黑木耳多糖提取工艺的研究进展

文献综述黑木耳多糖提取工艺的研究进展×××××××××摘要：大量研究结果表明，多糖具有抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血糖、血脂等生物活性，因此对多糖结构和生物功能的研究已成为继蛋白质、核酸之后探索生命奥秘的第三大里程碑。

黑木耳多糖作为一种天然保健品也为大家所接受，但现在工业化提取黑木耳多糖时多采用热水浸提，耗时长、产量低、成本高，无法满足市场需求，通过黑木耳多糖高产菌株的筛选和选育、优化多糖提取方法、改造天然多糖而增强原有活性、优化深层发酵生产黑木耳多糖工艺以及多糖药理机制、临床应用有效性和安全性研究等发功能性食品添加剂、保健品或药品的市场前景更加广阔，而研发出有益于人类身体健康、经济效益高的黑木耳多糖深加工产品，对推动黑木耳多糖产业发展具有重要意义。

关键词：黑木耳；多糖；提取工艺Research Review on the Extractive Conditions of Polysaccharide from Auricularia auricular Abstract: Lots of research results indicate that the polysaccharide has antitumour，anticoagulant，antithrombotic，fall blood sugar，blood fat，such as biological activity，so the research of polysaccharide structure and biological function has become after the protein，nucleicacid，explore the mysteries of life in the third major milestone。

Black fungus polysaccharide，as a kind of natural health products are accepted by you，but now when industrialization black fungus polysaccharide extracted with hot water extraction，timeconsuming，low output，the cost is high，can't meet the market demand，through the black fungus polysaccharide screening and breeding of high yield strain，optimizing the extract method，the transformation of natural polysaccharides and enha nce its active polysaccharide，black fungus polysaccharide optimization of submerged fermentation production process and pharmacological mechanism，and the clinicaleffi cacy and safety study of functional food additives，health products or medicines morebroad market prospect，and the development of beneficial to human body health，high economic benefit of black fungus polysaccharide processing products，to promote the development of black fungus polysaccharide industry is of great significance。

Keywords：Auricularia auricular；polysaccharide；extraction process黑木耳（Auricularia auricular），属于担子菌纲，木耳目、木耳科、木耳属。

黑木耳是我国珍贵的药用和食用的胶质真菌，味道鲜美，营养丰富，养血驻颜，祛病延年。

现代营养学家盛赞黑木耳为“素中之荤”，其营养价值可与动物性食物相媲美[1]。

黑木耳多糖具有调节免疫功能、抗血栓、抑菌、降血糖、抗溃疡、抗肝炎和抗突变、降血脂和促进血清蛋白生物合成等多种功效。

本研究从产业化的角度出发，通过对黑木耳多糖提取工艺条件的研究比较，以黑木耳多糖提取率为评价指标，在提取时间、提取温度、料液比等单因素试验基础上，优化提取黑木耳多糖的工艺条件，开发利用黑木耳资源及工业化生产提供理论依据[2]。

1黑木耳多糖的分离提取黑木耳多糖是一种天然药物活性成份,为细胞内容物,提取时需要进行细胞破碎,从而使细胞壁将多糖成份释放出来。

因而细胞破壁技术也就成了提取生物活性成份的关键。

目前从黑木耳子实体中提取黑木耳多糖的技术从时间发展顺序和自动化程度的主要分为传统提取法、现代提取法和复合提取法。

1.1 传统提取技术1.1.1 热水浸提法热水浸提法是一种国内外常用的比较传统的提取真菌类多糖成份的方法。

陈艳秋、林敏[3-4]等通过对采用热水浸提法对黑木耳子实体水溶性多糖的提取工艺的深入研究，得出如下结论:黑木耳子实体干粉与水之比为1:50，在90℃水浴中抽提3.5h，提取液用70%乙醇醇析，在此工艺条件下多糖得率最高。

此法所需提取剂蒸馏水经济易得，但是需经多次浸提，得率仍然很低，且费时费料。

1.1.2 稀碱液浸提法包海花[5]等分别以蒸馏水和1mol/LNaOH溶液作提取剂，80℃提取3h，发现用蒸馏水作提取剂的多糖含量为1.28%，而用1mol/LNaOH溶液作提取剂的多糖含量为3.52%，后者的多糖含量比前者高出近3倍，且能节省时间和减少原材料及试剂的消耗。

1.2 现代提取法1.2.1 酶解提取法近年来，一些学者致力于酶法提取食药用真菌多糖的研究，所谓酶法即采用酶与热水浸提法相结合的方法，酶多采用一定量的果胶酶、纤维素酶及中性蛋白酶，此法具有条件温和、杂质易除和得率高等优点[6]。

