北京地区常见蔬菜中叶黄素_玉米黄素和_胡萝卜素的测定及其含量
植物叶绿素类胡萝卜素测定方法
叶绿素、类胡萝卜素含量的测定一、原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量;根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C 和液层厚度L成正比,即A＝αCL式中：α比例常数;当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm 时,α为该物质的吸光系数;各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得;如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和;这就是吸光度的加和性;今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度;在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰;二、材料、仪器设备及试剂一材料：新鲜或烘干的植物叶片;二仪器设备：1分光光度计；2电子顶载天平感量；3研钵；4棕色容量瓶； 5小漏斗；6定量滤纸；7吸水纸； 8擦境纸；9滴管;三试剂：195%乙醇或80%丙酮v丙酮：v乙醇=2：1的95%水溶液；2石英砂；3碳酸钙粉; 暗中2h,,25ml三、实验步骤1取新鲜植物叶片或其它绿色组织或干材料,擦净组织表面污物,剪碎去掉中脉,混匀;2将取好的样品放入25ml容量瓶中,加混合浸提液无水乙醇:丙酮=5:520ml,放在黑暗条件下,浸泡至叶片发白,用浸提试剂定容至25ml,摇匀备用;3把叶绿体色素提取液倒入1cm光径的比色皿内,以浸提试剂为空白测定吸光度;选择波长663 646 和470nm;四、实验结果计算叶绿素a 的浓度 = OD 633 – OD 646叶绿素b 的浓度 = OD 646– OD 663类胡萝卜素浓度=÷229 单位 mg/L Cmg/L 提取液总量ml叶绿体色素含量mg/g= ____________________________ 烟叶重量g1000注意事项：操作避光研磨时间短些。
高效液相色谱法测定15种蔬菜中的胡萝卜素
2、重复性和精密度
此外，该方法具有较好的重复性和精密度，能够满足实际测定的要求。通过 本研究的开展，为准确评估蔬菜的营养价值提供了科学依据。
谢谢观看
2、样品中胡萝卜素的测定结果
表1 15种蔬菜中胡萝卜素的含量（mg/100g）
3、样品中水分含量的测定结果
3、样品中水分含量的测定结果
采用烘干法测定了15种蔬菜中的水分含量，结果如表2所示。由表可知，不同 蔬菜中的水分含量也存在显著差异。其中，生菜和芹菜中的水分含量较高，分别 为94.7%和92.5%；红薯和土豆中的水分含量较低，分别为79.3%和78.6%。其他 蔬菜中的水分含量介于上述两者之间。
采用高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素，需对方法进行重复性和精密度 评估。实验结果表明，该方法的重复性和精密度均较好，能够满足实际测定的要 求。
2、重复性和精密度
结论 本次演示介绍了高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素的方法及注意事项。 该方法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，能够准确测定蔬菜中类 胡萝卜素的含量。通过对不同种类蔬菜中类胡萝卜素含量的测定，发现叶菜类蔬 菜中类胡萝卜素含量较高，而根茎类蔬菜中类胡萝卜素含量较低。
2、实验方法
（2）色谱条件：采用高效液相色谱仪进行分离分析，色谱柱为C18柱（5μm， 4.6mm×250mm），流动相为甲醇-丙酮（1:1），流速为1ml/min，检测波长为 450nm，柱温为30℃。
2、实验方法
（3）标准曲线绘制：精确称取适量胡萝卜素标准品，用甲醇-丙酮（1:1）混 合溶剂配制成不同浓度的标准溶液。分别进样分析，以峰面积（A）对胡萝卜素 浓度（C）绘制标准曲线。
3、高效液相色谱法测定类胡萝 卜素
3、高效液相色谱法测定类胡萝卜素
北京社区居民夏秋季节膳食叶黄素、玉米黄素摄入量分析
量和加工方 式）。根据食物频率表 的调查结果 ，结合 ＨＰ Ｃ Ｉ Ｌ ￣ 定所得数据 ，计算被调 查者平均每 日膳食 叶 Ｊ
黄素、玉米黄素的摄入量 。 １４ 质量控制 ．
