白腐真菌处理染料孔雀石绿的研究
白腐菌对染料脱色和降解作用的研究进展

统 。 。
22 白腐 菌对污染 物 的降解 机理 .
18 年 美 国两 个 科 研 小组 发 现 黄 孢 原 毛 平 革 93 菌 ( h nr h e h s or m) 向胞 外 分泌 术质 素 P aeo at cr o pi 能 c e ys u 分 解酶 系 , 为降 解术 质素研究 的重 大进 展 。 白腐葭 的降解 活动 只发生在 次级代 谢阶 段 。当 白腐菌 被引 入废水 中 后 , 由于生 物具 有 的应 激性 将 对营养 限制 ( 一些 主要 营养物质如 氮 、 、 限制 ) 碳 硫 作 出应 答反应 , 成 一 套酶 系 统 。首先 产 生 细胞 内的 形 葡 萄糖 氧化酶 和 细胞 外 的 乙二 醛氧 化 酶 , 分子 氧 在 ( 界曝气 供 给) 外 参与 下 氧化相 应 底物 而形 成 o , 激活过 氧化 物酶 而启动醇 的催 化循 环。 由于 白腐 菌
13 生 物 处 理 法 .
质 . 人类健 康影响很 大 。 对
包 括投菌 法 、 物铁 法和生物 接触 氧化法 。 生 表 1 化学处 理法 简介
活 性 磷 炭 吸附 法
活性 硅 薷 土 暖 跗法
其 它 敷驸 法
维普资讯
如前 所述 , 理 有颜 色 的废水 可 以采用 一 些 物 处 理 化学 技术 , 包括 : 絮凝 、 积 、 收 、 氧 漂 白或 氯 沉 吸 臭 漂 白、 成吸 附树 脂 的离子 交换 、 渗透 等等 。不 幸 合 反
法就会 显现 出其极 大 的价 值 。投菌法是 针对 所要 去 除 的污染物 质 , 利用 特 殊 培养 的优 势 菌种 对 该 污染 物进行 有 效 降 解 的 方 法 。投 菌 法 在 美 国 、 国 、 德 日
白腐真菌对活性艳红染料X-3B的脱色实验研究

传统上 , 人们采用物理 、 化学或活性污泥方法 对染 料废 水进 行 脱 色 降解 处 理 。 由于染 料 分 子具
有 耐光 、 耐热 、 难物 理 化 学 处理 及 抵御 生 物 降解 等 特 点 , 以处 理 效 果并 不 理 想[ 。近 年来 , 所 1 ] 一种 崭 新 的 白腐 真菌 生 物技 术 , 异 军 突起 , 正 日益 受 到人
a i t fe ta c l lrl ud s o d h t t e c r y t m fd c l u a i n wa u sd h el. The r s ls wo l f b l y o x r el a i i h we t a h o e s s e o e o o r t s o t i e t e c l i u q o s e u t u d b o e s me v l e i hed r ta p i t n o i tf n u n e v r n n a n i e rn . o au n t ie p l a i fwh t r u c c o eo g s i n i me tle g n e i o g K y wo d W ht o u g s D e t fW a twae Ai A r t n C l r Ca b n Nur n E ta C l lr q i De e rs i R t n u y su se t r e F r e ai ut e o u r o t e t x r e l a ud i u Li -
Co p rd wi h i sa i c lu e h i ea inc lu ewa r utbefrt ewht o u g st e ooiet ed e m a e t tear tt ut r -t ear rt ut r smo es i l o i r t n u od e lr h y — h c a o a h e f z
【白腐菌】白腐真菌的分离及其降级集中染料特性的研究

8 8
合物的效果, 分析研究白 腐真菌的降解机制, 腐真菌在我国 为白 环境污染治理中的应用提供
理论及技术支持。
二、 试验方法
( 菌种 一)
实验用到P l . C和F 两株菌种。 . P C是来自 国外的菌种, l 行采集分离出的一株白 F 是自
腐真菌。
F l采集及主要分离步骤如 卜 。从京郊区树林中采集有白腐真菌生长树枝,置 3℃的 0 生化培养箱中保存。 保持一定的湿度, 待新的白 腐真菌生长出来后, 接种新生的自腐真菌到 马铃薯一琼脂固体培养基上,培养。反复转接即可得到纯种白腐真菌。 ( 培养基 二) 采用固体和液体两种培养基:
