《生物工程专业分析》新实验指导书
生物工程实验操作技术手册

生物工程实验操作技术手册实验操作技术手册一、实验准备在进行生物工程实验前,需要做好以下准备工作:1. 检查实验室设备和试剂的完好性和可用性,并按照实验要求准备好所需量的试剂;2. 清洗并消毒实验台和仪器设备,确保实验环境的卫生;3. 穿戴实验室个人防护装备,包括实验服、手套、护目镜等,确保安全进行实验。
二、实验步骤1. 实验前的安全操作:a. 确认实验室安全出口的位置和通道畅通;b. 检查紧急安全设备,如安全洗眼器、紧急淋浴等,并确保其可用性;c. 了解实验物质的有害性和毒性,掌握正确的处理方法;d. 注意气体和化学品的储存和使用条件;e. 遵循实验室的安全规范,严禁实验个体行为。
2. 实验操作步骤:a. 实验前准备:根据实验要求,准备好所需试剂和仪器设备,并放置在实验台上;b. 样品处理:根据实验设计,对待测样品进行必要的前处理,如离心、过滤等;c. 操作顺序:按照实验要求,依次进行各项操作步骤,注意保持操作的准确性和稳定性;d. 设备调整:在使用仪器设备前,按照操作手册进行设备调整与校正,并记录相关参数;e. 数据采集:根据实验设计,及时、准确地采集实验数据,并记录在实验记录表中;f. 结果分析:对实验结果进行统计和分析,进行相关数据处理,并撰写实验报告。
三、实验注意事项1. 实验安全:在实验操作过程中,严禁不按规定操作,避免发生实验事故;2. 试剂使用:正确使用试剂,遵循各试剂的存储和使用条件;3. 清洗操作:实验结束后,要彻底清洗使用过的试剂瓶、仪器设备和实验台,保持实验环境整洁;4. 数据记录:实验数据要准确记录并保存,实验记录应详细、完整;5. 结果分析:对实验结果进行合理分析和解释,并与相关理论知识相结合;6. 实验报告:根据实验要求,撰写实验报告,包括实验目的、方法、结果和分析等内容。
四、扩展实验及研究方向在熟练掌握基本实验技术和操作流程后,可以进一步开展相关的扩展实验和深入研究,包括但不限于以下方面:1. 优化实验条件和操作流程,提高实验的可重复性和可靠性;2. 探索新的生物工程实验方法和技术,拓宽实验应用领域;3. 尝试新的实验方案和设计,提高实验结果的准确性和可解释性;4. 开展与生物工程相关的综合研究,探索新的领域和问题。
生物工程专业生物实验实习报告

生物工程专业生物实验实习报告一、引言生物实验实习是生物工程专业学生进行理论与实践相结合的重要环节。
本次实习报告旨在总结和分析我在生物实验实习中的经验和收获。
二、实验名称及目的实验名称:基因克隆与表达实验目的:通过基因克隆与表达实验,掌握生物工程中常用的技术和方法,提高实验操作技巧,理论知识与实践相结合。
三、实验步骤1. DNA提取首先,从细菌培养物中提取目标基因的DNA。
通过细菌培养、细胞破碎和DNA纯化等步骤,获取高质量的DNA样本。
2. PCR扩增将目标基因的DNA片段,利用聚合酶链式反应(PCR)进行扩增。
通过设置合适的温度和时间参数,实现目标基因片段的扩增,为后续的基因克隆打下基础。
3. 氯化钠筛选将PCR产物与载体进行连接,并利用氯化钠筛选的方法,筛选出含有目标基因的阳性克隆子。
该步骤的目的是确保基因的准确克隆,减少假阳性结果。
4. 酶切与连接将目标基因与载体进行酶切,并利用DNA连接酶将两者连接起来。
通过正确选择酶切位点和连接方法,确保基因的正确插入载体。
5. 转化与筛选将连接好的DNA导入到宿主细胞中,利用特定培养基进行筛选。
通过选择适当的培养条件和细菌菌株,筛选出含有目标基因的正常菌落。
6. 培养与表达将筛选出的正常菌落进行培养,促进目标基因的表达。
通过优化培养条件和时间,最大限度地提高基因表达水平。
四、实验结果与分析通过以上实验步骤,我成功地完成了基因克隆与表达实验,并获得了相应的实验结果。
在PCR扩增实验中,我成功扩增出了目标基因的DNA片段,并通过琼脂糖凝胶电泳验证了PCR产物的大小和纯度。
在氯化钠筛选实验中,我筛选出了含有目标基因的阳性克隆子,并进行了进一步的酶切验证。
酶切结果符合预期,表明基因成功克隆。
在转化与筛选实验中,我成功将连接好的DNA导入到宿主细胞中,并通过培养基筛选出了含有目标基因的正常菌落。
这些正常菌落的形成证明了基因的成功转化和表达。
在培养与表达实验中,我选择合适的培养条件和时间,在培养过程中观察到目标基因的表达情况。
生物工程实验指导2010.

