小鼠腹腔巨噬细胞分离
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
小鼠腹腔巨噬细胞分离
1．取6周左右的小鼠，腹腔注射2ml 4％巯基乙酸肉汤或淀粉肉汤。3～4天以后收集腹腔细胞。
2．颈椎脱臼法处死小鼠，消毒腹部，沿腹中线注入5mL冰中预冷的无菌PBS-H（含10U/ml 肝素和10％小牛血清的PBS）和2mL空气。轻轻按摩腹部5分钟。
3．剪开腹壁，用吸管吸出渗出液，再用同样容量的预冷PBS-H冲洗腹腔2～3次。合并渗出液于离心管中，4℃离心400g 5分钟，去上清液。
4．用预冷的RPMI-1640培养液洗涤细胞1次，4℃离心400g 5分钟，去上清液。用预冷的适量RPMI-1640培养液悬浮细胞，台盼蓝染色计数细胞并检测细胞活力。