实验四植物抗逆生理
低温胁迫实验报告

一、实验背景低温胁迫是植物生长过程中常见的非生物胁迫之一,对植物的生长发育、产量和品质等产生严重影响。
为了研究低温胁迫对植物的影响及植物的抗逆性,本实验以某植物品种为研究对象,通过模拟低温环境,探讨低温胁迫对植物生理指标、形态指标及分子生物学水平的影响。
二、实验材料与方法1. 实验材料实验材料为某植物品种的幼苗,共分为对照组和低温胁迫组。
2. 实验方法(1)低温胁迫处理将实验材料分为对照组和低温胁迫组,低温胁迫组置于4℃低温环境下处理,对照组置于室温(25℃)条件下。
每组设置3个重复,每个重复20株植物。
(2)生理指标测定在低温胁迫处理0d、3d、6d、9d、12d时,分别采集植物叶片,测定以下生理指标:- 叶绿素含量:采用丙酮法测定;- 可溶性糖含量:采用蒽酮法测定;- 可溶性蛋白含量:采用考马斯亮蓝G-250法测定;- 丙二醛(MDA)含量:采用硫代巴比妥酸法测定;- 脯氨酸含量:采用酸性茚三酮法测定。
(3)形态指标观察在低温胁迫处理0d、3d、6d、9d、12d时,观察植物叶片的形态变化,记录叶片颜色、叶片厚度、叶片伸展度等指标。
(4)分子生物学水平研究在低温胁迫处理0d、3d、6d、9d、12d时,采集植物叶片,提取总RNA,进行Real-time PCR检测低温胁迫对关键基因表达的影响。
三、实验结果与分析1. 生理指标变化(1)叶绿素含量:随着低温胁迫时间的延长,低温胁迫组叶绿素含量呈下降趋势,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。
(2)可溶性糖含量:低温胁迫处理初期,可溶性糖含量有所上升,随后逐渐下降,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。
(3)可溶性蛋白含量:低温胁迫处理初期,可溶性蛋白含量有所上升,随后逐渐下降,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。
(4)丙二醛(MDA)含量:低温胁迫处理初期,MDA含量呈上升趋势,随后逐渐下降,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。
动物抗逆性能实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在通过模拟不同逆境条件,评估实验动物(如小鼠)的抗逆性能,包括对高温、低温、缺氧、脱水等逆境的耐受能力和适应性。
通过本次实验,旨在了解动物在不同逆境下的生理和行为反应,为动物健康管理、疾病预防和抗逆育种提供科学依据。
二、实验动物与材料实验动物:昆明种小鼠,体重20-25克,雌雄各半。
实验材料:1. 高温模拟设备:实验室内恒温箱,温度可调至40℃。
2. 低温模拟设备:实验室内低温箱,温度可调至-20℃。
3. 缺氧模拟设备:实验室内缺氧箱,模拟氧气浓度降低至10%。
4. 脱水模拟设备:实验室内脱水箱,模拟动物水分丢失至体重减少5%。
5. 实验试剂:生理盐水、麻醉剂、血液采集管等。
三、实验方法1. 高温逆境实验:将小鼠放入恒温箱中,调节温度至40℃,观察并记录小鼠的存活时间、行为反应、生理指标(如心率、呼吸频率)等。
2. 低温逆境实验:将小鼠放入低温箱中,调节温度至-20℃,观察并记录小鼠的存活时间、行为反应、生理指标等。
3. 缺氧逆境实验:将小鼠放入缺氧箱中,调节氧气浓度至10%,观察并记录小鼠的存活时间、行为反应、生理指标等。
4. 脱水逆境实验:将小鼠放入脱水箱中,模拟水分丢失至体重减少5%,观察并记录小鼠的存活时间、行为反应、生理指标等。
四、实验结果与分析1. 高温逆境实验结果:小鼠在高温环境下表现出明显的应激反应,如呼吸加快、心率升高、活动减少等。
