低温产甲烷菌分离鉴定及发酵产气初步研究(硕士优秀毕业论文答辩PPT模板)
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产甲烷菌的分离、培养及鉴定方法
产甲烷菌的分离、培养及鉴定方法产甲烷菌是一类以产生大量甲烷气体作为能量代谢的终产物的特殊原核微生物，广泛存在于各种极端厌氧环境中。
作为自然界碳素循环中厌氧生物处理的最后一个成员，该菌与其它菌群协同作用，将大量的有机物转化成可再生能源，对自然界中的物质循环及当今社会能源危机中的能源替代问题具有极大的推动作用。
通过本实验，我们可掌握产甲烷菌等厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法，能够实时观察产甲烷菌的形态特征并了解产甲烷菌的生长特性。
摘要产甲烷菌是一类以产生大量甲烷气体作为能量代谢的终产物的特殊原核微生物，广泛存在于各种极端厌氧环境中。
作为自然界碳素循环中厌氧生物处理的最后一个成员，该菌与其它菌群协同作用，将大量的有机物转化成可再生能源，对自然界中的物质循环及当今社会能源危机中的能源替代问题具有极大的推动作用。
通过本实验，我们可掌握产甲烷菌等厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法，能够实时观察产甲烷菌的形态特征并了解产甲烷菌的生长特性。
一、实验原理(一) 产甲烷菌厌氧微生物在自然界分布广泛，种类繁多，其生理作用日益受到人们的重视。
产甲烷菌是专性厌氧菌，对氧气非常敏感，因此，产甲烷菌的分离、培养及活菌计数的关键是提供无氧和低氧化还原电势的培养环境。
(二) 产甲烷菌的发现历史自1901—1903年巴斯德研究所的马载（Maze）第一次观察到一种产甲烷菌的微球菌（马氏甲烷球菌）以来，迄今共发现了五十多种产甲烷菌。
1974年Bryant 提出产甲烷菌这一名词，为避免这一类细菌与氧化甲烷的好氧菌相混淆。
1979年由Balch W.E.等人根据菌株间16SrRNA降解后各寡核苷酸中碱基排列顺序间相似性的大小，提出了一个新的系统分类方法，共分为3个目、4个科、7个属、13个种。
(三) 定义、性质及分布产甲烷菌（Mathanogens）是一类必须生活在厌氧生境下并伴有甲烷产生的古生菌，其形态和生理、生化特性呈现明显的多样性。
低温产甲烷复合菌系的选育及干、湿发酵的比较
低温产甲烷复合菌系的选育及干、湿发酵的比较摘要：将3个低温厌氧环境样品Y、S、Z进行干、湿发酵低温驯化，选育适宜低温干、湿发酵的稳定、高效产甲烷复合菌系。
样品Y、S、Z在（19±0.5）℃条件下进行干发酵低温驯化，分别在第6代、第7代、第6代产气基本稳定，第8代65 d总产气量分别为42.60、40.50、41.70 L，总固体（TS）产气率分别为266.25、253.13、260.63 L/kg。
复合菌系Y最适接种量为25%，甲烷含量最高为72.9%，COD去除率最高为77.17%；样品Y、S、Z在相同条件下进行湿法酸化发酵低温驯化，分别在第7代、第7代、第8代产气基本稳定，第9代55 d总产气量分别为35.48、34.52、33.78 L，TS产气率分别为221.75、215.75、211.13 L/kg；3组复合菌系稳定世代在干发酵和湿法酸化发酵中均使得沼气发酵启动期比第1代提前5 d以上。
经差异显著性分析，相同发酵方法下不同复合菌系间总产气量差异达到显著水平。
关键词：低温驯化；沼气发酵类型；总产气量；甲烷纯度；COD温度是限制低温沼气发展的重要因素，低于20 ℃时沼气发酵效率会显著下降，我国北方年平均气温为1.3 ℃，若在低温季节进行沼气发酵需人为加热保温，增加了运行成本，而使得沼气发酵难以在北方推广。
此外，湿发酵沼液量大，处置不当易造成二次污染，若干发酵替代湿发酵不仅利用秸秆解决生物质能转化问题，而且减少其焚烧所带来的空气污染[1]。
