食用菌母种的分离
食用菌菌种分离的方法和操作步骤以及注意事项
食用菌菌种分离的方法和操作步骤以及注意事项食用菌菌种分离的方法和操作步骤菌种分离即是进行食用菌菌丝纯化的过程，它是制种工作的重要环节，通俗地讲就是把食用菌菌丝从自然中单独分离出来进行纯培养，从而获得纯食用菌菌丝的过程。
菌种分离是一项重要而又细致的工作，每个环节都必须严格按照无菌操作规程进行。
食用菌的分离方法很多，常用的有组织分离法、孢子分离法和基内菌丝分离法三种。
1.组织分离法组织分离法是将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法。
其特点：一是属于无性繁殖，能够保持原有菌种的优良特性，是生产中获得纯菌种的常用方法，且简单易行，取材广泛，菌丝萌发快。
二是组织分离操作简便，又不易带入杂菌，容易获得纯菌种。
但对银耳、黑木耳等胶质菌因其子实体种菌丝极少，如用组织分离培养，则往往不易成功。
1.1子实体分离种菇要选择朵大盖厚、柄短、八九分成熟的优良品种。
切去菇体基部，在超净工作台用75%的酒精棉球进行擦拭菌盖与菌柄两次，进行表面消毒。
接种时，只要将种菇撕开，用消毒后的小刀在菌柄与菌盖的交界处切取一小块组织，再用接种针将组织块放入PDA培养基的试管斜面中间。
置于24℃温度下培养3-5天就可以看到组织块上产生白色绒毛状菌丝，转管扩大即得到菌种。
如香菇、平菇等可以使用此方法。
1.2菌核组织分离茯苓、猪苓、雷丸等食用菌的子实体不易采集。
而常见的是它储藏营养的菌核。
用菌核分离，同样可以获得菌种。
方法是将菌核表面洗净，用酒精消毒，切开菌核，取中间组织一小块，约黄豆大小，接种在PDA培养基斜面上，在24℃下培养，产生菌丝后进行分离纯化。
应注意的是，菌核是储藏器官，大部分是多糖类杂质，只有少量的菌丝，因此挑选的组织块要大一些，如果组织块过小，则不易分离出菌种。
1.3菌索分离法菌索分离常用于蜜环菌分离。
方法是选新鲜的活菌索，用75%酒精棉球将菌索表面消毒后，去掉菌鞘，把白色菌髓部分用无菌剪刀切成小段，接入PDA斜面培养基上，在24℃下培养，有白色菌丝长出且无污染，即表明分离成功。
食用菌母种分离选育食用菌选育
食用菌母种分离选育食用菌选育食用菌母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。
作为一般制种专业户，可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下。
1、采集种源从******成人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源。
种菇的标准是：八成熟，朵形圆正、肉质肥厚，无病虫害。
采集1—2朵符合上述标准的种菇编上号码，作为分离母种的材料。
从栽培室采集的应标有原菌株代号。
2、培养基配制琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200—250克，琼脂15—20克，葡萄糖20—25克，清水1000毫升。
也可以加硫酸镁1—1.5克，维生素B1微量，磷酸二氢钾2—3克。
先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸30分钟，捞起后用4层纱布过滤，取汁。
然后将琼脂加入汁内，边加热边搅拌，让琼脂充分溶化；再将葡萄糖等加入，稍煮几分钟后，同样用4层纱布过滤，取其汁液，将汁液趁热装入玻璃试管内。
装至管长的1／5，管口用棉花塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内，装量20毫升。
然后置于高压锅内，在98—108千帕／厘米的压力下灭菌30分钟左右。
灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。
3、母种分离方法有孢子弹射、组织分离和基内分离3种方法。
①孢子弹射法。
将种菇表面消毒，吸干水分后，将菇体悬挂于装有琼脂培养基的三角瓶内，让菇体内的袍子自然散落在培养基上萌发菌丝。
也可以剪取一小决菇体，贴附在试管斜面培养基表面，让孢子散落在培养基上萌发菌丝，即能获得母种；②组织分离法。
将消毒过的种菇，在接种箱内用手从菇柄处对半解开，或用刀片切开，使菇体形成对开。
在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5×10毫米的小薄片，用接种针挑取一块薄片，接入斜面培养基的中央，每支试管接种一小块薄片，待其萌发菌丝，即可得到母种；③基内分离法。
