不同水解方法对土壤中性糖和氨基糖含量测定的影响
土壤中纤维素二糖水解酶检测方法
土壤中纤维素二糖水解酶检测方法
土壤中纤维素二糖水解酶是一种重要的酶类，它在土壤有机质分解和循环过程中起着关键作用。
检测土壤中纤维素二糖水解酶的方法通常包括以下几个方面：
1. 酶活性测定，这是最常用的方法之一，通过测定土壤样品中纤维素二糖水解酶的活性来评估其在土壤中的水平。
常见的测定方法包括使用对羟基苯甲酸或对羟基苯甲酰乙酰乙酰胺等底物，在一定条件下测定酶活性的变化。
2. 分子生物学方法，利用PCR技术或实时荧光定量PCR技术检测土壤样品中纤维素二糖水解酶基因的存在和丰度。
这些方法可以提供关于土壤微生物群落中相关基因的信息，从而间接评估纤维素二糖水解酶的水平。
3. 酶联免疫吸附测定法（ELISA），ELISA技术可以用于定量土壤样品中纤维素二糖水解酶的含量，通过特异性抗体与酶结合进行颜色反应，从而测定酶的浓度。
4. 同位素标记法，利用同位素标记的底物来跟踪土壤中纤维素
二糖水解酶的活性，通过测定同位素标记的底物代谢产物的丰度来评估酶的活性水平。
5. 土壤微生物组学方法，利用高通量测序技术对土壤微生物群落进行分析，从中获取有关纤维素二糖水解酶相关微生物的信息，以此间接评估酶的水平。
综上所述，检测土壤中纤维素二糖水解酶的方法涉及到酶活性测定、分子生物学方法、酶联免疫吸附测定法、同位素标记法和土壤微生物组学方法等多个方面，综合运用这些方法可以全面准确地评估土壤中纤维素二糖水解酶的水平。
不同耕作措施对土壤水解酶活性的影响
１２ 土样 采集 和测定 项 目 ．
１ 材 料 与方 法
１ １ 试 验 设 计 ．
分别于玉米播 种期 、 花吐丝期 、 扬 蜡熟期 、 收获 期取土样 。每 个处 理随机 取 ５个 点 ， 土深度 Ｏ 取 ～ ２ ｍ， 除石块 、 ０ｃ 剔 植物 残根等杂物 ， 混合装袋 带回实 验室 ， 样品经风干后研磨 ， １ｍ ｎ筛待测 。 过 Ｉ
采 用 比 色 法 分 别 对 蛋 白 酶 、 酶 、 化 酶 进 行 脲 转
试 验 以 当 地 主 栽 品 种 龙 原 ２ ８为 材 料 ， ８ 于 ２０ ０ ９年 ４月在 东 北 农 业 大 学 植 物 学 实 验 实 习 基 地 进行 。在保 护性耕 作 下 ， ２ ０ 自 ０ ７年开 始定位 实
黑龙 江农 业 科 学 ２ １ （ １ ： ７ ２ ００１）２～ ９
Ｈｉｎｉｇ ｇｉｌｒ ｉｃ ｅｏｇａ ｒｕｕ ｌｃｎｅ ｌ ｊｎ Ａ ｃｔａＳｅ ｓ
育种栽培 嗲
不 同耕 作 措 施 对 土壤 水 解 酶 活 性 的影 响
张 冰 ， 守坤 ， 董 孙聪 姝 ， 龚振 平 ， 丽君 刘 （ 东北农业 大 学 农 学院 ， 黑龙 江 哈 尔滨 １ ０ ３ ） ５ ０ ０
果表明 ： 土壤 酶 活性 与 玉 米 生 长发 育 密切 相 关 ， 翻耕 处 理 相 比 ， 与 少免 耕 处 理 能 有 效 提 高 土 壤 水 解 酶 活 性 ； 在
促 进 土壤 水 解酶 协 调 性 方 面 ， 耕 处 理 表 现 出明 显 优 势 。 免 关 键词 ： 作 措 施 ； 耕 土壤 水 解酶 ； 白酶 ； 酶 ； 化 酶 蛋 脲 转
玉 米 人 工 收获 留 ｌ ～ １ 人 ｌ 收 获 留 １ ～ １ ｍ 残 茬 ， 将 玉 米 秸 秆 Ｔ ０ ｃ ５ 并
碱解扩散法测定土壤水解性氮影响因素分析
土壤有效养分的测试是测土配方施肥工作中最基础和最重要的环节。
