茉莉酸甲酯对丹参毛状根中丹参酮类成分积累和释放的影响
茉莉酸甲酯综述Word文档
茉莉酸甲酯综述Word⽂档茉莉酸甲酯的研究进展摘要：茉莉酸及其衍⽣物茉莉酸甲酯统称为茉莉酸盐，是⼴泛存在于植物中的⼀种⽣长调节物质，在植物体内起着重要的作⽤。
本⽂主要就茉莉酸和茉莉酸甲酯的⽣物合成、茉莉酸甲酯的⽣理⽣化作⽤、茉莉酸类物质在植物抗性⽅⾯的研究及其在植物⽣长代谢⽅⾯的作⽤进⾏了综述。
关键词：茉莉酸类物质；茉莉酸甲酯；抗逆性茉莉酸(JA)和茉莉酸甲酯(MeJA)作为与损伤相关的植物激素和信号分⼦, ⼴泛存在于⾃然界,是许多植物体内产⽣的天然化合物[1]。
外源应⽤类化合物能够激发防御植物基因的表达,诱导植物的化学防御,产⽣与机械损伤和昆⾍取⾷相似的效果。
⼤量研究表明,⽤茉莉酸类化合物处理植物可系统诱导蛋⽩酶抑制剂(PI)和多酚氧化酶(PPO),从⽽影响植⾷动物对营养物质的吸收,还能增加过氧化物酶、壳聚糖酶和脂氧合酶等防御蛋⽩的活性⽔平,导致⽣物碱和酚酸类次⽣物质的积累,增加并改变挥发性信号化合物的释放,甚⾄形成防御结构,如⽑状体和树脂导管。
茉莉酸甲酯可以从植物的⽓孔进⼊植物体内,在细胞质中被酯酶⽔解为茉莉酸,实现长距离的信号传导和植物间的交流,诱导邻近植物产⽣诱导防御反应。
⼤量的研究表明,茉莉酸类化合物具有⼴谱的⽣理效应,它不仅调节植物的⽣长和发育,如萌发、衰⽼、果实成熟、根的⽣长、花粉发育和球茎的形成、卷须的缠绕等[ 1 ,2 ] ,⽽且还参与植物对机械伤害、病害、⾍害等环境的胁迫做出防御响应,和经典植物激素或植物⽣长调节剂相似[3 ]。
因此，近年来茉莉酸类化合物引起了植物学家⼴泛的关注。
1 茉莉酸及其茉莉酸甲酯的⽣物合成茉莉酸（Jasmonic acid）及其挥发性茉莉酸甲酯（MeJA）是通过硬脂酸途径（octadecanoid pathway）产⽣的脂肪酸衍⽣物，是环戊酮衍⽣物（cyclopentanone derivatives）之⼀。
植物受到创伤、昆⾍咬⾷或病源菌感染后引发的局部及系统性的伤害信号，如寡糖激发⼦、多肽、脱落酸及甲壳素等，与细胞膜上的受体结合进⼊细胞，或不经与受体结合直接穿过细胞膜进⼊细胞. 进⼊细胞后的伤害信号诱导脂肪酶作⽤，使茉莉酸前体物亚⿇酸从细胞膜渗透⾄细胞内，经脂氧合酶（lipoxygenase，LOX）氧化成13-氢过氧化亚⿇酸（13-hydroperoxylinolenic acid），再经丙⼆烯氧化合酶（allene oxide synthase，AOS）及丙⼆烯环化酶（allene oxide cyclase，AOC）氧化⽣成12-氧-植物⼆烯酸（12-oxo-phytodienoic acid，12-OPDA）进⼊细胞质中，经12-氧-植物⼆烯酸还原酶（OPR）作⽤，再进⼊到过氧化物体中经3 次β氧化最后形成茉莉酸。
诱导子对丹参毛状根酚酸类和丹参酮类成分积累的影响_张顺仓
色谱级 甲醇、乙睛购 自 F isher Sc ientif ic ( Fa irlaw n, N J, USA ) , 磷酸 ( 色谱级 ) 购自西安试剂厂, 对 照品迷迭香酸 ( 批号 20283-93-5) 、丹酚酸 B ( 批号 115939-25-8)、二氢丹参酮 Ñ ( 批号 20958-18-3)、隐 丹参 酮 ( 批 号 110852-200305) 、没 食 子 酸 ( 批 号
第 36卷第 10 期 2011 年 5 月
V ol1 36, Issue 10 M ay, 2011
诱导子对丹参毛状根酚酸类和丹参酮类 成分积累的影响
张顺仓1, 刘岩 2, 沈双 1, 梁宗锁 1* , 杨东风 1
( 11西北农林科技大学 生命科学学院, 陕, 天津 300402)
# 1270#
用 H PLC 色 谱方 法, 色谱 条 件 为: 以 A 乙 腈 和 B 0101% 磷酸水溶液 ( pH 216)为流动相, 采用二元梯 度洗脱 ( 表 1) 。W aters 2996二极管阵列 检测器检 测, 流速 110 mL# m in- 1, 柱温 30 e ( 图 1)。
# 1269#
【推荐下载】茉莉酸甲酯对丹参茎叶丹酚酸和丹酚酸B含量影响
