电位滴定法测定半胱氨酸和胱氨酸的研究及应用1
实验 电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量
实验电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量一、实验目的1. 掌握滴定法测定氨基酸总量的原理2. 了解电位滴定法确定酸碱滴定终点原理3. 熟练使用酸度计。
二、实验原理氨基酸含有酸性的一COOH，也含有碱性的一NH2。
它们互相作用使氨基酸成为中性的内盐。
加入甲醛溶液时，-NH2与甲醛结合，其碱性消失。
这样就可以用碱来滴定一COOH，并用间接的方法测定氨基酸的含量。
将酸度计的玻璃电极及甘汞电极(或复合电极)插入被测液中构成电池,用碱液滴定,根据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点.三、仪器与试剂1. 仪器酸度计、复合玻璃电极、磁力搅拌器烧杯(200mL) 微量滴定管（10ml）2. 试剂①20%中性甲醛②0.05mol/L氢氧化钠标准溶液③pH=6.18标准缓冲溶液四、实验步骤1. 仪器校正：开启酸度计电源，预热30分钟，连接复合电极。
选择适当pH的缓冲溶液，测量缓冲溶液的温度，调节温度补偿旋钮至实际温度。
将电极浸入缓冲溶液中，调节定位旋钮，使酸度计显示的pH值与缓冲溶液的pH值相符。
校正完后定位调节旋钮不可再旋动，否则必须重新校正。
2. 样品处理准确称取约5.0g酱油试样，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取20.0mL，置于200mL烧杯中，加60mL水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液[c（NaOH）=0.050 mol/L]滴定至酸度计指示pH8.2，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05 mol/L）的毫升数，可计算总酸含量。
3. 氨基酸的滴定在上述滴定至pH8.2的溶液中加入10.0mL 甲醛溶液，混匀。
再用氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L ）继续滴定至PH9.2，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L ）的毫升数( V 1)。
4. 空白实验同时取80mL 蒸馏水置于另一200mL 烧杯中，先用0.05mo1/L 氢氧化钠标准溶液滴至pH8.2(此时不记碱消耗量），再加入10.0mL 中性甲醛溶液，混匀。
电位滴定法测定
电位滴定法测定一、电位滴定法是啥呢？电位滴定法呀，就像是给溶液里的物质来一场特别的测量之旅。
它主要是根据滴定过程中指示电极电位的变化来确定滴定终点的一种分析方法哦。
想象一下，溶液里的那些离子呀，分子呀，就像是一群小伙伴在等着我们去发现它们的秘密。
电位滴定法就像是一个超级侦探，通过电位这个神奇的线索来找出我们想要知道的东西，比如说溶液里某种物质的含量之类的。
这种方法可厉害啦，不像有些传统的滴定方法，可能会受到溶液颜色或者人的视觉误差的影响。
电位滴定法可是依靠仪器，很精确的呢。
二、电位滴定法的原理这电位滴定法的原理其实也不难理解啦。
在滴定的过程中呢，随着滴定剂的加入，溶液里的离子浓度会发生变化，这就会导致指示电极的电位发生改变。
就好像是一个天平，当两边的东西不一样多的时候，天平就会倾斜，这里的电位就像是天平的状态一样。
当滴定到达终点的时候，电位会发生一个比较明显的突变，这个突变就告诉我们滴定结束啦，就像赛跑的时候冲过终点线一样明显。
比如说我们测定一个酸性溶液里的氢离子浓度，用碱液来滴定，随着碱液一滴一滴加进去，溶液里氢离子和氢氧根离子的比例在不断变化，电位也跟着变，到了氢离子和氢氧根离子完全反应的时候，电位就会突然来个大变化，这个时候我们就知道滴定完成啦。
三、电位滴定法需要用到的仪器设备1. 电位滴定仪：这可是主角呢。
它就像是一个聪明的小盒子，能够准确地测量出电位的变化。
现在的电位滴定仪功能可强大了，有很多不同的模式可以选择，而且操作也越来越简单方便啦。
2. 电极：电极也很重要哦。
有指示电极和参比电极。
指示电极就像是一个传感器，它能够对溶液里特定离子的浓度变化做出反应，把这种变化转化成电位的变化。
参比电极呢，它就像是一个稳定的参照物，为测量提供一个固定的电位基准。
不同的测定可能需要不同类型的电极，比如测定氯离子的时候可能要用银电极之类的。
3. 滴定管：这个大家应该比较熟悉啦，就是用来准确地加入滴定剂的。
电位滴定法测定半胱氨酸和胱氨酸的研究及应用1
电位滴定法测定半胱氨酸和胱氨酸的研究及应用杜宝中姚秉华田萍薛力（西安理工大学应用化学系，西安710048）摘要本文首次报道了以Hg2+为滴定剂，涂丝Ag-Ag2S电极指示。
电位滴定法测定复杂体系中半胱氨酸和胱氨酸的方法。
滴定终点突跃明显，检测下限1mg/L，回收率96~99%。
方法简便、快捷、灵敏，建立了一种测定半胱氨酸和胱氨酸简易可行的新方法。
关键词：涂丝Ag-Ag2S电极半胱氨酸和胱氨酸电位滴定1、前言在制革脱毛工艺过程中巯基化合物（主要指CySH）的量可度量毛损程度，同时对环境也有不同程度的污染。
