黑木耳多糖提取方法比较
银耳、木耳多糖清除羟自由基的比较实验
银耳、木耳多糖清除羟自由基的比较实验张磊;徐皓;孟超;殷晓蕾;黄超;李明明;宫晓婷【摘要】目的研究银耳多糖羟自由基的清除作用.方法采用酶解法提取银耳多糖粗品,蒽酮-硫酸比色法测定银耳多糖的含量,并稀释成三个浓度梯度,与过氧化氢-亚铁离子-水杨酸反应体系中的羟自由基进行反应以测定羟基清除率,以黑木耳为对照.结果银耳多糖清除羟自由基的效果随着浓度增加而增强:在浓度为0.5 mg/mL、1.5 mg/mL、3 mg/mL时其清除率分别为10.36％、18.04％、35.74％.结论银耳多糖与木耳多糖对羟自由基均有清除作用.3 mg/mL的银耳多糖对羟自由基清除率最高为35.74％,木耳多糖在同等浓度范围内为52％,银耳多糖的清除率小于同浓度下黑木耳多糖对自由基的清除率.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2019(040)007【总页数】4页(P493-496)【关键词】多糖;羟自由基;清除率【作者】张磊;徐皓;孟超;殷晓蕾;黄超;李明明;宫晓婷【作者单位】生命科学学院,山东第一医科大学(山东省医学科学院),山东泰安271016;生命科学学院,山东第一医科大学(山东省医学科学院),山东泰安 271016;生命科学学院,山东第一医科大学(山东省医学科学院),山东泰安 271016;生命科学学院,山东第一医科大学(山东省医学科学院),山东泰安 271016;生命科学学院,山东第一医科大学(山东省医学科学院),山东泰安 271016;生命科学学院,山东第一医科大学(山东省医学科学院),山东泰安 271016;生命科学学院,山东第一医科大学(山东省医学科学院),山东泰安 271016【正文语种】中文【中图分类】Q-331银耳(Tremella)又名白木耳、雪耳，属于隔担子菌亚门银耳科。
银耳在我国具有悠久的食用和药用历史，含有碳水化合物、蛋白质、维生素和多种氨基酸等。
目前研究最多的是银耳多糖。
银耳多糖(Tremella polysaccharides，TP)是重要的生物活性物质，可以通过激活免疫细胞来提高机体的免疫功能,使吞噬细胞吞噬能力提升，增加淋巴细胞活性从而提高其功能[1-3]，抗肿瘤[4]、预防肠道疾病[5-7]等功效。
[课程]资料-多糖含量测定的各种方法优缺点
![[课程]资料-多糖含量测定的各种方法优缺点](https://img.taocdn.com/s3/m/6e32b30a58eef8c75fbfc77da26925c52cc59139.png)
苯酚-硫酸法测多糖含量一、原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
二、试剂1、浓硫酸：分析纯，95.5%2、80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3、6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）4、标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）或分析纯葡萄糖。
5、15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6、5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7、6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8、6mol/L 盐酸三、操作1、制作标准曲线准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml，各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml，摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2、样品含量测定1）取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意：总的溶液不要超出10毫升。
