银耳菌种生产的几个注意事项.doc
DB35-T137.5-2001古田银耳菌种制作规程
ICS 67.080.20 B 39备案号：DB35古田银耳标准综合体 菌种制作规程福建省质量技术监督局 发布前言本部分是古田银耳标准综合体中菌种制作规程，规定了菌种制作的术语和定义、基本设备、一级种制作、二级种培养、三级种培养、病虫害防治、菌种质量要求、检验方法、标志包装保存运输。
本标准由福建省质量技术监督局、福建省农业厅提出。
本标准主要起草单位：古田县质量技术监督局、古田县食用菌办公室。
本标准主要起草人：林祖寿、蔡金波、张国雄、彭冬祥、徐彦彦、张汉文、戴维浩。
古田银耳标准综合体菌种制作规程1 范围本标准规定了古田银耳标准综合体菌种制作中的术语和定义、基本设备、一级种制作、二级种培养、三级种培养、病虫害防治、菌种质量要求、检验方法、标志包装保存运输。
本规程适用于古田银耳菌种制作。
2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
2.1 耳片银耳子实体的瓣片。
2.2 耳基银耳子实体基部，呈桔黄色或垩白色、硬实、蒂状与培养基质相联结的部分。
2.3 交合将培养成熟的银耳纯菌丝与香灰菌丝按一定比例混合，培育有生产价值的银耳菌种的方法。
2.4 基质块在银耳子实体的耳基正下方,由以银耳纯菌丝为主和少量香灰菌丝、培养基扭结而成的硬块层。
2.5 基内分离在生长子实体的培养基内分离出菌种的专门技术。
2.6 分泌液银耳菌种正常的生理活动产生的无色、清黄或清红色的分泌液。
2.7 吐黑水银耳菌种被病原菌污染，或培养条件不适宜出现的异常现象。
2.8 “杨梅霜病”（俗名）菌种受为害时，局部表面出现白色粉斑，周围白毛团生长受抑制或逐渐消溶。
2.9 “死菌”菌种受为害时，前期香灰菌丝可生长，中期香灰菌丝稀疏，菌丝前端出现粉红色或褐色，后期香灰菌丝停止生长。
3 基本设备3.1 原料仓库面积等于或大于20m2，建在制种厂的西北向，要求干燥、通风、环境卫生、远离畜、禽舍。
3.2 洗涤室面积等于或大于10m2，水泥地面，平整，有水源。
室内配备：台秤，工业天平，50、100、500ml 量杯，铁铲，水桶，铝锅，电炉，煤气炉，小压板，瓶刷，试管筐，试管（18×180mm），玻璃漏斗，漏斗架，纱布，棉塞，750ml菌种瓶。
食用菌生产流程注意事项
食用菌生产流程注意事项
食用菌生产流程中，应注意以下事项：
1. 原料准备：确保培养料无农药残留、无霉变，严格按配方配制，充分发酵腐熟。
2. 消毒灭菌：培养料装袋后，必须进行高温高压灭菌，消灭杂菌，确保菌丝生长环境无污染。
3. 接种操作：在无菌条件下进行接种，防止杂菌侵染，接种量要适宜，确保菌种萌发迅速且均匀。
4. 培养管理：接种后的菌棒需在适宜温度、湿度条件下培养，定期观察菌丝生长情况，及时调控环境条件。
5. 出菇管理：菌丝长满后进行搔菌、催蕾等操作，保持适宜的温湿度及光照，促进子实体正常发育。
6. 采收与保鲜：食用菌成熟后及时采收，避免过度成熟，采后迅速进行保鲜处理，确保产品品质。
菌种生产中的注意事项及常见问题的解决方法
菌种生产中的注意事项及常见问题的解决方法菌种生产中的注意事项及常见问题的解决方法一、一级种制作过程中的注意事项（1）制作或盛装培养基的器皿，不能使用铁锅或铜锅，以免铁锈或铜锈混入培养基中，使铁或铜含量过高。
