异硫氰酸荧光素共轭体系碳原子π电子效应测定痕量CPZ
２０１２年第２期 （总第７６期） 漳州师范学院学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｚｈａｎｇｚｈｏｕ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔ．Ｓｃｉ．） Ｎｏ．２．２０１２年
Ｇｅｎｅｒａｌ Ｎｏ．７６
异硫氰酸荧光素共轭体系碳原子 电子效应测定痕量ＣＰＺ 林少琴 ，林璇２ （１．福建教育学院理科研修部，福建福州３５０００１；２．漳州师范学院化学与环境科学系，福建漳州３６３０００） 摘要：本文基于ＦＩＴＣ的共轭体系碳原子上的氕电子效应，建立了测定痕量盐酸氯丙嗪＜ｃＰｚ）的新方法．该 方法线性范围宽，选择性好。体系简单、操作方便，适合于人血清与人尿液ＣＰＺ残留分析。结果与气相色谱法 （ＧＣ）．相吻合．根据人血清中ＣＰＺ残留量与致死量的相关性，本方法还可以用于临床诊断．同时，探讨了ＦＩＴＣ ＳＳＲＴＰ测定痕量ＣＰＺ的反应机理． 关键词：盐酸氯丙嗪；异硫氰酸荧光素；固体基质室温磷光法 中图分类号：０６２９．８ 文献标识码： Ａ
Ｔｈｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｓｉｄｕａｌ ＣＰＺ Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ兀．Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃａｒｂｏｎ Ａｔｏｍ ｉｎ ＦＩＴＣ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ Ｓｙｓｔｅｍ ＬＩＮ Ｓｈａｏ．ｑｉｎ ，Ｌｉｎ Ｘｕａｎ （１．Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｆｕｊｌａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｉｊｉａｎ ３５０００１；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｚｈａｎｇｚｈｏｕ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｉｊｉａｎ，３６３０００） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｃｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＣＰＺ） ｈａｓ ｂｅｅｎ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ丌－ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃａｒｂｏｎ ａｔｏｍ ｉｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ（ＦＩＴＣ）ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ｓｙｓｔｅｍ．ＴｌＩｉＳ ｍｅｔｈｏｄ ｗｉｔｈ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｅａｓｙ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＣＰＺ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｕｒｉｎｅ ｄｕｅ ｔｏ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｒ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｗｉｄｅｒ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ａｎｄ ｂｅｔｔｅｒ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｔｅｓｔｉｎｇ ｒｅｓｕｌｔｓ ｃｏｎｓｉｓｔ ｗｉｔｈ ｔｈｏｓｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＧＣ）．