输血实验室血型血清学质量控制
临床检验在ABO血型鉴定中的质量控制分析

临床检验在ABO血型鉴定中的质量控制分析ABO血型鉴定是临床实验室所必具的检查项目,对其正确的鉴定在临床治疗输血,器管移植、骨髓移植、法医鉴定、母婴血型不合引起的新生儿溶血病的诊断等方面发挥着根本性的作用。
因此实验室必须加强血型鉴定过质中各环节的质量控制工作,确保检验质量提高。
笔者就ABO血型鉴定过程中的质量控制工作的体会报告如下:1 加强理论学习、掌握基本原理。
ABO血型鉴定是根据红细胞膜表面有无A抗原和(或)B抗原,以及血清中存在血型抗体,利用红细胞的凝集实验,运用正向定型或反向定型,依据抗原抗体存在的情况判定血型。
ABO血型定型原则见表1。
ABO血型正反定型结果-标准血清 +受检者红细胞受检者受检者血清+试验红细胞抗A抗B 抗A+B血型 A细胞B细胞 O细胞+ - + A - + -- + + B + - -- - - O+ + -+ + + AB- - -注:+:凝集或溶血;-:不凝集。
2 选择适宜的鉴定方法,严格执行凝集结果判断标准2.1 生理盐水凝法:①玻片法,此操作相对简单,适于大量标本的检查,但反应时间长,被检者如血清效价低,则不易引起红细胞的凝集。
因此,不适宜用于反向定型。
②度管法:由于离心作用加速了凝集反应,使反应时间缩短,而且借助于离心力的作用可使红细胞接触紧密,促进了凝集作用,常常在急诊检查中被大量使用。
③玻片法凝集结果的判断应在低倍镜下对凝集程度的强弱判断标准为:呈一片或几片凝集块,仅见少数单个游离红细胞为(++++);呈数个大颗粒状凝块,有少数单个游离红细胞为(+++);数个小凝集颗粒和一部门维细凝集颗粒,游离红细胞约占1/2为(++);肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒,在镜下见每凝集团中有5—8个以上红细胞为(+);可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多的游离红细胞为(±);可见极少数红细胞凝集,而大多数红细胞呈分散为混合凝集外观,镜下未见细胞凝集,红细胞均匀分布为(-)。
临床检验ABO血型鉴定的质量控制方法

浅谈临床检验ABO血型鉴定的质量控制方法
2022级临床医学检验
【摘要】目的:总结探讨血型鉴定的影响因素。方法:对418例学生采用玻片法和试管法进行血型鉴定。结果:玻片法和试管法存在一定结果不符,其准确率低于试管法。结论:血型鉴定存在一定的影响因素,血型鉴定时,需要综合考虑。
【关键词】ABO血型;血型鉴定
血型是人类血液以血型抗原为表现形的遗传性状,ABO血型系统和Rh血型系统是红细胞的两大血型抗原抗体系统,在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。血型鉴定(bloodtyping)是临床输血的首要问题,正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。临床常用的血型鉴定方法有盐水凝集法和凝胶微柱法。盐水凝集法因简单易行在临床上广泛应用,其又分为玻片法和试管法,结果在实际操作中会受到诸多因素的影响。本文通过对418名学生的玻片法和试管法的血型鉴定结果进行统计分析,探讨ABO血型鉴定中的影响因素。
1资料和方法对象:我校检验学院2022年9月151名学生,年龄18~25岁,平均年龄21.4-t:2.5岁。每名生同时用玻片法和试管法两种方法进行ABO血型鉴定。
标本采集:抽取EDTA抗凝血,在2小时内完成ABO血型鉴定操作。
ABO血型鉴定方法:正定型法:①玻片法:取清洁且带有圆形凹陷的推片1张,并注明A、B:字样。将抗A试剂、抗B试剂各1
