BrdU掺入实验
Brdu法检测技术详细操作步骤
Brdu法检测技术操作详细步骤技术原理：溴脱氧尿苷，也称为BrdU（MW = 307.1Da），是在细胞周期的S期期间掺入DNA中的胸苷的合成类似物。
BrdU迅速被增殖细胞吸收，并且可以通过流式细胞术，免疫荧光和免疫组织化学等不同技术检测抗BrdU特异性抗体。
BrdU广泛用于测量DNA合成，研究细胞周期以及鉴定增殖细胞。
免疫荧光法：（1）取对数生长期待测细胞，将合适浓度的细胞接种于事先放有细胞爬片的细胞培养板中，将待测细胞给予不同处理后，每组加入10μM 的Brdu标记1.5h。
（2）弃培养液，加入1×PBS 洗涤5min×3 次。
（3）加入4%多聚甲醛固定30min。
（4）弃甲醛液，加入1×PBS洗涤5min×3次。
（5）加入2N HCL（用0.5%Tris-100透膜液配制）进行DNA变性，20min。
注：该步骤非常关键，时间要根据实际自行摸索。
（6）加入1×PBS 洗涤5min×3次。
（7）加入0.1M Na2B4O7室温孵育10min。
（8）1×PBS洗涤5min×3 次。
（9）将细胞爬片加入1% BSA 进行封闭 30min。
（10）将配制好的Brdu 一抗滴加在细胞上，4°C过夜孵育。
（11）次日取出爬片，室温下复温30min。
（12）1×PBS 洗涤5min×3 次。
（13）避光条件下，将488-抗兔荧光二抗滴加于细胞爬片上，于37°C 恒温箱中孵育30min。
（14）1×PBS洗涤5min×3 次。
（15）避光条件下，DAPI染液染细胞核5min。
（16）1×PBS洗涤5min×3次。
（17）用抗荧光淬灭剂封片，荧光显微镜下观察并保存图像。
流式细胞术：（1）取对数生长期待测细胞，将合适浓度的细胞接种于细胞培养皿中，将待测细胞给予不同处理后，每组加入终浓度10μM 的Brdu标记1.5h。
brdu检测细胞增殖原理
brdu检测细胞增殖原理
BRDU是一种毒性很低、耐受性高的含有双原子碘的尿嘧啶衍生物，它可以用来检测DNA合成过程中的碘取代效应，从而反映出细胞的增殖状况。
BRDU直接代替脱氧核糖核酸（DNA）的一种碘替代物，它比碘原子更容易结合到DNA上。
在BRDU检测技术中，BRDU通过与细胞混合后，被用作碘替代物，以反映细胞的增殖活动，该技术还可以用来测定细胞内碘的含量及其分布范围。
BRDU检测技术实施过程如下：首先，将BRDU混合于细胞培养液中，继而经过几个小时的培养，使BRDU与细胞DNA结合，随后，采用免疫组化技术对细胞进行染色，最后进行显微镜观察，以观察BRDU 在细胞DNA中的分布情况。
BRDU检测技术的优点是简单、快速、准确，它可以用来进行高分辨率的细胞增殖活性检测，解决传统方法存在的多次实验、微量性和低敏度等缺陷。
此外，它还可以用于观察特定培养条件下细胞的碘分布，通过分析这种碘分布，进而剖析出细胞分化、迁移、凋亡等过程中可能发挥作用的重要基因和蛋白质。
BRDU检测技术不仅在细胞科学领域得到广泛应用，而且在药物研发领域也有着重要的作用。
在药物的研发过程中，通过BRDU检测技术可以快速、准确地测定细胞增殖活性，从而检测药物对细胞增殖活性的影响，为药物研发提供有价值的信息。
综上所述，BRDU检测技术是一种简单、快速、准确的技术，可以用来快速检测细胞增殖活性。
它在细胞科学的应用越来越广泛，在
药物研发过程中也发挥着重要作用，是研究细胞增殖的一种有效工具。
brdu细胞染色实验步骤
brdu细胞染色实验步骤BRDU细胞染色实验是一种常用的细胞周期研究方法，用于检测细胞的DNA合成。
下面是BRDU细胞染色实验的详细步骤。