只有准确测定土壤有效养分含量，才能了解土壤肥力，指导精确施肥。
根据《全国第二次土壤普查暂行技术规程》规定，土壤水解性氮的测定采用碱解扩散法。
但测定过程中，分析步骤较为繁琐，影响因素也较为复杂。
为了增加测定的准确性，减少劳动量，在测试过程中，应注意以下几方面的问题。
１试剂的配制、保存和使用所用的试剂要严格按照《全国第二次土壤普查暂行技术规程》要求的步骤、顺序、用量等准确配制。
选用质量合格的药品、试剂，最好使用固定生产厂家生产的，以避免药品或试剂带来的误差和影响。
准确量取和称取所需试剂、溶液、药品，并且不能污染。
１．１氢氧化钠溶液１．８ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液：称取７２．０ｇ氢氧化钠，溶解于水，稀释至１Ｌ。
１．２ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液：称取４８．０ｇ氢氧化钠溶解于水，稀释至１Ｌ，保存于塑料瓶中待用。
１．２锌－硫酸亚铁还原剂将５０．０ｇ磨细并通过０．２５ｍｍ孔径筛的硫酸亚铁（Ｆｅ－ＳＯ４·７Ｈ２Ｏ）及１０．０ｇ锌粉混匀，装入棕色瓶中，存于阴凉处。
一般１０．０ｇ锌粉也可不加。
１．３碱性胶液将４０．０ｇ阿拉伯胶，放入装有５０ｍｍ水的烧杯中，加热至７０～８０℃，搅拌促溶，约１ｈ后放冷。
加入２０ｍｍ甘油和２０ｍｍ饱和碳酸钾水溶液，搅匀，放冷。
离心除去泡沫和不溶物，将清液贮于玻璃瓶中加盖密封备用。
注意：阿拉伯胶必须先溶解再混合，否则会结块；由于阿拉伯胶生产厂家、批次的不同配制出来的胶液的粘稠度也不尽相同，太稀会粘不住，所以粘稠度可以稍加调节。
１．４定氮混合指示剂称取０．５ｇ溴甲酚绿和０．１ｇ甲基红于玛瑙研钵中，加入少量９５％乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加９５％乙醇至１００ｍＬ。
指示剂贮存期不能超过２个月。
１．５硼酸溶液称取硼酸２０．０ｇ溶于水中，稀释至１Ｌ。
每升硼酸溶液中加２０ｍＬ混合指示剂，并用稀碱或稀酸调至红紫色（ｐＨ为４．５），此溶液放置时间不宜过长，如在使用过程中ｐＨ有变化，需随时用稀酸或稀碱调节。
第二讲糖分析方法
第二讲糖的分析方法一、中性糖的测定1．还原糖的次亚碘酸盐定量法适用：各种醛糖；适用于测定淀粉酶解时糖苷键水解的百分率，也可测定淀粉酶产物的寡聚糖链长。
基本反应：CH2OH(CHOH)n CHO+I2+3NaOH→CH2OH(CHOH)nCOONa+2NaI+2H2O (氧化)I2+2Na2S2O3→Na2S4O6+ NaI (滴定) 2．3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法原理：在碱性溶液中，3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与反应液的颜色强度呈比例关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。
注意：该法不是化学计量反应，戊糖、已糖和双糖与DNS反应的生色度A500/μmol糖的值分别是：戊糖（木糖、阿拉伯糖）：0.42；已糖（葡萄糖、半乳糖、甘露糖）：0.46；双糖（麦芽糖、乳糖）：0.65。
有人认为还原糖的醛基被氧化为羧基，但当量不准确，不同的糖类产生不等等量的色度，表明它的化学反应是较复杂的。
