伤口及脓肿培养标本采集指南
皮肤、软组织及伤口标本采集技术规范
皮肤、软组织及伤口标本采集技术规范【名词定义】采集患者创面、伤口及脓肿感染标本进行细菌培养及药物敏感试验。
【适应证】1.怀疑皮肤及软组织感染包括烧伤创面感染、手术后切口感染、急性蜂窝织炎、外伤感染、咬伤感染及压疮感染等时采样。
具体如下（1）皮肤或皮下脓肿受累部位出现红、肿、热、痛，需手术切开引流时。
（2）深部脓肿表现为局部疼痛和触痛并伴有全身症状，发热、乏力、食欲减退等。
（3）创伤或手术部位感染。
2.烧伤患者出现发热、创面恶化时，考虑采样。
3.烧伤的组织宜做定量培养，定量检验结果≥10⁵CFU/g则可预示有可能进展为创伤相关脓毒症。
【禁忌证】1.浅表伤口标本不能进行厌氧培养。
2.烧伤患者的早期创面无菌，烧伤后12小时勿采集标本，创面的拭子标本不能用于厌氧培养。
【目的】取皮肤、软组织标本进行细菌学检测，协助诊断皮肤、软组织及伤口感染。
【制度与依据】1.本规范理论部分主要依据：中华预防医学会医院感染控制分会发表于2018年第28卷第20期中华医院感染学杂志的《临床微生物标本采集和送检指南》。
感染性疾病的正确诊治需要以正确的病原学检测作为指导，而正确的病原学检测其前提是采集和送检合格标本。
因此，必须规范微生物标本的采集和运送，避免因标本的不合格，产生错误的病原学检测结果而误导临床治疗。
2.本规范操作部分主要依据：中华人民共和国国家卫生健康委员会2018年12月11日发布，2019年6月1日实施的《临床微生物学检验标本的采集和转运》，是中华人民共和国卫生行业标准，WS/T640—2018。
本标准是按照GB/T1.1—2009给出的规则起草；起草单位：北京大学人民医院、中日友好医院、安徽省立医院、首都医科大学附属北京友谊医院、北京医院、北京市垂杨柳医院。
【准备】1.用物准备：医嘱单、皮肤、软组织标本化验单或标本条形码、无菌治疗盘、75%酒精、棉签或棉球、无菌螺帽容器或棉拭子1～2个、10ml注射器1～2个、检查手套、手消液，需做厌氧菌检查者备厌氧血培养瓶1个，检查用物的有效期，物品处于备用状态。
皮肤组织及伤口标本采集与转运
皮肤组织及伤口标本采集与转运标准操作规程一、采集与运送流程注：a烧伤的组织宜做定量培养，定量检验结果≥105 CFU/g则预示有可能进展为创伤相关脓毒症。
b厌氧培养时，不能使用普通拭子采集标本。
c开放性伤口采样拭子最好选用专用采样拭子，不要使用棉质拭子；伤口拭子采集最少同时采集两支，一支用于培养，一支用于涂片镜检；拭子采集后宜置于转运培养基中运送。
d无论是浅表伤口标本、深部伤口标本，均宜从感染进展的前缘采集活检组织。
活检标本和抽吸物(脓液、渗出液)优于拭子标本；浅表伤口标本不能进行厌氧培养。
e不能用注射器转移。
f标本采集后应立即送检,通常室温暂存不超过1小时；若不能及时送检，需4℃保存，但不能超过24小时；厌氧菌培养不可放置冰箱保存；组织标本可加几滴生理盐水以保持标本湿润，并在15-30分钟内送至实验室，不可冷藏。
二、注意事项1.尽可能在抗菌药物使用前釆集标本。
2.厌氧培养应注意避免正常菌群污染和接触空气。
3.严格无菌操作，使用无菌容器。
4.闭合性脓肿或深部切口感染标本不能用拭子釆集。
5.岀现发热、寒战等全身感染症状患者应同时送检血培养。
6.标本量不足或组织干涸、样本外漏或容器破损、标本明显受到污染以及标本相关信息不齐全时,实验室可拒收标本。
