基因工程
什么是基因工程
什么是基因工程
一、什么是基因工程
基因工程（Gene Engineering）是一种技术，它可以改变物质基础的构造，使其形成新的基因组合，从而获得有意义的生物。
基因工程可以
让完全不同的物种合成出新物种，或者将不同物种的基因强行混合，
成功地让一些被认为在自然过程中不可能出现的新物种出现。
二、基因工程的基本原理
基因工程的基本原理是人工合成、改造、替换或者删除染色体的基因，在生物体的内部，精心操控它们来改变特质。
比如，可以用基因工程
在生物体内引入新基因，从而改变它们的某些性状，从而形成新物种、新性状或新能力。
同样，也能改变基因中某种成分，形成新物种。
三、基因工程在实践中的应用
（1）改性个体：基因工程可以调整体内基因水平，以便让体内特定的
特质性状得到发挥。
（2）编辑特质：基因工程可以根据所需改变，精确定位到特定的基因
的特定位点，再改变基因位置，最终让细胞发生变化。
（3）基因治疗：基因治疗是改变患有基因性疾病的患者的基因的技术，以改善疾病情况。
（4）转基因：转基因技术指的是将一种物种中的基因流入到另一种物
种中，从而改变或添加某种性质，如抗病性等。
四、基因工程的好处与弊端
（1）好处：基因工程可以帮助改变鉴定动物和植物的性能，用来生产
食物、药物、精馏植物等产品，帮助解决营养、病症，使物种在极端
环境发展。
（2）弊端：大量的基因重组可能引发不可预料的问题，产生致命的疾病，甚至影响人类基因。
有时，新基因对导入到一个物种中的其他生
命细胞产生负面影响。
什么是基因工程
什么是基因工程基因工程：改变生命的未来引言：人类一直在不断探索、改造和利用自然的力量，以满足我们的需求和向前迈进。
基因工程作为生物技术的一个重要分支，具有巨大的潜力，可以为人类带来许多福祉和进步。
本文将深入探讨什么是基因工程，它的原理和应用，以及相关的伦理和道德问题。
一、基因工程的定义和原理：基因工程，又称遗传工程，是一种利用重组DNA技术改变生物基因组的过程。
它主要包括三个步骤：选取目标基因、将目标基因导入目标生物体的基因组中、使导入基因能够在生物体中正常表达。
基因工程的原理主要包括DNA分子的切割、连接和重组。
科学家通过具有特定功能的限制酶将DNA切割成片段，然后将这些片段重新组合，以获得具有所需特性的DNA序列。
最后，将重组的DNA导入目标生物体中，通过细胞的自然复制过程使其在细胞和整个生物体中被表达。
二、基因工程的应用：1. 农业领域：基因工程在农业领域的应用非常广泛。
通过转基因技术，科学家们可以改良农作物，使其具有抗虫、抗病、耐旱等特性，提高产量和抗逆性，有力地支持全球粮食安全。
例如，转基因玉米可以抵抗玉米螟的侵袭，转基因水稻可以抗盐碱、耐旱。
2. 医学领域：基因工程在医学领域的应用正逐渐发展。
通过基因工程技术，科学家可以将外源基因导入体内，用于治疗一些遗传病、免疫系统疾病和癌症等疾病。
例如，基因工程药物可以治疗某些带有缺陷基因的遗传性疾病，如血友病和囊性纤维化等。
3. 环境保护：基因工程还可以用于环境保护。
通过改良某些细菌或植物的基因，可以使其具有降解有害化学物质的能力，从而清理油污和其他污染物。
基因工程在生物修复、环境治理中的潜力巨大，为解决环境问题提供了新的思路和方法。
三、伦理道德问题：虽然基因工程有着广阔的应用前景，但也涉及一些伦理和道德问题需要慎重考虑。
1. 遗传多样性：转基因作物的广泛种植可能导致农作物遗传多样性的丧失，降低农作物的抵抗能力。
我们应该保留自然界的遗传资源，同时加强监管和管理，确保基因工程的可持续发展。
什么是基因工程
什么是基因工程
基因工程是一种通过改变生物体的遗传物质（DNA）来实现对其性状的改变的技术和方法。
这包括插入、删除或修改基因，以产生具有特定性状或功能的生物体。
基因工程可以应用于微生物、植物、动物和人类等各个领域。
主要的基因工程技术和方法包括：
1. 基因克隆：将感兴趣的基因从一个生物体中复制并插入到另一个生物体中。
这包括DNA的复制、切割和连接等操作，常用于制造重组蛋白、疫苗等。
2. 重组DNA技术：制造重组DNA，即将来自不同来源的DNA 片段组合在一起。
这包括PCR（聚合酶链式反应）、限制酶切割、DNA 连接酶等技术。
3. 基因编辑：利用特定的酶（如CRISPR-Cas9系统）精确地修改生物体的基因。
这使得科学家能够精准地添加、删除或替换基因序列，以改变目标生物体的性状。
4. 转基因：将外源基因导入到一个生物体中，使其表达这个基因。
转基因技术在植物、动物等领域广泛应用，以改善农作物产量、提高抗病性、研究基础科学等。
5. 合成生物学：利用化学合成的方法设计和构建新的生物体，以实现特定的功能。
这包括人工合成基因、合成生物通路等。
应用基因工程的领域包括医学、农业、环境保护、工业等，其应用范围涉及疾病治疗、农作物改良、生物能源生产等方面。
然而，基因工程也引发了一些伦理、安全和法规方面的讨论和关注。
基因工程主要流程
基因工程主要流程基因工程呀，那可老有趣啦。
基因工程的流程呢，有这么几个主要的部分。
一、目的基因的获取。
咱得先把想要的那个基因弄到手呀。
这就好比咱要做菜，得先把食材找着。
那怎么找这个目的基因呢？有好几种办法呢。