3．Somogyi-Nelson法还原糖将铜试剂还原成氧化亚铜，在浓硫酸存在下与砷钼酸生成蓝色溶液，在560nm下的光密度与还原糖浓度呈比例关系。
注意：比方法重复性较好，产物稳定，测定范围10-180μg/mL。
4．苯酚-硫酸法苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的已糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）起显色反应，已糖在490nm处，戊糖及糖醛酸在480nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。
注意：（1）该法颜色持久，较稳定；（2）每种糖的显色值不同，故不宜直接用于杂多糖的定量测定；分析杂多糖时，可根据各种单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。
（3）有颜色的样品，测定值偏高；（4）此法较适于检测凝胶柱部分收集样品中相对糖量的分析。
5．蒽酮-硫酸法糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物，可与蒽酮试剂缩合产生颜色物质，反应后溶液呈蓝绿色，于620nm处有最大吸收，显色与多糖含量呈线性关系。
(完整版)气相色谱法测定土壤中性糖和氨基糖含量1(祁彪)(精)
气相色谱法测定土壤中性糖和氨基糖含量1. 方法原理中性糖和氨基糖在吡啶 -甲醇溶液中,以 4-二甲氨基吡啶为催化剂的条件下与盐酸羟胺和乙酸酐发生糖腈乙酰酯反应, 所得衍生物可利用气相色谱测定。
由于土壤样品成分较复杂, 需要较多的处理过程,本试验采用内标法(内标为戊五醇,可以有效地消除系统误差和样品损失所带来的误差,增加实验的精密度和准确度。
2. 主要仪器?BEIFEN SP-3420A气相色谱仪, 配火焰离子化检测器 (FID, 北京北分瑞利分析仪器 (集团有限责任公司;?AT. SE-30型石英毛细管气相色谱柱(30m ×0.25mm ×0.25um 〔 100%二甲基聚硅氧烷;通用型非极性固定相;热稳定性达到 350℃;化学键合交联柱,可用溶剂清洗;极性相似于 DB-1, SPB-1, HP-1等固定相;符合 USP G1, G2, G38指定固定相〕,中国科学院兰州化学物理研究所色谱技术研究开发中心;?RE-2000型旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;?HP-5016SY 型氮吹仪,上海济成分析仪器有限公司;?FreeZone 6 plus cascsdo型冷冻干燥仪,美国 LABCONCO 公司;?DK-98-J 型电子恒温水浴锅,天津泰斯特仪器有限公司?Allegra 64R TD5A型台式高速离心机,美国 Beckman COULTER公司;?DHG-9240型烘箱,上海一恒科学仪器有限公司;?雷磁 PHS-3C 型 pH 计,上海精密科学仪器有限公司。