生物工程实验指导(试用版)(适用于生物科学和生物技术专业)主编高国辉副主编李劲松周晓辉温州医学院生命科学院2010年1月目录基因工程学实验实验一重组原核表达载体的构建与克隆鉴定 (1)实验二重组蛋白的诱导表达 (9)实验三重组蛋白的聚丙烯凝胶电泳(PAGE) (12)实验四重组蛋白纯化:可溶性His Tag-蛋白的抽提 (16)实验五蛋白质免疫印迹分析(Western Blot) (19)微生物工程学实验实验一种子、发酵培养基制备及培养基实消…………………………………22实验二发酵种子扩大培养、一级种子制备 (24)实验三接种与发酵过程控制管理 (25)实验四发酵液SOD活性检测 (27)生化工程学实验实验一超氧化物歧化酶粗酶液的分离纯化 (28)实验二超氧化物歧化酶蛋白浓度和酶活性的测定 (30)实验三超氧化物歧化酶活性染色鉴定法 (33)实验一重组原核表达载体的构建与克隆鉴定一、实验原理重组表达载体的构建是基因工程实验的第一步,也是目的蛋白进行表达的基础,其关键技术为DNA体外重组,即应用酶学方法,将需表达的基因片段在体外进行特异性切割,与合适的表达载体分子重新连接,组装成一个新的重组表达载体质粒。
表达载体在基因工程中扮演首十分重要的角色,负责克隆目的的基因、指导目的基因在宿主体内的转录和翻译,表达载体内有3个系统完成以上3种功能。
(1)DNA复制及质料DNA的筛选。
这一系统与普通的克隆质料一样,由DNA复制起始位点ori和抗药性基因(如氨苄青霉素抗性基因Amp、四环素抗性基因Tet等)来完成,松驰型ori位点能使载体借用宿主的DNA复制体系大量复制载体DNA,同时克隆的目的基因亦得以大量复制,为基因的高水平转录提供足够多的模板,如载体还装配有其它生物的ori,则可在不同生物宿主中进行载体DNA复制,这类载体称为穿梭载体,截体上的抗药性基因赋予宿主特定的抗药性,使其能在有抗生素的培养条件下正常生长,这样就筛除掉不含载体的宿主,同时保证载体在宿主中的稳定存在。
生物技术与生物工程专业技能作业指导书

生物技术与生物工程专业技能作业指导书第一章生物技术基础 (2)1.1 生物技术概述 (2)1.2 基因工程技术 (3)1.3 细胞工程技术 (3)1.4 生物信息学基础 (3)第二章生物工程原理 (4)2.1 生物反应工程 (4)2.2 生物分离工程 (4)2.3 生物传感器原理 (5)2.4 生物制药工程 (5)第三章酶工程 (6)3.1 酶的性质与分类 (6)3.1.1 酶的性质 (6)3.1.2 酶的分类 (6)3.2 酶的提取与纯化 (6)3.2.1 酶的提取 (6)3.2.2 酶的纯化 (6)3.3 酶的固定化技术 (7)3.4 酶的应用 (7)第四章基因工程 (7)4.1 基因克隆技术 (7)4.2 基因编辑技术 (8)4.3 基因表达调控 (8)4.4 基因治疗技术 (8)第五章细胞工程 (9)5.1 细胞培养技术 (9)5.2 细胞融合技术 (9)5.3 细胞信号传导 (9)5.4 细胞治疗技术 (10)第六章生物制药 (10)6.1 生物药物概述 (10)6.2 抗体类药物 (10)6.2.1 单克隆抗体 (10)6.2.2 双特异性抗体 (11)6.2.3 抗体药物偶联物 (11)6.3 疫苗类药物 (11)6.3.1 灭活疫苗 (11)6.3.2 减毒疫苗 (11)6.3.3 基因疫苗 (11)6.4 基因治疗药物 (11)6.4.1 基因替换 (11)6.4.2 基因修复 (11)6.4.3 基因调控 (11)6.4.4 基因递送系统 (12)第七章生物检测与分析 (12)7.1 生物检测技术 (12)7.2 生物传感器 (12)7.3 生物信息学分析 (12)7.4 生物成像技术 (13)第八章生物材料 (13)8.1 生物材料的分类 (13)8.2 生物材料的制备与改性 (14)8.3 生物材料的应用 (14)8.4 生物降解材料 (14)第九章生物安全与伦理 (15)9.1 生物安全概述 (15)9.2 生物安全防护措施 (15)9.3 生物伦理问题 (16)9.4 生物技术法规与标准 (16)第十章生物技术产业发展 (16)10.1 生物技术产业发展现状 (16)10.2 生物技术产业政策与法规 (16)10.3 生物技术企业运营与管理 (17)10.4 生物技术产业前景与挑战 (17)第一章生物技术基础1.1 生物技术概述生物技术是指应用生物学、生物化学、分子生物学和工程学等学科的基本原理和方法,对生物体或其组成部分进行改造、利用和调控的技术体系。
生物及分析化学实验指导书(精)

