含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述
浙江大学远程教育学院专科毕业作业题目含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述专业学习中心姓名学号指导教师年月日目录1黄芪的简介 (1)2 黄芪中皂苷类化合物的介绍 (1)2.1 黄芪类化合物的化学成分 (1)2.2 黄芪中皂苷类化合物化学结构 (2)3 含黄芪制剂的种类和特点 (3)4 HPLC法测定含黄芪制剂皂苷类成分的研究动态 (3)4.1 含黄芪制剂HPLC样品制备方法 (3)4.2 HPLC法测定黄芪制剂皂苷化合物的内容及技术难点 (4)4.3 HPLC法测定黄芪制剂的应用实例 (5)5 小结与展望 (5)参考文献 (5)含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述【摘要】目的：综述近年来含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的研究动态，为今后在黄芪制剂此类成分的检测和质量标准的制定提供参考性建议。
方法：通过对近几年国内外相关文献资料的分类、整理、分析、对比，总结了黄芪制剂的皂苷的结构组成，黄芪制剂的结构特点，HPLC法测定的技术进展等。
结果：随着HPLC软件和硬件设施的不断更新，相关技术和理论的不断完善，越来越多的含黄芪制剂皂苷类化合物可以运用HPLC法检测，而且此方法具有高效、简便、准确的特点。
结论：HPLC法可用于黄芪制剂中皂苷类化合物的检测，且有着很好的应用实践价值。
【关键词】黄芪；皂苷；高效液相色谱；检测方法黄芪是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，黄芪有很强的药用价值，为多版中国药典收录的上乘补气药材。
黄芪主要含有皂苷、多糖、黄酮三类主要的化学成分，其中皂苷类化合物是发挥药效的主要成分[1]。
目前随着中药提取分离技术的不断革新，越来越多的黄芪类提取物被赋予现代化的制剂剂型。
但是黄芪复杂的组成成分和结构给黄芪制剂的质量控制、化学成分分析及含量测定带来了一定的难度[2]。
随着分析检测技术的日趋完善，运用HPLC法检测黄芪制剂中的皂苷类化合物已成为研究的热点，已有多数相关的研究报道表明HPLC法可以用于黄芪中皂苷成分的测定，并且具有准确度高、操作简便、效率更高的特点。
以下就黄芪的化学组成、结构特点、黄芪制剂特点、HPLC法测定方法的进展做一概述。
1黄芪的简介黄芪(Radix Astragalus)，又称北芪、元芪、黄耆，为豆科多年生草本植物，主要分布在我国的河北、山东、山西、陕西、甘肃、青海、内蒙、东北等地，以西北和内蒙产地的药用黄芪质量最好。
黄芪的根部是最具药用价值的部位，是我国历来最为推崇的补气补血的一味中药[3]。
黄芪味甘，微温，具有补气固表，托疮生肌，利水的功效，主治气血虚弱，自汗、久泻脱肛、子宫脱垂、肾炎浮肿等症状，始载于《神农本草经》，已经有数千年的药用历史，随着中药现代化进程的加快，黄芪的应用范围也在逐步扩大[4]。
2 黄芪中皂苷类化合物的介绍2.1 黄芪类化合物的化学成分黄芪之所以有着强大的药用价值，主要是因为黄芪药材本身含有的多种药用活性成分，其主要具有的药用成分包括以下几种。
(1)皂苷类成分：这是黄芪药材中最主要的活性成分，上世纪70年代，日本研究人员采用离子交换色谱法首次从黄芪中分离出了皂苷类成分，真正的让人们了解到黄芪中皂苷类化合物的存在，解开了人们对对黄芪中皂苷类成分的分离和检测。
陆续的人们采用水提法、醇提法、萃取法、树脂吸附法、超临界流体法分离得到各种类型的皂苷类化合物。
主要有：乙酰基黄芪皂苷、异黄芪皂苷(I~II)、黄芪皂苷(I~VIII)、大豆皂苷、三萜皂苷等。
随着中药分离技术的提高，越来越多的皂苷类成分被发现，而且不同的皂苷类成分的结构也极为相似，这也给我们黄芪制剂的检测带来了不小的难度[5]。
(2)多糖类成分：黄芪中的多糖成分主要有葡萄糖和阿拉伯糖的多聚体和多糖化合物。
近几年随着中药提取技术的更新与发展，研究人员们发现了黄芪中的多糖类还包括鼠李糖、半乳糖、葡聚糖和糖醛酸等[6]。
(3)黄酮类成分：黄芪中另一个重要成分是黄酮类化合物，主要有熊竹素、芒柄花素、毛蕊异黄酮、槲皮素、山奈黄素等[7]。
(4)其他成分：黄芪中还有一些含量较低的活性成分，主要包括氨基酸类、微量元素、叶酸、亚麻酸、维生素等[8]。
2.2 黄芪中皂苷类化合物化学结构黄芪药材中的皂苷类化合物通常具有复杂的化学结构，一般是由结构复杂的皂苷元和葡萄糖、鼠李糖、半乳糖结合而成。
