高效液相色谱以理论常识-测含量
高效液相测含量的方法
高效液相测含量的方法
1. 嘿，你知道高效液相测含量是怎么一回事吗？就比如说，像我们去寻找宝藏，高效液相就是那神奇的探测器，能精准地找到我们想要的东西！比如检测药品里有效成分的含量，它能一下子就帮我们搞清楚到底有多少有效的家伙在里面。
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比如检测水中的污染物含量，它能迅速而准确地给出答案呢，是不是很牛！
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像是检测植物提取物里的某种活性物质含量，高效液相总能出色完成任务！
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失手哦！我的观点就是高效液相测含量是一项非常有价值且强大的技术，能在各种领域大显身手呀！。
含量测定,高效液相色谱法
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析方法，可以用于含量测定。
该方法以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
高效液相色谱法具有高分离度、高灵敏度、高选择性等优点，适用于对热不稳定、难挥发、易分解的物质的分离和分析。
在含量测定中，高效液相色谱法可以用于测定药物、食品、环境样品中的成分含量。
需要注意的是，在进行含量测定时，应先进行方法学验证，以确保该方法具有足够的灵敏度、精密度和准确性。
同时，还应根据具体的样品和待测成分的性质选择合适的色谱柱、流动相和检测器等。
总之，高效液相色谱法是一种重要的分析方法，可用于含量测定，但需要经过方法学验证和选择合适的实验条件，以确保结果的准确性和可靠性。
掌握高效液相色谱法测定药物含量的原理
✓药品质量标准的分析方法根据其使用的对象 和检验目的不同，需要验证的项目也不同。
✓对分析方法评价不仅是要验证采用的方法是 否适合于相应的检验要求，同时也为建立新 的分析方法提供实验研究依据。
实验九 高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究
三、方法学验证的内容
（一）准确度 （二）精密度 （三）专属性 （四）检测限
实验九 高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究
四、实验内容
2．方法学验证
（1）专属性：醋酸地塞米松片中附加成分 有糖粉、淀粉、预胶化淀粉、粉晶纤维素、 硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠、10%淀粉浆。 记录色谱图，衡量分析方法是否受到干扰。
实验九 高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究
四、实验内容
2．方法学验证
实验九 高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究
四、实验内容
2．方法学验证
（4）重复性试验：取同一批样品，按样品 测定项下的方法测定5次，计算其含量测定 结果的RSD（%）。
实验九 高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究
四、实验内容
2．方法学验证
（5）回收率试验：照样品测定项下的方法 操作，计算回收率。
（2）线性与范围：以峰面积(Y) 对进样浓度 （X）绘制标准曲线，得回归方程。 醋酸地塞米松在20~100μg/ml 的范围内，峰面 积与浓度之间应呈良好的量的方法学研究
四、实验内容
2．方法学验证
（3）仪器精密度试验：记录5次测定的色谱 峰面积，计算RSD（%）。
（五）定量限 （六）线性 （七）范围 （八）耐用性
实验九 高效液相色谱法测定药物含量的方法学研究
四、实验内容
1．色谱条件与系统适用性试验
✓填充剂：十八烷基键和硅胶为流动相 ✓流动性：甲醇-水（70:30） ✓检查波长： 240 nm ✓理论板数按醋酸地塞米松峰计算不得低于 4000，醋酸地塞米松峰与相邻杂质峰的分离 度应符合要求。
高效液相色谱法测定有机化合物的含量
实验四高效液相色谱法测定有机化合物的含量[目的要求]1、了解仪器各部分的构造及功能。
2、掌握样品、流动相的处理，仪器维护等基本知识。
3、学会简单样品的分析操作过程。
[基本原理]高效液相色谱仪液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的主色谱分离技术，在基本理论方面与气相色谱没有显著不同，它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质差别。
与气相色谱相比，高效液相色谱对样品的适用性强，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，可以弥补气相色谱法的不足。
液相色谱根据固定向的性质可分为吸附色谱、键合相色谱、离子交换色谱和大小排阻色谱。
其中反相键合相色谱应用最广，键合相色谱法是将类似于气相色谱中固定液的液体通过化学反应键合到硅胶表面，从而形成固定相。
若采用极性键合相、非极性流动相，则称为正相色谱；采用非极性键合相，极性流动相，则称为反相色谱。
