多克隆抗体
多克隆抗体特点
多克隆抗体特点1.引言1.1 概述概述多克隆抗体是一种由多个不同B细胞克隆产生的抗体，与单克隆抗体相比，它具有更高的抗原特异性和更广泛的抗原识别能力。
多克隆抗体的制备方法相对简单，能够同时识别抗原上的多个表位，因此在科学研究和医学应用中具有重要的价值。
本文将首先介绍多克隆抗体的定义和原理，包括多克隆抗体的组成、产生过程以及克隆筛选的方法。
接着，将详细探讨多克隆抗体的制备方法，包括抗原免疫、脾细胞融合、杂交瘤筛选等步骤。
同时，还将介绍如何利用多克隆抗体对特定抗原进行鉴定和检测，以及多克隆抗体在各种实验和临床应用中的优势和局限性。
最后，本文将总结多克隆抗体的优点，包括更好的抗原识别能力、更高的敏感性和更广泛的应用范围。
同时，也将展望多克隆抗体在生物医学领域的应用前景，包括药物研发、病毒检测、免疫治疗等方面。
通过深入了解多克隆抗体的特点和应用前景，我们可以更好地理解这一技术的潜力，为生物医学研究和临床诊断提供更多的选择和可能性。
1.2 文章结构文章结构部分的内容主要是对整篇文章的结构进行介绍和概述。
在本文中，文章的结构分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分（1. 引言）用于引出本文的研究背景和意义，对多克隆抗体的特点进行概述，说明本文将要探讨的问题和目的，即本文要对多克隆抗体的特点进行详细的介绍和分析。
正文部分（2. 正文）是文章的核心部分，主要包括两个小节：多克隆抗体的定义和原理（2.1）和多克隆抗体的制备方法（2.2）。
在多克隆抗体的定义和原理中，将从理论角度对多克隆抗体的概念进行解释，并介绍多克隆抗体的产生原理。
而在多克隆抗体的制备方法一节里，则会详细介绍多克隆抗体的制备过程和方法。
结论部分（3. 结论）对文章进行总结和归纳，列举多克隆抗体的优点，并探讨了多克隆抗体在未来的应用前景。
通过本文对多克隆抗体特点的介绍和分析，可以更好地认识和理解多克隆抗体，为其在临床和科研领域的应用提供参考和指导。
综上所述，本文主要从引言、正文和结论三个部分介绍了多克隆抗体特点。
多克隆抗体的原理及制作方法
多克隆抗体的原理及制作方法一、原理多克隆抗体是由针对多种不同抗原表位的抗体组成的混合物。
外源性抗原初次进入动物体内后，可引发机体初次免疫应答，即在抗原呈递细胞（antigenpresenting cell，APC）和T细胞的作用下，未成熟B细胞被激活分化为产生抗体的浆细胞，对于大多数可溶性蛋白抗原而言，动物注射后5～7天，血清中开始出现抗体，并在12天左右达到顶峰，然后逐渐下降。
初次免疫应答产生的抗体持续时间较短，亲和力也较低。
但是受抗原刺激的B细胞除了分化为抗体产生细胞外，还增殖形成大量记忆性B细胞，它们在实施加强免疫时被快速激活，加强免疫后抗体滴度迅速上升，并持续更长时间，抗体合成率也比初次反应增加几倍到几十倍，加强免疫后7～14天出现抗体的峰值。
由于记忆B细胞的存在，需要更少的抗原刺激即可引起再次免疫应答。
记忆B细胞是长寿细胞，因此，特异性抗体应答在最后一次加强免疫之后6个月到一年都会存在。
本节介绍用佐剂乳化的抗原免疫动物获得多克隆抗血清的方法。
该法可用于免疫家兔，小鼠、大鼠或地鼠，也可用于更大的动物如绵羊、山羊或马。
二、材料（一）动物选择根据需要可选择适当品系的家兔，小鼠，大鼠或地鼠等动物进行免疫获得抗体。
动物的选择取决于所需的抗血清量以及特异性抗原的物种来源和免疫动物物种之间进化上的差异。
家兔常被选作免疫动物，因为兔与人、兔与小鼠之间的遗传学差异大，而人和小鼠来源的蛋白是最经常被研究的对象。
每次获取25ml血清的采血量，对兔本身没有明显的损伤。
（二）抗原制备优质抗血清很大程度上取决于抗原的质量、纯度和数量。
常用纯化的抗原或部分纯化的抗原免疫动物，所用抗原往往是蛋白质或肽。
一般而言，细菌或病毒蛋白如血凝素或细菌包膜蛋白有很强的免疫原性，而哺乳动物蛋白如多肽类激素或细胞膜受体则免疫原性较弱。
有时也会用到与适当的蛋白质载体、细胞或细胞与组织提取物相交联的半抗原（多糖、核酸、脂类和小分子化学物质等）以增强半抗原的免疫原性，通过化学方法将半抗原连接到已知的免疫原性强的载体蛋白上，常用的载体蛋白有匙孔戚血蓝素（KLH）、牛血清白蛋白（BSA）、鸡卵清蛋白（OVA）等。
多克隆抗体
多克隆抗体多克隆抗体: 原理、应用和优势摘要：多克隆抗体是一种可以广泛应用于生物医学研究、临床诊断和治疗的重要工具。
本文将介绍多克隆抗体的原理、应用和优势，帮助读者更好地了解和使用多克隆抗体。
1. 引言多克隆抗体是由多个不同的B细胞克隆所产生的抗体群体。
相比于单克隆抗体，多克隆抗体具有多种来源细胞、多样性抗体特异性和高抗原亲和力的优势。