3. 主要试剂8种中性糖标准 :核糖 (RIB、鼠李糖 (RHA、阿拉伯糖 (ARA、木糖 (XYL、葡萄糖 (GLU、半乳糖 (GAL、甘露糖 (MAN和岩藻糖 (FUC ;均购自 Sigma-Aldrich公司;4种氨基糖标准 :氨基葡萄糖 (GLU-N、氨基半乳糖 (GAL-N、氨基甘露糖(MAN-N和胞壁酸 (MUR,均购自 Sigma-Aldrich 公司;内标:戊五醇(Adonitol ,高纯试剂, Sigma-Aldrich 公司;其它试剂 :盐酸羟胺(Hydroxylamine hydrochloride,高纯试剂, Sigma-Aldrich 公司; 4-二甲氨基吡啶〔 4-(Dimethylamino pyridine〕,高纯试剂, Sigma-Aldrich 公司; 二氯甲烷(Dichloromethane ,色谱纯,天津市凯信化学工业有限公司;乙酸乙酯(Acetic ether、正己烷(n-hexane ,均为色谱纯,山东省禹王实业总公司化学试剂厂;无水甲醇(Methanol ,色谱纯,天津光复精细化工有限公司;吡啶、三氟乙酸(TFA ,均为分析纯,上海中秦化学试剂有限公司;乙酸酐,分析纯,天津市化学试剂三厂;盐酸,分析纯,白银西区银环化学制剂厂。
土壤中水(碱)解氮的测定 碱解 扩散法
土壤中水(碱)解氮的测定碱解扩散法土壤中水解氮的测定是土壤化学分析中的一个重要环节，其结果能够为农田施肥提供科学指导。
本文将介绍一种常用的土壤中水解氮的测定方法——碱解扩散法。
一、实验原理土壤中的水解氮可以通过碱解方法提取出来进行测定。
在碱解过程中，将土壤中的水解氮转化为氨氮，然后利用扩散法将氨氮转变为游离氨，最后通过酸碱滴定法或指示剂比色法测定氨氮的含量。
二、实验步骤1.样品的采集与处理：将需要测定的土壤样品进行采集，并将其过筛，去除杂质。
然后将样品晾干至室温，将土壤与蒸馏水按1:5的比例混合均匀，放置30分钟。
2.碱解：称取5g土壤样品，加入碱解杯中，加入20 mL 1 mol/L 的NaOH溶液，然后用塞子将杯子密封好，将其放置在40℃恒温槽中进行碱解反应，反应时间为30分钟。
3.扩散：将经过碱解的样品溶液转移到扩散瓶中，加入适量水，密封瓶口，使其静置12小时，使氨氮扩散到瓶盖上的酸性滤纸上形成酸性薄膜。
4.测定：将扩散瓶盖上的酸性滤纸剪下，用酸碱滴定法或指示剂比色法测定其氨氮含量。
三、实验注意事项1.样品的选择应当尽量代表性，并且应该进行均匀混合。
2.在碱解的过程中，要将样品密封好，防止氨气的挥发。
3.在扩散过程中，要保持相对湿度在85-95%之间，以促进氨氮的扩散。
4.进行氨氮的测定时，应遵循准确的实验操作，以获得可靠的结果。
四、实验结果的计算与分析通过酸碱滴定法或指示剂比色法测定出氨氮的含量后，可以根据土壤样品的质量与抽提液的体积，计算出土壤中水解氮的含量。
在实际应用中，我们可以根据测定结果来评估土壤的氮素供应能力，指导农田的施肥措施。
通常来说，土壤中的水解氮含量越高，说明土壤中的氮素供应能力越强，对作物生长的促进作用也会更明显。
然而，过高的水解氮含量也可能导致氮素的过度施用，造成环境污染和资源浪费。
因此，在进行土壤中水解氮的测定时，我们需要根据具体的土壤条件和作物需求，合理制定施肥方案，以实现高效利用土壤中的氮素资源，保证农田的可持续发展。
(完整版)土壤中碱解氮、有效磷、速效钾、有机质、交换钙、镁及有效锌含量测定方法
土壤水解氮的测定碱解扩散法1 范围本标准规定了土壤中水解氮的测定方法。
本标准适用于本公司所测各类土壤。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6003.1-1997 金属丝纺织网试验筛HG/T 2843 化肥产品化学分析常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液3 方法提要加入还原剂，使土壤中的硝态氮还原，再用氢氧化钠溶液处理土样，在扩散皿中，土样于碱性条件下水解，使易水解氮经碱解转化为氨态氮，由硼酸溶液吸收，以标准酸滴定，计算碱解氮的含量。