试验采用不同生境来源的样品，利用微生物对环境适应性及温度对其的选择作用在干、湿发酵中进行低温驯化，比较干、湿发酵优越性并且选育稳定、高效、适宜低温干、湿发酵的产甲烷复合菌系，为低温沼气工程提供试验参数及菌种资源。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 样品来源样品选择厌氧污泥Y、水稻田污泥S、沼气发酵液Z。
1.1.2 底物及试剂牛粪酸化液：将9 kg干牛粪与9L水在塑料桶里混合均匀，自然酸化待pH降至6时，用KHCO3溶液将其pH调至7，装料时将TS调至8%。
一株低温产甲烷菌的分离和鉴定
采用天根细菌基因组提取试剂盒。 1. 6. 2 PCR 反应
使用伯 乐 C1000 型 基 因 扩 增 仪，以 甲 烷 菌 16S 专用引物进行扩增。
ARC-8F： 5’TCCGGTTGATCCTGCC 3’ 1492R： 5’GGCTACCTTGTTACGACTT 3’ PCR 反应 体 系 （ 50 μl） ： 10 × 缓 冲 液 5 μl， dNTP 4 μl，引物各 1μl，DNA 1 μl，Taq 酶 0． 5 μl， 补双蒸水至 50 μl。 PCR 反应条件： 95 ℃ 预变性 5 min，94 ℃ 变 性 1 min，60 ℃ 和 55 ℃ 退火 30 s，72 ℃ 延伸 30 s， 30 个循环，72 ℃ 最终延伸 8 min。PCR 反应的产 物直接由大连宝生物公司进行测序。
* 收稿日期： 2012 － 02 － 24 作者简介： 李会（ 1976 － ） ，女，助理研究员，研究方向能源微生物和分子生物学。
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辽宁农业科学
2012 年
滤器注入灭过菌的培养瓶）
Biotin 0． 002、Folicacid 0． 002 、Pyridoxine-HCl
0． 01、Riboflavin 0． 005、Thiamine-HCl0． 005、Nia-
A： 基本溶液（ 储备液） （ g /L） （ 1） Solution ①： KH2 PO4 27． 2 （ 溶 于 试 剂 瓶 中） ； （ 2） Solution ②： Na2 HPO4 28． 4 （ 溶于试剂瓶 中） ； （ 3） MineralSolution： NH4 Cl 6、NaCl 6 、CaCl2 ·2H20 0． 2、MgCl2 ·6H2 O 2； （ 4） NaHCO3 80 + 半胱氨酸（ 每 50 ml 溶液中 加 0． 05 g） ； （ 5） Tracemetal solution： （ 配成浓储存液，用无 菌滤器注入灭过菌的培养瓶） H3 BO3 饱 和 液 l ml、FeCl2 · 2H2 O 2、ZnCl2 0． 05、MnCl2 · 4H2 O 0． 5、CuCl2 · 2H2 O 0． 03、 （ NH4） 6 Mo7 O24 ·4H2 O 0． 05、AlCl3 0． 05、CoCl2 · 6H2 O 0． 2、HCl（ 浓 ） l ml； （ 6） Vitamin Solution： （ 配成浓储存液，用无菌
《论文开题答辩》ppt课件
〔3〕根据制造大曲的消费周期，跟踪取样8次，每 次取大曲表层和曲心的混合样，每次取二个样品 〔不同库房内取一次〕，成型入库前取未潮湿的 原料一次和潮湿的原料一次。
〔4〕浮液配制 无菌条件下，取5g样品，参与 50mL无菌水，充分摇匀，自然沉淀后取上清液， 得到10-1稀释样。然后依次制成10-2-10-7稀释样。
④调整浊度
(a)封锁浊度计电源,调整指针至“0〞刻度; (b)用吸水纸擦干净空白接种液管外壁,置于浊度计中,接通 电源,调整指针至100% T； (c)运用YT浊度规范品检查浊度仪的准确性,并调整至 47%T； (d)擦干菌悬液管外壁,插入浊度计,读取菌悬液浊度值； (e)经过添加菌体或空白接种液调整浊度值,使其在相应规 范浊度值的±3%范围内。 ⑤微平板的接种与培育