一般使用搪瓷缸或铝锅。
（2）制成的培养基，在使用前应做无菌检查，方法是将其置于27°左右的恒温箱内培养24小时，证明无菌后方可使用。
（3）制备好的培养基，应及时用完，不宜久存，以免降低其营养价值或成分上发生变化。
（4）制备过程中，一定要严格遵守无菌操作规程，并标好标签，注明菌种名称。
接种日期和转管次数，尤其在同一时间几种不同的菌种接种时，一定要严防混杂。
（5）一级种转管的次数不能过多，一般以5-6次为好，不能超过10次，否则，由于移植时所造成的机械损失，以及培养条件的变化，会削弱菌丝活力，导致遗传性状变异，降低出菇率。
因此，引进或育成的菌种在第一次转管时，可较多数量扩转，并以不同方法保藏，按计划使用。
（6）切勿使用无标记或判断不准的菌种，以免使用后造成损失。
（7）不要使用培养基已干缩或老化的一级种，以免影响菌种成活率或导致生产性状的退化。
长期保藏的菌种，用前应放在恒温箱中活化培养，并逐步提高培养温度，活化培养时间一般为1-3天。
如在冰箱中保存时间超过3个月，最好转管培养一次再用，以提高接种成功率和萌发速度。
（8）启用保藏的一级种，应认真检查是否有污染现象。
如试管斜面上呈现明显的黑色、绿色、黄色等菌落，则説明已遭受霉菌的污染；将试管迎亮光观察，如果在气生菌丝下面有黄褐色圆点或不规则斑块，説明已遭细菌污染；被污染的菌种绝对不能用于扩大生长。
（9）接种块不萌发或不吃料的原因：菌种在0°甚至以下温度保藏，菌丝已冻死或失去活力；菌龄过老，生活力衰弱；接种操作时，母种块被接种铲或酒精灯火焰烫死；母种块没有贴紧原种培养基；菌种萌发后缺乏营养死亡；接种块太薄太小干燥而死；母种培养基过干，菌丝无法活化或原种培养料偏干，菌丝无法吃料生长；培养料配比不当，或菌袋内有氨气或其它不良气体，致使酸碱度不宜；菌袋接种前冷却不彻底，或培养温度过高等。
银耳的菌种分离技术
银耳的菌种分离技术1. 引言银耳（Auricularia auricula-judae），又称黑木耳、银耳菇，是一种重要的食用真菌。
它具有丰富的营养价值和药用价值，在中国和东南亚地区广泛种植和消费。
银耳菌种分离技术是研究银耳的基础工作之一，通过菌种分离可以获得纯种菌株，为银耳的种植和研究提供基础数据。
本文将介绍银耳菌种分离技术的步骤和注意事项。
2. 菌种分离技术的原理银耳菌种分离技术基于真菌的生物学特性和培养条件的优化，通过分离和筛选，得到纯种菌株。
其基本原理包括以下几个步骤：2.1 菌丝分离首先，从银耳的菌丝体上采样，可以选择新鲜的银耳子实体或已培养的菌丝体作为样本。
将样本切碎，均匀地涂抹在培养基表面，并进行适当的培养条件，如温度、湿度等。
2.2 菌丝生长放置培养皿在适当的温度和湿度下，等待菌丝生长。
银耳菌丝具有较快的生长速度，通常几天后就可以观察到菌丝的生长。
2.3 菌丝筛选观察培养皿上的菌丝，筛选出生长良好、无污染、纯净的菌丝进行后续的操作。
可以根据菌丝的颜色、形态等特征进行筛选，有经验的研究人员可以凭借肉眼识别，也可以借助显微镜进行观察。
3. 菌种分离技术的步骤银耳菌种分离技术的步骤如下：3.1 准备工作准备培养基和培养设备，确保无菌条件。
常用的培养基包括马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）、苹果蔗糖琼脂（AS）等。