大部分小鼠在高温环境下存活时间约为2小时,部分小鼠出现脱水、昏迷等症状。
2. 低温逆境实验结果:小鼠在低温环境下出现颤抖、心率降低、呼吸减慢等反应。
大部分小鼠在低温环境下存活时间约为1小时,部分小鼠出现体温下降、肌肉僵硬等症状。
3. 缺氧逆境实验结果:小鼠在缺氧环境下表现出明显的缺氧症状,如呼吸急促、心率加快、活动减少等。
大部分小鼠在缺氧环境下存活时间约为30分钟,部分小鼠出现昏迷、死亡等症状。
4. 脱水逆境实验结果:小鼠在脱水环境下出现明显的脱水症状,如皮肤干燥、体重减轻、食欲下降等。
植物环割实验报告

一、实验目的1. 观察植物环割后生理反应的变化。
2. 研究植物环割对植物生长、生理代谢及抗逆能力的影响。
3. 探讨植物环割在农业生产中的应用价值。
二、实验原理环割是指利用植物环割技术,在植物茎部或枝条上环割一圈,切断韧皮部中的筛管,使养分运输受阻,从而引起植物体内的一系列生理反应。
环割后的植物会表现出生长减缓、叶片黄化、果实变小等症状,同时,植物体内的激素水平、代谢产物等也会发生变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料- 植物品种:苹果、桃、梨等果树- 环割工具:环割刀、尺子、记号笔- 实验器具:剪刀、镊子、天平、显微镜等2. 实验方法(1)选择健康、生长状况良好的植物作为实验材料。
(2)在植物茎部或枝条上选择适当的位置进行环割,环割宽度约为茎直径的1/4。
(3)环割后,定期观察植物的生长状况、叶片颜色、果实大小等指标。
(4)采集环割前后的植物叶片、果实等样品,进行激素水平、代谢产物等指标的测定。
(5)通过显微镜观察植物细胞结构的变化。
四、实验结果与分析1. 植物生长状况环割后,植物的生长速度明显减缓,叶片颜色变浅,果实变小。
这是由于环割后养分运输受阻,导致植物生长所需的营养物质供应不足。
2. 激素水平环割后,植物体内的生长素、细胞分裂素等激素水平发生显著变化。
生长素水平下降,细胞分裂素水平上升,这有利于植物对环割应激的适应。
3. 代谢产物环割后,植物体内的代谢产物发生变化。
如环割后,植物体内的抗氧化物质含量增加,这有利于植物抵御环割带来的氧化损伤。
4. 细胞结构通过显微镜观察,发现环割后植物细胞结构发生一定程度的改变。
如细胞壁增厚、细胞质密度增加等,这有利于植物抵御环割带来的损伤。
五、结论与讨论1. 环割可以引起植物生长减缓、叶片黄化、果实变小等症状,但有利于植物对环割应激的适应。
2. 环割可以影响植物体内的激素水平、代谢产物等指标,有利于植物抵御环割带来的氧化损伤。
3. 环割技术在农业生产中具有一定的应用价值,如用于促进果实发育、提高果实品质等。
00植物抗逆境的分子生物学研究进展_综述_

安徽农业大学学报,2000,27(2):204~208Journal of A nhui A gricultural U niversity植物抗逆境的分子生物学研究进展(综述)①韦朝领,袁家明(安徽农业大学农学系,合肥230036)摘 要:本文就国内外有关植物抗逆境的分子生物学研究作一概述。
主要介绍植物在温度、水分和盐逆境下产生的诱导物质(如蛋白等),以及控制其基因的特征、表达和调控的研究现状。
并提出和讨论了有关该领域有待进一步探讨的问题。
关键词:植物抗逆境;诱导蛋白;基因 中图分类号:Q945文献标识码:A文章编号:100022197(2000)022*******自然界中,植物生长在开放的系统中,经常遇到恶劣环境的影响,主要有强光、高温、干旱、水涝和高盐等逆境的胁迫。
人们就逆境对植物影响的认识和研究,首先是从表观生理指标的一般性描述开始的,其次为植物在各种逆境下产生的生理生化、生态变化和生理调节机制,最后发展到分子水平,进一步探讨植物对不同逆境的感应、信号传导、基因表达与调控、蛋白质组装和细胞膜功能获得。