因此，本法的研究对于更有效地控制与研究制革脱毛工艺过程和提高成革质量以及检测其对环境污染程度均有十分重要的意义。
另外，半胱氨酸和胱氨酸在医药、生物化学及营养学等领域的广泛应用，亦使人们对其检测方法的研究十分关注。
测定半胱氨酸（CySH）和胱氨酸（CySSCy）的方法目前常见的有容量分析法[1]、光度分析法和微库仑滴定法[2]等，由于制革脱毛液本身的颜色、混浊及存在的各种复杂成分，使容量分析法和比色法在操作过程中带来困难，或因严重干扰而不适用；而微库仑滴定法不受颜色和浊度的影响，但要同时测定二者，必须分别采用碘库仑池和溴库仑池，给实际分析工作带来不便，硫离子选择电极对巯基的Nernst相应较差[3] ，从而限制了直接电位法的应用。
电位滴定法测定巯基化合物虽有文献报导[4,5]，但主要以银离子作滴定剂，限于纯样品中CySH和CySSCy的测定。
因此，关于复杂体系中CySH和CySSCy的测定国内外尚未见报道。
作者以Hg2+为滴定剂，涂丝Ag-Ag2S电极[6]作指示，电位滴定法测定了复杂体系中CySH和CySSCy含量，建立了最佳测定条件，获得了满意的结果。
2、测定原理2.1 CySH测定在pH5左右，CySH 中的巯基在10-1~10-4mol/L范围内对硫电极产生约50mV 亚Nernst响应，Hg2+对硫电极也产生约70mV的超Nernst响应。
电位滴定法
电位滴定法电位滴定法是一种常用的分析方法，用于测定溶液中某种物质的浓度。
它基于电化学原理，通过测定被滴定溶液中的电势变化来确定滴定终点。
电位滴定法常用于测定酸碱溶液中的物质浓度。
在实际操作中，首先需要准备好一种适当的指示剂，用于指示滴定过程中的终点。
常用的指示剂有酸碱指示剂、金属指示剂和草酸指示剂等。
在进行电位滴定法测定时，首先需要对滴定溶液进行标定。
这一步骤可以通过将已知浓度的标准溶液与待测溶液进行滴定的方式来完成。
通过测定终点的电势变化，可以计算出待测溶液中物质的浓度。
在进行电位滴定法测定时，需要使用一种电位滴定仪器，常见的有自动滴定仪和半自动滴定仪。
在滴定过程中，滴加的速度和滴定终点的确定非常关键。
滴加速度过快会导致无法准确确定终点，而滴加速度过慢则会增加测定的时间成本。
在使用电位滴定法进行测定时，需要制定一定的实验方案。
首先需要选择适当的指示剂，根据待测溶液的性质来选择合适的电位滴定仪器。
其次需要确定滴加速度以及滴定过程中的观察方法，以便准确测定终点。
电位滴定法的优点在于操作简单、快速高效。
通过测定溶液中物质浓度的方法，可以在实际应用中广泛使用。
它在化学分析、环境监测和医药等领域都有着重要的应用。
然而，电位滴定法也存在一些限制。
首先，它对滴定终点的要求较高，需要选择合适的指示剂和滴定速度。
其次，对于某些物质，如颜色较深或溶解度较低的物质，电位滴定法可能不适用。
此外，电位滴定法在处理不均质样品时也存在一定的难度。
总之，电位滴定法是一种常用的分析方法，在实际应用中具有广泛的用途。
它通过测定滴定溶液中的电势变化来确定滴定终点，从而计算出待测溶液中物质的浓度。
虽然电位滴定法操作简单、快速高效，但也存在一定的限制。
因此，在实际应用中需要根据具体情况选择合适的测定方法和仪器，以获得准确可靠的测定结果。
氨基酸的定量测定教材
1、甲醛滴定法
特点：简单易行、快速方便，与亚硝酸氮气容量法分析结果相近 应用：脯氨酸与甲醛作用时产生不稳定的化合物，使结果偏低 酪氨酸含有酚羧基，滴定时也会消耗一些碱而致使结果偏高 溶液中若有铵存在也可与甲醛反应，往往使结果偏高 试剂：40%中性甲醛溶液（以百里酚酞作指示剂，用氢氧化钠溶液将 40%甲醛中和至淡蓝色） 1g/L百里酚酞乙醇溶液 1g/L中性红50%乙醇溶液 0.1mol/L氢氧化钠标准溶液
(VHClO4 cHClO4 VNaAC cNaAC ) M m
100%
（含有两个氨基的氨基酸，如赖氨酸、胱氨酸和精氨酸在此计算式中还应该除以2） 式中：VHClO4——所消耗的高氯酸标准溶液的体积 cHClO4——所消耗的高氯酸标准溶液的浓度 VNaAC——所消耗的醋酸钠溶液的体积 cNaAC——所消耗的醋酸钠溶液的浓度 M——被测氨基酸的摩尔质量 m——被测氨基酸的质量
②样品测定：吸取澄清的样品溶液1～4mL，按标准曲线制作步骤，在相同 条件下测定吸光度A值，测得的A值在标准曲线上可查得对应的氨基酸质量。
3、茚三酮比色法
结果计算：
m 100 氨基酸含量= （mg/100g） m1 1000
式中：m——从标准曲线上查得的氨基酸的含量，μg m1——测定的样品溶液相当于样品的质量，g
100%
式中：VHClO ——所消耗的高氯酸标准溶液的体积 cHClO ——所消耗的高氯酸标准溶液的浓度 M——被测氨基酸的摩尔质量 m——被测氨基酸的质量
4
4、非水溶液滴定法
②回滴法（适用于不易溶解于冰醋酸而能溶解于高氯酸的氨基酸）：精确称取氨 基酸样品30~40mg 左右，溶解于5mL高氯酸标准溶液中，加2滴甲基紫指示剂，剩 余的酸以醋酸钠溶液滴定，颜色变化由黄，经过绿、蓝至初次出现不褪的紫色为 终点。 氨基酸含量=
恒电位滴定法测定混合氨基酸含量
┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊装┊┊┊┊┊订┊┊┊┊┊线┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊目录摘要--------------------------------------------------------------------------- 3 Abstract ----------------------------------------------------------------------- 3 1 绪论------------------------------------------------------------------------ 4 1.1 滴定计算分析理论和运用---------------------------------------------------- 41.1.1 电位分析法---------------------------------------------------------- 41.1.2 滴定计算分析-------------------------------------------------------- 41.1.3 控制体积滴定法------------------------------------------------------ 51.1.4 控制电位滴定法------------------------------------------------------ 6 1.2 氨基酸及氨基酸类药物------------------------------------------------------ 71.2.1 氨基酸概述---------------------------------------------------------- 71.2.2 氨基酸的分类-------------------------------------------------------- 71.2.3 氨基酸的药理学作用--------------------------------------------------101.2.4 氨基酸药物的分类----------------------------------------------------111.2.5 氨基酸分析技术------------------------------------------------------111.3 本文所作的工作------------------------------------------------------------142 实验原理-------------------------------------------------------------------14 2.1 计算模型------------------------------------------------------------------14 2.2 测定步骤------------------------------------------------------------------142.2.1 平衡时间测定（MEAS）------------------------------------------------142.2.2 等体积测定（MET）---------------------------------------------------142.2.3 恒电位测定（DET）---------------------------------------------------14 2.3 测定对象------------------------------------------------------------------152.4 电极的选择----------------------------------------------------------------153 实验部分-------------------------------------------------------------------15 3.1 实验仪器及试剂------------------------------------------------------------153.1.1 实验仪器------------------------------------------------------------153.1.2 实验试剂------------------------------------------------------------16 3.2 溶液的配制----------------------------------------------------------------163.2.1 0.02mol/L 氢氧化钠溶液的配制----------------------------------------163.2.2 1.00×10-2 mol/L丝氨酸溶液的配制-------------------------------------163.2.3 