这种分离的保留值大小，主要决定于组分分子与键合固定液分子间作用力的大小。
反相键合相色谱采用醇-水或腈-水体系作为流动相，纯水廉价易得，紫外吸收小，在纯水中添加各种物质可改变流动相选择性。
使用最广泛的反相键合相是十八烷基键合相，即让十八烷基（C18H37―）键合到硅胶表面，这也就是我们通常所说的碳十八柱。
[仪器试剂]高效液相色谱仪（包括储液器、高压泵、自动进样器、色谱柱、柱温箱、检测器、工作站）、过滤装置待测样品（浓度约100 ppm）、甲醇、二次水[实验步骤]1、仪器使用前的准备工作（1）样品与流动相的处理配好的溶液需要用0.45 μm的一次性过滤膜过滤。
纯有机相或含一定比便例有机相的就要用有机系的滤膜，水相或缓冲盐的就要用水系滤膜。
水、甲醇等过滤后即可使用；水放置一天以上需重新过滤或换新鲜的水。
含稳定剂的流动相需经过特殊处理，或使用色谱纯的流动相。
（2）更换泵头里清洗瓶中的清洗液流动相不同，清洗液也不同，如果流动相为甲醇-水体系，可以用50%的甲醇；如果流动相含有电解质，通常用95%去离子水甚至高纯水。
高效液相色谱法含量测定操作规程全文编辑修改
精选全文完整版可编辑修改高效液相色谱法含量测定1检验方法高效液相色谱法2检验原理高效液相色谱法系采用高压输液泵，将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对样品进行测定的色谱方法。
注入样品，由流动相带入柱内，各组分在柱内被分离，并依此进入检测器，由数据处理系统记录和处理色谱信号。
3检验试剂甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、纯水（高纯水）、磷酸等。
4供试品溶液制备取要测试的供试品适量，参照《药典》及《制剂规范》，用规定的溶剂适宜的提取精制方法，配制成一定浓度的供试品溶液。
供试品溶液注入色谱柱前要经适宜的0.45nm的滤膜滤过。
5对照品溶液制备根据供试品所要测定的成分取相应的对照品，用适宜的溶剂配制成相应浓度的对照品溶液。
6流动相配制用高纯度的试剂配制流动相，水应为新鲜配制的高纯水。
配制好的流动相通过适宜的0.45nm 的滤膜滤过，用前脱气。
7操作7.1打开自动进样器、检测器、泵、柱温箱，进入工作站。
7.2自动进样器排气自动进样器排气用50%甲醇（用前脱气），点击自动进样器界面上的purge键，自动排气25分钟。
7.3泵排气分析界面中，设置方法参数，下载方法参数。
用流动相冲洗吸滤头，再把吸滤头浸入流动相中，逆时针旋转排气阀90-180度，点击purge键，排气3-4分钟，顺时针旋转排气阀90-180度，激活仪器。
7.4进样操作7.4.1.将对照品溶液和供试品溶液分别置于样品瓶中，盖上带有垫片的瓶盖，顺时针旋紧，7.4.2将样品瓶按顺序放置于样品瓶架上。
7.4.3设置方法参数，选择波长、柱温、流速、结束时间等，下载并保存方法文件，待色谱系统充分稳定，基线平直。
7.4.4设置批处理分析表。
分析界面主项目中，点击批处理分析，依次设置样品瓶号、样品瓶架号、样品名、方法文件、数据文件、进样体积，保存批处理分析表，点击批处理分析开始，开始数据采集。
7.4.5不同浓度的对照品溶液和同一浓度的供试品溶液应分别进样不少于5针。
高效液相色谱法含量测定原理
高效液相色谱法含量测定原理
高效液相色谱法是一种分离、分析和测定化学物质的方法。
它基于分子在不同条件下的亲和性和互相之间的相互作用，通过将混合物分离成其组成部分来实现这一目的。
高效液相色谱法通常包括以下步骤：样品制备、柱填充、溶剂选择、流速控制、检测器选择等。
其中，样品制备是至关重要的。
它通常包括提取过程、清洁过程和浓缩过程。
选择适合的柱和溶剂也是至关重要的。
柱填充和溶剂选择的不同会影响到分离的效率和准确性。
流速控制是高效液相色谱法中最重要的步骤之一。
流速的选择应该考虑到样品的复杂性和所需的分离程度。
此外，检测器的选择也是至关重要的。
检测器的选择应该基于所需的检测灵敏度和特异性。
在高效液相色谱法中，含量测定通常是基于标准曲线法或内标法。
标准曲线法是最常用的方法，它使用一系列已知浓度的标准溶液作为参考，通过绘制标准曲线来确定样品的浓度。
内标法通常用于使用固定内标物的分析中，以减少误差并提高准确度。
综上所述，高效液相色谱法是一种高效、准确、灵敏和重复性好的分析方法，可以广泛应用于化学、生物、医药、食品等领域的分析研究中。
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高效液相色谱法测定牡丹皮丹皮酚的含量
高效液相色谱法测定牡丹皮丹皮酚的含量一、目的与要求1.掌握高效液相色谱法测定含量的原理与应用。
2.了解高效液相色谱在中药分析中的应用。
二、实验原理1.理论塔板数和理论塔板高度是色谱柱效的参数，而分离度是色谱的分离参数，是从色谱峰判断相邻二组分在色谱柱中总分离效能的指标，用R表示，均是衡量色谱柱效能的重要参数。