SIM和DIS是2个重要的参数，表示测试结 果与数据库相应的数据的匹配程度。当DIS ＜5.0，SIM＞0.75为良好的匹配；SIM值越 接近于1，检定结果的可源自性越高。2.3 培育基及试剂
牛肉膏蛋白胨培育基、麦芽汁培育基、孟 加拉红培育基、BIOLOG自动微生物鉴定 仪的特定培育基。
2.4 实验步骤
2.4.1 操作流程
培育基配制 → 灭菌 → 取样 → 样品悬浮液配制 → 接种 → 分别和纯化 →菌种挑选 → 接种 → 鉴 定
2.4.2 操作要点
〔1〕培育基的配置 根据培育基配制的要求进展。
制曲过程中微生物菌种挑选与性能鉴定
指点教师： 学生姓名：
学号：
大曲是白酒消费过程中的糖化剂、发酵剂， 是白酒发酵消费中微生物及酶的主要来源， 大曲的质量直接关系到酒的出酒率及基酒
化学实验毕业论文答辩PPT模板
毕业论文，泛指专科毕业论文、 本科毕业论文、硕士研究生毕业 论文、博士研究生毕业论文等， 即需要在学业完成前写作并提交 的论文，是教学或科研活动的重 要组成部分之一。
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案例分析
1 案例陈述 2 案例表述 3 分析导向 4 案例数据 5 情景再现 6 案例结合
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微生物产甲烷 PPT课件
目录
一.甲烷的简介 二.微生物产甲烷的生化机理 三.厌氧降解九大步骤 四.厌氧反应热力学分析 五.甲烷生产应用
一.甲烷的简介：
甲烷在自然界分布很广，是天然气、沼 气、坑气及煤气的主要成分之一。它可用作 燃料及制造氢、一氧化碳、炭黑、乙炔、氢 氰酸及甲醛等物质的原料。甲烷气可产生机 械能、电能及热能。
目前甲烷已作为一种燃料源，并通过管 道输送到用户，供给家庭及工业使用或转化 成为甲醇作为内燃机的辅助性燃料。
二.微生物产甲烷的生化机理 <一>.早期二阶段理论 <二>.三阶段(四阶段)理论的提出
<三>.四阶段理论
<一>. 早期理论——二阶段理论
对复杂有机物的厌氧降解过程的解释，早 期通行的是二阶段理论，认为有机物的厌 氧消化过程分为两个阶段——酸性发酵和 碱性发酵阶段，其中
<三>.四阶段理论
1、水解阶段 2、酸化阶段 3、产乙酸阶段 · 4、甲烷化阶段
三阶段（四阶段）理论见三阶段理论图
备注：与二阶段理论相比较，三阶段理论增加了产 氢产乙酸过程；四阶段理论则是在三阶段理论的 基础上增加了同型产乙酸细菌把H2和CO2转化为乙 酸的过程。
1.水解阶段
兼性和部分专性厌氧细菌发挥作用，复杂的 大分子有机物被胞外酶水解成小分子的溶解性有 机物 。如葡萄糖、氨基酸等
蒙牛澳亚示范牧场沼气发电综合利用工程
沼 气 在 发 电 方 面 的 应 用
工程位于内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔县盛乐经济园区 （蒙牛总部），由农业部沼气科学研究所进行总体设计与启动 调试。工程采用高浓度畜禽废弃物高效厌氧消化技术处理牧场 存栏10000头奶牛的鲜牛粪280 t/d，尿及冲洗废水360 t/d， 日产沼气10000m3/d，日发电20000 kW·h/d; 年减排COD 9125 t， CO2当量2.4万t，TN 487 t，TP 96 t。沼渣沼液供周边约10万 亩牧草种植地利用。该工程是目前我国最大的牛场粪污处理沼 气发电工程。
低温沼气功能菌群的产甲烷菌分析
低温沼气功能菌群的产甲烷菌分析丁建南;田晓娟;张国华;黄黄;黄江丽【摘要】运用16s rDNA PCR和实时荧光qPCR技术,对选育的低温沼气功能菌群中的产甲烷菌种群结构和数量进行了研究,并与常温沼气功能菌群进行了比较分析。
在总共33个产甲烷菌分类单元中低温沼气功能菌群占有20个,低温沼气功能菌群的产甲烷菌多样性远高于常温沼气功能菌群。