同时，需要准备菌种采样工具、无菌操作箱、显微镜等设备。
3.2 菌丝分离从银耳的菌丝体上采样，取适量的样本均匀涂抹在培养基上。
注意避免污染，保证操作无菌。
3.3 培养菌丝将培养皿放置在恰当的培养条件下，如温度、光照和湿度等，并以适当的时间间隔观察菌丝的生长情况。
3.4 菌丝筛选观察培养皿上的菌丝，筛选生长良好、无污染、纯净的菌丝，并进行备份保存。
筛选的依据可以包括菌丝的颜色、形态、生长速度等特征。
3.5 目视鉴定将筛选出的菌丝进行目视观察和鉴定，以确定是否为所需的银耳菌株。
目视鉴定主要依据菌丝的形态特征、产孢器的形状和颜色等进行判断。
银耳栽培管理技术
银耳栽培管理技术曾经和福建古田县老师做过食用菌，很是感情兴趣。
今天把所了解和学到的东西玉大家分享一下。
其一是银耳：分享如下：代用料栽培各种食用菌已是目前国内食用菌工作中重要的一个方面，各种食用菌如都能利用代料生产，不但可以节约大批木材，增加群众收入，而且也是解决粮食问题的一个有效途径。
银耳代用料栽培的成功，为今后工作开辟了道路，现将其栽培情况介绍于后。
1．栽培银耳需要的设备银耳栽培基本是就地取材，土法上马，因而设备较简单，包括有培养室、灭菌消毒灶（即土蒸灶）、接种箱以及小型用具。
（1）培养室是一个约12平方米的房间，一般的草房、瓦房、砖墙、土墙、土地、铺地皆可使用，要求房间墙壁地面坚固密实，无洞穴、裂缝，以免杂菌及害虫孳生。
室内要求明亮，有充足的散射光。
室内即要要求易保温（特别是冬季），更要便于通风换气（最好能形成空气对流）。
根据目前住房实际条件，发菌工作也是在培养室内进行，所以培养室最好能搞一个缓冲间，有利于上架、通气等管理工作。
培养室内，靠墙安放两排架子。
架腿高5至6层，每层高35厘米。
架子宽（内径不算架腿）75厘米。
每层平扎上数根竹竿或直木棍，以做安放培养基袋子用。
架子要求坚固、平稳、不松动。
培养室要准备农用喷雾器1个，打过剧毒药者不宜使用。
（2）灭菌消毒设备银耳培养基灭菌是用常压灭菌法。
也就是用土蒸灶来进行。
它的构造是：在1个1.5米X1.3米的灶面上用砖砌一个高1.5米的柜形蒸箱。
一边留有进料门，门扇上方有插温度计的小孔。
灶内有放料的搁板。
搁板距水面要有一定的距离。
内壁用水泥粉光，以防漏气。
进料门下方有水位观察小孔，后边烟道一侧有加水口。
烟道上有一连灶，架一口小锅，利用余热烧水，加入灶内。
以免加冷水时降温。
灭菌灶10多户可用一个。
（3）接种箱接种箱的附件有接种勺、接种针、酒精灯。
接种箱也可互相借用。
2．栽培银耳的代用料及其他材料栽培银耳的代用料是很丰富的，资料介绍用于栽培的有：木屑、甘蔗渣。
种植银耳的技术
种植银耳的技术银耳也叫白木耳，它不仅是宴席上的珍品，而且具有重要的医疗保健作用。
那银耳怎么种植呢?下面是为你整理的，希望对您有用。
一、种植季节银耳属于中温型菌类，菌丝生长最适宜的温度为24～25℃，子实体发育适宜的温度为20～25℃。
种植季节以春、秋两季的自然气温最为适宜，也可以采取冬季种植房加温，夏季野外搭荫棚种植，使银耳一年四季都可以种植。
二、培养料的配制种植银耳的原料十分广泛，以棉籽壳最为理想，此外，杂木屑、玉米芯、甘蔗渣等也是常用的原料。