1.00×10-2 mol/L组氨酸溶液的配制-------------------------------------163.2.4 1.00×10-2 mol/L谷氨酸溶液的配制-------------------------------------163.2.5 1mol/L硝酸钠溶液的配制---------------------------------------------173.2.6 0.01mol/L盐酸的配制------------------------------------------------173.2.7 单组分氨基酸标准溶液和待测溶液的配制--------------------------------173.2.8 谷氨酸、丝氨酸（组氨酸）混合氨基酸标准溶液和待测溶液的配制-----------17┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊装┊┊┊┊┊订┊┊┊┊┊线┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊3.2.9 丝氨酸、组氨酸混合氨基酸标准溶液和待测溶液的配制--------------------18 3.3 仪器设置------------------------------------------------------------------193.3.1 测定氨基酸溶液平衡时间的参数设定------------------------------------193.3.2 氨基酸溶液等体积测定时的参数设定------------------------------------193.3.3 恒电位滴定氨基酸溶液时的参数设定------------------------------------19 3.4 实验条件------------------------------------------------------------------203.4.1 平衡时间的控制------------------------------------------------------203.4.2 温度的控制----------------------------------------------------------21 3.5 恒电位滴定法测定单组分氨基酸的含量----------------------------------------223.5.1 恒电位滴定法测定丝氨酸的含量----------------------------------------223.5.2 恒电位滴定法测定组氨酸的含量----------------------------------------233.5.3 恒电位滴定法测定谷氨酸的含量----------------------------------------24 3.6 恒电位滴定法测定两组分混合氨基酸的含量------------------------------------253.6.1 恒电位滴定法测定丝氨酸、谷氨酸混合氨基酸的含量----------------------253.6.2 恒电位滴定法测定谷氨酸、组氨酸混合氨基酸的含量----------------------263.6.3 恒电位滴定法测定丝氨酸、组氨酸混合氨基酸的含量----------------------274 问题和讨论-----------------------------------------------------------------28 4.1 单组分氨基酸的测定结果----------------------------------------------------284.1.1 丝氨酸的测定结果----------------------------------------------------284.1.2 组氨酸的测定结果----------------------------------------------------294.1.3 丝氨酸的测定结果----------------------------------------------------294.1.4 结论----------------------------------------------------------------29 4.2 两组分混合氨基酸的测定结果------------------------------------------------294.2.1 丝氨酸、谷氨酸混合溶液的测定结果------------------------------------294.2.2 组氨酸、谷氨酸混合溶液的测定结果------------------------------------304.2.3 丝氨酸、组氨酸混合溶液的测定结果------------------------------------304.2.4 结论----------------------------------------------------------------30 