培养基配方及配制方法
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法在实验室中，培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础，正确配制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
不同的微生物对营养物质的需求有所不同，因此需要根据实验目的和微生物的特性选择合适的培养基，并掌握正确的配制方法。
接下来，我将为大家详细介绍几种实验室常用培养基的配制方法。
一、LB 培养基（LuriaBertani 培养基）LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基，其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配制 1L 的 LB 培养基，所需材料如下：胰蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g配制步骤：1、称取上述成分，将其放入一个干净的 1L 烧杯中。
2、加入约800ml 的去离子水，用玻璃棒搅拌，直至溶质完全溶解。
3、用去离子水将溶液定容至 1L。
4、调节 pH 值至 70（通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl 进行调节）。
5、将培养基分装到锥形瓶中，每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。
6、盖上瓶塞，用报纸或牛皮纸包扎瓶口。
7、放入高压灭菌锅中，在 121℃下灭菌 20 分钟。
二、牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基，适用于多种细菌的培养。
配制 1L 该培养基，需要准备以下材料：牛肉膏 3g蛋白胨 10g氯化钠 5g具体配制步骤如下：1、称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，放入干净的烧杯中。
2、加入适量的去离子水，搅拌溶解。
3、定容至 1L，搅拌均匀。
4、用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。
5、分装、包扎、灭菌，方法同上。
三、马铃薯葡萄糖培养基（PDA 培养基）PDA 培养基常用于培养真菌，尤其是霉菌。
配制 1L 的 PDA 培养基，材料如下：马铃薯 200g葡萄糖 20g琼脂 15 20g配制流程：1、将马铃薯去皮，切成小块，称取 200g，放入锅中，加入约1000ml 去离子水，煮沸 20 30 分钟，直到马铃薯块变软。
常用培养基的配制成分及方法
一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
4、TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
5、2×YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。
建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。
为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。
二、常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
培养基配方及配制方法
培养基配方1 斜面菌种保存培养基1.1PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
1.2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4~6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次。
取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml （视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
2基菌落总数检测2.1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g加入蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH，然后在121℃下灭菌15min，取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。
3志贺氏菌检测3.1 GN增菌液成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。
pH7.0制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。