实验材料和试剂准备：1.细胞培养基：根据实验需要选择合适的培养基，例如DMEM、RPMI-1640等，并添加适当浓度的胎牛血清或其他所需的血清。
2. BRDU标记试剂：购买商业提供的BRDU标记试剂，如BRDU胸腺嘧啶标记试剂盒。
3.磷酸缓冲液（PBS）：配制pH 7.4的PBS溶液。
4. 75%乙醇。
实验步骤：1.细胞培养和分组：a.选择合适的细胞系，将其接种在培养基中的培养瓶或培养皿中，并放入37℃的恒温培养箱中。
b.根据实验需求将细胞分为实验组和对照组，每组设立至少三个重复样本。
2.处理细胞：a.在实验组中加入BRDU标记试剂，在对照组中不加入BRDU标记试剂。
b.根据细胞的生长情况，选择合适的处理时间和剂量。
一般情况下，处理时间为2-24小时，剂量为10-100umol/L。
3.收集细胞：a.处理时间到后，将培养皿或培养瓶从恒温箱中取出。
b.用PBS缓冲液三次冲洗细胞，每次冲洗10分钟。
c.倒掉PBS缓冲液，用5 ml PBS缓冲液分别冲洗各个培养皿或培养瓶中的细胞。
4.固定细胞：a.在处理后的细胞上加入到预冷的75%乙醇中固定细胞，保持4℃，固定时间一般为2-24小时。
b.倒掉75%乙醇，用PBS缓冲液两次冲洗细胞，每次冲洗10分钟。
5.细胞染色：a.将固定的细胞孵育在含有抗BRDU抗体的试剂中，放置在4℃下孵育一定的时间（一般为2-24小时）。
b.冲洗细胞，去除未结合的抗体。
6.检测和分析：a.将细胞用PBS缓冲液洗涤两次。
b.加入荧光素检测方法所需的染料，如荧光素同位素染料（FITC）。
c.进行显微镜下观察和计数，或使用流式细胞术分析仪测量荧光信号。
总结：BRDU细胞染色实验是一种常用的细胞周期研究方法，能够检测细胞的DNA合成。
该实验的步骤包括细胞培养和分组、处理细胞、收集细胞、固定细胞、细胞染色和检测与分析。
细胞活力研究检测指标
细胞活力研究检测指标细胞活力研究通常涉及多种检测指标，以评估细胞的生理状态、代谢活性和功能。
以下是一些常见的检测指标：1. 细胞增殖能力：1)MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物）试验：通过测量活细胞中线粒体脱氢酶的活性来评估细胞增殖。
2)CCK-8（Cell Counting Kit-8）试验：类似于MTT，但使用水溶性四唑盐WST-8，减少了实验步骤。
3)BrdU（5-溴脱氧尿苷）掺入试验：通过检测BrdU在DNA合成期的掺入来评估细胞增殖。
2. 细胞存活率：1)细胞计数：直接使用血球计数板或自动细胞计数器计算活细胞数量。
2)台盼蓝染色：排除法，活细胞不会吸收台盼蓝，死细胞会被染成蓝色。
3. 细胞凋亡检测：1)Annexin V/PI染色：通过流式细胞仪检测细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻和细胞膜完整性来识别早期和晚期凋亡细胞。
2)TUNEL（末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记）试验：检测DNA断裂，是细胞凋亡的标志。
4. 细胞周期分析：流式细胞仪：使用PI或Hoechst染料对DNA进行染色，分析细胞周期分布。
5. 细胞代谢活性：1)ATP含量测定：ATP是细胞能量代谢的重要指标。
2)乳酸脱氢酶（LDH）释放：衡量细胞膜完整性和细胞损伤程度。
6. 氧化应激指标：1)ROS（活性氧物种）检测：使用荧光探针如DCFH-DA进行检测。
2)抗氧化酶活性：如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）等。
7. 蛋白质和基因表达：1)Western blot：检测特定蛋白质的表达水平。