对 ＨＰ Ｃ系 统进 行 的精 密度 实 验 、 加标 回收实 Ｌ 验 、稳定性实验及 平行样之间 的差异 分析 结果表 明， 该ＨＰ Ｃ Ｉ Ｌ ￣ 定方法 的精 密度 良好 ，提 取操作 的误差和 Ｊ Ｈ Ｌ 的系统误差在容许范围之 内。 ＰＣ
摘 要 ： 目的 ：测 算 北 京社 区居 民夏秋 季膳 食 叶 黄 素 、 玉 米黄 素摄 入量 。方 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ：采 用 高效 液 相 色谱 法
（Ｐ Ｃ Ｈ Ｌ ）对 １种 常 见蔬 菜、水果和蛋 类 中叶黄素、玉 米黄素和 Ｄ ５ 一胡 萝 卜 素含量进行检 测。运 用定量食物 频率 表
结合Ｈ Ｌ 测定结果 ，计算居 民膳 食叶黄素 、玉米黄素摄 入量 。结果 ：被调 查的５ １ ４ 岁以上社 区居 民中，叶黄 Ｐｃ ４名 ５ 素、玉米黄素平均摄入量 分别为 １２ １４ ８２ ６ ｇ ｄ ４ ． ±２ ０ ０ ／ 。二者 的摄 入量在 月人均 收入 １０ ～ ０ ． ±１ ５ ． ／ 和２ ５ ０ ６ ． ｇ ｄ ０ ２ ｕ ０ ０
１９ 元者 中最低 。５ ． ％和 ５ ．％的膳食叶黄素 来源于 菠菜和韭 菜，４ ．％和５ ． ％的膳食 玉米黄素来 自韭菜和 ９ ９ ９１ Ｏ２ ０６ １９ 鸡蛋 。结论 ：利 用定量食物频率 表结合 对常 见食物的Ｈ Ｌ 测定结 果 ，估计 了北京社 区居 民膳食叶黄素 、玉 米黄素 Ｐｃ
的膳食摄 入量 。收入水平是影响居 民二者摄 入量的 因素之一 。菠菜、韭 菜为被调 查者膳 食叶黄素的主要来 源，韭 菜、鸡蛋 为其膳食玉米黄素最重要 的来 源。 关键 词 ：社 区居 民；膳食摄 入量 ；叶黄素 ；玉 米黄素 ；北京
实验二蔬菜中胡罗卜素的测定(纸层析法)营养与食品卫生
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（三）样品的采集和处理
（1）粮食：样品用水洗三次，置60℃烤箱 中烤干，磨粉，储于塑料瓶内，放一小包 樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。
（2）蔬菜与其他植物性食物：取可食部用 水冲洗三次后，用纱布吸去水滴，切碎， 用匀浆器制成匀浆，贮于塑料瓶内，冰箱 内保存备用。
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点样：准确吸取待检液40μl在滤纸下端基线上A、B两 点之间或C、D两点之间迅速来回进行带状点样一次点 完（见图1）。每个样品点2带作为平行样。
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展开：
待纸上所点样液自然挥发干后，将滤纸卷成圆筒状，用定 书机固定两边，置于预先用石油醚饱和的层析缸中（见图 2），进行上行展开。（注意纸纹方向与展开方向一致； 缸内石油醚深度约1cm即可，样斑不能直接接触石油醚。
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四、操作步骤
（5）将石油醚提取液通过盛有10g无水硫酸钠固 体的小漏斗，滤入瓷蒸发皿。用少量石油醚分数 次洗净分液漏斗和无水硫酸钠层内的色素，洗涤 液合并瓷蒸发皿中。 （6）将瓷蒸发皿置于低温电热板上蒸发至约1ml 时，取下，待其自然挥干。冷却后置于冰裕上， 立即用石油醚2ml沿蒸发皿壁将色素洗下，混匀立 即点样。 （7）层析
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五、计算
式中：X2——样品中胡萝卜素的含量，以β －胡萝卜素计，mg/100g； c——在标准曲线上所查得的胡萝卜素 的含量，μg； V1——点样体积，ml； V2——加入瓷蒸发皿内的样品石油醚 提取液浓缩后的定容体积，ml； m——样品质量，g。
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胡萝卜素含量排行
胡萝卜素含量排行：
名
食物
1
木鳖果
3
辣椒粉
5
枸杞子
7
豆瓣菜
9
蒲公英叶
11
野苋菜
13
地笋
15
败酱草
17
甘薯叶
19
绿茶
21
茴芹
23
苣买菜
25
甲级龙井
27
酸浆草
29
北五味子叶（鲜）
31
羽衣甘蓝
33
鸭拓草
35
牛至
37
碱蓬草
39
独行菜
41
红茶
43
夏枯草
分析备注：