理论塔板数（n）：n=5.54（tR ／W1／2）2=16（tR／W）2理论塔板高度（H）：H= n／L分离度的计算R R=2（tRA - tRB）／1.699（W1／2A+ W1／2B）2.外表一点法三、仪器与试剂1、仪器液相色谱仪（紫外检测器），微量注射器，C18反相色谱柱，移液管（2ml），具塞锥形瓶，电子分析天平，超声提取器2、试剂甲醇（色谱纯），重蒸馏水3、试药牡丹皮药材，丹皮酚对照品四、实验内容与步骤1.色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（45:55）为流动相；检测波长为274nm；流速为1．0 ml/min；理论塔板数按丹皮酚峰计算应该不低于5000，分离度>1．5。
2.对照品溶液的制备去丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。
3.供试品溶液的制备取牡丹皮粉末约0.5g。
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml,密塞，称重定量，超声处理（功率300W，频率50kHz）30min，放冷，在称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，虑过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀即得。
4.测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μg，注入液相色谱仪，测定。
五、注意事项开机时先打开工作站，排气泡后再连接泵，最后连接检测器，关闭顺序与开机相反。
六、数据处理按干燥品计算，含丹皮酚不得少于1.2%。
实验报告-高效液相色谱法测定VE含量
实验四高效液相色谱法测定VE含量1 实验目的1.1 了解高效液相色谱仪的基本操作；1.2 了解高效液相色谱仪测定VE的原理。
2 实验原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
VE（维生素E）又名生育酚或产妊酚，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。
有抗氧化作用，能增强皮肤毛细血管抵抗力，并维持正常通透性；有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。
VE通过高效液相色谱柱进行分离，PDA检测器检测，外标法定量。
3实验器材3.1 实验样品VE样品溶液3.2 实验试剂浓度为50μg/ml的VE标样3.3 实验仪器高效液相色谱仪附PDA检测器4 色谱条件色谱柱：C18柱；流动相速度：0.3ml/min；进样量：5μl；柱温：30℃。
5 实验结果与讨论5.1 实验结果本次实验采用的是单点法测定。
实验结果见表1。
表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量进样量保留时间峰面积标样5μl 3.59min 42217待测样品5μl 3.59min 17369 样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积=5μl×50μg/mL×17369/（5μl×42217）=20.57μg/mL5.2 实验讨论本次实验中，测定标样溶液VE含量时，在指定的保留时间内并未出峰。
讨论分析原因：样品溶液在上周实验后，一直置于离心管中，未避光低温保存，导致样品中VE氧化，液相测定时没有在相应的时间出峰。
本次实验时间较短，且主要目的是了解高效液相色谱仪的基本操作，以及液相色谱仪测定VE的原理，故结合前组同学对VE含量的测定数据进行讨论与分析。
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被分离组分在柱中的洗脱原理Ⅱ基本概念和理论一、基本概念和术语1.色谱图和峰参数⊕色谱图（chromatogram）--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号－时间曲线，又称色谱流出曲线（elution profile）.⊕基线（base line）--流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。
一般应平行于时间轴。
⊕噪音（noise）――基线信号的波动。
通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
⊕漂移（drift）基线随时间的缓缓变化。
主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
⊕色谱峰（peak）--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。
流出曲线上的突起部分。
正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。
不对称色谱峰有两种：前延峰（leading peak）和脱尾峰（tailing peak ）.前者少见。
⊕拖尾因子（tailing factor,T）--T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。
也称为对称因子（symmetry factor）或不对称因子（asymmetry factor）《中国药典》规定T应为0.95～1.05。
T<0.95为前延峰，T>1.05为拖尾峰。
⊕峰底――基线上峰的起点至终点的距离。
⊕峰高（Peak height,h）――峰的最高点至峰底的距离。
