高速逆流色谱技术应用现状

合集下载

高速逆流色谱技术原理及应用领域

• 20世纪70年代，逆流色谱(CCC)。首先出现液滴逆流色谱(DCCC)
溶剂泵
进样器
进样器
溶剂约300根管柱上行法收集器
泵收集器约300根管柱下行法
优点：DCCC仪器轻巧简便，能避免乳化或泡沫的产生。缺点：流动相流速低，每小时只有十几毫升；分离过程长，一般需要几十小时才能完成一次几个组分的分离．
分离管内侧 ——————————————————————————————————————— ………………………………ooooo……ooooo②……oooo……………………………………… ………………………………………ooo…………oooo………………③……………………… ………………………………oooo①oo……ooooooo……oooo…①…………………………… ①②③④ ooooooooooooooooooooooooo……③……oooo…………ooooooooooooooooooooooooooooooo ooooooooooooooooooooooooo…oo……ooo④oo……ooo…ooooooooooooo④oooooooooooooo oooooooooooooooooooooooooo………oooo……oooo………oooooooooooooooooo②ooooooooo ——————————————————————————————————————— 分离管外侧 ①③组分，由于在轻相中的分配系数过大不易被流动相洗脱下来 ②④组分，根据在重相的分配系数大小按顺序洗脱出来分离区 ………………――――轻相 oooooooooooo――――重相 ①②③④——样品（4组分）
作为多分离柱高速逆流色谱仪国家新型专利的拥有者、高速逆流色谱领域的领导者，我们与通用电气医疗生物科学中国有限公司（ GE Healthcare Bio-sciences co.,ltd . ）建立了长期的合作伙伴关系 .

高速逆流色谱的应用与发展

一是基于流体静力学平衡的体系，有液滴逆流色谱（DCCC）、回转腔式逆流色谱仪（RLCCC）、旋转腔式逆流色谱（GLCCC）和固定螺旋管式逆流色谱仪（HCCC）等。
二是基于流体动力学平衡的体系，与上述差别是螺管绕自身轴线运动，分为非行星式、非同步式和同步式三大类，已开发出了多种形式的离心式逆流色谱设
固相浸润的影响主要由两方面决定，一是选用介质的亲和性，如果是亲油介质即使先被水占据多孔介质的外表面或内表面，在经过一段时间浸泡于油相中均会被油相所替代，这是一种平衡规律，反之亦相似，如果介质是双亲性质，则决定于油、水的亲和力对比。
如果采用固体颗粒加入油相，则固体内外表面均为油相所浸润，将颗粒简化为一孔球形颗粒，其示意图如图 2：
4
在第 1 种组合中（即固体相在固定相中加入）以一个分离级单元如图 1 所示：
A. 液体相（水相）
B. 液体相（有机相）
待分离物 a
C. 固体相
图 1 三相高速逆流色谱传递过程第 1 种组合
——固体相在固定相中加入示意图
待分离物质 a，利用萃取原理通过两液间的分配平衡富集于 B 相，又利用液
相色谱固定吸附原理选择性富集于 C 相，而洗脱过程则利用一合适洗脱液流动
3
2.3 三相高速逆流色谱利用高比表面的细小的固体分离载体与一液相形成流态化相与另一液相构
成高速逆流色谱的两相体系进行分离，实现液/液粗分→液/固提纯→液/固洗脱 →收集产品的一机优化过程，一方面可提高高速逆流色谱分离的选择性、分离容量和分离效率，又可发挥高速逆流色谱的连续、逆流、压降较低和可适合含固体杂质的分离，建立一种新的分离纯化的有效体系。可以解决目前液相色谱在分离粗制样品时存在的一些问题，如：柱吸附、柱堵塞造成的柱效下降，难以分离经微粉化技术处理的物料，难以分离高粘度样品，某些化合物需经过两步或多步才能实现有效分离等；同时可以解决高速逆流色谱在选择性和分离效率方面的局限性，将两种分离技术结合在一起，提供了新的分离选择性。这一体系的建立主要特点是在高速逆流色谱（HSCCC）体系中加入颗粒状的固相分离介质，在高速离心力场作用下，建立一固定相（由液/固或液相组成）—流动相（由液体相或液/ 固相组成）的三相高速逆流色谱。