1，胡萝卜素可在体内转化成维生素A，对应关系是1gβ-胡萝卜素=0.167g维生素A，即6：1. 2，补充胡萝卜素相比补充维生素A安全，补充过量皮肤颜色会变黄，但是停止补充后就会回归正常。 3，螺旋藻，枸杞子，西兰花，甘薯叶，绿茶，胡萝卜，小白菜，南瓜，西红柿都是补充胡萝卜素的良好选择。 4，很多中草药富含胡萝卜素。
排名 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 74 76 78 80 82
食物 螺旋藻 掐不齐 海苔 紫苏叶（鲜） 西兰花 藿香叶（鲜） 车前（鲜） 刺儿菜 沙参叶（鲜） 车前子（鲜） 地肤 歪头菜 菊花茶 早桔 茵陈蒿 决明（鲜） 胡萝卜（红） 胡萝卜（黄） 苦荬叶 牛蒡叶 沙棘 藿香叶（鲜） 百里香 芥蓝 刺梨 紫菜 黄花菜 木耳菜 小白菜 茼蒿 香菜 南瓜 红花 西红柿 荷兰豆 金桔 板栗 黄豆 砂仁 莴笋 绿豆
营养与食品卫生学课件实验六蔬菜中胡萝卜素的测定
三．仪器
1．组织捣碎机 2．层析缸 3．新华中速滤纸（16cm×20cm） 4．分液漏斗 125ml 5．具塞试管 50ml 、5ml 6．瓷蒸发皿 7．分光光度计 8．天平 9．水浴锅
四．试剂
1．石油醚（分析纯） 2．丙酮（分析纯） 3．3:7丙酮——石油醚 4．无水硫酸钠 5．5%硫酸钠溶液 6．β-胡萝卜素标准液（50μg/ml）
V1
W 1000
（mg/100g）
A = 样品光密度相当于标准的微克数
V1 = 点样毫升数 V2 = 浓缩后固定的体积 W = 样品重（克）
一. 实验目的：
熟悉蔬菜中胡萝卜素的测定原理 测定样品中的胡萝卜素的含量
二．原理：
蔬菜的植物色素包括叶绿素、叶黄素及胡萝卜素等 蔬菜中各种色素均可溶于石油醚，将一定量的植物
色素石油醚提取液点在层析纸的一端，用石油醚作 展开剂，进行上行展开。 由于胡萝卜素极性最小，故被石油醚洗走的速度最 快，从而可将胡萝卜素与其它色素分开。
7． 层析
（1） 点样：距滤纸底边4cm处用铅笔划一基线，在基 线上取两点，每点距纸两侧不少于4cm。准确吸取 检液0.3 ml，以画好的点为中心，迅速进行带状点样， 一次点完。
（2）展开：将点好样的滤纸卷成圆筒状，固定两边 （不使两边重叠），放入预先用石油醚饱和的层析 缸内。纸筒必须放正，滤纸筒基线以下1/3浸入液内， 进行上行层析。
8． 洗脱及比色
待胡萝卜素与其它色素完全分离后，停止层析，划 出溶剂前沿（便于计算Rf值）将胡萝卜素层析带剪下 （其色带的Rf值与标准色带值相同），放入盛有5ml石 油醚的试管中，用力振摇，使之洗入醚内，以石油醚为 空白，立即在450nm波长处比色。
蔬菜中天然色素的提取分离和测定
蔬菜中天然色素的提取、分离和测定一、目的与要求1．进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理。
2．掌握薄层层析法分离微量组分的操作技术。
3．了解蔬菜中主要色素的基本性质，通过色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法及原理。
二、基本原理（一）菠菜中的色素简介菠菜叶中富含多种色素成分，如叶绿素（绿色）、胡萝卜素（橙黄色）和叶黄素（黄色）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C 55H 72O 5N 4Mg) 和叶绿素b(C 55H 7O 6N 4Mg)，结构见图1。
二者差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
NN N N H 3C CHCH 2R CH 2CH 3CH 3H 3C O CO 2CH 3CH 2CH 2O O CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg图1 叶绿素a 和叶绿素b 的结构（叶绿素a ：R=CH 3， 叶绿素b ：R=CHO ）H 3C CH 3R CH 3H 3C R H 3C CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3图2 β-胡萝卜素和叶黄素的结构（β-胡萝卜素：R =H ，叶黄素：R = OH ）胡萝卜素（C 40H 56，见图2）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即 α-, β - 和γ - 胡萝卜素，其中β - 异构体含量最多，也最重要。