培养条件:固体培养基采用生化培养箱培养、液体培养基采用摇床培养。 ( 三)白 腐真菌降解特性研究 1 降解 目标化合物为染料,包括刚果红、活性翠蓝 K - , N G, 2 试验步骤: , () 1 菌种的扩大培养:液体营养限制培养基 ( L N M)摇床培养自腐真菌 (.. F P 和 I C )
五犬 。
测白 腐真菌培养基溶液的菌种湿重。摇匀溶液,取 1m , 0转/ 0 1 40 0 分钟条件 卜 离 心分离, 测得溶液中白 弃去上清液, 腐真菌的 湿重浓度。 () 配制含有不同染料浓度的 3 液体营养限 制培养基, 5m 三角瓶中装溶液 l m, 每20 1 0 l 0 11 2 ℃下灭菌 2 分钟。 0 () 4 每个三角瓶中移入 3 1 m 上述培养的菌溶液,3', 转/ 0 10 分钟 下 C 8 摇床培养。 () 定时取样,用紫外可见分光光度计测定染料浓度。测定前摇进行预处理,对于较 5 污浊的试样,先离心分离,在用微滤膜过滤;对于较清澈的试样,直接用微滤膜 过滤,然后测样。 () 6 采用上述同样步骤制作空白样,染料溶液中不含有白腐真菌生长所需的营养物。 三、实验结果与讨论 (一 )菌种分离的到一株白腐真菌,暂时命名为 F . l (_ )扩人培养
孔雀石绿降解方法的研究进展

养殖与饲料2017年第8期图1孔雀石绿、无色孔雀石绿及其脱甲基衍生物的结构式摘要孔雀石绿(C 23H 25N 2Cl ,Malachite Green ,MG )是一种三苯甲烷类化工染料,因其外观颜色呈孔雀绿而得名,在动物体内,孔雀石绿通过生物转化成无色孔雀石绿蓄积于动物组织中。
自1933年起孔雀石绿开始作为驱虫剂、杀菌剂、防腐剂等在水产养殖中出现,而后因为具有价格低廉、效果显著等优点,被广泛应用于预防与治疗各类水产动物的水霉病和对原虫的控制,但随着研究的深入,孔雀石绿潜在的具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等毒副作用受到关注。
因此,对于如何清除水体中孔雀石绿残留以及改善水环境污染的研究显得极其重要,本文将阐述国内外对于孔雀石绿降解方法的研究进展。
关键词孔雀石绿;降解方法;研究进展孔雀石绿降解方法的研究进展赵桐桐1,2李文悦1,3李继丰1张建雄1周鑫1*1.河北省唐山市畜牧水产品质量监测中心,河北唐山063000;2.河北北方学院,河北张家口075000;3.天津师范大学生命科学学院,天津300387收稿日期:2017-05-04*通讯作者赵桐桐,女,1995年生。
1孔雀石绿的化学性质孔雀石绿(C 23H 25N 2Cl ,Malachite Green ,MG )是一种三苯甲烷类化工染料,又称碱性绿、盐基块绿、孔雀绿,是一类具有较强杀菌能力的染料类药物[1]。
它是一分子苯甲醛与两分子二甲基苯胺在浓硫酸或氯化锌存在的条件下聚合而形成的深绿色晶体,因其外观颜色呈孔雀绿而得名。
分子式为C 23H 25N 2Cl ,相对分子质量为365,易溶于水和乙醇。
孔雀石绿多以草酸盐(malachite green oxalate ,C 23H 25N 2+HC 2O 4-)形式制备并在市面上出售,盐酸盐(malachite green chloride ,C 23H 25N 2+Cl -)比较少见。
图1列出了孔雀石绿、无色孔雀石绿及一系列脱甲基衍生物的结构式[2]。
白腐真菌处理染料孔雀石绿的研究

白腐真菌处理染料孔雀石绿的研究作者:沈丹玉赵丽红许海瀛崔晓玲辛书扬佟广恩来源:《科技创新与应用》2015年第08期摘要:实验研究了白腐真菌B在不同振荡条件下、不同染料浓度、不同碳源浓度等环境因素对孔雀石绿脱色效果的影响。
实验结果表明菌株B在染料浓度为100mg·L-1,振荡速度为150r·min-1,碳源浓度为20g·L-1时,其脱色率最高。
关键词:白腐菌;染料;孔雀石绿;脱色孔雀石绿是一种合成染料,广泛应用于水产养殖业,在养殖鱼类中作为杀菌剂来防治原生动物和真菌感染。
在纺织品和皮革工业,被用来给丝绸、羊毛和皮革等进行染色[1]。
然而使用这种染料会产生大量问题,因为孔雀石绿具有毒性较高,致癌、致畸、致突变等副作用。
而且毒性效应会随着接触时间、温度和浓度而增加,其消除速率非常缓慢[2]。
因此,需要找到一种从池塘和工业废水中去除过量/残留孔雀石绿的有效方法。
人们采用各种非生物方法,但是需要昂贵的催化剂和试剂,这本身是不环保的。
而利用微生物分泌的酶是消除这种染料最好的方式,具有环境友好性。
白腐真菌,是分解合成染料非常有效的类群,然而微生物降解孔雀石绿是很难的,因为它具有杀菌性,从而阻止了原生物修复策略的执行。
但是白腐真菌分泌的木质素降解酶能够降解这类污染物,对脱色具有良好的效果[3]。