⊕峰宽（peak width,W）--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。
W=4σ。
⊕半峰宽（peak width at half-height,Wh/2）--峰高一半处的峰宽。
W h/2＝2.355σ。
⊕标准偏差（standard deviation, σ）--正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。
正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。
标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。
σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。
⊕峰面积（peak area,A）――峰与峰底所包围的面积。
A=×σ×h＝2.507σh=1.064Wh/2h2.定性参数（保留值）⊕死时间（dead time,t0）--不保留组分的保留时间。
即流动相（溶剂）通过色谱柱的时间。
在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。
⊕死体积（dead volume,V0）――由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。
它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被流动相占据，Vm）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。
其中只有Vm参与色谱平衡过程，其他3部粉只起峰扩展作用。
为防止峰扩展，这3部分体积应尽量减小。
V0＝F×t0（F为流速）⊕保留时间（retention time,tR）--从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。
⊕保留体积（retention volume,VR）--从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值时流出溶剂的体积。
又称洗脱体积。
VR＝F*tR .⊕调整保留时间（adjusted retention time,tR’）--扣除死时间后的保留时间。
也称折合保留时间（reduced retention time）。
在实验条件（温度、固定相等）一定时，tR’只决定于组分的性质，因此，tR’(或tR)可用于定性。
TR’=tR-t0⊕调整保留体积（adjusted retention volume,VR’）--扣除死体积后的保留体积。
VR=VR-V0 或VR=F*tR’3.柱效参数⊕理论塔板数（theoretical plate number,N）用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。
N取决于固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。
如果峰形对称并符合正态分布，N可近似表示为：N=（tR/σ）2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2W：峰宽；σ：曲线拐点处峰宽的一半，即峰高0.607处峰宽的一半。
N为常量时，W随tR成正比例变化。
在一张多组分色谱图上，如果各组份含量相当，则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽，峰高则逐渐降低。
用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用，因为半峰宽更容易准确测定，尤其是对稍有拖尾的峰。
N与柱长成正比，柱越长，N越大。
用N表示柱效时应注明柱长，，如果未注明，则表示柱长为1米时的理论塔板数。
（一般HPLC柱的N在1000以上。
）若用调整保留时间（tR’）计算理论塔板数，所得值称为有效理论塔板数（N有效或Neff）=16(tR’/W)2⊕理论塔板高度（theortical plate height,H）每单位柱长的方差。
H=。
实际应用时往往用柱长L和理论塔板数计算：H=L/N4.相平衡参数（distribution coefficient,K）--在一定温度下，化合物在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的浓度之比。
K=[xs]/[xm]Cs-溶质在固定相中的浓度Cm－溶剂在流动相中的浓度分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。
在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数，离子交换色谱法为选择性系数（或称交换系数），凝胶色谱法为滲透参数。
但一般情况可用分配系数来表示。
在条件（流动相、固定相、温度和压力等）一定，样品浓度很低时（Cs 、Cm很小）时，K只取决于组分的性质，而与浓度无关。