在生物体内，β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。
目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素 A 使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C 40H 56O 2，见图2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与β - 胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
根据这些色素在有机溶剂中的溶解性,可将它们提取出来。
1．菠菜中各色素的理化性质绿色植物中的叶绿体色素在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。
不同品种玉米中叶黄素、玉米黄素及β-胡萝卜素含量的分析
0引言玉米是世界上种植面积最大和总产量最高的粮食作物，同时也是我国第一大作物，对保障我国粮食安全具有重要战略意义[1]。
玉米中含有较多的营养成分，其中为人所熟知的是胡萝卜素、叶黄素和玉米黄素[2]。
胡萝卜素有α、β、γ等同分异构体，其中以β-胡萝卜素生理活性最强，是重要的维生素A源[3]。
β-胡萝卜素分子式为C40H56，其化学结构为两边反向对称，分子结构中包含有两个β-紫罗兰酮和4个异戊二烯，中心断裂可产生两个维生素A分子[4]。
因此β-胡萝卜素是动物体内维生素A的重要来源，且具有预防眼疾、保护视力、预防和改善肿瘤、抗衰老的功能[5]。
而对于叶黄素和玉米黄素，经研究发现它们是一组同分异构体，化学结构为C40H56O2，叶黄素是α-胡萝卜素的衍生物，玉米黄素则是β-胡萝卜素的衍生物[6]。
叶黄素和玉米黄素对人体的健康有多种营养功能，如防止视网膜损伤[7]、抗氧化[8]、调节免疫功能[9]以及抑制肿瘤细胞增殖，延缓动脉粥样硬化等[10]。
因此，二者已被认为是重要的营养物质。
通过上述研究成果我们可以大概地了解到叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素它们有自己的独特的性质，而叶黄素、玉米黄素作为一种同分异构体，对其特性的研究更为人们所重视和感兴趣。
同分异构体虽然是分子式相同，但作用还是有一定区别的。
本次研究收集同一产地不同品种的玉米，测定并筛选出叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素含量相对较高的优良品种，为后续对叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素研究提供一些帮助，从不同品种玉米中叶黄素徐从华，马挺军*（北京农学院食品科学与工程学院，北京102206）摘要：对21种玉米中叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的含量进行定量分析，从而筛选出含量较高的品种，为农业生产及功能育种提供有效的依据。
采用HPLC检测叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的含量。
结果显示，叶黄素与玉米黄素高含量的三个品种是强49、大2和农16，其中含量最高的品种为强49，β-胡萝卜素含量最高的品种是强49，其β-胡萝卜素含量为752.63mg/100g，叶黄素含量为854.40mg/100g，玉米黄素含量为227.80mg/100g。
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WANG Zi-xin，LIN Xiao-ming
（Department of Nutrition and Food Hygiene, School of Public Health,Peking University Health and Science Center, Beijing 100191, China）
将 混 合 标 准 溶 液 稀 释 到 1/1000、 1/500、 1/100、1/50、1/10 及 1/3 倍，20 μl 进样，以 各标准物质的峰面积(mAu×S)为纵坐标，组分的 浓度(mg/L)为横坐标，绘制标准曲线，（表 2）。
Table 1 Protocol of gradient elution
290
Acta Nutrimenta Sinica,Jun.,2010, Vol.32 No.3
