实验动物与动物实验的生物安全共47页
实验动物实验室的生物安全防护要求(讲义)
最适宜温度：20-25℃，温差：3℃或4℃ 适宜的相对湿度：40-70%
换气次数：10-20次/小时，洁净程度越高，要求换气次 数越多。
气流速度：0.1-0.2m/s。 压强梯度：洁净区高于污染区，每级压差20-50Pa。合 理组织气流和风速可调节室内温度和湿度，又可降低室 内粉尘和有害气体污染，控制传染病的流行。
按微生物控制程度分类
1 、 普通环境 实验动物的生存环境直接与 外界大气相通。 2 、屏障环境 进入实验动物生存环境的空气 须经净化处理，其洁净度相当于10000级。 进入屏障内的人、动物和物品等均须严格的 微生物控制，是饲养清洁级SPF级实验动物 的场所。 3 、 隔离环境 洁净度相当于100级。人不能 直接接触动物。进入隔离系统内的动物和物 品都要经过严格的 净化和灭菌处理。是饲养 SPF级悉生动物及无菌动物的场所。
一、实验动物及实验动物设施：
以科学研究为目的而进行科学饲养、
繁殖的动物称之为实验动物。
它包括严格意义上的实验动物即在一定的环境条件 控制下，经过科学的育种、繁殖生产，遗传背景清 楚，携带的微生物状况明确，并对其生态学、生物 学、生物化学、形态结构了解的特殊动物如大鼠、 小鼠、金黄地鼠、豚鼠、家兔、犬和小型猪等。 也包括一部分家畜、家禽和一些未经过人工驯化的 野生动物，如猫、羊、非人灵长类、鸡、鸭、鸽、 蛇、蛙和鱼类等等。
表2 动物实验设施（设备3）环境指标（静态）
指标 项目 小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠 普通环境 温度，℃ 19～26 屏障环境 20～25 隔离环境 普通环境 16～26 犬、猴、猫、小型猪 屏障环境 18～22 隔离环境 鸡 屏障环境 16～26
日温差，℃ ≤ 相对湿度，%
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实验动物与动物实验室的生物安全防护
起的人和动物共患的一种细菌性疾病。人感染后形成 结核病，猴、犬、豚鼠、兔和猫等均可感染，以猴发 病率最高。
（九）志贺菌病
由志贺菌(Shigella spp)或称痢疾杆菌引起人和实
验动物肠道感染的一种细菌性疾病。人和猴以细菌性
痢疾为主要症状。
进入按以下顺序，即：更衣-淋浴- 更灭菌衣--洁净
走廊--动物实验室-污染走廊--洗消室--更衣--外部。
所有进出人员必须严格遵守屏障环境管理规定。
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物品进出屏障环境的基本要求： 双扉高压蒸汽灭菌器：耐高压蒸汽灭菌物品的灭菌。 带紫外线消毒的传递窗：不耐高温高压、不能药液 浸泡以及内包装已经由高压蒸汽、60CO辐照和环氧 乙烷等灭菌方式灭菌过的物品的灭菌。
率高，黄种人低。
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（五）弓形虫病
本病是由属孢子纲的刚第弓形虫引起的，能够在人
与动物之间传染的重要人兽共患病。小鼠、大鼠、地鼠
、豚鼠、犬和猴为中间宿主，猫为终末宿主。
症状：常无明显症状。
人：多数为无症状的隐性感染；
实验动物：少数被毛疏松不整，淋巴结肿大，出现 流产或死胎现象。
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（六）沙门氏菌
季均可发生，春夏稍高。
2、症状：(1)前驱期(沉郁期)；(2)兴奋期(狂暴期)；(3)麻痹期
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（四）猴B病毒病
由猴B病毒(Simian Bvirus Infections)（又称疱疹病
毒）引起的人和猴共患的一种传染病。猴是B病毒的自然 宿主，感染率可达10％～60％。多数情况下仅在口腔出现 疱疹和溃疡，之后病毒可长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器 官附近的神经节，也可长期潜伏在组织器官内，产生B病 毒抗体。人类感染主要表现脑炎或脑脊髓炎症状，多数病 人发生死亡。 大多数猴呈隐性感染。种族差异明显，白种人死亡
实验动物与生物安全