本实验通过研究白腐真菌对孔雀石绿的降解,研究了不同振荡情况、不同染料浓度、不同培养时间等条件下对染料孔雀石绿的脱色效果的影响。
1 实验材料与方法1.1 实验材料与仪器菌株:白腐真菌糙皮侧耳B(本实验室保存菌种)。
其他材料:孔雀石绿,土豆,琼脂,葡萄糖,硫酸铵,磷酸二氢钾,硫酸镁,维生素B1。
实验仪器:紫外-可见分光光度计,立式压力蒸汽灭菌器,振荡培养箱,电子分析天平,恒温培养箱。
1.2 实验方法1.2.1液体培养基葡萄糖20g·L-1,(NH4)2SO40.5g·L-1,KH2PO42g·L-1,MgSO4·7H2O 0.5g·L-1,VB10.02g·L-1。
孔雀绿染料的微生物脱色研究

孔雀石绿染料的微生物脱色研究孔雀石绿(Malachite green)别名碱性绿、盐基块绿、孔雀绿、苯胺绿、维多利亚绿或中国绿,亦为一种生物染色剂染料。
孔雀石绿过去常被用于制陶业、纺织业、皮革业、食品颜色剂和细胞化学染色剂,1933 年起其作为驱虫剂、杀虫剂、防腐剂在水产中使用,后曾被广泛用于预防与治疗各类水产动物的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病。
从上世纪90 年代开始,国内外学者陆续发现,孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿具有高毒素、高残留、高致癌和高致畸、致突变等副作用[1]。
许多研究表明,微生物具有极高的降解有机染料的能力,目前分离到的脱色微生物主要有真菌、藻类和细菌[2]。
但目前已报道的脱色菌的效率不高,且耐受孔雀绿染料的范围较低[3,4]。
本试验以高浓度孔雀绿染料为筛选底物,从活性污泥中分离出脱色菌,,能耐受并脱色降解较高浓度的孔雀绿染料,脱色能力强,且脱色速率高.1 实验设计方案与思路1.1 活性污泥分离纯化1.2 单菌种的扩大培养,在三角瓶中液体培养基培养1.3 不同单菌种对染料的降解实验:在三角瓶的液体培养基中加少量染料溶液(1000mg/L)和活性污泥,摇床培养,测定脱色率。
确定高效脱色菌种。
1.4 对菌种进行初步鉴定(菌种的形状、革兰氏染色)2 实验方法[5]2.1 活性污泥分离纯化配培养基配方:牛肉膏3g,蛋白胨10g,蒸馏水1000mL,NaCl 5g,pH:7.0~7.2,15-25g/l 琼脂,配置的时候先配液体培养基,再加琼脂配固体培养基,然后分装成六个液体培养基(每个约100ml)和一个固体培养基,塞上棉塞,包扎好,待灭菌。
把实验要用到的实验仪器用报纸包好,用细线扎好,连同培养基一起放入高压蒸汽灭箘法灭菌。
倒平板经灭菌后的固体培养基冷却至50摄氏度左右倒入3个无菌培养皿中,冷凝成平板。
稀释样品将1瓶90 ml和5管9 ml的无菌水排列好,按10-1、10-2、、、10-6依次编号。
白腐真菌的培养及其在染料污水脱色中的应用

白腐真菌是一类具有引起木质 白色腐烂功能 的 丝状 真菌 的总 称 m .白腐 真 菌 的 菌 丝 可 以穿 入 木 质 进 入其 细胞 腔并 释 放 降解 木 质 素 和 其 他 木 质组 分 的 酶 ,使木 质腐 烂成 淡 色 海 绵状 团块 即 白腐 .白腐 真 菌在生物降解 中具有非专一性 、非水解性 及细胞外
文献标志码 :A
文章编号 :2095-4271(2016)O1-0072-04
Culture of white rot fungus and its application in the decolorization of dye efl uent
XIE Jing·ru,LIAO Rong,MING Zhu,YANG Hua,WANG Rui-jue,YANG Sheng-tao
及应用 中随废水排放 到环境 中对环境和 生态造成十分严重的污 染,因此研 究染料 废水的 处理 具有十分重要 的意 义.白
腐真菌具有非专一性、非水解性 、细胞 外性及适 用于固、液基质等特 点 ,被广泛 的应 用于 降解 染料 废水.传 统工艺 中,对
菌株进行切割后加入到染料废 水 中,容 易引起 白腐 茵的物理损伤.本 文采用孢子接 种 的方式预先将 白腐 茵接 种 ,避 免
性 ,能够降解各种不 同结构的天然及合成化学物质 , 形 成独 特 的降解模 式 ,且 降解 过程 中的关 键酶 种 都 是 在 培养 物 的细胞外 液或 细胞 外成 分 中分 离得 到 … 这 些 优 势使得 白腐 真 菌 在 污染 物 降解 方 面 得 到 广 泛 的 了白腐真菌并选取活性艳 红 x.3B为模 型 污染物 ,考 察 了白腐 真菌对 染料脱 色的效
果.结果表 明白腐真 菌对 活性艳红的 降解效果十分 明显 ,仅 处理 3天 降解率就达到 65.82%.
