血乳酸指标在运动训练中的应用
天根 一步法逆转录PCR试剂盒说明书
通用型一步法RT-PCR试剂盒说明书 前言 本试剂盒适用于对各种动、植物、病毒RNA进行PCR 检测。用户可根据被分析基因，配合一对引物，或同时采用Taqman 荧光探针，先将提取的RNA反转录(reverse transcription).成cDNA，再经过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)技术对特异性片段进行扩增，进行电泳或实时荧光分析。 一步法RT-PCR可使RT及PCR过程在单管中完成，比分开进行RT及PCR更方便。由于不需要在RT完成后打开反应管，尽可能地避免了样品间的相互污染。 规格 20人份 适用仪器 适用于各种普通PCR仪器和实时荧光PCR仪器。 试剂盒组成 试剂准备 根据下表配制反应液： 振荡混匀后，按每管 40 μl(可根据需要调整)分装，备用。 PCR扩增 将均一化后的RNA提取样本10 μl加入各反应管，混匀、离心后，置普通PCR仪器或实时荧光PCR仪器上进行扩增及实
时检测。 结果判断 扩增产物可直接进行电泳检测；实时荧光检测可根据相应仪器的配套软件进行结果分析。 保存及有效期 -20℃保存，有效期为6个月。 注意事项 1. 开始检测前请仔细阅读本说明书全文。 2. 整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增（荧光检测）应分区进行以避免污染。 3. 操作人员应戴口罩，经常更换一次性手套，以避免RNA酶的污染；实验中所用器具均应经过除RNA酶处理。 4. 试剂盒组成中的试剂使用前应充分融化并混匀。 5. 进行实时荧光分析时，应使用透光性能较好的一次性薄壁离心管；.荧光探针应避光保存，加入缓冲液中后，应尽快进行扩增。 6. 注意适当处理检测中遗留的样品、扩增产物及可能被污染的试剂。 生产企业： 上海蓝创生物科技发展有限公司
血乳酸与运动
血乳酸与运动 单梓松 （广东第二师范学院，12体教C班） 摘要: 根据有关资料就训练时不同运动强度时血乳酸的影响进行分析，探讨提高人体耐 力最大血乳酸浓度能力的方法。以提高抗疲劳能力和运动成绩，指导运动实践。从乳酸与肌肉的能量代谢;血乳酸的测试方法;血乳酸在训练中的应用等方而，阐述了乳酸在训练中的重要作用，为科学训练实践配置合理的运动处方，提供了参考。 关键词:运动;血乳酸;科学训练；运动强度 血乳酸是体育科学研究中历史最长，应用最广泛的指标之一。随着竞技体育水平的高速发展，运动成绩不断冲击人们所预计的“生理界限”除了运动技术的完善，运动器械、场地条件的改进因素外，人体运动能力的提高是造成这个现象的最重要的因素之一。在与运动有关的各器官系统中，循环系统、呼吸系统、运动器官与运动能力的关系最为密切然而有研究表明，20年来世界优秀运动员每千克体重的心脏容积和最大吸氧量等指标并无明显变化。显然，对于高水平的运动员来说，其竞技能力提高的主要原因不在于循环呼吸系统功能的改善，而骨骼肌代谢能力的提高很可能起着更重要的作用。到目前为止，能反映骨骼肌代谢情况并能合理的制定训练方法，掌握适宜强度，评价训练效果和进行机能评定最适用的指标，仍然是血乳酸。 一、乳酸与肌肉的能量代谢 1. 运动时乳酸的生成 骨骼肌是人体主要的运动器官，是运动时乳酸生成的主要部位。剧烈运动时，体内供氧不足，糖经过一系列反应生成乳酸。在这个过程中，一分子葡萄糖可以转变为二分子乳酸，并释放能量，这些能量由ADP接受生成AT P, ATP是肌肉运动的直接能源。 乳酸在供能体系中占有重要地位，他是糖酵解供能系统的终产物，是有氧代谢供能系统的重要氧化基质，还可以在肝内经糖的异生途径转变为葡萄糖。与此同时，乳酸过多对内环境酸碱平衡的影响又成为负而效应，导致疲劳发生。 2. 人体安静时和运动后血乳酸水平 2.1 人体安静时的血乳酸水平 在正常生理情况下，人体大多数组织依靠有氧代谢途径供能只有少数组织，如表皮、神经、视网膜、肾上腺髓质和血细胞等在有氧时也能进行强烈的糖无氧代谢。因此，正常人在空腹、休息时静脉血乳酸为0.45～1.30mmol/L;运动员在安静时血乳酸水平和正常人并无差异。但是，有些运动员在比赛期或赛前，安静时血乳酸可比平时训练日高2}3倍，这是由于赛前紧张，儿茶酚胺类物质分泌增多，使糖无氧代谢加强的结果。比如摔跤运动员在训练期
血气分析中血乳酸检测之临床意义
血气分析中血乳酸检测之临床意义？ 全测定在的应用 乳酸测定 §乳酸是糖()的。乳酸产生于骨胳，肌肉，脑和。经后由肾分泌。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。 乳酸酸中毒 §相乳酸升高最常见于乳酸酸中毒，但也可与关联: –A型乳酸酸中毒：严重组织缺氧时发生，任何原因引起的组织缺氧将导致A型乳酸酸中毒发生。 –B型乳酸酸中毒：组织缺氧并不明显，但组织缺氧可同时存在。 A型乳酸酸中毒 § §严重 § § §局域性不足（组织缺氧） B型乳酸酸中毒 §药物引起 – – – –双呱类（药物） B型乳酸酸中毒 §疾病 –糖尿病 – –肝脏疾病 –(由于在血中的堆积，导致严重到可引起死亡的代谢性酸中毒和酮症的一类先天性代谢性疾病) –缺陷(影响糖类合成的酶缺陷) –缺陷(影响的疾病) – 正常参考范围 –