（既不要超出离心管的容量）。
2）离心，转速3000转/分钟，共三次。
第一次15分钟，取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
最后滤液保持18毫升左右。
3）水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。
4）定容取样。
水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。
定容至25毫升的容量瓶中。
(整理)黑木耳多糖在食品工业中的应用
黑木耳多糖在食品工业中的应用第一章研究目的及意义第二章黑木耳多糖的理化性质及功能2.1黑木耳多糖的化学结构2.2黑木耳多糖的生理活性2.3黑木耳多糖的构效关系2.4黑木耳多糖的分子修饰第三章黑木耳多糖的提取纯化方法3.1提取方法3.2纯化方法第四章黑木耳多糖在食品中的应用第五章分析与讨论（全文总结加应用前景分析）第一章研究目的及意义黑木耳多糖作为一种生理活性物质，近年来日益受到人们的重视。
黑木耳（Auricularia Auricular）又称木耳、耳子、光木耳，属真菌门担子菌纲的食药用菌，它是生长在朽木上的一种腐生菌，由菌丝体和子实体两部分组成。
菌丝体为无色透明，生长在朽木里面；子实体则生长在朽木的表面，为食用部分。
我国是世界上主要的黑木耳生产国，年产量占世界总产量的90%以上，它在我国多数地区都有生产，这就为黑木耳的开发应用提供了有利条件。
黑木耳脆嫩可口，营养极为丰富，有"素中之荤"的美誉。
吴瑞宪【1】对黑木耳的营养成分作了全面的分析，发现它富含大量的糖类和蛋白质，同时也是一种钙和铁含量较高的食品。
大量研究表明，黑木耳作为"生物应答效应物"（Biological Response Modifier，简称BRM）具有多种生理功能，而这些重要的生理功能都是与其多糖组分密切相关的。
因此，黑木耳多糖备受人们青睐，对其的研究也已成为近年来分子生物学、医药、食品科学等领域的研究和开发应用的热点。
第二章黑木耳多糖的理化性质及功能2.1黑木耳多糖的化学结构黑木耳多糖的结构分析包括单糖的组成、连接点类型、单糖与糖苷键的构型、分子量范围等。
M isaki.等从黑木耳子实体中分离得到了4种多糖：FⅠA、FⅠB、FⅡ和FⅢ，并指出FⅠA及FⅡ均为酸性杂多糖，二者均由D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸组成。
FⅠA的组成摩尔比依次为1.0∶4.1∶1.3∶1.3，FⅡ依次为1.0∶2.1∶1.0∶0.6。
黑木耳多糖提取工艺的优化
志2002,12(3)
目的对黑木耳多糖和红菇多糖进行降胆固醇作用研究。方法给予大鼠高脂饲料1周，建立高脂血症大白鼠模型，用黑木耳多糖、红菇多糖对具高脂血 症的大白鼠进行股部肌肉注射1周，剂量为每日15mg／kg d，测定血清中总胆固醇含量。结果注射红菇多糖后大鼠总胆固醇含量比对照组降低了 45.2％，注射黑木耳多糖后大鼠的总胆固醇含量比对照组降低了42.2％，均达到了显著水平。结论黑木耳多糖、红菇多糖有显著的降低胆固醇作用。
４．６１。
２．３对比试验结果与分析 对比试验结果如表６所示。在所做对比试验中，
惟有超声波协同纤维素酶酶解超微粉碎后的样品的
提取方法（试验４）所测得的黑木耳粗多糖溶出率远 远高于其他提取方法，说明超声波协同纤维素酶酶 解经超微粉碎强化后效果明显提高。
Ｔａｂ．６
表６对比试验结果
ＲｅｓｕＩｔ ０ｆ ｃＯｍｐａｒｉｓｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
6.宁正祥 食品成分分析手册 1998 7.任露泉 试验优化设计 2001 8.张曼夫 生物化学 2002 9.何泽超 纤维素的酶水解及超声波对其加速作用的研究[学位论文] 2001
相似文献(10条)
1.会议论文 张钟.高智谋.章战华 野生黑木耳多糖的提取及特性研究 2006
本文在对野生黑木耳与栽培黑木耳的蛋白质、脂肪、总糖等营养成分及多糖含量分析比较的基础上,对野生黑木耳多糖的提取、纯化、理化性质、单 糖组分等进行了研究,并对野生黑木耳多糖对实验性高脂血症小鼠的降脂作用进行了实验观察。
参考文献