选择已长菇的木段，削去树皮及表层木质部，用70％的***精消毒后，锯成1厘米厚的薄片，放入0.1％的升汞水中消毒1—2分钟，再用灭菌水洗去残液。
食用菌母种分离
一、实验目标：
1、掌握组织分离法制备母种的方法。 2、掌握组织分离接种技术。 3、会使用超净工作台和培养箱。
二、实验原理：
组织分离法是利用子实体组织来分离获得纯培 养菌丝的方法。
是一种无性繁殖，双亲的染色体没有经过重组， 因此组织分离基本上可保持亲本的生物学特 性。
三、仪器设备与材料
接种孢子
用接种环 蘸孢子液或孢子粉
涂布于平板上
七、菌种质量的鉴定
鉴定 项目
形态特征、生理特性、 栽培性状、经济效益等
一般从菌种的纯度、长势、颜色、菌龄、 、
均匀度和出菇快慢等6个方面进行鉴定。
好母种
退化母种
出菇试验
栽培
出菇快 产量高 品质好 抗逆性强
菌种种类 品种名称 菌种级别 代 时 生产厂家 接种日期
10、贴标签
写明菌种名称，接种日期，姓名，学号，专业， 随后放入培养箱中，置适宜温度下培养，待 组织块长出菌丝无污染即为纯种。
培养3~5天，就可以看到组织上产生白色绒毛状 菌丝，转管扩大即得到菌种。
十、结果
1、记录你制作的母种的生长状态； 2、是否有杂菌污染，如有分析其原因。
械及种菇表面消毒；
（3）0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消毒；
4、菌种培养没备
（1）培养箱 培养少量菌种的恒温电器（20~40℃）
（2）培养室
六、菌种分离的方法
菌种分离：将有价值的子实体的局部组织、孢 子或基内菌丝移接到斜面试管培养基上，获得 纯培养菌丝的操作称为菌种分离。
必 备
1、组织分离：采用食用菌子实体或菌核、菌索 的任何一部分组织培养成纯菌丝体的方法。
无
0.25%新洁尔灭浸2~3min 无菌纱布吸干表面水分
食用菌母种制作-实验一讲解
实验一食用菌母种制作一、目的要求：1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理；2、掌握母种培养基的制备方法；3、了解无菌操作基本原理，掌握母种的无菌接种培养方法。
4、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤；5、熟练分离出栽培用菌种。
二、主要仪器设备及药品材料：灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管（18x180mm）、手术刀、镊子、75%酒精、马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。
三、实验步骤与方法:①培养基的制作1 PDA培养基配方马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升.2. 母种培养基的配制(1)熬制。
马铃薯洗净，挖芽去皮。
称取200克，切成玉米大小颗粒或薄片。
量筒量取1000毫升水，铝锅中煮沸后记时30分钟。
四层纱布过滤于量杯中。
滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。
补足水量至1000毫升。
(2)分装试管。
将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。
培养基高度为试管长度的1/5左右，注意避免培养基沾于试管口外。
分装完成后，盖紧硅胶塞。
（3）捆把。
7支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。
贴上标签，准备灭菌。
（4）灭菌。
注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。
（5）摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2。
斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。
①菌种分离与培养（1）种菇选择。
选取无杂菌感染，无病虫害，出菇均匀，适应性强的子实体，要求个体健壮，朵大肉厚，外形规整，出菇早，约七八成熟的新鲜子实体。
子实体采收后切去大部分菌柄，放入干净器皿内备用。
（2）母种分离（组织分离法）。
在分离前用75%的酒精棉球擦菇体进行表面消毒，在超净工作台内将子实体撕开，用消毒刀片在菌盖与菌柄交接处的组织上取一小块（绿豆大小）移至试管斜面培养基的适当位置，迅速塞上硅胶塞。
将分离的试管放在室内避光培养7-8天，检查菌丝生长情况。
工作报告之食用菌实验报告