乳酸测定 §在以下科室或中检测乳酸有重要 意义： –外科手术(如) –重症监护科（ICU） – –（重点）实验室 乳酸测定临床应用 §心脏手术 §冠状动脉分流术 §体外膜氧合(交换膜式) §休克状况的评估 §内球囊植入术 §急诊科患者的分类救治 §创伤病人的评估 §的诊断 §烧伤患者 …… 开放性心脏手术 §通过血中乳酸测定对开放性心脏手术后进程的重要意义已经明确。通常手术后的恢复期，血中乳酸水平仅轻度升高，24小时至接近正常水平。若手术后的24小时内/后的血中乳酸结果不符合该模式，就需要进行容量支持、心脏、扩展和呼吸支持的治疗。 体外膜氧合(ECMO) §由于ECMO（体外循环交换膜式氧合作用）的强迫性与高费用，只有在病人的病情严重情况下才进行。血乳酸的测定作为是否需要进行ECMO的依据，也用来评价ECMO为组织供氧的效果。 休克状况的评估 §血乳酸升高常见于循环性休克的患者，循环性休克（严重）可由的减少（失血或脱水），心输出量减少或脓毒血症（）性血流紊乱等引起。虽然各种疾病的发生休克机理不一样，但休克情况下导致乳酸升高的原因似乎与组织缺氧或氧的利用缺陷有关。乳酸测定也同样用于疗效监测，如早期检测，乳酸结果可作为休克是否存在及严重性的重要指针，此时针对休克状况所采取的治疗措施是最为有效的。 冠状动脉分流术 §作为心肺分流术（CPB）的常规方法，需要诱导心动阻止，常引起乳酸的升高。如在CPB血乳酸检测峰值达到或超过L，手术后患者的死亡危险性更高。 §手术后，随着心脏血的再灌注，乳酸通常会降低。如再灌注后乳酸持续产生，即血乳酸浓度升高或不下降，表明心脏氧（）利用恢复到正常的延迟。这与功能降低相关，可能需要心脏兴奋剂或主动脉内球囊起博器的支持。 主动脉内球囊起博器植入术 §主动脉内球囊起博器植入术（IABP）有时作为在心外科手术遇到困难时的一种治疗手段。即便如此，其死亡率也是相当高的。如果有一个早期指标可提示
血浆乳酸测定意义
全血乳酸(LA)测定在临床中得应用 急诊科苏中杰 【概况】：乳酸(Lactic acid, LA) 分子量90，就是葡萄糖分子量得一半，就是体内糖无氧代谢(糖酵解)得代谢终产物。主要由葡萄糖通过糖酵解途径在细胞浆中生成。乳酸主要产生于骨胳，肌肉，脑与红细胞，经肝脏代谢后由肾脏分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供与代谢状态以及灌注量就是否不足。 乳酸水平得生理性增高可见于剧烈运动所致得肌肉痉挛等，但病理性增高则最常见于乳酸性酸中毒等多种临床疾病，而与呼吸性碱中毒也有关联。 A型乳酸酸中毒：严重组织缺氧时发生，任何原因引起得组织缺氧将导致A型乳酸酸中毒发生。常见于休克、严重哮喘、一氧化碳中毒、心衰、局域性血流灌注不足（组织缺氧）。 B型乳酸酸中毒：组织缺氧存在但并不明显。包括： （1）、药物引起者有：酒精中毒、阿斯匹林、氰化物、双呱类（糖尿病药物）。 （2）、疾病引起者有：糖尿病、恶性肿瘤、肝脏疾病、甲基丙二酸血症(由于甲基丙二酸在血中得堆积，导致严重到可引起死亡得代谢性酸中毒与酮症得一类先天性代谢性疾病)、糖原酶缺陷(影响糖类合成得酶缺陷)、脂肪酸氧化缺陷(影响脂肪酸分解得疾病)、脓毒血症。 血浆乳酸得正常值为1、0士0、5mmol／L， <2mmol／L均可视为正常，大于此值即可诊断为“高乳酸血症”。在危重病人，虽然低灌注与缺氧就是“高乳酸血症”得重要原因，但不就是唯一得原因，儿茶酚胺分泌增加与碱中毒等也可因促进糖酵解而增加乳酸含量。此外，肝功能下降导致乳酸摄取减少也会造成血乳酸增加。由此可见，血浆乳酸水平可受许多非循环因素得影响，单纯得“高乳酸血症”并不足以判断外周灌注不足与缺氧。但在上述情况下，乳酸水平一般不会很高，往往<5mmol／L，称为“中度高乳酸血症”。同时由于缓冲系统通常就是正常得，一般不
通用反转录试剂盒(M-MLV)使用说明
通用反转录试剂盒(M-MLV)使用说明 货号：RP1105 规格：50T/100T 保存：-20℃保存，避免反复冻融，复检期为1年。 产品内容： 试剂盒组成50次100次 M-MLV(200U/μL)50μL50μL×2 5×M-MLV Buffer200μL400μL (10uM)100μL200μL Oligo(dT) 16 RNasin(40U/μL)25μL50μL dNTPs(10mM)50μL100μL O1mL1mL×2 RNase-free ddH 2 说明书1份1份 产品简介： 通用反转录试剂盒适用于各种RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应，能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。 通用反转录试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT酶采用进口的M-MLV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。通用反转录试剂盒可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。 操作步骤： 一、反转录反应 1、在冰浴的无RNase的离心管中加入如下反应成分：