常用的培养料配方为：①棉籽壳85%，麦麸13%，石膏粉1.5%，蔗糖0.5%;②棉籽壳80%，麦麸15%，玉米粉3%;石膏粉1%，蔗糖1%;③杂木屑76%、麦麸20%、石膏粉2%、蔗糖1.3%、硫酸镁0.4%、尿素0.3%。
农户可以根据自己的实际情况，任选一种配方。
配制培养料时，先把木屑、棉籽壳、甘蔗渣等原料进行过筛，剔除混入的沙石、金属、木块等物质。
然后将棉籽壳或木屑倒入拌料场上，堆成山形，再把麦麸从山尖均匀地往下撒开，并把石膏粉均匀地撒向四周。
把上面的干料先搅拌均匀，然后把可溶性的添加物，如蔗糖、硫酸镁、尿素等溶于水中，再倒入干料中反复搅拌均匀。
每100千克干料加水100～130千克，使培养料的含水量在60%左右。
检测的办法是：手抓培养料握紧，如果手指缝间有水渗出，但不滴下，这时候最为适宜。
三、装袋、灭菌、接种1.装袋培养料拌匀后，要及时装入塑料袋内。
种植银耳用的塑料袋通常由高密度低压聚乙烯原料制成，半透明，柔而韧，抗寒、抗张力强，能耐100℃的高温。
种植袋长55厘米左右，直径8～10厘米，袋底密封良好。
规模化种植银耳通常采用装袋机装料，每小时可以装800～1000袋。
装料的方法是：把袋口张开，整袋套进装料机出料口的套筒上，双手托紧塑料袋。
当培养料从套筒源源输入袋内时，右手撑住袋头往内紧压，使培养料装紧装实。
当培养料装到离袋口5厘米左右的位置时，用棉纱线缠扎袋口3～4圈，再反折过来捆扎3～4圈，这样，袋口就密封好了。
银耳菌种规范化生产工艺讲座_六_银耳菌种退化与病害预防技术
银耳菌种规范化生产工艺讲座(六))))银耳菌种退化与病害预防技术丁湖广(福建省古田县新元食用菌研究所,古田352200)关键词银耳;菌种;退化;原因;纯化;病害防治1菌种退化的原因与防止措施通过自然选育、有性杂交、人工诱变和细胞融合等方法,选育出优良菌株,再经过菌丝无性繁殖,应用于生产。
从遗传学上看,这样无性繁殖后代,一般都能保持固有的遗传特性。
但一个新菌株育成后,经数年推广,由于种种原因,总会出现退化现象。
退化的菌种很难复状,不能应用于生产。
111退化原因菌丝在培养基上生长很慢,长势弱,稀疏,伸入培养基深层无力,分泌色素差;子实体形态不一致,大小、厚薄不等,颜色也有所改变;出耳慢或中途停止生长,产量低。
菌种的这种表现,如果不是栽培技术和环境因素所致,那就是菌种退化。
菌种退化的原因主要有以下几方面。
(1)基因突变。
基因突变是菌种退化的主要原因。
它可使原来纯的菌株变为不纯。
银耳为异核细胞,当某一核发生不利的突变,随着传代,核即发生分离,造成性状多样化,菌种出现变异,产量也随之发生变化。
(2)无限继代。
银耳制种技术已成为群众性的生产技术。
群众性菌种生产在技术和条件上差别很大,违反科学生产的现象时有发生。
如有的制种户只作组织分离,不作出耳鉴定;有的把分离出来的菌种直接应用于生产;有的无限制地继代、转管,这些都会加快菌种的退化。
(3)营养不良。
原种的培养基多数用木屑、麦麸和米糠等,配方大同小异。
使用基本相同的培养基,营养成分不能满足其生理要求,长期繁殖下去,便造成营养不良。
或因菌种培养时间长,瓶内养分耗尽,菌丝生长活力由强变弱。
(4)环境欠佳。
菌种发育长期处于不良的环境中,也会加速菌种退化,因为培养条件能对细胞核的数量产生影响。
此外,杂菌污染也会导致母种退化。