食用菌实验报告【篇一：食用菌组织分离法实验报告】食用菌母种的制作——组织分离法实验报告实验目的：学习和掌握食用菌的组织分离法；一、实验原理：食用菌的母种一般是采用孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物。
利用食用菌子实体内部组织进行分离，是获得母种最简便的方法。
二、实验器材：1. 食用菌：香菇、平菇。
2. 培养基：pda培养基斜面。
3. 仪器或其他用具： 75%酒精棉球、接种针记号笔等。
三、实验方法：1. 选择种菇：选择肥壮菇体作种菇；2. 种菇消毒：取1张菇片，用 70%的酒精轻擦表面进行消毒；3.菇肉接种：将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇柄与菌盖的交界处取一米粒大小的菇肉组织接于pda试管斜面上； 4. 培养：将试管斜面置于15～30℃下培养；五、注意事项1. 在整个操作过程中都要注意无菌操作，一切用具都要消毒。
2.要等刀片冷却后再切取组织块。
六、实验结果与记录第一次实验：10月16日上午进行接种，两试管都以肥壮的双孢菇为种菇，10月13日观察培养基结果分析：本次实验全班只有一人成功，大部分都被杂菌污染，最有可能的原因就是制作的pda培养杂菌没有菌落产生基本身受到污染，但是又有培养基根本没有菌落产生，那么一方面可以看做是空白对照，得到培养基本身没有问题而是我们操作都有问题，没有做到避免污染，规范的无菌操作，另一方面也有可能是在接种过程，接种针，试验刀酒精灯上灼烧后未冷却直接接触种菇，使待接种的菌块高温致死。
第二次实验：10月30日上午进行接种，记号笔标记的两支试管为双孢菇，标签纸标记的两只试管为香菇进行实验，10月9日观察实验基本成功，试管下端有少部分红棕色杂菌无杂菌，也无目的菌落实验成功，无杂菌，斜面上均为雪白的菌丝结果分析：培养基本身无污染，接种香菇菌块的过程中可能由于接种针和实验刀未完全冷却导致目的菌块高温致死，培养基上无菌落产生。
接种双孢菇菌块过程中基本做到了无菌操作，实验较为成功。
实验感想：本实验原理目的简单，操作过程方法在微生物学中也有接触，但是容易杂菌污染，第一次实验结果几乎全军覆没，几乎所有培养基都受到了污染，第二次实验在总结前一次的基础上，大部分做到了无菌操作，看到了培养基中雪白的菌落。
食用菌菌种制作技术
食用菌菌种制作技术作者：夏宏志李希政路晓玉来源：《农业与技术》2017年第23期摘要：本文简要说明了菌种培养基的分类，从消毒、灭菌、菌种制作、菌种培养、菌种污染原因分析上进行了论述，并对菌种老化与退化标准，菌种质量标准，菌种质量鉴别标准上进行了论述，给菌种质量判别提供了依据。
关键词：食用菌；菌种；培养基；菌种制作中图分类号：S646 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.201712320091 菌种的级别划分1.1 母种母种又称一级种，试管种，是食用菌的原始出发菌株。
母种的来源：通过组织分离法或孢子分离法自己选育而成；向有信誉的科研单位购买（引种必须作出菇试验，验证考核后方能用于大面积生产）。
母种转接一般以1支母种可转10～20支，在25℃培养，6～22d长满（因品种而异），母种必须纯度高，活力强。
1.2 原种原种又称二级种。
是由母种扩繁而来。
一般1支母种可转接5～6瓶，25℃培养30d左右长满。
原种要求必须纯度高，活力强，营养丰富。
1.3 生产种生产种又称三级种，栽培种。
是由原种扩繁而来，直接用于生产的菌种[1]。
一般一瓶原种可转接50～60瓶。
25℃下培养20～30d能长满瓶。
一级菌种培养基配方（适用于平菇、香菇、金针菇、木耳、滑菇等大多数食用菌）：土豆200g、葡萄糖20g、琼脂20g、蛋白胨2g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁2g、维生素B1或B2 6片、水1000mL。
1.4 二、三级种配方粉碎玉米芯70%、玉米面30%，另外加石膏1%、白灰2%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.2%、多菌灵0.1%。
1.5 粮食菌种制作选用干净无霉变小麦粒或玉米粒、高粱粒，用清水浸泡12h以上，捞出用水煮，煮至熟而不烂、不开花为准，捞出控干水分，加入石膏粉2%～3%，有条件加入30%木屑拌匀，装点滴瓶较好。
优点：菌丝生长健壮有力，可最大限度提高产量，生长速度较常规配方缩短50%以上时间。
缺点：制作较繁琐，容易污染。
食用菌母种怎么提取-
食用菌母种怎么提取?