3.2 HE琼脂成分：胨：12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂18~20g，蒸馏水1000ml0，0.4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml.，甲液20ml，乙液20ml。
pH7.5 制法：将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液，将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解，加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷却至50~55℃，倾注浇平板。
常见培养基的配制操作方法和注意事项
常见培养基的配制操作方法和注意事项一、培养基的配制方法：1.准备所需材料：培养基主要由基础成分和添加剂组成，根据不同需求，可以选择不同的成分配制培养基。
常见的基础成分包括碳源、氮源、矿物质盐和特定生长因子等，添加剂包括琼脂、酵母浸泡液等。
2.称量和溶解：根据配方比例，准确称量各个成分并分别溶解在适量的蒸馏水中，可以加温以加快溶解速度。
3.调整pH值：通常需要调整培养基的pH值，使用盐酸或氢氧化钠等酸碱调节剂，逐滴加入直至达到指定的pH值，一般为7.0-7.44.加入琼脂：在溶解各个成分的培养基溶液冷却至约50℃时，加入适量的琼脂，并充分搅拌溶解。
最后通过高温高压灭菌，使培养基凝固。
二、培养基配制的注意事项：1.材料和器皿的消毒：操作前需预先进行灭菌处理，如使用高温高压灭菌器、自闭式消毒法或紫外线照射等方法，以确保培养基的无菌性。
2.避免污染：在操作过程中应尽量避免培养基的污染，如使用干净的器皿和工具，并注意操作环境卫生。
3.精确称量：根据配方比例准确称量各个成分，尤其是微量元素等特定剂量的添加剂。
4.pH值调节：在调整培养基的pH值时，应逐滴添加酸碱调节剂，并反复检测和调整，以确保达到设定的pH值。
5.良好的溶解和混合：搅拌培养基溶液时应充分混合，以确保各个成分均匀分布。
6.温度控制：培养基配制过程中需要注意温度控制，避免溶液过热或过冷，影响琼脂的溶解或培养基的凝固。
7.灭菌处理：配制好的培养基需要通过高温高压灭菌或过滤灭菌进行处理，以保证培养基的无菌性。
8.存储条件：灭菌后的培养基应放置在低温、干燥和避光的环境中保存，并注意严格控制培养基的有效期。
总结：培养基的配制方法包括准备材料、称量和溶解、调整pH值、加入琼脂和灭菌处理等步骤。
在操作过程中需要注意材料和器皿的消毒、避免污染、精确称量、pH值调节、良好的溶解和混合、温度控制、灭菌处理和存储条件等方面的注意事项。
通过严格控制操作环境和工艺要求，可以确保培养基的质量和无菌性。
常用培养基配制方法
常用培养基配制方法：（1）基础盐培养基（MSM）：(NH4)2SO42.0g，MgSO4·7H2O0.2g，CaCl2·2H2O 0.01g，FeSO4·7H2O0.001g，Na2HPO4·12H2O1.5g，KH2PO41.5g，蒸馏水1000 mL。
（2）LB培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，蒸馏水1000 mL，pH7.5。
（3）高氏合成1号培养基：硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化钠0.5g，硫酸亚铁0.01g，可溶性淀粉20g，蒸馏水1000mL。
（4）查彼氏培养基：硝酸钠2g，氯化钾0.5g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，硫酸亚铁0.01g，蔗糖30g，蛋白胨0.5g，蒸馏水1000mL。
（5）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20 g，蒸馏水1000mL。
将无病马铃薯洗净去皮切碎，加蒸馏水1000mL，煮沸0.5 h，纱布过滤，滤液加蒸馏水补足1000mL，再加入葡萄糖，然后分装三角瓶灭菌备用。
（6）铵察氏琼脂培养基：氯化铵2g，氯化钾0.5g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，硫酸亚铁0.01g，蔗糖30g，蛋白胨0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000 mL。
（7）克氏合成1号琼脂培养基：磷酸氢二钾1g，碳酸镁0.3g，氯化钠0.2 g，硝酸钾1g，硫酸亚铁0.01g，碳酸钙0.5g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（8）葡萄糖天门冬素琼脂培养基：葡萄糖10g，天门冬素0.5g，磷酸氢二钾0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（9）葡萄糖酵母膏琼脂培养基：葡萄糖10g，酵母膏10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（10）瓦氏肉汁琼脂培养基：蛋白胨5g，葡萄糖10g，牛肉膏10g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
