化妆品皮肤致敏检测方法
化妆品不良反应测试标准
化妆品不良反应测试标准
化妆品不良反应测试标准通常根据国际标准ISO 10993-10《生物医疗器械评价－第10部分：粘膜刺激和敏感性试验》进行。
这个标准是用于评估化妆品和其他生物医疗器械对皮肤和黏膜的刺激性和过敏性的试验方法。
该标准要求进行以下测试：
1. 皮肤刺激性测试：通过将化妆品或其成分直接接触到皮肤上，观察是否出现红肿、水泡、溃疡等刺激反应。
2. 眼睛刺激性测试：将化妆品或其成分接触到兔子或其他动物的眼睛上，观察是否出现红肿、眼结膜炎等刺激反应。
3. 皮肤致敏测试：通过接触化妆品或其成分与动物进行敏感性测试，观察是否出现皮肤过敏反应，如红疹、瘙痒等。
4. 皮肤光敏感性测试：将化妆品或其成分涂抹到动物皮肤上，然后曝光于紫外线下，观察是否出现光敏感反应。
除了上述测试外，还可以根据需要进行其他特定的测试，如细胞毒性测试、基因毒性测试等。
需要注意的是，具体的测试方法和要求可能会根据国家和地区的不同而有所差异。
因此，在进行不良反应测试之前，应参考当地的法规和标准，并遵循相关的测试程序和要求。
化妆品行业质量检测标准
化妆品行业质量检测标准【引言】化妆品作为广大消费者日常生活中必不可少的产品之一，其质量和安全问题备受关注。
为了保障消费者的权益和生活质量，化妆品行业制定了一系列的质量检测标准，旨在规范产品生产和销售过程，把关产品质量，保障消费者权益。
本文将探讨化妆品行业质量检测的标准及相关要求。
【一、产品成分检测】1. 成分成分检测是化妆品行业质量检测的基础。
化妆品生产企业应确保所使用的原料成分符合国家相关规定和标准，不得添加有毒有害物质。
具体检测项目包括但不限于：防腐剂、重金属、激素类物质、致敏物质等。
2. 化妆品生产企业应建立完善的原料进货台帐，并定期对原料进行抽检，确保原料的纯度和质量。
3. 检测机构应采用合适的检测方法和仪器设备，对产品中的成分进行定量检测，并及时发布检测结果。
【二、产品安全性检测】1. 皮肤刺激性测试：化妆品必须经过皮肤刺激性测试，确保产品不会对人体皮肤产生不良反应。
测试方法包括但不限于：人体敏感性测试、参比物测试、皮肤病理学检测等。
2. 角质层透过性测试：化妆品应经过角质层透过性测试，确保产品对皮肤的渗透性符合安全要求。
检测方法包括皮肤透过实验和模型法等。
3. 眼刺激性测试：针对眼部产品，必须进行眼刺激性测试，确保产品对眼部不会产生不良反应。
测试方法包括但不限于：兔眼试验、膜毒理试验等。
4. 致敏性测试：化妆品应进行致敏性测试，以确保产品对人体不会引起过敏。
主要测试方法包括皮肤致敏实验、大鼠局部淋巴结试验等。
5. 光敏感性测试：对于含有防晒成分的化妆品，应进行光敏感性测试，确保产品具备良好的防晒效果。
测试方法包括光敏试验和光敏反应评估等。
【三、产品稳定性检测】1. 化妆品在生产过程中应保持稳定性，不易受到外界因素的影响而变质或失效。
稳定性检测主要包括理化性质、抗氧化性、耐热性等方面的测试。
2. 化妆品稳定性检测应包括长期稳定性试验、加速稳定性试验等，确保产品在正常使用条件下能够保持其性能和品质。
化妆品检验规则及稳定性试验
化妆品检验规则及稳定性试验化妆品是指用于人体皮肤、毛发、甲板及口唇等特定部位上的外用品，包括液体、固体和半固体制剂等。
为了确保化妆品的安全性和质量，化妆品行业普遍遵循一定的检验规则和进行稳定性试验。
一、化妆品检验规则：1.国家标准：根据国家相关法规要求，化妆品需要符合国家标准的规定。
国家标准一般由行业标准化机构制定，包括对产品的成分、性能、使用说明等方面的要求。
