分子实验室细胞实验室常用配方
组织裂解液和细胞裂解液如何配制
组织裂解液和细胞裂解液如何配制组织裂解液和细胞裂解液是在实验室中用于将组织或细胞中的生物分子（如蛋白质、核酸等）裂解或溶解的溶液。
这些液体通常包含一系列试剂和缓冲液，以帮助维持理想的酸碱平衡和溶解条件。
以下是组织裂解液和细胞裂解液常见的配制方法。
1. 常用的组织裂解液配方为RIPA裂解液（RIPA lysis buffer），其成分包括：- 50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）-150mM氯化钠（NaCl）- 1% NP-40或Triton X-100-0.5%钠脱氧胆酸或SDS-0.1%SDS-1mMEDTA-1mM苯甲硫酸酯（PMSF）2.配制方法：a. 称取所需量的Tris-HCl缓冲液和NaCl溶解于蒸馏水中；b. 加入适量的PMSF和其他表面活性剂（如NP-40、Triton X-100）；c.配制完毕后，pH应调整至理想值；d.将裂解液过滤或使用高速离心去除悬浮物。
细胞裂解液的配制：1.常用的细胞裂解液配方为RIPA裂解液（同组织裂解液配方）或RIPA缓冲液（不含表面活性剂），以避免破坏裂解液中的蛋白质。
2.配制方法：a.同组织裂解液的步骤1；b.不加入表面活性剂，方便后续蛋白质的分析。
同时，裂解液的配制可以根据实验需要做出适当更改，以满足特定的研究目的和条件。
在裂解液的配制过程中，需要注意以下几点：1.所选择的缓冲液的pH应调整到适合所需实验的范围内，以确保溶液的稳定性；2.表面活性剂的添加量应适中，以满足蛋白质溶解的需要，但过多的添加会造成裂解液的稀释和稳定性下降；3.裂解液的配制应注意在低温下进行，以防止试剂的降解和活性的损失；4.在裂解液的使用过程中，最好将裂解液与细胞/组织充分接触，并且较长时间地孵育，以满足完整的裂解过程。
最全常用缓冲液配方及缓冲范围
最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的溶液。
它可以减少酸碱反应的影响，使物质在酸碱环境中保持稳定。
在生命科学实验室和工业生产中，常用的缓冲液有许多种。
下面是最常用的一些缓冲液配方及其缓冲范围。
1. Phosphate缓冲液：Phosphate缓冲液通常由磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组成。
它的pH范围为2.1-7.4，在生物化学和细胞生物学实验中得到广泛应用。
配方1：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.0-2.8-0.2M磷酸氢二盐，pH5.8-7.4配方2：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.1-3.1-0.2M磷酸氢二盐，pH5.6-7.42. Tris缓冲液：Tris缓冲液由三羟甲基氨基甲烷（Tris）和其酸盐组成。
它的pH范围为7-9，在分子生物学和生化实验中广泛使用。
配方：- 1 M Tris HCl，pH 7.4-9.0- 1 M Tris base，pH 7.0-9.23.MES缓冲液：MES缓冲液是一种针对中性pH值（5.5-6.7）的缓冲液，常用于细胞生物学和酶活性实验。
配方：-0.1MMES，pH5.5-6.74.HEPES缓冲液：HEPES缓冲液是一种适用于细胞培养和酶活性实验的缓冲液，其pH 范围为6.8-8.2配方：-0.1MHEPES，pH6.8-8.25.CAPS缓冲液：CAPS缓冲液是一种适用于生化实验的缓冲液，其pH范围为9.7-11.1配方：-0.1MCAPS，pH9.7-11.1这些是最常用的缓冲液配方及其缓冲范围，可以根据实验的需要选择合适的缓冲液。
需要注意的是，在配制缓冲液时应使用高纯度的化学品，并根据实验要求精确控制缓冲液的pH值。
此外，在实验过程中应注意缓冲液的保存和稳定性，以确保实验结果的准确性。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用，用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液：Hematoxylin-Eosin（HE）染色液是一种经典的组织染色方法，常用于病理学研究和诊断。
配方如下：- Hematoxylin染色液：将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中，加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水，最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液：将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液：将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液：Giemsa染色液用于染色细胞，特别是白细胞，常用于血液学和微生物学研究。