（11）淀粉琼脂培养基：可溶性淀粉10g，碳酸镁1g，磷酸氢二钾0.3g，氯化钠0.5g，硝酸钠1g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。
培养基配方及配置
培养基配方及配置
一般来说，培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。
基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分，包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。
常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。
添加剂是指用于满足特定实验需求的成分，如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。
添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。
调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分，如缓冲液、pH调节剂等。
以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置：
1.基础培养基成分：
- 水：900ml
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
2.添加剂：（可根据实验需求进行必要的添加）
- 抗生素（如氨苄青霉素）：100μg/ml
- 抗菌剂（如氯霉素）：25μg/ml
3.配制方法：
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中，并搅拌混合均匀。
- 将培养基溶液倒入容量瓶中，加水至1000ml，并混合均匀。
-调节pH值至7.0-7.2（一般使用缓冲液进行调节）。
-用自制滤纸过滤器滤过，将溶液分装至培养皿或试管中。
-如需添加抗生素或抗菌剂，将相应的药物加入培养基中，并充分溶解。
-培养基装瓶后可以高温高压灭菌，或使用滤器过滤进行无菌处理。
以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程，不同实验需要可能
会有所调整和变化。
在设计培养基配方时，需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度，并注意配制和保管过程中的无菌操作，以确保培养基的质量和有效性。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于细菌、真菌、酵母等微生物的生长和繁殖的基质。
不同的微生物对培养基的要求不同，因此配方也会有所差异。
下面是一种常用的培养基配方及配制方法。
1.碳源：常见的碳源包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
碳源的添加能够提供微生物的能量和碳原子。
2.氮源：常见的氮源包括氨基酸、尿素、硝酸盐等。
氮源的添加能够提供微生物生长所需的氮元素。
3.矿物质：常见的矿物质包括钠、钾、氯等。
矿物质的添加能够提供微生物生长所需的微量元素。
4.生长因子：一些微生物对特定的生长因子具有依赖性，例如维生素和氨基酸等。
5.pH缓冲剂：常见的pH缓冲剂有磷酸盐缓冲液、琼脂等，用于调节培养基的pH值。
6. 凝固剂：常见的凝固剂包括琼脂、Agar等，用于使培养基变成固体状。
培养基配制方法：1.按照配方将所需的各种成分加入适量的蒸馏水中。
注意要先将一些难溶的固体成分溶解后再加入。
2.配制的过程中要注意无菌操作，使用无菌的容器和仪器，避免细菌及其他微生物污染。
3.将配制好的培养基混合均匀，使各个成分充分溶解。
可以通过搅拌或加热溶解等方法进行混合。
4.调节培养基的pH值。
使用酸碱试剂（如盐酸和氢氧化钠）进行调节，直到达到适合所需微生物生长的pH值范围。
5.如果需要固体培养基，可以加入适量的凝固剂（如琼脂）。
溶解后加入培养基中，然后将培养基煮沸消毒使凝结。
6.将配制好的培养基装入适量的培养皿或试管中。
7.灭菌处理。
使用高压灭菌器或自动培养箱等设备进行灭菌处理，以杀死培养基中的微生物。
通过以上步骤，就可以得到配制好的培养基。
根据不同的微生物要求和实验需要，可以调整培养基的成分和浓度，以获得最适合微生物生长和繁殖的环境。
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培养基配方1 斜面菌种保存培养基培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4~6小时（用摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次。
取过滤后的清液，加%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