4.3 两组分氨基酸滴定曲线分析--------------------------------------------------314.3.1 pH 值与电位之间的换算关系-------------------------------------------314.3.2 氨基酸的存在形式----------------------------------------------------314.3.3 丝氨酸、谷氨酸混合溶液滴定曲线分析----------------------------------364.3.4 组氨酸、谷氨酸混合溶液滴定曲线分析----------------------------------374.3.5 丝氨酸、组氨酸混合溶液滴定曲线分析----------------------------------394.3.6 进行恒电位滴定时选择工作电位所应注意的问题--------------------------41谢辞---------------------------------------------------------------------------43参考文献-----------------------------------------------------------------------44┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊装┊┊┊┊┊订┊┊┊┊┊线┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊恒电位滴定法测定混合氨基酸含量【摘要】氨基酸分析是生命科学研究中最重要的技术之一,但以恒电位滴定法对氨基酸的含量进行测定目前尚不多见。
一种测量半胱氨酸、高半胱氨酸和谷胱甘肽的方法[发明专利]
![一种测量半胱氨酸、高半胱氨酸和谷胱甘肽的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/91277c6c777f5acfa1c7aa00b52acfc789eb9f05.png)
专利名称：一种测量半胱氨酸、高半胱氨酸和谷胱甘肽的方法专利类型：发明专利
发明人：秦卫东,张倩倩,王俊华
申请号：CN202111395160.7
申请日：20211123
公开号：CN114088676A
公开日：
20220225
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种测量半胱氨酸、高半胱氨酸和谷胱甘肽的方法，属于纳米材料传感领域。
包括以下步骤：(1)将氧化型谷胱甘肽和氯金酸的混合溶液微波循环断续加热，待溶液冷却到室温后离心，将沉淀用去离子水洗涤三次后烘干，得金纳米簇；(2)以2‑吗啉乙磺酸和高锰酸钾为原料合成二氧化锰纳米片；(3)将金纳米簇、二氧化锰纳米片和样品溶液混合于磷酸盐缓冲溶液，在10℃恒温至2、5、30min时，用荧光光谱法分别测量半胱氨酸、高半胱氨酸和谷胱甘肽的含量。
本发明提供的方法选择性好、灵敏度高，可对复杂样品中半胱氨酸、高半胱氨酸和谷胱甘肽的实现同时灵敏检测。
申请人：北京师范大学
地址：100875 北京市海淀区新街口外大街19号
国籍：CN
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电位分析法—电位滴定法(食品仪器分析课件)
二、一阶微商法
若E-V曲线较平坦，突跃不明显，则可绘制ΔVE/ΔV曲线。ΔE/ΔV是E的变化值与相应的加入滴定剂体积的增量之 比。如当加入滴定剂为 24.10～24.20mL，相应的E由183 mV 变至194mV，则
E 194183 110mV mL1 V 24.20 24.10
其对应的体积平均值
根据测得的一系列电动势（或pH）及其相应的消耗滴定 剂的体积确定滴定终点。
2.终点确定方法
电位滴定法确定终点的方法有E-V曲线法、一阶微 商法和二阶微商法。
E-V曲线
一阶微商曲线 二阶微商曲线
电位滴定终点确定方法
电位滴定法确定终点的方法有E-V曲线法、一阶微商 法和二阶微商法。
E-V曲线
一阶微商曲线 二阶微商曲线
最后根据滴定剂和待测组分反应的化学计量关系，由 滴定过程中消耗的滴定剂的量即可计算待测组分的含量。
二、终点确定方法
1.实验方法
进行电位滴定时，先称取一定量试样制成试液，用移液管移 取一定体积置于滴定池中，插入指示电极和参比电极，将标准溶 液（滴定剂）装入滴定管中，组装好装置。开启电磁搅拌器和毫 伏计，读取滴定前试液的电池电动势，并记录，然后开始滴定。
一、E-V曲线法
以滴定过程中测得的电池电动势为纵坐标，滴定消耗滴定剂 的体积为横坐标绘制E-V曲线。E-V曲线上的拐点（即曲线斜率最 大处）所对应的体积即为终点体积（Vep）。
确定拐点的方法是，作两条与横坐 标成45o角的E-V曲线的平行切线，并在 两条切线间作一与两切线等距离的平行 线，该线与E-V曲线的交点即为拐点。 即为终点体积（Vep）。
V 24.10 24.20 24.15 mL 2
将ΔE/ΔV对 V 作图，可得一峰形曲线，曲线最高点 由实验点连线外推所得，其对应的体积即为终点体积（ Vep）。用此法作图确定滴定终点较为准确，但较烦琐。