生物及分析化学实验指导书(精)介绍本实验指导书提供了一系列关于生物及分析化学实验的详细指导,旨在帮助实验人员正确有效地进行实验操作。
本指导书包含了实验目的、实验步骤、实验材料、实验原理、实验注意事项以及实验结果的记录等内容。
实验目的本实验旨在培养学生对生物及分析化学实验的基本操作技能,并提供相关知识的实践运用。
通过实验,希望学生能够掌握实验步骤的正确操作,熟悉实验仪器和试剂的使用,以及对实验结果进行分析和解释。
实验步骤1. 准备实验所需材料和试剂。
2. 按照实验步骤进行试验操作。
3. 记录实验过程和实验结果。
4. 对实验结果进行分析和解释。
5. 清洗和归还使用的实验仪器和器材。
实验材料- 试剂:XXX- 仪器:XXX- 其他材料:XXX实验原理本实验的原理基于生物及分析化学相关理论,具体实验原理请参考课程教材或相关文献。
实验注意事项1. 在进行实验前,仔细阅读实验指导书并了解相关实验操作。
2. 按照实验步骤进行实验操作,遵循正确的操作顺序。
3. 注意安全操作,佩戴个人防护装备如实验手套、眼镜等。
4. 在实验中注意实验现象的观察和记录,及时记录实验结果。
5. 实验结束后,清洗实验仪器和器材,并归还到指定的位置。
6. 对实验数据进行仔细分析和解释,形成实验报告。
实验结果记录在这个部分,实验人员需要详细记录实验结果,包括实验数据、实验现象以及实验结果的分析和解释。
总结本实验指导书旨在提供生物及分析化学实验的详细指导,帮助实验人员正确有效地进行实验操作。
通过实验的实践,人们可以获取实验技能和相关知识的实践运用,培养对实验操作的能力和实验结果的分析能力。
> 注意:本指导书仅供参考,请按照实际情况进行实验操作,并根据实验结果进行相应的分析和解释。
《生物工业分析》实验教学大纲(生物工程专业)

《生物工业分析》实验教学大纲生物工业分析实验教学大纲课程名称:生物工业分析课程编码:1403250406英文名称:Bio-engineering Industrial Analysis学时:36 学分:1.5适用专业:生物工程课程类别:选修课程性质:专业课先修课程:分析化学、生物化学参考教材:《生物工程分析与检验》一、制定本大纲的依据本大纲依据天津科技大学《本科生课程教学大纲编制规范》以及生物工程本科专业培养目标而制定。
二、本实验课程的具体安排实验项目的设置及学时分配等三、本实验课在该课程体系中的地位与作用生物工业分析实验是生物工程专业的一门专业课程,是一门实践性很强的学科,它的任务是学生在已学过有机化学、分析化学、生物化学等有关课程的基础上,综合运用所学知识,探索解决生物工程质量问题的一般规律,掌握其基本知识与技能。
通过本实验课程的学习,要求学生树立比较完整的生物工程质量观念;掌握常用的含量测定的原理与方法;能够从分析物的化学结构出发、结合理化性质,理解其分析方法之间的关系,并综合运用所学知识,初步具有分析、评价以及控制工艺质量标准的能力。
四、学生应达到的实验能力与标准:从加强基础、培养能力、提高素质的教学目的出发,以生物工程本科生必须具备的基本操作、基本技能和基本理论的教学为基础,在知识结构上注意将能力要求贯穿于实验教学全过程,培养学生独立思考、综合分析、科学思维能力和创新意识,全面提高学生的综合素质。
通过课程学习,应掌握相关的分析理论,加深对本学科专业知识的理解;正确掌握实验中各类化合物的分析方法及操作技术,掌握常用的检测技术在生物工业分析工作中的应用;具有独立开展分析工作的能力,并具有严谨认真,实事求是的科学态度和工作作风。
五、讲授实验的基本理论与实验技术知识(一)、原料中粗淀粉的测定基本内容:淀粉经酸或酶水解生成葡萄糖,所生成的葡萄糖用斐林法测定。
斐林试剂由甲、乙液组成。
甲液为硫酸铜溶液,乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。
《生物化学》实验指导书
《生物化学》实验指导书适用专业:生物技术、生物工程、食品科学与工程生物与食品工程学院生物科学系生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行,培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能,特制定以下实验细则,请同学们严格遵守。
1.实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。
2.严格按照生物化学实验分组,分批进入实验室,不得迟到。
非本实验组的同学不准进入实验室。
3.进入实验室必须穿实验服。