高速对流液相色谱技术的研究及应用

高速对流液相色谱技术的研究及应用高速对流液相色谱技术是分离技术的重要一环。

在化学、生命科学、食品等领域，都有着广泛的应用。

该技术的研究及应用一直备受人们的关注。

本文将简要介绍高速对流液相色谱技术的基本原理、仪器设备及其应用。

一、基本原理高速对流液相色谱技术(短为HPLC)是基于分子间相互作用力的分离技术。

其原理是在高压下，将待分离的混合物在固定相上进行分离，分离时，不同成分依据相互间作用力和化学性质，在固定相中的停留时间不同，从而实现物质的分离。

大多数情况下，液相色谱的固定相都是多孔性的，可以有效地分离分子。

二、仪器设备高速对流液相色谱技术的仪器设备主要包括：漏斗、流动泵、样品进样装置、微量进样器、固定相柱、检测器和记录器。

整个系统由高压车法瓶、液体进样器、固定相柱、检测器和储存装置组成。

固定相柱是高速对流液相色谱技术的核心部件。

可以采用不同的固定相材料(如硅胶、活性炭、C18等)，不同的固定相材料具有不同的分离特性。

检测器则是记录离子流的总响应的设备，在这个过程中，可以通过生物学或化学方法来检测分化物质。

一般使用荧光检测器、紫外线检测器、流动反应离子检测器等。

三、应用高速对流液相色谱技术被广泛应用于食品、制药、化学、环境监测和证据分析等领域。

下面将从不同角度来介绍高速对流液相色谱技术的应用领域。

1、食品领域高速对流液相色谱技术在食品分析中的应用愈加广泛，主要应用于检测食品中的残留有害物质和添加剂的含量，如农残、抗生素、食品添加剂等。

此外，它还广泛应用于咖啡因、甜味剂、色素和虫胶素等食品添加剂的分析。

2、制药领域高速对流液相色谱技术在药品开发过程中扮演着越来越重要的角色，它可以通过快速准确地测定药品中的成分、温度、湿度和其他因素来提高制药过程的效率和质量。

高速对流液相色谱技术也用于药物中不同组分的交互作用和药物在体内的代谢过程的研究。

3、化学领域高速对流液相色谱技术在化学分析领域应用广泛，主要应用于环境污染和分析化学领域，用来测量水中的氨、硝酸盐、磷、硅、汞、镉、铜等，以及空气、土壤中的有毒物质。

高速逆流色谱原理及应用

高速逆流色谱的仪器设备
高速逆流色谱系统由高压泵、进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统等组成，其中色谱柱是核心部件。
高速逆流色谱的应用领域
高速逆流色谱在药物分析、天然产物研究、环境监测和食品安全等领域具有广泛的应用。
高速逆流色谱与传统色谱快、样品损失少等优点，适用于复杂样品的分析。
高速逆流色谱的优势和局限性
高速逆流色谱具有高灵敏度、高分辨率和多样性等优势，但对样品前处理要求严格，并且柱寿命较短。
总结与展望
高速逆流色谱作为一项重要的分析技术，将继续发展并在更多领域中发挥重要作用，为科学研究和工业应用提供支持。
高速逆流色谱原理及应用
高速逆流色谱（HPLC）是一种高效、准确的分析技术，广泛应用于生物医药、食品安全和环境监测等领域。
高速逆流色谱的介绍
高速逆流色谱是一种液相色谱技术，利用高压泵将样品溶液通过色谱柱，以不同的化学性质分离样品中的化合物。
高速逆流色谱的原理
高速逆流色谱基于溶质的分配与吸附过程，通过调节移动相和静态相的性质，实现对样品中化合物的分离和分析。

高速逆流色谱仪原理特点及应用

高速逆流色谱仪原理特点及应用一、简介高速逆流色谱（HPLC）是一种高效、精准的分析技术，它广泛应用于化学、制药、环保、食品等领域。

高速逆流色谱仪是高速逆流色谱技术的核心设备，能够对各种化合物进行分离和检测。

在本文中，我们将介绍高速逆流色谱仪的原理、特点及应用。

二、原理高速逆流色谱仪使用液相色谱技术，其基本原理是将待测样品溶液经过一定的处理后，注入色谱柱，通过色谱柱内液相的物理化学作用，将各种组分分离出来，并用检测器检测分离出来的化合物。