菌种对孔雀绿染料的降解实验

2 实验方法
2.2.2活性污泥中菌种的分离纯化 活性污泥中菌种的分离纯化采用平板划线法。 1 在无菌操作台中,将平板倒置于酒精灯旁 ,左手拿出皿底 并尽量使平板垂直于桌面,有培养基一面向着酒精灯(这时皿 盖朝上,仍留在酒精灯旁),右手拿接种环在酒精灯上烧红之 2 后再挑取一环活性污泥伸入培养皿内,先在平板上轻轻划一 折线(切勿划破培养基),转动培养皿,并将接种环上残菌 烧掉,冷却后使接种环从第一次画的折线的末端开始做第二 次折线划线,同法做第三、第四次划线。划线完毕(如上图) 3 盖好皿盖,倒置于37℃恒温培养箱培养7天后观察结果。(实 验将三个平板用于活性污泥菌种的分离纯化,做好标签)
3 结果与讨论
3.1孔雀绿的标准曲线制定
孔雀绿浓度 (mg/L) 吸光度A 0 0 2.16 0.137 4.32 0.266 6.48 0.383 8.64 0.527 10.80 0.652 12.96 0.811 17.28 1.071 21.60 1.299
3 结果与讨论
3.2不同菌种对染料的降解实验
01
PART 01 PART 02 PART 03
实验设计方案与思路
实验方法 结果与讨论 实验结论
PART 03
1 实验设计方案与思路
1.1 孔雀绿的标准曲线制定 1 1.2 活性污泥和土壤中菌种的分离纯化 1.3 单菌种的扩大培养 2 1.4 不同单菌种对染料的降解实验 1.5 对菌种进实验方法
2.1孔雀绿的标准曲线制定 配制浓度为216mg/L的孔雀绿标准溶液,在8支 1 50ml容量瓶中各加入该标准溶液0.50mL、1.00mL、 1.50mL、2.00mL、2.50mL、3.00mL、4.00mL和 5.00mL2 ,用水稀释至刻度、摇匀。在紫外分光光度 计上于波长617nm处,以水为参比,测定吸光度值 。利用所测得的标准系列的吸光度值对浓度作图, 3 绘制标准曲线。
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白腐真菌处理染料孔雀石绿的研究
实验研究了白腐真菌B在不同振荡条件下、不同染料浓度、不同碳源浓度等环境因素对孔雀石绿脱色效果的影响。
实验结果表明菌株B在染料浓度为100mg·L-1,振荡速度为150r·min-1,碳源浓度为20g·L-1时,其脱色率最高。
标签:白腐菌;染料;孔雀石绿;脱色
孔雀石绿是一种合成染料,广泛应用于水产养殖业,在养殖鱼类中作为杀菌剂来防治原生动物和真菌感染。
在纺织品和皮革工业,被用来给丝绸、羊毛和皮革等进行染色[1]。
然而使用这种染料会产生大量问题,因为孔雀石绿具有毒性较高,致癌、致畸、致突变等副作用。
而且毒性效应会随着接触时间、温度和浓度而增加,其消除速率非常缓慢[2]。
因此,需要找到一种从池塘和工业废水中去除过量/残留孔雀石绿的有效方法。
人们采用各种非生物方法,但是需要昂贵的催化剂和试剂,这本身是不环保的。
而利用微生物分泌的酶是消除这种染料最好的方式,具有环境友好性。
白腐真菌,是分解合成染料非常有效的类群,然而微生物降解孔雀石绿是很难的,因为它具有杀菌性,从而阻止了原生物修复策略的执行。
但是白腐真菌分泌的木质素降解酶能够降解这类污染物,对脱色具有良好的效果[3]。
本实驗通过研究白腐真菌对孔雀石绿的降解,研究了不同振荡情况、不同染料浓度、不同培养时间等条件下对染料孔雀石绿的脱色效果的影响。
1 实验材料与方法
1.1 实验材料与仪器
菌株:白腐真菌糙皮侧耳B(本实验室保存菌种)。
其他材料:孔雀石绿,土豆,琼脂,葡萄糖,硫酸铵,磷酸二氢钾,硫酸镁,维生素B1。
实验仪器:紫外-可见分光光度计,立式压力蒸汽灭菌器,振荡培养箱,电子分析天平,恒温培养箱。