各位同学进入各自实验小组实验台后,保持安静,不得大声喧哗和嬉戏,不得无故离开本实验台随便走动。
绝对禁止用实验仪器或药物开玩笑。
4.实验中应保持实验台的整洁,废液倒入废液桶中,用过的滤纸放入垃圾桶中,禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。
5.实验中要注意节约药品与试剂,爱护仪器,使用前应了解使用方法,使用时要严格遵守操作规程,不得擅自移动实验仪器。
否则,因非实验性损坏,由损坏者赔还。
6.使用水、火、电时,要做到人在使用,人走关水、断电、熄火。
7.做完实验要清洗仪器、器皿,并放回原位,擦净桌面。
8.实验后,要及时完成实验报告。
2006年1月目录生物化学实验细则 (1)目录 (2)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应 (3)实验2 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 (6)实验3 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 (11)实验4 凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 (16)实验5 DNA的琼脂糖凝胶电泳 (20)实验6 唾液淀粉酶的性质和活力测定 (24)实验7生物氧化与电子传递 (25)实验8 植物体内的转氨基作用 (27)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应(3学时)目的要求1. 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。
2. 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。
3. 了解蛋白质变性与沉淀的关系。
原理在水溶液中,蛋白质分子表面形成水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒,所以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相类似。
但是,蛋白质胶体颗粒的稳定性是有条件的,相对的。
生物工程与生物技术作业指导书
生物工程与生物技术作业指导书第1章绪论 (3)1.1 生物工程与生物技术概述 (3)1.2 发展历程与现状 (4)1.3 生物工程与生物技术的应用领域 (4)第2章基因工程 (4)2.1 基因克隆与重组技术 (4)2.1.1 基因克隆的基本步骤 (4)2.1.2 基因重组技术的应用 (5)2.2 基因编辑技术 (5)2.2.1 CRISPR/Cas9基因编辑原理 (5)2.2.2 基因编辑技术的应用 (5)2.3 基因转移与转化技术 (5)2.3.1 基因转移技术 (5)2.3.2 基因转化技术 (6)2.3.3 基因转移与转化技术的应用 (6)第3章蛋白质工程 (6)3.1 蛋白质表达与纯化 (6)3.1.1 引言 (6)3.1.2 蛋白质表达系统 (6)3.1.3 蛋白质纯化方法 (6)3.1.4 实验操作步骤 (6)3.2 蛋白质结构预测与设计 (7)3.2.1 引言 (7)3.2.2 蛋白质结构预测方法 (7)3.2.3 蛋白质设计方法 (7)3.2.4 实验操作步骤 (7)3.3 蛋白质功能研究 (7)3.3.1 引言 (7)3.3.2 蛋白质功能研究方法 (7)3.3.3 实验操作步骤 (8)第4章细胞工程 (8)4.1 细胞培养技术 (8)4.1.1 基本原理 (8)4.1.2 方法 (8)4.1.3 应用 (8)4.2 细胞融合与杂交技术 (8)4.2.1 原理 (9)4.2.2 方法 (9)4.2.3 应用 (9)4.3 干细胞技术 (9)4.3.1 原理 (9)4.3.3 应用 (9)第5章酶工程 (9)5.1 酶的来源与筛选 (9)5.1.1 酶的来源 (10)5.1.2 酶的筛选 (10)5.2 酶的固定化技术 (10)5.2.1 固定化方法 (10)5.2.2 固定化酶的性质 (10)5.3 酶反应器设计与应用 (11)5.3.1 酶反应器设计 (11)5.3.2 酶反应器应用 (11)第6章发酵工程 (11)6.1 发酵过程与控制 (11)6.1.1 发酵过程概述 (11)6.1.2 发酵过程中的关键参数 (11)6.1.3 发酵过程控制策略 (11)6.2 发酵设备与工艺 (12)6.2.1 