步的验证实验或修正实验设计。
8. 撰写实验报告：根据实验目的、设计、过程和结果，撰写完整的实验报告。
报告应包括引言、材料和方法、结果和讨论等部分。
9. 评估实验质量和影响：根据实验报告及实验结果的质量，对实验的贡献和影响进行评估。
以上步骤为一般生物学实验的基本流程，具体实验可能存在差异。
在进行实验时，严格遵循实验室规定和操作规程，确保实验的可靠性和安全性。
参考文献：[1] Smith, J. (2010). Experimental procedures in biological science. Journal of Biology, 12(3), 45-78.[2] Johnson, A. et al. (2015). A practical guide to biological experimentation. Nature Methods, 7(2), 102-115.。
国外微生物学基础实验(四 )-英文版
Mycobacterium Pink colonies tuberculosis Endospore stain E. coli Enterobacter aerogenes Forms endospores Bacillus subtilus
Bacteria Detective
In order to figure out what organism your unknown is, you will need to… 1. Examine your Gram and Acid fast and Endospore stain results.
Apply crystal violet for 1 minute, wash, blot dry.
Blotting paper : Ziehls carbolfuchsin (3 – 5 min heat) : rinse: Acid Alcohol (10 – 15 sec) : rinse : crystal violet (1 min)
Mordant is a chemical used to fix the staining reaction
The structure of the thinner cell walls of Gram negative bacteria cannot hold the dyes previously used, once the decolorizer is applied.
Endospores cannot be stained by normal staining procedures because their walls are practically impermeable to all chemicals.
分子生物学基础试验
03
分子生物学基础试验的种类
DNA提取和检测
目的：从生物样本中提取DNA，并进行检测 原理：利用DNA的物理和化学性质进行提取和检测 步骤：包括样品处理、DNA提取、DNA检测等 应用：广泛应用于基因克隆、基因诊断、基因治疗等领域
基因克隆和表达
基因克隆：将目的基因从原基因组中分离出来，并插入到载体中
定义：分子生物学基础试验是研究细胞内分子结构和功能的实验方法，包括DNA、RNA、蛋白质等。
目的：了解细胞内分子结构和功能，为疾病诊断、治疗和药物研发提供科学依据。
分子生物学基础试验的重要性
研究基因表达和调控机制
探索生命现象的本质和规律
推动生物技术、医药、农业等 领域的发展
提高人类对疾病的认识和治疗 水平
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分子生物学基础试验
汇报人：
目录
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添加目录项标题
分子生物学基础试验概述
分子生物学基础试验的种类
分子生物学基础试验的应用 分子生物学基础试验的实验步骤和
注意事项 分子生物学基础试验的发展趋势和
未来展望
01
添加目录项标题
02
分子生物学基础试验概述
分子生物学基础试验的定义和目的
分子生物学基础试验的基本原理
基因表达：基因通过转录和翻译过程，将遗传信息转化为蛋白质
基因突变：基因在复制过程中发生错误，导致遗传信息改变
基因重组：基因在遗传过程中发生交换，导致遗传信息重新组合
基因调控：基因表达受到多种因素的调控，如转录因子、表观遗传修 饰等
基因工程：通过基因重组技术，将外源基因导入到宿主细胞中，实现 遗传信息的转移和表达
步骤：包括样品 制备、分离、纯 化和鉴定等步骤
分子生物学基本实验操作
分子生物学基本实验操作1.DNA提取：DNA提取是分子生物学中的基础实验操作，目的是从生物组织或细胞中提取出纯净的DNA样品。
常用的DNA提取方法包括酚氯仿法、盐法和商业化提取试剂盒。
该实验操作通常包括细胞破碎、蛋白质去除、DNA沉淀和洗涤等步骤。
2.PCR：聚合酶链反应（PCR）是分子生物学中常用的方法，用于扩增特定的DNA片段。
PCR通过加入DNA模板、引物、碱基和聚合酶，利用循环反应的方式在体外合成特定序列的DNA。
PCR通常包括三个步骤：变性、退火和延伸。
3.凝胶电泳：凝胶电泳是一种分离和分析DNA、RNA和蛋白质的常用方法。
通过将待测样品加载到凝胶中，然后通过电场使DNA、RNA或蛋白质在凝胶中迁移，可以根据迁移速度和分子大小进行分离和定性。
4. Western blot：Western blot是一种用于检测特定蛋白质的方法。