1-5μg总RNA或50-500ng mRNA 2μL Oligo(dT) 或2pmole基因特异性引物 16 O至14.5μL 补RNase-free ddH 2 2、70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分： 4μL5×M-MLV Buffer 1μL dNTPs 0.5μL RNasin 1μL M-MLV 3、42℃温浴60min，如果是用随机引物，请先将离心管置25℃温浴10min，再42℃温浴60min。 4、95℃加热5min终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。 5、若用于后续PCR扩增,用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50μL，取2-5μL作为PCR 反应模板。 注意事项： 1、用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。 2、试剂盒的各组分应在-20℃保存，避免反复冻融，有效期12个月。 3、RNA样品要避免反复多次冻融，应使RNA在冰浴中处于融化状态。 相关试剂： PC2440Random PC2450Oligo T16 R1600DEPC处理水
血乳酸对运动训练的影响
血乳酸对运动训练的影响 一、乳酸是常用分析指标 血乳酸是运动训练中研究较早的指标，也是现代运动训练科学化应用最广泛的指标之一。血乳酸都作为制定训练方法，掌握适宜的运动强度，评定运动员身体有氧代谢和无氧代谢的主要指标。由于血乳酸在科学化训练中所发挥的重要作用，以至越来越多的教练员，科研人员开始在训练过程中进行应用，国外有些教练员把血乳酸分析仪作为“分析助手”。 人体在运动时，肌肉收缩直接供能物质是ATP，而肌肉中的ATP储存量很少，每千克肌肉约为4.7～4.8毫mol ,骨骼肌在单独由ATP供能做无氧运动时，维持时间不到3秒，若再加上磷酸肌酸供能，能维持最大功率运动时间不超过10秒，必须由糖酵解成乳酸的代谢过程继续提供ATP。在超过数秒的无氧运动时，随着ATP和CP的耗竭，肌肉细胞内肌乳酸等物质含量逐渐增多，能够激活肌糖原分解；使糖酵解速度加快，肌肉内ATP再合成的能量由许多能量物质和连续系统互相协调的代谢过程所完成的。乳酸是这一代谢过程中的重要产物，随着糖酵解速度不断加快，肌肉中乳酸含量不断增多。 二、原理 运动持续时间在10秒以上且强度很大时，机体所需的能量已远超出磷酸原系统所能供给的，同时机体的供氧量也远远满足不了需要。这时运动所需ATP 再合成在能量就主要靠糖原酵解来提供了。糖酵解以肌糖原为原料，在把葡萄糖分解成乳酸的过程中生成ATP。所产生的乳酸在氧供应充足时，一部分在线粒体中被氧化生能，一部分合成为肝和糖原等。乳酸是一种强酸，在体内积聚过多会破坏内环境的酸碱平衡，使肌肉工作能力下降，造成肌肉暂时性疲劳。因此，依靠糖原无氧酵解供能也只能使肌肉工作持续几十秒钟。无氧酵解供能时，不需要氧，但产生乳酸，故称乳酸能系统。乳酸能系统的重要意义是在缺氧情况下仍能产生能量，以供体内急需。 虽然人体中磷酸原系统供能的绝对值不大，能维持的时间很短，但其主要作用在于能量的快速可用性。短距离疾跑、跳、投、冲刺、举重等需要在几种钟内完成的运动，全部靠该系统的贮备为主要能源。 乳酸能系统的能量来自肌糖原的无氧酵解，酵解的最终产物为乳酸，放出的能量由ADP接受，再合成ATP，它是机体处于缺氧情况下的主要能量来源。无
血乳酸检测的临床意义
乳酸产生于骨胳，肌肉，脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供、代谢状态以及血灌注量。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。 血乳酸检测的临床意义： 1．预测和监控循环衰竭（休克）和中毒。 2．检测组织在动脉氧分压参考范围之内的缺氧情况。 3．评估原因不明的代谢性酸中毒，特别是伴有阴离子间隙升高和昏迷。 4．诊断急性肠血管闭塞。 5．检测分娩中胎儿的危险性。 6．诊断先天性乳酸酸中毒。 7．脑脊液乳酸检测用于鉴别诊断，监控治疗和预测脑和脑膜疾病。 [标本送检要求]肝素抗凝静脉血2ml，必须半小时内（从抽血计时）送检验科。 [收费标准]18元/项，收费编码250302008“乳酸（LAC）测定”。 附：乳酸酸中毒及临床应用 血乳酸升高最常见于乳酸酸中毒，但也可能与呼吸性碱中毒关联，可分为 A型：任何原因引起的严重组织缺氧时发生，包括休克严重哮喘、一氧化碳中毒、心衰、局域性血流灌注不足（组织缺氧）；B型：组织缺氧不明显，但可存在，包括药物（酒精中毒、阿斯匹林、氰化物、双呱类降糖药）和疾病（糖尿病、恶性肿瘤、肝脏疾病、甲基丙二酸血症、糖原酶缺陷、脂肪酸氧化缺陷、脓毒血症）。乳酸测定对指导重症监护患者救治有非常重要的作用，尤其是处理心肌梗塞、心功能不全、血流不足引起的组织缺氧。 正常参考范围12-16mg/dl；>32mg/dl需要救治；>72mg/dl死亡率高；可通过监测乳酸来评估治疗效果，乳酸水平降低说明组织氧供得到改善。 1．开放性心脏手术 通过血乳酸测定对开放性心脏手术后进程进行监测的重要意义已经明确。通常手术后的恢复期，血中乳酸水平仅轻度升高，24小时内降至接近正常水平。若手术后的24小时内/后的血中乳酸结果不符合该模式，就需要进行容量支持、心脏兴奋剂、扩展血管和呼吸支持的治疗。 2．体外膜氧合(ECMO) 由于ECMO（体外循环交换膜式氧合作用）的强迫性与高费用，只有在病人的病情严重情况下才进行。血乳酸的测定作为是否需要进行ECMO的依据，也用来评价ECMO为组织供氧的
血乳酸及其在运动实践中的应用