4 仪器通常实验室用仪器及：4.1 恒温培养箱；4.2 扩散皿；4.3 微量滴定管。
5 试剂本标准中所用试剂、水和溶液的配制，在未注明规格和配制方法时，均应符合HG/T2843的要求。
5.1 1.8mol L-1氢氧化钠溶液：称取72.0g氢氧化钠，溶解于水，稀释至1L；5.2 锌-硫酸亚铁还原剂：称取50.0g磨细并通过0.25mm孔径的硫酸亚铁（Fe S O4．7H 2O）及10.0g 锌粉混匀，贮于棕色瓶中；5.3 碱性胶液：称取40g阿拉伯胶放入装有50ml水的烧杯中，加热至70-80℃，搅拌促溶，约1h后放冷。
加入20ml甘油和20ml饱和碳酸钾水溶液，搅匀，放冷。
离心除去泡沫和不溶物，将清液贮于玻璃瓶中备用。
5.4 硫酸标准溶液C（1/2H2SO4）=0.01 mol L-1；先配成C（1/2H2SO4）=0.1 mol L-1，用Na2CO3标定，再稀释10倍。
5.5 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂；溶解0.1g溴甲酚绿和0.07g甲基红的乙醇中。
5.6 2%（m/V）硼酸溶液：溶解20g硼酸于1000ml蒸馏水中。
稳定性同位素技术在土壤重要有机组分循环转化研究中的应用_田秋香
864
土
壤
第 43 卷
集以 C3、C4 植株为食的奶牛排泄物做为底物，添加 到以黑麦草（Lolium spp，C3 植物）为优势种的草原 土壤，培养一天后阿拉伯糖和木糖含量显著降低，得 出阿拉伯糖和木糖的平均保留分别为 30 h 和 91 h
[16,36]
生物细胞壁的组成物质，并因其微生物异源性常作为 分子标识物对土壤真菌和细菌的残体在土壤有机质的 积累过程中起指示作用。 由于氨基糖具有一定稳定性，土壤中氨基糖的数 量主要反映了死亡微生物产生的残留，因此，仅根据 氨基糖的含量并不能推论出土壤中细菌和真菌的实际 生物量。但是，利用同位素示踪技术，氨基糖中同位 素的富集则可表明微生物对底物的利用，因而与微生 物的活性及其对底物响应的时间动态直接相关。 Decock 等[21]用13C 标记底物培养发现氨基糖可被 迅速合成，氨基葡萄糖的 δ13C 值由培养初的 -15‰ 增 加到 96.6‰，表明添加可利用底物可迅速提高微生物 细菌来源的胞 活性。当以13C 标记的葡萄糖为底物时， 壁酸中的13C 富集比例要大于真菌来源的氨基葡萄糖
[12-13]
。因此
把土壤有机质作为一个对象看待并不能准确地反映土 壤有机质的变化 。研究表明，土壤有机质主要是由 可识别的生物分子组成，其中 71% ~ 79% 是以碳水化 合物、氨基化合物、脂类、酚类的结构形式存在的 。 这些具有特定结构的简单化合物的生物化学活性和周 转特征不同，在维持调节土壤有机质功能的贡献上存 在差异 。因而，在分子水平上研究土壤有机质的组 成及转化特征从而阐明土壤有机质的来源、转化、去 向及截获和稳定机制已成为土壤学的热点之一，是评 价土壤生态系统固碳潜力的核心和关键[6-7]。
因此利用六碳糖和五碳糖的比例可评价不同土壤有机质库中植物和微生物源碳水化合物的主导作用34半乳糖甘露糖阿拉伯糖木糖比值小于05表明以植物来源的碳水化合物为主该比值大于则表示以微生物来源的碳水化合物为主31中性糖是微生物活动的重要能源和碳源但是利用同位素示踪技术发现不同种类的中性糖的可利用性存在显著差异因而各中性单糖在土壤中的保持和周转特征存在化合物特异性和时间依赖性