2. 多克隆抗体的原理多克隆抗体的制备需要经历免疫原注射、免疫细胞制备、抗体筛选和克隆扩增等步骤。
通过注射抗原刺激机体免疫系统，激发B细胞产生特异性抗体。
然后通过细胞融合技术或酶消化法获得抗体产生的细胞系，最后经过筛选和扩增获得多克隆抗体。
3. 多克隆抗体的应用多克隆抗体在生物医学研究、生物工程和医学诊断等领域具有重要应用价值。
在科研中，多克隆抗体可用于蛋白质表达分析、免疫组化染色、免疫印迹、酶联免疫吸附测定等实验技术。
在临床诊断中，多克隆抗体可用于检测病原体感染、肿瘤标志物和药物浓度。
此外，多克隆抗体还可应用于治疗，如癌症免疫治疗和抗体药物研发。
4. 多克隆抗体的优势相比于单克隆抗体，多克隆抗体具有以下几个优势：4.1 多源性：多克隆抗体通过多个细胞克隆产生，能够识别抗原上的多个不同部位，从而提高抗体的特异性和亲和力。
4.2 可灵敏性：多克隆抗体可以通过融合多个细胞系来增加抗体的生产量，提高实验的灵敏性和可靠性。
4.3 高特异性：多克隆抗体可识别抗原上多个不同的表位，在检测复杂样本中具有更高的特异性。
4.4 宽适应性：多克隆抗体对于不同类型的抗原具有较强的适应性，可以应用于多种研究领域和技术平台。
5. 多克隆抗体的挑战与优势相对应的是多克隆抗体也存在一些挑战。
制备多克隆抗体需要免疫动物，然后通过脾细胞和骨髓细胞等制备免疫细胞，这个过程较为复杂且不易实施。
此外，多克隆抗体的批次间差异性较大，因此需要进行一定的筛选和验证工作。
6. 结论多克隆抗体作为一种重要的实验工具，在生物医学研究、生物工程和医学诊断等领域发挥着重要作用。
多克隆抗体的制备(1)(1)
免疫乳剂制备成功的判别标准
油包水状态 鉴定方法是将乳化剂滴入4℃左右冷水中， 若保持完整不分散，成滴状浮于水面，即 乳化完全，为合格的油包水剂。
免疫
将制成的乳剂吸入注射器，在兔子背部及 颈部皮下注射8-10点，每点约0.2ml
每隔14天用初次用量的2/5的抗原于不完全 抗原中，在皮下多点注射加强免疫,每点 0.2ml,共加强2次。
多克隆抗体
天然抗原分子中常含有多种不同抗原 特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激 机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激 活，产生的抗体中含有针对多种不同抗 原表位的免疫球蛋白，称为多克隆抗体。
多克隆抗体制备的意义
免疫血清：将抗原注入机体所产生的抗体
是针对多种抗原决定簇的混合抗体，含有 这种特异性抗体的血清。
第一次免疫（基础免疫）
2-4周
第一次加强免疫
2-3周
第二次加强免疫
7天
效价测定
第一次免疫（基础免疫）
免疫乳剂的制备 ①研磨法:
取1.2ml佐剂加入到无菌的研钵中，缓慢加 入1ml抗原+0.2ml卡介苗混合液，每加一 滴研磨至小滴消失，边加边往同一个方向研 磨，抗原全部加入后继续研磨至乳白色粘稠 的油包水乳剂。
动物：健康家兔 抗原：生化大实验中制备的LDL 佐剂：弗氏佐剂 注射器、研钵 等
动物的选择
动物的选择常根据抗体的用途和量来决定，也与 抗原的性质有关
如要获得大剂量的抗体，则采用大动物； 如要获得直接标记诊断用的抗体，则直接采用本
动物； 如要获得间接的标记诊断用抗体，则必须用异源
动物制备抗体
佐剂
佐剂的条件作为一种良好的佐剂，必须具备下列条件： （1）增加抗原的表面积，并改变抗原的活性基团构 型，从而增强抗原的免疫原性； （2）佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留 时间，减低抗原的分解速度，使抗原缓慢释放至淋巴 系统中，持续刺激机体产生高滴度的抗体； （3）佐剂可以直接或间接激活免疫活性细胞并使之 增生，从而增强了体液免疫、细胞免疫和非特异性免 疫功能； （4）良好的佐剂应具有无毒性或副作用低的特点。
多克隆抗体和单克隆抗体的用途盘点
多克隆抗体和单克隆抗体的用途盘点单克隆抗体的定义:单克隆抗体是仅与目标蛋白某一特定表位结合的单一抗体。
单克隆抗体的制备：简洁来说就是将免疫原注射到宿主动物体内产生免疫反应，之后把 B 细胞从脾脏中移出，单种 B 细胞与骨髓瘤细胞融合为 B 细胞杂交瘤，成为一个永生化胞株。
这样一来，杂交瘤的 B 细胞就会始终产出只识别单一表位的单克隆抗体，通常这个胞株会有一个特定的克隆号（clone number），用来与其他胞株区分。
杂交瘤接下来可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产，杂交瘤分泌富含抗体的一种液体，被称作腹水，用注射器抽取纯化，就可获得大量的单克隆抗体。