茉莉酸甲酯对丹参茎叶丹酚酸和丹酚酸B含量影响 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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茉莉酸甲酯对丹参茎叶丹酚酸和丹酚酸B含量影响 【摘要】目的探讨茉莉酸甲酯(methy jasmonat, MJ )对栽培丹参的药效成分影响，并为丹参地上部分的开发利用提供一定的研究依据。
方法采用比色法和HPLC法，以丹酚酸和丹酚酸B为检测指标，对茉莉酸甲酯处理的丹参茎叶样品进行检测。
结果丹参种苗经茉莉酸甲酯喷施处理后的48 h内，其茎叶中丹酚酸和丹酚酸B含量均高于对照，在所测试范围5 10-9～5 10-3的浓度中，随浓度的升高而含量增加。
结论外施茉莉酸甲酯能促进丹参茎叶中的丹酚酸和丹酚酸B含量的积累，可以考虑在生产中加以应用，并注意今后在丹参的种植及采收中地上部分的利用。
【关键词】丹参茉莉酸甲酯丹酚酸丹酚酸B Abstract：ObjectiveTo study the effect of methyl jasmonate(MJ)on medicine composition of cultivar Salvia miltiorrhiza，and provide some reference for the exploitation and utilization of the leaves and stems in Salvia miltiorrhiza.MethodsThe leaves and stems of Salvia miltiorrhiza were treated with MJ, the contents of salvianolic acid and salvianolic acidB were assayed by the methods of colorimetry and HPLC. ResultsWithin the concentration of5 10-9～5 10-3g/L, the contents of the salvianolic acid and salvianolic acid B in Salvia miltiorrhiza treated by MJ were higher than those in control, and increased while the concentration of MJ increased.ConclusionThe contents of the salvianolic acid and salvianolic acid B in the leaves and stems of Salvia miltiorrhiza can be promoted by MJ, and utlization in cultivated planting of Salvia miltiorrhiza should be considered. Key words：Salvia miltiorrhiza Bge.; Methyl jasmonate; Salvianolic acid; Salvianolic acid B 丹参Salvia miltiorrhiza Bge.为唇形科植物丹参的干燥根及根茎，其有效成分包括水溶性和脂溶性两大类。
茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根中主要莨菪烷类生物碱成分积累和释放的影响
茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根中主要莨菪烷类生物碱成分积累和释放的影响[通信作者] *孙敏，教授，博士生导师，Tel：（023）68254901，E-mail：jwcsm@研究发现它在植物细胞的多种逆境反应中起信号介导的作用，引起细胞抗逆反应产物的表达[1-2]，并能作为诱导子（elicitors）诱导曼陀罗、丹参等物种毛状根中次生代谢产物的积累和释放[3-4]。