参考文献[1]中华人民共和国国家卫生健康委员会.WS/T 640-2018临床微生物学检验标本的釆集和转运[EB/OIJ. (2018 - 12 - 11 )[2019 - 01 - 08].[2][2]中华预防医学会医院感染控制分会.临床微生物标本采集和送检指南[J].中华医院感染学杂志,2018.28(20)：3192-3200.[3]尚红.全国临床检验操作规程[M].4版.北京：人民卫生出版社.2014：644-645.。
伤口分泌物采集方法
分泌物的采集方法：
开放脓肿：
用无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用蘸有无菌生理盐水的灭菌拭子采取脓液和病灶深部的分泌物，置无菌试管内送检。
注意尽量取化脓组织与正常组织交界处的脓汁，因为脓汁中心的细菌大部分已死亡，交接处的活菌较多，会提高阳性率。
开放病灶不能做厌氧培养。
闭锁脓肿：
一般采用穿刺或手术引流的方法采取。
采集前先用
2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤后，用无菌注射器抽取脓液送检；也可于切开排脓时用无菌棉拭子采样。
要消毒脓肿表面皮肤后用无菌注射器抽取，刺入无菌橡皮塞中送检。
烧伤伤口：
清创，出现渗出物后用拭子用力采集病灶基底部或边缘的标本，仅做需氧培养。
也可送组织标本。
脓疱或水疱：
酒精消毒，干燥，用针头（小儿用23号针头）挑破脓疱，用拭子采集脓疱液和基底部标本。
采集过程中的注意事项：
①采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂，应在用药之前采取。
②对大多数开放伤口，采集前应先清创，去除表面菌群。
③除非有渗出物，干燥、结痂伤口一般不做培养。
④闭合脓肿应取渗出物和脓肿壁标本，不能用拭子采集。
开放脓肿处理同开放伤口。
1/ 1。
医院手术部位感染标本采集及运送管理制度
医院手术部位感染标本采集及运送管理制度一、一般原则(一)在抗菌药物使用前，且有临床感染症状或伤口恶化或长期不愈合时采集标本。
(二)闭合伤口或穿刺采集标本，皮肤消毒液从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达5cm以上，消毒不少于2遍，待消毒液挥发干燥后(常需30s以上)穿刺采集。
(三)开放伤口用无菌生理盐水充分冲洗伤口部位，不可以用消毒剂。
(四)采集新鲜的感染组织，避免采集浅表的组织碎屑。
(五)若可以采集穿刺物或活检标本，应避免拭子标本。
(六)较大标本用含有少量生理盐水的无菌塑料容器。
二、采集方法(一)封闭性脓肿1.注射器穿刺抽取脓液。
2.若无法抽到脓液，应先皮下注射少量无菌生理盐水，再穿剌抽吸脓液:若脓液过多，应先切开引流，在基底部或脓肿壁采集标本。
脓液的量以大于1ml为宜。
3.排除注射器内部及针头的气体，用无菌橡皮塞封闭针头送检:或直接打入血培养瓶中。
疑为厌氧菌，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中。
(二)组织和活检标本:1.尽量采集足够大的组织，避免在坏死区域采集。
2.将小块的组织放在运输培养基内;较大的放在无菌容器中，并加人少量无菌生理盐水。
(三)开放伤口1.无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除表面的渗出物和碎屑。
2.用拭子深入伤口的基底部用于培养。