多克隆抗体定义：多克隆抗体是指与目标蛋白上多种不同表位结合的多种不同抗体. 多克隆抗体制备：多克隆抗体的第一步和单克隆抗体一样，都是将免疫原注射到宿主体内产生免疫反应，激活了多种B细胞。
不同的是免疫过后，多克隆抗体就直接从免疫宿主的血清中分别出来，或接着进行纯化，没有与骨髓瘤细胞融合的过程。
一旦宿主动物死亡，需要免疫新的动物，这时血清中的抗体就会有所不同。
虽然多抗每批次有稍微差别，但是由于它识别的表位多，这个差别影响并不算太大，而单克隆抗体虽然价格偏高，可是特异性更强更稳定。
可以说单抗和多抗是各有各的优点。
多克隆抗体和单克隆抗体的用途：1、定义多克隆抗体和单克隆抗体有用性的两个关键特征涉及它们各自对抗原的特异性和灵敏度。
2、抗体的特异性是由其结合域和目标抗原之间的相对亲和力打算的，而其他分子是存在的。
对这种特异性的利用对免疫学讨论人员和临床医生来说是至关重要的，由于很多应用都是利用多克隆和/或单克隆抗体来特地检测目标分子。
结合抗原特异性，抗体的灵敏度是一个重要的参数，打算了它在试验室的有用性。
3、高灵敏度的抗体特别适用于诊断应用，如免疫沉淀、West Blot 和酶联免疫吸附试验（ELISA），由于它们能够识别低水平的目标抗原。
免疫沉淀是一种分析技术，通过使用特异性结合抗原的抗体将抗原从混合物中分别出来。
多克隆抗体
多克隆抗体科技名词定义中文名称：多克隆抗体英文名称：polyclonal antibody定义1：由多个B细胞克隆所产生的抗体，可与不同抗原表位结合且免疫球蛋白类别各异。
应用学科：免疫学（一级学科）；免疫系统（二级学科）；免疫分子（三级学科）定义2：对特定抗原所产生的一组免疫球蛋白混合物，每种免疫球蛋白能识别抗原分子上的一个表位。
应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；总论（二级学科）定义3：多种抗原表位刺激机体免疫系统后，机体产生的针对不同抗原表位的混合抗体。
应用学科：细胞生物学（一级学科）；细胞免疫（二级学科）抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
组织结构：抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体（Monclone antibody）。
由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生的抗体就是多克隆抗体；除了抗原决定簇的多样性以外，同样一类抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD 等五类抗体。
抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原决定簇。
一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇，因而使机体产生好几种不同的抗体，最终产生出抗体是浆细胞。
只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系，纯系的英文为Clone，音译就是克隆。
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。
单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就象导弹精确地命中目标一样。
另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。
多克隆抗体又简称多抗。
与之相对应的叫单克隆抗体，简称单抗。
多克隆抗体制备课件
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免疫方式
• 注射途径: 免疫注射的途径也很重要。一般 采用多点注射，一只动物注射总数约为8～ 10点，包括足掌及肘窝淋巴结周围，背部 两侧、颌下、耳后等处皮内或皮下，皮内 易引起细胞免疫反应，对提高抗体效价有 利
多克隆抗体制备
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多克隆抗体的制备方法
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动物选择
一、选择制备多克隆抗体(抗血清)的动物种类 应考虑的要点: •需要制备的抗血清的质量; •供给蛋白质抗原的动物与免疫动物之间的种 系关系; •免疫动物产生的抗体特性（针对不同性质的 免疫原选用相应的动物）。 二、动物的年龄、性别和数量对抗体制备的 影响
血液采集
采血量
少量
采血部位
尾静脉，耳静脉，眼 底静脉
中量