食用菌母种：子实体中分得的菌种称为母种.
可以找专门做食用菌的实验室帮你做.一般用PDA培养基或者水琼脂培养基就可以.
仪器设备有：75%和95%的酒精,次氯酸钠,超净工作台,平皿,试管,滤纸,解剖刀,镊子,干热或湿热灭菌设备.
方法：
1制备培养基：称马铃薯200g,琼脂20g,蔗糖或葡萄糖20g,琼脂20g,取马铃薯削皮洗净,切成拇指大的小块,加入1000ml水煮至马铃薯块一触即烂,用四层纱布过滤,将滤液继续加热放入琼脂并搅拌直至琼脂完全溶解,加入蔗糖,装置容器内（一般为三角瓶,如是试管可直接分装）灭菌.
2灭菌后,如是试管直接摆斜面,如是平皿在超净工作台内分装,待培养基凝固即可用.
3开始分离母种：将采集到的野生菌,与要用的所有仪器试剂一起放入超净工作台内,紫外杀菌30mim,采用子实体分离方法,用酒精盯烧过的镊子和刀取菌种中未接触到空气的部分,黄豆粒大小,放入平皿培养基内,封号口放入26度的培养箱内3-5天,如未染菌,则在菌肉周围会有菌丝长出,此为母种.在超净工作台内,用接种针将菌丝挑出,放入试管中,继续纯化培养,放入，分离成功!
- 1 -。
食用菌栽培实验报告
食用菌栽培实验报告一、实验目的1.学习和掌握食用菌的组织分离法制作食用菌母种；2.掌握食用菌培养基的配置原理；3.通过平菇、秀珍菇、金针菇、鸡腿菇、香菇、榆黄菇的栽培实验，掌握食用菌代料栽培的一般方法和栽培管理技术。
二、实验原理（一）食用菌母种的制作食用菌的母种一般是采用孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物。
利用食用菌子实体内部组织进行分离，是获得母种最简便的方法。
（二）平菇、秀珍菇、金针菇、鸡腿菇、香菇、榆黄菇的栽培实验1.食用菌的营养物质食用菌在生活时需要多种多样的营养物质，除水和氧气外，还要碳、氮、钾、磷、硫、镁、铁等大量元素和一些微量元素。
各种食用菌对营养物质的要求各不相同，有的要求不严格，有的要求严格。
[1]碳源：能利用自单糖到纤维素等各种复杂的碳水化合物，如：纤维素、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、半乳糖、糊精、淀粉、半纤维素、木质素、有机酸、某些醇类等。
[2]氮素：是食用菌合成蛋白质和核酸必不可少的主要原料。
主要有蛋白质、氨基酸、尿素、氨、铵盐和硝酸盐等。
蛋白质必须经蛋白酶分解成氨基酸后才能被吸收；其他小分子氮素化合物菌丝体可直接吸收。
[3]碳氮比:一般认为食用菌在营养生长阶段碳氮比（C/N）以20 : 1为好，而在生殖生长阶段碳氮比以30 : 1～40 : 1为好。
[4]无机盐类，如：磷酸二氢钾、硫酸钙、硫酸镁、氯化钠、硫酸锌、氯化锰等。
这些无机盐中的金属元素磷、钾、镁为最重要，适宜浓度是每升培养基加100—500毫克，而铁、钴、锰、锌、钼等微量元素，每升培养基只需1／4毫克。
这些金属元素在普通水（河水、自来水）中都有，一般培养料不再添加。
[5]各种维生素和生长素，量很微，但必不可少。
[6]栽培原料:广泛采用棉籽壳。
棉籽壳含粗蛋白73％，粗脂肪3.45％，粗纤维36.99％，无氮浸出物73.99%。
其物理性能良好，能使水分和空气的矛盾得到解决，以满足菌丝生长的要求，棉籽壳的表面密布的一层棉纤维，在合适的水分、空气和温度的条件下首先分解，加之壳内残存的棉籽碎屑，也易分解利用；经过试验，1斤干棉籽壳能产1斤左右的鲜平菇，最高达4斤左右。
食用菌的制种(母种的分离和培养)