一种是从基因文库里面去淘。
基因文库就像是一个大仓库，里面存着各种各样的基因片段，咱就在这里面翻翻找找，看看能不能发现咱需要的那个基因。
还有一种办法是通过化学合成，如果这个基因的序列咱已经知道得很清楚了，那就像按照食谱做菜一样，咱可以人工把这个基因合成出来。
另外呀，要是知道这个基因在哪个生物体里，还可以用PCR技术，这个技术就像是一个精准的小助手，能把我们要的基因从生物体的基因组里给大量复制出来，这样我们就有足够的基因来进行后面的操作啦。
二、基因表达载体的构建。
有了目的基因之后呢，咱不能就这么直接把它放到受体细胞里呀，得给它造个小房子，也就是构建基因表达载体。
这个载体就像是一个小飞船，带着目的基因进入受体细胞。
这个载体里面呢，除了有目的基因，还有启动子、终止子这些重要的部件。
启动子就像是发动机的开关，它能让基因在受体细胞里开始表达，要是没有这个启动子，基因就像一辆没钥匙的汽车，发动不了。
终止子呢，就像是刹车，让基因的表达在合适的时候停下来。
而且呀，这个载体上通常还会有标记基因，这标记基因可有用啦，就像是给这个小飞船做个记号。
比如说我们用抗某种抗生素的基因做标记基因，那把这个构建好的载体放到含有这种抗生素的培养基里，能长起来的细胞就是成功导入了载体的细胞，就像在一群小朋友里，带着小红花的就是表现好的一样。
三、将目的基因导入受体细胞。
接下来就是把带着目的基因的载体送到受体细胞里去。
这个过程就像是送快递一样。
对于不同的受体细胞，送的方法还不一样呢。
如果受体细胞是植物细胞，我们可以用农杆菌转化法。
农杆菌就像是一个小邮差，它能自然地把我们构建好的载体送到植物细胞里面去。
还有基因枪法，就像用枪把基因载体像子弹一样打到植物细胞里。
基因工程
作用： 将外源基因送入受体细胞。 利用载体在受体细胞内，对外源基因 进行大量复制。
条件： 能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基 因等。 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
质
DNA诊断
DNA点杂交 寡聚核苷酸探针杂交分析法
PCR/单链构象多态性分析（SSCP）
(single strand conformation polymorphism, SSCP) 限制性内切酶谱分析法 DNA限制性长度多态性 (restriction fragment length polymorphism, RLFP) 分析
2.基因诊断
基因诊断：采用分子生物学的技术方法来分 析受检者的某一特定基因的结构(DNA水平) 或功能(RNA水平)是否异常，以此来对相应 的疾病进行诊断。是病因的诊断。
基因诊断的原理
DNA诊断----检测相关基因的结构及其 表达功能是否正常。 RNA诊断----对表达产物mRNA的质 和量进行分析。
基因工程为人类开辟新的食物来源。 1）鸡蛋白基因在大肠杆菌和酵母菌中表达获得 成功。这表明，未来能用发酵罐培养的大肠杆菌 或酵母菌来生产人类所需要的卵清蛋白。 2）用基因工程的方法从微生物中获得人们所需 要的糖类、脂肪和维生素等产品。
（三）基因工程与环境保护
基因工程在环保方面有什么应用？
1）用于环境监测。 2）用于被污染环境的净化。
基因治疗就是把基因直接导入人体或先导入人的 细胞然后再输入人体，让这种基因达到治疗目的。 首先是治疗基因的选择。
生物学 什么是基因工程
生物学什么是基因工程？
基因工程是一种利用基因技术对生物体的遗传物质进行操作和改变的科学和技术领域。
它涉及到对基因的分离、合成、修饰和转移等操作，以实现对生物体的遗传特征和功能的改变和控制。
基因工程的主要目标是通过改变生物体的基因组，来实现对其性状和功能的精确控制。
这可以通过多种手段来实现，包括基因的克隆、基因的突变、基因的插入和基因的删除等。
基因工程可以用于改良农作物和畜牧业、生物制药、环境修复、疾病治疗等多个领域。
基因工程的基本步骤包括基因的克隆、构建重组DNA、转化和表达等。
首先，需要从目标生物体中分离出所需的基因，这可以通过PCR扩增、限制酶切和DNA测序等技术来实现。
然后，将克隆的基因与载体DNA进行连接，形成重组DNA。
接下来，将重组DNA转移到宿主细胞中，这可以通过细胞转化、病毒介导转染等方法来实现。
最后，基因在宿主细胞中被表达，从而实现对目标性状或功能的控制。
基因工程的应用非常广泛。
在农业领域，基因工程可以用于改良作物的抗病性、耐逆性和产量等性状，以提高农作物的品质和产量。
在畜牧业领域，基因工程可以用于改良家畜的生长性能、抗病性以及产品质量等。
在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗和细胞治疗等。
此外，基因工程还可以用于环境修复、生物能源开发和基础研究等领域。
然而，基因工程也面临着一些道德、法律和安全等方面的问题和挑战。
例如，基因工程可能引发对生物多样性和生态系统的影响，可能引发基因污染和生物安全风险。
因此，在进行基因工程研究和应用时，需要遵守相关法律法规和伦理准则，并进行风险评估和管理。
基因工程