这些为更深入了解植物对不同逆境响应的分子机理和研究人工调控的生物技术等方面展示出良好的前景。
为了对其有个基础、全面的认识,本文针对植物逆境诱导蛋白、基因及其表达调控作一综述。
1 植物逆境诱导蛋白111 温度诱导蛋白11111 抗冻蛋白 抗冻蛋白(autifreeze p ro teins,A FP s)是一种抑制冰晶生长的蛋白质,能以非依数形式降低水溶液的冰点。
它是直接和冰晶的形式相互作用的蛋白质。
A FP s从本世纪60年代被发现以后,先后引起许多研究者的兴趣。
最早,A FP s是从两极冰河中的鱼类血液中发现的。
它从结构上可分成四种类型:即抗冻糖蛋白(A FGP3), 型抗冻蛋白(A FP ), 型抗冻蛋白(A FP ), 型抗冻蛋白(A FP )。
A FGP s主要由三肽糖单体串联重复而成,分子量一般在215~3317KD之间。
植物抗性生理-植物生理

第十三章植物的抗性生理植物体是一个开放体系,生存于自然环境。
自然环境不是恒定不变的,天南地北,水热条件相差悬殊,即使同一地区,一年四季也有冷热旱涝之分。
对植物产生伤害的环境称为逆境(stress),又称胁迫。
例如寒冷、高温、干旱、盐渍等。
有些植物不能适应这些不良环境,无法生存。
有些植物却能适应这些环境,生存下去。
这种对不良环境的适应性和抵抗力,称为植物的抗性(hardiness)。
植物的抗性生理(hardiness physiology)就是研究不良环境对植物生命活动的影响,以及植物对不良环境的抗御能力。
我国幅员辽阔,地形复杂,气候多变,各地都有其特殊的环境,所以,抗性生理与农林生产关系极为密切。
第一节抗性生理通论一、逆境对植物的伤害逆境会伤害植物,严重时会导致死亡。
逆境可使细胞脱水,膜系统破坏,一切位于膜上的酶活性紊乱,各种代谢活性无序进行,透性加大。
逆境会使光合速率下降,同化产物形成减少,因为组织缺水引起气孔关闭,叶绿体受伤,有关光合过程的酶失活或变性。
呼吸速率也发生变化,其变化进程因逆境种类而异。
冰冻、高温、盐渍和淹水胁迫时,呼吸逐渐下降;零上低温和干旱胁迫时,呼吸先升后降;感染病菌时,呼吸显著增高。
此外,逆境诱导糖类和蛋白质转变成可溶性化合物增加,这与合成酶活性下降,水解酶活性增强有关。
二、植物对逆境的适应植物对逆境的适应(或抵抗)主要包括两个方面:避逆性(stress avoidance)和耐逆性(stress tolerance)。
前者是指植物对不良环境在时间上或空间上躲避开,如沙漠中的植物只在雨季生长,阴生植物在树荫下生长。
后者是指植物能够忍受逆境的作用。
植物有各种各样抵抗或适应逆境的本领。
在形态上,有以根系发达、叶小以适应干旱条件;有扩大根部通气组织以适应淹水条件;有生长停止,进入休眠,以迎接冬季低温来临,等等。
在生理上,以形成胁迫蛋白、增加渗透调节物质和脱落酸含量的方式,提高细胞对各种逆境的抵抗能力。
植物生理学课程教学大纲

植物⽣理学课程教学⼤纲《植物⽣理学》课程教学⼤纲课程名称:植物⽣理学课程性质:专业基础课课程代码:J30024学分: 4.5理论学时:54实验学时:18⾯向专业:园艺(专升本)先修课程:植物学执笔⼈:⽥伟审定⼈:宋伊真第⼀部分:理论教学部分⼀、说明1.课程的性质、地位和任务植物⽣理学是研究植物⽣命活动规律的科学,是⽣命科学主要学科之⼀,也是植物⽣产类各专业的重要专业基础课。
⾼等绿⾊植物是植物⽣理学研究的主要对象,其⽣命活动是它研究的核⼼问题和主要内容,在了解植物⽣命活动的基本规律后对植物的⽣长发育进⾏有效地控制以满⾜⼈类的需求。
2.课程教学基本要求植物⽣理学主要介绍植物的细胞结构与功能、⽔分代谢、矿质与氮素营养、光合作⽤、呼吸作⽤、同化物的运输与分配、信号转导、植物⽣长物质、光形态建成与运动、⽣长⽣理、成花⽣理、⽣殖和衰⽼及抗逆⽣理等⽅⾯的基本概念、原理、调控及应⽤。