食用菌的制种（母种的分离和培养）()---食用菌菌种质量的优劣，直接影响到栽培的成败和产量的高低，只有优良的菌种，才能获得优质高产的食用菌。
因此食用菌的制种，是生产中一项极其重要的工艺。
食用菌的菌种按培养阶段和来源的不同，可分母种、原种和栽培种三种。
从食用菌的孢子分离培养或从组织分离培养、基内菌丝分离培养所得到的第一代菌丝体，称为母种。
从母种扩大培养的菌丝体，称为原种。
从原种扩大培养直接用于生产上播种的菌丝体；称为栽培种。
一、母种的分离和培养（一）母种培养基的配制1.母种培养基的种类母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。
因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。
适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多，常用的有下列几种：（1）马铃薯——葡萄糖——琼脂培养基马铃薯（去皮） 200克琼脂 20克葡萄糖（或蔗糖） 20克水 1000毫升（2）麦芽汁——葡萄糖——琼脂培养基干麦芽 250克琼脂 15～20克葡萄糖（或蔗糖） 10克水 1000毫升（3）胡萝卜——葡萄糖——琼脂培养基胡萝卜 100克琼脂 20克葡萄糖（或蔗糖） 20克水 1000毫升（4）蘑菇汁——葡萄糖一一琼脂培养基（适用于蘑菇）鲜蘑菇 250克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖） 20克水 1000毫升（5）蛋白胨——葡萄糖——琼脂培养基蛋白胨 2克葡萄糖 20克磷酸氢二钾 2克维生素B1（硫胺素） 0.5毫克磷酸二氢钾 0.5克琼脂 18克硫酸镁 0.5克水l000毫升2.母种培养基的制法兹以最常用的马铃薯——葡萄糖——琼脂培养基的制法为例介绍如下：先将马铃薯去皮，洗涤，切成小块，加水1000毫升，煮沸15～20 分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，加入琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最后补足水分，使其容量仍为1000毫升。
趁热分装于试管中，装量约为试管长度的1/5左右，装管时要注意不使培养基沾污试管壁和试管口。
菌类园艺工：食用菌找答案五
菌类园艺工：食用菌找答案五1、填空题导致菇色浅的重要因素是（）。
正确答案：光照不足2、问答题配制发酵料应注意哪些问题？正确答案：配制发酵料应注意两个问题：一是升温要快，温度要高；二是翻堆时要将料里翻外，外翻里，（江南博哥）避免发酵不均匀或夹带生料，确保发酵质量。
3、填空题培养料发酵处理是是利用（）在培养料堆积中繁殖所产生的高温，杀死培养料中的害虫和杂菌。
正确答案：嗜热微生物4、填空题保藏的母种在使用前一定要（）。
正确答案：活化5、单选母种的转管次数最多不能超过（）。
A、2次B、3次C、4次D、5次正确答案：A6、单选平菇子实体真正能产生担孢子的部位是（）。
A.菌盖表皮B.菌肉C.菌褶D.菌柄正确答案：C7、填空题食用菌菌种的生产，一般需要经过（）、（）和（）三级培养过程。
正确答案：母种；原种；栽培种8、单选高压灭菌利用的灭菌因素是（）A．压力B．热蒸汽温度C．热水正确答案：B9、单选原种制作时，常用（）罐头瓶代替菌种瓶。