2)qPCR（实时定量聚合酶链反应）：检测特定基因的mRNA表达水平。
8. 细胞信号通路活性：磷酸化蛋白检测：通过Western blot检测特定蛋白的磷酸化状态来评估信号通路的激活。
9. 细胞粘附和迁移能力：1)划痕试验：评估细胞迁移能力。
2)侵袭和迁移试验：使用Transwell小室评估细胞的侵袭和迁移能力。
brdu实验原理
brdu实验原理BRDU（5-bromo-2'-deoxyuridine）是一种含有溴原子的尿嘧啶类化合物，可以代替尿嘧啶在DNA中作为核苷酸的组成部分。
BRDU实验是一种用于测定细胞增殖率的常用实验方法，它通过检测细胞中BRDU含量来确定细胞的增殖率。
BRDU实验的基本原理是，将BRDU添加到细胞培养基中，当细胞开始进行DNA合成时，BRDU就会被用作尿嘧啶的替代物，从而被纳入细胞DNA中。
在实验结束时，可以通过检测细胞中BRDU含量来确定细胞的增殖率。
BRDU实验通常用于检测细胞增殖活性，它的原理是：在细胞增殖的过程中，细胞DNA会发生合成，而BRDU是一种合成的DNA标记物，它可以与细胞DNA结合，从而被检测出来，从而可以用来检测细胞的增殖活性。
BRDU是一种抗体，它可以与DNA中的脱氧核糖核酸结合，用于检测细胞中的新陈代谢活性。
BRDU实验的原理是，将BRDU抗体添加到细胞培养基中，当细胞合成新的DNA时，BRDU抗体就会结合到新合成的DNA上，从而使细胞内新合成的DNA可以被检测到。
BRDU实验可以用来检测细胞的增殖活性，从而评估细胞的生长和发育情况。
BRDU实验是一种常用的细胞增殖检测方法，它利用含有bromodeoxyuridine（BRDU）的核苷酸来检测细胞增殖。
BRDU是一种抗肿瘤药物，它具有被细胞吞噬的特性，因此可以用来检测细胞增殖。
BRDU实验的基本原理是，在细胞增殖过程中，BRDU会被吞噬进入细胞，并且会在DNA中积累，从而可以用来检测细胞增殖。
BRDU实验的实际操作过程是，在细胞培养基中加入BRDU，细胞吞噬BRDU，BRDU被积累在DNA中，然后用抗BRDU 抗体进行免疫检测，从而检测细胞增殖情况。
Brdu实验是一种常用的检测细胞增殖的实验方法。
它是通过检测细胞内的bromodeoxyuridine（Brdu）来评估细胞增殖的。
Brdu是一种核苷酸，它和脱氧核糖核酸（DNA）的结构十分相似，能够被细胞内的DNA聚合酶所识别，被用来代替脱氧核糖核酸（DNA）在DNA复制过程中发挥作用。
PPD动物实验路线
1.实验小鼠分组：空白对照组、PPD对照组（前15天注射生理盐水，后28天注射PPD 剂量为34mg/kg.d，)、D-半乳糖对照组(200mg/kg.d，后28天注射PPD空白溶剂)、PPD+半乳糖实验组(D- 半乳糖注射15天后开始注射PPD至43天）。
2.Brdu的掺入：100mg/kg.d 第15天腹腔注射，连续注射7天 ，处死前24h，再次注射Brdu
3.水迷宫实验对小鼠空间记忆能力进行判定。
4.麻醉处死后取海马组织免疫荧光染色。
新生细胞：Brdu Sox Nestin
分化细胞：新生神经元 Brdu Dcx
成熟神经元 Brdu MAP2
星形胶质细胞: Brdu GFAP
衰老细胞染色：β-糖苷酶染色
5.海马组织总RNA提取基因芯片筛选上调下调基因。
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告5篇
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告5篇篇1一、引言肿瘤细胞增殖实验是研究肿瘤发生、发展及其相关机制的重要手段。
随着科技的进步，体外检测肿瘤细胞增殖的方法逐渐成为研究热点。