在教学过程中,将课程基本理论与⽣产实践有机结合;同时运⽤多种教学⼿段,注重学⽣实践创新能⼒的培养。
⼆、教学内容与课时分配第⼀章绪论(2学时)1.植物⽣理学的定义、任务和内容2.植物⽣理学的产⽣和发展3.植物⽣理学的展望教学重点:植物⽣理学的研究内容。
教学难点:植物⽣理学今后研究的主要⽅向。
教学⽅法:讲授式、启发式、讨论式思考题:了解植物⽣理学的研究内容;了解植物⽣理学的发展概况及今后研究的主要⽅向。
第⼆章植物的细胞⽣理(2学时)1.植物细胞概述2.细胞壁3.⽣物膜4.植物亚显微结构教学重点:原⽣质的性质教学难点:原⽣质的性质与抗逆性的关系教学⽅法:讲授式、启发式、讨论式思考题:原⽣质的特点与植物新陈代谢和抗逆性的关系?第三章植物的⽔分⽣理(7学时)1.植物对⽔分的需要2.植物细胞对⽔分的吸收3.植物根系吸⽔和⽔分向上运输4.蒸腾作⽤5.合理灌溉的⽣理基础教学重点:⽔势、渗透势的概念,⽔存在的⽅式;植物细胞与根系吸⽔的⽅式、⽓孔运动的机理教学难点:⽔势的概念及其组成教学⽅法:讲授式、启发式、讨论式思考题:1.植物组织⽔势包括哪⼏部分组成?2.从植物⽣理学的⾓度,分析农谚“有收⽆收在于⽔”的道理。
植物的抗逆能力

植物的抗逆能力植物作为生物界的重要组成部分,具备了很强的适应能力和抗逆能力。
在面对各种不利环境因素时,植物能够通过一系列的调节机制来保持自身的生长和发育。
本文将从植物的抗旱、抗盐和抗寒三个方面来探讨植物的抗逆能力。
一、植物的抗旱能力干旱是全球范围内普遍存在的环境问题,对植物生长和发育产生了巨大的影响。
然而,植物通过一系列的适应机制来提高自身的抗旱能力。
首先,植物通过调控气孔开闭来减少水分蒸散,降低水分流失速度。
其次,植物在干旱条件下会启动一系列的抗氧化反应,增强细胞的抗氧化能力,减少氧自由基对细胞的损伤。
此外,植物在根系方面也发挥着重要的作用,通过增长根系长度和根毛数量来提高植物吸水的能力。
二、植物的抗盐能力盐碱地在全球范围内广泛存在,对植物的生长和发育造成了巨大的威胁。
为了适应盐碱环境,植物演化出了一系列的抗盐机制。
首先,植物通过积累渗透物质,如脯氨酸和可溶性糖类,来提高细胞的渗透压,减少盐分对细胞的损伤。
其次,植物根系的盐分排泄也对提高植物的抗盐能力起到了重要的作用。
此外,植物还可以通过调节离子通道的活性来控制盐分的吸收和排泄,从而降低盐分对植物的影响。
三、植物的抗寒能力寒冷环境对植物的生长和发育也有着重要影响。
为了适应低温条件,植物进化出了一系列的抗寒机制。
首先,植物通过增加细胞膜的不饱和脂肪酸含量来提高细胞膜的流动性,减少低温对细胞膜的损伤。
其次,植物还可以合成寒冷蛋白来提高细胞的抗寒能力。
此外,植物还可以通过调节抗氧化酶的活性和积累低分子量抗氧化物来对抗寒冷环境带来的氧化损伤。
综上所述,植物具备了很强的抗逆能力,可以通过一系列的适应机制来应对不利环境因素。
植物的抗旱、抗盐和抗寒能力是其适应环境变化的重要特征,对于维护生态平衡和农业生产具有重要意义。
未来的研究还需要深入探讨植物抗逆机制的分子基础,以期为植物的遗传改良和培育抗逆品种提供理论基础。
植物益生菌实验报告

植物益生菌实验报告植物益生菌实验报告引言:植物益生菌是一类对植物有益的微生物,可以促进植物生长、增强植物抗逆能力、改善土壤环境等。
为了探究植物益生菌的作用机制和应用前景,我们进行了一系列的实验研究。
实验一:植物益生菌对植物生长的影响我们选取了几种常见的农作物植物,如小麦、水稻和玉米,分别进行了植物益生菌处理和对照组的对比实验。
在相同的生长条件下,我们观察到益生菌处理组的植物生长更加健壮,根系发达,叶片更绿,生长速度更快。
这表明植物益生菌可以促进植物的生长和发育。