耳中央动脉，颈动/静 脉，心脏
大量
股动脉，颈动脉，心 脏，摘眼球
血清的分离：采取4℃静置过夜，3000-4000 转离心10-15min钟。
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多克隆抗体纯化
•蛋白A亲和层析 •蛋白A可与多种哺乳动物的IgG重链的Fc片段 相结合也可与某些IgM和IgA相结合 •抗原亲和纯化 •多抗的亲和层析是基于抗原与抗体结合的一 种层析方式。基本思路是将抗原固定在一种 基质上, 然后与抗血清孵育以捕获相应的抗体, 然后从基质上洗掉非特异性结合的抗体, 最后 再将抗体洗脱下来
.鸡Biblioteka 鸡的种系距哺乳动物较远,用以制备抗哺乳动物蛋白 质的抗体具有独特的优点。
鸡的IgG常称IgY,其特点是不会激活哺乳动物的补体 成分C1,也不会与细菌蛋白A或蛋白质G、哺乳动物的 Fc受体或类风湿因子等发生反应。在极端条件下,鸡 IgY的稳定性不如家兔IgG,不过,鸡的IgY在鸡蛋内可保 持稳定达数月之久,纯品IgY在中性缓冲液和冷藏条件 下则可保存数年之久。用鸡IgY已经制备出Fc和单价 的Fab或Fab′等片段。 鸡可将大量IgY输送入鸡蛋黄中, 从鸡蛋中收获抗体 可避免采用损伤性的收集手段。
多克隆抗体
传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经不同途径免疫动物，由于抗原性物质具有多个抗原决定簇，可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌抗各种决定簇的抗体，故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物，所以称这种免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体（polyclonal antibody ，PcAb）。
多克隆抗体的亲和力较一般单克隆抗体高。
多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，为制备高效价和高特异性的多克隆抗体，必须要有理想的免疫原、适宜的动物及切实可行的免疫方法。
本章主要介绍多克隆抗体的制备及相关技术。
第一节动物选择实验动物是生物医学中的重要组成部分。
目前常用于生物医学科学研究的实验动物种类很多，主要包括有两栖纲的青蛙、蟾蜍，鸟纲的鸡、鸭、鸽等，哺乳纲啮齿目的小鼠、大鼠、豚鼠等，兔形目的家兔，食肉目的猫、狗，有蹄目的羊、猪和灵长目的恒河猴、猩猩、绒猴等。
其中最常用和用量最大的是哺乳纲啮齿目动物，其次是兔形目和食肉目等。
一、实验动物的生物学特性实验动物选择得当与否是实验研究成败关键之一。
掌握实验动物的生物学特性，则能以最佳的设计选择实验动物，进行科学实验，从而获得预期的实验结果。
1. 小鼠小鼠是啮齿目中体型较小的动物。
新生小鼠 1.5g 左右，21 天断乳时12～15g，至 2 月龄体重达20g 以上，可供实验使用。
成年雌小鼠体重18~35g，成年雄鼠体重20~40g。
小鼠性情温顺，易于捕捉，对外来刺激敏感，喜群居于阴暗环境。
2 ．兔草食性动物，性情温顺，胆小易惊，喜居安静、清洁、干燥、凉爽、空气新鲜的环境，耐冷不耐热，耐于不耐湿。
兔耳大，表面分布有清晰的血管。
有特殊的血清型和唾液型，血清型分为α ' 、β ' 、α'β'和O型四种。
α ' 、α' β'型易产生人A型抗体，β ' 、O型易产生人B型抗体。
唾液型分两种：排出型与非排出型。
排出型易获得人血细胞 A 型物质，非排出型不易获得，这种A型物质与A型抗体产生能力有关。
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二、概述Байду номын сангаас二、概述
• 抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构 ，叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不 同的抗原决定簇，因而使机体产生好几种不同的 抗体，最终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗 原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系，纯系 的英文为Clone，音译就是克隆。由一种克隆产生 的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目 标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就象导 弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一 个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来 产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为 多克隆抗体。 • 多克隆抗体又简称多抗。与之相对应的叫单克隆 抗体，简称单抗。