2.功能性检验：化妆品通常会标明一些功能性指标，如抗皱、美白、保湿等。
这些功能性指标可通过实验室测试来验证产品的有效性，例如通过皮肤测量仪检测皮肤弹性、透明度等指标来评估抗皱效果。
3.安全性检验：化妆品必须符合一定的安全性标准。
常见的安全性检验包括皮肤刺激性、敏感性测试、眼刺激性测试、致敏性测试等。
这些测试可以通过人体试验、动物试验或体外试验等方法进行。
4.包装检验：包装是保护化妆品的重要手段，包装要具备一定的质量和功能。
包装检验涉及到包装容器的抗压、抗撞、气密性等方面的测试，以确保包装的完整性和稳定性。
5.重金属检测：一些重金属元素如铅、汞等在化妆品中是禁用的，因为它们有毒性和致癌性。
因此，化妆品需要进行重金属检测，确保产品中重金属含量符合国家规定的安全标准。
二、稳定性试验：化妆品的稳定性试验是确定产品在一定条件下的物理、化学和微生物稳定性的重要手段。
稳定性试验的目的是检测产品在其使用寿命内，是否能够保持其物理性质、化学性质和微生物质量的稳定。
稳定性试验主要包括以下几项：1.热稳定性试验：将化妆品样品在高温条件下放置一段时间，检测其物理性质和化学性质的变化。
例如，一些固体化妆品在高温下可能会融化或失去其原有的形状。
2.冷稳定性试验：将化妆品样品在低温条件下放置一段时间，检测其物理性质和化学性质的变化。
例如，一些液体化妆品在低温下可能会变得粘稠或凝固。
3.光稳定性试验：将化妆品样品暴露在不同光照条件下，检测其物理性质和化学性质的变化。
光照条件可能包括可见光、紫外线等，目的是确定产品对光的稳定性。
组合应用替代方法评价5种化妆品中常用防腐剂的皮肤致敏性
组合应用替代方法评价5种化妆品中常用防腐剂的皮肤致敏性王瑞;王欢;韩雨晴;赵金枫;颜士玉;盘瑶【期刊名称】《日用化学品科学》【年(卷),期】2023(46)1【摘要】采用基于不良反应结局路径(AOP)开发的体外致敏性检测方法对5种常用防腐剂进行皮肤致敏性评估。
根据整合测试和评估方法(IATA)的3选2原则,使用直接多肽反应试验(DPRA)和人细胞系活化试验(h-CLAT)分别对化妆品中常用的防腐剂苯氧乙醇、4-羟基苯甲酸甲酯、4-羟基苯甲酸丙酯、咪唑烷基脲和DMDM 乙内酰脲进行检测。
其中,直接多肽反应试验和人细胞系活化试验参照OECD 442C/442E指南的内容进行。
实验结果显示,苯氧乙醇、4-羟基苯甲酸甲酯在DPRA和h-CLAT中均为阴性;咪唑烷基脲和DMDM乙内酰脲在2个试验中均表现出阳性结果;而4-羟基苯甲酸丙酯在DPRA中为阴性,h-CLAT中为阳性。
该研究结果表明,甲醛释放体类防腐剂咪唑烷基脲和DMDM乙内酰脲是皮肤致敏物,而苯氧乙醇和4-羟基苯甲酸甲酯不是皮肤致敏物,基于文献调研结合更多的实验数据判定4-羟基苯甲酸丙酯为非致敏物。
DPRA和h-CLAT的组合测试弥补了单一方法检测的局限性,适用于化妆品原料皮肤致敏性的初筛。
【总页数】8页(P20-27)【作者】王瑞;王欢;韩雨晴;赵金枫;颜士玉;盘瑶【作者单位】北京工商大学化学与材料工程学院化妆品系;北京市植物资源研究开发重点实验室;北京工商大学化妆品监管科学研究院【正文语种】中文【中图分类】TQ658【相关文献】1.一种新型in silico模型在化妆品原料皮肤致敏性初筛中的应用2.体内外方法检测化妆品用防腐剂的致敏性3.采用DPRA替代方法评价3种香料的皮肤致敏性4.《日用化学品安全评价技术创新—替代方法》专题二基于有害结局通路原理的皮肤致敏测试替代方法进展5.基于AOP策略的体外替代试验在化妆品皮肤致敏性评价中的应用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