低温沼气功能菌群以对温度要求较低的中低温产甲烷菌为主,而常温沼气功能菌群则以中高温产甲烷菌占优。
虽然两类菌群的产甲烷菌在多样性和种群结构方面存在着较大差异,但在产甲烷菌数量方面并没有明显的不同,这表明选育的低温沼气功能菌群和常温沼气功能菌群一样,已经形成了稳定的产甲烷菌种群。
%Methanogens populations in low and normal temperature biogas functional microfloras were respectively investigated using 16s rDNA PCR and real-time qPCR techniques.The 16s rDNA clone library of methanogens showed a great difference in methanogens consortium diversity and structure between the two microfloras.A total of 33 OUTs of methanogens were identified,including 20 in low-temperature microflora and 13 in normal temperature microflora.Methanogens requiring low-medium temperature were found prevalent in low-temperature microflora and those active at moderate-high temperature occurred mainly in normal temperature microflora.However,the results of real-time qPCR showed that there was no significant difference in methanogen quantity between the two studied microfloras,indicating a stable methanogenic community had been built in both microfloras.【期刊名称】《江西科学》【年(卷),期】2012(030)001【总页数】4页(P36-38,43)【关键词】低温沼气功能菌群;产甲烷菌;种群分析;16s;rDNA;实时定量PCR【作者】丁建南;田晓娟;张国华;黄黄;黄江丽【作者单位】江西省科学院生物资源研究所,江西南昌330029;江西省科学院生物资源研究所,江西南昌330029;江西省科学院生物资源研究所,江西南昌330029;江西省科学院生物资源研究所,江西南昌330029;江西省科学院生物资源研究所,江西南昌330029【正文语种】中文【中图分类】S216.4低温是影响我国亚热带及其以北广大区域沼气设施使用效率的主要原因，也是限制沼气向高纬度和高海拔地区进一步推广的主要因素［1，2］。
675001_低温沼气功能菌群的产甲烷菌分析
收稿日期:2011-12-08;修订日期:2012-01-16作者简介:丁建南(1955-),男,研究员,研究方向为微生物生态学。
基金项目:江西省科技支撑计划项目“低温沼气发酵综合技术的研究”;江西省科学院基金项目“低温沼气发酵专属菌群中产甲烷菌种群分析”(2007⁃YGY⁃04)。
第30卷 第1期2012年2月江 西 科 学JIANGXI SCIENCEVol.30No.1Feb.2012 文章编号:1001-3679(2012)01-0036-04低温沼气功能菌群的产甲烷菌分析丁建南,田晓娟,张国华,黄 黄,黄江丽(江西省科学院生物资源研究所,江西 南昌330029)摘要:运用16s rDNA PCR 和实时荧光qPCR 技术,对选育的低温沼气功能菌群中的产甲烷菌种群结构和数量进行了研究,并与常温沼气功能菌群进行了比较分析。