A.500mlB.300mlC.800ml正确答案：A10、问答题简述食用菌栽培的发展前景？正确答案：（1）食用菌产业是21世纪大有前途的产业。
（2）食用菌栽培是广大农村脱贫致富的良好途径率高，效益好。
（3）食用菌栽培能促进多种事业同时发展，使自然界物质得到良性循环，能量合理流动，有益于农业生态系统平衡。
（4）发展食用菌栽培有得天独厚的自然条件。
11、问答题有利于形成花菇的措施有哪些？正确答案：1.催化时机：菌盖直径达2～3cm。
2.催花措施：“两降低，两加强”3.降低温度：调节12～18℃，并且加大温湿差，傍晚盖膜升温、增湿，使棚温增至28～35℃。
白天揭膜降温、降湿，短时间内降到15℃以下。
降低湿度至60%～70%左右，并且干湿交替。
4.加强通风5.加强光照：让阳光直晒，如此大温湿差及强光刺激3～4天，即可催出花纹。
促使盖表面开裂形成优质花菇12、单选香菇菌膜理想的颜色是（）。
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水1000亳升，PH值自然。
3.工艺流程：
称量→煮制→分装→灭菌 → 排斜面→无菌检验
培养基的分装及排斜面示意图
（二）、母种的接种与培养
1．组织分离法制母种（无性繁殖）
将子实体、菌核、菌索等一小块组织放
于斜面培养基上，使其萌发为纯菌丝的方法，
称为组织分离。该法具有简便、易成功、能
保持原菌种性状等优点，但重复多，易退化，
应与孢子分离交替进行。组织分离法适用于
绝大多数食用菌
实验方法
种菇选择：
在出菇场要选择肉厚肥大、鲜嫩，出菇早、菇形 整齐、菌柄短且无病害的做种。
表面消毒：
将种菇表面用清水冲洗干净，放在接种箱（或无 菌室内）进行表面消毒。用镊子将种菇放在培养 皿内，用另一反镊子夹75%酒精棉球（或0.1%升 汞棉球）对种菇进行表面消毒，然后移入另一培 养皿内再用无菌水反复洗涤三次，洗净残留的消 毒剂。
食用菌母种的分离制备
一、母种培养基的制备及接种培养
（一）母种培养基制作： 1.用具、设备： 手提消毒灭菌锅、铝锅、试管、电 炉、棉花、漏斗、PH试纸、接种箱或超 净工作台、培养箱等。
2.培养基配方：
①去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，
磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二钾0.1克，硫酸镁
0.5克，蛋白胨2克，水1000亳升，PH值自然
养基灭菌的效果。如在此期间没有出现任何
杂菌，说明灭菌效果良好。待其冷却30℃以
下可接种。
三、栽培种培养基的制备及接种培养 栽培种是直接用于生产的菌种。生产种 的优劣，对产量有着直接的影响。栽培种的 培养基和接种方法，基本上和原种相同。栽 培种是用培养好的原种进行扩大接种的。
栽培种制作示意图
四、菌种质量
孢子收集器示意图
3、母种转管接种与培养。
母种的接种必须在严格的无后将所有试管及接种器具放入接种箱里进行消毒
灭菌，力求灭菌彻底。在点燃酒精灯火焰上进行操
作，将菌种试管和接种用斜面培养基放在火焰旁。
拨去棉塞，把消毒灭菌的接种针伸入菌种试管内， 挑小块菌种放入斜面培养基中（见下图）
平菇、木耳、香菇、猴头。
② 棉子壳培养基：棉子壳99.5%，石膏
0.3%，水适量。适用于培养平菇、猴头、金
针菇、鸡腿菇。
3.培养料的配制
⑴ 木屑、棉籽壳培养料的拌料配制
木屑、棉籽壳培养料按配方称量后，堆制 混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水 中再拌入。拌料时要控制料的含水量在60﹪