本文将对体外检测肿瘤细胞增殖的实验方法、应用及优缺点进行综述，为相关研究者提供参考。
二、实验方法1. 细胞培养细胞培养是体外检测肿瘤细胞增殖的基础。
研究者需根据实验需求选择合适的细胞系，并掌握细胞培养的基本技术，如细胞的复苏、传代、冻存等。
2. 实验试剂与仪器在进行肿瘤细胞增殖实验时，需要使用一系列的试剂和仪器，如细胞计数试剂、酶标仪、显微镜等。
这些试剂和仪器的选择对实验结果的准确性至关重要。
三、实验技术1. MTT法MTT法是一种常用的检测细胞增殖的方法，其原理是利用活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原MTT，生成蓝色结晶物并沉积在细胞中，从而反映细胞的增殖情况。
该方法具有操作简便、快速、准确等优点，在肿瘤细胞增殖实验中得到了广泛应用。
2. BrdU法BrdU法是通过检测细胞内BrdU的掺入量来反映细胞的增殖活性。
该方法需要预先在培养基中加入BrdU，然后通过特异性抗体检测BrdU的掺入量。
BrdU法具有较高的灵敏度和特异性，能够更准确地反映细胞的增殖情况。
3. 流式细胞术流式细胞术是一种能够同时检测单个细胞多个参数的技术，可以用于分析细胞的周期、凋亡、增殖等情况。
在肿瘤细胞增殖实验中，流式细胞术可以用于检测细胞的DNA含量、BrdU掺入量等指标，从而更全面地了解细胞的增殖情况。
四、应用及优缺点1. 药物筛选与评价体外检测肿瘤细胞增殖实验可以用于药物的筛选与评价。
通过检测药物对肿瘤细胞增殖的抑制作用，可以评估药物的抗肿瘤活性，为药物的进一步研究和开发提供依据。
2. 肿瘤病理学研究体外检测肿瘤细胞增殖实验还可以用于肿瘤病理学研究。
通过分析肿瘤细胞的增殖特性，可以了解肿瘤的发生、发展及其相关机制，为肿瘤的诊断和治疗提供理论依据。
3. 个体化治疗与预后判断体外检测肿瘤细胞增殖实验在个体化治疗和预后判断中也具有重要价值。
BrdU掺入实验
1、BrdU掺入实验：注释：溴脱氧尿嘧啶核苷是DNA前体胸腺嘧啶核苷类似物，通过竞争掺入S期细胞单链DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。
BrdU与胸腺嘧啶竞争掺入的强溴脱氧尿嘧啶核苷是DNA前体胸腺嘧啶核苷类似物，通过竞争掺入S期细胞单链DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。
BrdU与胸腺嘧啶竞争掺入的强度可能与细胞增殖异常有关，如肝癌细胞约11.6%的胸腺嘧啶被替代，而正常肝细胞仅有1.1%。
既往在分子遗传学等研究中常采用同位素标记，但有放射污染，技术难度大，实验周期长等缺点。
近年来非放射性标记物的研究发展迅速，然而其敏感性多数不及同位素，使实验应用受限。
自82年Gratzer制备出抗BrdU 单抗及标记检测技术不断改良提高，应用BrdU标记的敏感性已与氘胸腺嘧啶核苷相似。
目前认为BrdU是最有希望取代同位素的非放射性标记物之一。
本文综述近年来BrdU研究概况，重点介绍标记过程中有关技术问题。
一、标记技术：1、剂量和途径：BrdU可用于体内或体外标记，体内标记时，实验鼠按体重60mg-200mg/kg于鼠腹膜射，狗按体重100mg/kg静脉注射，人体以表面积150μg/m2用量，取标本前8.25-10h静脉注射，免疫组化检测。
BrdU经静脉给药一般无副作用，偶有道过量可致细胞突变。
体外标记的研究广泛而深入，通常将保存在培养液中的新鲜组织剪啐至1-2mm3大小，离心去除了上清液后，加入100μg/mlBrdU，或新鲜组织在0.3mg/ml浓度的BrdU中37摄氏度1小时，然后固定包埋，细胞标记在RPMI1640-10培养液中进行，细胞数低于1×106/ml，加入20μl的BrdU孵育202、标本处理：适当的标本处理对BrdU染色强度至关重要。