实验二:植物益生菌对植物抗逆能力的影响为了了解植物益生菌对植物抗逆能力的影响,我们进行了干旱和盐碱胁迫实验。
在干旱胁迫下,益生菌处理组的植物相比对照组表现出更好的耐旱性,叶片水分含量更高,叶片脱水速度更慢。
在盐碱胁迫下,益生菌处理组的植物叶片离子平衡更稳定,叶片脱水现象更少。
这说明植物益生菌可以增强植物的抗旱和抗盐碱能力。
实验三:植物益生菌对土壤环境的改善为了探究植物益生菌对土壤环境的改善作用,我们进行了土壤酸碱度和微生物数量的测定。
结果显示,益生菌处理组的土壤酸碱度更为中性,而对照组的土壤酸性较重。
此外,益生菌处理组的土壤中微生物数量更多,包括有益微生物和分解有机物的微生物。
这说明植物益生菌可以改善土壤环境,提高土壤的肥力和养分利用率。
实验四:植物益生菌的应用前景基于以上实验结果,我们认为植物益生菌具有广阔的应用前景。
首先,在农业生产中,植物益生菌可以作为一种生物肥料使用,代替传统化学肥料,降低对环境的污染。
其次,植物益生菌可以应用于园艺和花卉栽培,改善植物的生长状况,增加产量和品质。
此外,植物益生菌还可以应用于环境修复和植被恢复,促进土壤修复和生态系统的健康发展。
结论:综上所述,植物益生菌通过促进植物生长、增强植物抗逆能力和改善土壤环境,对农业生产和生态环境具有重要意义。
我们的实验结果表明,植物益生菌具有广阔的应用前景,但仍需要进一步的研究和应用推广。
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3.4膜透性的测定
1 选用18个三角瓶,分为三组,每组六个,第一组三角瓶中加入未用KNO3处理的小麦叶片,叶片蒸馏水冲洗干净,然后用吸水纸吸干水分,用剪刀把叶片剪成1cm的小段,每个瓶中准确称量0.5g叶片,再往每个瓶中加入10ml去离子水,六个瓶中三个为A处理,三个为B处理;第二组的六个三角瓶中加入用0.3%梯度KNO3处理过的叶片0.5g,都加入10ml蒸馏水,分成A、B两个处理;用0.6%梯度KNO3处理过的小麦叶片也是同上面的步骤一样;
1.2.6可溶性糖含量的测定(蒽酮法)
1.材料:植物叶片。
2.仪器设备:离心机,离心管,分光光度计,电子分析天平,恒温水浴,研钵,试管,移液管,试管架,移液管架,活性炭,漏斗,剪刀,玻璃棒。
3.试剂
(1)浓硫酸;
(2) 80 %乙醇。
(3)葡萄糖标准溶液( 100 μg/mL ):准确称取 100 mg 分析纯无水葡萄糖,溶于蒸馏水并定容至 100 mL ,使用时再稀释 10 倍( 100 μg/mL )。
前言
在农业生产中,作物经常会遇到各种不良的环境条件,如干旱、洪涝、低温、高温、盐渍以及病虫侵染等,这些对植物产生伤害的环境,又称为胁迫也就是植物的逆境。盐分胁迫主要是由渗透胁迫和离子胁迫组成的在盐分胁迫下植物的外部形态和内部的生理生化特性都发生了一系列的变化,有些变化是盐胁迫伤害的结果,是植物对逆境条件的消极反应,有些变化则是植物对逆境的积极反应,有利于对不利环境条件的适应。盐分对植物的伤害是多种多样的。主要包括:
1.2.5丙二醛(MDA)含量的测定
10%三氯乙酸;0.6%硫代巴比妥酸(TBA)溶液;石英砂;
10%三氯乙酸:称取三氯乙酸55.5556g加水溶解定容至500ml;
0.6%硫代巴比妥酸(用10%三氯乙酸配制):称0.6707g TBA加10%TCA溶解定容至100ml(4℃贮存)。
仪器 :离心机,离心管,分光光度计,电子分析天平,恒温水浴,研钵,试管,移液管,试管架,移液管架,洗耳球,剪刀。
准确称取100mg分析纯无水葡萄糖溶于蒸馏水并定容至100ml使用时再稀释10100gml蒽酮溶于80浓硫酸将98浓硫酸稀释把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中1000ml中冷却至室温贮于具塞棕色瓶内冰箱保存可使用实验设计将种植的小麦用不同浓度梯度的盐溶液提前24小时预处理盐溶液的浓度分别为003060梯度的作为对照做三次重复