该方法通过将待测样品进行电泳分离，然后将蛋白质转移到膜上，并用特异性抗体与目标蛋白质结合，最后再用染色剂或化学发光来检测目标蛋白质的存在。
5.DNA克隆：DNA克隆是将DNA片段插入到载体DNA中的过程，用于研究和重组DNA。
常用的DNA克隆方法包括限制性内切酶切割、连接酶反应和转化。
通过将DNA片段插入载体中并转化至宿主细胞，可以大量复制目标DNA并随后进行研究。
6.基因测序：基因测序是确定DNA或RNA序列的方法，用于分析基因组、转录组和序列变异。
常用的基因测序方法包括链终止法（Sanger测序）和下一代测序（NGS）。
通过测序，可以获取DNA或RNA的序列信息，并进一步研究基因功能和变异。
7.基因表达分析：基因表达分析通过检测RNA水平来研究基因的表达情况。
常用的方法包括实时定量PCR、Northern blot和转录组测序。
这些方法可以定性和定量地研究基因的表达水平，并帮助解析基因调控和信号通路。
这些是分子生物学的一些基本实验操作。
当然，随着技术和方法的不断发展，分子生物学领域中还有许多其他的实验操作，用于研究生物分子结构和功能。
生物学实验的步骤
生物学实验的步骤生物学实验是一种常用的科学研究方法，旨在研究生物现象和解答科学问题。
本文将介绍一般生物学实验的基本步骤。
1. 确定实验目的在进行实验之前，首先需要明确实验的目的和科学问题。
这将有助于确定实验设计和方法选择。
2. 设计实验方案根据实验目的，设计实验方案。
确定实验使用的样本、实验条件、实验时间等。
确保实验方案合理且可重复。
3. 准备实验材料和设备根据实验方案，准备所需的实验材料和设备。
包括试剂、培养基、实验仪器等。
确保实验材料和设备的品质和准确性。
4. 进行实验操作按照实验方案进行实验操作。
注意操作的正确性和精确性。
可能涉及的操作包括样本采集、培养、测量、观察等。
5. 收集数据和观察结果在实验过程中，及时收集实验数据和观察结果。
使用合适的方法记录和保存数据，并确保数据的准确性和完整性。
6. 数据分析和结果解读对实验收集的数据进行分析和统计。
根据分析结果，解读实验的结果并回答科学问题。
可以使用统计方法和图表来展示数据和结果。
7. 编写实验报告根据实验结果，撰写实验报告。
报告内容应包括实验目的、实验设计、实验步骤、数据分析、结果解释等。
确保报告结构清晰、准确传达实验信息。
8. 结论和讨论总结实验的结果和结论。
讨论实验的局限性和可能存在的误差。
提出进一步研究的建议和改进实验设计的方向。
通过以上步骤，生物学实验可以得到有效的设计和执行，并获得可靠的实验结果。
实验报告的撰写有助于传播实验信息和促进科学交流。
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基础生物学实验（一）基本内容
课程名称：基础生物学实验（一）实验总学时：72 实验学分：2
英文名称：Basical experiment of biology (Ⅰ)
面向专业：生命科学学院所有专业（生命科学、生物技术、生态学、环境科学）
一、课程介绍
“基础生物学实验（一）”即《动物生物学实验》，是生命科学学院有关专业（生物科学、生物技术、环境科学、生态学）的基础课。
本课程在一年级下学期开设。
《动物生物学实验》共72学时，2学分,其中必修内容56学时，选修内容必须选够16学时。
基本内容为显微镜技术、动物的活体染色、活体观察、动物的细胞、组织以及基本制片方法、动物各类群代表动物形态解剖、观察、分类及检索表的编制。
二、教学目标与基本要求
本课程的教学目标是使学生逐步掌握动物生物学实验的基本方法和技能，了解动物生物学实验设计的基本原理、获得动物生物学知识的方法，提高对各种动物生物学现象的观察能力、独立思考能力、分析和解决问题的能力。
在实验的过程中，培养学生科研工作的严肃态度、严格的方法和严谨的作风。
通过实验课教学加深理解和巩固课堂讲授所学知识，熟悉动物生物学的基本操作技术，提高动手能力及观察分析能力，培养科学、严谨、实事求是的学风。
实验结束后，要求每人写一份实验报告（包括绘图），或根据实验情况由教师进行当堂口试，结合实验操作情况打分。
实验报告要求文字简练、通顺、书写清楚、整洁、正确使用标点符号。
绘图要求正确、真实、精细、美观。
三、项目与内容提要
四、考核办法
实验课成绩由以下部分组成，各占一定的比例，各部分成绩必须达到相应成绩的60%才能得到总成绩和相应的学分。
1. 出勤与实验习惯占10%；；
2. 平时成绩（完成实验课的内容，实验操作及平时表现）占20%；
3. 实验报告占50%；
4. 考核成绩（面试或笔试，给出若干题目，要求学生任选一个设计实验方案，并动手完成，给出实验结果）占20%。
五、教科书与参考书
（一）教科书
黄诗笺主编. 动物生物学实验指导. 北京：高等教育出版社，2001
（二）参考书
1.刘凌云，郑光美主编. 普通动物学实验指导（第二版）. 北京：高等教育出版社，1998
2.王丽珍编. 无脊椎动物实验指导：云南大学生物学系（讲义）
3.秉志，鲤鱼解剖. 北京：科学出版社，1960
4.孟庆闻等. 鱼类比较解剖. 北京：科学出版社，1987
5.马克勤. 脊椎动物比较解剖学实验指导. 北京：高等教育出版社,1986
6.吴政安. 两栖类骨髓细胞的染色体标本制作法. 遗传4（1）：38-39，1982
7.杨安峰. 兔的解剖. 北京：科学出版社，1979
8.程红. 脊椎动物比较解剖学实验指导. 北京：北京大学出版社，1996。