刘玉兰，汪学德，马传国，等．油脂制取与加工工艺学［Ｍ］．北京：科学出版社，２００３． ［苏］索柯罗大Ｂ １１．离心分离理论及设备［Ｍ］．汪尜临，孙启才，陈文梅，译．北京：机械工业出版社，１９８６． 袁志发，周挣节．试验设计与分析［Ｍ］．北京：高等教育出版社。２（）ｏ（）． 李少华，李树君，李子明，等．油料浸出湿粕脱溶技术的发展［Ｊ］．农业机械学报，２００６，３７（８）：２１４～２１７．
黑木耳多糖的提取工艺
ｅ ｔａ ｔ ｎｔ ｍｐｅａｕ ｅｗａ ０ ｘｒ ｃｉ ｅ ｏ ｒ ｔｒ ｓ １ ０℃ ， ｈ ｘｒ ｃｉｎ ｔｍｅ ｒ ｉ ｓ ｐ ｗａ ０． ｎ ｔｉ ｏ ｄｔ ｎ ｔ ｅｙｅｄ ｏ ｔ ｅｅ ｔａ ｔ ｉ ｓｗｅ ｅ２ ｔ ｏ ｍｅ ， Ｈ ｓ７． Ｉ ｈ ｓｃ ｎ ｉｏ ， ｈ ｉｌ ｆ ｉ ｓ ｌ ｂ ｅｐ ｌｓ ｃ ｈ ｒｄ ｓｉ ｕ ｉｕａ ｉ ｕ ｉｕａｗａ ２２ ｏｕ ｌ ｏｙ ａ ｃ ａ ｉ ｅ ｎＡ ｒｃ ｌｒａａ ｒｃ ｌ ｓ３ ．４％．ｈ ｏ ｔｎ ｓ ｆ ｏｕ ｌ ｏｙ ａ ｃ ａ ｉ ｅ ｔ ｅｃ ｎ ｅ ｔ ｓ ｌ ｂ ｅｐ ｌｓ ｅ ｈ ｒｄ ｓｉ ｕ ｉｕａ ｉ ｏ ｎＡ ｒｃ ｌｒａ
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黑木耳多糖的提取及免疫调节活性研究进展
黑木耳多糖的提取及免疫调节活性研究进展
栗果;邵莉;毋瑞朋;王少康;薛蓓
【期刊名称】《轻工科技》
【年(卷),期】2024(40)3
【摘要】黑木耳是一种味道极其鲜美、含有大量糖类和膳食纤维的真菌,在我国已有上千年的栽培史。
黑木耳多糖具有悠久的研究历史,且生物活性广泛,具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗凝血、降血糖等多种生物活性功能,被广泛应用于生物学和临床研究中。
本综述通过对黑木耳多糖近年来多种提取方法的优缺点进行比对分析,对免疫调节活性等方面的研究进行详细阐述,为后续开发免疫调节药物和应用黑木耳多糖提供理论参考。
【总页数】5页(P22-26)
【作者】栗果;邵莉;毋瑞朋;王少康;薛蓓
【作者单位】西藏民族大学医学院;东南大学公共卫生学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.1
【相关文献】
1.黑木耳多糖的提取方法及生物活性的研究进展
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3.富硒黑木耳菌丝体硒多糖的提取与抗氧化活性
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黑木耳多糖及其生物活性
黑木 耳 （ ｕ ｉｕａ ｉ ｕ ｉｕａ Ａ ｒ ｌｒａａ ｒ ）是一种 药食 两 ｃ ｃ
获得 真菌 多糖 的方法 一般有 两种 ：一 是从 固体
用 大 型 真 菌 ，属 层 菌 纲 ，木 耳 目 ，木 耳 科 ，木 耳 培养 的子 实体 中提 取 ，二 是通 过深层 发酵 获得 。相 属 。 别名 光木 耳 、 云耳 、木 茸 、木 菌 等 。黑 木 耳 对于 从子 实体提取 多糖 ，深层 发酵具 有 以下优 势ｆ： ３ ］ 由菌丝 体和子 实体 两部 分构 成 。菌 丝体 生长 在朽木 （ １）生 产 周 期 大 大 缩 短 ； （ ２）能 有 目的地 获 取高 内部 ，子 实 体则 生 长 在 朽 木表 面 。
含 量 的 次 级 代谢 产 物 ； （ ３）液体 种 子 替 代 固体 种
黑 木耳 香嫩 可 口，铁 、糖 类 、蛋 白质等 含量 较 子 ，具 备 菌 龄 一 致 、 接 种 方便 的优 点 ；（ ４）劳 动