儿童过敏原检测的检查方法
儿童过敏原检测的检查方法儿童过敏原检测的检查方法可分为体内试验和体外试验。
那么关于儿童过敏原检测的检查方法是怎样的呢？下面就是小编给大家带来的儿童过敏原检测的检查方法，希望大家喜欢!儿童过敏原检测的检查方法一一：体内试验1.皮内试验：通过皮内注射过敏原，经过一定时间后观察皮肤的反应，根据皮肤反应的情况确定是否对这种过敏原过敏。
2.点刺试验：点刺试验可视为一种特殊的皮内试验，其方法是先将点刺皮试液滴在皮肤上，然后用点刺针穿过液滴，刺入皮内。
皮肤的点刺液仅为皮内试验的万分之一，安全性较高。
由于皮损小，患者无痛苦。
我科采用的是国际标准化抗原--德国阿罗格点刺液。
a.吸入性过敏原包括螨虫、霉菌、艾蒿、榆柳杨树、动物皮毛、花粉等。
b.食物性过敏原包括鱼虾蟹、猪牛羊肉、奶、蛋、豆、花生、调味品等。
均为15分钟出结果。
【原理】：当有某种变应原进入皮肤时，对某些物质有速发型过敏反应的患者，立即特异性地引起皮肤内的肥大细胞脱颗粒，释放组胺等活性物质，导致局部毛细血管扩张(红斑)，毛细血管通透性增强(水肿、风团)，阳性者表示对该抗原过敏。
【操作方法】：先将点刺皮试液滴在皮肤上，然后用点刺针穿过液滴，轻轻刺入皮内。
3.斑贴试验：斑贴试验主要用于接触性皮炎的检查。
【方法】:将试剂贴在皮肤上观察一段时间后，根据皮肤对接触物的反应判断是否对这种物质过敏。
采用欧洲标准化斑贴试剂，检测精确。
包括药物、橡胶制品、护肤品、防腐剂、玩具、家装材料、染发剂、印刷品、纺织染料、漂白剂、金属饰品、香料等工农业及日化产品等二十大类数百种小类的过敏原。
【原理】将可疑致敏物质敷贴于患者皮肤上，通过皮肤或粘膜进入机体后由抗原呈递细胞将抗原呈递给T淋巴细胞，使特异性T淋巴细胞活化，诱发炎症反应。
适应症：a.接触性皮炎、湿疹、职业性皮肤病等因接触某些物质引起的变态反应发生的皮肤病。
b.当病因不明或有数种物质接触，需要寻找病因时，可做斑贴试验。
具体方法：将试剂贴在皮肤上观察一段时间后，根据皮肤对接触物的反应判断是否对这种物质过敏。
化妆品的检验方法
化妆品的检验方法
微生物检验是化妆品卫生性的重要检验方法。
微生物检验主要包括总
菌落数、大肠菌群、霉菌和酵母菌等指标的检测。
常用的微生物检验方法
有菌落计数法、膜过滤法和前处理+涂布法等。
此外，还可以使用PCR技
术对化妆品中可能存在的病原微生物进行检测。
稳定性测试是为了评估化妆品在存储和使用过程中的物理和化学稳定性。
稳定性测试主要包括外观、pH值、粘度、溶解度、离析和沉淀等指
标的测定。
稳定性测试可以确定产品的保存期限，也可以评估产品的质量
和性能。
生物学活性测试用于评估化妆品的功效和安全性。
生物学活性测试主
要包括皮肤刺激性、致敏性、眼刺激性和抗菌性等的测试。
常用的生物学
活性测试方法有皮肤刺激试验、皮肤致敏试验、眼刺激试验和抗菌试验等。
除了上述主要的检验方法外，还可以根据具体需求进行其他相关测试，如光敏性、防晒性能、抗氧化性能等。
此外，还要注意遵守产品标准和相
关法规的要求，并参考国家和国际标准组织发布的相关标准方法进行检验。
综上所述，化妆品的检验方法主要包括化学分析、微生物检验、稳定
性测试和生物学活性测试等。
通过这些检验方法，可以确保化妆品的安全性、卫生性和质量标准，保护消费者的健康和权益。
pq指数检测方法