滴分别滴于玻片上A、B处。分别取等体积待检血样(5%红细胞悬液或者全血)于抗A试剂和抗B试剂。另取洁净推片1张,标明A细胞、B细胞和0细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管滴加A、B和0型试剂红细胞悬液1滴。用不同的竹签将分型试剂与待检血样调匀,同时不停的摇动玻片(或者瓷盘)并观察血型凝集(或者溶血)反应,也可用低倍镜观察结果。②试管法:取洁净小试管(内径10mm×60mm)2支,分别标上抗A、B字样,分别加入抗A、抗B标准血清各1滴,于相应标记的试管;然后分别加入被检者5%红细胞生理盐水悬液l滴于各试管充分混匀;以1000转/分的速度离心1分钟判定结果。将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或者溶血)现象。如肉眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。③反定型法:首先将待检血离心(2500r/mm,3min)分离血清;取小试管3支,分别标记A、B、O,各管加被检者血清1滴,然后按标记分别加入5%的A、B、O型标准红细胞生理盐水1滴,混匀;以1000r/m比离l~,lmin后取出试管,轻摇管底,观察凝集。
医院输血科室内质控标准操作规程

输血科室内质控标准操作规程1.目的为检测、控制实验室测定工作的精密度、准确度,提高常规测定工作的批间、批内的一致性,依据临床输血质量管理指南室内质控的要求制定本规程。
2.适用范围适用于输血科对血型血清学实验室检测的全过程质控。
3.职责输血科工作人员负责血型血清学实验室检测的全过程质控。
4.原理实验室室内质量控制(以下简称室内质控)的目的是为获得可靠的测定结果室内质控就是监测过程,以评价检验结果是否可靠,以及排除质量环节中所有导致不满意的原因。
广义上室内质控适用于得出检验结果所有步骤的活动,从收集标本开始,直至报告测定结果,是保证高质量操作的必要措施。
5.所需设备、试剂及质控品5.1设备离心机,电热恒温水浴箱,显微镜,5.2试剂凝聚胺试剂盒,抗人球蛋白试剂,单克隆抗-A、抗-B,A、B、O型试剂红细胞等,抗-D,筛选细胞。
5.3质控品5.3.1质控品来源选择上一工作日A型和B型样本各一份,作为当前工作日的质控品,随当日样本同检。
5.3.2质控样本要求①ABO正反定型呈典型的A型或B型反应模式;②RH(D)阳性;③不规则抗体筛选阴性;④样本无溶血。
5.3.4凝聚胺试剂质控:A型或B型自身交叉配血试验为阴性质控,A 型与B型异型交叉配血试验(非配合型交叉)为阳性质控,随当日首份交叉配血同测。
预期质控结果:阴性质控不凝聚(阴性),阳性质控凝聚(阳性)。
6.检测环境条件室温应控制在18-27℃,湿度应保持30-70%.7.步骤与方法7.1人员的培训和职责做好质控的关键在人员,通过培训,使其掌握质控的基础知识、一般方法,明确各自的职责。
7.2标本的控制标本要求有唯一性标识。
标本在采集、运送、交接、处理、存储、消毁和记录等环节上都要控制,并有追溯性。
7.4试剂的质量控制选用质量可靠、通过质量评价的试剂盒。
日常工作应进行两个水平的质量控制。
7.4.1常规使用方法的每日质量控制,对每一新批次试剂要进行全面的质量控制,包括外观、标签、批号、有效期是否符合使用要求。
输血实验室室间与室内质控规范

– 缺乏训练和经验,缺乏动力, 过度操劳 ❖ 设备 – 使用不可靠的设备,设备缺乏保养维护 ❖ 试验 – 在交叉配血实验中出现高比例的假阳性,导致忽视阳性结果 ❖ 体系 – 系统允许24小时内,对输血反应进行调查。这对ABO/D分型错误结
❖ 离心离力过心高对,易血形型成鉴亚型定判的断重失误要或性假阳性
❖ 离心力过低,是形成亚型判断失误或假阴性
4+
3+
1+~±
0
A1 Aint A2 A3 Am Ax Ay Amos Aw Abantu AFinn Ael
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血库试剂
❖ 试剂抗血清