1.2 实验方法
1.2.1液体培养基
葡萄糖20g·L-1,(NH4)2SO40.5g·L-1,KH2PO42g·L-1,MgSO4·7H2O 0.5g·L-1,VB10.02g·L-1。
1.2.2 白腐真菌对孔雀石绿的降解
将菌种活化后接种到内装150mL培养基的500mL锥形瓶中,150r·min-1,30℃摇床培养3-4天,使其形成光滑均匀,大小适中的菌丝球,过滤收集菌球,将白腐真菌菌球接种到装有100ml的已灭菌的孔雀石绿共培养液的锥形瓶中,用棉花塞塞住瓶口,放入振荡培养箱(150r·min-1,30℃)培养。
1.2.3 培养液吸光度的测定
连续几天每天取实验样品进行测定,分别用紫外-可见分光光度计在618nm 波长下测量其吸光度,记录其数据。
1.2.4 脱色率的计算
脱色率η=(A0-A1)/A0×100%
式中:η为脱色率;
A0为降解前孔雀石绿溶液的吸光度;
A1为处理后孔雀石绿溶液的吸光度。
2 结果与讨论
2.1 不同孔雀石绿浓度对脱色率的影响
配制浓度为50、100、150、200、250、300、350mg·L-1的染料共培养液,在无菌环境中接种已培养好的菌体。
按1.2.4的方法测定脱色率,考察孔雀石绿浓度对脱色效果的影响,结果见表1。
由表1可知,孔雀石绿浓度在50~350mg·L-1范围内,菌株B对孔雀石绿的脱色活性都很高。
这说明菌株B对孔雀石绿的适应浓度范围较广,脱色效果显著。
表1 孔雀石绿浓度对脱色效果的影响
2.2 培养箱转速对脱色率的影响
培养箱转速对脱色率的变化如图1所示。
从图1可见,在80-170r·min-1的转速范围内,初始时脱色率随着转速增大而增大,在150r·min-1时达到最大,之后呈减小趋势,说明转速过高会影响白腐真菌的生长,降低脱色效率,最适宜的转速取150r·min-1。
图1 培养箱转速对脱色效果的影响
图2 不同碳源浓度对脱色效果的影响
2.3 不同碳源浓度对脱色率的影响
配制碳源浓度分别为5、10、15、20、25、30g·L-1的培养基,在同一染料浓度下接种白腐真菌B进行脱色。
振荡培养4天后,分别测定其脱色率,如图2所示。
从图2可见,碳源浓度在5~20g·L-1时,脱色率随着碳源浓度增加而增大,当碳源浓度超过20g·L-1时,脱色率开始下降,说明过高的碳源浓度会抑制菌株B的生长,进而影响其降解能力,故取碳源浓度为20g·L-1。
3 结束语
(1)白腐真菌菌株B对孔雀石绿溶液有良好的脱色作用。
(2)菌株B在染料浓度为100mg·L-1,振荡速度为150r·min-1,碳源浓度为20g·L-1时,其脱色率最高,达到90%。
参考文献
[1]Maalej-Kammoun M,Zouari-Mechichi H,Belbahri L,et al. Malachite green decolourization and detoxificationby the laccase from a newly isolated strain of Trametes sp[J]. Int Biodeterior Biodegrad,2009,63:600-606.
[2]Diwaniyan S,Kharb D,Raghukumar C,et al. Decolorization of synthetic dyes and textile effluents by basidiomycetous fungi[J]. Water Air Soil Pollut,2010,210:409-419.
[3]颜克亮,吴航军,王宏勋,等.木质纤维素水提物促进白腐菌降解孔雀绿研究[J].环境污染与防治,2009,31(7):25-29.。