三、标本的标识:填写患者信息、标本类型(深部组织、表浅组织、脓肿和穿刺物等)、标本的来源(腹腔、腿和上臂等)，记录标本采集的日期和时间及是否在使用抗菌药物前采集，选择检查项目(需氧培养或厌氧培养)。
四、标本的送检:为了更好地分离病原菌，标本应在采集后的30min 内送到实验室。
送检时应保持标本的湿润。
在送检前或运送过程中，禁止将标本放于冰箱。
若不能及时送检，运输培养基中标本应室温保存，最长不可超过24h。
2013微生物与寄生虫检验知识辅导：创伤和化脓性标本采集方法
软组织的急性化脓性炎症、化脓性疾病、脓肿和创伤感染等疾病可根据临床要求取标本送检。
对开放性感染和已溃破的化脓灶，标本采集前先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，再用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。
如为慢性感染，污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织，研磨成组织匀浆后送检。
闭锁性脓肿可行手术引流或穿刺法取标本于灭菌容器或灭菌注射器内送检。
注意事项：
①尽可能在用药前采集标本，采集前一定要作好清洗、消毒工作。
②不能立即送检的标本，应放4℃保存；培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌的标本除外。
③深部脓肿常由包括厌氧菌在内的混合细菌感染所致，若有条件应作厌氧菌培养，采集标本应遵守厌氧菌感染标本的采集原则。
手术切口标本采集与运送标准操作规程
1．贾淑梅临床医院感染管理与控制第四军医大学出版社：2005（3）：25
2．美P R默里、E J巴伦、M A法勒、F C特诺维、R H约克临床微生物学手册(上下)科学出版社2005-6
4．厌氧培养标本需保持厌氧状态运送：使用专用运送培养基或用针筒抽取标本后排尽空气,在针头上置无菌橡皮塞后运送。
5．最佳的临床标本送检，包括厌氧菌培养标本，首先取决于所获取标本的量。量少的标本要在采集后的15－30分钟内送检。活检组织如果采用厌氧运送方式，可置于25℃恒温箱存放20至24小时。
6．送检期间要予以安全防护：①放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。②严禁将带有裸露针头的注射器送往实验室。
手术切口标本采集与运送标准操作规程
适用对象：临床医务人员
文件编号：RJ-IC-SOP-SSQKBBCJ
编写者：糜琛蓉
审核者：倪语星
版次：01
编写日期：2007-5-30
审核日期：2007-6-10
执行日期：2007-7-1
注：本文件程序仅供本院医务人员使用，未经同意，不得翻印
目的：正确采集手术切口标本并运送
三.采集量：至少采集两个拭子标本，一个用于细菌培养，另一个用于制备涂片染色。最好每天1次，每次采集≥1ml
四.注意事项
1.标本避免干燥；
2.厌氧菌标本避免与空气接触；
3.采样前局部避免使用抗菌药物；
4.如使用消毒液消毒皮肤，须待其干燥后采样。
五.结果判断
感染的判定主要看细菌的种类和数量，因为外环境和皮Βιβλιοθήκη 定植菌也常在手术切口或创面分离到。
内容：
一.采集指征：
手术切口部位有红、肿、热、痛等感染征兆，怀疑有切口感染时。
手术切口标本
手术切口标本的采集与运送（一）采集指征手术切口部位有红、肿、热、痛等感染征兆，怀疑有切口感染时。
（二）采集方法1．封闭性脓肿(1)注射器穿刺抽取脓液。