血乳酸及其在运动实践中的应用 1 前言 骨骼肌是人体的主要运动器官，是运动时乳酸生成的主要部位。人体在剧烈运动时，氧的供应不足，糖经过无氧酵解生成乳酸，释放出能量，这些能量也正是肌肉运动的直接能源。运动时，肌肉是生成乳酸最多的地方，通过长时间或大强度的运动，可能使血乳酸因细胞膜通透性增加或组织损伤而升高。在现代体育运动训练中，血乳酸通常被看成反映运动能力的一种指标，被认为是掌握运动强度、评定身体对训练的适应和预测运动能力等得一个标杆，尤其是在评价耐力素质的最有效的指标。因此，血乳酸逐渐步入研究者的研究范畴之中，对血乳酸及其在运动实践中的应用对当代运动训练，尤其是在耐力素质训练等方面有着十分重要的意义。 2 乳酸的产生与消除 2.1 运动时乳酸的产生 运动时体内乳酸的增加主要是由骨骼肌产生的。剧烈的运动消耗大量的ATP，同时产生大量的ADP，造成胞内ATP/ADP比值倒置，使己糖激酶、1，6-二磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶的活性增加，加快糖生成丙酮酸并伴随NADH的大量产生，导致NAD+/NADH降低，而由于剧烈运动，运动肌肉局部相对缺氧，因此，剧烈运动的肌肉一方面大量产生丙酮酸、NADH，而另一方面又由于胞内相对缺氧，不能及时地氧化产生的丙酮酸，于是丙酮酸的底物作用，NAD+/NADH 比值降低均可使胞内LDH5活性增强，加快催化丙酮酸还原成乳酸，导致运动时体内乳酸的大量增加。 2.2 运动后乳酸的消除 运动后的血乳酸水平与运动的强度、持续时间等有关。而大多数的研究者认为人体内乳酸的消除主要有三种途径：1、在骨骼肌、心肌等组织中转换成二氧化碳和水；2、在肝脏和骨骼肌中重新合成成葡萄糖和糖元；3、在肝脏内合成成脂肪丙氨酸等。但要注意的是，血乳酸的转换和消除并不是只在运动后产生，而是以不同的方式和转换量贯穿于运动中和运动后。 血乳酸消除的半时反应大约为10-15分钟，恢复到安静时水平为30分钟左右，体能高者比体能低者恢复快。因此，可测定运动后乳酸半时反应来评定运动机能状态或训练水平。因此，可以测量运动后乳酸的半时反应来判定运动机能的状态和训练水平。 3 血乳酸值在运动实践中的应用 3.1 乳酸阈的确定及其测定方法
血浆乳酸测定意义
全血乳酸(LA)测定在临床中的应用 急诊科苏中杰 【概况】：乳酸(Lactic acid, LA) 分子量90，是葡萄糖分子量的一半，是体内糖无氧代谢(糖酵解)的代谢终产物。主要由葡萄糖通过糖酵解途径在细胞浆中生成。乳酸主要产生于骨胳，肌肉，脑和红细胞，经肝脏代谢后由肾脏分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量是否不足。 乳酸水平的生理性增高可见于剧烈运动所致的肌肉痉挛等，但病理性增高则最常见于乳酸性酸中毒等多种临床疾病，而与呼吸性碱中毒也有关联。 A型乳酸酸中毒：严重组织缺氧时发生，任何原因引起的组织缺氧将导致A型乳酸酸中毒发生。常见于休克、严重哮喘、一氧化碳中毒、心衰、局域性血流灌注不足（组织缺氧）。 B型乳酸酸中毒：组织缺氧存在但并不明显。包括： （1）.药物引起者有：酒精中毒、阿斯匹林、氰化物、双呱类（糖尿病药物）。 （2）.疾病引起者有：糖尿病、恶性肿瘤、肝脏疾病、甲基丙二酸血症(由于甲基丙二酸在血中的堆积，导致严重到可引起死亡的代谢性酸中毒和酮症的一类先天性代谢性疾病)、糖原酶缺陷(影响糖类合成的酶缺陷)、脂肪酸氧化缺陷(影响脂肪酸分解的疾病)、脓毒血症。 血浆乳酸的正常值为1.0士0.5mmol／L， <2mmol／L均可视为正常，大于此值即可诊断为“高乳酸血症”。在危重病人，虽然低灌注和缺氧是“高乳酸血症”的重要原因，但不是唯一的原因，儿茶酚胺分泌增加和碱中毒等也可因促进糖酵解而增加乳酸含量。此外，肝功能下降导致乳酸摄取减少也会造成血乳酸增加。由此可见，血浆乳酸水平可受许多非循环因素的影响，单纯的“高乳酸血症”并不足以判断外周灌注不足和缺氧。但在上述情况下，乳酸水平一般不会很高，往往<5mmol ／L，称为“中度高乳酸血症”。同时由于缓冲系统通常是正常的，一般不会伴有酸
Takara说明书
Code No. RR047A 研究用 PrimeScript TM RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 说明书
目录 内容页码 ●制品说明1 ●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 2 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ●Real Time PCR 4 ●实验例 6 ●附录7 ●关联产品8
●制品说明 为了准确地进行基因表达量分析，必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件，但Total RNA中常常混有基因组DNA，并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增，因此会造成解析结果不准确。为了避免这种情况发生，通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上，使基因组DNA得不到扩增。但是，此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因，同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。在这种情况下，我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理，以除去残存的基因组DNA。而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作，同时会造成RNA的降解和损失。 