抗-A, 抗-B, 抗-AB, 抗-D
2021/10/10
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举例;员工需进一步培训 非技术性避错免误的A常B见O来血源型定型差错
减弱或缺少的抗原反应 ➢ A或B亚型 ➢ 疾病状态 ➢ 过量可溶性血型物质 ❖ 未知的抗原 ➢ 获得性A或B抗原 ➢ 改变的抗原;T、Tn活化及Cad多凝集 ➢ 低频率抗原抗体的反应
2021/10/10
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❖ 两份细胞应明确表达的抗原 :D,C,c,E,e, K,k, Fya, Fyb, Jka, Jkb, S,s, M,N, Mia, P1, Lea, Leb, Dia (尽可能是纯合子)
2021/10/10
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抗体鉴定细胞
❖ 大于8份O细胞 ❖ 对常规抗体和混合抗体必须有明确的反应格局
❖ 一组细胞应包括 rr, rr’, r” r(r”r’) 细胞型 和至少 包括 R2 R2 表现型
其他血型试剂
抗人球蛋白血清
❖ 试剂红细胞
血型实验室的质量控制与输血安全

Go d b o d q aiy c n r llb r t r o e s r h a e y o l o r n f so o lo u l o to a o a o y t n u et es ft fb o d t a s u in t
Jl ANG Li a n -c g i
[ ywo d]Blo a su inLa o ao y u l yc nr l o dTrn f s nSaey Ke r s o dTr n fso b rt r ;q ai o to ;Blo 中 R 4 .
【 献标 识码 】 文 A
o ii eto n slto y tm ,o i,go n fdsnfcina dioains se nar ru d,tbe t.aedsn etd a l,ee r iifce ;⑤ bo dts r cs u l ycnto.Re ut :S a e e a cup — lo etp o esq ai o r 1 t s ls ofr v r do c a n h
p ro n l es n e;③ srn t e igbo dta su inl o ao yma a e n , s b i n rv e u l ys se @ L b rt r f ti l n ain te g h nn lo n f s b rt r n g me t et l ha di o et a t y tm r o a a s mp h q i a o ao yo sr tmpe tt ci me o
输血相容性检测室内质控操作规程

规*输血科各级检验人员室内质控操作程序,确保检验结果准确、可靠。
合用于输血相容性检测项目。
选择已知型别的红细胞和血清,根据其与在用试剂标准血清:抗 A、抗 B、抗 D 、ABO 血型反定型红细胞及 ABO 血型抗原检测卡(微柱凝胶)阳性及阴性检测结果,通过每天或者每批与待检标本相同的试剂和方法进行检测,以监控实验室进行 ABO 、RhD 血型检测过程中应用的试剂、设备及实验流程,并评估实验结果的有效性。
1. 质控品:样本 1 A1 型 RhD (+)红细胞样本 2 B 型 RhD (+)红细胞样本 3 A 血清样本 4 B 血清样本 5 O 型 RhD (+)红细胞样本 6 RhD ( -)红细胞2. 血型鉴定试剂:标准血清:抗 A,抗 B,抗 DABO 血型反定型红细胞: Ac, Bc, OcABO 血型抗原检测卡(微柱凝胶)卡式专用离心机首先将质控品、标准血清及 ABO 血型反定型红细胞从冰箱取出后平衡至室温。