112防止措施根据菌种衰老退化的原因,可采取以下有针对性的措施。
(1)减少扩接。
银耳菌种的退化、种性变异,是在繁殖过程中发生的,常用控制菌种移接次数来防止。
银耳菌种的制作
斜面培养基上，加棉塞后置22-24℃下恒温培养6-8天。
当银耳菌丝长至似绣球状如黄豆大小时，再连同香灰母种一起移入接种室（箱）里，按无菌操作用接种铲在距银耳纯菌丝团约2厘米处，接入一小块香灰菌丝母种，培养2天在接种块上便可见到白色菌丝，7天左右即形成白毛团而覆盖银耳纯菌丝团，12-15天在白毛团的上方可见到有红、黄色水珠即为成功。
需要指出，用银耳与香灰菌的斜面混合母种扩接原种时，应切去斜面的前后端，只取其绣球状的银耳纯白菌丝及附近黑灰色的香灰菌丝用于转接。
因此1支斜面母种只能接1瓶原种。
2、瓶装木屑原种混接法 如果没有银耳纯菌丝，将银耳孢子培养出芽孢母种，再接入瓶装木屑培养基制成的香灰菌母种，混合培养而成。
根据接种需要量，按1支香灰斜面母种扩接12-15瓶木屑培养基的比例，将香灰菌母种试管和经灭菌的瓶装木屑培养基，以及接种用的器具，一起放入接种箱里，按无菌操作，用接种铲挑取黄豆大小的香灰菌母种一块，接入木屑培养基瓶中。
接种完毕，移至24-26℃下培养，约经2天即可见到接种块上萌发白色菌丝。
此后要隔天检查，发现杂菌及时检出剔除。
一般培养11天左右，香灰菌丝可向培养基内延伸约3厘米，此时可观察到培养基表面有灰褐色或黑褐色的分泌物，这表明香灰菌丝生长旺盛，应及时接入银耳芽孢母种。
按1：12－15的比例，取银耳芽孢母种试管和培养好的木屑培养基香灰菌母种；一起放入接种室（箱）中，按无菌操作，用无菌接种刀划破香灰菌丝表层，再用无菌接种铲挑取少量银耳芽孢，接入香灰菌丝体中。
混合后将瓶移至23-25℃下培养，经10天左右即可见到银耳芽孢接种处生长浓白色菌丝。
再培养18天左右即出现红、黄色水珠，25天左右便可观察到有扭结状子实体原基，说明培养成功。
1瓶这样的木屑混合种可扩接30-40瓶原种（二级种）。
栽培种的生产 根据原种生长的好坏，耳基大小，银耳菌丝“吃料”的深度，来决定每瓶原种应扩接的瓶数。
为了保证质量，尽量控制在40-60瓶之内。
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银耳菌种生产的几个注意事项
银耳菌种在生产时除了注意无菌操作之外，还有一些要注意的事项，下面小编就为大家介绍下银耳菌种生产的几个注意事项。
1.生物专一性银耳菌丝和香灰菌丝配合也有专一性。
因此，为了生产有效的银耳菌种，我们必须从同一块耳木上分别获得银耳的纯培养（包括酵母状分生孢子或银耳菌丝）和纯的香灰菌丝。
不同地区或同一地区不同耳木（树种）上得来的银耳菌丝和香灰菌丝不能随便调换，随意组合。
否则，就有造成衰败的可能性。
经调换和组合的效果，必须根据银耳菌丝在木屑培养基中定植的情况，以及耳基形成的大小，开片的情况来判断。
凡是银耳菌丝能继续生长，形成耳基和顺利开片的，便可以继续扩大并用于生产，否则就不能使用。
2.接种比例：根据银耳菌丝生长较慢，香灰菌丝生长很快这一个特点，在纯的混合培养时，必须注意银耳菌丝和香灰菌丝的接种比例。
为了达到控制两者的接种比例，采用先培养银耳菌丝，后配香灰菌丝的办法，最为理想。