这只是理想状态下的色谱条件，在这种条件下，得到的色谱峰为正常峰；在许多情况下，随着浓度的增大，K减少，这时色谱峰为拖尾峰；而有时随着溶质浓度的增大，K也增大，这时色谱峰为前延峰。
因此，只有尽可能较少进样量，使组份在柱内浓度降低，K恒定时，才能获得正常峰。
在同一色谱条件下，样品中K值大的组份在固定相中滞留时间长，后流出色谱柱；K值小的组份则滞留时间短，先流出色谱柱。
混合物中各组份的分配系数相差越大，越容易分离，因此，混合物中各组份的分配系数不同是色谱分离的前提。
在HPLC中，固定相确定后，K主要受流动相的性质影响。
实践中主要靠调整流动相的组成配比及PH值，以获得组分间的分配系数差异及适宜的保留时间，达到分离的目的。
⊕容量因子（capacity factor,K）--化合物在两相间达到平衡时，在固定相与流动相中的量之比。
K＝（tR-t0）/t0=tR’/t0（或溶质在固定相中的量/溶质在流动相中的量）。
因此，容量因子也称质量分配系数。
｛K=Cs/Cm=K’Vm/Vs k=(tR-t0)/t0=K*Vs/Vm Vs：色谱柱中固定相的体积； Vm：色谱柱中流动相的体积。
｝分配系数、容量因子与保留时间之间有如下关系：k===K=,tR’=kt0。
上式说明容量因子的物理意义：表示一个组份在固定相中停留的时间（tR’）是不保留组分保留时间（t0）的几倍。
k=0时，化合物全部存在与流动相中，在固定相中不保留，tR’=0;k越大，说明固定相对此组分的容量越大，出柱慢，保留时间越长。
容量因子与分配系数的不同点是：K取决于组分、流动相、固定相的性质及温度，而与体积Vs、Vm无关；k除了与性质及温度有关外，还与Vs、Vm有关。
由于tR’、t0较Vs、Vm易于测定，所以容量因子比分配系数应用更广泛。
⊕选择性因子（selectivity factor,α）--相邻两组份的分配系数或容量因子之比。
α＝＝（设k2>k1）。
因k=tR’/t0,则α＝k2/k1，所以α又称为相对保留时间（《美国药典》）。
要使两组分得到分离，必须使α≠1。
α与化合物在固定相和流动相中的分配性质、柱温有关，与柱尺寸、流速、填充情况无关。
从本质上来说，α的大小表示两组份在两相间的平衡分配热力学性质的差异，即分子间相互作用力的差异。
5.分离参数⊕分离度（resolution,R）--相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。
也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。
R=（tR2-tR1）/[(W1+W2)/2],当W1=W2时，R=。
当R=1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露锋面积为95.4％，内测峰基重叠约2％。
R=1.5时，称为6σ分离，裸露锋面积为99.7％。
R≥1.5称为完全分离。
《中国药典》规定R应大于1.5。
⊕基本分离方程――分离度与三个色谱基本参数有如下关系：R=1/4（а-1）×N0.5×［k’/(1+k’)］其中N称为柱效项，α为柱选择项，k’为柱容量项。
柱效项与色谱过程动力学特性有关，后两项与色谱过程热力学因素有关。
从基本分离方常可看出，提高分离度有三种途径：①增加塔板数。
方法之一是增加柱长，但这样会延长保留时间、增加柱压。
更好的方法是降低塔板高度，提高柱效。
②增加选择性。
当α＝1时，R=0，无论柱效有多高，组分也不可能分离。
一般可以采取以下措施来改变选择性：a.改变流动相的组成及PH值；b.改变柱温；c.改变固定相。
③改变容量因子。
这常常是提高分离度的最容易方法，可以通过调节流动相的组成来实现。
k2趋于0时，R也趋于0；k2增大，R也增大。
但k2 不能太大，否则不但分离时间延长，而且峰形变宽，会影响分离度和检测灵敏度。
一般k2 在1～10范围内，最好为2～5，窄径柱可更小些。
[Last edit by gaomi_198266]2005-4-9 13:31:00 IP:218.58.247.216主题：RE:高效液相色谱仪理论常识[查看该用户在资料中心上传的资料][个人资料][给他留言] [帖子合集][回复] [引用] [维护]--------------------------------------------------------------------------------二、塔板理论1.塔板理论的基本假设塔板理论是Martin和Synger首先提出的色谱热力学平衡理论。
它把色谱柱看作分馏塔，把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程，即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。
塔板理论的基本假设为：1）色谱柱内存在许多塔板，组分在塔板间隔（即塔板高度）内完全服从分配定律，并很快达到分配平衡。
2）样品加在第0号塔板上，样品沿色谱柱轴方向的扩散可以忽略。
3）流动相在色谱柱内间歇式流动，每次进入一个塔板体积。
4）在所有塔板上分配系数相等，与组分的量无关。
虽然以上假设与实际色谱过程不符，如色谱过程是一个动态过程，很难达到分配平衡；组分沿色谱柱轴方向的扩散是不可避免的。
但是塔板理论导出了色谱流出曲线方程，成功地解释了流出曲线的形状、浓度极大点的位置，能够评价色谱柱柱效。