土壤氨基糖含量测定
土壤氨基糖含量测定土壤中的氨基糖是指一类含有氨基和糖基的有机化合物，主要由葡萄糖胺和N-乙酰葡萄糖胺组成。
它们是土壤中的一种重要有机氮物质，对土壤生物活性和养分循环起着重要作用。
因此，准确测定土壤中的氨基糖含量对于研究土壤生态系统具有重要意义。
测定土壤氨基糖含量的方法有很多种，下面将介绍其中常用的几种方法。
一、酸水解法这是一种常用的测定土壤氨基糖含量的方法。
首先将土壤样品加入到酸性溶液中，然后进行水解反应，将氨基糖转化为游离氨基。
接下来，使用显色试剂与游离氨基反应，形成有色产物。
最后，通过比色法或分光光度法测定产物的光吸收值，即可计算出土壤中氨基糖的含量。
二、酶解法这是一种较为精确的测定土壤氨基糖含量的方法。
首先将土壤样品加入到酶解液中，酶解液中含有特定的酶，可以将土壤中的氨基糖水解成葡萄糖胺和N-乙酰葡萄糖胺。
然后，使用显色试剂与水解产物反应，形成有色产物。
最后，通过比色法或分光光度法测定产物的光吸收值，即可计算出土壤中氨基糖的含量。
三、高效液相色谱法这是一种准确度较高的测定土壤氨基糖含量的方法。
首先将土壤样品经过适当的处理，得到可测定的土壤提取物。
然后，使用高效液相色谱仪进行分析。
在色谱柱中，氨基糖会根据其化学性质在不同时间点被分离出来，通过检测峰面积或峰高，可以计算出土壤中氨基糖的含量。
四、荧光法这是一种敏感度较高的测定土壤氨基糖含量的方法。
首先将土壤样品提取出来，得到土壤提取物。
然后，使用荧光染料与提取物中的氨基糖结合，形成荧光产物。
最后，通过荧光光度计测定产物的荧光强度，即可计算出土壤中氨基糖的含量。
需要注意的是，不同的测定方法对土壤样品的处理方式有所不同，因此在进行实验时需要根据具体方法进行操作。
此外，由于土壤中的氨基糖含量较低，为了提高测定的准确性，通常需要进行样品的预处理和浓缩。
测定土壤中的氨基糖含量是了解土壤生态系统功能的重要手段之一。
通过选择适合的测定方法，并进行准确的实验操作，可以获得可靠的结果，为研究土壤生态系统提供重要的参考数据。
土壤中纤维素二糖水解酶检测方法
土壤中纤维素二糖水解酶检测方法一、引言土壤是生物多样性和生态系统功能的基础，而土壤中的微生物活动对土壤的营养循环和有机质分解至关重要。
纤维素二糖水解酶是一种参与纤维素降解的重要酶类，其活性对土壤有机质分解具有重要意义。
研究土壤中纤维素二糖水解酶的检测方法对于揭示土壤中的微生物活动和土壤有机质降解过程具有重要意义。
本文将介绍一种用于土壤中纤维素二糖水解酶检测的方法，旨在为相关研究提供参考。
二、原理纤维素二糖水解酶是一种能够水解纤维素为可溶性低聚糖的酶类，其活性可以通过测定其水解产物（葡萄糖等）的生成速率来间接反映。
一般常用的检测方法是通过添加纤维素作为底物，加入土壤样品中的酶活性后，测定水解产物的生成速率，进而计算酶活性的方法。
三、材料与仪器1. 硫酸钾2. 磷酸二氢钾3. 纤维素底物（如半纤维素）4. 葡萄糖测定试剂盒5.pH计6. 温度控制设备7. 吸光度计四、实验步骤1. 样品处理：收集土壤样品后，去除大颗粒土壤，将细土壤样品放入离心管中，进行低速离心，取上清液备用。
2. 酶提取：取一定量土壤液，加入磷酸盐缓冲液，利用超声波或搅拌器进行振荡，离心后收集上清液。