，Ｉ’Ｉｌｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ａｌｓｏ ｂｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｉａｇｎｏｓｅ ｈｕｍａｎ ｄｉｓｅａｓｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｑｕａｎｔｉｔｙ ａｎｄ ｌｅｔｈａｌ ｄｏｓｅ ｏｆ ＣＰＺ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｉｔｙ，ａｌｓｏ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｉｓ ｔｈｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＰＺ ｔｈｒｏｕｇｈ ｓｏｌｉｄ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｍｅｔｒｙ（ｓｓＲＴＰ）． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＣＰＺ；ＦＩＴＣ；ＳＳＲＴＰ
盐酸氯丙嗪（ＣＰＺ）对大鼠脑损伤具有保护作用…，并可作为探针测定环境水样中某些阴离子表面活性剂 伫】，亦能与某些金属离子络合而显色用于光度分析【３】，显示了ＣＰＺ在医学、环境科学和分析化学上有潜在
的应用前景．过量的ＣＰＺ对人体的神经系统、呼吸系统和循环系统具有抑制作用．一般认为口服致死量为 １５—１ ５０ ＣＰＺ ｍｇ ｋｇ－【，致死血浓度为５．１０ ＣＰＺ ｍｇ Ｌ－【【们．由此可见，测定人血清中ＣＰＺ残留量对临床检测 具有重要的意义．在ｐＨ ６．１２和６０ ｏＣ反应２０ ｍｉｎ条件下，ＣＰＺ能与异硫氰酸荧光素（Ｆｒｒｃ）作用所生成 ＦＩＴＣ—ＣＰＺ化合物，使得ＦＩＴＣ的共轭体系碳原子上的尢电子密度（６）增大及ＦＩＴＣ的磷光信号（ＲＴＰ）剧烈 增强．据此，建立了ＦＩＴＣ共轭体系碳原子兀电子效应固体基质室温磷光法（ＳＳＲＴＰ）测定痕量ＣＰＺ的新 方法．本方法除了灵敏度比文献【３ １的方法高外，还具有线性范围比文献【３ ｏ】的方法宽，选择性比文献
收稿日期：２０１２－０１－２０ 基金项目：福建省教育厅科技项目（ＪＡ１０２７７） 作者简介：林少琴（１９５７－），女，福建省沙县人，教授。 第２期 林少琴，林璇：异硫氰酸荧光素共轭体系碳原子霄电子效应测定痕壅 ＿＿－－＿ ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿－＿＿＿＿＿－－＿－＿＿－＿＿。－＿－＿＿＿＿＿－＿＿＿＿－＿・－＿－＿＿＿＿＿＿＿＿ｌ＿・－＿＿－－－・－－－－＿＿・－－＿＿－－＿。＿－。 。。。。。 ＿。。‘ ’ 。。’一一 的方法好的优点，并已成功用于人血清与人尿液ＣＰＺ残留分析和人体疾病的诊断．
１实验部分 １．１仪器与试剂 ＬＳ．５５型磷光分光光度计；ｐＨＳ．３Ｂ酸度计；０．５ｌａＬ平头微量注射器． ＣＰＺＩ作溶液（北京药品生物检定所）：准确称取０．０１００ｇ盐酸氯丙嗪标准品，用纯水溶解并定容于１００ｍＬ 棕色容量瓶中，得浓度为１００ ｌａｇ ｍＬ 的储备液，临用时用水逐级稀释为１．００、１０．ｏ０和１００．００（ｆｇ ｍＬ叫）； ＦＩＴＣ溶液：用乙醇配制ｌｘｌ０－３ ｍｏｌ Ｌ ＦＩＴＣ贮备液，临用时用１ｘｌ０ ｍｏｌ Ｌ ＨＡｃ稀释成ｌｘｌ０叫ｍｏｌ Ｌ＿。； ｌｘｌ０ ｍｏｌ Ｌ＿。ＮａＯＨ；１ ｍｏｌ Ｌ—Ｐｂ（Ａｃ）２溶液．除了ＣＰＺ为基准试剂外，其它为分ｊ昕纯，水为三次亚沸水． ２．２实验方法 往２５ ｍＬ比色管中，加入适量的ＣＰＺ１００．００ ｆｇ ｍＬ－。，１．５０ ｍＬ １．０ｘｌ０－４ ｍｏｌ Ｌ－ ＦＴｒＣ，１．００ ｍＬ ｌｘｌ ｍｏｌ