北京地区常见蔬菜中叶黄素、玉米黄素和 β-胡萝卜素的测定及其含量
王子昕, 林晓明
(北京大学公共卫生学院营养与食品卫生学系, 北京 100191)
【摘 要】目的 测定分析常见蔬菜中叶黄素、玉米黄素和 β -胡萝卜素的含量。方法 采用高效液相色谱法 Develosil C30 柱；流动相 A: 乙腈：甲醇=75：25，B: 甲基叔丁基醚，梯度洗脱；紫外检测器，检测波长 480nm 检测北京市常 见市售蔬菜中叶黄素、玉米黄素和 β -胡萝卜素的含量。结果 叶黄素、玉米黄素和 β -胡萝卜素保留时间分别为 10.355、 10.732 和 20.789min，实现基线分离。深绿色叶菜，如苋菜、芹菜叶、香菜、菠菜、小白菜中叶黄素含量最为丰富。玉 米黄素仅在黄花菜（干）中检出。熟制后，各类蔬菜的平均叶黄素和 β -胡萝卜素含量呈上升趋势。结论 绿色蔬菜， 尤其是深绿色叶菜，是叶黄素、β -胡萝卜素的主要膳食来源，摄入熟制后的蔬菜有利于增加叶黄素、玉米黄素的摄入 量和生物利用率。[营养学报，2010，32（3）：290－294]
营养学报 2010 年第 32 卷第 3 期
291
和某些水果是二者最重要的来源。中国食物成分 表(2004)[6]中仅使用纸层析法测定总胡萝卜素， 未包含叶黄素、玉米黄素及 β-胡萝卜素及烹调 对其含量的影响。本研究旨在获得常见蔬菜中叶 黄素、玉米黄素及 β-胡萝卜素的含量，为相关 研究、膳食调查与相关疾病预防提供依据。
【Abstract】Objective To determine the contents of lutein, zeaxanthin and β-carotene in 31 vegetables. Method High performance liquid chromatography method with Develosil C30 column and ultraviolet detector was used to detect lutein, zeaxanthin and β-carotene at wavelength of 480nm. A gradient elution method with elution A (acetonitrile: methol=75:25) and B (methyl-tert-butyl-ether) was used to separate the carotenoids in both raw and cooked vegetables. Results The retention time of lutein, zeaxanthin and β-carotene was 10.355, 10.732 and 20.789 min respectively. The contents of lutein, zeaxanthin and β-carotene were linearly related with the peak area. Analysis showed that dark leafy vegetable such as amaranth, Chinese celery leaf, parsley, spinach and pakchoi petiole contained the highest amount of lutein. Zeaxanthin was detected only in dehydrated daylily. There was little or no loss of lutein, zeaxanthin and β-carotene but an average increase in lutein and β-carotene in vegetables after cooking. Conclusion Vegetables, especially dark leafy vegetables are major sources of dietary lutein, and β-carotene. Consuming cooked vegetables tends to increase the intakes of lutein, zeaxanthin and their bioavailability. [ACTA NUTRIMENTA SINICA, 2010,32(3)：290－294]
1.0 ml 加入 1 ml 离心管中，10 000 r/min 离心