目前已经分离得到的黄芪皂苷类化合物主要有：乙酰基黄芪皂苷、异黄芪皂苷(I~II)、黄芪皂苷(I~VIII)、大豆皂苷、三萜皂苷等，其主要结构式如下图所示[9]。
图1 乙酰基黄芪皂苷图2 异黄芪皂苷I图3 黄芪皂苷I 图4 大豆皂苷图5 三萜皂苷3 含黄芪制剂的种类和特点目前随着中医中药产业的现代化进程的不断加快，以及中药活性成分提取分离技术的提高，黄芪的临床应用不仅仅限于黄芪中药材和中药饮片的使用。
研究人员已经开始将黄芪根部位进行提取分离，得到浓缩后的黄芪提取物，并将其与现代的给药形式相结合，制成各种剂型应用于临床患者，满足了不同患者、不同适应症的需求，提高了患者的顺应性和黄芪的临床治疗效果。
目前临床常用的黄芪新剂型主要有黄芪口服液、黄芪颗粒(冲剂)、注射用黄芪多糖灭菌粉末、黄芪注射液等[10]。
黄芪口服液为棕黄色的澄清液体，含丰富的氨基酸、多糖、胡萝卜素、叶酸、多种微量元素、黄酮、黄芪皂苷、胆碱和葡萄糖醛酸等，用于治疗慢性病毒性肝炎、小儿反复呼吸道感染( RRI)、小儿肾病综合征、恶性肿瘤等。
黄芪颗粒(冲剂)为淡黄色颗粒，1g成药相当于1g生药黄芪。
该药口感好，可作为治疗小儿肾病较好的辅助用药，对小儿RRI也有较好疗效。
黄芪注射液有效成分以黄芪皂苷为主，1mL黄芪注射液(相当于生药2g)含黄芪甲苷不得少于0.08mg，可供肌内注射或静脉滴注，临床已广泛用于冠心病、充血性心力衰竭(CHF)、病毒性心肌炎(VMC)等。
注射用黄芪多糖灭菌粉末为类白色无定形粉末，无臭无味，总糖量以葡萄糖计不少于85%，主要用于癌症患者化疗或放疗后的辅助治疗。
根据黄芪开发出的新的药理活性，临床用药的需要，以及随着制剂技术的提高，研究人员尝试将黄芪提取物赋予更为新型的制剂剂型中，如黄芪纳米微粒、黄芪脂质体、复方黄芪鼻腔喷雾剂等[11]。
含黄芪的制剂在临床上均发挥着重要的作用，而且越来越多的新型的黄芪制剂相继研究和应用于临床，这对含黄芪制剂的含量检测、质量控制提出了更高的要求，传统的检测方法已经不能满足黄芪制剂分析检测的要求，高效液相色谱法的应用已经成为当下研究的热点，陆续有关于HPLC法测定黄芪制剂皂苷类成分的研究报道出来。
4 HPLC法测定含黄芪制剂皂苷类成分的研究动态4.1 含黄芪制剂HPLC样品制备方法因在黄芪制剂中黄芪的活性成分皂苷所占含量较低，在制备HPLC样品时需要对其进行进一步的提取和浓缩，以便更好进行HPLC法测定。
其样品处理的原则首要的是将黄芪制剂中的固体颗粒、少量蛋白、色素等成分除去，避免这些物质的存在对皂苷类化合物的测定结果造成干扰。
另一方面也可避免堵塞色谱柱元件，影响流动相流速的稳定性和均一性[12]。
目前常用的黄芪制剂HPLC样品制备方法有沉淀、过滤、离心、脱脂、结晶、洗涤、再溶解等方法。
在有些难以处理制备的样品中，单一的制备方法并不能满足需求，通常可以是多种方法的同时利用以达到制备合乎要求的样品液。
封士兰等[13]人在制备黄芪颗粒样品时，先采用溶剂超声法初步提取，然后用有机溶剂萃取分离得到可直接进样的HPLC样品。
总的来说黄芪制剂HPLC样品制备方法众多，在样品的制备时需要考虑到黄芪制剂的剂型特点，以及需结合HPLC色谱条件选择合适的样品制备方法。
4.2 HPLC法测定黄芪制剂皂苷化合物的内容及技术难点色谱条件的选择和优化是HPLC法测定黄芪皂苷研究的核心问题，也是技术的难点问题。
色谱条件的内容主要包括色谱柱类型、流动相组成比例、梯度洗脱程序、柱温控制、检测器等[13]。
根据需要测定的黄芪皂苷的分子结构，判断其分子极性大小选择合适的色谱柱，对于大多数极性小的黄芪皂苷的检测，通常选择反向柱，对于部分极性大的皂苷成分则可采用正相色谱柱。
流动相的组成比例选择也是至关重要的，根据相似相容原理进行合理选择调整，很少使用单一溶剂作为流动相，这样的洗脱效果较差，往往是甲醇、水、乙腈、无机盐等多种溶剂间的不同组合，其组成比例则需要通过实验摸索[14]。
对于部分成分复杂难以洗脱的皂苷成分，通常则需采用梯度洗脱程序，梯度洗脱程序并无明确规定和参考，需要结合具体实验样品，通过反复的实验摸索得的最优的条件。
柱温的控制也是需要充分考虑皂苷成分自身的溶解度和稳定性进行合适的调整，尽可能的是皂苷成分完全溶解在溶剂中被流动相洗脱检测出来[15]。
检测器的选择也是至关重要的，对于多数有紫外吸收的黄芪皂苷，通常可以采用紫外检测器、二极管阵列检测器，对于部分没有吸收的皂苷类成分，则可采用示差折光检测器，目前也得到了普遍的认可[16]。
例如中国药科大学的汪红等人[17]采用HPLC-ELSD法成果检测了黄芪及其注射液中黄芪皂苷I、III、IV等成分。