在总共33个产甲烷菌分类单元中低温沼气功能菌群占有20个,低温沼气功能菌群的产甲烷菌多样性远高于常温沼气功能菌群。
低温沼气功能菌群以对温度要求较低的中低温产甲烷菌为主,而常温沼气功能菌群则以中高温产甲烷菌占优。
虽然两类菌群的产甲烷菌在多样性和种群结构方面存在着较大差异,但在产甲烷菌数量方面并没有明显的不同,这表明选育的低温沼气功能菌群和常温沼气功能菌群一样,已经形成了稳定的产甲烷菌种群。
关键词:低温沼气功能菌群;产甲烷菌;种群分析;16s rDNA ;实时定量PCR 中图分类号:S216.4 文献标识码:AMethanogens Consortium Analysis in Low⁃temperatureBiogas Functional MicrofloraDING Jian⁃nan,TIAN Xiao⁃juan,ZHANG Guo⁃hua,HUANG Huang,HUANG Jiang⁃li (Biological Resources Institute,Jiangxi Academy of Sciences,Jiangxi Nanchang 330029PRC)Abstract :Methanogens populations in low and normal temperature biogas functional microfloras were respectively investigated using 16s rDNA PCR and real⁃time qPCR techniques.The 16s rDNA clone library of methanogens showed a great difference in methanogens consortium diversity and structurebetween the two microfloras.A total of 33OUTs of methanogens were identified,including 20in low⁃temperature microflora and 13in normal temperature microflora.Methanogens requiring low⁃medium temperature were found prevalent in low⁃temperature microflora and those active at moderate⁃high temperature occurred mainly in normal temperature microflora.However,the results of real⁃time qPCR showed that there was no significant difference in methanogen quantity between the two stud⁃ied microfloras,indicating a stable methanogenic community had been built in both microfloras.Key words :Low⁃temperature biogas functional microflora,Methanogens,Population analysis,16s rD⁃NA,Real⁃time PCR0 前言低温是影响我国亚热带及其以北广大区域沼气设施使用效率的主要原因,也是限制沼气向高纬度和高海拔地区进一步推广的主要因素[1,2]。
沼气池中产甲烷菌的分离鉴定及其分布的研究的开题报告
沼气池中产甲烷菌的分离鉴定及其分布的研究的开题报告一、选题背景及意义沼气池是一种重要的生物发酵设施，可利用有机废弃物和废水产生可再生能源沼气。