左右 。
⑵ 谷粒培养料的配制 谷粒因其营养较丰富，制作的菌种具有菌 丝萌发早、吃料快、抗衰老能力强、产量高 等优点，在生产中应用较多。一般是采用浸
菌柄与菌盖交界处取组织块
用解剖刀或鲜剖剪蘸酒精进行火焰消毒，冷却后把自己消毒 的种菇纵切开，然后用菌盖笔菌柄交界处，切取长宽的 0.3~0.5厘米的菌肉组织块，用接种针移到斜面培养基上，置 24℃恒温箱中培养。
检查筛选
每天检查试管斜面菌落生长情况，如从分离的菌肉组织块上 长出正常的白色菌丝，即分离成功，及时将生长出来的菌丝 转移新的试管斜面。若在组织块附近或其他地方出现其他颜 色杂菌生长应予以淘汰。
优质菌种是食用菌栽培成功的重要保证。
因此，在食用菌栽培中，既要了解各类菌种 的贮藏保管方法，又要能正确选用菌种，识 别菌种的真假与优劣。
1、母种的保藏
母种量少，一般保藏于冰箱里。
2、原种与栽培种的保藏 培养好的原种栽培种， 如不能马上使用，可保藏于冰箱里。但也以保藏于 阴凉、干燥、干净的保藏室里。室温10-200C。温 度低，保藏时间长些；温度高，保藏时间短些。保 藏室的温度不宜低于00C，也不能高于200C。 3、菌种检验 菌种的品种和质量都直接影响食用 菌的产量和质量。因此，质量检验工作十分重要， 一般从形、色、味、状五个方面进行检验。
（也可根据不同食用菌品种进行调节，如草
菇PH值7.5-8）。
②.去皮马铃薯100克，玉米粉30克，葡萄糖20 克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二 钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克，水1000亳
升，PH值自然。
③.去皮马铃薯100克，玉米粉15克，麸皮15克，
葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克，
纯化培养
将菌丝块移入PDA平板培养 若纯：四周辐射状生长，外缘整齐一致 否则：边缘参差不齐，色素分布不均匀 将较一致的菌丝的前端，切割→新培养皿
菌肉组织分离示意图
菌核组织分离示意图
2．孢子分离法（有性繁殖） 孢子分离有单孢分离和多孢分离两种方 法。单孢分离由于技术难度大，主要用于杂 交育种的研究，生产上较少采用，一般采用 多孢分离法。
泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。
4.装袋或装瓶
将培养料拌匀装入菌种瓶（或袋）内、
装料松紧适宜，上下一致，装料高度以齐瓶
（袋）肩为宜。然后用锥形木棒在瓶的中央
向下插一个小洞，塞上棉塞。装好的料瓶
（袋）要当天灭菌，以免培养料发霉变质。
5.培养基的灭菌 通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭 菌法以达到灭菌的目的。高压灭菌2小时或常 压灭菌于100℃维持8-10小时，灭菌后培养基 最好放在适温下，空白培养5-7天，以检查培
斜面试管转管接种
二、原种培养基的制备及接种培养
（一）、原种常用培养基制作：
1.用具、设备： 高压蒸汽灭菌锅或常压蒸汽灭菌锅；铝锅、 电炉；拌料机；装袋机；无菌室、接种箱 或超净工作台；培养箱或培养室等。
2.培养基配方：
① 木屑培养基：木屑78%，麸皮或米糠
20%，石膏1%，糖1%，水适量。适用于培养