主要的方法有：单一酶法、复合酶法等。

姜红[7]等探讨了纤维素酶和果胶酶对黑木耳多糖提取的影响，确定纤维素酶最佳提取工艺：纤维素酶加入量1.3%，50℃提取80min，黑木耳多糖提取率为4.71%；果胶酶最佳提取工艺：果胶酶加入量1.1%，55℃提取80min，黑木耳多糖提取率为4.15%。

张立娟和于国萍[7]通过单因素和正交试验确定了细胞破壁酶（纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶）在黑木耳多糖提取中的最佳作用条件，即先加入复合酶（纤维素酶与果胶酶）作用，再加入木瓜蛋白酶反应，采用此法的黑木耳多糖提取率高达16.83%，提取时间缩短至140min，较热水浸提法和稀碱浸提法具有明显的优势。

1.2.2 超声波提取法研究表明，利用超声波产生的高频震荡、高的加速度和强烈的“空化效应”及搅拌作用，可加速有效生物活性成份进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间、节约溶剂、并可在低温提取，有利于有效成份的保护。

此法在黑木耳多糖的提取中也得到了很好的应用[8]。

王雪和王振宇[9]采用超声波辅助提取黑木耳多糖，探讨超声功率、时间、液料比及水浴浸提时间等因素对黑木耳多糖提取效果的影响，并在单因素试验的基础上进行响应面分析，结果表明，超声波辅助提取黑木耳多糖的最佳工艺条件为：520W超声波提取13min，液料比1∶2，水浴浸提3.1h，黑木耳多糖提取率可达16.59%。

徐秀卉和杨波[10]采用单因素及正交试验方法优化超声波提取黑木耳多糖的最佳工艺条件，即提取温度50℃，超声波频率25kHz，提取时间15 min，料液比1∶30；在此工艺条件下，黑木耳多糖提取率为14.28%，说明超声波法提取黑木耳多糖比水提醇沉法更具优势。

赵梦瑶[11]等以黑木耳多糖得率为指标，研究粉碎粒度超声处理对黑木耳多糖溶出量的影响，结果表明，粉碎与超声协同处理对黑木耳多糖的溶出量有较大影响，超声处理原料粒度越小，多糖溶出量越多。

1.2.3 微波辅助提取法微波提取具有设备简单、适用范围广、提取率高、节省溶剂、节省时间、节能、不产生噪音和污染等众多优点，利用微波强化固液浸取过程是一种颇具发展潜力的新型辅助提取技术。

因此，采用微波辅助法萃取野生黑木耳多糖能够缩短加热时间，减少试剂用量，提高多糖提取率，节约能量，控制方便及减少废物产生等。

张钟和高智谋[12]采用微波法辅助提取野生黑木耳多糖，改进了传统的浸提工艺，即以水作为提取剂、微波功率560W、提取时间35s、料液比1∶40、萃取时间3h的浸提效果最佳，多糖提取率达98.55%；与传统的浸提法（提取时间24h，多糖提取率7.12%）相比，微波辅助提取多糖具有耗时短、耗能低、提取率高等优点。

王晓军和李颖[13]也确定了微波辅助萃取黑木耳多糖的提取工艺，即微波功率700W，微波辐射时间40s，浸提剂40m/g，水浴浸提时间4.5h。

可见，微波辅助萃取法是一种提取黑木耳多糖的有效方法之一。

1.2.4 超微粉碎法超微粉碎一般是指将3mm以上的物料颗粒粉碎至10-25μm的过程。

杨春瑜和薛海晶[14]研究证明，超微粉碎能够有效提高黑木耳多糖的溶出率，在相同工艺条件下，黑木耳超微粉的多糖提取率均高于黑木耳粗粉，并确定了超微粉多糖的最佳提取因素。

1.3 复合提取法复合提取法即将上述各种提取方法结合使用，以期获得黑木耳多糖的最佳提取率。

刘大纹[15]等利用超微粉碎技术结合超声波协同纤维素酶提取黑木耳多糖，获得最佳参数为：超声波频率20kHz、超声波功率20W、酶解温度41.88℃、pH4.61、提取时间160min，该提取方法具有反应时间短、反应条件温和、细胞壁破碎彻底、粗多糖溶出率高的优点。

娄在祥[16]等研究表明，超声波协同复合酶法可显著提高黑木耳多糖的提取率，其最佳提取条件为：料液比1∶50，浸提时间2.5h，浸提温度80℃，超声波功率125W，超声波复合酶作用时间60min、作用温度50℃，纤维素酶用量390μ/g，中性蛋白酶用量650μ/g。

王广慧[17]等利用超声波协同酶解结合高压热水浸提法提取黑木耳多糖，可显著提高多糖提取率，可达16.82%，最适提取条件为：浸提剂倍数为50，超声波功率为120W；复合酶反应最适pH 值为5，最适温度为50℃，添加量为1.5%，反应80min；蛋白酶反应最适pH值为6，最适温度为50℃，添加量为2.0%，反应60min；高压热水浸提温度115℃，浸提80min。