沼气主要由甲烷和二氧化碳组成，其中甲烷是一种重要的清洁能源，具有广泛的应用前景，如发电、热水供应和工业燃料等。
因此，沼气池的高效稳定运行及其甲烷产量的提高至关重要。
沼气池中产甲烷菌是影响沼气池甲烷产量和污泥稳定性的关键微生物。
然而，沼气池中产甲烷菌的分布和种类众多且复杂，其生态特性的研究还存在很多问题。
因此，对沼气池中产甲烷菌进行分离鉴定及其分布的研究，可以进一步了解沼气池中产甲烷微生物的多样性和功能，为沼气池的高效稳定运行提供科学依据。
二、研究内容本研究将对不同类型沼气池中产甲烷菌进行分离培养、形态学观察和生理生化特性分析，以了解不同菌种的生化代谢途径、生长条件以及甲烷产量等特性；同时采用16S rRNA基因扩增测序技术对产甲烷菌进行分类鉴定和分子系统进化分析，比较不同类型沼气池产甲烷菌的多样性和种类组成差异，探讨其生态特性及其在沼气池中的功能作用。
三、研究方法和技术路线（1）样品采集和沼气池性质分析：采集不同类型沼气池中的发酵液和污泥样品，分别进行PH值、温度、压力、ORP等水文理化参数测定，以及COD、BOD、甲烷含量等质量性能分析。
（2）产甲烷菌分离鉴定：采用温和酸碱处理、梯度离心等方法分离产甲烷菌，分别进行形态学、生理生化特性和分子生物学鉴定，如形态颜色观察、氧气耗尽实验、代谢产物检测、16S rRNA基因扩增等，确定其系统学分类和进化关系。
（3）多样性和功能分析：采用高通量测序和生物信息学分析技术，对产甲烷菌进行群落组成和多样性分析，以及功能基因组、代谢途径和调控机制等研究，以揭示不同沼气池中产甲烷菌的群落结构和生态功能。
四、预期研究结果和创新点本研究通过对不同类型沼气池中产甲烷菌的分离鉴定和分子生物学研究，可以测定产甲烷菌的多样性和群落组成，揭示其在沼气池中的生态功能和代谢途径，为沼气池的高效稳定运行提供科学依据和理论支持；同时，本研究还可以为产甲烷微生物的分类学和进化研究提供新的实验数据和分子证据，对沼气池微生物学的研究具有一定的参考价值和实际意义。
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克隆
酶切和质粒PCR验证
引物：5，-C/TTAAGCCATGCG/AAGT-3，
5‘-T/CGGGTCTCGCTCGTT G/ACC-3，
菌株测序结果及系统发育分析
小结
菌株SZ-2同源比对和系统发育分析属于产甲烷八
叠球菌属菌株（Methanosarcina），并与巴氏甲
烷八碟球菌属菌株亲缘关系较近 结合菌株的生理生化和形态学特征分析，菌株SZ-
纯化鉴定 （丰富生长）
耐低温兼性常 温筛选
纯产甲烷菌株
耐低温产甲烷 菌株驯化
模拟 厌氧发酵
菌株厌氧发酵 效果评价
本课题研究出发点是， 厌氧发酵关键微生物产甲 烷菌；从不同生境筛选获 得常温发酵且兼性耐低温产 甲烷菌株，改善低温发酵沼 气池厌氧菌群，提高耐低 温产气能力。
形态学、生物 特性研究
分子生物学鉴 定
新疆位于我国西北严寒地区，冬季气温、地温低，达不到最 佳厌氧发酵温度；研究表明沼气产量下降，是由于中温厌氧 发酵菌群进入冬季后，受低温影响活力下降和大量菌株衰亡。
因此，沼气能源在新疆的推广，受制于低温厌氧发酵。产甲 烷菌为厌氧发酵菌群代谢途径中关键，低温下产甲烷菌活力 下降使得整个代谢途径都会受到抑制。
本课题选择筛选耐低温产甲烷菌做为解决低温厌氧发酵途径
水解
大分子有机物
糖、蛋白、脂肪
β氧化、糖酵解、脱氨基
VFA、氨基酸、 酸化 单糖、H2、CO2
短链脂肪酸等
CO2还原
累积的 H2、CO2
异型 同型 乙酸发酵 乙酸发酵
甲烷
氧化脱羧
乙酸
研究内容
不同低温生境 采集样品
低温厌氧富集 培养产甲烷菌
厌氧滚管分离
厌氧发酵对比实验
一组：牛粪和秸秆混合物未添加外来菌剂进行厌氧发酵，原始菌群不 能适应低温15℃环境
二组：SZ-2菌株扩大后发酵牛粪和秸秆混合物，SZ-2菌株需要对发酵 环境适应、互营共生关系的建立等，发酵启动时间等受影响