Meyer对450例乳腺癌组织体外标记总结出3点经验：切组织块＜1mm厚；固定前组织有代谢活力；封闭脱氧胸腺核苷合成酶，因此酶能使脱氧尿苷转变成脱氧胸苷，从而阻止内源性脱氧胸苷与BrdU竞争掺入DNA。
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1、BrdU掺入实验：注释：溴脱氧尿嘧啶核苷是DNA前体胸腺嘧啶核苷类似物，通过竞争掺入S期细胞单链DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。
BrdU与胸腺嘧啶竞争掺入的强溴脱氧尿嘧啶核苷是DNA前体胸腺嘧啶核苷类似物，通过竞争掺入S期细胞单链DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。
BrdU与胸腺嘧啶竞争掺入的强度可能与细胞增殖异常有关，如肝癌细胞约11.6%的胸腺嘧啶被替代，而正常肝细胞仅有1.1%。
既往在分子遗传学等研究中常采用同位素标记，但有放射污染，技术难度大，实验周期长等缺点。
近年来非放射性标记物的研究发展迅速，然而其敏感性多数不及同位素，使实验应用受限。
自82年Gratzer制备出抗BrdU 单抗及标记检测技术不断改良提高，应用BrdU标记的敏感性已与氘胸腺嘧啶核苷相似。
目前认为BrdU是最有希望取代同位素的非放射性标记物之一。
本文综述近年来BrdU研究概况，重点介绍标记过程中有关技术问题。
一、标记技术：1、剂量和途径：BrdU可用于体内或体外标记，体内标记时，实验鼠按体重60mg-200mg/kg于鼠腹膜射，狗按体重100mg/kg静脉注射，人体以表面积150μg/m2用量，取标本前8.25-10h静脉注射，免疫组化检测。
BrdU经静脉给药一般无副作用，偶有道过量可致细胞突变。
体外标记的研究广泛而深入，通常将保存在培养液中的新鲜组织剪啐至1-2mm3大小，离心去除了上清液后，加入100μg/mlBrdU，或新鲜组织在0.3mg/ml浓度的BrdU中37摄氏度1小时，然后固定包埋，细胞标记在RPMI1640-10培养液中进行，细胞数低于1×106/ml，加入20μl的BrdU孵育202、标本处理：适当的标本处理对BrdU染色强度至关重要。
Meyer对450例乳腺癌组织体外标记总结出3点经验：切组织块＜1mm厚；固定前组织有代谢活力；封闭脱氧胸腺核苷合成酶，因此酶能使脱氧尿苷转变成脱氧胸苷，从而阻止内源性脱氧胸苷与BrdU竞争掺入DNA。
Xiang最近回顾大量文献。
广泛讨论固定包埋方法后，制备狗胫骨骨折模型，设3组对照研究，结果证实70%乙醇固定，epon包埋未脱钙狗骨组织的BrdU染色效果最好。
Swales和Smith用BrdU单抗在超微水平研究昆虫血脑屏障，重点探讨标记过程对细胞超微结构特征的影响。
比较4种固定后得出如下结论：单用多聚甲醛固定可获得良好的标记效果，但细胞结构易损伤，可加入单节显性戊二醛联合固定；等渗缓冲液加蔗糖磷酸/盐酸缓血酸胺缓冲剂或PBS 对保持细胞结构有较好效果；用脱氧胆酸处理可增加标记，促进抗体联接，该项研究清楚显示线粒体，高尔基体、内质网等结果器。
也有人建议如预备蛋白酶消化时，可用甲醛固定，而不用Carnoy或乙醇。
3、DNA变性BrdU掺入单链DNA碱基序列须经酸、碱、酶或加热等打开DNA双螺旋结构中的氢键，离子键和碱基推积力使DNA双链分离单链。