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser，通过42℃，2 min即可除去基因组DNA。同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分，经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA，因此，20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA 合成的全过程。 使用本制品合成的cDNA适用于SYBR? Green分析法和TaqMan?探针分析法，可以根据实验目的，选择与SYBR?Premix Ex Taq II（Tli RNaseH Plus）、Premix Ex Taq（Probe qPCR）等定量试剂组合使用。注意：Takara Bio使用SYBR? Green I作为研究试剂已得到Molecular Probes Inc.的许可。SYBR?为Molecular Probes Inc.的注册商标。 ●制品内容（20 μl反应×100次） 1. gDNA Eraser 100 μl 2. 5×gDNA Eraser Buffer*1200 μl 3. PrimeScript RT Enzyme Mix I*2100 μl 4. 5×PrimeScript Buffer 2（for Real Time）*3400 μl 5. RT Primer Mix*4 400 μl 6. RNase Free dH2O 1 ml×2 7. EASY Dilution（for Real Time PCR）*5 1 ml *1：5×gDNA Eraser Buffer在反转录反应前使用，请务必进行基因组DNA的除去反应。 *2：含有RNase Inhibitor。 *3：含有dNTP Mixture。 *4：含有Oligo dT Primer和Random 6 mers。 *5：制作标准曲线时梯度稀释DNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时，由于受Microtube吸附作用等的影响，往往不能准确地进行稀释，导致实验结果精 度降低。使用本制品时，即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释，容易在宽广范围内获得准确定 量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应，用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution 也可以单独购买（Code No.9160）。 注意：EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用，对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。 ●试剂盒外必备材料 热循环仪（或37℃水浴，42℃水浴和85℃加热块） 反转录反应所用0.2 ml和1.5 ml的微量反应管 微量移液器和枪头（高压灭菌） ●保存：-20℃。
血乳酸与运动训练
血乳酸与运动训练 摘要：本文从乳酸的生成机制、血乳酸与运动强度的关系、血乳酸在运动训练中的应用和乳酸的清除等方面进行阐述，目的在于为训练方法的制定和训练效果的评定提供理论依据。 关键词：血乳酸运动训练 乳酸在供能系统中占重要作用，它是糖酵解供能系统的终产物，又是有氧代谢供能系统中重要的氧化基质，还可以在肝内经糖异生途径转变为葡萄糖。与此同时，乳酸过多对内环境酸碱平衡的影响为负面效应，导致疲劳产生。因此，运动时乳酸的生成运动后乳酸的消除以及运动训练和体育锻炼中血乳酸指标应用成为运动生物化学研究的重要内容之一。 1、运动时乳酸生成机制 1.1人体安静时的血乳酸水平 在正常生理情况下，人体大多数组织依靠有氧代谢途径供能，只有少数组织如表皮、神经、视网膜、肾上腺髓质和血细胞等在有氧时也能进行强烈的糖无氧代谢。因此，正常人在空腹、休息时血乳酸为1—2mmol/l；运动员在安静时血乳酸水平和正常人并无差异。但是，有些运动员在比赛或赛前安静时血乳酸可比平时训练高2-3倍，这是由于赛前紧张儿茶酚胺类物质分泌增多，使糖无氧代谢加强的结果。 1.2运动时乳酸的生成和运动后血乳酸水平 骨骼肌是人体主要的运动器官，是运动时乳酸生成的主要部位。剧烈运动时，体内供氧不足，糖经一系列反应生成乳酸。运动后血乳酸水平与运动强度、持续时间、各器官的代谢机能有关。根据能量代谢的特点，1-3min的高强度运动血乳酸可达到最高水平。 2、血乳酸与运动强度 正常人安静状态时血乳酸浓度在2mmol/l以下，运动员血乳酸安静值与正常人无差异。运动时血乳酸浓度的变化与运动强度有关。在超过数秒的极限运动中，随着ATP、CP的消耗，细胞内ADP、AMP、磷酸和肌酸的含量逐渐增多，它可以激活糖原分解，使糖酵解速度大大加快，约在运动30-60秒达最大速度。肌乳酸的迅速增多，最高可达32mmol/l，直到运动结束。 长时间次最大强度运动时，运动肌的能量主要由糖、脂肪的有氧代谢提供。但在运动开始时，肌肉仅有少量血液供应。结合在肌红蛋白和血红蛋白上的贮存氧只能供少量肌糖原氧化产能，远不能满足运动肌的需要。通过整体调节提高肌
血乳酸指标在运动实践中的应用