（一）抗原制备 • Ig 是免疫球蛋白，对异种动物而言，是良 好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗 Ig 血清， • 经适当提取后，产生抗 Ig 抗体，又叫第二 抗体或抗抗体。在多数的间接标记反应中， 均需制备 • 抗 Ig 抗体。
（二）材料与试剂
1．提取的动物 Ig 2．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 3．青霉素和链霉素 4．实验动物 兔 5．其它材料及试剂
（2）皮下多点注射法：
A、家兔两侧掌（跖内各注射含有完全佐剂抗 原 0.10ml（IgG 含量5mg/ml） ； B、7～10 天后，脊柱两侧多点（颈、胸、腰 椎各两点、共 6 点）皮下注射含不完全佐 剂5的抗原，每点 0.50ml； C、7～10 天后，脊柱两侧重复注射一次； D、7～10 天后试血。不合格者重复步骤D。
（二）抗体的特异性鉴定 抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质 的识别能力。抗体的特异性高，它的识别能力就 强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉 反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原 和近似抗原分别做竞争抑制曲线，计算各自的结 合率，求出各自在 IC50时的浓度，并按下列公式 计算交叉反应率。 如果所用抗原浓度IC50浓度为 pg/管，而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无 穷大时，表示 这一抗血清与其他抗原物质的交叉 反应率近似为 0，即该血清的特异性较好。
（3）多途径联合注射法： A、两侧掌（跖）内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml（IgG 量为 5mg/ml） ； B、14 天后，多点皮下注射含有不完全佐剂抗原； C、7 天后，耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml； D、测定血清抗体效价，不合格者重复步骤C，并适 当递增 IgG 量。
2、效价 采用琼脂扩散法。 （1） 将血清倍比稀释，加入外周孔。 （2） 中间孔加动物 Ig。 （3） 37℃湿盒琼扩 24 小时，观察结果。
3、结果判定 （1）抗 Ig 的效价测定 琼脂扩散效价达 1﹕16 或
1﹕32 者为合格。 （2）纯度鉴定 采用琼扩法。中间孔加抗 Ig 血清， 外周孔加 Ig 和标准品 Ig。在抗 Ig 与 I抗原上那 部分可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原 决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定 簇，因而使机体产生好几种不同的抗体，最终产生 出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的 浆细胞群就是一个纯系，纯系的英文为Clone，音译 就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克 隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗 原决定簇结合，就象导弹精确地命中目标一样。另 一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可 以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗 体混杂物，称为多克隆抗体。