高速逆流色谱仪相较于其他色谱仪的优势在于可以在极短的时间内完成大量的分离、检测等操作。

高速逆流色谱仪的原理是基于其内部的色谱柱，其内部结构可以细分为装载柱、色谱柱和联接管。

样品通过色谱柱时，每种组分将被一步一步地分离出来，直到达到检测器，最后数据将被转换为电子信号，并通过数据处理软件进行分析和处理。

三、特点1. 高效HPLC技术的一大优势在于其高效性，使用HPLC技术可以在更短的时间内分离出更多的物质成分，从而提高分析效率。

2. 精准由于高速逆流色谱仪的高分辨率和灵敏度，其能够分离出复杂物质的成分，从而提供更加准确的结论。

3. 多种检测方式高速逆流色谱仪可使用不同类型的检测器，如紫外检测器、荧光检测器等，可以检测多种类型的化合物成分。

4. 适用范围广高速逆流色谱仪不仅适用于小分子化合物的分离和检测，也可以用于生物大分子、天然产物、有机和无机化合物等物质的分离和检测。

四、应用高速逆流色谱仪广泛应用于化学、生命科学、环境科学、食品科学等领域，其准确性和高效性为这些领域的研究和实践提供了重要的技术支持。

1. 化学在化学领域中，高速逆流色谱仪通常在合成新药物、分离小分子化合物、分析毒物、研究反应机理等方面有着广泛的应用。

2. 生命科学高速逆流色谱仪在生命科学领域可以用于分析蛋白质、氨基酸、核酸和多糖等生物大分子，可以检测蛋白质含量和组成，研究生物大分子的三维结构，为分子生物学、细胞生物学和基因工程研究提供技术支持。

近十年高速逆流色谱在中药化学成分分离中的应用概况

一
王风美等Ｉ利用ＨＳＣＣＣ法分离纯化丹参水溶性成分丹酚酸类物质，制备出丹酚酸Ｂ，纯度用ＨＰＬＣ测定，可达到９８．６％，可作为高纯度丹酚酸Ｂ化学对照品的制备分离方法。
２．展望
１．１生物碱类
金艳等 … 采用氯仿一无水乙醇一０．２ａｎｒ１／Ｌ盐酸ｆ４：３：２）系统，从浙贝母中分离得到贝母素甲、贝母素乙，经ＨＰＬＣ分析纯度，分别可达９７．５％、９４．５％，并采用ＭＳ、Ｈ— ＮＭＲ鉴定其结构。洪波等利用氯仿一甲醇一盐酸（０．３ｍｏｌ／Ｌ）（４：３：２）溶剂系统从附子【｝］分离得到了１５一Ａ一羟基新乌碱单体。１．２黄酮类张友胜等选用溶剂系统石油醚一醋酸乙酯一甲醇一水（１：３：２：２），从蛇葡萄植物中（ＡｍｐｅｌＩｌＩ１ｓｉｓＭｉｘｃｈｘ）将含有很高含量的二氢杨梅素从８０％左右的粗品提纯到９０％以上。潘霞等以芦荟全叶为原料，采用氯仿一甲醇一水（体积比为４：３：２）混合溶液和二氯｝｛｜烷一甲醇一水（５：４：２）混合溶液作为溶剂分离系统，ＨＳＣＣＣ经过两步分离纯化出色谱纯度在９５％以上的芦荟色酮单体。１．３鞣质类化合物采用正己烷一醋酸乙酯一乙醇一水（３：５：６：４）和正己烷一乙醚一乙醇一水（５：３：３：７）溶剂系统，李静等以莪术粗捉物为原料，应用ＨＳＣＣＣ技术，分离得到姜黄素。１．４苷类化合物窦得强一等采醋酸乙酯一正丁醇一水（４：ｌ：５）溶剂系统，从人参莘叶总皂苷ｑ１分离出人参皂苷Ｒｅ和Ｒｇ，经薄层鉴别人参皂苷Ｒｅ和Ｒｇ分别与对应的标准品有相同的Ｒｆ值１．５香豆素类王巧娥等采用溶剂系统为正己烷一氯仿一甲醇一水ｆ５：６：３：２）分离得到什草查尔酮甲和胀果香豆素甲的纯度分别为９５．Ｏ％和９８．８％。ＷｅｉＹ等从ｃｎｊ（１ｉｕｍｍ０ｎｎｉｅｒｉ（Ｉ．＿）ｃｕｓｓ０ｎ（ｃｆ１ｍｍ０ｎｃｎｕｍＦｒｕｉｔ）分离得到香豆精类化合物的实验ｌｌ１，即利用分析型ＨＳＣＣＣ测得正己烷一乙酸乙酯一甲醇一水（１：１：１：１）和（５：５：６：４）为最适合溶剂体系，然后应用制备型ＨＳＣＣＣ进行分离，效果较好。１．６其他（上接第１２０页）（Ｏ．０８９８，０．７１２７），全局最小值厂＝一１．０３１６．．