如果说银耳菌丝的接种比例应达到1000：1也不算过份的（银耳菌丝发展到直径约1cm，其内有成千上万条菌丝，只要配上几条香灰菌丝就可以了）。
否则，银耳菌丝很少，香灰菌丝占绝对优势，将来就不会出耳或出耳率很低。
若采用在香灰菌丝中加人酵母状分生孢子的方法来生产菌种的话，那么银耳酵母状分生孢子的数量是很大的，每毫升培养液中银耳酵母状分生孢子的个数可达10亿-100亿个。
在香灰菌丝生长的木屑培养基中加入酵母状分生孢子液，因酵母状分生孢子分散在木屑颗粒中不集中，而且不是所有的酵母状分生孢子都能萌发成菌丝。
因此，用此法生产银耳菌种，效果不很理想，若得不到银耳菌丝，可以把银耳酵母状分生孢子集中地涂在长了香灰菌丝的木屑培养基表面，这样银耳酵母状分生孢子比较容易萌发。
3.培养条件银耳纯菌种（酵母状分生孢子或银耳菌丝）的培养条件和银耳原种、种植种（混合培养）的培养条件是有一些不同的。
因此，必须注意混合培养的条件，使银耳菌丝和香灰菌丝都能适应同一培养基，同一培养条件。
例如将温度控制在20-28℃范围之内（最好是23-25℃）。
原种的含水量控制在65%，种植种的含水量控制在65%-70%之间。
因为原种培养基稍干，有利于银耳菌丝的生长，不易产生酵母状分生孢子，有利于扩大为种植种；而种植种稍湿一些，有利于酵母状分生孢子的产生和繁殖，此孢子液渗入木屑培养基深处，和香灰菌丝均匀混合，可以弥补银耳菌丝“吃料”不深只长在表层的缺陷，使出耳率更高，更稳定。
还必须根据每一瓶原种耳基生育的状况，来确定该原种是否可以扩大为种植种，以及每瓶应扩大几瓶种植种。
凡是混合培养后，能使银耳酵母状分生孢子萌发，银耳菌丝能继续生长，形成耳基，耳基能不断长大的组合，都是有实际应用价值的菌种。
原种经严格挑选，凡耳基大，银耳菌丝生长多（吃料深的），香灰菌丝粗壮有力，搅拌后扩接的瓶数就多。
反之，就不应扩大为种植种。
为了更加保险起见，每瓶以扩大40-60瓶为宜。
总之，必须使每一瓶新接种的培养基都有银耳菌丝和香灰菌丝，或酵母状分生孢子和香灰菌丝。
或者把原种搅拌之后，塞上棉花塞再培养3-5天，使搅断的银耳菌丝再生新的菌丝，这样才能保证种植种的质量。
4.提纯复壮防止菌种因长期使用，生活力降低，出现耳片发黄，不易开片，再生力差的毛病。
根据生产的方式选用不同菌龄、不同生理成熟度的银耳菌株。
如段木种植时，应选菌龄小，成熟度低，银耳气生菌丝一白毛团旺盛，不易胶质化的菌株；瓶栽时，应选菌岭大，成熟度高，白毛团小，容易胶质化并易开片的菌株。
香灰菌丝应选爬壁力强，羽毛状分枝长的，分解木材能力强的菌株作为段木种植的菌株，而代料种植时，香灰菌丝要稍“弱化”一些的菌株才好，否则满瓶、满袋都是香灰菌丝，有限的营养都被香灰菌丝消耗掉，银耳反而长不大。
原种贮藏的时间太长，耳基很大，培养基的养料消耗过甚，菌种的
生活力已衰退，应弃之不用。
否则使用效果还不如适龄的种植种再扩大培养的菌种。
5.母种保存母种应贮藏在4-15℃的冰箱中。
每1-3个月移植一次。
原种若不马上使用，也应保存在低温、干燥的场所。
种植种满瓶后至45天之内就应尽早地种下去。
银耳纯菌种长期单独保藏，所长的子实体有变黄的趋势；而和“香灰”菌丝混合培养，并经过长期保藏，子实体较不易变黄。
为了得到雪白的银耳，菌种应从色泽洁白的银耳（野生的或家生的）中进行采种。
保种3年以上就应注意色泽的问题。