1、基因工程，是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。
（供体基因、受体细胞、载体是重组DNA技术的三大基本元件。
）2、同尾酶：识别的靶序列也各不相同，但切割DNA后，产生相同的粘性末端，这一类限制酶特称为同尾酶。
这两个相同的粘性末端称为配伍未端。
3、同裂酶：有一些来源不同的限制酶识别的是同样的核苷酸靶子序列，这类酶特称为同裂酶。
同裂酶的切点位置可相同或不同。
4、1酶活性单位（U）：某种限制性核酸内切酶在最适反应条件下，60 min内完全切割1μg λDNA所需的酶活性5、星号（*）活性：如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称星号（*）活性。
6、停滞效应：PCR中后期，随着目的DNA扩展产物逐渐积累，酶的催化反应趋于饱和，DNA扩增产物的增加减慢，进入相对稳定状态，即为停滞效应，又称平台期。
7、PCR扩增引物：是指与待扩增互补的人工合成的寡核苷酸短片段，其长度通常在15～30个核苷酸之间。
8、linker：是指用化学方法合成的一段由8~12个核苷酸组成，具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸片段。
9、衔接头：它是一类人工合成的一头具有某种限制酶切的粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。
10、粘性末端：因酶切位点在两条DNA单链上不同（对称），酶切后形成得具有互补碱基的单链末端结构。
酶切后产生两个粘性末端很容易通过互补碱基的配对而重新连接起来。
11、平末端：因酶切位点在两条DNA单链上相同，酶切后形成的平齐的末端结构，这种末端不易重新连接起来。
12、基因克隆载体：通过不同途径将承载的外源DNA片段（基因）带入受体细胞且能在其中维持的DNA分子。
也称DNA克隆载体。
13、cos位点：λDNA两端各有12bp的粘性末端，粘性末端形成的书暗恋区域称为~~14、受体细胞:又称为宿主细胞或寄主细胞(host cell)等，从实验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从实验目的上讲是有应用价值和理论研究价值的细胞。
基因工程的名词解释
基因工程的名词解释
基因工程是一种利用生物技术手段改变生物体内遗传信息的技术,包括利用DNA分子作为工具来切割、重组、连接和修饰DNA分子,从而改变生物的性状和功能。
在基因工程中,通常会使用一些特定的工具和技术来操作DNA分子。
这些工具和技术包括:基因编辑技术,如CRISPR/Cas9、Taq酶、文库筛选等;DNA片段的制备,如扩增、剪切、合成等;DNA连接技术,如基因连接酶、基因转化技术等;以及基因转化材料,如植物、细菌、酵母等。
基因工程的应用范围非常广泛,包括生物医学研究、农业改良、食品加工、药物开发等。
在生物医学研究中,基因工程可以用于治疗疾病、开发新药物和改变生物体的性状。
在农业改良中,基因工程可以用于提高作物产量、改善作物品质、降低生产成本等。
在食品加工中,基因工程可以用于改变食品的口感、味道和营养价值等。
除了传统的生物学方法外,基因工程还采用了一些现代技术手段,如基因芯片、基因组学、蛋白质结构预测等。
这些技术的发展使得基因工程的研究和应用更加高效和精准。
基因工程也有一些伦理和法律问题需要解决,如基因隐私、基因歧视、遗传信息保护等。
因此,在基因工程的研究和应用中,需要遵循伦理和法律规定,确保其安全性和合法性。
基因工程名词解释
名词解释：1.Gene Engineering基因工程：在体外把核酸分子（DNA的分离、合成）插入载体分子，构成遗传物质的新组合（重组DNA），引入原先没有这类分子的受体细胞内，稳定地复制表达繁殖，培育符合人们需要的新品种（品系），生产人类急需的药品、食品、工业品等。
2.HGP人类基因组计划：是一项规模宏大，跨国跨学科的科学探索工程。
其宗旨在于测定组成人类染色体（指单倍体）中所包含的30亿个碱基对组成的核苷酸序列，从而绘制人类基因组图谱，并且辨识其载有的基因及其序列，达到破译人类遗传信息的最终目的。
3.Gene Therapy 基因治疗：是指将外源正常基因导入靶细胞，取代突变基因，补充缺失基因或关闭异常基因，达到从根本上治疗疾病的目的。
.基因诊断：是利用重组DNA 技术作为工具，直接从DNA水平监测人类遗传性疾病的基因缺陷。
Vector载体：是把外源DNA（目的基因）导入宿主细胞，使之传代、扩增或表达的工具。
plasmid质粒：是生物细胞内固有的、能独立于宿主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。
shuttle vector穿梭载体：是指含有两个亲缘关系不同的复制子，能在两种不同的生物中复制的。
质粒不相容性;同种的或亲缘关系相近的两种质粒不能同时稳定地保持在一个细胞内的现象，称为质粒不相容性.multiple cloning sites，MCS多克隆位点：DNA载体序列上人工合成的一段序列，含有多个限制内切酶识别位点。