三组：驯化后 SZ-2菌株复合污泥菌群，菌群互营共生关系良好；对 低温发酵环境适应能力强；因此从发酵启动时间和产量上都优于前两 组。
1-2 d，甲烷产量少，共生 菌受到刺激生长繁殖
3-5 d，互营共生发酵开始 启动
6 d ，SZ-2开始成为优势 菌株
6-11 d ，SZ-2菌株复合菌 群大量繁殖
结论：6-11 d，经驯化后 SZ-2菌株发酵污泥菌群具 备良好耐低温发酵高效产 气的能力；接种于低温沼 气发酵瓶中将有利于改善 沼气发酵。
耐低温产甲烷菌株筛选
菌株形态学观察
荧光相差显微镜下： 观察发绿色荧光
菌株呈叠形不规则球状 不规则裂殖 细胞不运动
SZ-2菌株生物学特性
菌株可用碳源底物、抗生素敏感性
二SZ甲-2胺菌、株三可甲利胺用作碳为源单底一物碳：源H底2/C物O2产混生合甲物烷、；甲不醇能、在甲以胺甲、酸 盐、乙酸盐、丙醇、丁醇作为唯一碳源的培养基上生长代谢 产生甲烷 。
内容123 低温产甲烷菌分离鉴定及发酵产气初步研究（硕士优秀毕
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实验部分
1 低温产甲烷菌筛选分离及生物学特性研究 2 低温产甲烷菌保藏 3 菌株分子生物学鉴定 4 菌株发酵产气初步研究
低温产甲烷菌的保藏
实验部分
1 低温产甲烷菌的筛选分离及生物学特性研究 2 低温产甲烷菌保藏 3 菌株分子生物学鉴定 4 菌株发酵产气初步研究
SZ-2菌株DNA提取、16S rDNA 扩增
小结
耐低温SZ-2菌株能够适应低温发酵环境并 与菌群建立共生关系，低温发酵的启动时 间和发酵产气量增长明显
驯化后的含有SZ-2菌株的菌群能更好适应 低温发酵，发酵启动时间和产气量提高效 果更好。
目录
1
研究背景、内容、意义
2
实验部分
3
结论及展望
4
致谢
结论
(1)厌氧条件下从沼气池和湖底采集污泥中分离两株产甲烷菌菌株，SZ1、SZ-2；SZ-2菌株符合兼性耐低温且常温也能良好产气要求； SZ-2菌 株呈明显八叠球状 ，15～30℃产气良好，25℃为最适温度，最适pH值 为6，氯化钠耐受范围为0～0.4 mol/L,0.2 mol/L时最适宜；可利 H2/CO2、甲醇、甲胺、二甲胺、三甲胺作为单一碳源底物；不能耐受链 霉素和卡那霉素 。
小结
厌氧分离获得两株产甲烷菌SZ-1、SZ-2 经过筛选，SZ-2菌株符合兼性耐低温且常温也能
良好产气要求 SZ-2呈八叠球状 ，15～30 ℃产气良好，TOPT=25
℃ ；最适pH值6；最适氯化钠浓度0.2 mol/L； H2/CO2、甲醇、甲胺、二甲胺、三甲胺为其可利
用单一碳源底物 。
SZ-2菌株不能耐受链霉素和卡那霉素
2与巴氏甲烷八叠球菌基本相符，只有最适温度有 差异 可能是长期生长在寒冷低温沼气池中适应低温环 境驯化的结果
实验部分
1 低温产甲烷菌筛选分离及生物学特性研究 2 低温产甲烷菌的保藏 3 菌株分子生物学鉴定 4 菌株发酵产气初步研究
排水集气
甲烷产量测定：气体体积与气相色谱测定甲烷浓度的乘积
SZ-2菌株驯化
低温产甲烷菌分离鉴定及发 酵产气初步研究
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目录Biblioteka 1研究背景、内容、意义
2
实验部分
3
结论及展望
4
致谢
研究背景
化石能源是不可再生能源，终有一天会枯竭；未来生物质能 等新能源的发展将举足轻重。
沼气是一种可再生能源，对于自然条件差，生态环境脆弱的 新疆农村牧区，减缓传统用能方式产生的植被破坏将具有重 要意义。
目录
1
研究背景、内容、意义
2
实验部分
3
结论及展望
4
致谢
实验部分
1 低温产甲烷菌的筛选分离及生物学特性研究 2 低温产甲烷菌的保藏 3 菌株的分子生物学鉴定 4 菌株发酵产气的初步研究 5
产甲烷菌富集培养筛选纯化
从越冬沼气池和湖底 采集污泥样品富集产甲烷菌
总结：低温产甲烷菌分离鉴定及发酵产气初步研究（硕士优秀毕业论文 答辩PPT模板）