曼陀罗Datura stramonium L.是茄科曼陀罗属植物，又叫曼荼罗、满达、曼扎、曼达、醉心花、狗核桃、洋金花、枫茄花、万桃花、闹羊花、大喇叭花、山茄子等，多野生在田间、沟旁、道边、河岸、山坡等地方，原产印度[5]。
曼陀罗原产热带及亚热带，我国各省均有分布。
喜温暖、向阳及排水良好的砂质壤土。
主要药用成分为具有抗胆碱特性的莨菪碱（hyoscyamine）、东莨菪碱（scopolamine）及阿托品（atropine）等生物碱，具有解痉镇痛、麻醉镇静、止咳平喘、扩张毛细血管、改善微循环以及抗晕船晕车等功效[6]。
随着对东莨菪碱药理作用的深入研究和广泛用于临床镇静、戒毒脱瘾、治疗麻痹症、晕动症、胃肠痉挛性绞痛、三叉神经痛和有机磷农药中毒等，在原有巨大市场基础上，其需求还在迅速增长[7]。
近年来，国内外对许多药用植物通过诱导子刺激毛状根中次生代谢产物的迅速积累培养体系的建立获得一些珍贵的天然次生代谢产物的研究，获得了令人鼓舞的结果[8]。
Zabetakis等[3]比较了在曼陀罗毛状根培养中添加MJ、真菌诱导子（酵母细胞壁，YE）和寡半乳糖醛酸（oligogalacturonides）的诱导效果，结果发现MJ能增加茛菪碱的合成，是所用的3种诱导子中诱导效果最好的。
Pitta-Alvarez等[9]考查了不同的生物（SA，YE）和非生物（CaCl2，AgNO3，CdCl2）诱导子对曼陀罗毛状根中茛菪碱生产的影响，结果表明所选用的生物和非生物诱导子都能不同程度地提高茛菪碱的产量。
不同干燥方法对丹参毛状根有效成分含量及其抗氧化活性的影响
不同干燥方法对丹参毛状根有效成分含量及其抗氧化活性的影响杨翼信;李焱;周铜水【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2014(000)012【摘要】目的：探讨不同干燥方法对丹参毛状根中主要化学成分含量及其抗氧化活性的影响，尤其关注采后干燥对丹参毛状根酚酸类成分是否也有类似对植物根一样的胁迫诱导作用。
方法丹参毛状根经冷冻干燥、真空干燥、阴干和晒干四种不同干燥方式处理后，采用高效液相色谱法测定毛状根中包括9种酚酸类和4种酮类成分的含量；利用1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（ DPPH）自由基清除试验、超氧阴离子清除试验、脂质过氧化抑制试验测定毛状根提取物的抗氧化活性。
结果与冷冻干燥相比，真空干燥和阴干对酚酸类成分的影响不大，但酮类成分下降约50％；晒干处理后二类成分均严重损失达90％左右；晒干样品提取物抗氧化活性也显著下降。
结论冷冻干燥是最适合丹参毛状根的干燥方法；与丹参根不同，采后干燥对毛状根的酚酸类成分无诱导作用。
【总页数】5页(P2233-2236,2237)【作者】杨翼信;李焱;周铜水【作者单位】复旦大学生命科学学院及天然药物研究中心，上海 200438;复旦大学生命科学学院及天然药物研究中心，上海 200438;复旦大学生命科学学院及天然药物研究中心，上海 200438【正文语种】中文【相关文献】1.茉莉酸甲酯对丹参毛状根有效成分含量的影响 [J], 熊丙全;刘冬青;廖相建;郑雪莲2.不同环境发汗对发汗丹参有效成分含量及体外抗氧化活性的影响 [J], 邱镇;于凡;李国转;王国凯;陈卫东;朱光宇3.脱落酸不同处理时间对丹参毛状根有效成分积累的影响 [J], 盛东峰;朱自学4.不同炮制方法对不同产地续断中有效成分含量及抗氧化活性的影响 [J], 张祺嘉钰; 孙毅; 赵重博; 左振宇; 宋艺君; 吴建华5.丹参功能基因组学研究Ⅱ——丹参毛状根不同时期基因表达谱分析 [J], 崔光红;黄璐琦;邱德有;袁媛;付桂芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
丹参中主要活性成分生物合成的研究进展