Ｌ～ＮａＯＨ，水定容，混匀．于６０℃恒温水浴中反应２０ ｒａｉｎ，水流冷却５ ｍｉｎ．取ＰＡＭ浸入ｌ ｍｏｌ Ｌ Ｐｂ（ＡＣ）２ 溶液１０秒后，于９０＋１℃干燥２ ｍｉｎ，用０．５ｌａＬ平头微量注射器悬空点样０．４ ｌａＬ，９０＋＿１℃下干燥２ ｍｉｎ，同 时做试剂空白．扫描体系的磷光光谱，记录 ｍ ｍ双＝４７８／６４２ ｎｍ处试液的Ｉｐｌ和试剂空白的Ｉｐ２，计算 △Ｉｐ（＝Ｉｐｌ—Ｉｐ２）值． ２．３分析样品制备 人体血清按文献【ｌＩ】方法处理，抽取临床服用氯丙嗪的患者的静脉血３ ｍＬ，用肝素抗凝，以２０００转／ 分的转速离心５分钟，吸取上层人血清ｌ＿００ ｍＬ，加１０ ２．５０ ｍｇ ｍＬ 抗坏血酸．水定容至１０ ｍＬ，置于 冰箱中保存备用．临用时取１．００ ｍＬ人血清贮备液，用水稀释至１０ 倍，供测试．参照文献 方法，取１Ｏ．ｏｏ ｍＬ人尿液， ０．１Ｏ ｍＬ ５％氢氧化钠溶液，加入１ ｇ氯化钠，加入５ ｍＬ乙酸乙酯，混匀１ ｍｉｎ，静置分层， ５％盐酸溶液调节ｐＨ－－６．１２，水定容至１００ ｍＬ，备用．临用时取１．００ ｍＬ人尿液贮备液，用水稀释至１０ 倍，供测试．
２结果与讨论 ２．１磷光光谱 在６０℃、２０ ｍｉｎ条件下，Ｐｂ２＋为离子微扰剂时ＦＩＴＣ在ＰＡＭ固体基质上均可发射稳定的ＲＴＰ信号， ｐＨ＝１．０４时， ｍ 为４４６．９／６１４．１ ｎｍ，Ｉｐ＝５８．３（图ｉ曲线２．２’）：ｐＨ＝６．１２时， ／ 为 ４５６．９／６２２．３ ｎｍ，Ｉｐ依次为８６．５（图１曲线３．３’）．两者的ＲＴＰ特性发生显著的差异，可能与体系的ｐＨ、 ＦＩＴＣ存在形式密切相关【ｌ ． 在ｐＨ＝６．１２条件下，６００．ｆｇ ＣＰＺ能使ＦＩＴＣ的ＲＴＰ信号剧烈增强（ 啪 ｍｍ ＝４７８．３／６４１．６ ｎｍｌｐ＝ １３５．５，Ａｌｐ＝７８．９，图ｌ曲线５．５’），且 啪 红移了１９．３ ｎｍ，可能是ＣＰＺ分子中．ＮＨ２与ＦＩＴＣ分子ｑ￣－ＮＣＳ 反应而生成含有一ＣＳ—ＮＨ 的ＦＩＴＣ—ＣＰＺ化合物．
图１ ！ 漳州师范学院学报（自然科学版） ２０１２年 ＦＩＴＣ—ＣＰＺ体系的磷光光谱（１—５曲线为激发光谱，１，．５’曲线为发射光谱，１．１’，２．２，，３．３，，４．４’和５．５，为激 发光谱与发射光谱的编号．，１’一５’标记的两个数据，分别为ＲＴＰ的发射波长和强度） 表１ ＦＩＴＣ－ＣＰＺ磷光特性
表２测试条件
２．２最佳条件 对于１．４ ａｇ ＣＰＺ ｓｐｏｔ＿。，分别考察发光物质（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ（Ａ），Ｔｅｔｒａｂｒｏｍｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ（Ｂ），ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｏｔ— 第２期 一．
签 墨：签壁！墨堕墨璧茎 童茎壅签墨堡堕 皇 垫堕 窒壅量 些 一——
＿———＿—＿●＿—＿—＿－—————＿—－－—————＿——●————＿＿——＿——＿＿—＿—＿－－—－——－－————————————————一一一 ｃｔｒ￣ｏｄｏ－ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ（Ｃ），ＦＩＴＣ）、试剂的浓度．－￣ｍＪＲ、反应酸度、反应温度和时间、烘干温度和时间、氧气
和湿度、放置时间、固体基质（ＰＡＭ，ＮＣＭ，ＡＣＭ，ｐａｐｅｒ）与离子微扰剂等对体系Ａｌｐ的影响（表．２），结 果表明，当１．５０ｍＬ１．０×１０一 ｔｏｏｌＬ＿。Ｆ１ＴＣ、反应ｐＨ为６．１２、反应温度为６０＊（２和反应时间为２０ｍｉｎ、烘 干温度为９０＂Ｃ￣烘干时间为２．０ ｍｉｎ、通Ｎ２时间为１０．０ ｍｉｎ、固体基质为ＰＡＭ和离子微扰剂为１．０ ｍｏｌ Ｌ一 Ｐｂ 时，体系的△Ｉｐ最大且ＲＳＤ％在±５％范围内． 由表２得出以下规律： １．体系的Ａｌｐ值按Ａ，Ｂ，ｃ和ＦＩＴＣ的顺序依次增大，其中ＦＩＴＣ的Ａｌｐ值最： 且稳定，可是ＦＩＴＣ分 子中的．ＮＣＳ易与ＣＰＺ分子中．ＮＨ２反应而生成ＦＩＴＣ．ＣＰＺ化合物的缘故． ２．随着Ｐｂ 浓度的升高体系的Ａｌｐ值逐渐增大，可能是由于Ｐｂ 的重原子效应，大大地提高了光分 子从ｓＩ——Ｔ１态跃迁几率，使得体系ＡＩｐ值剧烈增强的缘故．当Ｐｂ２ 浓度＞１．０ ｔｏｏｌ Ｌ 时体系的△Ｉｐ 值反而减小，可能是适量的Ｐｂ 对体系的Ａｌｐ值产生增强效应，而过量的Ｐｂ２ 对体系的△Ｉｐ值产生猝灭效 应的缘故． ３．随着ｐＨ的升高体系△Ｉｐ值逐渐增大，可能是体系中ＦＩＴＣ．ＣＰＺ产量逐渐增大；ｐＨ＝６．１２ 时体系△Ｉｐ值出现最大值，可能是此时ＦＩＴＣ．ＣＰＺ产量最高：在ｐＨ＞７．０情况下，体系中ｔａｐ值逐渐减小， 可能是ＣＰＺ随着ｐＨ的升高而逐渐水解，ＦＩＴＣ．ＣＰＺ产量随之降低． ４．体系△Ｉｐ值随反应温度和反应时间的增加而增大，当大于６０℃、２０ ｍｉｎ时体系的△Ｉｐ值逐渐减小， 可能是ＣＰＺ离解导致体系中ＦｒｒＣ．ＣＰＺ产量降低的缘故． ５．随着烘干温度与时间的增加，固体基质上水被蒸发，水对ＲＴＰ的猝灭作用减弱，体系的△Ｉｐ值逐 渐增大；在９０＂（２烘干２ ｍｉｎ时体系的△Ｉｐ值最大且恒定；当大于９０℃、２ ｍｉｎ时可能ＦＩＴＣ．ＣＰＺ被分解， 体系的△Ｉｐ值逐渐减小； 表３分析参数