能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。
α-互补：LacZ’基因的互补：lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶基因的突变体之间实现互补。
粘性末端：指DNA分子的两端具有彼此互补的一段突出的单链部分, 这一小段单链部分和同一分子的另一端或其它分子末端的单链部分如果互补的话，则能通过互补碱基之间的配对, 形成双链。
并在DNA连接酶的作用下, 使同一DNA分子的两端连接成环状,或使两个分子连成一大的线状分子。
基因工程的概念
基因工程的概念基因工程是一种利用基因技术改变生物体遗传特征的技术手段。
基因工程包括对基因的分离、克隆、修饰和转移等步骤，通过改变生物体的基因组来获得特定的性状或功能。
基因工程可以在不同的生物体中引入外来基因，实现基因的重组、修改和转移，从而改变其遗传特征并赋予其新的性状。
基因工程的应用范围非常广泛，包括农业、医学、生物工业等领域。
在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高作物的产量和抗性，使其更适应恶劣的环境条件。
通过异种基因转移，可以使作物具有抗虫、抗病、抗逆境等性状，提高作物的品质和经济效益。
在医学领域，基因工程可以用于治疗遗传性疾病。
通过基因修饰和转移，可以校正异常基因或增加缺失的基因，从而纠正遗传疾病的发生机制。
例如，通过基因工程技术可以生产蛋白质药物、基因疫苗和基因诊断试剂，用于预防和治疗多种疾病。
此外，基因工程还可以用于生物工业，如生产酶、药物和生物农药等。
通过基因工程技术可以改变微生物的代谢途径和菌株特性，使其具有高效、高产的产物合成能力。
这对于提高生物工业产品的产量和质量具有重要意义。
基因工程的发展离不开基因技术的进步。
现代基因工程技术主要包括DNA重组技术、基因克隆技术、基因表达技术和基因转导技术等。
这些技术的不断改进和创新，使得基因工程在各个领域的应用更加广泛和深入。
然而，基因工程也面临着一些争议和挑战。
一方面，基因工程技术可能带来一些潜在的风险，如基因突变、基因污染等。
另一方面，基因工程技术的应用也引发了伦理和道德方面的争议，如人类基因编辑是否合乎伦理规范等。
综上所述，基因工程作为一种利用基因技术来改变生物体遗传特征的技术手段，在农业、医学、生物工业等领域都具有重要的应用价值。
随着基因技术的不断发展和完善，基因工程有望为人类社会带来更多的福祉，但也需要在应用中严格控制和规范，以确保其安全和可持续发展。
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第18课时基因工程（1）知识提纲：考点一：基因工程的概念及基本工具1、基因工程概念：a、操作环境：体外；操作水平：分子水平b、优点：与杂交育种相比是克服了远缘杂交不亲和的障碍；与诱变育种相比是定向改造生物的性状。
c、原理：基因重组2、操作基本工具：（1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）a、来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
b、功能：能够识别特定的脱氧核苷酸序列，使磷酸二酯键断开c、结果：产生黏性末端和平末端。
注：限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸。
（2）“分子缝合针”——DNA连接酶a、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能连接黏性末端之间的磷酸二酯键；T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
b、与DNA聚合酶作用的异同:①相同点：都形成磷酸二酯键。
②区别：DNA聚合酶（需要模板）只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端。
DNA连接酶（不需要模板）是连接两个DNA片段的末端。
（3）“分子运输车”——运载体a、载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
b、最常用的载体是质粒,它是独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链小型环状DNA分子c、其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒d、作用：将目的基因导入受体细胞。
注：真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
典例剖析：例例2. 镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。
检测这种碱基序列改变必须使用的酶是（）A.解旋酶B.DNA连接酶C.限制性内切酶D.RNA聚合酶例3．已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。