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电位滴定法测定半胱氨酸和胱氨酸的研究及应用杜宝中姚秉华田萍薛力（西安理工大学应用化学系，西安710048）摘要本文首次报道了以Hg2+为滴定剂，涂丝Ag-Ag2S电极指示。
电位滴定法测定复杂体系中半胱氨酸和胱氨酸的方法。
滴定终点突跃明显，检测下限1mg/L，回收率96~99%。
方法简便、快捷、灵敏，建立了一种测定半胱氨酸和胱氨酸简易可行的新方法。
关键词：涂丝Ag-Ag2S电极半胱氨酸和胱氨酸电位滴定1、前言在制革脱毛工艺过程中巯基化合物（主要指CySH）的量可度量毛损程度，同时对环境也有不同程度的污染。
因此，本法的研究对于更有效地控制与研究制革脱毛工艺过程和提高成革质量以及检测其对环境污染程度均有十分重要的意义。
另外，半胱氨酸和胱氨酸在医药、生物化学及营养学等领域的广泛应用，亦使人们对其检测方法的研究十分关注。
测定半胱氨酸（CySH）和胱氨酸（CySSCy）的方法目前常见的有容量分析法[1]、光度分析法和微库仑滴定法[2]等，由于制革脱毛液本身的颜色、混浊及存在的各种复杂成分，使容量分析法和比色法在操作过程中带来困难，或因严重干扰而不适用；而微库仑滴定法不受颜色和浊度的影响，但要同时测定二者，必须分别采用碘库仑池和溴库仑池，给实际分析工作带来不便，硫离子选择电极对巯基的Nernst相应较差[3] ，从而限制了直接电位法的应用。
电位滴定法测定巯基化合物虽有文献报导[4,5]，但主要以银离子作滴定剂，限于纯样品中CySH和CySSCy的测定。
因此，关于复杂体系中CySH和CySSCy的测定国内外尚未见报道。
作者以Hg2+为滴定剂，涂丝Ag-Ag2S电极[6]作指示，电位滴定法测定了复杂体系中CySH和CySSCy含量，建立了最佳测定条件，获得了满意的结果。
2、测定原理2.1 CySH测定在pH5左右，CySH 中的巯基在10-1~10-4mol/L范围内对硫电极产生约50mV 亚Nernst响应，Hg2+对硫电极也产生约70mV的超Nernst响应。
以Hg2+滴定CySH中巯基时，发生络合反应：2CySH+ Hg2+Hg(CyS)2+2H+反应的K稳=1043。
当滴定至终点时，巯基量的剧减和Hg2+量的剧增使硫电极产生电位突跃，指示终点到达。
2.1 CySSCy测定在pH6时，CySSCy与NaHSO3定量反应：CySSCy+NaHSO3CySH+ CySSO3Na该反应转化为CySH的回收率达99%以上[7]。
通过测定CySH量可得CySSCy量。
3、实验部分3.1 仪器与试剂101型pH/mV 计（江苏电分析仪器厂）；涂丝Ag-Ag 2S 电极（自制）；801双液接饱和甘汞电极；10mL 微量滴定管；N 2 瓶。
滴定度200ugS 2-/ mL Hg 2+标准溶液：称取在1050C 下烘干的优级纯氧化汞0.6755g ，以5 mL 浓硝酸溶解，稀释至1000 mL 。
滴定时再稀释5倍（此液可稳定存放半年）。
pH=4.0,4.5,6.0的HAc －NaAc 缓冲溶液；制备离子交换柱：将D301大孔径弱碱性树脂（西安树脂厂），用酸、碱反复淋洗，再用水洗至pH3~4后，装入25mL 滴定管中（下端垫玻璃纤维）树脂高约12㎝，然后用0.01mol/L HCl 10mL 淋洗两次，备用。
3.2 实验方法3.2.1 制备试样液 将脱毛液调至pH4（视含量可加水稀释），在500C 水浴中保温，通N 2 6~8min ，以除去S 2-干扰，取其上层清液为试样液。
3.2.2 取适量试样液，用 HCl 调节 pH2，倾入树脂柱，以50mL 烧杯收集流出液，然后用0.01mol/L HCl 溶液淋洗3~4次，每次约5mL 。
此液即为待测样液。
3.2.3准确移取一定量待测样液于50mL 烧杯中，加pH4.5缓冲液15mL ，在恒速搅拌下，用汞标准溶液滴定至电位发生明显突跃(>40mV)为终点，记录滴定剂体积V 1(mL)。
然后加入pH6的缓冲液调至pH6，再加3~4滴10%NaHSO 3溶液，搅拌反应5min ，继续用汞标准液定至终点，记录滴定剂体积V 2(mL) ，可分别求得CySH 和CySSCy 的含量。
4、结果与讨论4.1底液酸度的选择：考虑到本法在偏酸性溶液中进行，且CySH 抗氧化能力较强，其终点电位突跃最大以及胶体硫不干扰本法测定等因素。
选择pH4.5 HAc －NaAc 缓冲液作底液较为适宜。
同时在测定过程中，尽可能少用缓冲液，以降低滴定介质的离子强度，增加终点电位突跃值，提高方法的灵敏度。
4.2 胱氨酸还原条件：在胱氨酸溶液中加入10% NaHSO 3后，溶液静置约10min ，搅拌下5min 即可转化完全。
因此，本文选择室温下搅拌反应5min 。
4.3 共存物的干扰：凡能与CySH 反应的重金属离子的存在，在一定程度上可干扰测定，但本文测定试样中此类离子含量甚微，无明显干扰。
而与CySH 共存的S 2-、-232O S 、-23SO 对测定有影响。
试样中共存的S 2- 直接影响CySH 的测定结果。
可采用酸化通N 2 消除S 2-干扰，试验表明，可除去99%以上的S 2-，而不引起其它组分的改变。