3. 酶活性测定：将提取的酶液加入含有纤维素底物的反应体系中，设定一定的温度和时间，停止反应后用葡萄糖测定试剂盒测定产物的含量。
4. 数据处理：根据产物的含量和反应时间计算出酶的活性。
五、实验注意事项1. 在酶提取和酶活性测定的过程中，保持温度稳定，避免影响酶的活性。
2. 样品处理时要注意避免氧化和杂质的干扰。
3. 测定过程要进行重复实验，确保结果的准确性。
4. 废液处理：酶提取液及含高浓度葡萄糖的废液需按规定处置。
六、结果分析通过以上方法测定得到的土壤中纤维素二糖水解酶活性反映了土壤中微生物的代谢活动，可作为评价土壤有机质分解和营养转化的重要指标之一。
对于不同种类或不同处理的土壤样品，可以通过该方法获得不同的酶活性值，从而比较土壤的微生物活性和有机物降解能力。
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内标（ 戊五醇） 都从 Ｓ ｍａ ｌ ｉ 公 司和 Ｆｕａ ｉ ． ｄｃ ｇ Ａ ｒｈ ｌ 公司 ｋ
购买 ； 酸 羟胺从 Ｓｇ ． ｄｉ 盐 ｉｍａＡｌｒ ｈ公 司购买 ， ． 甲 ｃ ４二
氨基 吡啶从 Ｆｕ ａ 司购买 ； 氯 甲烷 、乙酸 乙酯 、 ｌ 公 ｋ 二 正 已烷 和无水 甲醇 从 Ｄｍａ公 司购 买 ；吡啶 、三氟 ｉ
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牛 态 环 境 ２ ０ ， （） １６ —０ １ ０ ６ １ ５： ０ ７ １７ ５
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ｈｔ：ｗ ｊｅｃ ｔ ｍ ｔ ／ ｗｗ ｅｓｉｏ ｐ／ Ｅｍａ ：ｄｔｒ ｅｓｉｏ — ｉ ｅ ｉ ＠ｊｅｃｔｍ ｌ ｏ
３ 辽 宁沈 阳农 田生 态系统 国家野 外 观测研 究站 ，辽 宁 沈 阳 １０ １ ；４ 辽宁 大学生 命科 学 系 ，辽 宁 沈 阳 １０３ ． ０６ １ ０６ １
摘要 ： 碳水 化合物是土壤有机质的重要 组成成分 ， 其含量和特性对土壤性质有很大 的影响 。 水解试 剂的选择对土壤碳 水化合 物测定的准确度有着至关重要 的影 响 ， 文章首次研究 ｒ 同水解方法测定土壤 中性 糖和氨基糖含量的差异 。 不 结果表明 ，中性 糖 的最佳水解条件为 ４ｍｏ・ ■氟乙酸（ Ｆ ） ｌ ５。下水解 ４ｈ ｌ Ｌ Ｔ Ａ在 ０ Ｃ ，氩基糖的最佳水解 条件为 ６ｍｏ Ｌ Ｃ 在 １５℃下水解 ｌ Ｈ １ ０ ８ｈ 。此外文章实现丫 ８种中性糖（ 核糖 、鼠李糖 、岩藻糖 、阿拉们糖 、木糖 、葡萄糖 、半乳糖 和甘露糖） ４利－ 和 氩基糖（ 氨基 葡萄糖 、氨基半乳糖 、氨基甘露糖和胞肇酸） 同时在 ＤＭ— ｌ毛细管气相色谱柱 Ｉ ： 的基线分离且本方 法具有一定的精密度和准 确度 。该实验 的研究将为土壤中性糖和氨基糖 的同时分析提供一定 的技术支持 和理论基础 。 关键词 ：中性糖 ；氨基糖 ；水解 ；土壤 ；气相色谱 中图分类号 ：ｓ ３ ｌ２ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：ｌ７ ．ｌ ５（ ０ ６） ５ｌ６ —５ ６２２ ７ ２ ０ ０ 一０ ７０
乙酸（ Ｆ ） Ｔ Ａ 、盐 酸和 乙酸酐 均为 分析纯 。 １２ 方 法原 理 －