现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是（）A．3 B．4 C．9 D．12例4．（多选）下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达例5：下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
请回答下列问题：(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有__________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越____________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是__________________________ 。
(4)与只使用Eco R Ⅰ相比较，使用Bam H Ⅰ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止________________________________。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入__________酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_________________________。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 ____________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
第19课时基因工程（2）知识提纲：考点二：基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因2.原核基因采取直接分离获得：可从基因组文库或cDNA文库中获取。
真核基因是采取人工合成：人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
3.PCR技术扩增目的基因（在生物体外：PCR扩增仪）（1）原理：DNA双链复制；原料：四种游离的脱氧核苷酸；条件：模板、原料、酶、引物、ATP（2）过程：第一步变性：加热至90～95℃DNA解链（不需要解旋酶）；第二步复性或退火：冷却到55～60℃，引物（两种DNA引物）结合到互补DNA链；第三步延伸：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶(Taq酶)从引物起始互补链的合成。
（3）结果：在短时间内形成大量的DNA片段（2n）。
第二步：基因表达载体的构建(最核心步骤，在体外进行)1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（1）启动子：是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA。
（启动子≠起始密码子）（2）终止子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
（终止子≠终止密码子）（3）标记基因的作用：利于目的基因的鉴定和筛选。
常用的标记基因是抗生素基因。
第三步：将目的基因导入受体细胞_（不涉及碱基互补配对）1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2.常用的转化方法：①将目的基因导入植物细胞：农杆菌转化法，基因枪法和花粉管通道法等。
②将目的基因导入动物细胞：常用方法是显微注射技术，受体细胞多是受精卵。
③将目的基因导入微生物细胞：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，再促进感受态细胞吸收DNA 分子，完成转化过程。
3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
第四步：目的基因的检测和表达1.首先检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。
2.其次检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 DNA与mRNA杂交。
3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是进行抗原－抗体杂交。
4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。
典例剖析：例1．目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。
下列属于目的基因检测和鉴定的是（）①检测受体细胞是否有目的基因②检测受体细胞是否有致病基因③检测目的基因是否转录信使RNA ④检测目的基因是否翻译蛋白质A.①②③B.②③④C.①③④D.①②④例2.科学家已经能够通过基因工程的方法，能使番茄果肉细胞中含有人奶蛋白。