总之色谱条件的选择和研究是HPLC法测定黄芪皂苷成分含量的最核心的问题，也是研究者们最为重视和着重研究的方向。
但是因为黄芪皂苷成分的复杂和多样性，目前对于不同的制剂和成分，其色谱条件不是千篇一律的，需要具体问题具体分析。
HPLC法测定黄芪制剂皂苷成分的另一个重要问题是HPLC图谱数据的处理，因黄芪制剂中皂苷类成分众多，所以在图谱上会出现大大小小数十个甚至几十个色谱峰[18]。
对于每一个色谱峰所对应的皂苷成分的定位工作也是十分复杂的。
首先需要排除溶剂峰、其他物质出峰，根据不同皂苷化合物极性大小，初步定位，同时再根据文献中提供的相对保留时间定位，再者根据对照品在同等色谱条件下进行定位，并更加峰面积计算各组成分的含量[19]。
4.3 HPLC法测定黄芪制剂的应用实例目前随着研究的不断深入，已经有越来越多的关于HPLC法测定黄芪制剂皂苷成分的报道。
针对于黄芪皂苷HPLC色谱条件选择以及检测器的选择这些难点问题进行不同方向的研究。
金芪降糖片为临床上常用的治疗2型糖尿病的药物，有黄芪、黄连、金银花组成，其主要活性成分为黄芪中的5种皂苷类成分。
其含量检测一直是该制剂质量标准建立的难点，天津中医药大学的邓雁茹[20]等人采用HPLC法准确测定了金芪降糖片中5中皂苷的含量，其研究的创新点在于采用了梯度洗脱程序成功分离了5种皂苷成分，在同一色谱条件下准确的测定了5种皂苷成分的含量，且开发的方法专属性强、准确度高、简便易行。
黄芪皂苷IV、III、I等成分在紫外下吸收较弱，若用紫外检测器对其进行检测，则可能造成含量测定结果的不准确。
因此Jieping Qin等[21]在检测复方扶芳藤合剂中的黄芪皂苷时，对于黄芪皂苷IV、III、I等紫外吸收较弱的成分创造性的采用了示差折光检测器(ELSD)对制剂中的黄芪皂苷成分进行了准确测定。
HPLCUVELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分
天然产物研究与开发Nat Prod Res Dev 2019，31：434-440，458收稿日期：2018-07-16接受日期：2019-02-18基金项目：国家中药标准化项目（ZYBZH-C-QIN-45）；陕西省咸阳市2016年科学技术研究计划（2016k02-110）*通信作者Tel ：86-29-38185060；E-mail ：tzs6565@163．comHPLC-UV-ELSD 法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分史鑫波1，2，唐志书1，2*，刘妍如1，2，宋忠兴1，2，陈衍斌3，苏瑞1，2，许刚3，王升41陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心；2陕西省创新药物研究中心，咸阳712083；3陕西步长制药有限公司，西安710075；4中国中医科学院中药资源中心，北京100700摘要：建立HPLC-UV-ELSD 法同时测定黄芪中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮的含量，并比较四种不同供试液中7种成分的含量差异，实验采用Agilent 5TC-C 18色谱柱（250mm ˑ4．6mm ，5μm ），0．3%甲酸水溶液-乙腈进行梯度洗脱，流速为1．0mL /min ，检测波长254nm ；柱温30ʎC ，漂移管温度70ʎC 。
在该色谱条件下，黄芪中7种成分能得到较好的分离，稳定性，重复性及精密度良好。
本方法能简便、快捷、有效的测定黄芪药材中多种成分含量。
大孔树脂制备供试品中黄芪皂苷和黄酮类成分更高，说明碱化处理对黄芪中的成分含量产生了一定影响。
关键词：黄芪；HPLC-UV-ELSD ；黄芪皂苷；黄酮类成分；含量测定；碱化处理中图分类号：R284．1；R917文献标识码：A文章编号：1001-6880（2019）3-0434-08DOI ：10．16333/j．1001-6880．2019．3．