2基菌落总数检测平板计数琼脂培养基将?胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g加入蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH，然后在121℃下灭菌15min，取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。
3志贺氏菌检测GN增菌液成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。
制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH为，分装，在115℃高压灭菌15min。
HE琼脂成分：胨：12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂18~20g，蒸馏水1000ml0，%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml.，甲液20ml，乙液20ml。
制法：将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液，将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解，加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷却至50~55℃，倾注浇平板。
注1：此培养基不能高温灭菌。
注2：甲液的配置：硫代硫酸钠：34g，柠檬酸铁钠：4g，蒸馏水：100ml。
注3：乙液的配置：去氧胆酸钠：10g，蒸馏水：100ml。
注4：Andrade指示剂的配置：酸性复红：0.5g，1mol/l的氢氧化钠溶液：16ml，蒸馏水：100ml。
将酸性复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液，数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液1~2ml。
SS琼脂3.3.1 基础培养基：成分：牛肉膏：5g，胨：5g，三号胆盐：3.5g，琼脂：17g，蒸馏水：1000ml。
制法：将牛肉膏蛋白胨，三号胆盐加入到400ml蒸馏水中，将琼脂加入到600ml蒸馏水中，煮沸使其溶解，然后液混合，于121℃下灭菌15min，保存备用。
3.3.2 完全培养基成分：基础培养基：1000ml，乳糖：10g，柠檬酸钠：8.5g，硫代硫酸钠：8.5g，10%柠檬酸铁溶液：10ml，1%中性红溶液：，%煌绿溶液：。
制法：加热融化基础培养基，按比例加入处染料以外的所有成分，搅拌均匀，调，加入中性红溶液和煌绿溶液，混合均匀后浇平板。
注1：配制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱48h内使用。
注2：煌绿溶液配好后，应在10日内使用。
注3：可以购买SS琼脂的干燥培养基。
麦康凯琼脂成分：蛋白胨：17g，胨：3g，猪胆盐（牛、羊胆盐）：5g，氯化钠：5g，琼脂：17g，蒸馏水：1000ml，乳糖：10g，%结晶紫水溶液：10ml，%中性红水溶液：5ml。
制法：将蛋白胨、胨、猪胆盐、氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，调，将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解，将两液混合均匀，于121℃下灭菌15min备用。
临用时加热融化琼脂，趁热加入乳糖，等冷却到50~55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液，搅拌均匀后浇平板。
注：结晶紫和中性红水溶液配好后，须经高压灭菌。
伊红美蓝琼脂（EMB）成分：蛋白胨：10g，乳糖：10g，磷酸氢二钾：2g，琼脂17g，2%伊红Y溶液：20ml，%美蓝溶液：10ml，蒸馏水1000ml，。
制法：将蛋白胨、磷酸盐、琼脂溶解于蒸馏水中，调pH，于121℃下灭菌15min备用。
临用时加热融化琼脂，并加入乳糖，冷却至50~55℃时加入伊红和美蓝溶液，混合均匀后浇平板。
三精铁琼脂成分：蛋白胨：20g，牛肉膏：5g，乳糖：10g，蔗糖：10g，葡萄糖：1g，氯化钠：5g，六水硫酸亚铁铵：0.2g，硫代硫酸钠：0.2g，琼脂：12g，酚红：0.025g，蒸馏水：1000ml，。
制法：将除琼脂和酚红以外的各种成分溶解于蒸馏水中，调pH，然后加入琼脂，加热溶解，加入%酚红水溶液，摇匀，分装时量多一点，于121℃下灭菌15min，搁高层斜面备用。
葡萄糖半固体发酵管成分：蛋白胨：1g，牛肉膏：0.3g，氯化钠：0.5g，%溴甲酚紫酒精溶液：，葡萄糖：1g，琼脂：0.3g，蒸馏水：100ml，。
制法：将蛋白胨，牛肉膏，氯化钠加入水中，调pH后，加入琼脂，煮沸溶解，再加入指示剂和葡萄糖。
分装，于121℃下灭菌15min，备用。
半固体管成分：蛋白胨：1g，牛肉膏：0.3g，氯化钠：0.5g，琼脂：~0.4g，蒸馏水：100ml，。
制法：将上述成分溶于水中，加热煮沸，并调pH后分装小试管，121℃高压灭菌15min，直立凝固备用。