血乳酸指标在运动实践中的应用 运动康复系2011级杨帆1191059 1评定运动员训练水平 （1）评定有氧运动能力：我们把个体在渐增负荷中乳酸拐点定义为“个体乳酸阈”。乳酸阈是反映骨骼肌代谢水平和有氧工作能力的重要指标，其可通过多级负荷实验和两点法做出的血乳酸-速度曲线来评定运动员所具有的有氧能力，当血乳酸达到4mmol/ L时所对应的速度越高，说明有氧能力越强。另外，通过同等条件的第二次测试，在记录成绩的同时，检查血乳酸的变化，如果4mmol/L时所对应的速度提高了，说明该运动员有氧能力也相应提高了；如果4mmol/L时所对应的速度下降了，说明该运动员有氧能力也相应下降了。 （2）评定无氧能力：①ATP-CP供能系统能力的评定(适宜于举重和田赛中的投跳项目)：做功大而乳酸值低者，说明ATP-CP系统储备高，做功小乳酸值高，说明ATP-CP系统储备低；②糖酵解能力的评定：主要是测定最大血乳酸值，高水平运动员的血乳酸值越高，说明运动员机体耐受乳酸能力越高，糖酵解动员快，供能多，肌肉适于参与剧烈运动，即无氧能力较好；反之，最大乳酸能力较差，即无氧能力较差。 2制定运动强度 （1）乳酸阈强度：个体乳酸阈强度是发展有氧耐力的最佳强度，其理论依据是，用个体乳酸阈强度进行训练，既能使呼吸和循环系统机能达到较高水平，最大限度地利用有氧功能，同时又能在能量代谢中使无氧代谢的比例减少到最低程度。 （2）最大乳酸训练：机体生成乳酸的最大能力和机体对它的耐受能力直接与运动成绩相关。研究表明，血乳酸在12 -20mmol/L是最大无氧代谢训练所敏感的范围。为使运动中能产生高浓度的乳酸，强度和密度要大，间歇时间要短，练习时间一般要大于30秒，以1分钟-2分钟为宜。以这种练习强度和时间及间歇时间的组合，能最大限度地动用糖酵解供能系统供能的能力。 （3）乳酸耐受能力训练：乳酸耐受能力一般可以通过提高缓冲能力和肌肉中乳酸脱氢酶活性来获得。因此，训练中要求血乳酸在12mmol/L左右，重复训练，刺激机体对这一血乳酸水平适应，提高缓冲能力和肌肉中乳酸脱氢酶活性。 3评价训练负荷效果 运动时血乳酸浓度会上升，并与运动强度有关。运动后血乳酸值升高幅度大，表示运动强度大；通过一段时间的训练，血乳酸升高的幅度减少，则表明机体对此训练量适应。郭黎等人的研究指出运动后血乳酸浓度与无氧耐力运动成绩有密切的联系；运动后心率的恢复与乳酸清除率并不平行，心率恢复的程度并不能真实反映体内乳酸的清除情况；乳酸清除率较心率恢复率可更确切地反映无氧耐力运动员运动后恢复的程度。
生理生化监控在运动训练中的应用
青岛基地教练员业务研讨会 第七讲《生理生化监控在运动训练中的应用》 （2010年9月16日） 王景玲 一、进行生理生化监控是科学训练的重要环节之— （一）生理生化监控指标的来源 三个再合成ATP的供能系统
（二）运动负荷和机能水平的关系
上图说明：长期的运动训练过程实质上是一个不断重复进行的刺激-反应-适应过程，是一个身体结构与机能不断破坏与重建的循环过程，通过这个过程，运动能力不断增强，运动成绩不断提高。 只有当训练负荷的强度和持续时间与特定个体的工作能力相适应时，训练刺激才是有效的。当训练负荷超出了这一狭窄的有效范围，就会出现训练负荷不足或过度训练。”
生理生化监控是指通过利用一些方法和技术，测定运动训练过程中运动员体内的一些生理生化指标，以评价运动员训练时的负荷强度和量、训练方法和手段的合理性与有效性。从而为教练员了解训练效果，正确评价和调整训练方案提供科学依据。运动训练的生理生化监控涵盖了运动训练过程前、中、后以及动态的和静态的全方位的监控。 观察运动员对运动负荷的反映，科学地监控和调整运动负荷，不仅能防止运动损伤和过度疲劳的发生，而且能有效地提高训练效果，这是科学训练的重要环节之—。 二、运动训练生理生化监控研究的内容
生理生化训练监控的主要内容：专项能力监控—阶段性训练效果，训练方法评价；机能状态监控—恢复效果、手段评价等；训练负荷(强度、量)监控：一次/组训练效果、训练方法评价，恢复性训练/手段效果评估。 （一）身体机能监控 ————机能评定 测定一个小周期训练后运动员身体机能状况，评价运动员对这一小周期训练负荷的适应情况，以及为运动员下一个小周期的训练负荷安排提供参考。 （二）训练中监控的内容 训练负荷强度监控； 训练负荷量监控； 训练方法监控； 训练效果监控； 三、常用训练生理生化监控指标及评定方法 （一）训练负荷强度监控
全血乳酸测定在临床中的应用
全血乳酸测定在临床中的应用 序言 §John Toffaletti博士: 纽约杜克大学医学中心血气室主任，血气研究领域久负盛名，发表了一篇题为―全血乳酸浓度的测定及重要临床意义‖ 的综述，该文章从乳酸的定义、检测的意义、临床应用及样品分析前处理细节做了一个非常好的概述…… 乳酸测定 §乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳，肌肉，脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。 乳酸酸中毒 §相乳酸升高最常见于乳酸酸中毒，但也可与呼吸性碱中毒关联: –A型乳酸酸中毒：严重组织缺氧时发生，任何原因引起的组织缺氧将导致A型乳酸酸中毒发生。 –B型乳酸酸中毒：组织缺氧并不明显，但组织缺氧可同时存在。 A型乳酸酸中毒 §休克 §严重哮喘 §一氧化碳中毒 §心衰 §局域性血流灌注不足（组织缺氧） B型乳酸酸中毒 §药物引起 –酒精中毒 –阿斯匹林 –氰化物 –双呱类（糖尿病药物） B型乳酸酸中毒 §疾病 –糖尿病 –恶性肿瘤 –肝脏疾病 –甲基丙二酸血症(由于甲基丙二酸在血中的堆积，导致严重到可引起死亡的代谢性酸中毒和酮症的一类先天性代谢性疾病) –糖原酶缺陷(影响糖类合成的酶缺陷) –脂肪酸氧化缺陷(影响脂肪酸分解的疾病) –脓毒血症 正常参考范围