010Simultaneous determination of astragaloside and flavonoids components in astragali radix using HPLC-UV-ELSDSHI Xin-bo 1，2，TANG Zhi-shu 1，2*，LIU Yan-ru 1，2，SONG Zhong-xing 1，2，CHEN Yan-bin 3，SU Rui 1，2，XU Gang 3，WANG Sheng 41Shaanxi University of Chinese Medicine ，Shaanxi Collaborative Innovation Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization ；2Shannxi Research Centre on Discovery and Innovation of New Medicine ，Xianyang 712083，China ；3Shaanxi Buchang Pharmaceutical Limited Company ，Xian 710075，China ；4National Resource Center for Chinese Materia Medica ，China Academy of Chinese Medical Sciences ，Beijing 100700，ChinaAbstract ：HPLC-UV-ELSD method was developed for the simultaneous determination of astragaloside I ，astragaloside II ，astra-galoside III ，astragaloside IV ，calycosin glucoside ，ononin ，and calycosin in Astragali Radix ．This method was then used to de-termine the contents of seven active analytes in four different testing samples．The seven compounds were analyzed simultane-ously with an Agilent C 18（250mm ˑ4．6mm ，5μm ）column by gradient elution using 0．3%（v /v ）formic acid-acetonitrile as the mobile phase at the flow rate of 1．0mL /min ；The detection wavelength was set at 254nm ，the column temperture was maintained at 30ʎC ，and the evaporative light-scattering detector （ELSD ）drift tube temperature was 70ʎC．The seven active analytes of Astragali Radix can be separated in the chromatographic conditions．Precision ，repeatability and stability were good．The developed method was simple ，rapid and effective for the determination of the components in Astragali Radix．As a result ，astragaloside and flavonoids were higher in the preparation of macroporous resin ，indicating that alkalization had an effect on the content of composition in Astragali Radix ．Key words ：astragali radix ；HPLC-UV-ELSD ；stragaloside ；flavonoids ；content determination ；alkalization黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membrana-ceus （Fisch．）Bge．var．mongholicus （Bge．）Hsiao 或膜荚黄芪Astragalus membranaceus （Fisch．）Bge．的干燥根［1］。
高效液相-蒸发光散射检测器测定黄芪中4种皂苷类成分
高效液相-蒸发光散射检测器测定黄芪中4种皂苷类成分发表时间：2018-04-09T14:23:22.957Z 来源：《心理医生》2018年8期作者：代吉英[导读] 选择黄芪甲苷作为指标成分是测定黄芪质量的重要方法，不过黄芪中黄芪甲苷的含量极少。
（榆中县贡井中心卫生院甘肃兰州 730118）【摘要】目的：研究高效液相-蒸发光散射检测器测定黄芪中4种皂苷类成分的效果。