人类 疾 病 天 然 模 型 存 在 ， 且 有 的 高 等 动 物 在 解 而 剖、 生理 学上 接 近 于人 类 ， 医 学 实 验 最 理 想 的实 是 验动 物 。 目前 ， 乎 所 有 的 生命 科 学 领 域 的 科 研 、 几 教学 、 生产 、 检定 、 安全 评 价 和 成 果评 定 都 离 不 开 实
实验动物与生物安全
* 包括下述不同等级：
基础实验室（BSL-1): 一级生物安全水平 基础实验室（BSL-2): 二级生物安全水平 防护实验室（BSL-3): 三级生物安全水平 最高防护实验室（BSL-4):四级生物安全水平
四、野生动物和昆虫
普通级环境应安装纱窗、挡鼠板、下水道安装 网眼挡板等。
五、动物致敏原 实验前戴口罩、手套和防护镜，穿隔离服，
症状严重者需要脱离动物饲养环境并且治疗。
六、有害气体 来源于动物粪便、尿液等排泄物，主要成分 为氨。当饲养室饲养动物的密度过大，或更 换垫料不及时均会引起氨气浓度过高；特别 是在大动物饲养室中。
三、生物安全的相关术语
1.实验室生物安全 —— 是指从事生命科学研究和教学的实验室为避免 各种生物危害而采取包括建立规范的管理体系、配 备必要的物理、生物防护设施和设备等综合措施。
2.生物安全实验室（biosafety laboratory, BSL） —— 是指专门从事病原微生物研究的实验室。
* 根据操作不同危险度等级微生物所需的实验室设计
* ABSL-1一般不需要使用生物安全柜，人员进入实验 室穿戴防护服和手套即可，应配备常规的实验及清洁 用具，也可配备呼吸防护装置、紧急冲洗装置等。可 在开放的实验台、洗手池上操作。
* ABSL-2在达到ABSL-1条件的基础上，还应具备生物 危害警告标志，要增加适合感染性材料操作的Ⅱ级生 物安全柜、洗眼装置以及高压灭菌锅和化学消毒装置 等废弃物处理设施，实验室的门带锁，能自动关闭。
2、细菌性疾病
沙门氏菌病、布氏杆菌病、猴结核病、志贺氏菌病、李 斯特菌、鸚鹉热、鼠咬热、鼠疫、钩端螺旋体病、肠炎 耶森氏菌病等；
实验动物与动物实验室的生物安全防护
一、流行性出血热 二、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎 三、狂犬病 四、猴B病毒病 五、弓形虫病 六、沙门氏菌病
与人类之间自然传播和感染疾病， 七、钩端螺旋体病
即人类和脊椎动物由共同病原体 八、结核分支杆菌病
引起，在流行病学上又有关联的 疾病。
九、志贺菌病 十、鼠痘 十一、兔出血症
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（一）流行性出血热
由流行性出血热病毒引起的主要发生于大鼠的烈性传染病
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（七）钩端螺旋体病
钩端螺旋体病(Leptospirosis)是一种重要而复杂的 人畜共患病和自然疫源性传染病。临床表现形式多样， 主要有发热、黄疸、血红蛋白尿、出血、流产、皮肤和 黏膜坏死、水肿等。
钩端螺旋体的动物宿主非常广泛，几乎所有温血 动物都可感染，其中啮齿目的鼠类是最重要的贮存宿主
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，也是一种人畜共患的自然疫源性传染病。1981年WHO统一命 名为肾综合征出血热（HFRS ）。 1、自然宿主：主要是小型啮齿动物，大鼠为实验动物型HFRS
的主要传染源。
2、传播：气溶胶吸入，人类主要接触宿主动物及排泄物而受感 染。
3、症状： 人：发热，头痛，肌肉痛，结膜水肿充血（点状）， 出血性肾损伤（肾综合症出血热），最后肾衰竭，出现尿毒 症，严重可导致死亡。大鼠：多为隐性感染，长期排毒，一 般无临床症状，也不死亡。一般不影响实验进程。
（八）结核分支杆菌病
由结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引
起的人和动物共患的一种细菌性疾病。人感染后形成
结核病，猴、犬、豚鼠、兔和猫等均可感染，以猴发
病率最高。
（九）志贺菌病
由志贺菌(Shigella spp)或称痢疾杆菌引起人和实
验动物肠道感染的一种细菌性疾病。人和猴以细菌性
实验动物与生物安全课件
第二类
ABSL-3
第一类
ABSL-4
实验动物生物危害及控制
废弃物
动物粪便 动物尸体 野生动物及昆虫 动物致敏源 有害气体
动物饲养及实验人员安全防护
安全教育及操作培训 健康检查及接种疫苗 实验中个人防护 实验中意外损伤的防护