实验4-氨基酸类物质的荧光光谱分析
氨基酸类物质的荧光光谱分析【摘要】荧光物质吸收特定频率辐射能量后会产生荧光，不同荧光物质的最大吸收波长、最大激发波长以及荧光谱图不同，以此可以鉴定未知物质。
荧光还与物质浓度在一定范围内有线性关系，可以通过测定未知浓度的已知物荧光吸收强度来测定浓度。
【实验目的】1、熟悉荧光分析法的基本原理；2、了解RF–5301 型荧光分光光度计的构造、原理，掌握荧光分析法的基本操作；3、掌握荧光分析技术应用于定量分析的原理及方法。
【基本原理】原理概述：利用荧光物质分子在吸收特定频率辐射能量后，由基态跃迁至激发态的任一振动能级，在溶液中以热的形式损失部分能量后回到第一电子激发态的最低振动能级，再以辐射形式去活化跃迁到电子基态的任一振动能级，便产生荧光。
荧光的产生：荧光物质分子在吸收特定频率辐射能量后，由基态跃迁至第一电子激发态（或更高激发态）的任一振动能级，在溶液中这种激发态分子与溶剂分子发生碰撞，以热的形式损失部分能量后，而回到第一电子激发态的最低振动能级（无辐射跃迁）。
然后再以辐射形式去活化跃迁到电子基态的任一振动能级，便产生荧光。
能产生强荧光的物质分子，一般都具有大的共轭π 键结构或具有刚性平面结构等特征。
发射光谱与吸收光谱：荧光分析法的特点：优点：灵敏度高、选择性好、工作曲线线性范围宽，能提供激发光谱、发射光谱、发光强度、发光寿命、量 子产率、荧光偏振等诸多信息；缺点：由于能够产生强荧光的物质相对较少，荧光分析法的应用不太广泛；改进：对于没有强荧光或没有荧光的物质的测定可设计相应的反应使其生成具有荧光特性的配合物进行测定。
氨基酸：含有氨基和羧基的一类有机化合物，是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。
色氨酸（Try）、酪氨酸（Tyr）和苯丙氨酸（Phe）是天然氨基酸中仅有能发射荧光的组分，可以用荧光法测定。
【仪器与试剂】1、仪器：F-4600 型荧光分光光度计，10 mL 带玻璃塞的比色管10 只，移液管图1荧光光谱仪结构示意图2、试剂：标准溶液a：4×10-4mg/mL的酪氨酸溶液；标准溶液b：1×10-3mg/mL的苯丙氨酸溶液；标准溶液c：1×10-3mg/mL的色氨酸溶液；色氨酸待测样；去离子水。
荧光分析法的应用
—NH2， — NHR ， —NR2， — OH， — OR ， — CN
化合物
苯
苯酚
苯胺 苯基氰
苯甲醚
λ
em max
(nm)
278~310 285~365 310~405 280~390 285~345
相对荧光强度
10
18
20
20
20
b.吸电子取代基减弱荧光、加强磷光
—C=O， — COOH ， —NO2
第一激发单重态的能级轨道上，也可能跃迁至能级更高的单
重态上，这种跃迁是符合光谱选律。如果跃迁至第一激发三
重态轨道上，则属于禁阻跃迁。
电子激发单重态与三重态示意图
在单重激发态中，电子的自旋方向仍然和处于基态轨道的电子 配对，表现出抗磁性，其平均寿命为10－5～10－8s； 在三重激发态中，两个电子平行自旋，表现出顺磁性，其平均 寿命为10－4～1s。
分子吸收辐射后可能激发为第一电 子激发态（或更高激发态）的任一振动 能级，这种激发态分子以热的形式损失 其振动能后下降为第一电子激发态的最 低振动能级（无辐射跃迁）；然后再以 辐射的形式跃迁为电子基态的任一振动 能级，即产生荧光，并进一步以无辐射 跃迁形式回到基态的最低振动能级。
二 分子荧光的性质
3、分子荧光（磷光）产生示意图
每个分子具有一系列严格分立的能级，称为电子能 级，每个电子能级中又包含了一系列的振动能层和转 动能层。图中基态用S0表示，第一电子激发单重态和 第二电子激发单重态分别用S1、S2表示，0、1、2、 3⋯表示基态和激发态的振动能层（见下图），第一、 二电子的激发三重态分别用T1和T2表示。