292
Acta Nutrimenta Sinica,Jun.,2010, Vol.32 No.3
10 min，吸取上清液加入 2 ml HPLC 进样瓶中，
20 μl 进样 HPLC 测定。 1.7.3 精密度实验：分别用上述混合标准液进行
关键词： 叶黄素；玉米黄素；β-胡萝卜素；蔬菜；高效液相色谱法；熟制
中图分类号：R151.41
文献标识码：A
文章编号：0512-7955（2010）-03-0290-05
THE DETERMINATION AND CONTENTS OF LUTEIN,ZEAXANTHIN AND β-CAROTENE IN VEGETABLES IN BEIJING REGION
Key words：lutein; zeaxanthin; β-carotene; vegetables; HPLC; cooking
叶黄素与玉米黄素同属于含氧的类胡萝卜 素 。 它 们 有 相 同 的 分 子 式 (C40H56O2) 与 分 子 量 (568.87)，二者的区别是 β-紫罗酮环(β-ionone ring)上一个双键的位置不同[1]，二者均为人体视 网膜中黄斑色素的主要成分。叶黄素与玉米黄素 的最大吸收峰均位于可见光的蓝光波长范围，故
Equation
R2
Linear range （mg/L）
Lutein Zeaxanthin β-carotene
Y=61.211x-5.6413 Y=130.47x-28.266 Y=74.695x+0.9157
0.9998 0.0391－13.6945 0.9994 0.0625－21.8884 0.9996 0.0319－11.1720
1.6 标准曲线与最小检测浓度 精确称量叶黄素标准品 4.08 mg, β-胡萝卜
素标准品 3.36mg, 氯仿溶解后, 使用流动相 A 分 别定容于 10 ml 棕色容量瓶中。精确称取玉米黄
素标准品 16.32 mg，相同方法定容于 25 ml 棕色 容量瓶中。准确吸取叶黄素、玉米黄素及 β-胡 萝卜素标准溶液各 1.0 ml 于 10 ml 棕色容量瓶中， 混匀后，倍比稀释 10 倍, 配置为混合标准溶液， 其中叶黄素、玉米黄素及 β-胡萝卜素浓度分别 为 39.12、62.54 和 31.92 mg/L。
3 种标准品保留时间处基线噪音的 3 倍(信
以
噪比 S/N=3)所对应的浓度为最小检测浓度，叶黄
素、玉米黄素和 β-胡萝卜素的最小检测浓度分
别为 0.0326、0.0208 和 0.0223 mg/L。
1.7 方法
1.7.1 样品前处理：将蔬菜样品洗净，去除不可
食部后，平均分成 2 份。其中 1 份直接匀浆化后
日内及日间精密度 RSD 实验。叶黄素、玉米黄素 及 β-胡萝卜素保留时间、峰面积的日内 RSD 及 日间 RSD（均＜5%，n=3），在相关要求范围内。
1.7.4 加标回收率：茴香、油麦菜。每种样品取 6 份，每份 1.00g，其中 3 份作为样品本底，另 3
待测。另一份模拟烹调方式加工至熟将盛有蒸馏
水的容器置于电磁炉上，待蒸馏水沸腾后，将样
品放入，5 min 后拭干表面水分，并记录加工前
后样品的重量变化，匀浆化后待测。
1.7.2 叶黄素、玉米黄素及 β-胡萝卜素提取：
根据相关文献[8]方法进行改进。称蔬菜样品匀浆
约 1.00g，置于研钵中并加入少量（约 5 ml）丙
Time (min)
Flow rate (ml/min)
En B (%)
0
1
100
0
15
1
58
42
20
1
0
100
30
1
100
0
35
1
100
0
Table 2 Standard curve of lutein, zeaxanthin and
β-carotene
Standards
丙酮（分析纯，北京化学试剂公司）；乙腈、 甲醇：（HPLC 级，美国 Honeywell B&J）；甲基叔 丁基醚（HPLC 级，美国 J. T. Baker）；氯仿（色 谱纯，国药集团化学试剂公司）。 1.4 仪器
1100 型组合式全自动高效液相色谱仪(包括 G1379A 脱气机，G1310A HPLC 泵，G1313A 自动进 样器，紫外检测器，G1310A 色谱工作站)，美国 Agilent；色谱柱：Develosil C30-UG5 4.6 mm× 250 mm (NW)；保护柱：Develosil C30-UG5 4.0mm× 10mm (NW) ， 野 村 化 学 （ 日 本 ）。 离 心 机 Anke TGL-16B 型台式离心机，上海安亭科学仪器厂。 1.5 色谱条件