第十四章 实验动物与生物安全
实验动物生物安全实验室要求
危害程度分类
第四类 第三类
防护水平
ABSL-1 ABSL-2
实验室操作和安全设施
限制出入，穿戴防护服和手套。 ABSL-1的操作内容加上, 危险警告标志。 可产生气溶胶的操作应使用Ⅰ级或Ⅱ级 BSC。废弃物和饲养笼具在清洗前先清除 污染。 ABSL-2的操作内容加上,进入限制,所有 操作均在BSC内进行，并穿着专用特殊防 护服。 ABSL-3的操作内容加上,严格限制出入, 进入前更衣,配备Ⅲ级BSC或正压防护服, 离开时淋浴,所有废弃物在清除出设施前 需先清除污染。
实验动物动物实验生物安全要求
实验动物动物实验生物安全要求动物实验是科研和医学领域中不可或缺的一个环节，它对于理解疾病的发展机制、测试新药物的安全性和有效性起着重要的作用。
然而，动物实验也引起了许多道德和伦理问题，而且可能对动物自身造成潜在风险。
因此，为了保障动物福利和实验结果的可靠性，需要制定一系列针对实验动物的生物安全要求。
首先，实验动物的源头管理是非常关键的。
采购实验动物的单位需要确保从信誉可靠、依法合规经营的实验动物供应商购买。
供应商需要提供相应的证明文件，证明其符合国家相关法律法规的要求，并提供适用于动物实验的相关品系鉴定报告。
这些文档包括供应商仓库的温湿度、空气质量等状况，以及经营者的许可证、动物饲养及疫情防控制度等。
其次，实验动物的饲养环境要求严格，确保其健康和安全。
饲养环境应该清洁、卫生，而且能够满足实验动物的生理需求。
实验动物的饲养场所应该具备必要的保温、通风和消毒设施，以及室内外合理的采光条件。
对于一些特殊物种的实验动物，如透明鱼类或无毛小鼠等，需要提供特殊的设施和饲养条件，以保证其生存和繁殖。
此外，实验动物的生物安全要求还包括对饲料、饮水和饲养物资的要求。
饲养动物所需的饲料应该符合国家相关标准，满足其营养需求，并且不含有因农药残留、重金属或其他有害物质。
饮水系统应当进行定期的检测和清洁，以保障实验动物的饮水安全。
另外，饲养物资如饲养箱、笼具、水槽等应该经过彻底的清洗和消毒，并且定期更换，以防止潜在的交叉感染和环境污染。
为了确保动物实验的科学性和严谨性，动物实验应该得到科研机构的批准，并严格按照一定的实验操作规范进行。
实验过程中应该监测实验动物的生理指标和行为特征，及时发现并处理异常情况。
实验动物的相关记录和数据应该进行可靠的管理和保存，以保证实验结果的可信度和可重复性。
此外，疾病防控也是动物实验中的一项重要工作。
实验动物单位需要建立健全的疫情监测制度和应急响应机制，及时发现并处理动物疾病或异常情况。
对于一些潜在的感染性疾病，如屠杀病或实验动物病毒等，需要采取必要的隔离措施，确保其他动物和工作人员的安全。
动物实验室的生物安全
动物实验室的生物安全作者：实验室生物安全精品课程发布时间：2009-7-7 访问人数：261调整文章字体大小：[大] [中] [小]第四章动物实验室的生物安全（一）小鼠的抓取与固定配音部分：抓取和固定是动物实验操作中一项最基本的技术，所有的动物实验均涉及到，不同种类的动物其抓取和固定的方法不一样，下面介绍小鼠的抓取与固定。
动画设计部分：第一步：正确操作：首先用右手从笼盒内将小鼠尾中部或基部抓住，并提起或放在手上；也可以用尖端带有橡皮的镊子夹住小鼠的尾巴。
错误操作：（1）抓住小鼠的尾尖部小鼠挣脱或断尾（2）抓取时用力过大小鼠窒息或颈椎脱臼（3）抓取时用力过小小鼠头部能反转过来咬伤实验者的手部第二步：正确操作：固定（徒手固定）：右手抓住小鼠尾部，将小鼠放在笼盖（或表面粗糙的物体）上，轻轻向后拉尾巴，然后当小鼠向前挣脱时，用左手拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤，无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部，并调整好动物在手中的姿势。
错误操作：（1）在光滑的表面徒手抓取小鼠增加抓取的难度，因为小鼠视野小，胆小，在在粗糙的表面行动迟缓，便于抓取。
（2）左手抓小鼠力量过大小鼠窒息或颈椎脱臼，或内脏破裂。
（二）小鼠眶静脉丛窦采血（可适用于病原微生物感染的动物血样本的采集）配音部分：实验动物的采血方法很多，按采血部位不同，可分为：尾部采血，耳部采血、眼部采血、心脏采血以及大血管采血等，当需要多次重复采血时，可以采用下面介绍的小鼠眶静脉窦采血。