(2)若无法抽到脓液，应先皮下注射少量无菌生理盐水，再次穿刺抽吸脓液；若脓液过多，应先切开引流，在基底部或脓肿壁采集标本。
脓液的量以1ml左右为宜。
(3)排除注射器内部及针头的气体，直接注入血培养瓶中。
疑为厌氧菌，应迅速将脓液注入厌氧血培养瓶中。
2．组织和活检标本(1)采集足够大的组织，体积以1mm3为宜，避免在坏死区域采集。
(2)将采集的组织放放在无菌容器中，并加入少量无菌生理盐水。
3．开放伤口(1)无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除表面的渗出物和碎屑。
(2)用拭子深入伤口的基底部或伤口正常组织边缘部位采集两个标本，分别用于培养和革兰染色。
（三）标本运送为了更好的分离病原菌，标本应在采集后的30min内送到实验室。
送检时应保持标本的湿润（尽量采用运输培养基，组织可以放在生理盐水中）。
在送检前或运送过程中，禁止将标本放于冰箱。
若不能及时送检，标本应室温保存，最长不超过24h。
（四）注意事项：1．标本避免干燥，可滴加几滴无菌盐水保持湿润。
2．厌氧菌标本避免与空气接触，应采用厌氧转运培养基。
3．采样前局部避免使用抗菌药物。
4．如使用消毒液消毒皮肤，须待其干燥后采样。
五、微生物标本的运送要求（一）运送人员和交通工具1．微生物标本应包装完整，由经过培训的专人运送，严禁运送途中擅自打开包装。
2．可以步行、自行车或专车等方式运送，严禁使用任何公共交通工具。
（二）运送容器1．标本运送时应防止标本外溢、蒸发和污染。
必须使用指定的采样管，加盖密封后放入指定的、密封的、符合生物安全标准的标本运送箱内。
2．标本运送箱必须有生物危险标志，运送高致病性标本时必须加锁。
（三）运送温度应注意温度控制，如奈瑟菌检测标本应置于25℃～35℃环境运输，不可冷藏和冰冻。
病毒检测标本一般都需要冷藏和冰冻。
医院微生物室创伤和外科感染病原体检验操作规程
医院微生物室创伤和外科感染病原体检验操作规程
三、创作和外科感染
1、标本采集
(1)、开放性感染分泌物或脓液先用无菌生理盐水冲洗表面，用2支无菌棉拭子取创伤或溃疡深处及分泌物送检，一支为涂片用，一支为培养用。
(2)、封闭性脓肿常局部消毒后，用注射器抽取脓液置于无菌试管内送检。
(3)、对放线菌标本，常用无菌棉拭子挤压瘘管，选取流出脓液中的“硫磺样颗粒”置于无菌瓶内送检。
胸腔、腹腔、心包腔和滑膜腔等标本采集，应严格按无菌操作程序，由临床医生进行。
检验程序
直接涂片分离培养
革兰染色通平板、Mac
抗酸染色巧克力平板（5%CO2）。
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伤口及脓肿培养标本采集指南
导语
皮肤、软组织的急性化脓性炎症、化脓性疾病、脓肿和创伤感染等疾病的发病机制复杂，其病原菌可为单一微生物，也可由多种微生物混合感染。
临床取伤口及脓肿感染标本行细菌培养及药物敏感试验，常作为诊断和药物治疗的依据，而无效失实的培养结果则会混淆医生的正确判断，延长或延误治疗时机。
因此，临床必须联合微生物实验室共同努力，规范标本的采集、送检，确保检测结果的准确性。
1选择采集指征
1.开放性损伤或术后切口感染
2.导管治疗感染
3.瘘管内脓液
4.脓肿（包括阑尾脓肿、胸腹腔脓肿、
脑脓肿、盆腔脓肿、肛周脓肿、肺脓肿、肝脓
肿、肾周脓肿、淋巴结乳腺脓肿等）
5.皮肤化脓（毛囊炎、疖、痈）和皮下
软组织化脓感染。
2
采集
开放性损伤和术后切口感染
先用无菌生理盐水冲洗表面，进行清创，尽量去除表层覆盖物和渗出物，再用无菌拭子