方法：通过高效液相-蒸发光散射检测器测定黄芪中丙二酰黄芪皂苷Ⅰ黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷的相对校正因子，分析结果。
结果：黄芪药材中黄芪甲苷含量最低，部分甚至无法检测到，丙二酰黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅰ含量较高。
结论：通过高效液相-蒸发光散射检测器能够对黄芪中4种皂苷类成分进行准确测定。
【关键词】高效液相-蒸发光散射检测器；黄芪；皂苷成分；测定【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）08-0323-02选择黄芪甲苷作为指标成分是测定黄芪质量的重要方法，不过黄芪中黄芪甲苷的含量极少，但是丙二酰黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅰ的含量偏高[1]。
高效液相-蒸发光散射检测器（ELSD）不对化合物的光学性质存在以来，能够良好响应非挥发组分，所以在多种中药成分的质量控制中应用较广[2]。
本研究具体分析高效液相-蒸发光散射检测器测定黄芪中4种皂苷类成分的效果。
1.材料及方法1.1 仪器及药剂仪器有Agilent 1100高效液相色谱仪、色谱工作站、电子分析天平、Agilent LC-TOF MS系统。
药剂有实验室自制的丙二酰黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷Ⅳ，HPLC(峰面积归一化法) 纯度都在98%以上。
色谱纯选择乙腈为，Milli-Q 超纯水作为水，其余都选择分析纯。
1.2 方法1.2.1制备对照品溶液精密称取丙二酰黄芪皂苷Ⅰ5.165mg、黄芪皂苷Ⅰ5.91mg、黄芪皂苷Ⅱ1.29mg、黄芪甲苷Ⅳ1.14mg，放在5ml 量瓶内，通过甲醇进行稀释，达到刻度位置，完成混合对照品溶液的制备，放在4℃温度下保存备用。
HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪皂苷Ⅲ、黄芪皂苷Ⅳ的含量
ｐ ｒ ｅ ｓ ｅ ｎ ｔ ｅ ｄ ｇ ｏ ｏ ｄ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｈ ｉ ｐ ｗ ｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ａ ｔ ｏ ｆ ｐ ｅ ａ ｋ ａ ｒ ｅ ａ ｖ ａ ｌ ｕ ｅ （ ｒ＝０ ． ９ ９ ９ ２ ） ， ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｗ ａ ｓ ９ ８ ． ０ ９ ％ ， Ｒ Ｓ Ｄ ｗ ａ ｓ １ ． ０ ２ ％（ ｎ＝６ ） ． Ｉ ｎ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｉ ｚ ｅ ０ ． ０ ９ ３— ０ ． ８ １ ６ Ｉ ｘ ｇ ｏ ｆ ａ ｓ ｔ ｒ ａ ｇ ａ ｌ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ Ｖ， Ｉ ｔ ｈ ｅ ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ ｌ ｏ ｇ —
ＨＰＬＣ —ＥＬＳ Ｄ Ｍｅ ｔ ｈｏ ｄ
Ｓ ＨＩ Ｊ ｉ ｎ ｇ—ｃ ｈ ａ ｏ， Ｗ ＡＮ Ｇ Ｙｏ ｎ ｇ—ｈ ｕ ｉ ， Ｆ ＡＮ Ｓ ｉ —ｃ ｏ ｎ ｇ ， Ｚ ＨＯＵ Ｒａ ｎ
（ ｏ ｆ Ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｔ ａ ｉ ｙ ｕ ａ ｎ Ｓ ｈ ａ ｎ ｘ ｉ ０ ３ ０ ０ ２ ４ ）
・
７ ２ ０・
世界中西医结合杂志 ２ ０ １ ４年第 ９卷第 ７期
Ｗ０ ｒ ｌ ｄ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｉ ｎ ｔ ｅ ｇ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ Ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ａ ｎ ｄ Ｗｅ ｓ ｔ ｅ １ ３ ３ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ２ ０ １ ４， Ｖ ｏ １ ． ９ ， Ｎ ｏ ． ７