高速逆流色谱技术在天然产物分离中的应用

高速逆流色谱技术在天然产物分离中的应用摘要天然产物的有效成分的分离是一个复杂过程，并且目前所使用的分离纯化技术远不能达到人们的要求。

高速逆流色谱技术（HSCCC）的出现使得这一问题得到了显著的解决。

本文主要就HSCCC的原理、溶剂体系的选择、特点及其在天然产物分离方面的应用做简要的介绍。

关键词：天然产物的分离，高速逆流色谱技术，溶剂体系的选择AbstractThe active ingredient’s isolation of natural product is a complex proc ess. And the current separation and purification technology don’t meet the requirements.High-speed countercurrent chromatography (HSCCC) makes this problem has been significantly addressed. This review focuses on HSCCC principle, the choice of solvent system, characteristics and the application in natural product’s isolation. Keywords: Natural product’s isolation, HSCCC, The choice of solvent system我国药用植物种类及其丰富，搞清其有效成分，对中药的开发利用显得尤为重要。

但天然产物的有效成分的分离是一个复杂过程，而且目前所使用的分离纯化技术远远不能令人满意。

传统的分离方法对含量低、结构和性质相似以及不能结晶的组分的分离提纯常常受到限制，存在固态载体的吸附损耗、样品可能变性、回收率低等问题[1]。

现在用于天然产物分离的主要色谱技术为高速逆流色谱技术（HSCCC），该技术是由美国国立卫生院Yiochiro Ito博士[2]于上世纪80年代发明的。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

高速逆流色谱技术应用现状Application actuality of high-speed countercurrent chromatography(HSCCC)刘迪1陈雪峰1宋晓宇2LIU Di1CHEN Xue-feng1SONG Xiao-yu2(1.陕西科技大学生命科学与工程学院,陕西咸阳712081；2.陕西海升果业发展股份有限公司,陕西咸阳713300)(1.Department of Life Science and Engineering,Shaanxi University of Science and Technology,Shaanxi,Xianyang712081,China；2.Shaanxi Haisheng Fresh Juice Co.Ltd,Shaanxi,Xianyang713300，China)摘要：综述了高速逆流色谱技术(HSCCC)原理及特点，溶剂体系的选择，影响分离效果的因素，与之相联的检测技术及其应用现状。

关键词：高速逆流色谱(HSCCC)；溶剂体系；分离；检测；应用Abstract:This paper reviews the principle,characteristic,choice of two-phase solvent systems,factors of effecting separetion impact,checking and measuring technology coupled with HSCCC forhigh-speed countercurrent chromatography(HSCCC)。

The application of HSCCC is also introduced.At last，this article discusses the expectation of HSCCC.Keywords:High-speed countercurrent chromatography(HSCCC)；Two-phase solvent systems；Separation；Checking and measuring；Application 在互不相溶的溶剂中溶质可以有不同的分配系数，根据此原理，产生了逆流色谱技术。

逆流色谱从产生至今，经过不断的发展与完善，逆流色谱技术和设备都已趋近于成熟。

至今，已出现了高速逆流色谱技术(high-speed countercurrent chromatography，HSCCC)，它是逆流色谱技术经历了近60年发展的结果。