以下有关该基因工程的叙述错误的是（）A．采用反转录的方法得到的目的基因有启动子、终止子B．用同种限制酶处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的黏性末端而形成重组DNA分子C．番茄的叶肉细胞可作为受体细胞 D．启动子对于目的基因在番茄的叶肉细胞中的表达是不可缺少的例3.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。
下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（）A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中两种DNA引物分别与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C．延伸过程中需要热稳定DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高例4.对基因表达载体构建的一些说法，不正确的是（）A．需要限制酶和DNA连接酶参与 B．基因表达载体中含有启动子和内含子C．通常用抗生素基因作为标记基因 D．基因表达载体的构建是基因工程的核心例5.（多选）用某人的胰岛素基因制成的DNA探针，检测下列物质，能形成杂交分子的是（）A．该人胰岛A细胞中的DNA B．该人胰岛B细胞的mRNAC．该人胰岛A细胞的mRNA D．该人肝细胞的DNA例6．有关基因工程的叙述正确的是 ( )A．限制酶只在获取目的基因时才用 B．重组质粒的形成是在细胞内完成的C．质粒都可以作为运载体 D．蛋白质的氨基酸排列顺序可以为合成目的基因提供线索例7：下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程，请据图回答下列有关问题：（1）图中①步骤在基因工程中称为。
需用到的两种工具酶分别是和。
（2）质粒上的两种抗性基因称为基因，其作用是。
（3）图中的重组质粒在组成上除了目的基因外，还必须有、和。
（4）为使图中②过程更易进行，可用处理大肠杆菌。
（5）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA，是利用T-DNA可转移至受体细胞并且整合到的特点。
（6）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC—，限制酶Ⅱ识别序列和切点是—G↓GATCC—，那么在①过程中，应用限制酶切割质粒，用限制酶切割抗虫基因。
（7）将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有的培养基上，若能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。
（8）在抗虫棉培育过程中，将目的基因导入棉花受体细胞采用最多的方法是。
（9）④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用根细胞相比较，其优点是。
（10）⑤过程所用的现代生物技术称为，从遗传学角度来看，根据细胞通过⑤过程，能形成棉植株的根本原因是根细胞具有。
（11）要确定抗虫基因导入后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和检定工作，则在个体水平上的鉴定过程可简述为：。
经筛选分析，该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。
理论上，该转基因植株自交产生的F1代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的。
第20课时基因工程（3）知识提纲：考点三：基因工程的应用1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。
a、培育抗虫作物的优点：减少环境污染、降低生产成本。
b、抗虫植物只是抗虫，但不能抗病毒、细菌、真菌等。
c、抗虫棉的Bt毒蛋白基因（目的基因）来自苏云金芽孢杆菌。
2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。
a、动物乳腺生物反应器：利用转基因动物的乳汁来获得所需要的药品b、动物膀胱生物反应器：从转基因动物的尿液中提取药用蛋白c、动物基因工程主要为了改善畜产品的品质，而不是为了产生体型巨大的个体。
3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。
a、原理：利用正常基因置换或弥补缺陷基因的冶疗方法b、成果：将腺苷酸脱氨酶基因转入患者的淋巴细胞，再将这种淋巴细胞转入患者体内而获得免疫能力。
c、途径：体外基因冶疗和体内基因冶疗（两种方法目前都还处于初期临床试验阶段）d、基因冶疗与基因检测的区别：后者是制作相应探针，利用DNA分子杂交原理，快速准确检测人类某种遗传病。