位移到较长的波长处，称为Stokes位移。
原因：激发与发射之间产生了能量损耗
分析化学课后习题答案(第六版-李发美)
第十章紫外－可见分光光度法1．名词解释：吸光度、透光率、吸光系数(摩尔吸光系数、百分吸光系数)、发色团、助色团、红移、蓝移。
2．什么叫选择吸收？它与物质的分子结构有什么关系？物质对不同波长的光吸收程度不同，往往对某一波长(或波段)的光表现出强烈的吸收。
这时称该物质对此波长(或波段)的光有选择性的吸收。
由于各种物质分子结构不同，从而对不同能量的光子有选择性吸收，吸收光子后产生的吸收光谱不同，利用物质的光谱可作为物质分析的依据。
3．电子跃迁有哪几种类型？跃迁所需的能量大小顺序如何？具有什么样结构的化合物产生紫外吸收光谱？紫外吸收光谱有何特征？电子跃迁类型有以下几种类型：σ→σ*跃迁，跃迁所需能量最大；n →σ*跃迁，跃迁所需能量较大，π→π*跃迁，跃迁所需能量较小；n→ π*跃迁，所需能量最低。
而电荷转移跃迁吸收峰可延伸至可见光区内，配位场跃迁的吸收峰也多在可见光区内。
分子结构中能产生电子能级跃迁的化合物可以产生紫外吸收光谱。
紫外吸收光谱又称紫外吸收曲线，是以波长或波数为横坐标，以吸光度为纵坐标所描绘的图线。
在吸收光谱上，一般都有一些特征值，如最大吸收波长(吸收峰),最小吸收波长(吸收谷)、肩峰、末端吸收等。
4．Lambert-Beer定律的物理意义是什么？为什么说Beer定律只适用于单色光？浓度C与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素有哪些？朗伯－比耳定律的物理意义：当一束平行单色光垂直通过某溶液时，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度l成正比。
Beer定律的一个重要前提是单色光。
也就是说物质对单色光吸收强弱与吸收光物质的浓度和厚度有一定的关系。
非单色光其吸收强弱与物质的浓度关系不确定，不能提供准确的定性定量信息。
浓度C与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素（1）定律本身的局限性：定律适用于浓度小于0.01 mol/L的稀溶液，减免：将测定液稀释至小于0.01 mol/L测定（2）化学因素：溶液中发生电离、酸碱反应、配位及缔合反应而改变吸光物质的浓度等导致偏离Beer定律。
核磁共振图谱解析培训手册全解
核磁共振图谱解析培训手册药明康德核磁分析实验室常用的核磁共振（NMR）实验1H13C13C－DEPT135o ( CH CH3 , CH2 )13C－DEPT90o ( CH )1H －1H COSY (化学键上相邻氢原子的识别)1H －1H TOCSY (结构片断的识别)1H －1H NOESY (空间上相近的氢原子的识别)1H －13C (HSQC, HMQC) (碳氢直接相关（碳氢原子直接相连）) 1H －13C HMBC (碳氢远程相关（碳氢原子二、三键偶合）)下面一一介绍各种实验的用途，并带有相应的例子加以说明提纲一:氢谱：1.影响氢谱化学位移的因素1).诱导效应(对饱和烷烃)2). S－p杂化的3). 磁各向异性4). 共轭效应和诱导效应(对不饱和烷烃影响)5). 介质因素6). 空间因素7). 氢键的影响2. 活泼氢3. 重水交换4. 关于手性化合物和前手性化合物中CH2上两个氢的化学位移5. 芳环与芳杂环的偶合常数6. 3JHH与两面角Φ的关系(Karplus公式) 以手性化合物中氢的自旋偶合关系为例7. 烯烃自旋-自旋偶合(J-coupling)体系8. 六元环自旋-自旋偶合(J-coupling)体系9. 动力学现象（变温实验)1). 活泼氢2). 受阻旋转3). 互变异构4). 原子翻转（常见）二. 碳谱,DEPT谱三. 氟对氢，碳的耦合四. 1H –1H COSY五. 1H –13C HSQC －碳氢直接相关验六. 1H-13C HMBC－氢碳远程相关实验七. 用NOE方法对异构体的鉴别1) 常见的用NOE方法进行异构体鉴别的简单例子2) 五元环异构体的鉴别3) 六元环异构体的鉴别4) 烯烃的顺反八. 用HMBC方法对异构体的鉴别一．氢谱•氢谱是最常见的谱图. 核磁共振氢谱能提供重要的结构信息：化学位移，耦合常数及峰的裂分情况，峰面积。