操作步骤按不同检验方法(平板法、试管法、微柱凝胶法)具体如下:1. 平板法:在玻片上(或者纸片上)按表 1 加样各 1 滴(50ul),混匀(直径约 20mm 大小), 先后缓慢摇晃玻片, 2 分钟摆布肉眼判读结果,并记录。
2. 试管法:取 13 支(95mm×12mm 或者 75mm×12mm) 试管做好标记, 按表 1 加样各 1 滴(50ul), 混匀, 离心 (离心速度和时间可以选择转速 1000rpm 时间 1 分钟或者转速3400rpm 时间 15 秒) , 判定结果,并记录。
3. 柱凝胶法:取 4*待检 ABO 血型抗原检测卡(微柱凝胶)做好标记。
将样本 1 分别加入第 1*卡的 1-3 孔中各 1 滴(50ul),将样本 2 分别加入第 2*卡的 1-3 孔中各 1 滴(50ul),将样本 5 分别加 入第 3*卡的 1-3 孔中各 1 滴(50ul),将样本 6 加入第 4*卡的第 3 孔内。
输血科质量控制管理流程

输血科质量控制管理流程1制定目的提高医学检验质量2适用范围输血科日常开展的实验项目,包括血型、不规则抗体和交叉配血实验。
3主要内容3.1室内质量控制3.1.1.输血科建立和实施与检测项目相适应的室内质量控制流程。
3.1.2.质控规则的选定:使用经过国家认证的室内质控品进行室内质控,每次实验至少选择一个阴性、一个阳性对照质控品。
3.1.3.质控频次:试剂质控每月一次;实验质控每日一次。
3.1.4质控品技术规则定义:质控参照临床化学定量实验Levrey-Jennings质控图。
技术规则定义如下:3.1.4.1 1S(1-2S):一个质控测定值超过X+2S质控限,作为Levrey-Jennings质控图的警告限。
3.1.4.2 2S(1-3S):一个质控测定值超过X+3S质控限,作为Levrey-Jennings质控图的失控限。
3.1.4.3 22S(2-2S)两个连续的质控测定值超过X+2S 质控限3.1.4.4 R4S(R-4S)同一批内高和低质控测定值之间的差值超过4S。
3.1.4.5 10X(10-X)十个连续的质控测定值落在平均数(X)的同一侧。
3.1.5质控品常规使用前的确认:所有制品包括质控品、试剂均必须在有效期内,且无其他异常情况,否则结果无效。
3.1.6质控品监测数据的分析:血清质控采用定性及半定量标准,要求效价在规定范围内;机测质控必须与质控品规定结果一致。
3.1.7试验有效性判断:质控品监测数据超过允许范围,本次试验无效。
3.1.8失控处理:每次质控都要做好室内质量控制记录,失控时要积极查找原因,原因清楚后,对通次标本重新检测。
3.2室间质量控制参加省输血质量控制中心和国家卫计委临床检验中心组织的输血相容性检测实验室室间质评工作。
3.3参加地区和全国 EQA 总结会议。
学习质控有关文献、掌握质控学术动态(质控项目、质控规则等)。
输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程

输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程1、目的:规范血液免疫学产前检查操作,确保试验过程及结果的准确性与可靠性。
2、范围:本规程适用于实验室血液免疫学产前检查试验操作。
3、职责:经授权的血型实验室试验人员负责血液免疫学产前检查试验过程及报告的发出。
4、原理孕妇和丈夫ABO血型不合(O/A、O/B、O/AB、A/B、A/AB、B/A、B/AB)时,孕妇体内的IgG抗A(B)可能会引起新生儿溶血病的发生。
本试验通过检测孕妇血清中有无IgG性质的抗A(B)抗体及其效价(应用巯基试剂破坏IgM抗体,检测IgG抗体效价)即可预测ABO系HDN发生的可能性。
应用筛选红细胞可检测孕妇血清中是否存在不规则抗体,如果存在,应用谱细胞进行抗体鉴定,确定抗体的特异性,进一步检测非ABO系新生儿溶血病。