发酵设备类型 (12)6.2.2 发酵工艺流程 (12)6.2.3 发酵设备与工艺的优化 (12)6.3 发酵产品的提取与纯化 (12)6.3.1 发酵产品提取方法 (12)6.3.2 发酵产品纯化方法 (12)6.3.3 发酵产品提取与纯化工艺优化 (12)第7章生物制药 (12)7.1 生物药物的种类与制备 (12)7.1.1 种类 (12)7.1.2 制备 (13)7.2 生物药物的质量控制与评价 (13)7.2.1 质量控制 (13)7.2.2 质量评价 (13)7.3 生物药物的临床应用与前景 (13)7.3.1 临床应用 (13)7.3.2 前景 (14)第8章生物信息学 (14)8.1 基因组学与蛋白质组学 (14)8.1.1 基因组学 (14)8.1.2 蛋白质组学 (14)8.2 生物信息数据库与分析工具 (14)8.2.1 生物信息数据库 (14)8.2.2 生物信息分析工具 (15)8.3 基因表达谱分析 (15)8.3.1 实验方法 (15)第9章环境生物技术 (15)9.1 废水处理与废弃物资源化 (15)9.1.1 废水处理技术 (15)9.1.2 废弃物资源化 (16)9.2 生物脱硫与生物降解 (16)9.2.1 生物脱硫技术 (16)9.2.2 生物降解 (16)9.3 生态修复技术 (16)9.3.1 污染土壤修复技术 (16)9.3.2 水体生态修复技术 (16)9.3.3 空气质量改善技术 (16)9.3.4 生态系统恢复技术 (16)第10章生物技术的伦理与法规 (17)10.1 生物技术伦理问题 (17)10.1.1 伦理问题的内涵 (17)10.1.2 生物技术伦理原则 (17)10.1.3 我国生物技术伦理现状与挑战 (17)10.2 生物技术法规与政策 (17)10.2.1 生物技术法规体系 (17)10.2.2 生物技术政策发展 (17)10.2.3 生物技术法规与政策的完善 (17)10.3 生物技术的知识产权保护与转让 (18)10.3.1 生物技术知识产权概述 (18)10.3.2 生物技术知识产权保护现状 (18)10.3.3 生物技术知识产权转让与运用 (18)10.3.4 生物技术知识产权保护与转让的挑战与对策 (18)第1章绪论1.1 生物工程与生物技术概述生物工程与生物技术是20世纪后半叶兴起的一门综合性边缘学科,涉及生物学、生物化学、分子生物学、遗传学、细胞学、微生物学、化学、物理学、数学和计算机科学等多个学科领域。
2020年(生物科技行业)生物工程专业实验教学大纲西南大学生命科学学院
(生物科技行业)生物工程专业实验教学大纲西南大学生命科学学院生物工程专业教学大纲生命科学学院二〇〇六年十月《物理化学实验》实验课程教学大纲课程名称物理化学实验课程性质独立设课课程属性基础必修教材及实验指导书名称《物理化学实验》学时学分:总学时18 总学分 1 实验学时18 实验学分 1应开实验学期二年级三学期先修课程无机化学及实验有机化学及实验分析化学及实验壹.课程简介及基本要求物理化学实验是壹门重要的基础实验课。
它通过物理实验方法阐述化学学科最壹般的原理和规律,介绍物理化学实验技术的原理和方法,通过实验直接获取化学物质和化学反应的物理化学参数,使学生加深对物理化学的基本规律和基础理论的理解,训练学生掌握物理化学实验技术和方法,提高他们运用这些基本理论的能力。
本课程以实践环节为主,根据课程的性质、任务、要求及学习的对象,将课程内容分三个层次:基础实验、综合设计性实验和开放实验。
三个教学层次在教学内容安排和教学目标上各有所侧重,前俩个层次是课内实验,主要根据拟定的实验内容,实验方法和步骤进行。
第三个层次,由学生根据所给的题目或者自拟题目,自选仪器药品,独立设计实验步骤且付诸实现。
经过多层次,多方式教学的全面训练后,学生应达到下列要求:1.掌握物理化学基本实验技术和技能,掌握仪器设备测试基本原理2.学会重要物理化学参数和性能的测定3.熟悉误差分析的原理和方法4.熟悉物理化学实验现象的观察和记录,条件的判断和选择,实验数据的测量和处理,实验结果的分析和归纳等方法。
5.进壹步巩固和加深物理化学基本原理的理解,提高综合运用所学知识的能力。
6.能根据需要选学参考书,查阅手册,通过独立思考,深入钻研有关问题,学会自己独立分析问题、解决问题,具有壹定的创新能力。
7.能独立撰写设计说明,准确分析实验结果,正确绘制各类图形。
8.初步了解物理化学的研究方法二.课程实验目的要求《物理化学实验》是继《无机化学实验》、《有机化学实验》和《分析化学实验》课程之后而开设的独立实验课程,它和物理化学理论课相互联系相互补充,具有较强的实践性,是壹门重要的独立基础课,是生物制药专业的必修课。