擦拭病变有进展的边缘或深层基底部进行取样。
也可采集新鲜渗出物进行需氧培养，已形成肉
芽或组织增生的慢性感染，可取感染部位下的
组织送检。
说明：
在开放性损伤和术后切口感染处不易采得合格标本，因为其表面有污染菌和大量定值菌
群。
因此，在采样之前必须进行清创(可以用
无菌蒸馏水或生理盐水浸湿的纱布擦拭表面，
为防止重复污染，每次都要更换一个新的)单
纯采集伤口脓液进行培养所得结果是不可信的，
甚至会误导治疗。
临床医生根据经验（如伤口出现产气、发臭、产生大量脓液等症状）怀疑有厌氧菌感染
时，应严格按照厌氧菌标本采集要求采样送检，
或者联系微生物实验室寻求帮助。
为什么好多脓液标本培养是无菌生长？
因为脓液中除含有脓细胞（变性坏死的白细胞）外，还有大量坏死的细菌，组织碎片和
渗出的组织液。
也就是说脓液就是一个大混战
后的战场，除仍在激战的白细胞和细菌们之外，
更多的是战死的细菌尸体和阵亡的白细胞将士。
而对于脓液这个尸殍遍野的战场来讲，细菌的
活力已经不是很好，加之临床上很多脓液培养
可能都是在抗生素使用之后采集留取，腹背受
敌，细菌就更难生长。
闭合性脓肿
需要在穿刺术或手术时采集标本，首先清创，勿用拭子取样，要用注射器抽取脓肿内容
物；或将脓肿切开引流后，取脓肿壁的一部分
送检。
如必须用拭子，取样后要立即插入配套
的运送培养基中送检。
说明：闭合性脓肿应考虑加做厌氧菌培养，标本采集后应将注射器内空气排空，同时将针
头插入灭菌胶塞内送检。
烧伤
首先清理烧伤部位，消毒伤口。
如有液体渗出，要用拭子用力擦拭取样送检。
如情况允
许，应送活检标本，因为采自伤口表面的标本
培养出的多是定植菌。
瘘管内脓液
用无菌棉拭子挤压瘘管，选取脓液中“硫磺样颗粒”盛于灭菌试管内送检；也可用灭菌
纱布条塞人瘘管内，次日取出送检。
本法有利
于检出放线菌。
脓疱或水疱
选择完整脓疱，进行表面消毒后，用无菌针将其挑破，用无菌拭子收集脓液送检。
若脓
疱过大，可使用1ml注射器穿刺、抽取其中脓
液送检。
皮肤化脓和皮下软组织化脓
用2.5％～3％碘酊和75％酒精消毒周围皮肤，待干后，穿刺抽取脓汁或分泌物送检；
切开排脓时，最好用棉拭子采取病灶边缘或基
底部的分泌物送检。
注意事项
1.尽可能在使用抗生素前采集标本。
2.采集前进行皮肤清创有助于提高培养
结果的准确性
3.对干燥结痂损伤，在无渗出物的情况
下，不推荐取样培养。
4.临床医生开具检验申请单时，要对标
本采集给出具体描述：注明解剖学位置，标明
来自开放性损伤还是闭合性损伤，检测目的是
需氧培养还是厌氧培养，以及标本采集前是否
使用过抗生素。
5.遇到特殊细菌或特殊标本时，临床应
与微生物实验室沟通，针对性处理。
3送检标本送检
1.标本采集后立即通知外送队送检，不
能立即送检时冷藏保存，但不能超过24小时。
2.外送队必须严格执行查对制度，保证
无误。
3.送检时应使用密闭容器盛装标本，同
时避免泄漏、丢失。
4.标本应在最短路径、最短时间内送达
微生物实验室。
4核收实验室核收
1.微生物实验室标本核收组在标本送达
时进行核对、查收。
2.对收到的标本进行接种时，应加做直
接涂片革兰染色，通过镜下观察其中白细胞和
鳞状上皮细胞，从而评估标本来自伤口表面还
是深部。
3.说明：临床上已发生感染的伤口总是
发生化脓性反应，革兰染色应该显示较多的白
细胞，上皮细胞的多少表明是否为表皮标本。
原则上讲，不应在用作厌氧培养的标本涂片中见到上皮细胞。
4.合格标本进入系统检验流程。
5.不合格标本进入退检流程。