• 抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并 分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免 疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就 是抗体。 • 抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇 刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称 之为单克隆抗体（Monclone antibody）。由多种抗原决 定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这 些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生 的抗体就是多克隆抗体；除了抗原决定簇的多样性以外， 同样一类抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD等五类抗体。
（三）抗体的亲和力 是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的 高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点 与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有 助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键 、疏水键、侧链相反电荷基因的库仑力、范德华 力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示，K的 单位是L/mol，通常K的范围在 108 ～1010 /mol ，也有多达 1014 /mol。抗体亲和力的测定对抗 体的筛选，确定抗体的用途，验证抗体的均一性 等均有重要意义。
• 定义2：对特定抗原所产生的一组免疫球蛋 白混合物，每种免疫球蛋白能识别抗原分 子上的一个表位。 • 所属学科：生物化学与分子生物学（一级 学科）；总论（二级学科）
• 定义3：多种抗原表位刺激机体免疫系统后 ，机体产生的针对不同抗原表位的混合抗 体。 • 所属学科：细胞生物学（一级学科）；细 胞免疫（二级学科）
四、鉴定
（一）抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗，制备抗 体的目的都是要求较高效价。不同的抗原 制备的抗体，要求的效价不一。鉴定效价 的方法很多，包括有试管凝集反应、琼脂 扩散试验、酶联免疫吸附试验等。常用的 抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效 价的方法，以资比较。如制备抗抗体的效 价，一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
（三）操作方法 1、免疫方法 • 可以采用以下各种方法之一进行免疫。 （1）淋巴结注射法： A、在兔的两后足跖部皮下（或皮内）注射活卡介苗 50mg（每 侧约0.30ml） 。7～10 天后，兔跖及腘肌淋巴结肿大； B、于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml)； C、必要时，14 天后，重复步骤B一次； D、再过 7 天后，于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml（含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉 素 1 000μg/ml） ； E、5～7天后，耳静脉采血。测定血清效价。
三、多克隆抗体制备 三、多克隆抗体制备
多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤： 1、制备抗原。 2、选择实验动物。 3、动物免疫。 4、试取血进行测试，看看是否成功免疫。 5、如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部 血清。 • 6、纯化出抗体。 • 7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。 • • • • • •
多克隆抗体
简述多克隆抗体的定义、制备及鉴 定等相关知识
一、定义
• 中文名称：多克隆抗体 • 英文名称：polyclonal antibody • 定义1：由多个B细胞克隆所产生的抗体，可与不 同表位结合且免疫球蛋白类别各异。 • 所属学科：免疫学（一级学科）；免疫系统（二 级学科）；免疫分子（三级学科）