ａ ｎ ｄ ａ ｓ ｔ ｒ ａ ｇ ａ ｌ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ Ｖ Ｉ ｉ ｎ ａ ｓ ｔ ｒ ａ ｇ ａ ｌ ｕ ｓ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｄ ｉ ｍ ｏ ｎ ｓ ｉ ｌ Ｃ ｌ ８ （ １ ５ ０ ｍｍ× ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ ｍ） ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｉ ｃ ｃ ｏ ｌ —
HPLC测定经不同益生菌发酵前后黄芪中黄芪甲苷和黄芪皂苷Ⅱ的含量
HPLC测定经不同益生菌发酵前后黄芪中黄芪甲苷和黄芪皂苷Ⅱ的含量林莎莎;周洪雷;孙筱林;池雨锋;蒋海强;张玲;楚新红【摘要】采用HPLC-ELSD法测定黄芪经不同益生菌株发酵前后的黄芪甲苷和黄芪皂苷Ⅱ的含量变化.色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),采用乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速为:1 mL/min.结果表明,黄芪对照中黄芪甲苷和皂苷Ⅱ的含量分别为0.4762 mg/g和0.0503 mg/g.用混合菌种发酵后黄芪甲苷和皂苷Ⅱ的含量分别为0.2578 mg/g和0.1094 mg/g.黄芪经益生菌发酵后黄芪甲苷含量降低而皂苷Ⅱ的含量升高,且不同菌种发酵后的黄芪甲苷和皂苷Ⅱ的含量也有差异.【期刊名称】《山东科学》【年(卷),期】2016(029)004【总页数】5页(P17-20,49)【关键词】黄芪;益生菌发酵;HPLC-ELSD;黄芪甲苷;黄芪皂苷Ⅱ【作者】林莎莎;周洪雷;孙筱林;池雨锋;蒋海强;张玲;楚新红【作者单位】山东中医药大学药学院,山东济南250355;山东中医药大学药学院,山东济南250355;三株医药生物研究所,山东济南250100;山东中医药大学药学院,山东济南250355;山东中医药大学药学院,山东济南250355;山东中医药大学药学院,山东济南250355;三株医药生物研究所,山东济南250100【正文语种】中文【中图分类】R284.1黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.) Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根[1]。
黄芪的主要化学成分有皂苷、黄酮和多糖等。
药理研究表明，大剂量的黄芪总皂苷有强心苷样的作用，还能够降低老年大鼠全血比粘度、血浆比粘度以及红细胞压积[2],发挥明显抗血栓的作用[3]。
黄芪甲苷检测
迪信泰检测平台
黄芪甲苷检测
黄芪甲苷即黄芪皂苷IV（astragaloside IV），是黄芪中的一种皂苷类代表性成分。
具有强心、增强免疫功能等多种药理作用。
黄芪甲苷也被用作评价黄芪药材质量优劣的标准。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱（HPLC）和液质联用（LC-MS）技术，可高效、
精准的检测黄芪甲苷的含量变化。
此外，迪信泰检测平台还提供其他多种中药成分检测服务，方法成熟，可高效处理大批量样本。
HPLC和LC-MS测定黄芪甲苷样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. 黄芪甲苷含量信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
黄芪甲苷的测定方法
黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来，对的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1．1 HPLC—uv法属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。
紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前 HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用 HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为 203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为 97．52％，RSD为3．10％。