峰面积与氢的数目成正比，所以能定量的反应氢核的信息.1.影响氢谱化学位移的因素1）诱导效应(对饱和烷烃)与质子相连的碳原子上,如果接有电负性强的基团,则由于它们的吸电子诱导效应,使质子周围的电子云密度减弱,使屏蔽作用减弱,质子共振吸收移向低场,电负性越强,化学位移值越大.• 经常碰到的R 与 R(R ＝O, Cl, F, Br, -NCOR)，此种结构的CH 2的出峰 位置通常在4.5~5.5ppm 。
生物化学第四版课后参考答案
1 绪论1．生物化学研究的对象和内容是什么？解答：生物化学主要研究:（1）生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能；（2）生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化；（3）生物遗传信息的储存、传递和表达；（4）生物体新陈代谢的调节与控制。
2．你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。
提示：生物化学是生命科学的基础学科，注意从不同的角度，去理解并运用生物化学的知识。
3．说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。
解答：生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。
碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。
碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。
碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。
特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。
氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（-NH2）、羟基（-OH）、羰基（）、羧基（-COOH）、巯基（-SH）、磷酸基（-PO4 ）等功能基团。
这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。
生物大分子在结构上也有着共同的规律性。
生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。
构成蛋白质的构件是20种基本氨基酸。
氨基酸之间通过肽键相连。
肽链具有方向性（N 端→C端）,蛋白质主链骨架呈"肽单位"重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性(5′、→3′),核酸的主链骨架呈"磷酸-核糖（或脱氧核糖）"重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。
仪器分析考试必考知识点(全面)
仪器分析考试必考知识点分子光谱法：UV-VIS、IR、F原子光谱法:AAS电化学分析法：电位分析法、电位滴定色谱分析法：GC、HPLC质谱分析法:MS、NRS⒈经典分析方法与仪器分析方法有何不同?经典分析方法：是利用化学反应及其计量关系,由某已知量求待测物量，一般用于常量分析，为化学分析法。
仪器分析方法：是利用精密仪器测量物质的某些物理或物理化学性质以确定其化学组成、含量及化学结构的一类分析方法，用于微量或痕量分析，又称为物理或物理化学分析法。
化学分析法是仪器分析方法的基础,仪器分析方法离不开必要的化学分析步骤,二者相辅相成。
⒊简述三种定量分析方法的特点和应用要求一、工作曲线法(标准曲线法、外标法）特点：直观、准确、可部分扣除偶然误差。
需要标准对照和扣空白应用要求：试样的浓度或含量范围应在工作曲线的线性范围内，绘制工作曲线的条件应与试样的条件尽量保持一致.二、标准加入法(添加法、增量法)特点:由于测定中非待测组分组成变化不大，可消除基体效应带来的影响应用要求：适用于待测组分浓度不为零,仪器输出信号与待测组分浓度符合线性关系的情况三、内标法特点：可扣除样品处理过程中的误差应用要求：内标物与待测组分的物理及化学性质相近、浓度相近,在相同检测条件下，响应相近,内标物既不干扰待测组分，又不被其他杂质干扰1、吸收光谱和发射光谱的电子能动级跃迁的关系吸收光谱：当物质所吸收的电磁辐射能与该物质的原子核、原子或分子的两个能级间跃迁所需要的能量满足ΔE=hv的关系时,将产生吸收光谱。