5、所需设备、材料或试剂:37℃恒温水浴箱、细胞洗涤离心机、抗-A抗-B血型定型试剂(单克隆抗体)、抗-D RH血型定型试剂(单克隆抗体)、凝聚胺介质试剂、抗人球蛋白试剂(抗-IgG、C3d)、(A、B、O)型标准红细胞悬液(2—5%)、商品化筛选细胞、谱细胞、2—ME试剂、12×75mm试管、塑料滴管。
6、检测环境条件:温度:18—25℃;湿度:30—70%7、标本要求7.1标本接收在接收标本时,应尽可能的了解、核对、记录患者的相关资料,包括受血者姓名、年龄、性别、临床诊断、输血史、用药史、妊娠史、标本编码等;7.2检验人员收到被检者产前检查申请按照申请单内容在试管上做标记(用记号笔在试管上标明被检者姓名、性别),保留申请记录。
7.3按照要求进行血液采集。
将采好的血液沿试管壁注入已标识的抗凝试管中,反复颠倒混匀,放入2-8℃冰箱待用。
并填写《外来标本交接记录》及相关记录。
7.4标本的种类与数量:产前检查需送夫妇血样,血样均需抗凝(EDTA抗凝),女(母)5ml,男3ml。
7.5标本的保存与处理:完成所有试验内容后,要仔细核对实验结果,发出实验报告后,将实验所用的标本原始送检管存于2-8℃冰箱内至少7天以便进行查找和核对,之后交由单位相关部门统一处理。
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输血实验室血型血清学质量控制
随着输血医学的发展,输血安全问题已日益受到各方面的高度关注,通常输血有两方面:其一是经血液传播疾病问题,其二是实验室血型血清方面的问题。
而血型血清学方面的的检测是非常重要的,它是安全输血的根本保证。
下面就血型血清学实验室质量控制有关问题作一探讨。
一、血型血清学实验室目标
输血的原则是安全、有效、及时,其中安全最为重要,这就要求在实验室作出的结果必须正确无误,否则将引起严重后果。
输血过程中可能出现各式各样的疑难问题。
它们存在于供血者的检查、血液采集、血型鉴定、抗体检出和鉴定、交叉配血试验、输血和成份措施、成份单采和置换、输血反应、输血传染病,各类自身抗体检出、新生儿溶血性贫血、新生儿血小板减少性紫癜、亲子鉴定、骨髓移植等等。
有理论、技术上的问题,也有责任心的问题。
正确的结果是输血的安全保证。
血型血清学实验室质量控制室内质控(IQC)、室间质控(EQA)。
二、室内质控
1、样本:准确无误的标本是输血工作最关键的一步,这就要求临床在采集样本时严格遵守查对制度,每次只能采集一个人的样本,样本的交接应双方鉴收,样本用完后最少保留在规定的时间内。
2、人员:一个人的能力有大小,但在输血工作中出现问题最多的是责任性差错事故。
人是关键。
血库应选责任心强、经验丰富的同志,在核对时应细心、认真、负责(凝集的判断有无、强弱、真假),正确的判读结果报告是输血工作的关键。
3、技术方法:精湛的技术是输血工作的保证。
开展的项目应齐全,血型鉴定(低板、96孔板、试管法)、交叉配血试验(盐水、PEG、凝聚胺IAT)、抗体筛选和鉴定、产前检查、HDN、服效药等等试验。
4、试剂:试剂是输血安全的根本。
试剂必须是通过国家批批检、认可的试剂,一般情况下应是在有效期内,外观无污染、无沉淀、无溶血、无凝块,特异性、亲和力、效价在规定的范围内。
常用试剂备用有:(1)、试剂抗血清:抗-A、-AI、-B、-AB、-H、-D、-C、-c、-E、-e、抗-IgG+C3等等。
(2)、红细胞A细胞、B细胞、A2细胞、Rh阴性细胞、筛选细胞、谱细胞、IgG-致敏细胞。
(3)、反应的介质有PEG、凝聚胺等。
最常用抗血清要求
抗血清试验细胞效价(>)
Anti-A A1 128
A2 64
A2B 64
Anti-B B 128
试剂红细胞
*A细胞:与抗A、抗A1反应4+(与抗B无反应)
*B细胞:与抗B反应4+,与抗A(抗A1无反应)
*筛选谱细胞:2-3份0细胞(尽可能含DCcEe、Kk、Fya,b、 Jka,b、Ss、MN、PI、Lea,b抗原等)