高 ，是 备 受 欢 迎 的食 品 。 黑木 耳性 平 ，味 甘 ，富 强 度小 ，且 不受 季 节 及地 域 的限制 。 含 多糖 ，具 有 一 定 的 生 物 活性 ，亦 可 人 药 ¨ 。 ］ 唐青涛等 Ｈ 对黑木 耳深层 发酵生产 多糖进 行了初 黑木 耳的生 物活性 主 要来 自其 多 糖成 分 ］ 黑 步 的探 索性研究 。从 ７ 。 种黑木耳菌株 中筛选 出生 长较 木耳 多糖 具 有 降血 脂 、降血 糖 、抗肿 瘤 、 抗凝 血 、 快并且 产胞外 多糖 量较大 的菌株作为 出发菌 ， 转接液 抗辐射 等 多种生 物活性 。 目前的研 究 主要集 中在 黑 体 种 ，摇瓶培 养 后作 为菌 种 ， 以正交试 验优 化深层 木 耳子 实体 多糖 的提取 工 艺方面 ，液态 深层 发酵 的 发酵 条件 。结果 表 明 ，葡 萄糖 ２％，酵母膏 ０３％， ． 研 究报 导较 少 。现对 黑木 耳多糖 液态 深层 发酵 及分 起始 ｐ ． Ｈ ６０为黑木 耳产 多糖较适 宜 的条 件 ，产量 最 子结构 和生物 活性 的研 究进展作 一 综述 。
黑木耳多糖的研究进展
２０ ， （ ： ８ ６８ ０６ ９ ）２－ ３． ３ ５６
【１ ｕ ｎ，ｈ ｎ Ｆ ｈ ｇ ｅｎ ｈ ｕ ｉＬｎ ｈｒ ｄ ｏｉ ｅ ｇ ２ 】Ｙ ｎ Ｄ ｎ， Ｃ ｎ Ｊ Ｃ Ｈｕ ｔ ｎ
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１ １ ＝ ８ ＝一
黑木耳多糖的研究进展
熊艳 。 车振 明
（ 西华大学生物工程学 院 ， 四川 成都 ６０３ ） １０９
摘
要： 黑木耳 多糖作为一种生理活性物质 ， 近年来 日益受到人们 的重视 。从 黑木耳 多糖 的提取 方 法、 分子结构 、 保
ｗｅｅｂ ｅ ｙｄ ｓ ｕ ｓ ｄ ｒ ｒ ｆ ｉｃ ｓ ｅ ． ｉ ｌ
Ｋ ｙ ｏ ｄ ： ｕｉ ｌ ｉＡ ｒ ｕａ ｌ ａｃ ａ ｄ （Ａ ）ｅｔ ｃ ｎ ｃｎ ｌ ； ｏｅｕａ ｒｃ ｒ；ｅ ｔ ｅ ｅｔ ｅ ｒｓＡ ｒ ｕａ ａ ｕ ｃｌ ｐ ｙ ｃｈｒ ｅＡ Ｐ；ｘ ａｔ ｇｅｈ ｏｏ ｍ ｌ ｌ ｓｕ ｔ ｅｈ ａ ｈ ｆ ｃ ｗ ｃ ｒ ｉ ｒｏｓ ｉ ｒ ｉ ｔ ｙ ｇ ｃｒｔ ｕ ｆ
黑木耳 （ ｕｉ ｌｉ Ａ ｒ ｕ ｒ又称木耳 、 Ａ ｒ ｕ ｒ ｕ ｃｌ ） ｃ ａａ ｉ ａ 耳子 、 光
利条件 。
木耳 ， 属真菌门担子菌纲的食、 药用菌 ， 它是生长在朽 木上的一种腐生菌 ， 由菌丝体和子实体两部分组成。 菌 丝体为无色透明， 生长在朽木里面 ； 子实体则生长在朽 木的表面， 为食用部分。 我国是世界上主要的黑木耳生
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黑木耳多糖提取方法比较
摘要：采用正交试验比较研究热水浸提法、微波辅助提取法和超
声波辅助提取法提取黑木耳（auricularia auricula）多糖的工艺
及效率。热水浸提法最佳工艺为料水质量比1∶40、提取温度80 ℃、
提取时间4 h，提取率为8.41%；微波辅助提取法最佳工艺为料水
质量比1∶30、微波功率560 w、微波时间90 s、提取温度80 ℃，
提取率为14.08%；超声波辅助提取法最佳工艺为料水质量比1∶40、
超声功率80 w、超声时间20 min、提取温度60 ℃，提取率为15.22%。
超声波辅助提取法效率最高，优于另两种方法。
关键词：黑木耳（auricularia auricula）；多糖；热水浸提；
微波辅助提取；超声波辅助提取
中图分类号：r284.2 文献标识码：a 文章编号：0439-8114（2013）
10-2386-03
黑木耳（auricularia auricula）味道鲜美、营养丰富，是一种
药食两用大型真菌。我国是世界上最主要的黑木耳生产国，年产量
占世界总产量的90%以上[1]，所以对黑木耳进行深入开发具有重要
意义。研究表明木耳多糖是黑木耳的主要生物活性物质[2]，具有
调节免疫功能、抗血栓、抑菌、降血糖、抗溃疡、抗肝炎、抗突变、
降血脂和促进血清蛋白生物合成等多种功效[3，4]。目前黑木耳多
糖的提取方法主要有水提醇沉法、碱液提取法、超声波辅助提取法、
酶解法和微波辅助提取法等，这些方法都有其优点，也有其难以克
服的不足之处[5-9]。
研究考察了传统的热水浸提法、微波辅助提取法和超声波辅助提
取法提取黑木耳多糖的工艺条件及提取效果，比较3种提取方法的
效率，为黑木耳的深加工提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
干黑木耳产自吉林省，购自抚顺市农贸市场。苯酚、浓硫酸、葡