配方如下：- Giemsa染色液：将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂：用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下：- Thioglycollate培养基：将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中，加热至溶解。
- Dithiothreitol（DTT）溶液：将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中，用10 mL离心管分装，-20℃保存。
4. Bradford试剂：用于蛋白质的浓度测定，常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下：- Coomassie Brilliant Blue G-250：将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中，加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂：用于胶片的显影，常用于分子生物学实验。
配方如下：-显影溶液A：将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B：将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液：用于细胞或组织的裂解，提取蛋白质或RNA，常用于生物化学和分子生物学实验。
实验室常用溶液配制
0.25%胰酶-EDTA的配制细胞消化胰酶的配制对一般细胞0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0.25g3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4 调PH7.45 仍在冰浴中6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。
低温，防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2 ，增加消化效力实验常用溶液的配制1.革兰氏碘液：称碘化钾2g溶于100ml蒸馏水中，再加1g碘使其溶解，最后用蒸馏水稀释至300m1，盛于棕色瓶内，保存于暗冷处。
2.1.苯酚品红改良液（一）①A液：取3克碱性品红，溶于100ml 70％酒精中（此液可长期保存）。
②B液：取A液10m1，加入90ml 5％苯酚水溶液（一般在两周使用为好）。
③C液：取B液45m1，加入 6ml冰醋酸和6ml 37％甲醛。
④、苯酚品红改良液：取C液10m1，加入90ml45％冰醋酸和1克山梨醇。
2.2.苯酚品红改良液（二）：A液：碱性品红3g＋100ml 70％乙醇。
B液：A液10ml＋5％苯酚水溶液90m1。
C液：B液120ml＋冰醋酯12ml＋甲醛12ml。
D液：C液120ml＋45％冰醋酸480ml。
在D液中加1％山梨醇（600mlD液中加 6g山梨醇），此液配好后至少放4一5天方可使用，可保存几年。
3.1.甲基绿一哌罗宁混合染液（一）：①醋酸缓冲液（pH4.8）0．2mol.L-1醋酸（A.R）（取1.2ml加蒸馏水至100ml）4份0．2mol.L-1醋酸钠（A.R）（取2．72g加蒸馏水至100ml）6份。
分子生物学实验室常见实验
分子生物学实验室常见实验1.基因克隆实验：基因克隆实验是一种常见的分子生物学实验，其目的是将感兴趣的DNA序列克隆到重组DNA分子中。
这个实验通常包括DNA的摘取、PCR扩增、限制性内切酶的消化、连接载体、转化大肠杆菌等步骤。
2. 蛋白质表达实验：蛋白质表达实验是一种常见的分子生物学实验，其目的是将感兴趣的蛋白质表达到大肠杆菌等宿主细胞中。
这个实验通常包括将感兴趣的基因克隆到表达载体中，表达载体转化至宿主细胞，利用诱导剂等物质诱导表达蛋白质等步骤。
3. PCR实验：PCR实验是一种基于酶催化反应的分子生物学实验。
该实验通过模板DNA、引物、酶及核苷酸等原料，经一系列温度变化，扩增目标DNA片段。
该实验通常用于基因克隆、DNA测序、点突变检测等领域。
4. DNA测序实验：DNA测序实验是一种常见的分子生物学实验，其目的是确定DNA序列。