高速逆流色谱技术(HSCCC)最早的研制应用者是美国国立卫生院Ito博士[1]，最初它是用来进行制备分离的。

近几年，人们对健康的认识越来越深刻，更多的人追求天然绿色的健康理念，故HSCCC作为一种对提取物污染小的制备技术，它的应用越来越受到了人们的关注。

目前，HSCCC已从制备型发展到了分析型，甚至是微量分析型，应用范围也十分广泛[2]。

高速逆流色谱技术在我国的应用较早，技术水平在国际领域也处于领先地位。

目前，我国是世界上为数不多的高速逆流色谱仪生产国之一。

我国的深圳同田生化技术有限公司是全球第一家多分离柱高速逆流色谱仪专业生产企业。

公司拥有自主知识产权的高速逆流色谱专利技术，现已研制并生产出TBE系列分析型，半制备型TBE-300、300A，制备型TBE-1000高速逆流色谱仪设备。

本文就高速逆流色谱技术的原理及特点、溶剂体系的选择、影响提取效果的因素、与之相联的检测技术以及其应用现状，做简单的综述。

1原理及特点—————————基金项目：广东佛山市科技局攻关项目（03080011），陕西科技大学B类科研创新团队资助。

作者简介：刘迪(1980-)，女，陕西科技大学生命科学与工程学院在读研究生。

E-mail:didi19801210@收稿日期：2005-12-211.1原理流体动力学中有一种特殊的动力学平衡现象，即单向流体动力学平衡现象。

HSCCC就是利用了这种现象来实现高速分离的。

在这样的动力平衡体系中，两种互不混溶的溶剂相在转动螺旋管中单向地分布。

高速逆流色谱仪工作时，色谱仪中的螺旋管做行星运动，由于重力及螺旋管力的作用，固定相移向螺旋管的入端，使得固定相得以保留，同时两相溶剂在螺旋管中得以混合。

由于不同溶质在两相中的分配系数不同，溶质在两相溶剂中进行分配平衡，从而使不同成分得以分离。

1.2特点高速逆流色谱技术的特点有以下几点：(1)操作简单易行：传统的制备方法，如重结晶、柱层析和高效液相色谱(制备型)，操作周期长且步骤繁琐。

HSCCC无需对样品进行复杂的处理，出峰可以在线检测，且可以和灵敏度高的检测技术联用，方便快捷准确。

(2)应用范围很广：HSCCC中使用的两相溶剂体系组成可以是任意的，故可以适用于各种化合物的分离。

(3)无需固体载体：由于不使用固体载体所以不会出现吸附、污染、峰形拖尾以及样品损失等现象。

因此HSCCC 在经过多次重复分离均可以实现较好的重现性以及得到较高的回收率。

(4)产品纯度高：选择正确的溶剂体系，可以将样品分离后得到高于90%纯度的产品。

(5)适用于制备型分离。

2溶剂体系的选择欲用HSCCC进行成功的分离，选择适宜的溶剂系统非常重要。

不同的溶剂系统，具有不同的上、下相之比，其粘度、极性、密度等性质相差甚远，对相同的成分具有不同的溶解、分配能力，形成分配系数的差异，对分离效果产生不同的影响。

目前，溶剂体系的选择还没有一套完整的理论依据。

一般来讲，选择的条件为[3]：(1)溶剂可分层；(2)不造成样品的分解或变性；(3)固定相能实现足够高的保留值：一般要求固定相的保留值大于50%(体积比)；(4)样品在溶剂系统中有合适的分配系数值：被分离物质的分配系数(K)范围要在0.5～2(K=Cu /CL,Cu是上相中溶质浓度，CL是下相中溶质浓度)，测量K值可以用浓度测定法和色谱法(TLC或HPLC)；(5)溶剂易挥发除去。

对于未知组成的样品，一般根据经验来选择溶剂体系。

通常是先选用氯仿/甲醇/水(2：1：1，体积比，下同)或正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水(1∶1∶1∶1)溶剂体系进行尝试，然后再进行适当的改变。

溶剂体系选择后，通常以平衡两相中的上相为固定相，下相为流动相。

另外，两相中的酸碱性不同，会对溶液中酸碱性较敏感的化学成分的分离造成影响。

近年来，溶剂体系的选择已经发展到用超临界CO2(SF CO2)以及制冷剂R134a(1,1,1,2-四氟乙烯)作流动相[4]。

3影响因素高速逆流色谱仪的转速、流动相流速、进样体积是影响提取效果的主要因素。

通常情况下：(1)转速越高，越易产生乳化现象；(2)流动相流速越大，固定相流失加重；(3)进样量太大，峰间距变窄，峰形变宽。

在选定了溶剂体系后，有时需要对三个仪器运行参数(转速，流动相流速，进样体积)进行正交试验，以确定最佳分离条件。

4与高速逆流色谱技术相联的检测技术目前，可见光检测﹑紫外光检测技术在HSCCC中应用较多。

但有时由于组分对可见光或紫外光无吸收，或是固定相的流失导致流出液乳化，故无法用常用光学检测器检测。

现在已出现了HSCCC 与质谱(MS)、电子电离质谱(EIMS)、化学电离质谱(CIMS)、快速原子轰击质谱(FABMS)、热喷雾质谱(TSPMS)和电喷雾质谱(ESIMS)的联用[5]。