在CySH 和-232O S 共存溶液中以本法测定，因-232O S 与Hg 2+发生络合反应(K 稳=1029.4) 而产生干扰，由于-232O S 和CySH 的结构决定其具有巯基特性，以丙烯晴、氯化苄等掩敝法、酸化通N 2分解法和氧化还原法均无法消除干扰，但考虑到-232O S ,72.1,60.021==pK pK CySH 的等电点pI=5.02，利用pH=2~5范围内，CySH 带正电，-232O S 带负电这一特点，采用离子交换树脂分离后即可进行测定。
为提高树脂交换容量，淋洗液酸度0.01mol/L 为宜。
若树脂交换性能下降，经1mol/L HCl 和NaOH 再生后，其性能恢复如前。
-23SO 离子的存在，使本法终点电位突跃下降，其量大于0.01mol/L 时，影响测定结果，这主要是-23SO 与Hg 2+ 形成络离子所致。
因此，在用NaHSO 3还原胱氨酸双硫键时，用量不可过多，否则终点电位突跃太小。
另外制革过程和生化制品中常见的共存物如-23CO 、-Cl 、-24SO 、-24HPO 和落叶松栲胶皮质水解物及表面活性剂等均无明显干扰。
结果见表1。
表1 常见干扰物的影响4.4回收试验：将实际试样中CySH 和CySSCy 分别测定后，再添加CySH 和CySSCy 溶液，本法测得二者的回收率分别为98%和96%，表明本法测定结果是可靠的。
结果见表2 表2 回收率试验注：测定结果为三次数据的平均值4.5 样品测定：以制革厂灰碱脱毛废液及生化制品为试样，按前述实验方法分步滴定CySH 和CySSCy ，结果如表3所示。
表3 样品测定结果注：测定结果为5次数据平均值5、结论5.1 本法与化学法和光度法相比，不受试样颜色和浊度的影响，并从根本上消除了232O S 对CySH 的干扰。
由于络合反应的K 稳非常大，反应迅速完全，终点突跃十分明显，勿需绘制滴定曲线即可确定终点。
检测下限CySH 为1mg/L ，CySSCy 为2mg/L 。
5.2 本法为制革脱毛液中CySH 和CySSCy 的快速、准确测定提供了一种可行的简便方法，同时还可用于工业控制以及医药、生化和营养学等样品的测定。
参考文献1、陈耀祖．有机分析[M]． 北京：高等教育出版社，1983：2662、刘海坤，周端赐，李拓． 分析化学[J]．1984，12（2）：8333、Paul K ．C ．Tesng ．Anal ．Chem ．Acta, 1975，47：23164、L ．Prszner ．Anal ．Chem ，1975，47：19105、Hiromn Satake ，etc ，The chem ．Society of Japam ．1981，54：19686、杜宝中．西北轻工业学院学报[J]，1990，8（4）：50Determinatiom of Cysteine and Cystine with PotentiometricTirationand Its Analaytical ApplicationBu Bao-Zhong Yao Bing Hua Tian Ping Xue Li(Department of Applied chemistry Xian University of Technolory, Xian 710048)Abstract In the paper it is firstly reported in China that a new method is used determine Cysteine and Cystine Leather Depilating Waste water by using an electrode of coated wire Ag-Ag 2S.The high efficacy exchange resin, desingned by the author himself, has eliminated the serious interference due to, Meanwhile such researched on instrumentation system ,reducing condition and other substances, its recovery is above 96%.This method is simplified, quick, sensitive and accurate, Which would not be affected by the colour and turbility, of the samples, endpoint mutation is explicit. Cysteine and Cystine have been determined simultaneously in a sample. Therefore, this method can be widely applied to determined in control of industrial process, medicine, biochehemstry and alimentoloyKeywords: coated wire Ag-Ag 2S electrode Cysteine and cystine Potentiometric titration。