这个实验通常包括PCR扩增、DNA纯化、测序反应、数据分析等步骤。
5. RNA干扰实验：RNA干扰实验是一种常见的分子生物学实验，其目的是利用RNA干扰技术抑制特定基因的表达。
这个实验通常包括制备siRNA、合成siRNA、转染细胞等步骤。
6. 蛋白质纯化实验：蛋白质纯化实验是一种常见的分子生物学实验，其目的是将感兴趣的蛋白质从混合物中提纯出来。
这个实验通常包括细胞裂解、纯化、检测等步骤。
7. 荧光检测实验：荧光检测实验是一种常见的分子生物学实验，其目的是利用荧光分子标记分子或细胞等，观察其分布、表达及功能等。
这个实验通常包括荧光染色、荧光显微镜观察等步骤。
8. 基因编辑实验：基因编辑实验是一种新兴的分子生物学实验，其目的是通过基因编辑技术，直接改变DNA序列，从而实现对基因的修饰。
这个实验通常包括CRISPR/Cas9等基因编辑技术的设计、实现、检测等步骤。
tne缓冲液的功能主治
TNE缓冲液的功能主治1. 什么是TNE缓冲液？TNE缓冲液是一种常用的实验室试剂，其中的TNE代表三种核酸碱基（Thymidine、Nicotinamide、Ethylenediamine），常用于许多生物学实验和研究中。
2. TNE缓冲液的配方TNE缓冲液的配方如下：•NaCl：100mM•Tris-HCl：10mM （pH 7.5）•EDTA：1mM•Triton X-100：0.1%以上配方根据实验的需求可以进行调整，但通常可以作为基础的TNE缓冲液配方。
3. TNE缓冲液的功能TNE缓冲液具有多种功能，在生物学研究中起到重要作用。
3.1 细胞裂解•TNE缓冲液可用于细胞裂解的目的，其中的Triton X-100可以破坏细胞膜，释放细胞内的成分。
3.2 核酸提取•TNE缓冲液可以用于核酸的提取和纯化。
其中的EDTA可以抑制核酸酶的活性，保护核酸不被降解。
•TNE缓冲液的pH值适中，利于核酸的稳定。
3.3 蛋白质分析•TNE缓冲液可以用于蛋白质的裂解和分析。
其中的Tris-HCl可以调整溶液的pH值，使得裂解和分析过程中维持适宜的酸碱条件。
•Triton X-100可以使得蛋白质释放出来，并维持蛋白质的可溶性。
3.4 免疫检测•TNE缓冲液可以用于免疫检测中的洗涤步骤。
其中的NaCl可以用于调节检测抗体和抗原之间的结合反应。
•Triton X-100可以用于破坏非特异性的相互作用，减少背景信号。
3.5 其他应用•TNE缓冲液还可用于DNA/RNA杂交技术、制备细胞裂解液等。
4. TNE缓冲液的主治TNE缓冲液主要用于细胞裂解、核酸提取和蛋白质分析等与基因表达和调控相关的实验中，具体包括但不限于以下主治：•细胞裂解和组织溶解：TNE缓冲液能有效裂解各种细胞和组织，保持细胞成分的完整性。
•核酸提取：TNE缓冲液可用于DNA和RNA的提取、纯化和保存，适用于分子生物学实验中对核酸的需求。
•蛋白质分析：TNE缓冲液可用于蛋白质的裂解、提取、分析和保存，适用于蛋白质组学研究中的需要。
实验室常用液体配制标准操作规程
常用液体配制标准操作规程（SOP）国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心二〇〇八年九月修订目录一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜）三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）一、细菌培养系统1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。
取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。
剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
6、化学感受态制备：1）原理:：细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。
将细菌置于0℃，低渗CaCl2 溶液中时，菌细胞壁和膜的通透性增强，菌体膨胀成球型。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
pbs溶液
pbs溶液PBS溶液引言：PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）是一种广泛应用于生物科学领域的缓冲溶液。
它被用于许多实验室中的分子生物学和细胞生物学实验，包括细胞培养、免疫染色、蛋白质和核酸研究。
PBS溶液具有许多优点，如稳定性、调节pH值的能力和可溶性等，因此被广泛应用于生物科学研究。
一、PBS的组成PBS溶液主要由磷酸盐和盐溶解在水中而成。