丹参中主要活性成分生物合成的研究进展刘薇薇;陈军峰;肖莹;张磊;陈万生【摘要】Tanshinones and phenolic acids are two major classes of effective compounds in tiorrhizae Radix et Rhizoma.Accumulative levels of these compounds directly determined its quality and efficacy.Presently,for the purpose of understanding the underlying the mechanism behind the biosynthesis and regulation of effective compounds in tiorrhiza,a series of progresses have been pressed ahead.Benefiting from the boost and convenience of high-throughput genomic,transcriptomic,and metabolic analysis methods,remarkable achievements have been accessed in this field.In this paper,a summary for the recent progress have been made with the provision of a reference for better understanding over the quality of tiorrhiza.%丹参酮类和丹参酚酸类化合物是丹参中两类主要的活性成分,其含量水平是丹参药效的决定因素,直接体现了药材的品质.为深入解析丹参的品质内涵以提升丹参品质,学者们开展了一系列研究以阐明丹参中活性成分的生物合成机制及累积特征.近年来,随着更高效的基因组、代谢组等研究手段的应用,丹参活性成分的生物合成研究获得了快速发展,本研究对该领域研究进展进行综述,为丹参的活性成分及其药材品质的深入研究提供理论依据.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2016(018)011【总页数】8页(P1891-1898)【关键词】丹参;丹参酮;丹参酚酸;生物合成【作者】刘薇薇;陈军峰;肖莹;张磊;陈万生【作者单位】上海中医药大学附属普陀医院上海200233;中国人民解放军第二军医大学附属长征医院上海200003;中国人民解放军第二军医大学附属长征医院上海200003;中国人民解放军第二军医大学药学院药用植物学教研室上海200433;中国人民解放军第二军医大学附属长征医院上海200003【正文语种】中文【中图分类】R931.6中药丹参（Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma）是唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎，其有效成分具有良好的扩张血管、治疗心肌缺血、抗动脉粥样硬化、改善微循环以及抗菌消炎等活性，在中国广泛应用于心脑血管系统疾病的治疗。
基于茉莉酸甲酯诱导的丹参毛状根酚酸类成分次生代谢机制研究_李文渊
第 37 卷第 1 期 2012 年 1 月
Vol. 37，Issue 1Байду номын сангаасJanuary，2012
表 1 荧光定量 PCR 检测基因引物序列 Table 1 Primer sequences for real-time PCR
检测基因 PAL 4CL TAT HPPR C4H β-actin
引物序列（ 5'-3'）
有清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应，其作用强度 高于维生素 C、维生素 E、甘露醇。此外，它还对心 肌缺血再灌注损伤、脑损伤具有保护作用，并且具有 抗衰老、抗肿瘤的作用［7］。CA 是大部分酚酸类成 分的基本化学结构，它在体内的代谢产物阿魏酸具 有抗心肌缺血、降低心肌耗氧量等作用，临床上用于 冠心病、心绞痛和缺血性脑血管病的治疗［8］。