4用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中,直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至25ml,摇匀;
5把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内,以95%乙醇为空白,在波长663nm和645nm下测定吸光度。
3.2脯氨酸含量的测定
3.3.1脯氨酸标准曲线的制作
1取6支试管,编号,按下表配制每管含量为0~12ug的脯氨酸标准液。加入表中试剂后,置于沸水浴中加热20min。取出冷却,各试管再加入4ml甲苯,振荡30秒钟,静置片刻,使色素全部转至甲苯溶液。
3.3POD酶活性的测定
1取样 取0.3g左右的叶片,放在冰凉的研钵下,加入POD提取液4ml,快速研磨,研磨完成后,直接倒入离心管中,放到4℃冰箱冷藏。(做3次重复);
2离心 调整离心机的转速和时间,12000转下离心6min,离心温度在-4~4℃;
3反应步 取上清液40微升(0.04ml)于试管中,加入3ml反应液,混匀,之后放在35℃水浴中保温5min;
3实验步骤
3.1叶绿素含量的测定
1取新鲜植物叶片(或其它绿色组织),擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀;
2称取剪碎的新鲜样品 0.2g ,分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及2~3ml 95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10ml,继续研磨至组织变白。静置3~5min;
3取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中;
2 把所有的三角瓶抽真空20min;
3 测定每组中A处理的电导率;
4 将每组B处理的三角瓶用保鲜膜封口,放入恒温培养箱中80℃下处理15min,取出冷却至室温,测定他们的电导率;
3.5丙二醛(MDA)含量的测定
1提取
采用硫代巴比妥酸显色法。取叶片,洗净擦干后去中脉。称取0.5 g样品,加5%三氯乙酸2 mL和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8ml 三氯乙酸进一步研磨,匀浆后4000 rpm,离心10min。
盐胁迫对小麦抗逆生理指标的影响
摘要:盐胁迫是影响农作物产量及质量的主要非生物因素之一,盐胁迫通过渗透胁迫和离子胁迫以及由此引起的营养不均衡影响植物的生长和发育,破坏植物的生理生化功能,最终导致植物细胞及植物体本身的死亡。因此,探究盐胁迫对农作物的影响以及盐害机理,提高农作物的耐盐性,从而提高盐渍土的农作物产量及质量,具有重要的理论和现实意义。土壤溶液中可溶性盐含量的增加将导致溶液渗透压增大,引起植物发生生理干早,从而抑制植物正常生长。盐胁迫使植物光合速率下降、生长受抑制、衰老加速,其对植物的危害主要包括渗透胁迫和离子胁迫,且渗透胁迫是盐胁迫下最早也是最明显的影响因素。本实验通过测定:叶绿素、脯氨酸、膜透性、POD、可溶性糖、MDA。研究小麦幼苗在盐胁迫的情况下生理的变化。
V为植物样品稀释后的体积(ml)-----准曲线计算
W为植物组织鲜重量(g)-------------0.1g
4结果与分析
4.1叶绿素含量的测定
叶绿素含量测定的吸光值如下表1所示
表1提取液吸光度值
重复一
重复二
重复三
0梯度
663nm
0.824
试剂
管号
0
1
2
3
4
5
10μg·ml-1脯氨酸标准液(ml)