DNA变性方式及程度直接影响标记效果，Williamson 等回顾123份关于结直肠癌的告，发现用酸变性约占80%，在0.05-3.00MHCL间设9个浓度比较分析，对每种浓度作用的组织切片分别数5×103个细胞，结果冰冻切片＜0.01MhCL浓度变性后标记指数最高。
低浓度酸产生高LI的原因可能DNA双链失稳态，组胺蛋白离解产生易使抗原掺入的SSSN段，另有人提出用低浓度酸从DNA离解出组胺蛋白后加热变性，可避免组胺产生稳定DNA低抗热变性的作用。
消除组胺可降低原位DNA的熔解温度阈，酸预处理使染色质核小体结构几乎全部破坏，从而使DNA解螺旋更广泛。
坚持热变性者认为加热较酸对BrdU掺入能提供更多结合部位。
此外，变性和单抗孵育须严格衔接，如变性后BU20a 单抗孵育延误1小时，BrdU阳性细胞核标记数便从6.6%降至1.4%，说明影响LI的因素复杂，加单抗前仔细研究变性技术及干扰因素，从而获得BrdU标记应有的高LI是必要的。
另外采作BrdU标记核酸分子可能对DNA变性有非凡要求，需进一步探索。
4、标记染色：如何延长BrdU作用时间以标记新进入S期的细胞。
使增殖缓慢的细胞标记率提高，是另一个重要问题，早年有人用恒定套管装置和非生物降解弹丸对大鼠研究，但结果重复性差。
近来Maysinger研制一种具有很好的生物相容性可降解的微囊用于体内、外标记，通过电镜、影像技术及免疫细胞化学分析，证实微囊中BrdU能有效掺入鼠脑疾患四周的增生细胞核中，可连续释放高浓度BrdU达48-50小时。
另有人研究渗透性微囊和缓弹丸，发现标记效果均优于单次注射。
研究非放射性标记物常与放射性标记物相比，以证实特异性，敏感性及其它有关特性，在同一靶细胞比较似乎更具有说服力。
然而3H-TdR和BrdU的比标记研究不能在同一时间给药，因两种标记物在同一个细胞增殖周期内竞争胸腺嘧啶激酶。
有人认为两种标记先后给药均可，另有主张先标BrdU，理由是3H-TdR放射自显影乳胶用胰酶去除时偶有细胞丢失，致其后BrdU标记信号损失，Lin等强调BrdU标记时间较3H-TdR长约50分钟，如先标记3H-TdR 可望BrdU能标记更多早期S期细胞。
Thoolen从另外角度观察两种标记染色之间关系，将成年的雄鼠分3组，腹膜下分别注射3H-TdR，BrdU和两中标记物曲小时后取睾丸标记处理，免疫金银法染色，分别计数精原细胞每组平均阳性胞核数量，结果3H-TdR标记为162个，BrdU标记为166个，双标记为146个说明90%BrdU掺入的清原细胞显示3HTdR标记，另有10%胞核仅显示一种标记，无交叉性。
3H-TdR的β射线散射范围有限，使放射自显影反应不可能超过远离乳胶1μm以上的胞核，这些胞核或许能被BrdU标记显色，少数细胞仅接受一种标记的确切原因不清楚，也可能与碱基配对所形成的氢键数量有关。
此外已证实微波，氯化锂13】、氟尿嘧啶核苷等均有助于BrdU标记。
二、检测：BrdU特异掺入S期细胞，通常测定其LI，即S期细胞占细胞周期的百分数，标记阳性为光镜下致密覆盖于胞核上的褐色沉淀物。
检测方法用单抗或多抗的免疫化学法，也可用DNA荧光染料染色的细胞化学法。
目前常用免疫金银法，因该法不受内源性过氧化酶影响，较免疫酶标法有更好对照背景。
不同类型细胞DNA对变性敏感性的差别可能由染色质结构决定，某些类型对变性反应迟钝，使检测不敏感或失败，有人提倡单抗联接BrdU后用FCM检测较免疫组化法更客观省时，且可测出肿瘤倍体。
但需注重恶性瘤常伴组织及细胞坏死，BrdU 不能掺入死亡细胞，故用FCM分析须除外死亡细胞，否则可被错误当成静止细胞。
胰酶和Dnase混合孵育细胞标本有可能克服死亡细胞干扰三、BrdU标记和3H-TdR标记的比较与32P、35S等常用放射性核素相比，3H-TdR释放的β-粒子能量低，散射极少，因此感光乳胶上的成影分辨最高，放射性损伤相对较小，且半衰期较长。