ACCTACCTCGTCGCCCTATGC CCACGCGATCAAGTCCTTCT ATTCGCATTCGCATTTCTCGG GCGGCGTAGTGCTTCACCTTT TTCAACGGCTACGCTCCAACT AAACGGACAATGCTATCTCAAT GACTCCAGAAACAACCCACATT CCCAGACGACCCTCCACAAGA CCAGGAGTCCAAATAACAGAGCC GAGCCACCAAGCGTTCACCAA AGGAACCACCGATCCAGACA GGTGCCCTGAGGTCCTGTT
丹参4-(5′-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶的cDNA全长克隆及其诱导表达分析
关键 词 ： 丹参 ； ｍ Ｍ ； Ａ Ｅ 克隆 ； ＳＣ Ｋ Ｒ Ｃ ； 茉莉 酸甲酯
中 图分 类 号 ：Ｒ １ ． ９ ５２ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ５３— ８ ０ ２ ０ ）２—１５ ０ ０ １ ４ ７ （ ０８ １ ２ｔ ｉｅ５－ｉｈ ｓｈ ）２Ｃ ｍｅｈ ｌ ｆｌｌｎ ｔ ＤＮ ｆ （ ｙｉ ｎ ＇ ｐ ｏｐ ｏ ・・ － ｔｙ－ ４ ｄ ｄ Ｄ－
Ａ ｓ ａｔ Ｔ ｉ ｐｐ ｒ ｒｌ ｔ ｄ ｃｄｔｅａｑ ｉ ｄｆｌｌｎｔ Ｄ Ａ ｏ ４ （ ｙ ｄｎ ｄｐ ｏｐ ｏ 一 ｂ ｔ ｃ ： ｈｓ ａ ｅ ｆｓ ｙｉ ｒ ｕ ｅ ｃｕｒ ｌ ｅ ｇ ｃ Ｎ ｆ 一ｃｔ ｉｅ５－ｉｈ ｓｈ ） ｒ ｔ ｎｏ ｉ ｈ ｅ ｕ ｈ ｉ
ｅ ｙ ｈ ｉｏ ｉ ａ ｅ ｃｏ ｉ ｇ ａ ｄ ａ ａ ｙ ｉ ｒ ｔ ｒ ｔ ｌｋ ｎ ｓ ｌ ｎ ｎ ｎ ｎ ｌ ｓｓ ｏ ｎ ｒ ｄ ｃ ｄ ｇ ｎ ｘ ｒ ｓ ｉ ｎ ｉ ａ ｖａ ｍ ｉ ｉ ｒ ｈ ｚ ｆｉ ｔ ｏ ｕ ｅ ｅ ｅ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｎ Ｓ ／／ ｌ ｏ ｒ ｉａ ｔ
Ｅ ５ ４ ０ ） Ｒ ｓｌ ｆ Ｋ Ｇ ｎｌｓ ｈ ｗ ｄ ｔａ Ｓ Ｃ ａ ｅｏｇ ｔ ｔｅ ｕ ｓ ｅｍ ｏ ｏ ｅ Ｆ ３ ３ ９ ． ｅｕｔ ｏ Ｅ Ｇ ａ ａ ｉ ｓｏ ｅ ｈ ｔ ｍ ＭＫ ｗ ｓ ｂ ｌ ｏ ｈ ｐｔ ａ ｆｎｎ － ｓ ｙｓ ｎ ｒ
２Ｃ ｍ ｔｙ Ｄ． ｙ ｒ ｏ ｋｎ ｓ ｏ ａ ｙｒｏｓｏ Ｓ ｌ ａｍ ｌｏｒｉ Ａ ｂ ： ｍＣ 一 － ｅ １ ｅ ｔ ｉ ｌ ｉａｅｆ ｍ ｈ ｉ ｏｔ ｆ ａｖ ｉｉｒ ｚ ｈ ． ｒ ｈ ｔ ｒ ｒ ｉ ｔ ｈ ａ（ ｂ ｒ Ｓ ＭＫ。Ｇ ｎ ａ ｋｎ ｍ ｅ ： ｅ Ｂ ｎ ｕ ｂｒ
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第 32 卷第 4期 2007 年 2月
中国中药杂志
Ch ina Journal of Ch in ese M ateria M ed ica
V o.l 32, Issue 4 February, 2007
0 22 m 微孔滤膜除菌, 加入培养基中, 使 M J终浓 度为 200 m o l L- 1。
9d
0 024 # 0 004 0 572 # 0 082
2d0 147 # 0 0 Nhomakorabea4 0 251 # 0 044
丹参酮Ⅱ A 6d
0 134 # 0 023 0 601 # 0 109
9d
0 251 # 0 028 1 563 # 0 324
2. 2 M J对丹参酮类成分释放的影响 实验结果表 明, 处理后 9 d, 培 养基中隐 丹参酮 达 0 103 g mL- 1, 丹参酮Ⅱ A达 0 344 g mL- 1, 未经处理的正 常培养组 ( 对照组 ) 培养基中未检测到丹参酮类成 分。证明 M J能有效刺激丹参毛状根中丹参酮类成
[ 关键词 ] 茉莉酸甲酯; 丹参; 毛状根; H PLC [ 中图分类号 ] S 567 [文献标识码 ] A [文章编号 ] 1001 5302( 2007) 04 0300 03