M+hv→M＊2、带光谱和线光谱带光谱:是分子光谱法的表现形式。
分子光谱法是由分子中电子能级、振动和转动能级的变化产生。
线光谱：是原子光谱法的表现形式。
原子光谱法是由原子外层或内层电子能级的变化产生的.2、原子吸收定量原理:频率为ν的光通过原子蒸汽,其中一部分光被吸收，使透射光强度减弱.3、谱线变宽的因素(P-131）：⑴多普勒（Doppler)宽度ΔυD：由原子在空间作无规热运动所致。
仪器分析思考题 (附答案)
《仪器分析》思考题第一章绪论1.经典分析方法和仪器分析方法有何不同？经典分析方法：是利用化学反应及其计量关系，由某已知量求待测物量，一般用于常量分析，为化学分析法。
仪器分析方法：是利用精密仪器测量物质的某些物理或物理化学性质以确定其化学组成、含量及化学结构的一类分析方法，用于微量或痕量分析，又称为物理或物理化学分析法。
化学分析法是仪器分析方法的基础，仪器分析方法离不开必要的化学分析步骤，二者相辅相成。
2.灵敏度和检测限有何联系？灵敏度(sensitivity，用S表示)是指改变单位待测物质的浓度或质量时引起该方法检测器响应信号(吸光度、电极电位或峰面积等)的变化程度.检出限(detection limit，用D表示)，又称为检测下限，是指能以适当的置信概率检出待测物质的最低浓度或最小质量。
检出限既与检测器对待测物质的响应信号有关，又与空白值的波动程度有关。
检测限与灵敏度从不同侧面衡量了分析方法的检测能力，但它们并无直接的联系，灵敏度不考虑噪声的影响，而检出限与信噪比有关，有着明确的统计意义。
似乎灵敏度越高，检出限就越低，但往往并非如此，因为灵敏度越高，噪声就越大，而检出限决定于信噪比。
3.简述三种定量分析方法的特点和适用范围。
一、工作曲线法（标准曲线法、外标法）特点：直观、准确、可部分扣除偶然误差。
需要标准对照和扣空白试用范围：试样的浓度或含量范围应在工作曲线的线性范围内，绘制工作曲线的条件应与试样的条件尽量保持一致。
二、标准加入法（添加法、增量法）特点：由于测定中非待测组分组成变化不大，可消除基体效应带来的影响试用范围：适用于待测组分浓度不为零，仪器输出信号与待测组分浓度符合线性关系的情况三、内标法特点：可扣除样品处理过程中的误差试用范围：内标物与待测组分的物理及化学性质相近、浓度相近，在相同检测条件下，响应相近，内标物既不干扰待测组分，又不被其他杂质干扰第二章光谱分析法导论1.常用的光谱分析法有哪些？分子光谱法：紫外-可见分光光度法红外光谱法分子荧光光谱法分子磷光光谱法原子光谱法：原子吸收光谱法原子发射光谱法原子荧光光谱法X射线荧光光谱法2.简述狭缝的选择原则狭缝越大，光强度越大，信噪比越好，读数越稳定，但如果邻近有干扰线通过时会降低灵敏度，标准曲线弯曲。
【国家自然科学基金】_量子化学研究_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140729
2012年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
推荐指数 4 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 schrsdinger-virasoro李代数 1 schrsdinger-virasoro lie algebra 1 quantization 1 nox 1 lie bialgebra 1 dft 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37
科研热词 量子化学计算 量子化学 煤 荧光光谱 密度泛函理论 基组 香豆素类染料 键级 锕系元素 铁(ⅱ)配合物 金属有机配合物 酰基衍生物 费托合成 表面 苯甲醛 苯甲酸 自然键轨道 生成焓 焚烧 热解 热化学 气体 方法 多重键 吸附 含铬废物 吡嗪 反应动力学 动力学 分子结构模型 分子结构 农药分子 二阶超极化率 主族元素 co氢助解离 cis 3,3-二硝基氮杂环丁烷(dnaz)