pq指数检测方法（最新版3篇）目录（篇1）1.引言2.PQ 指数的定义和作用3.PQ 指数的检测方法3.1 直接法3.2 间接法4.应用实例5.结论正文（篇1）【引言】随着科学技术的快速发展，对于各种物理量的检测和测量也越来越重要。
其中，PQ 指数作为衡量一个物质性质的重要参数，在多个领域都有着广泛的应用。
为了准确获取 PQ 指数，研究者们提出了多种检测方法。
本文将对这些方法进行介绍和分析。
【PQ 指数的定义和作用】PQ 指数，全称为“潜在致敏性指数”，是一种衡量物质潜在致敏性的指标。
它通过对物质的物理、化学性质进行综合评价，以预测该物质对人体皮肤致敏的可能性。
PQ 指数的取值范围为 1-100，数值越小，表示物质的致敏性越高。
在化妆品、洗涤剂等日用化学品领域，PQ 指数的检测具有重要意义。
【PQ 指数的检测方法】PQ 指数的检测方法主要分为直接法和间接法两种。
直接法是指通过实验直接测定物质对皮肤的致敏性。
具体操作是将待测物质涂抹在志愿者皮肤上，观察一段时间后，根据皮肤出现红肿、瘙痒等过敏反应的程度来判断物质的 PQ 指数。
这种方法的优点是结果准确可靠，但缺点是对志愿者有一定风险，且操作复杂，耗时较长。
【间接法】间接法是指通过检测物质的物理、化学性质，结合计算机模拟等手段来预测物质的 PQ 指数。
这种方法的优点是操作简便，速度快，对志愿者无风险。
但缺点是预测结果可能受到一些未考虑的因素影响，从而导致误差。
目前，常用的间接法包括经验公式法、人工智能法等。
【应用实例】在化妆品行业，为了保证产品的安全性，企业通常会采用 PQ 指数检测方法对产品成分进行评估。
通过检测和比较不同成分的 PQ 指数，可以筛选出潜在致敏性较低的原料，从而降低产品的致敏风险。
【结论】总之，PQ 指数检测方法在保障化妆品等日用化学品安全方面具有重要作用。
目录（篇2）1.引言2.PQ 指数的定义和作用3.PQ 指数的检测方法4.PQ 指数的应用领域5.总结正文（篇2）在现代科技发展中，各种检测技术应运而生，为各个领域提供了有效的检测手段。
sds标准分61
sds标准分61SDS标准分61是一种用于评估物质在皮肤引起刺激性和过敏原的化学物质的方法。
它是一种常见的实验，通常用于评估化妆品、清洁剂、医疗器械等产品的安全性。
通过对参与实验的志愿者进行皮肤接触测试，可以评估化学物质对皮肤的刺激性和过敏原性，从而确保产品的安全性和合规性。
SDS标准分61的评估方法主要分为两个部分：皮肤刺激性测试和致敏性测试。
在皮肤刺激性测试中，研究人员将化学物质涂抹在志愿者的皮肤上，观察其是否引起炎症反应、红肿、刺痛等刺激性症状。
而在致敏性测试中，则在皮肤刺激性测试的基础上，通过更长时间的暴露和多次接触，观察是否会引起过敏反应，如皮疹、过敏性炎症等。
通过对化学物质进行SDS标准分61测试，可以及早发现潜在的皮肤刺激性和过敏性问题，从而减少产品对人体的危害。
因此，越来越多的化妆品、清洁剂等生产企业开始重视SDS标准分61测试，并将其作为产品研发和检测的重要依据。
除了生产企业外，消费者也可以通过关注产品的SDS标准分61测试结果来选择安全性更高的产品。
在购买化妆品、清洁剂等产品时，可以通过查看产品说明书或官方网站上的测试报告，了解产品是否进行过SDS标准分61测试以及测试结果如何。
这样可以更好地保护自己的皮肤健康，避免使用可能对皮肤造成损害的产品。
梳理一下本文的重点，我们可以发现，SDS标准分61是一种重要的皮肤安全性评估方法，对于化妆品、清洁剂等产品的安全性评估具有重要意义。
通过严格遵循SDS标准分61的测试方法，可以更好地保障产品的安全性和合规性，有效预防产品可能引起的皮肤问题，保护消费者的健康。