–< 2.0 mmol/L –需要救治：>4.0 mmol/L –死亡率高：>9.0 mmol/L 临床医生通过监测乳酸来评估治疗效果，乳酸水平降低说明组织氧供得到改善。 乳酸测定临床应用 §乳酸测定对指导重症监护患者救治有非常重要的作用，尤其是处理心肌梗塞、心功能不全、血流不足引起的组织缺氧。因此，要求通过快速反应，在30分钟内(包括抽血)提交具有诊断价值的检测结果。由此将带来了临床乳酸检测申请的大幅度提高。 乳酸测定 §在以下科室或外科中检测乳酸有重要 意义： –外科手术(如冠状动脉分流术) –重症监护科（ICU） –急诊科 –生理学（重点）实验室 乳酸测定临床应用 §开放性心脏手术 §冠状动脉分流术 §体外膜氧合(体外循环交换膜式氧合作用) §休克状况的评估 §主动脉内球囊起博器植入术 §急诊科胸痛患者的分类救治 §创伤病人急诊室的评估 §急腹症的诊断 §烧伤患者 …… 开放性心脏手术 §通过血中乳酸测定对开放性心脏手术后进程进行监测的重要意义已经明确。通常手术后的恢复期，血中乳酸水平仅轻度升高，24小时内降至接近正常水平。若手术后的24小时内/后的血中乳酸结果不符合该模式，就需要进行容量支持、心脏兴奋剂、扩展血管和呼吸支持的治疗。 体外膜氧合(ECMO) §由于ECMO（体外循环交换膜式氧合作用）的强迫性与高费用，只有在病人的病情严重情况下才进行。血乳酸的测定作为是否需要进行ECMO的依据，也用来评价ECMO 为组织供氧的效果。 休克状况的评估 §血乳酸升高常见于循环性休克的患者，循环性休克（严重低血压）可由血容量的减少（失血或脱水），心输出量减少或脓毒血症（脓毒性休克）性血流紊乱等引起。虽然
RACE cDNA反转录说明书
RACE cDNA反转录说明书 1.准备cDNA合成反应液 2.0 ul 5×First-Strand Buffer 1.0 ul DTT (20uM) 1.0 ul dNTP Mix (10mM) 总共体积：4ul 2.准备以下试剂： 5’-RACE-cDNA: 1.0—2.75ul RNA, 1.0ul 5’-CDS Primer A 3’-RACE-cDNA: 1.0—3.75ul RNA, 1.0ul 5’-CDS Primer A Control-cDNA: 只需要1ul mouse heart total RNA（1ug/ul） 3.加入H2O于上一步反应液至5’-RACE为3.75ul，3’-RACE为 4.75ul，然后轻轻吸打混匀。 4.放入PCR仪反应：72℃3min, 42℃2min 然后14000g离心10s。 5.对于5’-RACE-cDNA的合成，加入1ul SMARTerⅡA oligo至4.75ul。 6.配混合液： 4.0ul Buffer mix from step 1 0.25ul RNase inhibitor (40U/ul) 1.0ul SMARTScribe reverse transcriptase (100U) 总体积：5.25ul 7.将第6步混合液加入第2步微离心管中，使总体积达到10ul。用枪轻轻吸打混匀。 8.42℃反应90min，然后70℃反应10min。 9.用Tricine-EDTA buffer稀释反应产物： 如果：起始RNA<200ng,加入20ul； 起始RNA>200ng,加入100ul； Poly A+ RNA，加入250ul。 10. 将稀释好的cDNA模板保存于-20℃，最长时间达3个月。
血乳酸指标在运动训练中的应用
32 CHINA SPORTS COACHES 中国体育教练员 2010年第4期 训练与科研 血乳酸指标在 运动训练中的应用 ● 上海体育科学研究所 邱 俊 运动补糖 影响体重的基本要素是热能摄入量与热能消耗量，要想减轻或保持体重，就要控制热能摄入量，使之不超过热能的消耗量。众所周知，每日摄入的营养素中，能为人体提供热能的有碳水化合物、脂肪及蛋白质3类，只有这3类营养素提供的总热能大于热能消耗量时，人才会发胖。因此，吃糖会增加体重的说法是片面的。由于对糖的认识存在误解，运动员的补糖普遍不足，主食及含糖运动饮料摄入不足是主要原因。要保证运动员顺利完成高强度的训练和比赛，合理、及时的补糖十分重要。 运动前补糖能增加运动员体内肌糖原、肝糖原的储备和血糖的来源，延迟运动衰竭的出现时间。早餐是运动员上午训练的重要能量基础，若早餐未摄入足够的能量甚至空腹训练，就极易发生疲劳，影响训练质量。 运动中补糖可补充大脑能量供应的不足，提高机体的血糖水平，减少肌糖原的耗损。训练时，可每隔30－60min补充一次含糖饮料或容易吸收的含糖食物，如面包、蛋糕等。摄入运动饮料时要少量多次，避免温度过低对胃肠道的刺激。运动中补糖量一般不大于1g/min。 运动后补糖能加速肌糖原的恢复。在恢复期，运动员对营养的迫切需求仅仅是运动后的几小时而不是几天，故运动后补糖越早越好，6h内补糖的效果最佳。建议运动后即刻补糖50g，以后每隔2h补充50－100g，24h内补糖达到9－16g/kg。 此外，运动员应尽量避免进行离心性运动，离心性运动引起的肌纤维损伤会使肌糖原的合成能力受到抑制。有研究指出，在做离心和向心运动的腿中，运动后即刻补糖，肌糖原的合成速度较为相近；而2天后补糖时，做离心运动的腿中糖原的合成速度明显低于向心运动的腿。 为更好地进行糖的补充，且避免因补糖导致的胃肠道反应，以及由于血糖升高而引起的胰岛素反应，运动营养品越来越偏向于补充FDP（1,6-二磷酸果糖）和低聚糖以及含有它们及一些复合无机盐的运动饮料。FDP既能为机体提供糖和能量，又能增强运动时的有氧代谢，改善和增强运动员的无氧能力，对红细胞、心肌等也有保护和促进作用。研究认为，低聚糖既有利于维持大强度运动时的血糖水平和内环境稳态，还有利于降低血乳酸水平、延缓运动性疲劳的发生。日常膳食中，低聚糖在豆类食物中较为常见。糖-电解质运动饮料通常含有2－3种糖类，包括葡萄糖、果糖、蔗糖、低聚糖和玉米糖浆等，适宜在运动前、中、后饮用，由于其渗透压浓度与血液的渗透压浓度相近，故吸收速度较快，效果较好。