土壤 中以氨基葡萄糖和胞壁酸为代表 的氨基糖聚 合物 是土 壤微生 物细 胞壁 残 留物 ，其变化 可反 映微 生物 对土 壤有 机质 循 环 与转 化 的相 对 贡献 圳 。糖
醛 酸 在土壤 中含 量很低 ，其在 土壤 中作用研 究也 较
不 同水解方 法对土壤 中性糖和氨基糖含量测定的影响
张 威 ，何 红 波 ，解 宏 图 ， 白 震 ，张旭 东 ，张 明
１ 中国科学 院沈 阳应 用生 态研究 所 陆地生 态过 程重 点实 验室 辽 宁 沈 阳 １０ １ ；２ 中国科 学 院研 究生 院 ，北京 １０３ ０６ １ ０ ０９
（ ＧＡＬＮ） ． 、氨 基甘 露糖 （ Ｎ－ 和 胞壁 酸（ Ｒ ， ＭＡ Ｎ） ＭＵ ）
土壤 中物质转化与循环有着重要的影响。目前 ， 碳 水 化 合 物 的 含 量 和 特性 已成 为 土 壤 有 机 质研 究 中 项重要指标和主要对象【。根据碳链上取代基团 ｊ Ｊ
一
不 同， 碳水 化合 物可 分为 中性糖 、 氨基 糖和 糖醛 酸 。 其 中中性糖 大多数 以多糖形 式存在 （ 为纤 维素 、 主要 半 纤维 素 、淀粉 等）Ｊ 形成 土壤 团粒结构 的重要 【，是 ４ 胶 结 物质 ，同时 也是微 生 物活动 的碳 源和能 源 Ｊ 。
１ 实验 部 分
１１ 仪器 与试 剂 ．
标 准 溶液 和 内标 的配制 ：８ 中性 糖 和戊 五 醇 种 的浓 度均为 １ ・ ～ 四种 氨基 糖 中除胞壁 酸浓度 ｍＬ ， ｍｇ 为０５ ・ － ，其它 均为 １ ・ － ．ｍｇ ｍＬ 外 ｍＬ ｍｇ 。 衍 生试剂 的配 制 ： １ ４： 的吡 啶． 甲醇溶液 ， 含有 ３ ・ 的盐 酸羟胺 和４ ・ － ． 甲基 氨 ２ ｍｇｍＬ ０ｍｇ甲醇 溶液 中 ，以４二 甲 ． 氨 基 吡 啶为 催 化 剂 的 条件 下 与 盐 酸 羟胺 和 乙酸 酐 发 生糖腈 乙酰 酯 反应 ，所得 衍生 物可利 用气相 色谱 测 定 。由于土 壤样 品成分 较复 杂 ，需要 较多 的处理 过程 ，本 试验 采用 内标 法 （ 为戊 五 醇） 内标 ，可 以有 效 地 消除 系统 误 差和样 品损失 所带来 的误差 ，增加 实 验 的精密 度和准 确度 。
１３ 溶 液的 配制 ．
少。分析土壤 中碳水化合物种类和数量时，需将其 水解 为单糖 后进 行测 定 ，而水 解试 剂 的选 择对测 定 的准 确度 有着 至关 重要 的影 响 ，目前 尚无 这方 面 的 相关 讨论 。 本文将 探 索土壤 中性 糖（ 种 ） 氨基糖 （ ８ 和 ４ 种） 的最 佳水 解 条 件并 对 中性 糖 和 氨基 糖 的 色谱 同 时分 离进行 了研 究 。
型ｐ 等 。 Ｈ计
８ 中性糖 标 准 ， 核糖（ Ｉ） 鼠李糖 （ＨＡ） 种 如 ＲＢ 、 Ｒ 、 阿拉 伯糖（ Ｒ 、木糖（ Ｌ 、葡 萄糖（ Ｌ 、半乳 Ａ Ａ） ＸＹ ） Ｇ Ｕ） 糖（ ＡＬ 、甘露 糖 （ Ｎ） Ｇ ） ＭＡ 和岩 藻糖（ＵＣ ，４种氨基 Ｆ ） 糖 标 准 如 氨 基 葡 萄 糖 （ Ｌ Ｎ） 氨 基 半 乳 糖 Ｇ Ｕ－ 、
碳 水 化 合 物 约 占土 壤 有 机 质 总 量 的 １％ ～ ０ ２％ ， 土壤 中易 降解 的有机 成分之 一 【 Ｊ ０ 是 ｌ 。碳水 化 之 合 物的含 量和 特性不 仅影 响土 壤微 生物 活性 ，而 且 与 土壤结 构形 成密 切相关 ，因而 对土壤 环境质 量和
或 Ｔ ．６ 心 机 ，ＤＨ ９２ Ａ犁 烘 箱 ，Ｐ ．Ｂ ＧＬ １Ｇ离 Ｇ．１３ ＨＳ３