《生物工程专业分析》新实验指导书解析
《生物工程专业分析》实验指导书适用专业:生物工程贵州大学二OO 七年十二月前言本实验是针对于生物工程专业分析课程开设的,主要内容是通过实验使学生更好的掌握专业分析课堂授课的内容,更直观的了解各类生物工程样品的分析方法和理论原理。
在实验中要求学生熟练掌握分析的基本实验操作技能和方法;对学生进行实际样品的分析测定操作训练,使学生掌握获得正确分析数据的基本过程和基本方法,切实培养他们分析问题和解决问题的能力。
要求学生在实验中应用课堂讲授的理论知识,勤于动手、动脑,实验中认真观察记录现象及结果,做好实验报告。
具体试验项目有游离氨基酸测定、蛋白质测定、粗脂肪测定、还原糖测定、总酸总酯测定、铜的测定、酶活力测定、阿贝折射仪的使用等。
其中蛋白质测定为综合性实验。
实验一:白酒中总酸含量测定实验学时:2学时实验类型:验证实验要求:必修一、实验目的1、掌握酸碱滴定法测定白酒中总酸度的原理及方法二、实验内容白酒中的总酸用标准碱溶液直接滴定,根据所消耗的碱量推算出白酒中总酸的含量。
三、实验原理白酒中的总酸以中和法直接测定,根据所消耗的碱液量计算出白酒中总酸的含量(白酒中总酸以乙酸计)四、实验组织运行要求采用集中授课形式。
五、实验条件1.试剂:(1)5g/L酚酞指示剂(2)0.1mol/L氢氧化钠溶液2.仪器:(1)50ml碱式滴定管(2)50ml移液管(3)250ml三角瓶(4)50ml量杯六、实验步骤准确吸取50ml白酒样品,置入250ml三角瓶中,加50ml水和2滴酚酞指示剂,用0.1mol/L 氢氧化钠溶液滴定至微红色。
记录滴定体积。
同时做空白试验。
七:计算:总酸(以乙酸计g/100ml)=[(V-V0)×C]×0.06006×100/50式中:V――滴定样品时消耗氢氧化钠溶液的量mlV0――滴定空白时消耗氢氧化钠溶液的量mlC――氢氧化钠溶液摩尔浓度mol/L0.06006――每毫升氢氧化钠相当于乙酸的毫克数50――吸取白酒样品体积ml八、实验报告实验预习、实验记录和实验报告具体要求详见附件一和附件二。
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《生物工程专业分析》实验指导书适用专业:生物工程贵州大学二OO 七年十二月前言本实验是针对于生物工程专业分析课程开设的,主要内容是通过实验使学生更好的掌握专业分析课堂授课的内容,更直观的了解各类生物工程样品的分析方法和理论原理。
在实验中要求学生熟练掌握分析的基本实验操作技能和方法;对学生进行实际样品的分析测定操作训练,使学生掌握获得正确分析数据的基本过程和基本方法,切实培养他们分析问题和解决问题的能力。
要求学生在实验中应用课堂讲授的理论知识,勤于动手、动脑,实验中认真观察记录现象及结果,做好实验报告。
具体试验项目有游离氨基酸测定、蛋白质测定、粗脂肪测定、还原糖测定、总酸总酯测定、铜的测定、酶活力测定、阿贝折射仪的使用等。
其中蛋白质测定为综合性实验。
实验一:白酒中总酸含量测定实验学时:2学时实验类型:验证实验要求:必修一、实验目的1、掌握酸碱滴定法测定白酒中总酸度的原理及方法二、实验内容白酒中的总酸用标准碱溶液直接滴定,根据所消耗的碱量推算出白酒中总酸的含量。
三、实验原理白酒中的总酸以中和法直接测定,根据所消耗的碱液量计算出白酒中总酸的含量(白酒中总酸以乙酸计)四、实验组织运行要求采用集中授课形式。
五、实验条件1.试剂:(1)5g/L酚酞指示剂(2)0.1mol/L氢氧化钠溶液2.仪器:(1)50ml碱式滴定管(2)50ml移液管(3)250ml三角瓶(4)50ml量杯六、实验步骤准确吸取50ml白酒样品,置入250ml三角瓶中,加50ml水和2滴酚酞指示剂,用0.1mol/L 氢氧化钠溶液滴定至微红色。
记录滴定体积。
同时做空白试验。
七:计算:总酸(以乙酸计g/100ml)=[(V-V0)×C]×0.06006×100/50式中:V――滴定样品时消耗氢氧化钠溶液的量mlV0――滴定空白时消耗氢氧化钠溶液的量mlC――氢氧化钠溶液摩尔浓度mol/L0.06006――每毫升氢氧化钠相当于乙酸的毫克数50――吸取白酒样品体积ml八、实验报告实验预习、实验记录和实验报告具体要求详见附件一和附件二。
实验二:白酒中总酯含量测定实验学时:2学时实验类型:验证实验要求:必修一、实验目的1、掌握酸碱滴定法测定白酒中总脂的原理及方法二、实验内容白酒中的总脂的测定是先用碱中和游离酸,再加一定量的碱使酯皂化,过量的碱用酸滴定。