动画设计部分：第一步：正确操作：准备一个广口瓶，里面装少许已消毒的棉球，再到如适量乙醚至棉球上，但不可浸透棉球。
右手抓住小鼠尾部（方法同上述抓取方法），将小鼠头朝下放入广口瓶中，保持小鼠悬空，小鼠头不可接触到棉球，右手在外面拉住小鼠尾巴。
错误操作：（1）棉球放入过多，乙醚的量过多小鼠麻醉过度死亡（2）小鼠头部接触棉球或把小鼠完全直接放入瓶内小鼠麻醉过度死亡（3）抓住小鼠的尾尖部尾部挣断或从手中滑脱，小鼠掉入瓶内，麻醉过度。
实验动物生物安全及动物福利
实验动物及其动物实验的操作
在进行实验时，为了不损伤动物的健康，不影 响观察指标，并防止被动物咬伤，首先要限制动物 的活动，使动物处于安静状态，抓取动物前，必须 对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔 细、大胆敏捷、熟练准确、工作人员必须掌握合理 的抓取固定方法。
• 实验动物及其动物实验的操作
• 以隔离器(Isolator)为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养 无菌动物和已知菌动物。洁净度达到5或7级。
实验动物及其设施的等级
• 隔离环境动物设施主要指标
• 洁净度：5或7级（空气三级过滤后，加隔离器） • 温 度：20-26℃; 日温差：≤4℃ • 相对湿度：40-70%; 静压差： ≥ 50Pa • 换气次数：≥20次/h；气流速度： ≤ 0.2m/s • 落下菌数：≤0个/皿; 氨浓度：≤14mg/m3 • 工作照度：≥200/lx ;噪音：≤60dB(A)
二、实验动物福利
一、实验动物生物安全
（一)引言
实验动物：指经人工饲养、繁育，对其携带的微生物和寄 生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研 究、医药、教学、生产和检测鉴定以及其他科学实验的动 物。如大鼠、小鼠、裸鼠、豚鼠、家兔、比格犬、恒河猴、 小型猪、沙鼠等。 实验用动物包括：实验动物，野生动物，经济动物。如牛、 羊、猫、未实验动物化的土种狗等。 动物实验：是指以实验动物为对象和材料，在设计好的符 合相应条件要求的环境下进行实验或者检测，观察、记录 动物的反应情况和结果的过程。
实验动物及其动物实验的操作
屏障环境标准操作规程
• SPF级实验动物购买的标准操作规程 • SPF级实验动物接收和检疫的标准操作规程 • SPF级动物实验室实验动物饲料、饮水、垫料管理的标准操作
实验动物的生物安全
二、 实验动物的生物危害及其评估
感染性微生物的危险等级 ——是公认的评估感染风险的主要依据
等级划分原则 1、微生物致病性 2、传播方式和宿主范围 3、现有预防措施 4、现有治疗措施
二、 实验动物的生物危害及其评估
WHO对感染性微生物的危险度分级 1级：无或极低危险 不对人或动物致病 2级：中度个体危险，低度群体危险 可致病但危害不严重，可有效治疗及预防，传播可能有限 3级：高度个体危险，低度群体危险 导致人或动物严重疾病，一般不传染，可有效治疗和预防 4级：高度危险 导致人或动物严重疾病，易于发生个体间直接/间接传播，
感染风险评估内容：传染源+传播途径+易感对象+管控措施
对传染源的评估 传染源包括： 被研究的病原、实验动物和易感宿主、接触动物的易感人群 传染源特性 1、病原体：毒力，致病性，生物学稳定性 2、宿主：实验动物种类，自然携带的传染性病原，记载的
职业病来源 3、疫源地/疫情
二、 实验动物的生物危害及其评估
对传播途径的评估 1、病原逸散方式： 天然的、人工的 2、病原传播方式： 气溶胶、直接接触、二次传播，垂直传播 3、感染途径： 摄入、吸入、粘膜接触、意外接种等
二、 实验动物的生物危害及其评估
对易感对象的评估 1、人/动物感染后发病的严重程度 2、人/动物的抵抗力 3、对人/动物有效免疫预防措施、治疗方法、医疗监督 4、人的技术水平、经验
二、 实验动物的生物危害及其评估
1、实验室感染 人兽共患病、动物传染病 2、过敏 实验动物过敏症 3、环境污染
二、 实验动物的生物危害及其评估
动物实验设施内感染的种类 1、人兽共患病的实验室感染*** ——宿主广泛，严重危及公共安全 ——使用标准化合格实验动物时基本可避免 2、实验性病原体的实验室感染** ——实验性病原体意外扩散导致工作人员（动物）感染 ——较常见，传播范围局限，但情况较复杂 3、动物传染病的实验室感染* ——危害实验动物健康 ——波及生态系统