希望未来SDS标准分61的应用能够更加广泛，为人们提供更加安全的产品选择。
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化妆品皮肤致敏检测方法整理化妆品引起的皮肤过敏可分为诱导接触、诱导阶段和激发接触三个阶段, 诱导接触是由于机体接触过敏原而诱导出致敏状态, 此时皮肤产生较轻的反应或无明显反应, 经过一段时间( 几周, 甚至几年) 的诱导期, 如果机体再次接触过敏原, 就会引起迟发性超敏感反应, 且在最初染毒部位以外的皮肤均可发生。
皮肤致敏可解分为5 个方面: ①化学物穿透进入皮肤; ②与内源性蛋白反应;③皮肤代谢, 有的化学物, 称为前半抗原, 需要通过皮肤代谢进行活化成为半抗原之后才具备结合皮肤蛋白的能力。
④树突细胞( D C ) 激活: 半抗原化的蛋白被未成熟的D C 细胞识别, 导致D C活化, 然后启动一系列的反应。
激活后的D C 具有一些特性, 如上调细胞表面标志物(C D 83 或c D 86) , 分泌多种细胞因子( I L 一1β) , 下调参与抗原摄取的蛋白( 如水通道蛋白)。
⑤抗原特异性免疫反应。
传统人体实验单次斑贴试验: 受试者接受单次斑贴, 分别持续24、72 或96 h , 在诱发期间和去除斑贴后的10一14d, 用激发斑贴作用48 h 后, 对皮肤反应进行评分。
通常在激发斑贴后, 需继续试用产品4w , 该试验仅能检测潜在的有效致敏剂,敏感性不足。
人体重复斑贴试验: 重复斑贴基本上与上述方法相同, 不同的是在1 0一14d 的致敏诱导期间, 每隔2d 在同一部位连续给予受试物数次; 2 周后, 必须在另一位置的皮肤上再做一次斑贴测试。
人体最大化试验: 包括同一皮肤位置的5 次重复的4 h8 封闭式斑贴, 在去除和再施加斑贴之间有24 h 的休止期。
刺激性物质的浓度是引起中等程度红斑的浓度, 对非刺激物质, 试验部位诱发前预先经5% 的S L S 斑贴2 h4 处理。
最后一次诱发斑贴后, 休止2 周。
在发生轻微刺激反应的皮肤部位经4 h8 封闭斑贴后进行评分,记录致敏指数。
人体最大化试验可能对皮肤造成严重的后果, 操作起来有一定的风险。
通常认为, 已通过动物实验或其它有效的方法证实为致敏原的化妆品原料, 不应当再用志愿者进行测试。
由于每次测试通常需要15 0一200 名志愿者参与, 不仅耗时,且非常昂贵, 尽管考虑使用人体最大化试验可能会减少志愿者数量,但这种测试会增加某一反应的严重程度。
而且人体志愿者个体反应差异较大,为了获得95 % 置信区间, 仍然需要大量志愿者参与才能获得可靠结果。
但基于伦理的考虑, 人体试验总是难以实现预期的效果。
体外代替方法动物实验豚鼠最大值试验( Guinea, G PMT)使用福氏完全佐剂作为免疫增强剂, 试验包括皮内注射、局部接触诱导和激发封闭斑贴三个过程。
试验组至少10 只豚鼠, 对照组5 只, 诱导受试物浓度为能引起皮肤轻度刺激反应的最高浓度, 激发接触受试物浓度为不能引起皮肤刺激反应的最高浓度。
第0 天( 诱导接触) , 将受试物皮内注射人豚鼠颈背部皮下, 第7d( 诱导接触) 将涂有受试物的封闭斑贴贴敷在同一注射部位去毛区固定4 8 h。
2 周后第21d ( 激发接触),再将涂有受试物的斑贴贴敷在同一注射部位去毛区固定2h4。
激发接触后, 除去受试物斑贴后24h、48h 和72h观察和比较实验组与对照动物的皮肤反应强度。
B ue hl er 封闭斑贴试验( B ue hler Test ,B T ) 不使用佐剂, 只在诱导期和激发期局部皮肤上涂抹受试物。