1．2 HPLC一示差折光检测法由于在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精 12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。
该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。
1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。
实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。
含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述
浙江大学远程教育学院专科毕业作业题目含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述专业学习中心姓名学号指导教师年月日目录1黄芪的简介 (1)2 黄芪中皂苷类化合物的介绍 (1)2.1 黄芪类化合物的化学成分 (1)2.2 黄芪中皂苷类化合物化学结构 (2)3 含黄芪制剂的种类和特点 (3)4 HPLC法测定含黄芪制剂皂苷类成分的研究动态 (3)4.1 含黄芪制剂HPLC样品制备方法 (3)4.2 HPLC法测定黄芪制剂皂苷化合物的内容及技术难点 (4)4.3 HPLC法测定黄芪制剂的应用实例 (5)5 小结与展望 (5)参考文献 (5)含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述【摘要】目的：综述近年来含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的研究动态，为今后在黄芪制剂此类成分的检测和质量标准的制定提供参考性建议。
方法：通过对近几年国内外相关文献资料的分类、整理、分析、对比，总结了黄芪制剂的皂苷的结构组成，黄芪制剂的结构特点，HPLC法测定的技术进展等。
结果：随着HPLC软件和硬件设施的不断更新，相关技术和理论的不断完善，越来越多的含黄芪制剂皂苷类化合物可以运用HPLC法检测，而且此方法具有高效、简便、准确的特点。
结论：HPLC法可用于黄芪制剂中皂苷类化合物的检测，且有着很好的应用实践价值。
【关键词】黄芪；皂苷；高效液相色谱；检测方法黄芪是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，黄芪有很强的药用价值，为多版中国药典收录的上乘补气药材。
黄芪主要含有皂苷、多糖、黄酮三类主要的化学成分，其中皂苷类化合物是发挥药效的主要成分[1]。
目前随着中药提取分离技术的不断革新，越来越多的黄芪类提取物被赋予现代化的制剂剂型。
但是黄芪复杂的组成成分和结构给黄芪制剂的质量控制、化学成分分析及含量测定带来了一定的难度[2]。
随着分析检测技术的日趋完善，运用HPLC法检测黄芪制剂中的皂苷类化合物已成为研究的热点，已有多数相关的研究报道表明HPLC法可以用于黄芪中皂苷成分的测定，并且具有准确度高、操作简便、效率更高的特点。
HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分
HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分史鑫波;唐志书;刘妍如;宋忠兴;陈衍斌;苏瑞;许刚;王升【摘要】建立HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮的含量,并比较四种不同供试液中7种成分的含量差异,实验采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),0.3％甲酸水溶液-乙腈进行梯度洗脱,流速为1.0 mL,/min,检测波长254 nm;柱温30℃,漂移管温度70 ℃.在该色谱条件下,黄芪中7种成分能得到较好的分离,稳定性,重复性及精密度良好.本方法能简便、快捷、有效的测定黄芪药材中多种成分含量.大孔树脂制备供试品中黄芪皂苷和黄酮类成分更高,说明碱化处理对黄芪中的成分含量产生了一定影响.