3H-TdR标记用放射自显影术和闪烁计数检测，灵敏度高，结果确切。
其应用价值已经肯定。
因此研究非放射性标记物多以3H-TdR为标准对照。
在肿瘤生物学和细胞增殖动力学的研究中，Mayer在试管内分析一组人乳腺癌大样本，比较BrdU和3H-TdR的标记效果，3H-TdR标记234例，平均LI为6.9±0.4%；BrdU标记450例，平均LI6.4±0.3%，两种标记物无显著差异。
BrdU和3H-TdR 标记的肿瘤大小，组织类型，淋巴结转移，胞核大小以及DNA倍体均正相关，充分说明两种标记物之间的密切关系。
在同一靶细胞标记也证实90%以上标记3H-TdR阳性细胞也标记有BrdU，反之亦然。
四、应用：BrdU标记用于DNA修复、复制、分子杂交的重组DNA技术可替代同位素标记，在分子生物学、遗传学、细胞增殖动力学，肿瘤生物学、免疫学、药理和药代动力等领域有广泛应用价值。
Kitazaws等用BrdU标记对白血病细胞HL-60和K562基因表达进行研究，将标记DNA 和RNA原位杂交，发现80%用于合成DNA的胸腺嘧啶被BrdU替代。
Stevenson等用BrdU单抗和FCM对哺乳动物细胞BALb/C，3T3，Colon26等6种细胞系研究杀瘤性巨噬细胞的细胞毒作用对细胞动力学的影响。
受试细胞系接触Mφ之前，先经BrdU脉冲标记，即在适当时间加入BrdU，只作用短时间马上洗去，以保证BrdU掺入DNA的精确时间，结果发现在12小时的细胞培养中，6促细胞系的细胞均可被杀瘤性Mφ阻滞在细胞周期的每一个时相内。
近几年来，由于BrdU标记方法敏感、简单和迅速，该技术在肿瘤增殖动力学领域的研究也非常活跃。
目前BrdU标记不仅用于肿瘤诊断，评估预后，对指导肿瘤治疗已受重视，将活检标本LI作为术后的是否行辅助治疗的依据，尤其对增大的区域淋巴结价值更大，区域淋巴结已转移病例可按LI高低确定化疗方案，现已明确小剂量化疗后肿瘤复发者是LI高的病例，而不是LI低者。
值得提出的是BrdU的LI较FCM的DI更客观可靠，因FCM难于识别双相二倍体和异倍体肿瘤DNA分布的S期细胞，而且DI的S期细胞数也可能含有死亡细胞。
此外已证实BrdU替代腺嘧啶所合成的DNA对放射性物质更敏感，使肿瘤对放疗的敏感性增加。
可以预言，BrdU标记作为一种新近倍受重视的材料和方法在生物医学领域的应用前景将会十分广阔。
BrdU掺入试验详细步骤：第1天1.用100μM的BrdU工作液（用5mg/ml的储存液以6μL/mL稀释而成）标记细胞。
Ø胚胎干细胞，30分钟Ø3T3细胞，2.5小时Ø二倍体成纤维细胞，4－6小时2.胰酶消化细胞，用PBS洗脱，400×g或1700rpm离心5分钟，去上清，加入10 mL 70% EtOH重悬。
3.保存在－20℃过夜或数天。
第2天1.将第一天的标本离心去上清，并用洗涤缓冲液（PBS + 0.5% IFS）洗涤。
2.离心去上清，以0.5 mL 2M HCl + 0.5% IFS （必须新鲜配制！），室温孵育20分钟。
3.加入1ml洗涤缓冲液洗涤细胞。
4.离心去上清，以0.1M的四硼酸钠（Na2B4O7）重悬细胞，室温孵育2分钟。
5.用1ml洗涤缓冲液洗涤细胞2次（分出一部分细胞用于PI单染，见第10步）6.用50μL洗涤缓冲液重悬细胞，加入anti-BrdU抗体，4℃孵育20分钟。
7.加入1.5ml洗涤缓冲液洗一次。
8.用50μL洗涤缓冲液重悬细胞，加入用于封闭Fc段的抗体（如FITC-conjugated rabbit anti-mouse (F(ab')2 fragments等），4℃孵育20分钟。
9.加入1.5ml洗涤缓冲液洗涤一次。