试验选用至少20 只豚鼠, 对照组至少10 只。
受试物诱导浓度和激发浓度与G P M T 相同, 试验时直接将受试物斑贴涂在去毛皮肤上, 封闭贴敷6h。
第7 天和16 天以同样方法重复一次。
第28 天在豚鼠背部另一侧皮肤上涂抹受试物斑贴固定6h, 进行激发接触。
激发接触后24 h和48h 观察皮肤红斑和水肿形成。
由于没有使用F C A 免疫增强剂来刺激免疫系统,B T 的灵敏度比G P M T 低。
LLNA，(小鼠局部淋巴结实验):是鉴别皮肤变态反应的替代方法之一, 20 02 年被O E C D 正式采用为试验指南( T G 429 ), 同时也是被欧盟67 5/ 4 8 / EE c 认可的方法(B 42 )的方法。
其原理是皮肤变态反应在诱导阶段即可引起接触部位局部淋巴结T 细胞的活化和增殖, 增殖反应与化学物的剂量( 即致敏原的致敏力) 成比例, 因此可以通过比较受试物与溶剂对照引起淋巴细胞增殖的剂量一反应关系( 即刺激指数,SI ) 来评估增殖状况。
当刺激指数≧3时, 提示受试物是潜在的皮肤致敏物。
近年来又改进新方法，LLNA: Brd U-ELISA改良法。
为掺入溴脱氧尿嘧啶核苷( Brd U) 和酶联免疫吸附测定( ELISA) 的LLNA方法对淋巴结重量、刺激指数( SI) 和EC 3值等致敏性指标进行分析，EC3值代表的是被测化学物质能够诱导出引流淋巴结中细胞增殖刺激阈值的必需浓度，试验同时应设赋形剂对照。
同时还测量耳厚差和耳重刺激性指标，从而全面评价化学物的刺激性和致敏性。
基于法规限制和伦理方面的关怀，以及动物皮肤与人类皮肤的差异，人们做了很多工作努力寻找可以替代动物实验的方法预测化学物质的致敏性。
替代动物实验体外方法对体内皮肤致敏发生过程的研究，目的在于开发模仿体内致敏过程的系统模型。
从概念上讲，体外试验方法必须解决引起ACD(过敏性接触皮炎) 的关键步骤，这是非动物的替代试验方法应追寻的基本理论。
由于人的LCs 比较稀缺并且容易自发激活，而DC 样细胞系，比如THP-1，U937 以及MUTZ-3，常用来替代人LCs 进行体外皮肤致敏性研究。
这些细胞在接触致敏物后会产生类似于体内DCs 活化后的一些变化，比如，分子标记表达的升高，以及细胞因子的分泌。
Four alternative tests have so far been submitted to ECVAM（欧洲替代方法验证中心）prevalidation: (i) MUSST and (ii) h-Clat assess surface markers on dendritic cell lines, (iii) the direct peptide reactivity assay (DPRA) measures reactivity with model peptides and (iv) theKeratinoSensTM assay which is based on detection of Nrf2-induced luciferase.h-CLAT技术(人源细胞系激活)人细胞系激活试验主要通过检测人THP-1 （人急性单核细胞白血病细胞株）细胞接触化学物后细胞表面标志物以及信号通路的变化判断其是否具有致敏性。
通过流式细胞仪检测PI( propidium iodide，碘化丙啶) 染色结果来评价测试样品的细胞毒性。
根据PI 染色结果的数据，从中选取基于细胞活力75% ( cell viability，CV75 ) 剂量的8 个剂量组进行试验，样品处理细胞时间为24h。