植物经常遭受不良因素如微生物入侵与伤害等 胁迫, 为了抵御不良环境, 植物细胞往往产生次生代 谢物质。诱导子的应用即基于这个原理, 采用诱导 子诱导药用植物细胞合成目的产物, 从而为研究植 物次生代谢调控提供了新思路与手段。近 10 余年 来, 这方面的研究一直是国内外研究的热点 [ 1 ] 。而 人工培养体系 毛状根具有生长稳定, 迅速, 能够 生产大量次生代谢产物等特点, 为药用植物活性成 分的研究构建了便利 实验体系 [ 2 ] 。目前有文献报 道 A g+ 和酵母提取物 ( Y E) 等诱导子对丹参毛状根 中丹参酮类成分含量的影响 [ 3, 4 ] , 但尚未见有茉莉 酸甲酯作为诱导子对丹参酮类成分的诱导的报道。 茉莉酸及其衍生物 ( 如茉莉酸甲酯 ) 被认为在植物 次生代谢过程中起诱 导信号传导作用 [ 5] 。有报道 外源性茉莉酸类化合物能有效刺激植物次生代谢物 的生物合成 [ 6, 7] , 可引起植物次 生代谢产物的迅速 积累 [ 6] , 其作用具有广泛性, 能诱导包括萜类、黄酮 类、生物碱类等化合物的积累。 Y uk imune等 [ 8 ] 在培
参酮、丹参酮Ⅱ A进行含量测定。色谱图见图 1。
1. 4 诱导试验 向培养 18 d的丹参毛状根培养基 中 M J进行诱导处理, 设 3个重复, 分别于处理后 0,
6, 9, 12 d后收获, 测定毛状根的干重及毛状根中丹
参酮 (隐丹参酮和丹参酮Ⅱ A ) 的含量。 1. 5 毛状根中丹参酮类成分的提取 取干燥至衡 重的丹参毛状根适量, 研碎过 40 目筛, 混匀。取毛
第 32 卷第 4期 2007 年 2月
中国中药杂志
Ch ina Journal of Ch in ese M ateria M ed ica
V o.l 32, Issue 4 February, 2007
茉莉酸甲酯对丹参毛状根中丹参酮类成分 积累和释放的影响
王学勇 1, 崔光红1, 黄璐琦 1* , 邱德有2
[ 1] K etchum R E, G ibson D M, C roteau R B. The k inet ics of taxoid accu m ulat ion in cell suspen sion cu ltures of Taxus follow ing elicitation w ith m ethyl jasmonate[ J]. B iotechnol Bioeng, 1999, 62( 1): 97.
( 1. 中国中医科学院 中药研究所, 北京 100700; 2. 中国林业科学研究院 林业研究所, 北京 100091)
[ 摘要 ] 目的: 研究茉莉酸甲酯 ( m ethy jasmonat, M J)对丹参酮类成分的积累和向培养 基中的释 放的影响。方 法: 6 7V 悬浮振荡培养 ATCC15834农杆菌诱导的丹参毛状根培养 18 d后, 液体培养基中加入化学诱导子 茉莉 酸甲酯, 采用 H PLC 的方法, 测定 M J处理后不同时间段 ( 2, 6, 9 d)丹参毛状根中隐丹参酮、丹参酮 IIA的含量以及其 在培养基中的含量。结果: 毛状根经 M J处理后 2, 6, 9 d隐丹参酮的含量分别达 0 039, 0 204, 0 572 m g g- 1, 分别 是同时期未经 M J处理的 2 2, 8 5, 23 8倍 ; 丹参酮 IIA的含量达 0 251, 0 601, 1 563 m g g- 1, 分别是同时 间期未经 M J处理丹参毛状根的 1 9, 4 1, 6 2倍。结论: M J能显著促进丹参 毛状根中 丹参酮 类成分 的积累并 向培养 基中释 放。
[收稿日期 ] 2006 07 12 [ 基金项目 ] 国家重点基础研究发展计划 ( 2006CB504700) ; 国 家高技术研究发展计划 ( 2003AA 2Z2040) [ 通讯作者 ] * 黄璐琦, Te:l ( 010) 64014411 2956, E m ai:l hu a
ngluq @i 263. net
[ 3] Zhang C H, Y an Q, Cheuk W K, et a.l Enhan cem ent of tansh inone product ion in Sa lvia m iltiorrh iza hairy root cultu re by A g+ elicitation and nutrient feed ing[ J] . P lantaM ed, 2004, 70: 147.