蒸馏水(ml)
冰醋酸(ml)
2.5﹪酸性茚三酮(ml)
0
2
2
3
0.2
1.8
2
3
0.4
1.6
2
3
0.6
1.4
2
3
0.8
1.2
2
3
1.0
1.0
2
3
2 用移液管轻轻吸取各管上层脯氨酸甲苯溶液至比色杯中,以甲苯溶液为空白对照,在520mm波长处测定吸光度(A)值。
0.607
0.749
645nm
0.299
0.217
0.268
0.2梯度
663nm
1.143
0.964
0.939
645nm
0.572
0.485
0.470
0.4梯度
663nm
0.844
1.097
0.789
645nm
0.404
0.524
0.379
将上述表格中的吸光值代入下面公式,计算出叶绿素含量:
叶绿素a的含量= 12.7OD663- 2.69OD645;
3.6.2显色及比色
吸取上述糖提取液1mL,放入一干洁的试管中,加蒽酮试剂5mL混合之,于沸水浴中煮沸10分钟,取出冷却,然后于分光光度计上进行测定,波长为625nm,测得吸光度。从标准曲线上查得滤液中得糖含量(或经直线回归公式计算),然后再行计算样品中含糖百分数。
3.6.3绘制标准曲线
取标准葡萄糖溶液将其稀释成一系列不同浓度的溶液,浓度分别为每mL含糖0、5、10、20、40、60、80μg。按上述方法分别测得其吸光度,然后绘制A625-糖浓度曲线,或进行直线回归求得直线方程。
(3)生理紊乱:盐分过多会降低蛋白质的合成速率,相对加速储藏蛋白质的水解,造成体内氨基酸的积累过多,产生过多的氧自由基和氨,对植物造成伤害。盐分过多也抑制光合速率,叶绿体趋于分解,叶绿素被破坏,叶绿素和胡萝卜素的生物合成受干扰,气孔关闭,光合下降。
总之,在盐分胁迫下,植物会产生一些反应,以忍受或适应盐的环境。
2显色
取上清液2 mL,加0.6% TBA 2 mL,混合后在100℃水浴上煮沸30 min,迅速在冰浴上冷却后再离心一次。分别测定上清液在450nm、532 nm和600 nm处的吸光度值。
3.6可溶性糖含量的测定(蒽酮法)
3.6.1可溶性糖的提取
称取0.5g的新鲜植物(青菜)叶片,于研钵中加80%酒精4ml,仔细研磨成匀浆,倒入离心管内,置于80℃水浴中不断搅拌30min,离心10分钟(5000转/min),收集上清液于10ml的刻度试管中,其残渣加2ml80%酒精重复提1次,合并上清液。在上清液中加0.5g活性炭,80℃水浴脱色30min,定容至10ml,过滤后取滤液(稀释10倍或20倍后)测定。
(4)蒽酮试剂:称取 1.0 g 蒽酮,溶于 80% 浓硫酸(将 98% 浓硫酸稀释,把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中) 1000 mL 中,冷却至室温,贮于具塞棕色瓶内,冰箱保存,可使用 2 ~ 3 周。
2实验设计
将种植的小麦用不同浓度梯度的盐溶液提前24小时预处理,盐溶液的浓度分别为0、0.3%、0.6%,0梯度的作为对照,做三次重复。
叶绿素b的含量= 22.9OD645- 4.86OD663;
3 标准曲线的绘制
以脯氨酸含量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
3.3.2样品的测定
1 脯氨酸的提取
称取不同处理的植物叶片各0.5g,分别置大试管中,然后向各管分别加入5ml 3%的磺基水杨酸溶液,在沸水浴中提取10min(提取过程中要经常摇动),冷却后过滤于干净的试管中,滤液即为脯氨酸的提取液。
仪器:分光光度计;电子分析天平;离心机;小烧杯;普通试管;移液管;注射器;恒温水浴锅;漏斗;漏斗架;滤纸;剪刀;洗耳球。
1.2.3细胞膜透性测定
蒸馏水,去离子水;
仪器:电导仪,电子天平,三角瓶,吸水纸,剪刀,恒温培养箱,真空泵。