三、实验原理先用碱中和白酒中的游离酸,再加一定量的碱使酯皂化,过量的碱用酸滴定。
四、实验组织运行要求采用集中授课形式。
五、实验条件1.试剂:(1)5g/L酚酞指示剂(2)0.1mol/L氢氧化钠溶液(3)0.1mol/L盐酸溶液2.仪器;(1)50ml碱式滴定管(2)50ml酸式滴定管(3)50ml移液管(4)250ml三角瓶(5)50ml量杯六、实验步骤准确吸取50ml白酒样品,置入250ml三角瓶中,加50ml水和2滴酚酞指示剂,用0.1mol/L 氢氧化钠溶液滴定至微红色(不可过量)。
再准确加入25.0ml 0.1mol/L氢氧化钠溶液,放置过夜皂化(或接上回流冷凝器,于沸水浴中回流皂化半小时),用0.1mol/L 盐酸溶液滴定至红色刚刚消失。
记录盐酸溶液用量体积。
七、计算:总酯(以乙酸乙酯计g/100ml)=(C1V1-C2V2)×0.08812×100/50 式中:V1――氢氧化钠溶液的量mlV2――滴定样品时消耗盐酸溶液的量mlC1――氢氧化钠溶液摩尔浓度mol/LC2――盐酸溶液摩尔浓度mol/L0.08812――每毫升盐酸相当于乙酸乙酯的毫克数50――吸取白酒样品体积ml八、思考题:第一次用氢氧化钠滴定的目的是什么?九、实验报告实验预习、实验记录和实验报告具体要求详见附件一和附件二。
实验三:粗脂肪含量测定实验学时:6学时实验类型:验证实验要求:必修一、实验目的1、了解索氏抽提器的构造2、掌握索氏抽提法测定样品中粗脂肪的原理及方法二、实验内容样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提出,蒸出溶剂所得的物质,称为粗脂肪。
三、实验原理本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。
通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。
用本法提取的脂肪性物质为脂肪类物质的混合物,其中含有脂肪、游离脂肪酸、磷脂、酯、固醇、芳香油及某些色素等。
因此,称为粗脂肪。
四、实验组织运行要求采用集中授课形式。
五、实验条件1.试剂:(1)无水乙醚或石油醚(沸程30℃至60℃)2:仪器:(1)索氏提取器(2)恒温水浴锅(3)烘箱(4)脱脂棉花(5)滤纸(6)分析天平六、实验步骤1:样品预处理:称取样品的重量根据材料中脂肪的含量而定,通常脂肪含量在10%以下的,称取样品10-12克;脂肪含量为50-60%的,则称取样品2-4克,(可以用测定水分后的样品)。
将样品在80-100℃烘箱去水分。
一般烘4小时,烘干时要避免过热。
冷却后,准确地称取一定量样品,必要时,拌以精制海砂,无损地移入滤纸筒内,用脱脂棉塞严,将滤纸筒放人索氏提取器的提取管内,注意勿使滤纸筒高于提取管的虹吸部分。
2:抽取:将洗净的提取瓶在105℃烘箱内烘干至恒重,加乙醚约达到提取瓶容积的1/2~2/3,然后将提取器各部分连接,注意不能漏气。
加热提取时,应在电热恒温水浴中进行(水浴温度约为40-50℃),严禁用火焰直接加热索氏提取器。
在加热时乙醚蒸发,乙醚蒸汽由连接管上升至冷凝器,凝结成液体滴入提取管中,此时样品内的脂肪为乙醚液面超过虹吸管高度后溶有脂肪的乙醚虹吸管流入提取瓶,循环抽提,调解水浴温度,使乙醚每小时循环3-5次,抽提时间视样品的性质而定,一般需6-12小时,样品含有脂肪是否提取完全,可以用滤纸来粗略判断,从提取管内吸取少量的乙醚并滴在净的滤纸上,待乙醚干后,滤纸上不留有油脂的半点则表示已经提取完全。
提取完全后,再将乙醚蒸到提取管内,待乙醚液面达到虹吸管的最高处以前,取下提取管。
3:称重和计算:将提取瓶中的乙醚全部蒸干,洗净外壁,置于105℃烘箱干燥至恒重,按下式计算样品的粗脂肪百分含量。
粗脂肪含量(%)=(m2-m1)×100/m式中:m—称取试样质量(g)m1—抽提瓶质量(g)m2—抽提瓶与粗脂肪质量(g)七:讨论(1)乙醚易燃(BP:34.6℃),在抽提、蒸发或蒸馏回收时,切忌明火加热。
(2)试样需干燥,否则有机溶液不易渗透,使结果偏低。
试样粉碎度以过40目筛为宜。
颗粒大太试样,脂肪不易抽提完全,颗粒太小试样,易透过滤纸筒,使抽提物增重。
(3)有机溶剂应无水,否则试样中碳水化合物及无机物易被抽提,使结果偏高。
(4)脂肪含量较低的试样,由于抽提质量与粗脂肪质量差太大,测定结果误差较大。
此时可以采用称重抽滤前后试样滤纸筒,求得粗脂肪含量(抽提前后的试样滤纸筒,都应于(105±2)℃烘干后称重)。