3 01
第 32 卷第 4期 2007 年 2月
中国中药杂志
Ch ina Journal of Ch in ese M ateria M ed ica
V o.l 32, Issue 4 February, 2007
代谢过程中哪些环节有关, 其 作用原理是否 与 YE 等诱导子作用相似, 是否通过增强丹参酮类成分的 none MVA 代谢途径相关酶的活性从而促进丹参酮 类成分的积累等, 还有待于进一步研究。 [ 参考文献 ]
80% ~ 30% A。在该色谱条件下对丹参毛状根隐丹 倍 ( 处理后 6 d) 。
表 1 M J处理后不同时期丹参酮类成分的积累 ( n = 3)
mg g- 1
组别
对照 MJ
2d
0 017 8 # 0 004 0 039 # 0 006
隐丹参酮
6d 0 023 # 0 006 0 204 # 0 037
图 1 丹参毛状根丹参酮类成分的色谱图 A 对照品; B 样品; 1. 隐丹参酮; 2. 丹参酮Ⅱ A
2 结果与分析
2. 1 M J对丹参酮类成分积累的影响 M J处理后 作用结果见表 1。经过 M J处理后, 丹参酮类成分含 量迅速上升, 处理后 2 d, 隐 丹参酮达 0 039 mg g- 1, 是同时期对照组的 2 19倍; 丹参酮Ⅱ A达 0 251 m g g- 1, 是对照组的 1 7倍; 处理后 6 d, 隐丹参酮 达 0 204 m g g- 1, 是同时期对照组的 8 9倍, 丹参 酮Ⅱ A达 0 601 mg g- 1, 是对照组的 4 5倍; 处理后 9 d, 隐丹参酮达 0 572 m g g- 1, 是同时期对照组的 23 8倍, 丹参酮ⅡA 达 1 563 m g g- 1, 是对照组的 4 0倍。分析结果表明: 丹参毛状根 M J处理之后, 丹参酮类成分在短时间内迅速积累, 其中隐丹参酮
[ 2] Y oojeong k mi , Barbara E W, Pam ela J W. S econdary m etabolism of hairy root cultu res in b ioreactors vitro cell[ J]. D ev B iol Plan,t 2002, 38: 1.
状根细粉约 0 2 g, 精密称定, 置 20 mL 量瓶中, 加甲
醇溶液 4 mL, 精密称 重, 超声 处理 40 m in, 取出放 冷, 加甲醇溶液补足至原重, 摇匀, 静置, 过 0 45 m 微孔滤膜, 即得。 1. 6 培养基中丹参酮类成分的提取 取 100 mL 丹 参毛状根培养基置于 250 mL 的分液漏斗, 加入等体 积的氯仿, 摇匀, 静置, 待分层后, 收集下层溶液, 重复 萃取 3次, 旋转蒸发仪回收氯仿至干, 加入 50 mL 无 水乙醇溶解洗涤, 转入 100 mL 烧杯, 水浴浓缩至干, 甲醇溶解, 定容至 2 mL, 过 0 45 m 微孔滤膜, 即得。 1. 7 丹参酮类成分含量测定 采用 RP H PLC 色谱 方法, 其色谱条件为: W aters RP C18 ( 3 9 mm ∀ 150 mm, 5 m ) , 检测波长 270 nm; 柱温 30 ! , 流速 1 0 mL m in- 1, 流动相为 0 5% 醋酸甲醇 ( A ) 和 0 5% 醋酸水 ( B ) 线性梯度洗脱: 0~ 25 m in, 30% ~ 60%
A; 25~ 30 m in, 60% ~ 65% A; 30~ 50 m in, 65% ~ 成分增长幅度较大, 与同时期对照组比较, 最大增幅
70% A; 50 ~ 60 m in, 70% ~ 80% A; 60 ~ 61 m in, 达 23 8倍 ( 处理后 9 d); 丹参酮ⅡA最大增幅达 4 5
通过实验首次证明了茉莉酸甲酯能有效提高丹 参酮类成分在丹参毛状根中的积累并刺激其向培养 基中释放。从实验结果可知, 丹参毛状根中, 经 M J 处理后第 9天, 隐丹参酮和丹参酮ⅡA分别是同时期 对照组的 23 8倍和 4 0倍; 培养基中, M J处理后第