使用FITC( fluorescein isothiocyanate ，异硫氰酸荧光素) 标记的抗 CD86，抗 CD54 以及同型对照的单克隆抗体培养测试样品处理过的细胞30min ，用流式细胞仪分析 CD86 和 CD54的荧 光强度。
最终通过计算RFI 值来评估测试样品的致敏性。
RFI( % ) =MFIMFI MFI MFI 空白对照细胞同型对照空白对照细胞试剂处理细胞同型对照试剂处理细胞--，MFI:平均荧光强度。
每种化学物测定 3次其细胞活力和 CD86 /CD54 表达量，并取 3 次测定结果的平均值。
任一剂量组 3 次测定结果的平均值超过阳性标准( CD86≥150% ( EC150) ，或者 CD54≥200% ( EC200) ) ，这一化学物将被认定为致敏“阳性”。
其缺点是对水溶性低的受试品可能得出假阴性结果。
DPRA(直接肽反应)将待测样品与GSH(谷胱甘肽)和含有半胱氨酸/赖氨酸的合成肽反应。
样品与GSH 以1：100的比例混合反应15min ，样品与含有半胱氨酸/赖氨酸的合成肽以1:10/1:50的比例混合反应24h ，皆在25℃环境下反应。
用HPLC(高效液相色谱) 以及水域紫外检测器检测计算样品中肽的消耗量。
通过与LLNA 的数据库比对建立一个分级树，将肽反应分为微，低，中，高4个级别。
微级至低级表明样品为非致敏剂或者弱致敏剂，中级到高级表明样品为强致敏剂。
MUSST(骨髓U937皮肤致敏实验)将人骨髓细胞系U937与待测样品混合培养，用流式细胞术分析CD86的表达，用实时定量RT -PCR 分析IL -1β和IL -8的基因上调表达。
计算CD86的含量，以及通过与LLNA 数据库对比来确定样品的致敏程度。
CD86(阴性对照百分比)=%-%86%-%86照活性阴性对照组同型细胞对活性细胞阴性对照组胞对照活性试剂处理细胞组同型细活性细胞试剂处理细胞组CD CD 。
85%为一个临界点。
≧85%的不含毒性或致敏性。
ARE(抗氧化响应元件)Nrf2-亲电体-感应通路包含表达蛋白Keap1,传递子Nrf2,以及抗氧化反应元件(ARE)，形成了由皮肤致敏剂诱导的毒性应答路径。
用报告细胞系AREc32对大量的化学样品进行筛选，AREc32用基因重组的方法插入一个8倍重复的大鼠GSTA2序列，这个序列位于人类乳腺癌细胞系MCF7的荧光素酶报告基因的上游。
人AKR1C2基因的ARE 元件中荧光素酶报告基因的单个拷贝插入到HaCaT 角质细胞中。
用重组后的HaCaT 角质细胞与待测样品混合培养后观察基因的表达强度，用软件进行数据分析，与LNNA 数据库对比。
重组皮肤组织模型根据ECVAM科学咨询委员会(ECVAM Scientific Advisory Committee,ESAC)发布公告,EpiSkin(L’Oreal)、EpiDerm(ZEBET)和SkinEthic这3种组织工程皮肤先后在1998年3月、2000年3月和2006年11月通过了验证工作。
2014年9月欧莱雅在中国获得人体皮肤重建模型EpiSkin的营业执照,开启了组织工程在中国的研究与应用。
EpiSkin皮肤模型模拟人天然皮肤结构,将分离的人表皮细胞接种在特定的生物材料上进行培养,形成具有三维结构的人表皮样皮肤模型。
在中国生产的EpiSkin表皮模型是取自于中国成年人志愿者的阴茎包皮角质形成细胞,这些志愿者都经过血清检测确保不携带HIV 1型、HIV 2型、乙肝和丙肝病毒。
角质形成细胞被培养在含有Ⅰ型和Ⅳ型胶原的拟真皮替代物上。