*鉴定谱细胞:大于8份0细胞(对常规抗体或混合抗体有明确的反应格局) 5、设备:先进的设备是血型血清学的基础。
设备应具备:冰箱、水浴箱、离心机、血浆解冻箱、光学显微镜等。
6、环境:血型血清学实验室的合理设置是减少污染、正确操作的基本环节,实验室应设置合理、设备齐全。
上述最重要的是人——样本——方法——试剂——仪器——结果报告。
输血报告单应完整,各种记录齐全。
三、室间质控
室间质控有国家组织的、有国际组织的等,有条件的实验室应参加国家、省、市组织的室间质评活动。
此活动的开展可提高血型血清学的实验室质量;避免闭门造车、克服自我感觉良好,提高改进技术。
室间质评的形式有多种内容多样(ABO、Rh、抗体筛选、抗体鉴定、交叉配血)培训的方法多种方式、有国家卫生部组织的有各级组织的技术培训,会交流等。
其实提高血型血清学质量控制是输血安全的保证,血型血清学领域要开展的研究还应有:1、方法学的改良与革新。
研究新的微量、快速、敏感、特异、简便的定型技术或抗体筛选鉴定技术,尤其是免疫化学技术及分子生物学技术的应用:2:溶血性输血反应的前瞻性预防、治疗。
如ABO以外抗体的产生规律及临床意义;3、疑难血型的鉴定及合血技术。
如自身抗体对血型鉴定及交叉配血的影响;4、血型与疾病的关系。
研究新生儿溶血病更可靠的产前诊断方法,某些疾病(疟疾)与血型(Duffy)的关系,以及血型血清学技术作为辅助诊断的可能性等;5、输血对机体特别是免疫功能的影响。
如输血对肿瘤患者预后的影响,输血所移植物抗宿主病等;6、红细胞酶型、免疫球蛋白同种异型及血清型的研究等等。
四、建议
搞好血型血清学质量控制工作还应从以下方面1、加强引进高学历、高职称的技术人员,尤其注意专业人才引进,同时加强技术人员的专业培训、进修。
同时定期举办血型检验技术高级培训班。
2、加强血型实验室建设:加强血型实验室的室内质量控制、检验试剂的质量控制、实验程序文件的制定等(有条件的单位可参加实验室认可),同时在血型研究领域加大力度。
3、多开展血型检验项目:应开展血小板血型、疑难血型鉴定、Rh(-)患者配血等项目。
4、尽快采用先进、自动化的检验技术与方法:提高检验的工作效率,开展基因检测技术、酶技术的研究应用。
5、加强对检验试剂的质量控制:加强对红细胞试剂、抗体筛查试剂、谱细胞试剂的研发,对血型检验试剂进行临床评估、规范市场,引导试剂的选择使用。
6、规范血型检验程序和检验操作规程:保证检验的准确性,同时避免不必要的重复检验。
血站血型血清学检验状况的调查研究
摘要:
目的:了解血站血型血清学检验状况,进一步加强血站血型血清学检验的质量控制,为开展全国血站血型血清学检验室间质量评价提供相关材料。
方法:采用调查表方式,向参加卫生部临床检验中心血站血液检验室间质评的单位寄发调查表,对回报数据进行统计分析。
结果:共有139家血站参加了本次调查,其中血液中心12家、中心血站94家、县(区)血站21家、军队血站5家、中心血库7家。
检验科血型血清学检验人员平均5人,其中高级职称占3.6%、中级30.4%、初级63.4%、其它2.6%;其中本科及以上学历占21.8%、大专42.5%、中专50.0%、其它2.4%。
血站中开展ABO定型占100%、Rh(D)占97.8%、抗体筛查占64.0%、抗体鉴定占46.0%、交叉配血占84.9%、疑难血型鉴
定占60.4%、Rh(-)患者配血占67.6%、白细胞血型占14.4%、血小板血型占16.5%、组织器官移植配型占10.1%、亲子鉴定占7.9%、新生儿溶血病检查占56.8%。
血站血型血清学检验采用纸片、玻片、瓷片法占77.0%、试管法占77.7%、微量板法占38.8%、凝胶柱法占10.1%、抗球蛋白试验占68.3%、酶技术占42.4%、吸收放散试验占48.9%。
结论:血站血型血清学检验在检验技术人员、检验项目开展、检验方法技术使用、检验仪器方面比较落后,应重视血型检验,加强血型检验的质量控制,保证输血安全。