血乳酸在运动训练中的运用与测定_贺戎
河南大学体育学院《运动生物化学》课程小论文 题目:血乳酸在运动训练中的运用与测定 学号：1215090229 姓名：张雨彪
摘要 本文通过对从2005年来国内体育期刊刊载有关血乳酸在运动训练的应用与测定的论文进行了研究与归纳，分析了血乳酸的概念，乳酸的产生与消除及其意义，血乳酸与运动强度的关系。训练水平可影响运动后血乳酸浓度。速度耐力性运动项目的高水平运动员，运动成绩好，同时血乳酸最大浓度值也高；耐力性运动项目的运动员，在完成相同亚极量运动负荷时，优秀运动员血乳酸值相对较低。这一特点可用以评定运动员训练水平或选材。 关键词：血乳酸中长跑竞技体育综述
前言 据研究证明，血液乳酸的含量与运动强度关系密切，血乳酸可作为评定运动强度的生化指标，而且高乳酸的训练有利于提高运动员的速度耐力素质，增强运动员的耐酸能力。因此，血乳酸含量的测定，对于从事体育工作的人来说是很重要的。 1有关血乳酸的相关理论 1．乳酸的产生 乳酸是机体进行无氧代谢时糖醇解的产物，但在不同的运动情况下，都有不同程度的乳酸的生成.[2.] 1.1安静状态下乳酸的生成 在人体处于安静状态时，肌细胞内糖原或葡萄糖酵解过程生成丙酮酸和还原型辅酶I。其中大部分丙酮酸和NADH能进入线粒体氧化脱羧生成乙酰CoA，再进入三羧酸循环生成二氧化碳和水，只有少量丙酮酸和NADH在细胞质内的乳酸脱氢酶(肌型LDHS)催化下，生成乳酸再生的NAD+重新参加糖酵解过程。所以，安静时正常人体内肌乳酸含量约为1毫摩尔／千克湿肌。 1.2短时间极量运动时乳酸的生成 在极量运动时．ATP的利用速率最大值可达安静时的几百倍甚至近千倍，大大超过有氧代谢生成ATP的最大速率。此时，氧气缺乏，血液供应少，Ⅱ型肌纤维儿乎全被募集，运动时所需的ATP只能通过磷酸原和糖酵解系统供给。出于人体骨骼肌纤维贮存的ATP，c晗量很少，只能维持最大功率运动10秒钟之久。所以，在109：钟以上极量运动中．随着ATP、CP的消耗，细胞内ADP，AMP，Pi和肌酸的含量逐渐增多，从而激活糖原分解，加快糖酵解速度。运动持续30秒—60秒时，糖酵解达最大速度．肌乳酸生成迅速增加，直至运动结束。在竭尽全力的自行车运动中，肌乳酸浓度可达39毫摩尔／千克湿肌，在l0秒、30秒、90秒极量运动时，糖酵解供能占总能量消耗的相对百分数分别是44％、49％和42％，可见，乳酸的生成在短时间极量运动时的作用是相当大的。 1.3亚极量运动时乳酸的生成 在长时间亚极量运动时，体内的氧气较充分，运动时主要靠糖、脂肪的有氧代谢供能，糖酵解供能所占比例较少，主要发生在运动开始时和获得稳态氧耗速率以前。运动开始时，由于局部性缺血引起的暂时氧供不足，导致乳酸生成量增加。大约在运动5分钟-l0分钟获得稳态氧耗速率后，糖酵解供能相应减少，乳酸生成速率下降。但当战术变换采取加速度或增大运动强度时，乳酸生成速率又会相应提高。 [2.] 2血乳酸指标在运动实践中的应用 2．1评定运动员训练水平
血浆乳酸测定意义教学内容
血浆乳酸测定意义
全血乳酸(LA)测定在临床中的应用 急诊科苏中杰 【概况】：乳酸(Lactic acid, LA)是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢终产物。主要由葡萄糖通过糖酵解途径在细胞浆中由丙酮酸代谢生成,乳酸/丙酮酸的比例大约为20∶1。乳酸产生于骨胳，肌肉，脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾脏分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量是否不足。另外，肌乳酸的产生量与肌纤维收缩的强度、大小有密切的关系，所以运动后测定乳酸浓度可以对运动强度的大小作出相应的鉴定。乳酸的分子量只有90，是葡萄糖分子量的一半，是一种低分子化合物，从肌细胞中可以较顺利地弥散到血液中。各种不同强度的运动后3—12分钟，血乳酸可达到最高值，耐力运动后即刻血乳酸已经达到最高值。强度越大的，运动后血乳酸达到最高值的时间也越长。血乳酸的最高值是与肌乳酸的最高值成正比。因此，测定血乳酸的浓度也同样可以对运动强度的大小作出相应的鉴定。为此血乳酸测定也用于体育科研中。 乳酸水平的生理性增高可见于剧烈运动所致的肌肉痉挛等，但病理性增高则最常见于乳酸性酸中毒等多种临床疾病，而与呼吸性碱中毒也有关联。 –A型乳酸酸中毒：严重组织缺氧时发生，任何原因引起的组织缺氧将导致A型乳酸酸中毒发生。常见于休克、 严重哮喘、一氧化碳中毒、心衰、局域性血流灌注不足（组织缺氧）。 –B型乳酸酸中毒：组织缺氧存在但并不明显。 §药物引起者有：酒精中毒、阿斯匹林、氰化物、双呱类（糖尿病药物）。 §疾病引起者有：糖尿病、恶性肿瘤、肝脏疾病、甲基丙二酸血症(由于甲基丙 二酸在血中的堆积，导致严重到可引起死亡的代谢性酸中毒 和酮症的一类先天性代谢性疾病)、糖原酶缺陷(影响糖类合 成的酶缺陷)、脂肪酸氧化缺陷(影响脂肪酸分解的疾病)、脓 毒血症。