尿素琼脂成分：蛋白胨：1g，氯化钠：5g，葡萄糖1g，磷酸二氢钾：2g，%酚红溶液：3ml，琼脂：20g，蒸馏水：1000ml，20%尿素：100ml，±。
制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，调pH，加入琼脂后加热使其溶化并分装小瓶，121℃高压灭菌15min，冷却至50~55℃后，加入经过滤灭菌的尿素溶液，最终尿素浓度为2%，最终的pH应为±。
分装于灭菌试管内，搁斜面备用。
西蒙氏柠檬酸盐琼脂成分：氯化钠：5g，七水硫酸镁：0.2g，磷酸二氢铵：1g，磷酸氢二甲：1g，柠檬酸钠：5g，琼脂：20g，蒸馏水：1000ml，%溴麝香草酚蓝溶液：40ml，。
制法：先将盐类溶解于水中，调pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃下灭菌15min，搁成斜面。
实验方法：挑取少量琼脂培养物接种，于36℃±1℃培养4天，每天观察结果，阳性者斜面上有菌落生长。
培养基由绿色转为蓝色。
氰化钾（KCN）培养基成分：蛋白胨：10g，氯化钠：5g，磷酸二氢钾：0.225g，磷酸氢二钠：5.64g，蒸馏水：1000ml，%氰化钾溶液：20ml，。
制法：将除氰化钾以外的成分配好分装，121℃灭菌15min，放在冰箱内使其充分冷却，每100ml培养基加入%氰化钾溶液（最后浓度为1:10000），分装于12mm×100mm灭菌试管，每管约4ml，立刻用橡皮塞塞紧，放在4℃冰箱内，至少可保存两个月，同时将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装备用。
试验方法：将琼脂培养物接种于蛋白胨水内成作为稀释菌液，挑取1环接种于氰化钾培养基，另外挑取1环接种于对照培养基，在36℃±1℃下培养1~2天，观察结果，如有细菌生长，则为阳性，经2天后不生长则为阴性。
注：氰化钾是剧毒物质，使用时应小心，切勿沾染，以免中毒。
夏天分装培养基应在冰箱内进行，实验失败的主要原因是封口不严，氰化钾逐渐分解，变成氢氰酸气体逸出，以致药物浓度降低，细菌生长，造成假阳性现象。
氨基酸脱羧酶实验培养基成分：蛋白胨：5g，酵母浸膏：3g，葡萄糖：1g，蒸馏水：1000ml，%溴甲酚紫乙醇溶液：1ml，L-氨基酸或DL-氨基酸：0.5g或1g/100ml，。
制法：除氨基酸以外的所有成分加热溶解后，分装每瓶100ml，分别加入各种氨基酸：赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。
L-氨基酸按%加入，DL-氨基酸按1%加入。
再调，对照培养基不加氨基酸。
分装于灭菌的小试管内，每管，上面滴加一层液体石蜡。
115℃高压灭菌10min。
实验方法：从琼脂斜面上挑取培养物接种，于36℃±1℃下培养18~24h，观察结果，氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色。
阴性者因为碱性物质产生，但因葡萄糖产酸而是培养基变成黄色，对照管应为黄色。
蛋白胨水（靛基质试验用）成分：蛋白胨或胰蛋白胨：20g，氯化钠：5g，蒸馏水：1000ml，制法：将上述成飞混合均匀，分装小管，121℃灭菌15min。
靛基质试剂：柯凡克试剂：将5g对二氨基甲醛溶于75ml戊醇中，然后慢慢加入浓盐酸25ml。
欧-波试剂：将1g对二氨基苯甲醛溶于90ml95%的乙醇内，然后慢慢加入浓盐酸20ml。
实验方法：挑取少量接种物接种，在36℃±1℃下培养1~2天，必要时可培养4~5天，加入柯凡克试剂约，轻摇试管，阳性者试剂层呈深红色，或加入欧-波试剂，沿管壁流下，覆盖于培养液表面，阳性者接触面上呈玫瑰红色。
注：蛋白胨应含有丰富的色氨酸，每批蛋白胨买来后应用已知菌种实验。
糖发酵管成分：牛肉膏：5g，蛋白胨：10g，氯化钠：3g，十二水磷酸氢二钠：2g，%溴麝香草酚蓝溶液：12ml，蒸馏水：1000ml，。
葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃灭菌15min。
其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100ml，121℃灭菌15min，另将各种糖类配好10%溶液，一同灭菌，将5ml糖溶液加入到100ml液体培养基中，以无菌操作分装小试管。
注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
实验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃，一般观察2~3天，迟缓反应需观察14~30天。
5％乳糖发酵管成分：蛋白胨：0.2g，氯化钠：0.5g，乳糖：5g，2%溴麝香草酚蓝水溶液：，蒸馏水：100ml，。
制法：除乳糖以外的各成分溶解于50ml蒸馏水内，调pH，将乳糖溶解于另外50ml蒸馏水中，分别于121℃灭菌15min，将两者混合，以无菌操作分装到小试管中。
注：在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1天内发酵。