典型的PBS溶液的配方包含磷酸二氢钠（NaH2PO4）、磷酸二钠（Na2HPO4）、氯化钠（NaCl）以及水。
标准的配方使用20mM的NaH2PO4和80mM的Na2HPO4，0.2M的NaCl，最终pH值约为7.4（根据实际需求而有所变化）。
二、PBS的性质1. 缓冲性质：PBS溶液被用作实验室中的缓冲剂，能够调节溶液的pH值，使其保持稳定。
PBS溶液在生理条件下（pH值约为7.4）具有最佳的缓冲能力，可以保持生物实验中所需要的稳定pH条件，这对于许多实验来说是非常重要的。
2. 渗透性：PBS溶液是一种无机缓冲溶液，具有较低的渗透性，这意味着它可以穿透细胞膜而不对细胞产生毒性作用。
这使得PBS溶液在细胞处理和培养中非常有用，可以用于洗涤、培养和悬浮细胞。
3. 离子浓度：PBS溶液中的Na+和Cl-离子浓度与人体细胞内液相似，可以提供细胞所需的渗透压，使细胞保持稳定的生理状态。
4. 溶解能力：PBS溶液具有良好的溶解性，可以溶解许多生物分子，如蛋白质、核酸、药物等。
这使得PBS溶液在生物科学研究中成为一个理想的选择，因为它可以用于稀释、洗涤和溶解的同时不会对目标分子产生不良影响。
三、PBS溶液的应用1. 细胞培养：PBS溶液常被用于洗涤和培养细胞。
在细胞培养过程中，细胞需要定期洗涤以去除细胞培养基、细胞残渣以及代谢产物。
使用PBS溶液进行洗涤可以保持细胞的稳定环境并避免细胞残留。
此外，PBS溶液还可用作细胞悬浮的稀释液。
2. 免疫染色：PBS溶液是免疫染色实验中常用的稀释液。
实验室常用细胞表征及处理方法(实战版)
实验室常用细胞表征及处理方法一、细胞培养1.1细胞培养基配方普通细胞所需要的培养基配方主要为：购买的培养基+10 %血清（小牛或者胎牛）+1%双抗。
（常用的双抗及胰酶建议直接购买）1.2细胞传代1.2.1洗涤：将培养瓶内的旧培养液吸出，加入2~3ml PBS缓冲液洗涤2-3次，摇晃使其均匀铺满整个平面，清洗细胞，随后吸弃PBS液以除去残留的血清和死细胞。
1.2.2消化：加入适量（盖满细胞层表面即可，25cm2的培养瓶加入0.5-0.6mL 即可，75 cm2加入1.0mL）的0.25%胰蛋白酶液，轻轻摇晃，普通细胞一般需要60s左右，特别难以消化的细胞可以放在37℃孵箱孵育适当的时间，如Hela细胞大约需要30s-40s，翻转培养瓶。
然后在倒置相差显微镜下观察细胞消化情况,待细胞开始收缩成圆形、细胞间的连接明显消失，细胞间出现明显的空隙，即可终止消化（若细胞成片收缩，倒去消化液）。
若存在细胞团，可以轻轻拍打培养瓶侧壁，尽量消化完全，不然传代后会出现较多的细胞团，再次消化会非常困难。
1.2.3终止消化：在培养瓶中加入1-3ml培养液（胰酶遇血清会终止其活性）以终止消化。
用吸管反复吹打洗瓶壁上的细胞，边角部分特别注意多次吹打。
可在倒置相差显微镜下观察细胞吹打的程度，（轻轻摇动培养瓶，观察细胞是否完全脱壁），最后形成单细胞悬浮液。
将单细胞悬液移入15ml离心管内,离心1000r×5min,弃去上清液,加入5ml 培养基进行吹打重悬（也可不用离心，直接把单细胞悬液分装于新的培养瓶里，补加适量培养基）。
小培养瓶需5ml左右培养基，直径60mm培养皿5-7ml，以上均应视细胞的数目而定，细胞多，可适当加多些培养基）。
1.2.4.传代：取上述步骤所得单细胞悬液，进行细胞悬液计数，然后按所需密度接种到其它培养瓶中。
标注上代数、日期及操作人。
注：本实验所需的PBS液、DMEM细胞培养液及0.25%胰蛋白酶液均需37℃预热处理。
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（一）WB相关试剂及常用缓冲液●●10%过硫酸铵溶液AP（分装保存于-20度）AP粉末 1gddH20 10ml●10％SDS（十二烷基硫酸钠）：SDS粉末 10gddH20定容到 100ml注意：用磁力搅拌器搅拌不会容易起泡泡●6X蛋白质sample bufferTris-HCl(1M,pH6.8) 30mLSDS 10g甘油 30mLDTT（154.25） 9.3g溴酚蓝 0.06gdd H20 定容至100mL●10XPBS缓冲液的配制：NaCl 80gKCl 2gNa2HPO4 14.4g（十二水合36g）KH2PO40 2.4g加800 mLddH2O,根据开始的pH用NaOH或HCL调pH到7.4，调好pH再定容到1升。