5进展5.1天然产物HSCCC 具有较强的适应性，可以从复杂的天然产物粗制品中提取不同特性(如不同极性)的有效成分。

用乙酸乙酯/正己烷/甲醇/水(3∶1∶1∶6)分离红茶粗提物，得到茶黄素、茶黄素单没食子酸酯和茶黄素双没食子酸酯[6]；用氯仿/甲醇/水(4∶3∶2)分离银杏叶粗提物，得到白果内酯[7]；先用乙酸乙酯/正丁醇/水(5：1.8：6)分离山茱萸粗提物，再用乙酸乙酯/乙醇/水(5：0.5：6)进一步分离，得到纯度为97%的没食子酸[8]；用石油醚/乙酸乙酯/甲醇/水(1：3：2：2)分离含82.89%二氢杨梅素的蛇葡萄粗提物，得到纯度为90%以上的二氢杨梅素[9]；用氯仿/甲醇/水(4∶3.8∶2)分离芦荟粗提物，可以将芦荟中的蒽醌类成分很好的分离[10]HSCCC 不仅可以用来对天然产物的粗提物进行有效成分的提纯，还可以用于对天然产物进行除杂处理。

5.2中药我国是中药大国，中药在我国的资源十分丰富。

基于HSCCC 的特点，利用它来进行中药有效成分的提取与纯化，具有很大优势。

用丁醇/乙酸/水(4：1：5)分离冬忍花粗提物中的绿原酸，粗提物绿原酸含量为5.97%，纯化后纯度达到94.8%，得率达到了约90%[11]；用正己烷/正丁醇/水(3：4：7)分离人参粗提物，可以得到5种组分[12]；用正己烷/乙醛/乙醇/水分离紫草粗提物，可以得到纯度为98.9%的紫草宁，回收率达到96.95%[13]；用氯仿/甲醇/异丙醇/水(5：6：1：4)分离刺五加粗品，得到刺五加苷，纯度为98%[14]；用分析型的HSCCC 设备得出用氯仿/甲醇/0.2M 盐酸(4：1.5：2)可以从黄连中分离出4种生物碱，并用制备型设备进行分离制备[15]；用氯仿/甲醇/0.5mol/L HCl(2：1：1)分离中药黄柏粗提物，可以得到8种生物碱和一种小檗碱[16]；用氯仿/甲醇/水(4：3：2)分离虎杖粗提物中的乙酸乙酯相，用乙酸乙酯/乙醇/水(10：1：10)和乙酸乙酯/乙醇/水(70：1：70)分离虎杖粗提物中的水相，最后得到白藜芦醇和白藜芦醇甙，纯度均为99%[17]；用pH6.2的氯仿/磷酸-磷酸钠缓冲液(1∶1)分离苦参粗提物得到生物碱类成分[18]；用正己烷/乙醇/水(10∶5.5∶4.5)和正己烷/乙醇/水(10∶7∶3)，采用分步洗脱的方法可以分离纯化丹参[19]；采用乙酸乙酯/甲醇/水(4∶1∶5)分离长瓣金莲花粗提物，得到黄酮类物质[20]；采用甲醇/NaH 2PO 4缓冲液(4∶3∶1)分离弥勒獐牙菜中的总生物碱，并证实了其中有一种为龙宁胆碱[21]；用氯仿/甲醇/NaH 2PO 4缓冲溶液(pH 值4.8)(3∶2.5∶1)分离青叶胆中的生物碱，并证实了其中一个生物碱为龙胆碱，含量30%[22]；用氯仿/甲醇/水(10∶7∶3)分离纯化雪莲黄酮类成分[23]；用氯仿/甲醇/水(9∶10.5∶8)从芦荟生药中一次性分离得到芦荟甙(纯度99.99%)和芦荟大黄素(纯度95.83%)[24]；用氯仿∶甲醇∶水=4∶(3.5～4.0)∶2作为溶剂分离系统，对含蒽醌类中草药的乙醇粗提物进行分离，该溶剂体系具有通用性，用它来分离茜草、虎杖及决明子中的蒽醌类活性成分[25]。