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2019(031)003【总页数】8页(P434-440,458)【关键词】黄芪;HPLC-UV-ELSD;黄芪皂苷;黄酮类成分;含量测定;碱化处理【作者】史鑫波;唐志书;刘妍如;宋忠兴;陈衍斌;苏瑞;许刚;王升【作者单位】陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心;陕西省创新药物研究中心,咸阳712083;陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心;陕西省创新药物研究中心,咸阳712083;陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心;陕西省创新药物研究中心,咸阳712083;陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心;陕西省创新药物研究中心,咸阳712083;陕西步长制药有限公司,西安710075;陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心;陕西省创新药物研究中心,咸阳712083;陕西步长制药有限公司,西安710075;中国中医科学院中药资源中心,北京100700【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R917黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus (Bge.)Hsiao 或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根[1]。
HPLC-MS法测定步长脑心通中多种黄芪皂苷类成分
王
( ) *
铎( ， 盛龙生 ) ， 宋
越* ， 李
萍 (!
中国药科大学现代中药教育部重点实验室， 南京 )(+++, ； 中国药科大学分析测试中心， 南京 )(+++, ； 浙江大学药学院中药科学与工程学院， 杭州 *(++)【摘 要】 目的： 应用高效液 相 色 谱 % 电 喷 雾 飞 行 时 间 质 谱 联 用 （ !"#$%.’/ 0 123 &’） 法定量分析步长脑心
通胶囊中黄芪皂苷类成分。方法： 采用人参皂苷 45( 作为 内 标 物； 色 谱 柱： 6789:; .;<=>? $(@ ， )A+ BB C D E F BB， A 质谱采集模式： 正离子。结 柱温 )A G ； 流动相： （ I） （ J） ， 梯度洗脱； 流速： ・BK> L ( ； B； + E ( H 甲酸水溶液 % 乙腈 ( B# ! 果： 各黄芪皂苷的检测限为 + E (+ M + E )) >5， 定量限为 + E )) M + E A) >5； 在 对 应 的 线 性 范 围 内， 峰面积之 ! " + E ,,@) ； 比 （ "# $ "% ） 的日间精密度 （ 4’N） 和日内精密 度 （ 4’N） 均 小 于 ) E @F H ； 回 收 率 大 于 ,D E , H 。 结 论： 本 文 建 立 !"#$% .’/ 0 123 &’ 法可以准确测定黄芪类中药制剂中的黄芪皂苷类成分。 【关键词】 黄芪皂苷； 定量分析；!"#$%.’/ 0 123 &’N 【中图分类号】 1ODF+ P -) 【文献标识码】 I 【文章编号】 (F-)%*FA( （)++F） +D%+)@-%+D
黄芪甲苷的测定方法
黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较黄芪甲苷为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来，对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1．1 HPLC—uv法黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。
紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为97．52％，RSD为3．10％。
1．2 HPLC一示差折光检测法由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。
该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。
1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。
实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。