科研热词 推荐指数 量子化学计算 5 量子化学 2 热力学稳定性 2 密度泛函理论 2 同分异构体 2 动力学稳定性 2 动力学 2 非线性光学性质 1 锌配位聚合物 1 金属有机聚合物 1 量子隧穿 1 酸性 1 还原 1 超薄栅氧化物 1 苯甲醚 1 苯并菲 1 臭氧 1 自然键轨道 1 能量分解 1 磺胺间甲氧嘧啶 1 磺胺噻唑 1 碱金属 1 盘状液晶 1 电荷转移反应 1 煤焦 1 煤 1 热解 1 溶剂热合成 1 汞 1 氯铝酸离子液体 1 氧化 1 晶体结构 1 无机苯(b3n3h6) 1 异构化 1 对称匹配微扰理论(sapt) 1 密度泛函方法 1 咔唑 1 吸收光谱 1 吡啶 1 反型层 1 双核铜(ⅰ)配合物 1 双β -二酮 1 分子间相互作用 1 催化 1 从头算 1 一维长链 1 sod 1 r_2noh 1 r_2hno 1 r2noh 1 r2hno 1 n沟金属-氧化物-半导体器件 1
现代分析化学实验(2012-9-25)
现代分析化学实验2012年9月25日前言现代分析化学实验是一门实践性很强的学科，它分为两大部分：化学分析实验和仪器分析实验。
其实验课时占整个课时的一半甚至高出理论课课时，但仍觉得不够。
因为，现代分析化学实验技术发展快速，新技术、新方法不断涌现，实验教材很难跟上分析化学技术的发展步伐，加上分析仪器种类多，同一种类型型号多，更新快。
我们在编写此《现代分析化学实验》的编写过程中，分析仪器尽量使用国产仪器；在贯彻教学大学本科生分析化学教学大纲对基本仪器、基本方法和基本操作技术训练的要求同时，编写的实验项目力求理论联系实际，做到适用、简便、先进。
本书的内容包括两大部分：化学分析实验和仪器分析实验。
化学分析和仪器分析都是分析化学不可或缺的内容。
化学分析法适用于常量和半微量组分的分析，具有简单，价廉，准确度和精密度高的特点；国家标准的分析方法中就规定有大量的化学分析法，而且随着自动滴定仪等的出现，化学分析法也更加快捷准确。
仪器分析法特别适用于微量组分、痕量组分、超痕量组分的分析，具有灵敏度高、分析速度快、自动化程度高的特点。
由此，化学分析法和仪器分析法是相辅相成的，在应用上应根据具体情况，取长补短，互相配合，充分发挥各种方法的特长，才能更好地解决分析化学中的问题。
化学分析实验中包含化学分析实验的基本知识、基本操作技能及化学分析实验项目。
仪器分析实验包含仪器分析实验的基本知识、常用仪器使用说明和仪器分析实验项目。
其宗旨在于加强实验基本技能训练，系统掌握分析化学基础和现代技术，巩固和加深对分析化学理论知识的理解和应用，同时适应新形势下分析实验课教学改革要求。
那就既要增加知识面，获得知识，提高素质，又通过综合和设计实验训练，调动积极性，改变单纯依赖实验讲义做实验的现象，培养和启发同学们发现问题，思考问题，自己动手解决问题的综合能力。
教材首先选用有代表性的分析化学基础实验内容作为必做实验，目的是熟悉和掌握常用分析实验操作，加深理解基础理论知识的和常用分析仪器的原理，并且对现代比较先进的分析仪器使用有一定程度的了解。
第38届中国化学奥林匹克(初赛)试题参考答案
-RTln(K)
=
208.7
(kJ·mol-1)（1
分）
K = 1 时，F = 14.26 pN，由于反应温度未改变，因此 ΔGr, m/NA = F·Δl（1 分）
由此解出 Δl = 2.43 × 10-8 m = 24.3 nm（1 分）
第 4 题 盘状双层胶束（21 分，占 11%） 盘状双层胶束(bicelles)可用于模拟生物膜，研究膜蛋白与脂双层膜的相互作用。盘状双层胶 束是扁平状的，厚度约为 40 Å，直径约为 400 ~ 600 Å。单一脂质在水环境中可形成双层胶 束，形成的原理非常简单。 向 DMPE 中加入缓冲液，振荡过夜，可制得盘状双层胶束。假设 DMPE 的 pKa1 = 1.0, pKa2 = 9.0。
故当 pH = 9.0 时，此胶束所带电荷数为：
1000 × (0.50 − 5.0 × 10 ) = 500e （3 分）
pH = 7.0 时
[H ]
δ(H A
)= [H
]
+ [H
]K
+K K
= 9.9 × 10
KK
δ(A
)= [H
]
+ [H
]K
+K K
= 9.9 × 10
故当 pH = 9.0 时，此胶束所带电荷数为：
1000 × (9.9 × 10 − 5.0 × 10 ) = 9.9e （3 分）
4-2 计算此胶束所带电荷小于 1 个电子电量时的 pH 范围。
4-2 当该胶束带 1 个电子电量的正电荷时
[H ] − K K
δ(H A ) − δ(A
)= [H
]
+ [H
]K
+K K