配好后用高压蒸气灭菌后常温保存最好是在4度●PBST(1X)PBS(1X) 500mlTween 20 500μl●50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液配制1L溶液各成分的用量● Tris粉末 242g冰醋酸 57.1mlNa2EDTA·2H2O 37.2gddH20定容到 1L●封闭液脱脂奶粉 5g叠氮钠 0.02g(现配现用时可不加)PBS 定容到100mL●脱色液：(室温)甲醇 165mL乙酸 50 mLH20 785 mLddH20 定容至1L●TBST(1X)TBS(1X) 500mlTween 20 500μl●Stripping buffer(可反复利用)温老师组配方10%SDS 10mlΒ-巯基乙醇 350 lTris-HCI（pH6.8） 6.25ml（6.06加到50mL水）加入ddH2O 至50mL●Stripping buffer(可反复利用)郭老师给配方甘氨酸 15gSDS 1gTween20 1mldd ddH2O 1L作这个buffer洗20min，然后用PBST洗3次，再重新封闭孵抗体。
（二）细胞和细菌培养基、抗生素●SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨 20g酵母提取物 5g氯化钠 0.5g1mol/L氯化钾 2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁●1M IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3））溶液IPTG粉末 2.383gddH20 定容到10ml用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。
●Amp+(50mg/ml)Amp+粉末 50mgddH20 1ml注意：分装保存于-20度，使用时按1000：1的比例用●Kana+(50mg/ml)Kana +粉末 50mgddH20 1ml注意：分装保存于-20度，使用时按1000：1的比例用●胰酶：抽滤，长期保存可放负20度粉末 0.25gEDTA 0.02-0.03g1XPBS 100ml●高糖DMEM培养基：抽滤保存在4度粉末全部碳酸氢钠 3.7gddH20 定容到1L（用盐酸调pH值到：7.2-7.4）●G418母液（100mg/ml）用0.22μM滤菌，分装存于-20度粉末 1gPBS 10ml●zeocin母液（100mg/ml）用0.22μM滤菌，分装存于-20度粉末 1gddH2O 10ml●Blasticidin（100mg/ml）用0.22μM滤菌，分装存于-20度粉末 0.3gPBS 10ml●Na3PO4（164） 8.2g（50mM）NaCl (58.5) 17.55g（300mM）加800 mL ddH2O溶解，用2M NaOH或者2M HCL 调pH到8.0，再定容到1升。
配好后用高压蒸气灭菌后常温保存。
●洗涤液(wash buffer)：2011年做蛋白纯化时用Na3PO4 8.2g（50mM）NaCl 17.55g（300mM）咪唑 0.681g（10mM）加800 mLddH2O溶解,根据开始的pH用2M NaOH或者2M HCL调pH到8.0，调好pH再定容到1升●洗脱液(elution buffer)：2011年做蛋白纯化时用Na3PO4 8.2g（50mM）NaCl 17.55g（300mM）咪唑 17.025g（250mM）加800 mLddH2O溶解,根据开始的pH用2MNaOH或者2M HCL调pH到8.0，调好pH 再定容到1升）PrepEase®Histidine-Tagged Protein Purification Kits - High Specificity●8X LEW Buffer (Lysis-Equilibrium-Wash Buffer)：（室温保存）pH：8.0NaH2PO4.2H2O 6.2404g（400mM）NaCl 14.0256g（2.4M）dH20 定容到100 mL （调节pH：8.0）●4X Elution Buffer：（室温保存）pH：8.0NaH2PO4.2H2O 3.1202 g（200mM）NaC l7.0128g（1.2M）咪唑 6.81 g（1M）dH20 定容到100 mL（调节pH：8.0）●EDTA:（100mM）EDTA 2.923 gdH20 定容到100 mL●NiSO4:NiSO4 .6H2O 2.6285g（100mM） dH20 定容到100 mL●溶菌酶：（使用时1ml溶液加入20ul）粉末 50mgddH20 1mL(四)利用His-tag从细胞中富集蛋白配方●磷酸钠缓冲液按图示比例混合0.2 M Na2HPO4溶液和0.2 MNaH2PO4溶液，得到两种缓冲液，pH分别调节成为8.0和6.3.（注意二价阳离子螯合剂，还原剂，会导致镍从树脂上的洗脱）本实验的所有试剂中EDTA浓度不得超过1 mM,DTT浓度不超过5 mM，巯基乙醇浓度不超过20 mM。