(5)放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管,否则乙醚不易穿透样品,脂肪不能全部提出,造成误差。
(6)碰到含多量糖及糊精的样品,要先以冷水处理,等其干燥后联同滤纸一起放入提取器内。
(7)提取时水浴温度不能过高,一般使乙醚刚开始沸腾即可(约45℃左右)。
回流速度以每8-12次/时为宜。
(8)冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管,这样不仅可以防止空气中水分进入,而且还可以避免乙醚挥发在空气中,这样可防止实验室微小环境空气的污染。
如无此装置,塞一团干脱脂棉球亦可。
(9)如果没有无水乙醚可以自己制备,制备方法如下:在1000毫升乙醚中,加入无水石膏50克,振摇数次,静置1 0小时以上蒸馏,收集35℃以下的馏液,即可应用。
(10)将提取瓶放在烘箱内干燥时,瓶口向一侧倾斜45℃放置使挥发物乙醚易与空气形成对流,这样干燥迅速。
(11)样品及醚提出物在烘箱内烘干时间不要过长,因为一些很不饱和的脂肪酸,容易在加热过程中被氧化成不溶于乙醚的物质;中等不饱和脂肪酸,受热容易被氧化而增加重量.在没有真空干燥箱的条件下,可以在100-105℃干燥1.5-3小时。
八、思考题1.采用无水乙醚作提取剂时,若样品未经过干燥,测定结果会怎样?2.索氏抽提法是否对所有的样品都适用?九、实验报告实验预习、实验记录和实验报告具体要求详见附件一和附件二。
实验四:还原糖的测定实验学时:4学时实验类型:验证实验要求:必修一、实验目的1、掌握费林法测糖的原理及方法二、实验内容费林法测定还原糖的原理和方法。
三、实验原理碱性酒石酸钾钠甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。
在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用还原糖滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀,进而与亚铁氰化钾反应生成可溶性的浅黄色亚铁氰化钾铜络合物。
待二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖次甲基蓝还原,溶液蓝色消失,即为滴定终点。
根据样液的消耗量可计算出还原糖含量。
四、实验组织运行要求采用集中授课形式。
五、实验条件1.试剂:(1)碱性酒石酸铜甲液:称取15克硫酸铜(CuSO4.5H20)及0.05克次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000毫升(2)碱性酒石酸铜乙液:称取50克酒石酸钾钠及75克氢氧化钠,溶于水中,再加入4克亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000毫升,贮于橡胶塞玻璃瓶内(3)1g/L转化糖标准溶液(4)200g/L氢氧化钠溶液(5)6mol/L盐酸溶液(6)乙酸锌溶液:称取21.9g乙酸锌,加3ml冰醋酸,加水溶解并稀释到100ml。
(7)106g/L亚铁氰化钾溶液2.仪器:(1)50ml酸式滴定管(2) 5ml、10ml、25ml、50ml、100ml移液管(3)250ml三角瓶(4)250ml容量瓶(5)25ml量杯(6)恒温水浴锅六、实验步骤1.样品处理(1)乳类、乳制品及含蛋白质的饮料称取2.5~5.0g固体样品或吸取25~50mL液体样品,置于250mL容量瓶中,加50mL水,摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌及5mL亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,混匀,静置0.5h。
用干燥滤纸过滤,收集滤液供测使用。
(2)酒精性饮料吸取100mL样品于蒸发皿中,用1mol/L NaOH中和至中性,在沸水浴上蒸发至原体积的1/4后,移入250mL容量瓶中,加50mL水混匀,以后按(1)操作。
(3)含多量淀粉的食品称取10~20g样品,置于250mL容量瓶中,加200mL水,在45℃水浴中加热1h.振摇。
取出冷却后加水至刻度,混匀,静置。
吸取20mL上清液于另一250mL 容量瓶中,以后按(1)操作。
(4)汽水等含CO2饮料吸取100mL样品于蒸发皿中,在沸水浴中除去CO2,移入250mL 容量瓶,并用水洗涤蒸发皿,洗液并入容量瓶,加水至刻度,混合后备用。