萄糖均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 多糖的测定 采用苯酚-硫酸法进行黑木耳多糖含量的测
定，以葡萄糖为标准品[10]。
1.2.2 黑木耳多糖的提取方法
1）热水浸提法。粉碎干黑木耳，用石油醚脱脂，取2.0 g黑木
耳粉，加入去离子水，通过水浴浸提，离心得到上清液，用无水乙
醇沉淀，离心，干燥得到粗多糖。
2）微波辅助提取法。粉碎干黑木耳，用石油醚脱脂，取2.0 g
黑木耳粉，加入去离子水，用微波处理，水浴浸提2 h，离心得到
上清液，用无水乙醇沉淀，离心，干燥得到粗多糖。
3）超声波辅助提取法。粉碎干黑木耳，用石油醚脱脂，取2.0 g
黑木耳粉，加入去离子水，用超声波处理，水浴浸提2 h，离心得
到上清液，用无水乙醇沉淀，离心，干燥得到粗多糖。
1.2.3 正交试验 采用l9（34）正交试验分别研究水浸提法、微
波辅助提取法和超声波辅助提取法的工艺，各试验因素与水平见表
1、表2和表3。
2 结果
2.1 热水浸提法
通过l9（34）正交试验确定热水浸提法提取黑木耳多糖的最佳工
艺，直观分析结果见表4。热水浸提法提取黑木耳多糖的最佳工艺
条件是a3b3c3，即料水质量比1∶40，提取温度80 ℃、提取时间
4 h。在此最佳条件下黑木耳多糖的提取率为8.41%。极差分析结果
表明，热水浸提法各因素对黑木耳多糖提取率的影响为提取温度>
提取时间>料水质量比。
2.2 微波辅助提取法
通过l9（34）正交试验确定微波辅助提取法提取黑木耳多糖的最
佳工艺，直观分析结果见表5。微波辅助提取法提取黑木耳多糖的
最佳工艺条件是a2b2c3d3，即料水质量比1∶30、微波功率560 w、
微波时间90 s、提取温度80 ℃。在此最佳条件下黑木耳多糖的提
取率为14.08%。极差分析结果表明，微波辅助提取法各因素对黑木
耳多糖提取率的影响为微波时间>微波功率>料水质量比>提取温
度。
2.3 超声波辅助提取法
通过l9（34）正交试验确定超声波辅助提取法提取黑木耳多糖的
最佳工艺，直观分析结果见表6。超声波辅助提取法提取黑木耳多
糖的最佳工艺条件是a3b3c3d1，即料水质量比1∶40、超声功率80
w、超声时间20 min、提取温度60 ℃。在此最佳条件下黑木耳多
糖的提取率为15.22%。极差分析结果表明，黑木耳多糖提取率的影
响为超声时间>超声功率>提取温度>料水质量比。
2.4 3种黑木耳多糖提取方法的比较
由表7可知，从提取效果来看，提取率最高的是超声波辅助提取
法，其次是微波辅助提取法，热水浸提法的提取率最低，还不到前
两种方法的2/3，表明微波和超声波在辅助提取黑木耳多糖中发挥
了重要作用。从料水质量比来看，3种方法相差不大，而且对于这
3种方法来说，料水质量比都不是最主要的影响因素。微波辅助提
取法提取液用量相对较少，可能是由于微波时间较短，太多的提取
液可能造成微波处理不充分。从提取时间来看，热水浸提法需要的
时间最长，而微波辅助和超声波辅助能大大缩短提取的时间。而且
超声波辅助提取法中的超声时间和微波辅助提取法中的微波时间
都是最主要的影响因素，可能是由于足够时间的超声波和微波作用
有助于充分破坏细胞，促进多糖的提取。从提取温度来看，超声波
辅助提取法所需的温度最低，说明充分破坏细胞结构不需要太高的
温度。微波辅助提取法中微波作用的时间相对较短，对细胞结构的
破坏可能不如超声波辅助提取法充分，所以仍需要较高的提取温
度。热水浸提法需要的温度也较高，而且提取温度是该方法的主要
影响因素，说明生产中如果提取温度达不到一定高度，会较大程度
地影响提取效果。总的来说，超声波辅助提取法提取率最高，提取
温度最低，在黑木耳多糖的提取中具有一定优势。
3 小结
热水浸提法最佳工艺为料水质量比1∶40、提取温度80 ℃、提
取时间4 h，提取率为8.41%；微波辅助提取法最佳工艺为料水质
量比1∶30、微波功率560 w、微波时间90 s、提取温度80 ℃，
提取率为14.08%；超声波辅助提取法最佳工艺为料水质量比1∶40、
超声功率80 w、超声时间20 min、提取温度60 ℃，提取率为15.22%。
超声波辅助提取法效率最高，优于另两种方法。
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