注意使用pH为6.3的磷酸缓冲液，而且pH不得低于6，pH要精确配制，非常重要！Histidine 的质子化，会导致镍树脂上的解离，所以要精确测定pH，并且以pH试纸校对，而不是仅仅依靠pH仪器。
洗脱溶液200mMImidazole咪唑，5% (wt/vol)SDS，150mM Tris-HCl(pH 6.7)30% (vol/vol)丙三醇720mM巯基乙醇0.0025%(wt/vol)溴酚蓝注意wt/vol是质量/体积之比例，而vol/vol是体积：体积的比例。
(五)双向电泳溶液配制●水化上样缓冲液（I）：尿素(8M) 4.805gCHAPS(4%) 0.4gDTT(65mM) 0.098g(现加)Bio-Lyte0.2%（w/v）50μI(40%现加)溴酚蓝0.001% 10μI(1%溴酚蓝)MilliQ水定容到10mI,分装成10小管，-20度冰箱保存●上样缓冲液（II）：尿素(7M) 4.2g硫脲(2M) 1.52gCHAPS(4%) 0.4gDTT(65mM) 0.098g(现加)Bio-Lyte0.2%（w/v）50μI(40%现加)溴酚蓝0.001% 10μI(1%溴酚蓝)MilliQ水定容到10mI,分装成10小管，-20度冰箱保存●上样缓冲液（III）尿素(5M) 3g硫脲(2M) 1.52gCHAPS(2%) 0.2gSB 3-10(2%) 0.2gDTT(65mM) 0.098g(现加)Bio-Lyte0.2%（w/v）50μI(40%现加)溴酚蓝0.001% 10μI(1%溴酚蓝)MilliQ水定容到10mI,分装成10小管，-20度冰箱保存●平衡缓冲液母液尿素(6M) 36gSDS(2%) 2gTris-HCI(pH8.8)0.375M 25mI(1.5M)甘油(20%) 20mIMilliQ水定容到100mI，分装10管，-20度保存●胶条平衡缓冲液I（充分混匀，用时现配）胶条平衡缓冲液母液10mIDTT 0.2g●胶条平衡缓冲液II（充分混匀，用时现配）胶条平衡缓冲母液10mI碘乙酰胺0.25g●低熔点琼脂糖封闭液低熔点琼脂糖0.5% 0.5gTris（25mM）0.303g甘氨酸(192mM) 1.44gSDS（0.1%）1mI（10%SDS）溴酚蓝（0.001%）100μI（1%溴酚蓝）MilliQ水定容到100mI,加热溶解至澄清，室温保存（六）同位素实验相关试剂●●● 2 X Annealing bufferTris-HCI(pH7.5-8.0) 20mMNaCI 100mMEDTA 2mM●●Tris 0.89M 26.945g硼酸（pH8.3） 0.89M 13.757gNa2EDTA 20mM 1.86115g●15% Denatured DNA PAGE gel(100ml)10 X TBE 15ml40%,19:1 gel stock 37.5mlddH2O 16mlUrea 48g存放在4度，使用前加200μl 10%AP和20μl TEMED●20% Denatured DNA PAGE gel10 X TBE 15ml40%,19:1 gel stock 50mlddH2O 3.5mlUrea(尿素) 48g存放于4度，使用前取35ml混合液加140μl 10%AP和140μl TEMED ●硼氢化钠（1M） 37.83粉末 0.7566gddH2O 10ml● 2 X dRP buffer（分装保存于负20度）DNA binding buffer（七）酶切打质谱相关配方NH4HCO3(79.06) 100mM粉末 0.7906gddH2O定容到100ml,pH7.8-8.0DTT（154.25g） 100mM粉末 0.01542gddH2O 1mlIAA(碘乙酰胺，184.96) 200mM粉末 0.036992gddH2O 1ml（八）其他配方●2XHEPES-缓冲液（潘老师给的配方做细胞转染，需要调pH为7.05，用0.22μM滤菌，分装存于-20度）。
●CaCI2·2H2O(2M) 147.02 潘老师给的配方做细胞转染粉末 5.88gddH2O 20ml0.22μm滤菌，分装存于-20度●5XTBS（1L体系）（在利用flag tag带磁珠的抗体富集蛋白时用）Tris-HCI(250mM) 30.275gNaCI(750mM) 43.875gdd H20 定容至1L（调节pH为7.4）●MMS甲磺酸甲酯（Sigma 密度为1.3g/mI,M=110.13）1M 体系：液体85μI ddH2O 915μI●Hochest母液：1mg/ml,避光存于-20度工作液：母液按1:1000稀释●TritonX-100（0.2%）TritonX-100 2 lddH2O 1ml● 2 X HDM buffe(II)曾用于LSD1去甲基化100mmol/L PMSF(苯甲基磺酰氟)：分成贮存于-20℃。